Получение пептидов или протеинов – C12P 21/00

Группа изобретений относится к биотехнологии. Рекомбинантная плазмидная ДНК pPA-OPRF-ETA размером 8007 пар оснований кодирует синтез рекомбинантного белка OprF-ETA Pseudomonas aeruginosa. Плазмида содержит следующие фрагменты: Xba I-Hind III фрагмент ДНК размером 177 пар оснований; Hind III-Hind III фрагмент ДНК размером 1059 пар оснований; Hind III-Xho I фрагмент ДНК размером 1598 пар оснований; Sph I-Hind III фрагмент ДНК размером 425 пар оснований; EcoR I - BamH I фрагмент ДНК размером 57 пар оснований. Предложены также штамм бактерий Еscherichia coli PA-OPRF-ETA, продуцирующий белок OprF-ETA и полученный путем трансформации родительского штамма бактерий Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной ДНК рРА-OPRF-ETA и способ получения указанного белка OprF-ETA. Группа изобретений позволяет получить целевой продукт с массой около 100 кДа. 3 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биоинженерии, молекулярной биологии и биотехнологии. Предложена дрожжевая клетка, предназначенная для детекции взаимодействия между белками и их доменами, котрансформированная двумя плазмидами, модифицированными для экспрессии в клетках дрожжей двух белков, где нуклеотидная последовательность, кодирующая первый белок, клонирована в одну плазмиду, а нуклеотидная последовательность, кодирующая второй белок, - в другую плазмиду, где нуклеотидные последовательности, кодирующие белки, слиты с нуклеотидными последовательностями, кодирующими активационный и ДНК-связывающий домены белка GAL4, при этом нуклеотидные последовательности, кодирующие исследуемые белки, отделены от нуклеотидных последовательностей, кодирующих активационный или ДНК-связывающий домен белка GAL4, при помощи нуклеотидной последовательности, кодирующей пептид, представляющий собой последовательность GluLeuGluAlaAlaAlaLysGluAlaAlaAlaLysGluAlaAlaAlaLysGluAlaAlaAla, который экспрессируется в виде белкового мостика между исследуемым белком и доменами белка GAL4. Изобретение позволяет свести к минимуму взаимовлияние доменов тестируемых белков и ДНК-связывающего/активационного доменов вектора и может быть использовано для детекции взаимодействия между белковыми молекулами в медицинских и исследовательских целях. 4 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к лейколектинам, и может быть использовано в медицине. Получен полипептид лейколектин, характеризующийся SEQ ID NO:1-8. Для рекомбинантного получения лейколектина используют кодирующую его нуклеиновую кислоту, встроенную в вектор экспрессии, которым трансформируют клетку-хозяина. Для определения присутствия или определения количества полипептида лейколектина в образце используют антитело или антиген-связывающий фрагмент вариабельной области указанного антитела, которое специфически связывается с полипептидом лейколектином. Полипептид лейколектин или кодирующую его нуклеиновую кислоту используют в составе фармацевтической композиции в терапии патологических нарушений кожи и слизистых. Изобретение позволяет эффективно лечить или проводить профилактику аутоиммунных нарушений кожи, воспалительных заболеваний кожи или слизистой оболочки, или поврежденной кожи у животного. 11 н. и 5 з.п. ф-лы, 19 ил., 3 табл., 12 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к модифицированному фактору Виллебранда (VWF), и может быть использовано в медицине. Рекомбинантным путем получают модифицированный VWF, слитый в С-концевой части своего первичного продукта трансляции с N-концевой частью альбумина посредством линкера SSGGSGGSGGSGGSGGSGGSGGSGGSGGSGS. Полученный модифицированный VWF используют в составе фармацевтической композиции для лечения или профилактики нарушения свертываемости крови. Изобретение позволяет получить модифицированный VWF, который сохраняет способность к N-концевой димеризации и С-концевой мультимеризации, имея при этом удлиненный полупериод функционального существования в плазме крови по сравнению с полупериодом функционального существования VWF. 8 н. и 9 з.п. ф-лы, 5 ил., 4 табл., 11 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения пептидов, специфично распознающих клетки определенных типов. Указанный способ предполагает конструирование множества библиотек случайных пептидов на основе олигонуклеотидных фрагментов, кодирующих их, путем фрагментации суммарной РНК клеток определенного типа и клеток других типов, которые могут быть вовлечены в патологический процесс и оказывать влияние на его диагностику и терапию. При этом клонируют указанные фрагменты в правильной ориентации в векторе на основе бактериофага. Затем выполняют скрининг библиотек с использованием комбинаций клеток определенного типа и клеток других типов с получением групп пептидов, специфично распознающих клетки выбранного типа в составе фаговых частиц. Из полученных пептидов выделяют и тестируют индивидуальные пептиды в составе фаговых частиц для подтверждения их специфичности. Затем для получения пептидов в чистом виде создают матрицы на основе аминокислотных последовательностей пептидов в составе фаговых частиц, с которых затем считывают последовательности новых пептидов и синтезируют их химическим путем, с последующим подтверждением специфичного распознавания клеток определенного типа. Изобретение позволяет получать высокоспецифичные и высокоселективные пептиды, распознающие клетки определенного типа. 5 ил., 1 табл., 11 пр.

