нестероидное противовоспалительное анальгетическое средство

Формула изобретения

Нестероидное противовоспалительное и анальгетическое средство, содержащее в качестве активной основы индометацин, отличающееся тем, что активная основа дополнительно содержит тиотриазолин в соотношении индометацина к тиотриазолину 1:(1-3).

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, в частности к лекарственным средствам в форме растворов, таблеток, капсул, мазей, суппозиториев и других форм, используемых для лечения воспаления суставов различной этиологии, ушибов мягких тканей, тромбофлебитов.

Известно лекарственное средство «Индометацин» (Справочник Видаль Лекарственные препараты в России. - М.: АстраФармСервис. - 1995. - С.475-476).

Индометацин является одним из наиболее эффективных нестероидных противовоспалительных средств (НПВС) и по его фармакологическому назначению, а также по достигаемому противовоспалительному и анальгезирующему эффекту его принимаем за прототип.

Недостатком индометацина является его токсичность, провоцирующая появление головной боли, головокружения, диспептических явлений, сонливости, развитие язвенных поражений слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта и кровотечения (Khattab M.M., Gad M.Z., Abdallah D. Protective role of nitric oxide in indomethacin-induced gastric ulceration by a mechanism independent of gastric acid secretion //Pharmacol. Res. - 2001. - Vol.43. - №5. - P.463-467).

В основу изобретения поставлена задача - разработать лекарственное средство с широким спектром фармакологического действия, превосходящего по противовоспалительной, анальгетической эффективности прототип с менее выраженным токсическим действием.

Решение поставленной задачи обеспечивает нестероидное противовоспалительное, анальгезирующее средство, содержащее в качестве активной основы индометацин и тиотриазолин в соотношении 1:(1-3).

Это соотношение лекарственных веществ для всех форм лекарственных средств по изобретению сохраняется в указанных выше пределах, а концентрация содержания активных компонентов в лекарственных препаратах определяется условиями введения конкретной лекарственной формы пациенту и обусловлена максимальной биологической доступностью препарата в организме.

Фармакологический эффект от использования изобретения.

Использование предлагаемого лекарственного средства в терапевтической дозе, в соответствии с изобретением, позволяет усилить противовоспалительную активность в сравнении с индометацином в остром периоде воспаления (в фазу альтерации) на 7% и в фазу отека на 12,3%, что обусловлено повышением антициклооксигенозной активности комбинации препаратов и способностью тиотриазолина стабилизировать цитоплазматические мембраны клеток тканей, сосудов и уменьшать проницаемость сосудов.

Применение комбинации препаратов в терапевтической дозе, в соответствии с изобретением, потенциирует анальгетические свойства индометацина, снижая порог болевой чуствительности в 2,1-3,6 раза по сравнении с индометацином.

Кроме того, лекарственное средство по изобретению более чем в два раза реже вызывает развитие повреждений слизистой оболочки желудка (язв и эрозий) по сравнению с индометацином за счет широкого спектра действия тиотриазолина, блокирующего токсичность индометацина.

Сущность изобретения поясняется ниже приведенным описанием и примерами исследований лекарственного средства по изобретению и прототипа.

Нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (НПВС) относятся к числу наиболее широко применяемых в медицине симптоматических препаратов. Однако лекарственные средства этой группы являются не безопасными, так как даже кратковременное их применение может приводить к развитию побочных реакций, которые встречаются в 25% случаев, а у 5% больных, особенно пожилого возраста, могут представлять угрозу для жизни. Ведущий механизм, определяющий эффективность НПВС, связан с подавлением активности циклооксигеназы (ЦОГ), которая играет ведущую роль в развитии воспалительной реакции.

Повышение качества противовоспалительной терапии НПВС может быть достигнуто путем создания рациональной комбинации с препаратами, ограничивающими их токсическое действие, например ульцерогенность.

Соответсвенно, для выявления наиболее эффективной комбинации НПВС с другими препаратами были исследованы в широком диапазоне доз: индометацин (прототип) и комбинация индометацина с тиотриазолином в различных соотношениях. В процессе исследования были установлены противовоспалительная, анальгетическая активность препаратов и их повреждающее действие на слизистую оболочку желудка.

Исследование противовоспалительной активности препаратов

Исследование проведено на 132 белых мышах массой 18-22 г.

Активность исследуемых веществ определяли по их способности уменьшать развитие отека по сравнению с контролем и выражали в процентах, которые показывают, насколько лекарственное вещество угнетает развитие отека по отношению к контролю, где величина отека принимается за 100%.

