способ моделирования остеопороза

Формула изобретения

Способ моделирования остеопороза путем введения препарата, отличающийся тем, что проводят двустороннюю овариэктомию с последующим введением омепразола в дозе 0,3-0,4 мг/кг перорально в течение 6 месяцев.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине и может быть применено при моделировании остеопороза.

Известен способ моделирования аваскулярного остеонекроза, принятый за аналог (Зайцева М.Ю., Нетылько Г.И. Экспериментальное моделирование аваскулярного остеонекроза мыщелков бедренной и большеберцовой костей. Травматол. ортопед. России. 2005; 37 (3): 36-39).

Известен способ моделирования остеопороза путем введения стероидов, принятый за прототип (Wang G., Cui Q., Balian G. The patogenesis and prevention of steroid induced osteonecrosis Clin. Orthop.2000; 370: 295-310).

Однако известный способ не позволяет моделировать остеопороз, возникающий при воздействии ингибиторов протонного насоса в разных возрастных группах.

Целью изобретения является повышение точности моделирования остеопороза, возникающего при воздействии ингибиторов протонного насоса.

Технический результат достигается тем, что животным проводят двустороннюю овариэктомию с последующим введением омепразола в дозе 0,3-0,4 мг/кг перорально в течение 6 месяцев.

Способ реализуется следующим образом.

Крысам-самкам линии Вистар весом 220-250 г, которые содержались на стандартном рационе питания и свободном доступе к пище и воде в условиях вивария, проводили двустороннюю овариэктомию и в течение 6 месяцев перорально вводили омепразол в дозе 0,3-0,4 мг/кг.

В сыворотке крови определяли фосфор, кальций, креатинин, альбумины, щелочную фосфатазу; в костной ткани определяли уровень кальция и фосфора. Морфологическое исследование костной ткани проводили с предварительной декальцинацией. Образцы ткани фиксировали по стандартной методике и окрашивали гематоксилином и эозином.

Способ подтверждается следующими примерами.

Пример 1.

Крысу линии Вистар весом 220 г (самку) содержали на стандартном рационе питания и свободном доступе к пище и воде в условиях вивария. Двустороннюю овариэктомию проводили следующим образом: в условиях хирургической стадии нембуталового наркоза (40 мг/кг) проводили срединную лапаротомию, выделяли трубы матки, взяв их на лигатуру, осуществляли перевязку яичниковых артерий. Выделяли яичники и пересекали проксимальный конец труб за лигатурой. Погружали резецированный конец трубы с лигатурой в полость живота. Осуществляли тщательный гемостаз. Ушивали двойным швом апоневроз и кожу. В течение 6 месяцев перорально вводили омепразол в дозе 0,3 мг/кг.

Спустя полгода в условиях хирургической стадии нембуталового наркоза (40 мг/кг) осуществляли забор крови (1,5 мл), центрифугировали (3000 об/мин). Далее сыворотку разделяли в кюветы для определения фосфора, кальция, креатинина, альбуминов, щелочной фосфатазы на анализаторе Olimpus. Далее производили забор костной ткани в области диафиза бедренной кости и грудины и определяли уровень кальция и фосфора. Морфологическое исследование костной ткани проводили с предварительной декальцинацией. Образцы ткани фиксировали по стандартной методике и окрашивали гематоксилином и эозином.

Результаты исследований биохимических показателей у животного с овариэктомией и пероральным введением омепразола показали, что уровень кальция в сыворотке крови составил 2,57 ммоль/л (норма 2,16), щелочной фосфатазы - 168,0 (норма 45,5), фосфора - 1,82 (норма 1,6), альбуминов - 33,0% (норма 35), креатинина - 45,0 (норма 72). То есть наблюдалось повышение уровня кальция, фосфора и щелочной фосфатазы, что свидетельствует о развитии остеопороза.

Содержание кальция в костной ткани составило 0,99 мг/г ткани (норма 3,5 мг/г), фосфора - 0,91 мг/г ткани (норма 1,5 мг/г), что свидетельствует об уменьшении насыщенности кальцием и фосфором костной ткани.

При морфологическом исследовании обнаружено истончение костных балок и дистрофия остеобластов.

Пример 2.