Изобретения относятся к области биотехнологии и касаются слитого белка для специфического ингибирования свертывания крови, экспрессионной плазмидной ДНК, кодирующей такой слитый белок, бактерии, принадлежащей к роду Escherichia, трансформированной такой ДНК, и способу получения слитого белка. Представленный слитый белок включает тиоредоксин I E.coli и инфестин-4 и характеризуется последовательностью SEQ ID NO:2. Плазмидная ДНК содержит последовательность SEQ ID NO:1, кодирующую представленный слитый белок, находящуюся под контролем промотора, функционирующего в бактериальной клетке. Способ получения упомянутого слитого белка включает культивирование упомянутых бактерий в питательной среде, разрушение бактериальных клеток и очистку указанного слитого белка с использованием металлохелатной хроматографии и анионообменной хроматографии. Охарактеризованные решения позволяют получить белок, обеспечивающий указанную специфичность, с последующим его использованием в блокировании контактной активации свертывания крови за счет ингибирования XIIa фактора и отсутствии ингибирования Ха фактора. 4 н.п. ф-лы, 10 ил., 7 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу получения цитохрома С. Способ предусматривает обезжиривание сердец свиней, крупного рогатого скота или лошадей. Подготовленное сырье измельчают с получением фарша, затем экстрагируют 2,5% раствором трихлоруксусной кислоты при температуре 10-15 ^°С и рН 3,9-4,2. Отделяют экстракт и осуществляют его сорбцию на катионите Nuvia S, уравновешенном дистиллированной водой. После завершения сорбции катионит Nuvia S промывают дистиллированной водой и аммиачно-аммонийным буферным раствором. Затем проводят элюцию цитохрома C с катионита Nuvia S раствором сульфата аммония с последующей очисткой его диафильтрацией до полного удаления ионов сульфата аммония и концентрированием цитохрома С ультрафильтрацией. Изобретение позволяет увеличить выход продукта, повысить его чистоту и сократить технологический процесс. 2 з.п. ф-лы, 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области иммунологии и биотехнологии. Представлены выделенное, искусственное или рекомбинантное антитело или его функциональная часть, способные специфически связывать F-антиген респираторно-синцитиального вируса, которые включают: вариабельную последовательность тяжелой цепи, содержащую CDR1 NYIIN (SEQ ID NO:1), CDR2 GIIPVLGTVHYAPKFQG (SEQ ID NO:2), CDR3 ETALVVSTTYLPHYFDN (SEQ ID NO:3), и вариабельную последовательность легкой цепи, содержащую CDR1 QASQDIVNYLN (SEQ ID NO:4), CDR2 VASNLET (SEQ ID NO:5), CDR3 QQYDNLP (SEQ ID NO:6); а также нуклеотидная последовательность, кодирующая указанное антитело. Описана выделенная клетка млекопитающего, включающая указанную нуклеиновую кислоту, где эта клетка экспрессирует эту нуклеиновую последовательность. Раскрыт способ получения антитела или его функциональной части, включающий: культивирование указанной клетки in vitro; и получение антитела или его функционального фрагмента, продуцируемого указанной клеткой. Описана композиция для лечения или предупреждения РСВ-связанного расстройства, или предупреждения или противодействия неблагоприятного эффекта РСВ-инфекции на человека, включающая терапевтически эффективное количество указанного антитела или его функциональной части и фармацевтически приемлемый носитель, растворитель или эксципиент. Предложено применение указанного антитела или нуклеиновой последовательности, кодирующей его, для получения лекарственного средства для лечения или предотвращения РСВ-связанного расстройства, или предупреждения или противодействия неблагоприятного эффекта РСВ-инфекции на человека. Изобретение позволяет расширить арсенал средств для лечения или предотвращения РСВ-связанных расстройств. 10 н. и 12 з.п. ф-лы, 16 ил., 3 табл., 5 пр.

