эфиры эстрамастина или их фармацевтически приемлемые соли и способ их получения

Формула изобретения

1. Эфиры эстрамастина общей формулы



где R₁ водород, низший алкил С₁ С₄;

R₂ водород, низший алкил С₁ С₄;

R₃ водород, низший алкил С₁ С₄, или R₂ и R₃ вместе CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-;

n 0,1 или 2,

или их фармацевтически приемлемые соли.

2. Способ получения эфиров эстрамастина общей формулы I



где R₁ водород, низший алкил С₁ С₄;

R₂ водород, низший алкил С₁ С₄;

R₃ водород, низший алкил С₁ С₄ или R₂ и R₃ вместе CH₂-CH₂-CH₂-CH₂-;

n 0,1 или 2,

или их фармацевтически приемлемых солей, отличающийся тем, что осуществляют этерификацию эстрамастина аминокислотой общей формулы

HOOC CHR₁ (CH₂)_n NR₂R₅,

где R₅=R₃ или не обязательно защитная группа,

с получением продукта общей формулы II



где R₄- группа NR₂R₅,

из которого затем удаляют защитную группу с получением соединений общей формулы I.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что получают соединения, где n=0.

4. Способ по пп. 1 и 2, отличающийся тем, что получают соединения R₁ водород.

5. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что получают соединения, где R₂ и R₃, одинаковые или различные, принадлежат к группе, состоящей из водорода, метильного или этильного радикала.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к новым эфирам эстрамастина и способу их получения, а именно эфиров общей формулы I:



(I) где R¹ водорода атом, низший алкил С₁-С₄;

R² атом водорода, низший алкил С₁-С₄;

R³ атом водорода, низший алкил С₁-С₄; или R² и R³ вместе -CН₂-CH₂-CН₂-CН₂-,

n 0,1 или 2

или их фармацевтически приемлемых солей, обладающих противоопухолевыми свойствами.

Цель изобретения получение новых производных экстрамастина, образующих водорастворимые кальциевые соли и пригодных для орального применения при лечении рака предстательной железы.

Синтез ведут этерификацией эстрамастина аминокислотой общей формулы:

HOOC--(CH₂)_n-NR²R⁵ где R⁵=R³ или защитная группа,

с получением продукта общей формулы II:



(II) где R⁴ группа -NR²R⁵

c последующим удалением защитной группы с получением целевых продуктов I.

Эстрамастин, эстра-1,3,5(10)-триен-3,17в-диол-3-N, N-бис(2- хлорэтил)карбамат и его различные эфиры хорошо известны в качестве противораковых агентов. Один из них, 17-эстрамастиндигидрофосфат (ЭМФ), был изучен более широко, и его водный раствор ("эстрацит") теперь широко применяется при лечении рака предстательной железы. Проблема орального применения ЭМФ состоит во взаимодействии с ионами кальция, содержащимися в пище и питье. В присутствии ионов кальция ЭМФ дает осадок и образует нерастворимый комплекс который не адсорбируется пищеварительным трактом и таким образом имеет очень маленькую активность в организме. Было сделано несколько попыток решить эту проблему, как относительно фармацевтического получения ЭМФ солей, так и самого экстрамастина. Однако оказалось невозможным найти такую модификацию ЭМФ для орального применения, которая бы обеспечила в плазме такой же уровень важнейшего метаболита ЭМФ экстрамастина, и соответствующего 17-кетопроизводного-экстрамастина, какой дает водорастворимая натриевая соль ЭМФ в отсутствии ионов кальция.

Эфиры аминокислот для фармацевтических целей описаны. Однако эти эфиры спиртов, хотя и содержащие стероидный скелет, имеют структуру, весьма отличающуюся от структуры эстрамастина.

П р и м е р 1. 17-эстрамастин хлорацетат.

Эстрамастин (4,4 г 0,01 моль) растворяют в толуоле (100 мл). Хлорацетилхлорид (1,7 г, 0,015 моль) прибавляют в раствор и нагревают при 70^oC 1,5 ч. Растворитель затем удаляют в вакуумном испарителе при 30^oC. Остаток обрабатывают этанолом и продукт кристаллизуется. Продукт фильтруют и промывают несколькими миллилитрами этанола. Хлорацетат после сушки при комнатной температуре плавится при 95^oC. Выход 4,9 г.

