способ снижения метастазирования карциномы легкого льюис

Формула изобретения

Способ снижения метастазирования карциномы легкого Льюис путем введения инъекционного водного раствора натриевой соли 5-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-диона, отличающийся тем, что осуществляют внутрибрюшинное введение инъекционного водного раствора натриевой соли 5-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-диона в дозе 20 мг соли/кг мыши однократно в сутки в течение 5 дней.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к антиметастазическим средствам.

Известно использование для иммунокоррекции при онкологических заболеваниях (в комбинации с химио- и лучевой терапией) различных иммуномодуляторов, в частности препарата Галавит - натриевой соли 5-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-диона. Препарат назначают по 100 мг через день до 5 инъекций, затем один раз в 3 дня. Общий курс - 20 инъекций. (Справочник Видаль-2002).

Однако доза введения препарата не дифференцируется в зависимости от гистогенеза опухоли.

Наиболее близким к данному изобретению является известный способ снижения метастазирования карциномы легкого Льюис путем введения инъекционного водного раствора натриевой соли 5-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-диона в сочетании с циклофосфаном (N,N-Бис(2-хлорэтил)тетрагидро-2Н-1,3,2-оксазафосфорин-2-амин-2-оксидамоногидрат) (Любина Л.В., Зяблицкий В.М., Романовская В.Н., Михальская Т.Ю., Будагов Р.С., Юрченко Н.И., Калюжин О.В. Влияние Галавита на рост и метастазирование карциномы Льюиса В 16 // Галавит в эксперименте и клинике. - М.: 1998. - С.33).

Экспериментальное изучение влияния препарата Галавит на рост и метастазирование карциномы легкого Льюис у мышей-опухоленосителей показало, что применение Галавита способствовало статистически достоверному усилению антиметастазического действия циклофосфана - количество легочных метастазов снижалось в 4 раза по сравнению с уровнем метастазирования при применении только одного циклофосфана. В 30% случаев макроскопически видимые метастазы отсутствовали вообще.

Препарат Галавит практически не имеет противопоказаний (только беременность, лактация и повышенная чувствительность к компонентам препарата) и побочных действий (только аллергические реакции) (Справочник Видаль, 2002).

Однако известно, что препарат циклофосфан имеет следующие противопоказания: кахексия с резкой анемией, лейкопения, тромбоцитопения, сердечная недостаточность, тяжелые заболевания печени и почек, а также следующие побочные действия: тошнота, рвота, головная боль, алопеция, лейкопения, тромбоцитопения, боли в мышцах и костях, токсический гепатит, цистит (Справочник Видаль, 2004). В связи с этим использование указанного способа снижения метастазирования ограничено по противопоказаниям циклофосфана, а, кроме того, имеет побочные действия, являющиеся результатом использования циклофосфана.

Технической задачей изобретения является разработка способа снижения метастазирования карциномы легкого Льюис, лишенного указанных недостатков.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе снижения метастазирования карциномы легкого Льюис путем введения инъекционного водного раствора натриевой соли 5-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-диона осуществляют внутрибрюшинное введение инъекционного водного раствора натриевой соли 5-амино-1,2,3,4-тетрагидрофталазин-1,4-диона в дозе 20 мг соли/кг мыши однократно в сутки в течение 5 дней.

Антиметастазическую активность оценивали в экспериментах с использованием в качестве моделей мышей линий С ₅₇ В1/₆, DBA/₂ , СВА DDF₁, массой 20-25 г с подкожно трансплантированными опухолями и препарат Галавит в лиофилизированной лекарственной форме для инъекций во флаконах. Непосредственно перед применением препарат растворяли в дистиллированной воде для инъекций.

Оценку антиместазической активности проводили в соответствии с Методическими рекомендациями по доклиническому изучению средств, обладающих способностью ингибировать процесс метастазирования и повышать активность цитостатической терапии злокачественных опухолей, утвержденных МЗ РФ 25 ноября 1995 г., в присутствии первичного опухолевого узла.