Изобретение относится к способу определения и количественной оценки необычно модифицированных гликанов, который может использоваться при анализе гликанов. Предложенный способ включает стадии: a) обеспечения препарата гликана, содержащего необычно модифицированные гликаны, выбранные из группы, содержащей сульфатированные гликаны, фосфорилированные гликаны, полиацетилированные сиалированные гликаны и их комбинации, где указанные необычно модифицированные гликаны являются отрицательно заряженными, и где препарат гликана получен путем выделения гликанов и сиаловых кислот из терапевтической композиции гликопротеина, где сиаловые кислоты выделяют путем воздействия на терапевтическую композицию гликопротеина по меньшей мере одного агента, который расщепляет остатки сиаловых кислот, в условиях, обеспечивающих расщепление сиаловых кислот; b) подвергания препарата гликана хроматографическому методу разделения, который разделяет гликаны на основании отношения заряда к массе, посредством чего происходит разделение указанных необычно модифицированных гликанов; и c) количественного определения, по меньшей мере, одного отделенного необычно модифицированного гликана, используя, по меньшей мере, один стандарт количественной оценки. Предложен новый эффективный способ, позволяющий анализировать необычно модифицированные гликаны. 41 з.п. ф-лы, 7 ил., 2 табл., 1 пр.

L-ФУКОЗА 1 6 СПЕЦИФИЧНЫЙ ЛЕКТИН

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложен L-фукоза 1 6-специфичный лектин, экстрагируемый из базидиального гриба или сумчатого гриба, характеризующийся пиковым значением молекулярной массы около 4500 m/z, определяемым при масс-спектрометрическом анализе MALDI-TOF. Новый L-фукоза 1 6-специфичный лектин обладает высоким сродством к L-фукоза 1 6 сахарной цепи, определяемым константой ассоциации 1,0×10 ⁴ М^-1 или более (при 25ºС), и имеет константу ассоциации 1,0×10³ М^-1 или менее (при 25ºС) с высокоманнозными сахарными цепями и/или гликолипидами, не содержащими L-фукоза 1 6 сахарную цепь. В одном варианте предложенный L-фукоза 1 6 специфичный лектин представляет собой белок или пептид, состоящий из аминокислотной последовательности, выбранной из SEQ ID NO:2-6. L-фукоза 1 6-специфичный лектин используют для специфического обнаружения L-фукоза 1 6 сахарной цепи и эффективной очистки L-фукоза 1 6 сахарной цепи или сахарной цепи, не содержащей L-фукозу 1 6. 6 н. и 10 з.п. ф-лы, 38 ил., 8 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Описаны варианты антител, связывающих молекулу GRM, а также их антигенсвязывающие фрагменты, аминокислотные последовательности вариабельных областей которых представлены в материалах заявки. Представлена нуклеиновая кислота, кодирующая указанные антитела. Предложен способ получения белка, связывающего RGM, включающий культивирование клетки-хозяина в культуральной среде в условиях, подходящих для получения связывающего белка, способного связываться с RGM, где клетка-хозяин содержит вектор экспрессии, содержащий выделенную нуклеиновую кислоту, кодирующую указанное антитело. Описана фармацевтическая композиция для лечения заболевания, в котором активность RGM А оказывает негативное воздействие, содержащая терапевтически эффективное количество указанного антитела и фармацевтически приемлемый носитель. Предложено применение указанного антитела для получения лекарственного средства, используемого для a) снижения связывания hRGM А с рецептором Neogenin больного; или b) для снижения связывания hRGM А с ВМР-2 и ВМР-4 у больного. Изобретение позволяет получить антитела против GRM, которые используются для лечения заболеваний, связанных с избыточным взаимодействием RGM с рецептором Neogenin, ВМР-2 и ВМР-4. 