Крысу линии Вистар весом 250 г (самку) содержали на стандартном рационе питания и свободном доступе к пище и воде в условиях вивария. Двустороннюю овариэктомию осуществляли в условиях хирургической стадии нембуталового наркоза (40 мг/кг). Проводили срединную лапаротомию, выделяли трубы матки, взяв их на лигатуру, осуществляли перевязку яичниковых артерий. Выделяли яичники и пересекали проксимальный конец труб за лигатурой. Погружали резецированный конец трубы с лигатурой в полость живота. Осуществляли тщательный гемостаз. Ушивали двойным швом апоневроз и кожу. В течение 6 месяцев перорально вводили омепразол в дозе 0,4 мг/кг.

Спустя полгода в условиях хирургической стадии нембуталового наркоза (40 мг/кг) осуществляли забор крови (1,5 мл), центрифугировали (3000 об/мин). Далее сыворотку разделяли в кюветы для определения кальция, фосфора, щелочной фосфатазы, креатинина, альбуминов на анализаторе Olimpus. Далее производили забор костной ткани в области диафиза бедренной кости и грудины и определяли уровень кальция и фосфора. Морфологическое исследование костной ткани проводили с предварительной декальцинацией в 10% растворе азотной кислоты в течение 1 суток. Образцы ткани фиксировали по стандартной методике и окрашивали гематоксилином и эозином.

Биохимические показатели у животного с овариэктомией и пероральным введением омепразола были следующими: уровень кальция в сыворотке крови составил 2,75 ммоль/л (норма 2,16), щелочной фосфатазы - 204,0 (норма 45,5), фосфора - 2,10 (норма 1,6), альбуминов - 30% (норма 35), креатинина - 58,0 (норма 72). То есть наблюдалось повышение уровня кальция, фосфора и щелочной фосфатазы, что свидетельствует о развитии остеопороза.

Содержание кальция в костной ткани составило 0,91 мг/г ткани (норма 3,5 мг/г), фосфора - 0,71 мг/г ткани (норма 1,5 мг/г), что свидетельствует об уменьшении насыщенности кальцием и фосфором костной ткани.

При морфологическом исследовании обнаружено, что выраженность истончения костных балок и дистрофия остеобластов выше, чем в примере 1.

Пример 3

Крысу линии Вистар весом 240 г (самку) содержали на стандартном рационе питания и свободном доступе к пище и воде в условиях вивария. Двустороннюю овариэктомию проводили следующим образом: в условиях хирургической стадии нембуталового наркоза (40 мг/кг). Выполняли срединную лапаротомию, выделяли трубы матки, перевязывая их в проксимальном (овариальном) отделе, осуществляли перевязку яичниковых артерий. Выделяли яичники и пересекали проксимальный конец труб за лигатурой. Погружали резецированный конец трубы с лигатурой в полость живота. Осуществляли тщательный гемостаз. Ушивали двойным швом апоневроз и кожу. В течение 6 месяцев перорально вводили омепразол в дозе 0,35 мг/кг.

Спустя полгода в условиях хирургической стадии нембуталового наркоза (40 мг/кг) осуществляли забор крови (1,5 мл), центрифугировали (3000 об/мин). Далее сыворотку разделяли в кюветы для определения фосфора, кальция, креатинина, альбуминов, щелочной фосфатазы на анализаторе Olimpus. Далее производили забор костной ткани в области диафиза бедренной кости и грудины и определяли уровень кальция фосфора. Морфологическое исследование костной ткани проводили с предварительной декальцинацией. Образцы ткани фиксировали по стандартной методике и окрашивали гематоксилином и эозином.

Результаты исследований биохимических показателей у животного с овариэктомией и пероральным введением омепразола показали, что уровень кальция в сыворотке крови составил 2,66 ммоль/л (норма 2,16), щелочной фосфатазы - 186,0 (норма 45,5), фосфора - 1,92 (норма 1,6), альбуминов - 32,0% (норма 35), креатинина - 52,0 (норма 72). То есть наблюдалось повышение уровня кальция, фосфора и щелочной фосфатазы, что свидетельствует о развитии остеопороза.

Содержание кальция в костной ткани составило 0,95 мг/г ткани (норма 3,5 мг/г), фосфора - 0,9 мг/г ткани (норма 1,5 мг/г), что свидетельствует об уменьшении насыщенности кальцием и фосфором костной ткани.

При морфологическом исследовании обнаружено истончение костных балок и дистрофия остеобластов, выраженные в средней степени.

Исследование проведено на 18 крысах, у которых воспроизведена модель остеопороза. Цель изобретения - повышение точности моделирования остеопороза, возникающего при воздействии ингибиторов протонного насоса, - достигнута.