способ получения средства, повышающего резистентность организма

Формула изобретения

Способ получения средства, повышающего резистентность организма, включающий обработку сырья острым паром и отделение водного экстракта, отличающийся тем, что в качестве растительного сырья используют древесную зелень пихты сибирской (Abics sibirica), обработку паром проводят в течение 1,5-2 ч при температуре пара 100-110^oC и давлении 0,2-0,3 атм, образовавшуюся парогазовую смесь отводят и отделяют водный экстракт от масла.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к получению лекарственных препаратов из растительного сырья. Препарат, полученный предлагаемым способом, может быть использован в медицине для повышения устойчивости организма к простудным заболеваниям, для стимуляции репаративных процессов при оперативных вмешательствах. Он стимулирует деятельность системы кроветворения и иммунной системы, благотворно влияет на центральную нервную систему, снижает усталость. Эффективен при заболеваниях верхних дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта, лучевой болезни. Может использоваться в животноводстве в качестве биостимулятора и для санации организма.

В медицине известно применение препаратов, приготовленных из растительного сырья, например женьшеня, элеуторококка, которые применяются в качестве биостимуляторов (Дардымов И. В. Женьшень, элеуторококк. М. Наука. 1976). Однако эти препараты применяются в виде спиртовых настоек и экстрактов, что снижает их биологическую активность. В то же время эти растения имеют ограниченную массу в природных условиях, низкую возобновляемость. Интродукция данных препаратов трудоемка и мало распространена. Передозировка же вместо биостимулирующего действия приводит к патологическим изменениям в функциональных системах организма.

Известно средство, обладающее иммуномодулирующей активностью, взятое за прототип и приготовляемое из растительного сырья левзеи, багульника, чистотела. Средство используют в виде водного экстракта. Экстракцию проводят путем обработки сырья водяным паром при температуре 100^oС в течение 20 минут, после фильтрации добавляют пчелиный мед. Смесь электролизуют в течение 20 минут и отбирают щелочную фракцию (авт. св. СССР N 1731225, кл. A 61 K 35/76).

Однако указанные препараты не могут найти широкого применения из-за узкого спектра биологического действия и слабой сырьевой базы.

Задачей, на решение которой направлено предлагаемое изобретение, является получение высокоэффективного средства, повышающего резистентность организма, приготовляемое на основе доступного растительного сырья. Препарат не должен обладать негативными побочными действиями, а способ его получения должен быть достаточно прост.

В изобретении в качестве растительного сырья предлагается использовать древесную зелень хвойных пород, в частности пихтовую лапку пихты сибирской (Abies sibirica). В народной медицине известно применение препаратов из этих пород деревьев при стенокардии, атеросклерозе, бронхиальной астме и т. д. Определяющей чертой этих препаратов является противовоспалительное и бактерицидное действие. Действующей субстанцией их является хвойное масло, получаемое путем перегонки с водяным паром древесной зелени с последующим отделением масла от водного экстракта. При этом последний являлся отходом производства. Было установлено, что если производить отгонку масла при определенных условиях, то водный экстракт приобретает ряд ценнейших лечебных свойств. Он насыщен биологически активными веществами, включает поливитаминные комплексы С, Р, В, К, каратиноиды, полифенольные комплексы, сахара, хлорофиллин, фитонциды и различные микроэлементы. Полученный таким образом экстракт обладает широким спектром терапевтического действия, превосходящим спектр действия масла.

Для получения водного экстракта по предлагаемому способу растительное сырье пропаривают водяным паром в течение 1,5 2 часов при температуре 100 - 110^oС, причем давление поддерживают в пределах 0,2 0,3 атм. Затем при тех же условиях производят отвод парогазовой смеси, ее охлаждение, конденсацию и отделение масла от водного экстракта.

Полученный экстракт подвергают входному контролю, стерилизующей фильтрации и разливают в стерильные флаконы.

Температурные условия являются максимально щадящими, при которых не происходит разрушение витаминных комплексов и других биологически активных веществ.

