высшие n-ацил-n, n¹ -трифенил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью

Формула изобретения

Высшие N -ацил- N, N¹, N² - трифенил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлориды общей формулы

P -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-29t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">CH -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-30t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-31t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-32t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">

где R = C₈H₁₇, C₁₀H₂₁,

обладающие противовирусной активностью.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области органической химии, конкретно к производным -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизомасляной кислоты - высшим N-ацил-N,N¹,N²- трифенил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлоридам (гидрохлоридам высших N-ацил-N, N¹, N²-трифенил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидинов) общей ф-лы I, обладающим противовирусной активностью в отношении вируса гриппа А(Н3N2).

P -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">-CH -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-2t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-3t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> (I) (I)

Заявляемые соединения формулы (I) могут найти применение в медицине в качестве антивирусного препарата, а также в биологии для изучения механизма противовирусного действия.

Соединения формулы (I) и их биологические свойства в литературе не описаны.

Известен лекарственный препарат ремантадин, применяющийся в медицинской практике для лечения гриппа [1].

Известно, что ряд природных ацилированных по -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминогруппе -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аланинамидинов, таких как амидиномицин (II) [2,3]

-аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-4t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-5t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> и ноформицин (III) [2,4,5],

H₂N -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-6t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> NH -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-7t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">H₂ обладает противовирусной активностью в отношении вирусов парагриппа тип 3, гриппа свиней, полиомиелита SК, человеческого риновируса N 2, риновируса лошадей, некоторых причинных вирусов животных. Однако информации об антивирусной активности соединений (II), (III) в отношении вирусов гриппа человека А(Н3N2) не имеется.

Наиболее близким по структуре к заявляемым соединениям (I) являются N-стеароил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аланинамидин (IV) [6]

C₁₇H -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-8t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> N -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-9t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">CH -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-10t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">H₂ и N-бензоил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">-аланинамидиний хлорид (V) [7].

Ph -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-11t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> NHCH₂CH -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-12t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-13t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> Сравнительно близким по структуре к заявляемым веществам (I) является и N-бензоил-N,N¹,N²-трифенилглицинамидиний хлорид (VI) [8] .

-аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-14t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">CH₂C -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-15t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-16t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">

Однако об антивирусной активности соединений (IV)-(VI) сведений не имеется.

Задачей изобретения является синтез производных амидинов -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминокислот, обладающих высокой антивирусной активностью в отношении вирусов гриппа А(Н3N2).

Поставленная задача достигается высшими N-ацил-N,N¹,N²-трифенил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлоридами формулы (I), которые обладают эффективным противовирусным действием.

Заявляемые соединения формулы (I) получают ацилированием N¹,N²- дифенил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">-N-фениламиноизобутириламидина хлорангидридами высших карбоновых кислот.

П р и м е р 1. N-пеларгоноил-N,N¹,N²-трифенил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлорид (Iа, R=C₈H₁₇).

К раствору 2,0 г (0,006 моль) N¹,N²-дифенил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -N- фениламиноизобутириламидина в 30 мл безводного серного эфира при перемешивании прибавляют 1,07 г (0,006 моля) пеларгоноилхлорида в 20 мл безводного эфира. На следующий день отфильтровывают осадок аналитически чистого продукта, выход - 2,5 г (81% ), т. пл. 159-160^оС. ИК-спектр (в вазелиновом масле), -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024165/957.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">, см^-1: 1496, 1576, 1597 (С=С) аром., 1615 (N -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-17t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-18t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> N) , 1661(С=О), 2400-2800 ( -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-19t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -Н). УФ-спектр (в МеОН), -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/955.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">_макс., нм (lg -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024095/949.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> ):263,5 (4,20). Спектр ПМР (CDCl₃), -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024015/948.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">, м. д. (J, Гц): 0,82 т (3Н, -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-20t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">СН₂, 5); 1,13 ш.с. (12Н, (СН₂)₆); 1,47 д (3Н, -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-21t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">СН, 6); 1,93 кв (2Н, СН₂С(О),7) 3,33-3,97 м (2Н, СН₂СН); 4,58-5,23 м (1Н, СН), 6,77 ш. с. (10Н, 2Рh); 7,25 ш.с. (5Н, Ph); 12,13 ш.с. (2Н, 2 -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-22t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">H). Найдено,%: С 73,98; Н 8,07; Сl 7,28; N 8,44.

С₃₁Н₄₀ClN₃O.

Вычислено, %: С 73,59; Н 7,91; Сl 7,02; N 8,31.