П р и м е р 2. 17-эстрамастин бромацетат.

Данное соединение получено методом сходным с описанным в примере 1 из эстрамастина и бромацетилбромида, т.пл. 109^oС.

П р и м е р 3. 17-эстрамастин N-метиламиноацетат гидрохлорид.

17-эстрамастин хлорацетат (5,2 г 0,01 моль) растворяют в ацетонитриле (40 мл) при комнатной температуре. Метиламин (3,1 г 0,1 моль) растворяют в холодном ацетонитриле и прибавляют при 0^oC. После 3 ч избыток амина и растворитель удаляют в роторном испарителе. Остаток растворяют в хлористом метилене (50 мл) и трижды промывают 50 мл воды, устанавливая каждый раз рН раствором бикарбоната натрия 7-9. Органическую фазу сушат безводным сульфатом натрия и удаляют растворитель. Остаток растворяют в ацетонитриле (40 мл) и осаждают N-метиламиноацетат путем добавления раствора хлороводорода в эфире (0,012 моль). Образуется объемный осадок, который после перемешивания в течение нескольких минут распадается на прекрасные кристаллы. Продукт отфильтровывают и промывают смесью этилацетата и ацетонитрила 1:1. Затем гидрохлорид сушат под вакуумом при комнатной температуре 24 ч. Выход 3,7 г. Т.пл. 226^oC c разл. ЯМР-спектроскопия показывает, что продукт имеет структуру эстрамастин 17-N-метилацетат.

П р и м е р 4. 17-эстрамастин N-метилацетат метансульфонат и этаносульфонат.

Используя метод, описанный в примере 3, за исключением применения растворов метансульфоновой и этансульфоновой кислоты в эфире вместо хлороводорода в эфире были получены метансульфонат и этансульфонат, т.пл. 212^оС и 170^оС соответственно.

П р и м е р 5. 17-эстрамастин N-R³-N-R³-аминоацетат гидрохлорид.

Эфиры имеющие заместители R² и R³ описаны в табл.1. Получены из 17-эстрамастина бромацетата с использованием метода примера 3 с небольшими изменениями.

П р и м е р 6. 17-эстрамастин аминоацетат гидрохлорид и метансульфонат.

Эстрамастин (4,4 г 0,01 моль) и N-трет.-бутокси карбонилглицин (1,75 г, 0,01 моль) растворяют в хлористом метилене (35 мл). Прибавляют дициклогексилкарбодиимид (2,1 г, 0,01 моль) и 4-диметиламинопиридин (0,1 г, 0,001 моль) и перемешивают реакционную смесь 3 ч. Образующую дициклогексилмочевину удаляют фильтрованием и упаривают растворитель. Маслообразный осадок растворяют в ацетонитриле (10 мл) и прибавляют ацетонитрил (40 мл), содержащий хлористый водород (0,03 моль) и перемешивают смесь 16 ч. Образующийся осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из смеси эфир-метанол. Выход 3,2 г 17-эстрамастин аминоацетата гидрохлорида (т.пл. 220^oC, соединение 6.1), как подтверждено ЯМР-спектроскопией. Таким же методом, за исключением использования метансульфоновой кислоты вместо хлороводорода и отсутствием кристаллизации получен 17-эстрамастин аминоацетат метансульфат (соединение 6.2), т.пл. 206^оС.

П р и м е р 7. 17-эстрамастин амино-пропионаты гидрохлориды.

Следующие соли были получены, используя метод, описанный в примере 6

17-эстрамастин 2-1-аминопропионат гидрохлорид, т.пл. 248^oC из N-трет.-бутоксикарбонил-L-аланина.

17-эстрамастин 3-аминопропионат гидрохлорид, т.пл. 223^оС из N-трет.-бутоксикарбонил- -аланина.

П р и м е р 8. 17-эстрамастин аминоацетат метансульфонат.