При повышении температуры свыше 110^oС биологическая активность получаемого экстракта резко снижается из-за разрушения целых групп биологически активных веществ, а при снижении температуры ниже 100^oС биологическая активность также снижается, вероятно из-за неполной экстракции находящихся в хвое биологически активных веществ.

Давление на уровне 0,2 0,3 атм. также обеспечивает оптимальную экстракцию биологически активных веществ. При нарушении соотношения величины этих параметров (температура, давление) качество получаемого экстракта резко снижается (критерием качества является биологическая активность).

В настоящее время предлагаемый способ реализован на предприятиях АО "Ассоциация Дельта" г. Томска. Препарат, получаемый этим способом из древесной зелени пихты сибирской (Abies sibirica), имеет зарегистрированный товарный знак АБИСИБ.

Способ осуществляется следующим образом. Перегоночный чан экстрактор из нержавеющей стали, имеющий уплотнительную крышку и пароотводную трубу, загружают предварительно измельченной пихтовой лапкой и подают в него из парообразователя пар для предварительного подпаривания. Пихтовую лапку периодически добавляют и утрамбовывают. После того, как лапка перестанет садиться под действием пара, загрузка считается законченной. Экстрактор после этого герметично закрывают с помощью крышки с уплотнением.

Процесс получения АБИСИБа ведут при равномерной подаче пара в экстрактор и непрерывной подаче воды в парообразователь. При этом температура пара поддерживается в пределах 100 110^oС, а давление в парообразователе - 0,2 0,3 атм. В таком состоянии пихтовая лапка пропаривается в течение 1,5 - 2 часов.

После пропаривания вентиль пароотводной трубы открывают на 1/4 оборота и парогазовая смесь, образующаяся в чане, поступает в холодильник, где происходит ее охлаждение и конденсация. Затем водно-масляная смесь поступает в единый сборник флорентину, где разделяется на 2 составные части (благодаря разной удельной плотности: масло 0,9, экстракт 1,0). Разноуровневые выводы краны сборника позволяют производить чистое разделение в отдельные емкости масла и водного экстракта.

В течение всего процесса необходимо следить также за температурой выходящего из холодильника конденсата, которая не должна быть выше 25 - 30^oС, т. к. конденсация поступающего пара не будет полной и часть биологически активных веществ не попадает в экстракт.

Процесс считается законченным, когда проба конденсата из холодильника (до флорентины), взятая в бутылку 0,25 л, образует в горлышке слой масла не более 1 мм. Эту пробу берут через каждый час.

Съем масла и АБИСИБа идет наиболее интенсивно в первые 5 часов и заканчивается примерно через 10 часов. После окончания отгонки чан освобождают от пихтовой лапки и других отходов, образовавшихся на дне, тщательно чистят, после чего установка готова к повторной загрузке.

При загрузке 1000 кг пихтовой лапки получают 150 170 кг АБИСИБа и 12 - 14 кг пихтового масла.

В таблице 1 представлена зависимость качества АБИСИБа от технологических условий его получения. Полученные по этим примерам экстракты подвергают исследованиям на биологическую активность по критерию действия на кроветворную систему организма. Исследования проводились на крысах. Контрольная группа животных получала дистиллированную воду, опытная водный экстракт пихтовой лапки АБИСИБ. Результаты исследований приведены в таблице 2.

Как видим из представленных таблиц, экстракт, полученный по примерам 1 и 3, по биологической активности не имеет достоверных отличий по сравнению с данными контрольной группы животных. А экстракт, полученный по примеру 2, стимулирует систему кроветворения, как белый, так и красный кровяной росток.