П р и м е р 2. N-ундеканоил-N,N¹,N²-трифенил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> - аминоизобутириламидиний хлорид (Iб, R=С₁₀Н₂₁) получают аналогично примеру 1 из 2,1 г (0,0063 моль) N¹,N²-дифенил- -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/946.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -N- фениламиноизобутириламидина и 1,3 г (0,0063 моль) ундеканоилхлорида, выход 94%, т.пл. 166-168^o С.

ИК-спектр (в вазелиновом масле), -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024165/957.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">, см^-1: 1497, 1574, 1597 (С=С) аром., 1613 (N -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-23t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-24t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE"> N), 1662 (С=О), 2400-2800 ( -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-25t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">-Н). УФ-спектр (в МеОН), -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024007/955.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">_макс., нм (lg -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024095/949.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">):263,5 (4,19).

Спектр ПМР (CDCl₃) -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024015/948.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">, м.д. ( J, Гц): 0,84 т (3Н, -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-26t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">СН₂, 5); 1,15 ш.с. (16Н, (СН₂)₈); 1,48д (3Н, -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-27t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">СН, 6); 1,92 кв (2Н, СН₂С(О),7); 3,33-3,95 м (2Н, СН₂СН); 4,58-5,23 м (1Н, СН); 6,72 ш.с. (10Н, 2Ph); 7,25 ш.с (5Н, Ph); 12,15 ш.с. (2Н, 2 -аминоизобутириламидиний хлориды, обладающие противовирусной активностью, патент № 2024500" SRC="/images/patents/449/2024500/2024500-28t.gif" ALIGN="ABSMIDDLE">Н).

Найдено, %: С 74,23; Н 8,47; Cl 7,01; N 8,28.

С₃₃Н₄₄ClN₃O.

Вычислено, %: С 74,23; Н 8,25; Cl 6,65; N 7,87.

Заявляемые соединения (I) представляют собой мелкокристаллические вещества, малорастворимые в воде, хорошо растворимые в спиртах, диполярных апротонных растворителях, хлороформе.

Изучение антивирусной активности

Исследование антивирусных свойств соединений проводили по способности подавлять репродукцию вируса гриппа А/Ленинград 34/72 (Н3N2). Эксперименты проводили на переживающих фрагментах хорионаллантоисной оболочки куриного эмбриона (ХАО КЭ).

Для определения токсичности соединений для клеток ХАО навески последовательно разводили с коэффициентом -2 в растворе Хенкса, разливали по 0,5 мл в лунки пластиковой панели и вносили фрагменты ХАО. Состояние клеток определяли через 48 ч инкубации при 37^оС. Минимальной токсической дозой (МТД) считали минимальную концентрацию, вызывающую гибель клеток в трех и более лунках.

В работе использовали аллантоисный вирус, прошедший пассаж на 10-11-суточных куриных эмбрионах, титр вируса на куриных эмбрионах составил 10^-8, на клетках ХАО -10^-6, титр гемаглютинина вируса равнялся 1:2048.

Клетки заражали 1, 10 и 100 дозами вируса. Затем вносили различные разведения соединений, меньшие МТД, для клеток ХАО. Через 48 ч инкубации при 37^оС определяли наличие жизнеспособных клеток и титр вируса в культуральной среде (раствор Хенкса) реакцией гемаглютинации с 1%-ной взвесью эритроцитов кур.

Проведенные исследования показали, что соединение Iа обладало минимальной токсичностью для клеток ХАО, равной 125 мкг/мл. В концентрации 0,487 мкг/мл задерживало репродукцию 1 дозы вируса гриппа, при заражении 100 дозами этот эффект наблюдался при внесении в среду 0,975 мкг/мл. Химиотерапевтический индекс соединения равнялся 256 (таблица). МТД для клеток ХАО соединения Iб равнялась 500 мкг/мл. Соединение задерживало размножение вируса при заражении клеток 100 дозами в концентрации 3,9 мкг/мл, при заражении 1 дозой в концентрации 0,975 мкг/мл (таблица). В качестве эталонного объекта использовали препарат ремантадин, используемый в терапии и профилактике гриппозной инфекции. МТД ремантадина для клеток ХАО равнялась 250 мкг/мл. Содержание Iб было в 2 раза менее токсичным для клеток и проявляло выраженный эффект, в 2 раза превышающий активность базового препарата. Антивирусная активность соединения Iа была аналогичной активности ремантадина (таблица).