иммунодепрессивное средство

Формула изобретения

Применение гипохлорита натрия в качестве иммунодепрессивного средства.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии.

Цель изобретения уменьшение токсического воздействия лечения при наличии дополнительного антибактериального эффекта.

Способ осуществляется следующим образом: вводят гипохлорит натрия 0,1-0,2% раствор 0,5 мл.

Иммунодепрессивные свойства подтверждаются следующими исследованиями.

За 24 ч до введения антигена (эритроциты барана) однократно или пятикратно животным внутрибрюшинно вводят раствор гипохлорита натрия, а затем исследуют уровень антителообразующих клеток (JgM-АОК) и гиперчувствительность замедленного типа (ГЗТ).

П р и м е р 1. В опыте использовали мышей-самцов-гибридов F₁(СВАхС57ВL) массой 20-22 г, которым однократно и пятикратно вводят 0,2%-ный раствор гипохлорита натрия в объеме 0,5 мл внутрибрюшинно. Через 24 ч после последней инъекции гипохлорита натрия мышей иммунизируют внутривенно антигеном (эритроциты барана). На 4 сут после введения антигена исследует уровень JgM-АОК селезенки. В контроле использовали 0,89%-ный раствор хлористого натрия. Результаты исследований представлены в табл. 1.

Как видно из табл. 1, однократное и пятикратное внутрибрюшинное введение 0,2% -ного раствора гипохлорита натрия вызывает в одинаковой степени достоверное (р < 0,01) подавление АОК селезенки мышей по сравнению с контролем. Число JgМ-АОК на 10⁶ клеток, как в одном, так и в другом случае снижается приблизительно в 3 раза.

П р и м е р 2. Подавление гиперчувствительности замедленного типа. Внутрибрюшинно мышам-самцам-гибридам F₁ (СВАхС57ВL) массой 20-22 г однократно и пятикратно вводят 0,2%-ный раствор гипохлорита натрия в объеме 0,5 мл.

Через 24 ч после последней инъекции гипохлорита натрия мышей иммунизируют внутрибрюшинным введением антигена (эритроциты барана). На 4 сут после введения антигена исследуют гиперчувствительность замедленного типа. Результаты исследований представлены в табл. 2.

Результаты опытов показали подавление гиперчувствительности замедленного типа как при однократном, так и при пятикратном введении гипохлорита натрия приблизительно в 2,5 раза.

П р и м е р 3. Действие различных концентраций NaClO на иммунный ответ мышей. Мышам-самцам-гибридам F₁(СВАхС57ВL) массой 23-25 г, однократно, внутрибрюшинно вводят по 0,5 мл 0,05% 0,1% 0,2% и 0,3-ный растворы NaClO. Контрольной группе животных вводят по 0,5 мл 0,89-ного раствора NaCl. Через 24 ч после инъекции NaClO мышей иммунизируют внутривенным введением антигена (эритроциты барана). На 4 сут после введения антигена исследуют уровень JgM-АОК селезенки мышей. Результаты исследований представлены в табл. 3.

Как видно из табл. 3, уровень JgM-АОК селезенки мышей под влиянием 0,1% 0,2% и 0,3%-ных растворов NaClO достоверно снижался (р < 0,01) по сравнению с контрольными данными. Достоверных различий в иммунодепрессивном действии между 0,1% 0,2% и 0,3%-ными растворами NaClO не выявлено (р > 0,05). 0,05% -ный раствор NaClO не оказывал иммунодепрессивного эффекта у подопытных животных.

П р и м е р 5. Сравнительное изучение LD-50 гипохоррита натрия и циклофосфамида. На 54 беспородных мышах обоего пола, массой 21-23 г (по 6 мышей в серии), проведено сравнительное изучение циклофосфамида и 0,3%-ного раствора NaClO (расчет по активному хлору).

Циклофосфамид вводили внутрибрюшинно, однократно по 0,5 мл в дозах 200, 500, 1000 и 1500 мг/кг массы животного, разведенного на физиологическом растворе.

Гипохлорит натрия вводили внутрибрюшинно, однократно по 1,0 мл в дозах 375, 750, 1500 и 3000 мг/кг массы животного. Контрольной группе животных внутрибpюшинно, однократно вводили 0,5 мл 0,89%-ного раствора хлористого натрия. Результаты представлены в табл. 4.

Острую токсичность исследуемых средств изучали по формуле LD-50 LD-100 -E(Zхd)/m, где m число животных в каждой группе; LD-100 100%-ная смертность животных; Z среднее арифметическое число павших животных; d разница между смежными дозами.

В результате проведенных исследований установлено, что LD-50 циклофосфамида при внутрибрюшинном, однократном введении равно 934 мг/кг массы мышей, в то время как для гипохорита натрия LD-50 определить не удалось в связи с отсутствием гибели животных.

Таким образом, 0,1-0,2%-ный раствор гипохлорита натрия является высокоэффективным неспецифическим иммунодепрессантом.

Гипохлорит натрия, предлагаемый нами в качестве иммунодепрессанта в концентрации 0,1-0,2%-ного раствора, не обладает "острой" токсичностью.

Гипохлорит натрия в предлагаемых концентрациях является мощным антибактериальным средством, а также средством, способным повышать чувствительность антибиотикорезистентной микрофлоры к антибиотикам, что дает ему значительные преимущества перед всеми известными в настоящее время иммунодепрессантами, которые лишены данных свойств.

П р и м е р 6. Влияние гипохлорита натрия и циклофосфамида на способность лимфоцитов больных с дерматомиозитом к спонтанному розеткообразованию (Е-РОК) с эритроцитами барана in vitro.

Для постановки реакции берут 0,1 мл суспензии лимфоцитов (2х10⁶ кл/мл) и добавляют 0,1 мл раствора гипохлорита натрия, содержащего 0,012 мг на 1 мл в одном случае, а в другом с циклофосфамидом 0,005 мг/мл. Контролем служат клетки, которые инкубируют в тех же условиях, что без препарата. Инкубируют 1 ч при 37^оС, центрифугируют, недостаточную жидкость сливают, клетки ресуспендируют в среде 199 на растворе Хенкса и ставят реакцию известным способом. Полученные результаты приведены в табл. 5.

Гипохлорит натрия вызывает выраженное подавление процентного седержания Е-розеткообразующих клеток, что характеризуется непосредственным действием на Т-лимфоциты, угнетая их способность к спонтанному розеткообразованию, в модельных и клинико-лабораторных исследованиях не уступает по иммунодепрессивному эффекту циклофосфамиду, в предлагаемых концентрациях не токсичен и обладает выраженными антибактериальными свойствами. Применение предлагаемого средства в экспериментальной и клинической иммунологии позволит получать стойкий иммунодепрессивный эффект.