способ определения морфофункционального состояния коры надпочечников

Формула изобретения

Способ определения морфофункционального состояния коры надпочечников, включающий приготовление гистологических срезов, их окраску и последующее исследование, отличающийся тем, что исследование проводят путем сканирования пучковой зоны надпочечников, измеряют уровень оптической плотности на 420 точках, по которым рассчитывают ее средний показатель и при его снижении относительно нормы определяют пониженную активность, а при повышении - повышенную активность.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к морфологии и может найти применение при определении морфофункционального состояния эндокринных желез в норме и при патологии, при трансплантации органов.

Известен способ определения морфофункционального состояния коры надпочечников по содержанию липидов в цитологических срезах надпочечников, при котором приготавливают негативы микрофотографий, причем параллельно ставят контрольные опыты, устанавливают время освещения негативов в опыте и контроле и по разнице времени освещения определяют процентное содержание липидов (1). Однако, данный способ дает лишь косвенную оценку функционального состояния коры надпочечников и носит субъективный характер при оценке средней плотности позитивных изображений и в установлении времени экспозиции при получении позитивных изображений, т.к. оценка зависит от профессиональной подготовки исследователя.

Наиболее близким техническим решением, выбранным в качестве прототипа, является способ определения морфофункционального состояния коры надпочечников, при котором приготавливают гистологические срезы, измеряют вес и размеры органа, толщину коры, ширину, объем и вес зон, определяют ядерно-цитоплазменное соотношение. Известный способ имеет следующие недостатки.

По данному способу предусматривается применение большого количества сложных методик, в частности для морфометрии необходимо исследование серийных тонких и ультратонких срезов, а для электронной микроскопии в количестве нескольких десятков срезов для получения достоверных результатов. Кроме того, для измерения всех параметров затрачивается время до 3-4 часов, что замедляет процесс определения.

Целью настоящего изобретения является упрощение и ускорение определения морфофункционального состояния коры надпочечников.

Поставленная цель достигается определением уровня оптической плотности пучковой зоны коры надпочечников путем сканирования и при снижении этого показателя относительно нормы диагностируют пониженную активность, а при повышении повышенную активность.

Сопоставительный анализ с прототипом показывает, что заявляемый способ отличается от известного тем, определение морфофункционального состояния коры надпочечников осуществляется измерением уровня оптической плотности пучковой зоны путем сканирования. Это отличие позволяет сделать вывод о соответствии заявляемого решения критерию "новизна". Признаки, отличающие заявляемое решение от прототипа не выявлены в других решениях при изучении данной и смежной области науки и, следовательно, обеспечивают заявляемому решению соответствие критерию "изобретательский уровень".

Пример конкретного выполнения.

Способ осуществляется следующим образом.

После забоя мыши, с каждого надпочечника приготавливают по 3 среза толщиной 5 мкм и производят общую окраску гематоксилином и эозином. У всех срезов путем сканирования на микроскопе "Протва" измеряют оптические плотности пучковой зоны коры надпочечников, приводят средний показатель и по нему судят о функциональном состоянии коры надпочечников относительно нормы. За норму принят средний показатель оптической плотности интактных мышей.

Мышам линии BaIb/c трансплантировали на спинке размером 1,51,5 мм аллокожу от мышей линии C57BIac. В определенные дни (1, 3, 7, 10,14,21) производили забой животных с целью определения морфофункционального состояния коры надпочечников интактных мышей линии BaIb/c. В каждый срок забивали по 6 мышей. С каждого надпочечника приготавливали по 3 среза толщиной 5 мкм и производили окраску гематоксилином и эозином. Затем на микроскопе "Протва" путем сканирования измеряли оптическую плотность пучковой зоны коры надпочечников и по среднему показателю определили ее функциональное состояние. В таблице приведены значения оптических плотностей пучковой зоны коры надпочечников, которые отражают ее функциональное состояние в динамике эксперимента. Как видно из таблицы, изменение морфофункциональной активности коррелирует с изменением оптической плотности, т.е. чем выше активность, тем больше оптическая плотность.

Морфологической основой функционального состояния коры надпочечников является содержание РНК, липидов, состояние ядер, паренхиматозных клеток, эндотелия сосудов и наличие пролифирирующих клеток. Их изменение сопровождается изменением функционального состояния коры надпочечников, что в свою очередь влияет на оптическую плотность.

Использование предлагаемого способа для оценки морфофункционального состояния коры надпочечников обеспечивает следующие преимущества по сравнению с другими способами.

1. Сокращается время определения до 5-10 минут по сравнению с прототипом, для осуществления которого тратится 3-4 часов.

2. За счет количественной оценки повышается точность и достоверность определения, а сама процедура определения значительно упрощается.

Данный способ может применяться в условиях клиники при проведении трансплантации органов, что позволяет сделать вывод о соответствии предлагаемого технического решения критерию "промышленная применимость".