Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: .....гормоны роста – C12N 15/18

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению модифицированного гормона роста, и может быть использовано в медицине. Рекомбинантным путем получают полипептид, который имеет антагонистическую активность в отношении рецептора гормона роста. Изобретение позволяет получить полипептид, который эффективен при лечении состояний, обусловленных избытком гормона роста в организме пациента. 6 н. и 5 з.п. ф-лы, 19 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии. Предложена рекомбинантная плазмидная ДНК pPBS-St9, кодирующая полипептид с последовательностью гормона роста человека соматотропина, имеющая молекулярную массу 4,1 Мда (6266 п.о.), а также штамм Saccharomyces cerevisiae BY4739 [leu2 ura3 lys2 prc1::LEU]/pPBS-St9, содержащий рекомбинантную плазмидную ДНК pPBS-St9, - продуцент рекомбинантного соматотропина. Изобретение может быть использовано для получения рекомбинантного гормона роста человека при лечении карликовости. 2 н.п. ф-лы, 5 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии. Получен штамм дрожжей Saccharomyces cerevisiae, способный продуцировать секретируемый соматотропин человека. Данный штамм содержит под контролем промотора последовательность ДНК, кодирующую зрелый соматотропин человека, слитый в одной рамке считывания с лидерным пептидом. Лидерный пептид включает удвоенную про-область -фактора дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Он также может содержать утроенную про-область -фактора дрожжей Saccharomyces cerevisiae, или удвоенную про-область белка HSP150 дрожжей Saccharomyces cerevisiae, или комбинацию указанных про-областей. Способ получения соматотропина человека предусматривает культивирование штамма-продуцента соматотропина человека. Применение изобретения обеспечивает повышение выхода целевого продукта. 2 н.п. ф-лы, 1 ил., 8 пр.

Штамм гибридомы получают путем иммунизации мышей линии BALB/c. Мышей иммунизируют по общепринятой методике путем двукратного подкожного введения ЛПС Francisella tularensis 15/10. На третьи сутки после последней бустер-инъекции проводят гибридизацию спленоцитов иммунных мышей (1×10⁸ клеток) с клетками мышиной миеломы Р3-Х63 Ag/8-653 (1×10⁷ клеток). В качестве агента для слияния применяют полиэтиленгликоль (Sigma, США). После гибридизации проводят селекцию, скрининг, клонирование и криоконсервацию гибридомы. Гибридома 11D6 по изобретению продуцирует моноклональные антитела (МКА) к ЛПС F.tularensis, титр которых составляет в культуральной жидкости 1:1000, в иммуноасцитической жидкости 1:100000. Продуцируемые гибридомой МКА высокоспецифичны к ЛПС F.tularensis и пригодны для конструирования тест-систем для выявления возбудителя туляремии. 7 ил., 6 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению эритропоэтина, слитого с Fc-фрагментом человеческого IgG, и может быть использовано в медицине. Рекомбинантным путем получают слитый белок, содержащий природную молекулу человеческого эритропоэтина с остатком цистеина вблизи ее С-конца и фрагмент Fc человеческого IgG, содержащий шарнирную область, причем N-конец указанного Fc-фрагмента присоединен к указанному С-концу указанной молекулы эритропоэтина и при этом указанный Fc-фрагмент является природным, за исключением мутации, состоящей в замещении остатка цистеина в указанной шарнирной области, расположенного ближе всего к указанной эритропоэтиновой молекуле, нецистеиновым остатком, в результате чего первый цистеиновый остаток указанной шарнирной области, расположенный ближе всего к указанному N-концу, отделен по меньшей мере 12 или 17 аминокислотами от указанного остатка цистеина указанной молекулы эритропоэтина. Полученный пептид используют для стимуляции эритропоэза у млекопитающего. Изобретение позволяет получить слитый белок, обладающий активностью эритропоэтина, имеющий продленное время полужизни in vivo по сравнению с нативным человеческим эритропоэтином. 12 н. и 31 з.п. ф-лы, 20 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению нейтрализующих эпитопов для антитела анти-GDF-8, и может быть использовано в медицине. Получают пептидные варианты из области с 327 по 346 аминокислоту последовательности SEQ ID NO:1, которые специфически связываются с моноклональным антителом крысы 788. Пептиды получают рекомбинантным путем с использованием клетки-хозяина, трансформированной вектором экспрессии с нуклеиновой кислотой, кодирующей указанный вариант пептида. На основе полученных пептидов готовят вакцинные композиции, которые используют для вызывания иммунного ответа aнти-GDF-8 и понижающего регулирования активности GDF-8 у животного. Также полученные пептиды можно использовать в способе скрининга для отбора анти-GDF-8 антител. Полученные пептиды обладают связывающей анти-GDF-8 антитело активностью, что позволяет использовать их для снижения активности фактора роста и дифференцировки 8. 9 н. и 8 з.п. ф-лы, 2 ил., 6 табл.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предлагается способ конструирования штаммов дрожжей - стабильных продуцентов гормона роста человека (соматотропина). Кроме того, предлагаются два штамма ВКПМ Y-3506 и ВКПМ Y-3507 - стабильных продуцента соматотропина человека. Штаммы-продуценты были получены путем последовательной интеграции в геном реципиентного штамма экспрессионных плазмид. Каждая плазмида несет в своем составе ген соматотропина (GH1), слитый с лидерной последовательностью, под контролем промотора GAL1, а также один из генов URA3, LEU2, TRP1 и HIS3, комплементирующих ауксотрофные мутации штамма-реципиента. Продуктивность полученных штаммов составляет 100-130 мг соматотропина на 1 л среды. 3 н.п. ф-лы, 7 ил.