9 н. и 4 з.п. ф-лы, 16 ил., 10 табл., 11 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантного штамма бактерий Escherichia coli - продуцента биологически активного флагеллина. Охарактеризованный штамм получен трансформацией культуры клеток E. coli BL21[DE3] рекомбинантной плазмидной ДНК рЕТ151FliC, полученной на основе вектора рЕТ151FliC, в который был встроен ген fliC, кодирующий биологически активный флагеллин, имеющий нуклеотидную последовательность, представленную в Seq ID No 3. Штамм депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) ФГУП ГосНИИГенетика под № В-11369. Представленное решение обладает более высокой продуцирующей способностью в отношении рекомбинантного флагеллина, являющегося эффективным адъювантом. 1 ил., 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения наноструктурированного материала на основе рекомбинантных жгутиков архей H. salinarum , связанных с ионами металлов или наночастицами. Выращивают трансформированные рекомбинантной плазмидой клетки архей, выделяют жгутики, содержащие пептидные вставки для связывания с ионами металлов или с наночастицами. Модифицируют поверхность жгутиков посредством связывания пептидных вставок с указанными ионам или наночастицами с последующей промывкой, сушкой и упаковкой полученного материала. Конструкция плазмиды содержит рекомбинантные гены для синтеза флагеллинов А1 и А2, формирующих жгутик. При этом последовательность флагеллина А1 и/или флагеллина А2 содержит пептидную вставку для избирательного связывания ионов металлов или наночастиц, где место пептидной вставки определяют в области между первым и вторым сайтами гликозилирования, расположенной в флагеллине А1 между позицией 86 и позицией 96 SEQ ID NO: 2, а в флагеллине А2 - между позицией 82 и позицией 92 SEQ ID NO: 3. Изобретение позволяет получить наноструктурированный материал с улучшенными адгезивными свойствами, устойчивый по отношению к воздействию высоких температур. 9 з.п. ф-лы, 7 ил., 7 пр.

Настоящее изобретение относится к иммунологии и биотехнологии. Предложены варианты нуклеиновых кислот, каждый из которых кодирует аминокислотную последовательность тяжелой цепи иммуноглобулина IgG1. Указанная цепь содержит на С-конце СН3-домена глицин-лизиновый дипептид, кодируемый кодоном ggaaaa, ggcaaa или gggaaa. Описаны: плазмида, кодирующая тяжелую цепь иммуноглобулина; клетки-варианты, обеспечивающие экспрессию иммуноглобулина IgG1; способ получения иммуноглобулина в клетках млекопитающего; способ улучшения экспрессии иммуноглобулина в клетках млекопитающего; - использующие варианты нуклеиновой кислоты. Использование изобретения обеспечивает предупреждение экспрессии побочного продукта массой 80 кДа, что может найти применение при производстве иммуноглобулинов. 7 н. и 11 з.п. ф-лы, 7 ил., 3 табл., 6 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается применения штамма дрожжей Komagataella pastoris ВКПМ Y-727. Охарактеризовано применение штамма дрожжей Komagataella pastoris ВКПМ Y-727 в качестве реципиента для конструирования продуцентов целевого белка, необязательно включающее введение в него мутаций, обеспечивающих использование ауксотрофных селективных маркеров. Представленное решение может быть применимо при получении рекомбинантных белков без использования метанола в качестве индуктора экспрессии генов. 8 ил., 4 табл., 10 пр.

