антрациклин гликозиды или их фармацевтически приемлемые соли, обладающие противоопухолевыми свойствами, и способ их получения

Формула изобретения

1. Антрациклин гликозиды общей формулы



где Z водород;

Х водород или гидроксигруппа;

R₁ водород, фтор, гидрокси-или аминогруппа;

R₂ и R₃ оба гидроксигруппа или один из них водород или аминогруппа, а другой гидроксигруппа,

R₄ и R₅ один водород, а другой гидроксигруппа

или их фармацевтически приемлемые соли при условии, что когда R₂ и R₃ оба гидроксигруппы, то R₁ фтор или аминогруппа, обладающие противоопухолевыми свойствами.

2. Способ получения антрациклин гликозидов общей формулы I



где Z водород;

Х водород или гидроксигруппа;

R₁ водород, фтор, гидрокси-или аминогруппа;

R₂ и R₃ оба гидроксигруппа или один из них водород или аминогруппа, а другой гидроксигруппа,

R₄ и R₅ один водород, а другой гидроксигруппа,

или их фармацевтически приемлемых солей при условии, что когда R₂ и R₃ оба гидроксигруппа, то R₁ фтор или аминогруппа, отличающийся тем, что антрациклин гликозид общей формулы II



где R₁ R₅ и Х имеют указанные значения,

или его соль, растворенную в безводном полярном растворителе, подвергают взаимодействию с бис(2-йодэтиловым) эфиром, затем проводят экстрацию продукта формулы I метиленхлоридом, очистку с помощью хроматографии и при необходимости с последующим переводом целевого продукта в его фармацевтически приемлемую соль.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к антрациклин-гликозидам, к способам их получения.

Изобретение предлагает антрациклин-гликозиды, имеющие общую формулу I

где Z водород, Х водород или гидрокси, R₁ водород, фтор, гидрокси или амино; R₂ и R₃ оба гидрокси или один из R₂ и R₃ водород или амино, а другой гидрокси при условии, что, когда R₂ и R₃ оба представляют собой гидрокси, R₁ представляет собой фтор или амино, и R₄ и R₅ оба представляют собой водород или один из R₄ и R₅ водород, а другой гидрокси и их фармацевтически приемлемые соли.

Предпочтительными фармацевтически приемлемыми кислыми аддитивными солями являются хлористоводородные соли. Предпочтительные антрациклин-гликозиды общей формулы I включают:

а) 4-метил-6-дезокси-3"-деамино-3"-(4-морфолинин)даунорубицин

(Х=ОН, R₁=R₂=R₃=OH, R₃=R₅=H, Z=H).

b) 4-деметокси-4-амино-3"-деамино-3"-(4-морфолинин)даунорубицин

(Х=Н, R₁=NH₂, R₂=R₃=R₄=OH, R₅=H, Z=H)

c) 4-деметокси-4-амино-3"-деамино-3"-(4-морфолинил)-4"-эпидаунорубицин (Х=Н, R₁=NH₂, R₂=R₃=R₅=OH, R₄=H, Z=H)

d) 4-деметокси-4-фторо-3"-диамино-3"-(4-морфолинил)даунорубицин (Х= H, R₁=F, R₂=R₃=R₄=OH, R₅=H, Z=H)

e) 4-деметокси-4-фторо-3"-деамино-3"-(4-морфолинил)-4"-эпидаунорубицин (Х=Н, R₁=F, R₂=R₃=R₅=OH, R₄=H, Z=H)

f) 4-деметокси-11-дезокси-11-амино-3"-деамино-3"" -(4-морфолинил)-даунорубицин (X=H, R₁=R₅=H, R₂=NH₂, R₃=R₄=OH, Z=H)

q) 4-деметокси-6-дезокси-6-амино-3"- деамино-3"-(4-морфолинил)даунорубицин (X=H, R₁=R₅=H, R₃=NH₂, R₂=R₄=OH, Z=H)

h) 4-деметокси-6-дезокси-6-амино-3"- деамино-3"-(4-морфолинил)-доксорубицин (X=OH, R₁=R₅=H, R₃=NH₂, R₂=R₄=OH, Z=H)

Новые антибиотики на основе антрациклин-гликозида в соответствии с изобретением, получают путем образования морфолинилового или метоксизамещенного морфолинилового кольца в положении С-3" на сахарной составляющей противоопухолевых антрациклин-гликозидов общей формулы II

где R₁, R₂, R₃, R₄, R₅ и Х имеют приведенные значения, или из солей, например, фармацевтически приемлемой кислой аддитивной соли, такой, как хлористоводородная соль. Антрациклин-гликозиды формулы I, или фармацевтически приемлемую соль, получают путем взаимодействия антрациклин-гликозида формулы II или его соли, например, фармацевтически приемлемой кислой аддитивной соли такой, как хлористоводородная соль, pаствоpенной в безводном полярном растворителе, с бис(2-иодоэтил)эфиром, экстракцией продукта формулы I метиленхлоридом, очисткой хроматографическим методом и, при желании, превращением антрациклин-гликозида формулы I в его фармацевтически приемлемую соль.