Антиметастазический эффект оценивали на момент начала гибели мышей в контрольной группе (оптимальный срок для регистрации эффекта). Животных умерщвляли передозировкой эфирного наркоза, вскрывали, визуально определяли наличие макроскопических метастазов и интенсивность метастазирования в легкие. Затем легкие, пораженные метастазами, взвешивали на торсионных весах и вычисляли показатель торможения роста метастазов (ТРМ, %) по формуле

,

где А - средняя масса легких с метастазами в контрольной группе;

В - средняя масса легких с метастазами в группе леченых мышей.

Статистическую обработку результатов проводили по критериям Стьюдента.

Полученные результаты представлены в таблицах 1 и 2.

В таблице 1 представлены результаты изучения влияния пятикратного внутрибрюшинного (в/бр) применения Галавита в дозах 10, 20 и 100 мг/кг мыши. Лечение начинали через 7 дней после трансплантирования опухоли.

Каждой мыши трансплантировали подкожно в область подмышечной впадины правой передней лапы по 0,5 мл суспензии механически измельченной опухолевой ткани, разведенной в среде 199 в соотношении 1:9. В данном объеме суспензии гомогенизированной опухолевой ткани содержится около 1,0×10 ⁶ жизнеспособных опухолевых клеток.

Метастазы на момент забоя животных (27 сутки эксперимента) выявлены у всех животных контрольной группы и всех животных, получавших лечение. Однако у животных, получавших Галавит в дозе 20 мг/кг мыши в течение 5 дней, масса легких, пораженных метастазами, была на 29% меньше, чем в группе контрольных не леченых животных, что свидетельствует о наличии антиметастазического эффекта. Применение препарата в дозе 10 и 100 мг/кг мыши в тех же режимах не оказало заметного влияния на метастазирование карциномы Льюис.

Увеличение длительности курса введения препарата до 10 дней (забой на 35 сутки) или дробное применение препарата в тех же или близких дозах не усиливало антиметастазического действия (таблица 2).

Применение препарата в дозах 10, 20 и 40 мг/кг мыши внутримышечно (в/м) в течение 10 последующих дней проявило даже определенную тенденцию к стимуляции метастазирования карциномы легкого Льюис. Средняя масса легких у животных в этом случае превышала аналогичный показатель в контрольной группе соответственно на 15, 10 и 25%. Частота метастазирования на фоне проводимого по данной схеме лечения также не снижалась.

Таким образом, наилучшие результаты получены в результате способа по изобретению, при этом использовался только препарат Галавит, имеющий минимальные противопоказания и побочные действия в низкой суточной и суммарной дозе.

Таблица 1
№	Воздействие	Ср. масса легких, мг	ТРМ, %
1	Контроль	394,2±27,1	-
2	Галавит в/бр 10 мг/кг×5 р.	447,3±105	+14
3	Галавит в/бр 20 мг/кг×5 р.	294,5±99,5	29
4	Галавит в/бр 100 мг/кг×5 р.	398,5±92,9	+1
*значение со знаком «+» означает стимуляцию метастазирования

Таблица 2
№	Воздействие	Ср. масса легких, мг	ТРМ, %
1	Контроль	492,4±91,6	-
2	Галавит 10 мг/кг (У+В) ×10р.,в/бр	535,7±152,9	+9
3	Галавит 20 мг/кг (У+В) ×10 р., в/бр	485,2±141,2	2
4	Галавит 40 мг/кг (У+В) ×10р.,в/бр	546,4±143,5	+11
5	Галавит 10 мг/кг×10 р., в/м	565,0±120,7	+15
6	Галавит 20 мг/кг×10 р., в/м	542,4±131,5	+10
7	Галавит 40 мг/кг×10 р., в/м	616,3±64,8	+25
значение со знаком «+» означает стимуляцию метастазирования; (У+В) - дробное введение дозы: утром и вечером.