Изобретение относится к биохимии. Описан способ иммунологического анализа белка CXCL1 человека. Измеряют CXCL1 человека или его фрагмент в образце, используя два или более типов моноклональных антител к CXCL1 человека или их фрагменты. Каждый из двух или более типов моноклональных антител к CXCL1 человека или их фрагментов специфично распознают любой из участков последовательности аминокислотных последовательностей, представленных в SEQ ID NO:1-3, которые представляют собой частичные последовательности аминокислотной последовательности, составляющей белок CXCL1 человека. При этом два или более типов моноклональных антител к CXCL1 человека или их фрагментов специфично распознают участки последовательности, отличающиеся друг от друга. Представлены моноклональные антитела или их фрагменты, каждый из которых специфично распознает любой участок аминокислотной последовательности, представленный в SEQ ID NO:1-3, и имеет новую аминокислотную последовательность. Изобретение позволяет определять с высокой чувствительностью белок CXCL1 человека. 6 н. и 9 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл., 21 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Представлено антитело, которое представляет собой нейтрализующее антитело против VEGFR-2/KDR, гипервариабельные участки которого являются идентичными гипервариабельным участкам антитела TTAC 0001 против VEGFR-2/KDR, слитое со связывающим доменом ангиопоэтина 2, являющимся лигандом Tie-2, для лечения рака посредством ингибирования ангиогенеза. Также описаны ДНК, кодирующая указанное антитело; экспрессионный вектор, содержащий указанную ДНК; и клетка-хозяин CHO, трансформированная указанным вектором, для получения антитела. Предложен способ получения антитела, включающий: инкубацию клетки-хозяина, и выделение указанного антитела из культуральной жидкости клетки CHO. Описана фармацевтическая композиция для лечения связанного с ангиогенезом заболевания, содержащая эффективное количество указанного антитела и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый наполнитель. Изобретение позволяет получить антитело против VEGFR-2/KDR, слитое со связывающим доменом ангиопоэтина 2, которое может быть использовано для эффективного лечения заболевания, связанного с избыточным ангиогенезом. 6 н. и 7 з.п. ф-лы, 10 ил., 8 пр.

Изобретение относится к новым соединениям общей формулы 1 или 2 или их фармацевтически приемлемым солям, обладающим сродством к CD16а рецептору. Изобретение также относится к модифицированным этими соединениями белкам (конъюгатам), усиливающим и направляющим антителозависимую клеточную цитотоксичность. Соединения могут найти применение для лечения онкологических и аутоиммунных заболеваний. Изобретение также характеризует способ получения конъюгатов, фармацевтическую композицию и лекарственное средство, которые содержат модифицированные белки. В общих формулах 1 или 2

Изобретение относится к области иммунологии. Предложен вариант полипептида Fc человеческого IgG с заменами 259I и 308F, где нумерация положений приведена согласно индексу EU Kabat. Описан вариант указанного полипептида, включающий помимо указанных замен одну или несколько из следующих: 428L, 434S, 307Q, 319L, 250I. Раскрыты: нуклеиновая кислота, кодирующая указанные варианты; клетка-хозяин для продукции указанных вариантов полипептида, содержащая кодирующую нуклеиновую кислоту; способ получения указанных вариантов полипептида, включающий использование клетки, экспрессирующей указанный полипептид и содержащей кодирующую указанный полипептид НК. Использование изобретения обеспечивает полипептид, демонстрирующий повышенную аффинность с FcRn человека, что может найти применение в терапии различных заболеваний. 5 н. и 6 з.