питательная среда для выделения бактерий рода yersinia

Формула изобретения

Питательная среда для выделения бактерий рода Yersinia, содержащая источник питательного агара, источник углерода, ингибитор посторонней микрофлоры, ингибитор кислотообразования, воду дистиллированную, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит в качестве стимулятора роста витаминный препарат “ЭКД”, в качестве источника питательного агара - сухой питательный агар, в качестве источника углерода - Д(-)маннит, в качестве ингибитора посторонней микрофлоры - желчные соли и кристаллический фиолетовый, в качестве индикатора кислотообразования - нейтральный красный при следующем соотношении компонентов, г/л:

Сухой питательный агар 30,0 - 40,0

Витаминный препарат “ЭКД” 1,0 - 3,0

Д(-)Маннит 15,0 - 25,0

Желчные соли сухие 7,5 - 9,5

Нейтральный красный 0,02 - 0,04

Кристаллический фиолетовый 0,001 - 0,02

Вода дистиллированная Остальное

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицины, а именно к клинической микробиологии, и может быть использовано для бактериологической диагностики заболеваний, вызываемых бактериями рода Yersinia.

Наиболее употребительной средой для выделения иерсиний являются среда Эндо и среда Серова (1).

Недостатком этих сред является то, что на среде Эндо выделение иерсиний затруднено из-за недостаточно четких дифференцирующих свойств среды, а также слабоселективных свойств, а среда Серова сложна в приготовлении и включает в состав дефицитный реактив (конго красный).

Наиболее близким к предложенной питательной среде является питательная среда для выделения иерсиний, описанная в SU 1482944, кл. С 12 Q 1/04, 30.05.1989, содержащая источник питательного агара - среда Эндо, источник углерода - Д(-) маннит, в качестве ингибитора посторонней микрофлоры - желчь сухая, индикатор кислотообразования генцианвиолет, воду дистиллированную.

К причинам, препятствующим достижению указанного ниже технического результата при использовании известной среды, принятой за прототип, является многоступенчатость способа выделения иерсиний, которая требует обязательного предварительного подращивания бактерий в фосфатно-буферном растворе на холоду, низкая чувствительность среды, не обеспечивающая рост иерсиний при посеве единичных клеток, недостаточная селективность.

Кроме того, среда является многокомпонентной, сложна в приготовлении, что затрудняет выпуск данной среды в качестве коммерческого препарата в промышленном масштабе.

Задача предлагаемого изобретения - повышение дифференцирующих и селективных свойств среды.

Указанный технический результат при осуществлении изобретения достигается тем, что в качестве основного источника азотистого питания в предлагаемой среде используется сухой питательный агар, в качестве стимулятора роста витаминный препарат “ЭКД”, содержащий аминокислоты и комплекс витаминов, а также многоатомный спирт маннит, расщепляемый бактериями рода Yersinia с образованием кислоты, как ингибиторы грамположительной микрофлоры в состав среды введены соли желчных кислот и кристаллический фиолетовый, в качестве индикатора кислотообразования - нейтральный красный, при следующем соотношении компонентов, г/л:

Сухой питательный агар 30,0-40,0

Витаминный препарат "ЭКД" 1,0-3,0

Д(-) маннит 15,0-25,0

Желчные соли, сухие 7,5-9,5

Нейтральный красный 0,02-0,04

Кристаллический фиолетовый 0,001-0,002

Вода дистиллированная остальное

Содержание в предлагаемой среде желчных солей и кристаллического фиолетового полностью ингибирует рост грамположительной микрофлоры, обеспечивает рост штаммов Proteus vulgaris в O-форме. Вместе с тем среда обладает высокой чувствительностью, отмечается рост колоний иерсиний при посеве из разведения 10^-7. Среда сконструирована из отечественных гостированных ингредиентов на основе сухого питательного агара и витаминного препарата “ЭКД”, имеющих промышленный выпуск на предприятии НПО “Питательные среды” (3, 4).

Среду получают следующим образом.

Пример 1. В 0,9 л дистиллированной воды растворяют следующие ингредиенты, взятые в количестве (минимальное): сухой питательный агар - 30,0 г, витаминный препарат “ЭКД” - 1,0 г, Д(-) маннит - 15,0 г, желчные соли, сухие - 7,5 г, нейтральный красный - 0,02 г, кристаллический фиолетовый - 0,001 г. Среду доводят до кипения, кипятят 2-3 мин. Остужают до 45С, разливают в чашки Петри, подсушивают в термостате 1,5 ч.

Пример 2. Отличается от примера 1 тем, что в 0,9 л дистиллированной воды растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в количестве (оптимальное): сухой питательный агар - 35,0 г, витаминный препарат “ЭКД” - 2,0 г, Д(-) маннит - 20,0 г, желчные соли, сухие - 8,5 г, нейтральный красный - 0,03 г, кристаллический фиолетовый - 0,002 г. Далее согласно примеру 1.

Пример 3. Отличается от примеров 1 и 2 тем, что в 0,9 л дистиллированной воды растворяют следующие ингредиенты среды, взятые в количестве (максимальное): сухой питательный агар - 40,0 г, витаминный препарат “ЭКД” - 3,0 г, Д(-) маннит - 25,0 г, желчные соли, сухие - 9,5 г, нейтральный красный - 0,04 г, кристаллический фиолетовый - 0,003 г. Далее согласно примеру 1.

Каждый вариант среды получали отдельно.

Результаты испытания биологических показателей предлагаемой и известной сред приведены в таблице.

Из данных таблицы видно, что предлагаемая среда имеет преимущество, так как на питательной среде задерживается ползучий рост протеев, подавляется рост грамположительной микрофлоры.

Состав среды и технология ее приготовления просты, также среда удобна, обладает хорошими ростовыми свойствами.

Источники информации

1. Этиология, эпидемиология, клиника и лабораторная диагностика человека. Методические рекомендации для эпидемиологов, микробиологов и инфекционистов, М., 1982 г., с.17.

2. Г.Я. Ценева. Иерсинез и псевдотуберкулез. С-П., 1992 г., с.12-13 (прототип).

3. ФС 42-3520-98.

4. ФС 42-3441-97.