Через один час после создания декстранового отека животных выводили из эксперимента путем декапитации и на уровне тазобедренного сустава ампутировали воспаленные и невоспаленные задние лапы. После применения препаратов внутрь максимально уменьшает объем отека на первом часу воспаления на 62,9-66,4% предлагаемый препарат, в составе которого доза индометацина на 2,5 мг меньше по сравнению с максимальным противоотечным эффектом (56,95%) чистого препарата в дозе 7,5 мг/кг. Так как в интервале 30-90 минут в патогенезе воспаления принимают активное участие гистамин и серотонин, проникновению которых в очаг воспаления способствует декстран, можно сделать заключение, что предлагаемый препарат наиболее эффективно угнетает выделение факторов альтерации тканей - серотонина и гистамина.

Через 3 часа на модели каррагенинового отека после применения внутрь исследуемых препаратов установлена высокая эффективность смеси индометацина и тиотриазолина, которая в соотношении 1:3 (в дозе индометацина 5 мг/кг и тиотриазолина 15 мг/кг) устраняли отек лапки на 71,1%, тогда как индометацин в дозе 7,5 мг/кг уменьшал отек только на 65,1%. Так как в интервале 2,5-5,5 часов в патогенезе воспаления принимают активное участие простогландины, выполняющие важную роль в развитии каррагенинового воспаления, применение предлагаемого препарата позволяет наиболее эффективно подавить выделение простагландинов и таким образом ограничить развитие отека.

Таким образом, можем сделать вывод о том, что исследуемые препараты (при курсовом приеме внутрь) обладают выраженным противовоспалительным эффектом, особенно предлагаемый препарат. Результаты приведены в таблицах №1 и №2.

Изучение анальгетической активности препаратов

Для изучения анальгетической активности препаратов использовали две стандартные модели а) электроболевого раздражения корня хвоста крысы и б) отдергивания хвоста (тепловая иммерсия). Исследования проведены на 144 белых крысах линии Вистар массой 180-200 г, на 24 группах животных. Каждая группа содержала по 6 особей - самцов. Крысы получали препараты индометацин, и смесь индометацина с тиотриазолином внутрь, в разных дозах.

Оценку болевой чувствительности определяли спустя 2-3 мин и 90 мин по появлению голосовой реакции (писк, вокализация) и движению хвоста в ответ на постепенно нарастающее электрическое раздражение от электростимулятора ЭСЛ-1. Длительность каждого раздражения не превышала 1 сек. Результаты приведены в таблице №3. Полученные данные показывают понижение порога болевой чувствительности во всех группах животных, которые получали как чистый индометацин, так и с тиотриазолином. Индометацин максимально снижал порог болевой чувсвительности 50,3%-62,7% по реакции хвоста и вокализации через 90 мин наблюдения после применения его в дозе 10 мг/кг. В то же время предалагаемый препарат в дозе (индометацин 5 мг/кг и тиотриазолин 15 мг/кг) повышал порог устойчивости к болевым раздражениям на 80,0%-85,6% по реакции хвоста и вокализации. При этом доза индометацина уменьшается в два раза. В предлагаемом лекарственном средстве тиотриазолин потенциирует анальгетические свойства индометацина.

Таким образом, можем сделать вывод о том, что исследуемые препараты (при приеме внутрь) обладают выраженным анальгетическим эффектом, особенно предлагаемый препарат. Результаты приведены в таблице №3.

Исследование ульцерогенности препаратов

Известно, что одним из неблагоприятных эффектов применения индометацина внутрь является его токсическое действие на слизистую оболочку желудка с появлением гиперемии, изъязвлений и язв. Изучение ульцерогенности препаратов проведено на 30 белых крысах линии Вистар массой 160-200 г. Группы животных (в каждой группе по 6 животных) получали препараты: индометацин и смесь индометацина с тиотриазолином в эффективных дозах внутрь в течение четырех дней. Животных декапитировали на четвертый день, извлекали желудок, рассекали их по малой кривизне и промывали в физиологическом растворе для удаления содержимого. Оценку ульцерогенного эффекта проводили визуально по количеству язвенных дефектов, что отражали в баллах и язвенном индексе (ЯИ). Результаты приведены в таблице №4. Результаты проведенного исследования показали, что предлагаемый препарат в дозе (индометацин 5 мг/кг и тиотриазолин 15 мг/кг) в 2,5-3 раза реже вызывает образование язв слизистой оболочки желудка по сравнению с индометацином в дозах 5-10 мг/кг. При этом язвенный индекс после применения предлагаемого препарата по сравнению с индометацином снижается в два раза (табл.№4), т.е. предлагаемый препарат имеет преимущества перед индометацином, так как является менее ульцерогенным и токсичным. Токсичность предлагаемого препарата ЛД₅₀ составляет 750 мг/кг массы, что в пять раз ниже по сравнению с индометацином, ЛД₅₀ которого составляет 150 мг/кг.