п. ф-лы, 32 ил., 14 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к рекомбинантной продукции белков человека, и может быть использовано для получения гибридного рекомбинантного эритропоэтина человека. Конструируют нуклеотидные последовательности, кодирующие гибридные белки EPO-TR 1,6, EPO-TR 4 и EPO-TR 6. Белок ЕРО-TR 1,6 представляет собой рекомбинантный эритропоэтин человека, слитый с фрагментом TR 1,6 белка MUC1 человека. Белок EPO-TR 4 представляет собой рекомбинантный эритропоэтин человека, слитый с фрагментом TR 4 белка MUC1 человека. Гибридный белок EPO-TR 6 представляет собой рекомбинантный эритропоэтин человека, слитый с фрагментом TR 6 белка MUC1 человека. Гибридные белки получают путем роллерного культивирования в подходящих условиях модифицированной линии клеток млекопитающих СНО, содержащей кодирующую белок нуклеотидную последовательность с последующим выделением гибридного белка из культуральной жидкости. Изобретение позволяет получить гибридный рекомбинантный эритропоэтин человека, обладающий пролонгированным действием. 4 н.п. ф-лы, 4 ил, 7 табл., 9 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения рекомбинантного интерферона альфа-2 человека. Гибридные белки GFN80 и GFN100 конструируют на основе рекомбинантныго интерферона альфа-2 человека, слитого с N-конца с аминокислотной последовательностью полипептида S(G ₄S)₁₆ или S(G₄S)₂₀ соответственно. Рекомбинантным путем получают штаммы продуценты Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3927 и Saccharomyces cerevisiae ВКПМ Y-3928. Штаммы используют в способе получения гибридного белка GFN80 и GFN100, который предусматривает культивирование в подходящих условиях дрожжевых клеток, трансформированных вектором экспрессии, который содержит область инициации репликации эндогенной 2-мкм плазмиды дрожжей Saccharomyces cerevisiae, а также промотор GAL1 дрожжей, контролирующий экспрессию гена, включающего последовательность ДНК SEQ ID NO:1 или SEQ ID NO:2, соответственно, с последующим выделением гибридного белка из культуральной жидкости. Изобретение позволяет получить гибридный рекомбинантный интерферон альфа-2 человека с пролонгированным действием в организме животных. 5 н.п. ф-лы, 7 табл., 15 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Представлен выделенный химерный полинуклеотид для усиления продуцирования представляющего интерес гетерологичного белка, содержащий полинуклеотидную последовательность промотора SigA или SigH, функционально связанную с полинуклеотидом, кодирующим белок YmaH, причем химерный полинуклеотид содержит последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID NO: 1, 2, 3 или 13. Также описаны вектор экспрессии, содержащий указанную нуклеотидную конструкцию, и клетка-хозяин Bacillus для продукции представляющего интерес гетерологичного белка, содержащая указанный вектор. Предложен способ получения модифицированной клетки Bacillus, включающий трансформацию клетки-хозяина Bacillus-продуцента представляющего интерес гетерологичного белка указанным вектором; и выращивание указанной модифицированной клетки в оптимальных условиях. Описан способ получения представляющего интерес белка в модифицированной клетке Bacillus, где способ включает культивирование указанной клетки-хозяина; и выращивание указанной модифицированной клетки Bacillus в оптимальных условиях. Кроме того, раскрыт способ усиления экспрессии представляющего интерес гетерологичного белка из Bacillus, включающий получение указанной модифицированной клетки Bacillus; выращивание модифицированной клетки Bacillus воптимальных условиях; и экспрессию указанного представляющего интерес белка в модифицированной клетке Bacillus, где экспрессия указанного представляющего интерес гетерологичного белка в модифицированной клетке Bacillus усиливается по сравнению с экспрессией указанного представляющего интерес белка в указанной родительской клетке-хозяине Bacillus. Изобретение позволяет повысить выход целевого белка за счет сверхэкспрессии белка YmaH. 7 н. и 23 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к мутеинам липокалина слезной жидкости человека, и может быть использовано в медицине. Мутеин липокалина слезной жидкости человека (hTLc) имеет обнаруживаемую аффинность