Более конкретно реакцию для получения производных 3"-(4-морфолино)антрациклина формулы I обычно осуществляют с использованием избыточного количества бис(2-иодоэтил)эфира в безводном полярном органическом растворителе, таком, как диметилформамид. Реакцию обычно осуществляют при комнатной температуре. Ее можно выполнить за один день. Искомый продукт выделяют из реакционной смеси, например, при помощи экстракции метиленхлоридом и очищают хроматографией, например, колоночной. Его можно трансформировать в хлористоводородную соль, например, путем обработки метанольным раствором хлористого водорода.

В одном из вариантов изобретения антрациклин-гликозид формулы II или его соль растворяют в безводном полярном растворителе и подвергают взаимодействию при комнатной температуре и в течение 24 ч избыточным количеством бис(2-иодоэтил)эфира в присутствии триэтиламина, pH реакционной смеси, ранее разбавленной водой, доводят до 7,5 с использованием водного раствора кислого углекислого натрия, реакционную смесь экстрагируют метиленхлоридом, органический растворитель удаляют при пониженном давлении и, после очистки сырого продукта на колонке силикагеля с использованием смеси метиленхлорида и метанола (98: 2 об.) в качестве элюирующего агента продукт выделяют в виде хлористоводородной соли путем прибавления метанольного раствора безводного хлористого водорода.

Исходными веществами для получения новых 3"-(4-морфолино)- или 3"-(2-метокси-4-морфолино) гликозидов настоящего изобретения являются:

1) 4-диметил-6-дезокси-доксорубицин (С1: X= OH, R₁=R₂=R₄=OH, R₃=R₅=H) (заявка на патент США 4600537)

2) 4-диметокси-4-амино-даунорубицин (С2: X=H, R₁=NH₂, R₅=H, R₂=R₃=R₅=OH) и 4-деметокси-4-амино-4"-эпи-даунорубицин (С7: X=H, R₁=NH₂ R₄=H, R₂=R₃=R₅= OH) (заявка на Европатент N 0288268)

3) 4-деметокси-4-фторо-даунорубицин (С4: X=H, R₁=F, R₄=H, R₂=R₃=R₅=OH) и 4-деметокси-4-фторо-4"-эпи-даунорубицин (С5: X=H, R₁=F, R₄=H, R₂=R₃=R₅=OH) (заявка на патент США N 4697005).

4) 4-деметокси-11-дезокси-11-амино-даунорубицин (С6: X=H, R₁=R₅=H, R₂= NH₂, R₃= R₄= OH) и 4-деметокси-11-дезокси-11-амино-доксорубицин (С13: X=OH, R₁=R₅=H, R₂=NH₂, R₃=R₄=OH) (заявка на патент США N 4348388), а также

5) 4-деметокси-6-дезокси-6-амино-даунорубицин (С8: X=H, R₁=R₅=H, R=NH- R₂= R₄= OH) и 4-деметокси-6-дезокси-6-амино-доксорубицин (C9: X=OH, R₁=R₅=H, R₃= NH₂, R₂=R₄=OH) (заявка на Европатент N 0254484) и их соли, в частности, хлористоводородные.

Изобретение предлагает фармацевтические композиции, включающие антрациклин-гликозид формулы I или его фармацевтически приемлемые соли вместе с фармацевтически приемлемым разбавителем или носителем. Могут быть использованы традиционные носители и разбавители. Способы приготовления и введение композиции являются традиционными.

Соединения по изобретению используются при лечении человека или животного. Они также пригодны в качестве противоопухолевых средств. Пациенту вводят терапевтически эффективное количество соединения. Можно вводить количество, достаточное для ингибирования роста опухоли. Опухолью может быть аденокарцинома Сolon или лейкемия Gross.

Биологическую активность соединений в соответствии с настоящим изобретением испытывали in vitro против клеток Lovo (аденокарциномы человеческой толстой кишки) и Lovo/DX в сравнении с доксорубицином. Результаты приведены в табл. 1 (активность in vitro). Соединения настоящего изобретения также испытывали in vitro против лейкемии мышей Р388 и Р388/DX в сравнении с доксорубицином. Результаты приведены в табл.2. Все соединения испытывались в виде их гидрохлоридов.

Следующие примеры иллюстрируют изобретение. Измерения с помощью тонкослойной хроматографии (ТСХ) осуществляли на пластинках Kieselgel (Merck F₂₅₄) с использованием метиленхлорид/этанол (95/5 по объему) в качестве элюента. "Merck" является товарным знаком.

П р и м е р 1. 4-Диметил-5-дезокси-3"-деамино-3"-(4-морфолинил) доксорубицин (а).