Таким образом, предлагаемое лекарственного средство по изобретению обладает более высокой противовоспалительной, анальгетической активностью в сравнении с известными препаратами индометацина, при этом снижается токсичность индометацина, т.к. в предлагаемом лекарственном средстве достижение терапевтического эффекта наблюдается при меньшей дозе индометацина.

Для иллюстрации приводим следующие примеры доклинического исследования перорально вводимых препаратов по изобретению.

Пример №1

Исследование противовоспалительной активности на каррагениновой декстрановой модели воспаления.

Исследования проведены на 132 белых мышей массой 18-22 г, животные были распределены на 22 группы по 6 животных. Для формирования острого асептического воспаления у лабораторных животных использовали флогогены - каррагенин и декстран. Выбор двух флогогенов обусловлен тем, что воспаление, вызванное разными агентами, отличается особенностями своего развития и факторами, участвующими в его генезе. Так, декстран вызывает высвобождение биогенных аминов - гистамина и серотонина, а каррагенин способствует экссудации благодаря активации синтеза простогландинов.

Исследуемые препараты (индометацин и комбинация индометацина с тиотриазолином) вводили перорально за 1 час до субплантарного введения по 0,05 мл 1% раствора каррагенина или 6% раствора декстрана.

Через 3 часа на модели каррагенинового отека (так как в интервале 2,5-5,5 часа в патогенезе воспаления принимают активное участие именно простогландины, выполняющие важную роль в патогенезе каррагенинового воспаления) и через 1 час на модели декстранового отека (так как в интервале 30-90 мин в патогенезе воспаления принимают активное участие гистамин и серотонин, проникновению которых в очаг воспаления способствует декстран) животных выводят из эксперимента путем декапитации и на уровне тазобедренного сустава ампутируют воспаленные и не воспаленные задние лапы.

После этого массы конечностей взвешивают. Активность исследуемых веществ определяют по их способности уменьшать развитие отека по сравнению с контролем и выражают в процентах, которые показывают, насколько лекарственное вещество угнетает развитие отека по отношению к контролю, где величина отека принимается за 100%.

Результаты приведены в таблицах №1 и №2.

Таблица№1 Противовоспалительная активность на модели декстранового отека
Препарат	Доза, мг/кг		Масса лапы, мг		Изменение массы лапы, % по сравнению с контролем
Индометацин	4,0		38,83±2,03		50,1*
Индометацин	5,0		34,83±3,13		55,24*
Индометацин	7,5		33,5±2,21		56,95*
Индометацин	10,0		41,33±2,21		46,9*
Индометацин	15,0		43,33±5,43		44,3*
Контроль	вода		77,83±6,3		0
Индометацин		4,0	34,83±1,34	55,2*
Тиотриазолин		12,0
Индометацин		5,0	28,83±3,89	62,9*
Тиотриазолин		10,0
Индометацин		5,0	31,33±3,19	59,7*
Тиотриазолин		15,0
Индометацин		7,5	26,16±4,29	66,4*
Тиотриазолин		7,5
Контроль		вода	77,83±6,3	0
Примечание: * - достоверно по отношению к исходному фону (Р<0,05).

Таблица №2 Противовоспалительная активность на модели карагенинового отека
Препарат	Доза, мг/кг	Масса лапы, мг	Изменение массы лапы, % по сравнению с контролем
Индометацин	4,0	37,2±2,9	56,8*
Индометацин	5,0	34,2±4,9	58,8*
Индометацин	7,5	29,0±3,4	65,1*
Индометацин	10,0	31,2±5,5	62,5*
Индометацин	15,0	41,3±4,6	50,2*
Контроль	вода	83,0±7	0
Индометацин Тиотриазолин	4,0 12,0	27,7±2,5	69,0*
Индометацин Тиотриазолин	5,0 15,0	24,8±2,1	71,1*
Индометацин Тиотриазолин	4,0 5,0	35,8±4,8	58,3*
Индометацин Тиотриазолин	4,0 7,5	29,2±3,3	66,1*
Индометацин Тиотриазолин	7,5 7,5	26,5±3,7	69,2*
Контроль	вода	86,0±6,6	0
Примечание: * - достоверно по отношению к исходному фону (Р<0,05).

Пример №2

Изучение анальгетической активности проведено с учетом вовлечения центральных и периферических механизмов (электроболевое раздражение корня хвоста крысы).