связывания с рецепторной тирозинкиназой Met (c-Met) человека, или ее доменом, или фрагментом c-Met человека. Мутеин содержит от 6 до 18 аминокислотных замен относительно аминокислотной последовательности зрелого липокалина слезной жидкости человека (SWISSPROT DATABANK ENTRY P31025; SEQ ID NO:36), которые выбраны из группы, состоящей из Arg 26 Thr, Val, Pro, Ser, Gly; Glu 27 Gln, Gly, Val, Ser; Phe 28 Met, Asp; Pro 29 Leu, Ile, Ala, Trp; Glu 30 Leu, Gly, Arg, Phe; Met 31 Ser; Asn 32 Leu, Arg, Val, Gln; Leu 33 Tyr, Val, Ile, Thr, Phe; Glu 34 Val, Arg, Ala; Leu 56 Asn; Ile 57 Gln; Ser 58 Ile, Val; Asp 80 Tyr; Lys 83 Ala; Glu 104 Asp; Leu 105 Thr; His 106 Trp и Lys 108 Gly. Также мутеин может дополнительно содержать следующие замены: Cys 61 Ser; Cys 101 Ser; Cys 153 Ser; Arg 111 Pro; Lys 114 Trp; Thr 37 Ser; Met 39 Ile, Leu; Asn 48 Ser; Lys 52 Thr, Met; Met 55 Leu; Lys 65 Arg, Leu; Ala 79 Leu, Ser; Ala 86 Thr; Ile 89 Ser, Gln, Thr, His; Thr 40 Cys; Glu 73 Cys; Arg 90 Cys; Asp 95 Cys; Lys 121 Cys; Asn 123 Cys и Glu 131 Cys. Изобретение позволяет эффективно лечить патологические расстройства, в которые вовлечен путь HGF/c-Met, а также проводить идентификацию c-Met человека в образце. 12 н. и 38 з.п.ф-лы, 16 ил., 9 табл., 25 пр.

Настоящее изобретение относится к области микробиологии и касается способа получения RTX-токсина ApxI. Представленный способ осуществляют путем культивирования бактерий Actinobacillus pleuropneumoniae в культуральной среде, которая обеспечивает рост бактерий, причем указанная культуральная среда содержит бороглюконат в концентрации менее 60 ммоль/л для образования в среде комплекса кальций-бороглюконат. Изобретение позволяет повысить выход RTX-токсина ApxI, что может быть применимо при производстве вакцин. 4 з.п. ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Описано химерное рекомбинантное антитело, специфически связывающееся с эритропоэтином человека, характеризующееся следующими признаками: а) Kd=2,4×10^-9 М, изоэлектрическая точка в диапазоне рН 7,5-8,0; б) последовательность тяжелой цепи SEQ ID NO:12; в) последовательность легкой цепи SEQ ID NO:14. Представлен штамм гибридомы мыши, являющийся продуцентом моноклонального антитела к эритропоэтину человека, депонированный в СХЖ РАСХН под № 84. Также описано мышиное моноклональное антитело, специфически связывающееся с эритропоэтином человека, продуцируемое указанной гибридомой и характеризующееся следующими признаками: а) Kd=0,95×10 ^-9 М, молекулярный вес = 160 кД, изоточка в диапазоне рН 6,8-7,1; б) последовательность вариабельной области легкой цепи SEQ ID NO:1; в) последовательность вариабельной области тяжелой цепи SEQ ID NO:2; г) последовательности участков, определяющих комплементарность антитела: CDRH-1 - SEQ ID NO:5, CDRH-2 - SEQ ID NO:6, CDRH-3 - SEQ ID NO:7, CDRL-1 - SEQ ID NO:8, CDRL-2 - SEQ ID NO:9, CDRL-3 - SEQ ID NO:10. Изобретение позволяет расширить арсенал мышиных антител против эритропоэтина человека. 3 н.п. ф-лы, 3 ил., 5 пр., 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен штамм Fusarium sambucinum, депонированный в коллекции ВКПМ под номером F-1161. Данный штамм является продуцентом белковой пищевой биомассы. Изобретение позволяет с высокой скоростью роста в условиях жидкофазного глубинного культивирования накапливать высокобелковую биомассу с повышенным количеством ценных ненасыщенных жирных кислот, полноценных по составу. 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен способ получения пищевой грибной биомассы с высоким содержанием белка. Осуществляют многоциклическое глубинное культивирование Fusarium sambucinum ВКПМ F-1161 на жидкой питательной среде, содержащей источники углерода, азота, минеральных солей, отделение и сушку влажной биомассы гриба. Культивирования осуществляют при рН от 3,5 до 7,0 в условиях аэрации воздухом от 0,5 до 2,0 л/л/мин. Температурный режим в каждом цикле ферментации поддерживают от начала цикла до точки переключения на уровне от 26 до 30°С, далее до конца цикла - на уровне от 22 до 25°С. Точку переключения определяют по накоплению биомассы до концентрации от 45 до 60% от максимально достижимой в ферментационном аппарате, или точку переключения определяют по концентрации растворенного кислорода по ее снижению до величины от 20 до 40% от насыщения (в пересчете на атмосферное давление воздуха). Изобретение позволяет получать наибольшее накопление высокобелковой биомассы с заданным количеством нуклеиновых кислот. 