К раствору 0,15 г (0,27 ммоль) хлоргидрата 4-диметил-6-дезоксидоксорубицина (С1) в 5 мл безводного диметилформамида прибавляют 1 г (3,07 ммоль) бис(2-иодоэтил)эфира и 0,075 мл (0,535 ммоля) триэтиламина. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение одного дня, затем смесь разбавляют 100 мл воды и pH доводят до 7,5 водным раствором кислого углекислого натрия. Водный слой экстрагируют метиленхлоридом три раза. Органическую фазу сушат в присутствии безводного сульфата натрия, и растворитель удаляют при пониженном давлении. Остаток хроматографируют на колонке силикагеля с использованием метиленхлорид/метанола (98:2 по объему) в качестве системы элюента, получая 70 мг (выход 42%) указанного в заготовке соединения (а), которое выделяют в виде хлористоводородной соли после прибавления метанолового раствора безводного хлороводорода. Температура плавления 161-162^оС (разложение): R_f:0,19; ФД-МС: m/z 583 (M₊.);

¹Н-ЯМР (200 МГц, ДМСО) inter alia : 12,94 (c, 1H, 11-ОН), 12,53 (с, 1Н, 4-ОН), 7,9-7,7 (м, 3Н, 6-Н, 1-Н, 2-Н), 5,77 (д, J=5,7 Гц, 1Н, 4"-OH), 5,42 (д, J= 5,9, 7,4 Гц, 1Н, f=H), 4,54 (с, 2Н, СН₂ОН), 4,0-2,7 (м, 13Н, 5^о-Н, 4"-Н, 10-СН₂, СН₂ОСН₂, СН₂NCH₂), 1,19 (д, J=6,4 Гц, 3Н, 5"-CH₃).

П р и м е р 2. 4-Диметокси-4-амино-3"-деамино-3""-(4-морфолинил)даунорубицин (b).

В соответствии с методикой, описанной в примере 1, указанное в заголовке соединение (b) получают, начиная с 4-деметокси-4-амино-даунорубицина (С2). Выход 80% температура плавления 167-168^оС (разложение); R_f:0,33; ФД-МС: m/Z= 582 (M₊).

¹Н-ЯМР (200 МГц, CDCl₃) inter alia 13,73 (с, 1Н, 6-ОН), 13,40 (с, 1Н, 11-ОН), 7,67 (д, J=6,4 Гц, 1Н, 1-Н), 7,49 (дд, J=6,4, 8,3 Гц, 1Н, 2-Н), 6,97 (д, J= 8,3 Гц, 3-Н), 6,81 (широкий, 2Н, NH₂), 5,56 (д, J=3,2 Гц, 1Н, 1"-H), 5,26 (дд, J= 2,2, 3,8 Гц, 1Н, 7-Н), 3,68 (м, 4Н, СН₂ОСН₂), 2,6-2,3 (м, 6Н, СН₂NCH₂) 2,42 (с, 3Н, ОСН₃), 1,38 (д, J=6,6 Гц, 3Н, 5"-СН₃).

П р и м е р 3. 4-Деметокси-фторо-3"-деамино-3"-(4-морфолинил)-4"- эпидаунорубицин (е).

В соответствии с методикой, описанной в примере 1, указанное в заголовке соединение (е) получают, начиная с 4-деметокси-4-фторо-4"-эпи-даунорубицина (С5). Выход 62,5% температура плавления 161-162^оС (разложение); R_f:0,3; ФД-МС m/z 586 (MH₊), 585 (М+.); ¹Н-ЯМР (200 МГц. ДМСО) inter alia : 13,61 (с, 1Н, 6-ОН), 13,19 (с, 1Н, 11-ОН), 8,17 (дд, J=1,2, 7,8 Гц, 1Н-1-Н), 7,99 (дд, J= 4,6, 7,8, 8,2 Гц, 1Н, 2-Н), 7,77 (ддд, 1,2 8,2, 11,7 Гц, 1Н, 3-Н), 5,37 (д, J= 3,2 Гц, 1Н, 1"=H), 5,02 (м, 1Н, 7-Н), 3,88 (м, 4Н, СН₂ОСН₂), 3,8-3,2 (м, 6Н, 4"-Н, 3"-Н, СН₂NCH₂) 2,26 (с, 3Н, СОСН₃), 1,25 (д, J=6,3 Гц, 5"-CH₃).

П р и м е р 4. 4-Деметокси-6-дезокси-6-амино-3"-деамино-3"-(4-морфолино) -доксорубицин (r).

В соответствии с методикой, описанной в примере 1, указанное в заголовке соединение (r) получают, начиная с 4-деметокси-6-дезокси-6-амино-доксорубицина (С9). Выход 45% температура плавления 156-158^оС (разложение). ФД-МС: m/z 584 (M₊.). ¹Н-ЯМР (200 МГц, CDCl₃) inter alia : 1,11 (д, J=6,6 Гц, 3Н, 5"-СН₃), 2,3-2,6 (м, 8Н, СН₂NCH₂), 5,02 (дд, J=3,9, 5,3 Гц, 1Н, 7-Н), 5,4 (д, J= 2,9 Гц, 1Н, 1"-H), 7,7-8,0 (м, 2Н, 2-Н), 8,06 (широкий, 2Н, NH₂), 8,2-8,3 (м, 2Н, 1-Н, 4-Н), 14,2 (1Н, 11-ОН).