Исследования проведены на 72 белых крысах линии Вистар массой 180-200 г, которых разделили на 12 групп животных, каждая группа содержала по 6 особей - самцов. Препараты получали в разных дозах, согласно которым животные были разделены на группы. Исследуемые препараты вводились перорально.

Для оценки анальгетической активности обезболивающих средств нами был использован метод электрического раздражения хвоста крысы. Стальные игольчатые электроды (диаметром 0,5 мм) с фиксированным межэлектродным расстоянием (10 мм) вводились под кожу на расстоянии 1 см от корня хвоста. Оценку болевой чувствительности определяли спустя 2-3 мин (животное успокаивается) и 90 мин по появлению голосовой реакции (писк, вокализация) и движению хвоста в ответ на постепенно нарастающее электрическое раздражение от электростимулятора ЭСЛ-1. Длительность каждого раздражения не превышала 1 сек. Результаты приведены в таблице №3.

Пример №3

Изучение анальгетических свойств препаратов на модели отдергивания хвоста (тепловая иммерсия).

Эксперименты проведены на 72 белых крысах линии Вистар массой 180-200 г. Животные были распределены на 12 групп в зависимости от получаемого препарата и его дозы (каждая группа содержала по 6 особей - самцов). Измерение латентного периода реакции отдергивания хвоста, после помещения 3 см которого в водяную баню температурой 50±0,2°С, производили до введения препаратов и через 90 минут после введения.

Результаты приведены в таблице №3.

Таблица №3 Показатели изменения порога болевого реагирования на раздражение
Группы животных	Болевой порог, амплитуда (V)
	Регистрация по движению хвоста	Регистрация по реакции вокализации
Индометацин 5 мг/кг	1,36+0,55+38,7%	2,7±1,17+21,6%
Индометацин 7,5 мг/кг	2,02±0,31+40,6%*	3,91+1,15+45,8%
Индометацин 10 мг/кг	1,92±0,33+50,3%*	4,2±1,12+62,7%
Индометацин 15 мг/кг	1,44±0,29+26,0%	4,2±1,12%+62,7%
Индометацин 5 мг/кг+тиотриазолин 5 мг/кг	1,63±0,59+20,4%	3,62+1,79+45,8%
Индометацин 5 мг/кг +тиотриазолин 10 мг/кг	1,68±0,33+58,5%*	3,2+1,48+78,0%*
Индометацин 5 мг/кг +тиотриазолин 15 мг/кг	1,75±0,59+80,0%*	3,03+1,25+85,6%*
Индометацин 7,5 мг/кг +тиотриазолин 5 мг/кг	2,52±0,51 46,5%*	4,2+1,12+50,0%*
Индометацин 7,5 мг/кг +тиотриазолин 10 мг/кг	1,64±0,39+51,8%*	4,1+1,11+65,3%*
Индометацин 7,5 мг/кг +тиотриазолин 15 мг/кг	1,37±0,2+90,3%*	2,38+0,86 +72,5%
Индометацин 5 мг/кг +тиотриазолин 20 мг/кг	1,24+0,08+53,0%*	2,96+1,5+64,0%
Контроль	1,13±0,42+26,0%	2,2+1,4+10,0%
Примечание: в процентах выражено изменение болевого порога по отношению к исходному фону; * - достоверно по отношению к исходному фону (Р<0,05).

Пример №4

Исследование ульцерогенности индометацина и его комбинаций с тиотриазолином.

Животные: 30 белых крыс линии Вистар массой 160-200 г. Группы животных, получавших препараты в разных дозах (в каждой группе по 6 животных):

1 - индометацин 10 мг/кг;

2 - индометацин 5 мг/кг;

3 - индометацин 5 мг/кг + тиотриазолин 15 мг/кг;

4 - растворитель в адекватном объеме;

5 - полноценное питание, препараты не вводили.

Принцип метода заключается в макроскопическом исследовании слизистой желудков крыс, которые получали препарат на фоне голодания. Животных декапитировали на четвертый день, извлекали желудок, рассекали их по малой кривизне и промывали в физиологическом растворе для удаления содержимого. Оценку ульцерогенного эффекта проводили визуально по количеству язвенных дефектов, что отражали в баллах и язвенном индексе (ЯИ).

Результаты приведены в таблице №4.

Таблица №4 Влияние препаратов и исследуемой комбинации на развитие повреждений слизистой желудка
	Группы животных
	1	2	3	4	5
Количество язв	21,38±2,32	17,17±1,47	7,33±2,73	1,66±1,21	0
ЯИ	25,8	21,2	11,2	4,8	0