К эстрамастину (4,4 г, 0,01 моль), растворенному в хлористом метилене (30 мл) прибавляют N-бензилоксикарбонилглицина (2,2 г, 0,01 моль) дициклогексилкарбодиимид (0,12 г 0,001 моль). Смесь перемешивают при комнатной температуре 2 ч. Образующуюся дициклогексил мочевину отфильтровывают, фильтрат промывают соляной кислотой (2М; 10 мл), водой (10 мл), раствором карбоната натрия (1М; 25 мл) и опять водой (25 мл) и сушат сульфатом натрия. Растворитель упаривают в роторном испарителе. Оставшееся масло растворяют в этаноле (125 мл). Прибавляют палладий на угле (1 г, содержание палладия 5%) и обрабатывают смесь водородом при комнатной температуре и атмосферном давлении. Когда реакция прекращается, смесь фильтруют и растворитель упаривают. Остаток растворяют в ацетонитриле (75 мл). Добавляют метансульфоновую кислоту (1 г, 0,01 моль). После 18 ч перемешивания остаток отфильтровывают, промывают ацетонитрилом и сушат при комнатной температуре. Выход 17-эстрамастин аминоацетат метансульфоната 3,7, т.пл. 204^оС.

П р и м е р 9. 17-эстрамастин 4-(N,N-диметиламино) бутират гидрохлорид.

К эстрамастину (4,4 г 0,01 моль) в хлористом метилене (50 мл) прибавляют 4-диметиламинобутирилхлорид гидрохлорид (1,3 г, 0,01 моль). Раствор кипятят 2 ч. Упаривают растворитель и полученное масло кристаллизуют. Продукт обрабатывают активированным углем в этанольном растворе и перекристаллизовывают из смеси этанол-эфир. Выход 6,5 г. Т.пл. 205^оС. Как подтверждено ЯМР-спектроскопией продукт является 17-эстрамастин 4-(N, N-диметиламино)бутиратом гидрохлоридом.

П р и м е р 10. Взаимодействие с ионами кальция.

Раствор А: 0,3 М диэтансульфонат кальция. Карбонат кальция (1,38 г 15 ммоль) растворяют при добавлении 1 н. раствора этансульфокислоты до получения постоянного рН 5,3. Раствор разбавляют водой до 50 мл.

Раствор В: 0,03 М диэтансульфонат кальция. Одну часть раствора А разбавляют 9 ч. воды.

Раствор С:0,05 М ацетатный буфер с рН 4,5. Ледяную уксусную кислоту (3,0 г 0,05 моль) растворяют в 800 мл воды, титруют 1 М раствором гидроксида натрия до рН 4,5 и разбавляют до 1 л. Испытываемое соединение растворяют 50 мл раствора С. Чистый раствор образуется через несколько минут. Спустя 5 мин вводят эквимолярное количество ионов кальция прибавлением раствора А или В. За смесью наблюдают 3 ч (см.табл.3).

Результаты показывают, что новые соединения в присутствии ионов кальция не дают какого бы то ни было осадка в концентрации в 10 раз большей, чем концентрация эстрамастин фосфата динатриевой соли, необходимой для немедленного образования нерастворимой кальциевой соли экстрамастин фосфата.

П р и м е р 11. Сравнение эстрамастинфосфата и эфиров эстрамастина в аспекте оральной биодоступности эстрамастина на собаках.

Различные рецептуры орально вводились группе из четырех гончих собак. Доза была эквивалентна 140 мг эстрамастин фосфата. Животных не кормили до принятия дозы и давали им 50 мл 0,01 М соляной кислоты после принятия. Образцы крови анализировали на эстрамастин при помощи газовой хроматографии.

Были использованы следующие рецептуры:

1. Водный раствор динатриевой соли фосфата эстрамастина.

2. Водный раствор соединения 6.2.

3. Водный раствор соединения N 4.2.

4. Водный раствор соединения 7.2.

Табл.4 показывает области под кривыми изменения концентрации экстрамастина в плазме крови собак во время. Средние значения составляли 5462, 118 60, 83 62 и 174+83 нг/млч для эстрамастин фосфата, соединений 6.2, 4.2 и 7.3 соответственно.

Использовали несколько доз. Полученные значения экстраполировали до дозы эквивалентной дозе других соединений.

П р и м е р 12. Рецептуры, простые таблетки. I:Cоединение 6.2 мг 160 Крахмал, мг 15 Поливидон, мг 8 Этанол III:Крахмал, мг 15 Стеарат магния, мг 2

I смешивают и гранулируют с раствором II. После сушки и просеивании через сито 1 мм прибавляют III. Смесь прессуют в таблетки массой 200 мг.