способ количественного определения сульфамидных препаратов в лекарственных формах

Формула изобретения

Способ количественного определения сульфамидных препаратов в таблетках путем обработки анализируемой пробы растворами соляной кислоты, нитрита натрия с последующим фотометрированием полученного раствора, отличающийся тем, что анализируемую пробу дополнительно обрабатывают раствором хромотроповой кислоты в присутствии карбоната натрия, измеряют оптическую плотность полученного раствора при длине волны 530 нм относительно воды и определяют количество исследуемого вещества с помощью градуировочного графика.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к аналитической химии, может быть использовано для контроля за содержанием сульфамидных препаратов в различных объектах.

Целью изобретения является создание высокочувствительной экспресс-методики определения содержания сульфамидных препаратов в лекарственных формах. Сульфамидные препараты со свободной первичной аминогруппой легко диазотируются в кислой среде. В результате азосочетания образовавшихся диазосоединений с щелочным раствором -нафтола в присутствии ацетата Na образуются интенсивно окрашенные азосоединения. Методика рекомендована Государственной Фармакопеей как общегрупповое испытание на подлинность лекарственных веществ, содержащих первичную ароматическую аминогруппу [Фармацевтическая химия. Под ред. проф. А.П.Арзамасцева. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006, 640 с.] [1].

Вместе с тем, при азосочетании диазотированных сульфамидных препаратов с -нафтолом формируются окрашенные осадки, а скорость их формирования сильно зависит от концентрации сульфамидов. Это обстоятельство является препятствием к дальнейшему использованию данной реакции.

Целью изобретения является создание высокочувствительной экспресс-методики определения содержания сульфамидных препаратов в лекарственных формах. Поставленная задача достигается тем, что диазотированные по свободной аминогруппе сульфамиды сочетают с хромотроповой кислотой, в результате чего образуются воднорастворимые окрашенные в красный цвет азосоединения с молярным коэффициентом светопоглощения 4,5·10⁴ при 530 нм. Азосоединения формируются быстро, они не меняют своих оптических характеристик во времени.

Образование соли диазония. Сульфамиды общей формулы

в солянокислой среде в присутствии нитрита натрия образуют соли диазония

В присутствии хромотроповой кислоты и соли диазония образуется азосоединение, окрашенное в яркий алый цвет ( =530 нм).

Выполнение определения. Навеску сульфамидного препарата 0,01 г, взятого после измельчения таблетки, растворяют в HCl и доливают воду до 10 см³. Отдельно приготавливают раствор нитрита натрия (0,01 г в 10 см³ воды) и хромотроповой кислоты (0,03 г в 10 см³ воды +2 кристаллика Na ₂CO₃·10 H₂O). Мелко дробят лед, помещают в стакан емкостью 100 см³ 20 г льда, вносят раствор сульфамида и нитрита натрия. Через 1 мин добавляют хромотроповую кислоту и доводят объем раствора до 50 см³ водой. Формируется азосоединение, окрашивающее раствор в алый цвет. В зависимости от интенсивности окраски отбирают в кюветы толщиной от 0,1 до 1,0 см³ полученный раствор и измеряют оптическую плотность его при 530 нм.

Градуированные графики. В серию стаканчиков отбирают разбавленный в 100 раз исходный раствор: 0; 0,05; 0,1; 0,20; 0,40; 0,60; 1,0; 2,0; 5,0 см ³, вносят, как в прописи для определения лед, нитрит натрия, соляную кислоту и через 1 мин хромотроповую кислоту и доводят объем до 50 см³ водой. Измеряют оптические плотности при 530 нм в кювете толщиной 1 см относительно воды. Градуировочные графики для определения сульфамидов в индивидуальных препаратах приведены на чертеже.

Результаты определения индивидуальных сульфамидных препаратов в их растворах приведены в таблице 1.

Таблица 1. Метрологические характеристики методики определения азосоединений сульфамидов в индивидуальных препаратах фотометрическим методом, n=6. P=0,95; tp=2,57.
Препарат	Внесено в воду, мг/дм3	Найдено, мг/дм3
Данным методом	По методике [1]
Стрептоцид	0,01	0,01±0,005	0,01±0,01
0,10	0,10±0,01	0,10±0,05
1,00	1,00±0,15	1,00±0,25
Норсульфазол	0,01	0,01±0,005	0,01±0,01
0,10	0,10±0,01	0,10±0,05
1,00	1,00±0,10	1,00±0,30
Этазол	0,01	0,01±0,005	0,01±0,01
0,10	0,10±0,01	0,10±0,05
1,00	1,00±0,15	1,00±0,30
Сульфадимезин	0,01	0,01±0,005	0,01±0,01
0,10	0,10±0,01	0,10±0,05
1,00	1,00±0,15	1,00±0,30

Как видно из табл.1, разработанная методика по метрологическим характеристикам превосходит широко используемую.

Тонкослойная хроматография соединений. Образующиеся соединения хорошо растворимы в воде и водно-этанольных смесях до содержания этанола на уровне 60%. Соединения хорошо адсорбируются силикагелями (например, силикагелем А-60), на крахмале и целлюлозе, что обеспечивает возможность разделения их с помощью хроматографии, в том числе и тонкослойной хроматографии (ТСХ). Было проверено ТСХ разделение полученных азосоединений на пластинках Sorbfil ПТСХ-АВ-В (ТУ 26-11-17-89).

Выполнение разделения. На пластинку Sorbfil ПТСХ-АВ-В через 1 см на линии старта вносят по 0,03 см³ (1 капля) 10^-3 М раствора каждого из азопроизводных сульфамидов. Пластинку опускают в стакан, на дно которого на высоту 0,5 см налита смесь этанола, уксусной кислоты и воды в соотношении 50:1:49. Стакан накрывают колпаком. После того как подвижная фаза достигнет верхней отметки пластины (1 см от верхнего края), пластинку вынимают, подсушивают в токе воздуха (вентилятор) и измеряют расстояния, пройденные отдельными компонентами. Эти расстояния достаточно близки, однако они различаются. Рассчитывают коэффициент разделения R_f

где h₀ - расстояние, пройденное подвижной фазой, h_x - расстояние, пройденное азосоединением. Результаты разделения приведены в таблице 2.

Таблица 2. Хроматографические характеристики (Rf ) азопроизводных сульфамидных препаратов.
Производные сульфамидов	Rf	Цвет пятна	Смесь производных	Rf
Стрептоцид	0,65	Алый	Стрептоцид,	0,65
Норсульфазол	0,45	Алый	норсульфазол, этазол,	0,45
Этазол	0,55	Алый	сульфадимазин пятна хорошо	0,55
Сульфадимазин	0,60	Алый	разделяются и различаются	0,60

Таким образом, при диазотировании смеси сульфамидов получают смесь их азопроизводных, которые при ТСХ хроматографировании хорошо разделяются. По отдельным пятнам можно легко судить о наличии в смеси различных сульфамидов.