Изобретение касается нового клона гибридных клеток F3H10, продуцирующих в условиях клеточной культуры и брюшной полости сингенных животных моноклональные антитела к дифтерийному токсину. Клон получен путем слияния клеток мышиной миеломы SP-2/0 с клетками подколенных лимфоузлов мышей линии BALB/c, иммунизированных в подушечки задних лапок препаратом дифтерийного токсина (производство ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф.Гамалеи). В качестве сливающего агента был использован полиэтиленгликоль с молекулярной массой 4000. Селекция гибридомы проведена на среде Игла в модификации Дульбекко с добавлением сыворотки плода коровы и гипоксантина-аминоптерина-тимидина. Гибридома синтезирует моноклональные антитела, специфически взаимодействующие с дифтерийным токсином и которые относятся к классу IgG по данным ИФА с типирующими антисыворотками против отдельных классов Ig мыши. Титр антител достигает в культуральной жидкости 1:10000 - 1:20000, в асцитной 1:1000000. Антитела могут быть использованы для конструирования иммунобиологических тест-систем детекции дифтерийного токсина, превосходящих по чувствительности, специфичности и воспроизводимости аналоги. 2 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии и получению генно-инженерных конструкций для экспрессии трансгенов в клетках млекопитающих in vitro и in vivo. Предложена модифицированная последовательность гена ангиопоэтина-1 (Ang1). Последовательность предназначена для трансфекции клеток млекопитающих с целью экспрессии в них ангиопоэтина-1. Продукция ангиопоэтина-1 в случае использования оптимизированного гена AGPopt в 1,6 раза больше, чем в случае использования природного гена hAGP. При этом содержание ангиопоэтина-1 в культуральной среде трансфицированных клеток составляет не менее 0,5 мкг/мл. Изобретение может быть использовано в медицине. 3 ил., 1 табл.

Растения трансформируют с использованием нуклеиново-кислотных конструктов, содержащих первую нуклеотидную последовательность, которая кодирует -зеин, или ее фрагмент, способный направлять и удерживать белок в эндоплазматическом ретикулуме клетки растения, вторую последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует аминокислотную последовательность, которая специфическим образом расщепляется ферментными или химическими средствами, и третью последовательность нуклеиновой кислоты, которая кодирует целевой пептид или белок. Трансформация растения такими конструктами позволяет получать слитые белки, накапливающиеся в эндоплазматическом ретикулуме клеток в форме белковых телец, из которых могут быть выделены целевые белки, в частности кальцитонин. 10 н.и 37 з.п. ф-лы, 19 ил.

Изобретение относится к области генной инженерии, конкретно к химерным полипептидам, содержащим антагонист рецептора гормона роста, и может быть использовано в медицине. Производят модификации в связывающем домене гормона роста путем замены аминокислотного остатка глицина в положении 120 и дополнительно модифицируют в сайте 1, где заменяют по меньшей мере один аминокислотный остаток, который увеличивает сродство гормона роста к его связывающему домену на рецепторе гормона роста. Затем конъюгируют его с лигандсвязывающим доменом рецептора гормона роста посредством пептидного линкера. Изобретение обеспечивает получение высокоэффективного антагониста рецептора гормона роста с увеличенным периодом полувыведения, пониженной иммуногенностью и отсутствием токсичности по сравнению с известными мутантными формами. 12 н. и 23 з.п. ф-лы, 16 ил., 1 табл.

Изобретение относится к генной инженерии, конкретно к получению мутеинов плацентарного фактора роста 1-го типа (PLGF-1), и может быть использовано в медицине. Мутеин мономерной формы PLGF-1 человека включает замену или удаление в полипептидной последовательности белка дикого типа одного остатка цистеина (Cys) в положении 142 полипептидной последовательности белка-предшественника с целью предотвращения мультимеризации данной мономерной формы. Изобретение позволяет получить химически стабильные мутеины PLGF-1 и эффективно применить их для диагностики и лечения онкологических и неонкологических патологий. 16 н. и 28 з.п. ф-лы, 7 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложены молекула нуклеиновой кислоты GDF-9B дикого и мутированного типов, кодируемые ими полипептиды, вектор, конструкция, лиганд и способы использования таких нуклеиновых кислот и полипептидов. Предложенная группа изобретений позволяет модулировать фолликулярный рост яичников через активность гомодимеров GDF-9B и гетеродимеров GDF-9B/GDF-9 in vivo и in vitro. Изобретение может быть использовано в животноводстве для активной и пассивной иммунизации против этих полипептидов для изменения фолликулярного роста. 16 н. и 19 з.п. ф-лы, 9 ил., 4 табл.

Изобретение относится к области генной и клеточной инженерии и может быть использовано в ветеринарии и животноводстве. Предложена капсула для имплантации животному, представляющая собой полупроницаемую мембрану из альгинат-поли-L-лизин-альгината, в которую заключены клетки миобластов крысы (L6), секретирующие соматотропин свиньи благодаря включенной в них экспрессионной кассете, состоящей из нуклеотидной последовательности, кодирующей секреторный сигнал инсулина и оперативно связанной с ней нуклеотидной последовательности, кодирующей активную форму соматотропина свиньи. Разработан надежный и высокотехнологичный способ обеспечения животного необходимым количеством гормона роста, предусматривающий внутримышечное введение в область шеи или в основание уха свиньи одной или большего числа капсул по изобретению. 2 н. и 2 з.п.ф-лы, 13 ил., 3 табл.