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Представлен очищенный препарат рекомбинантного фермента N-ацетилгалактозамин-6-сульфатаза (GALNS) человека, где указанный фермент включает аминокислотную последовательность, по меньшей мере, на 95% идентичную аминокислотам 27-522 SEQ ID NO:4, пригодный для лечения субъекта, страдающего лизосомальной болезнью накопления, которая ассоциирована с GALNS, где: (a) указанный препарат фермента GALNS имеет чистоту, по меньшей мере, приблизительно 95% при определении окрашиванием кумасси синим при SDS-PAGE в невосстанавливающих условиях; и (b) остаток цистеина в положении 79, по меньшей мере, приблизительно в 50% молекул фермента GALNS в указанном препарате фермента GALNS преобразован в C -формилглицин (FGly); где указанный фермент GALNS является гликозилированным N-связанным гликозилированием по остаткам аспарагина в положениях 204 и 423, где, по меньшей мере, приблизительно 50% олигоманнозных цепей, присоединенных к остатку аспарагина в положении 204, являются бис-фосфорилированными. Предложен способ лечения субъекта, страдающего мукополисахаридозом типа IVa (MPS IVa), синдромом Моркио A или множественной сульфатазной недостаточностью (MSD), включающий введение субъекту терапевтически эффективного количества указанного очищенного препарата рекомбинантного GALNS человека. Изобретение позволяет получить фармацевтический препарат рекомбинантной высокофосфорилированной GALNS человека, имеющий высокий уровень молекул с преобразованным в C -формилглицин остатком цистеина в положении 79, в силу чего он высоко поглощается через рецептор манноза-6-фосфата (MPR) и имеет высокую активность. 2 н. и 27 з.п. ф-лы, 13 ил., 15 табл., 11 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу получения антитела, у которого изменены фармакокинетические свойства при сохранении антиген-связывающей активности вариабельной области, который предусматривает стадии: (а) получение антител, в которых модифицирован заряд аминокислотных остатков, выбранных из аминокислотных остатков в положениях 31, 61, 62, 64 и 65 вариабельной области тяжелой цепи и в положениях 24, 27, 53, 54 и 55 вариабельной области легкой цепи в соответствии с нумерацией по системе Кабата, где модификация заряда аминокислотных остатков приводит к изменению 1,0 или более в теоретической изоэлектрической точке вариабельной области антитела, и (b) отбор антитела с сохраненной антиген-связывающей активностью от антител, полученных на стадии (а). Изобретение позволяет эффективно изменять фармакокинетические свойства антитела, сохраняя его антиген-связывающую активность. 7 з.п. ф-лы, 62 ил., 34 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу выделения низкомолекулярных пептидов из сырья животного происхождения, которые могут служить в качестве биологически активных веществ при создании фармацевтических или косметических композиций. Способ включает ферментативный гидролиз исходного сырья, центрифугирование с последующей стерилизующей фильтрацией полученной субстанции через мелкопористые фильтры с диаметром пор 0,2 мкм. В качестве исходного сырья используют эритромассу крови доноров, которую предварительно подвергают гемолизу, вирусинактивации, инактивации фермента после ферментативного гидролиза. Проводят осветление раствором перекиси водорода с конечной концентрацией 0,83% с последующим выдерживанием при 66 °С в течение 15 мин. Изобретение позволяет выделить низкомолекулярные пептиды и повысить их биологическую активность. 2 табл., 1 пр.