Водный экстракт пихтовой лапки, полученный предлагаемым способом, представляет собой прозрачную жидкость цвета с пихтовым запахом. Подлинность препарата определяется:

а) по волновому спектру поглощения в области УФ-лучей с максимумом поглощения 196 200 нм, 215 218 нм, 276 279 нм. Препарат разводят водой в соотношении 1 9 и снимают спектр поглощения на спектрофотометре;

б) хлороформный экстракт должен иметь 2 зоны максимального поглощения: при длине волны 270 276 нм и второй, небольшой пик, в зоне 410 420 нм. Экстракт получают из 5 мл препарата трехкратно, небольшими порциями (примерно по 3 мл хлороформа), проводят экстрагирование в делительной воронке. Полученные порции хлороформного экстракта фильтруют через гигроскопическую сухую вату, объединяют и доводят общий объем до 10 или 15 мл. Спектр поглощения снимают на спектрофотометре. Раствор препарата должен быть прозрачным (Государственная фармокопея, том XI, с. 194), рН находится в пределах 4,5 6,0 (ГФ, том XI, с. 113), показатель преломления 1,333 (ГФ, том XI, с. 29), плотность 0,9980 0,0005 (ГФ, том XI, с. 24), содержание сухого остатка 0,012 0,016

Для подготовки к внедрению препарата АБИСИБ в клиническую практику были проведены исследования на острую и хроническую токсичность. Для определения острой токсичности использовано 40 животных. Перорально животным (белым крысам) вводили по 1 мл различных разведений АБИСИБа (1 2, 1 4, 1 8, 1 16). Летального эффекта не наблюдалось. Поэтому крысам вводили нативный препарат от 1 мл до 4 мл одноразово. При этом также летального исхода не наблюдалось. В течение месяца со дня введения препарата никаких изменений в общем клиническом состоянии и поведении животных не произошло. На основании проведенных экспериментов сделано заключение, что препарат не имеет порога острой токсичности.

Возможность проявления побочных явлений при длительном приеме препарата (хроническая токсичность) определяли на 60 животных. Ежедневно в течение 6 месяцев животным вводили перорально по 1 мл АБИСИБа. Контрольным животным вводили такое же количество воды. Ежемесячно из хвостовой вены забирали кровь, взвешивали животных. За 6 месяцев эксперимента привес животных опытной группы был на 12 больше, чем в контрольной группе. Ни одна из крыс опытной группы не погибла, при гибели 4-х крыс в контрольной группе. После 6 месяцев животных забивали и проводили патолого-анатомические и гистологические исследования. Были взяты следующие органы: желудок, поджелудочная железа, тонкий кишечник, печень, селезенка, сердце, надпочечник. Обзорными микроскопическими исследованиями не выявлено каких-либо патологических изменений на уровне клетки, тканей.

Исследования препарата на все виды фармакологического действия (острая и хроническая токсичность, кумулятивное действие, эмбриотоксическое, аллергенное, канцерогенное действие) показали, что данный препарат не обладает этими видами действия, что позволяет провести испытания данного препарата на добровольцах. Испытания проведены более чем на 100 добровольцах. Ежедневно в течение месяца каждый из них принимал по 45 мл препарата (по 1 ст. ложке 3 раза в день, за 15 20 минут до еды, а через каждые 2 недели исследовали кровь и регистрировали общее состояние. Обобщение материалов показало:

1. Отсутствие каких-либо побочных явлений.

2. У всех добровольцев гемоглобин вырос на 2 3 мг

3. У добровольцев с исходным уровнем лейкоцитов свыше 10 тыс. их количество снизилось до 6 7 тыс.

4. При язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки препарат снимал боль, лейкоцитоз снижался с 16 18 тыс. до 8 9 тыс. в 1 мкл крови.

5. При воспалительных явлениях со стороны верхних дыхательных путей (ларингиты, бронхиты, тонзиллиты) они исчезали через 3 4 дня после начала приема препарата. Препарат оказывал выраженный купирующий эффект при бронхиальной астме.

Была проведена клиническая апробация препарата при различных заболеваниях, в частности в центре реабилитации детей, пострадавших от аварии на ЧАЭС, в областной хирургической клинике г. Томска.

В случае применения АБИСИБа для лечения людей, пострадавших от аварии на ЧАЭС (32 больных с синдромом повышенной утомляемости и снижением активности естественных киллеров) по 15 мл 3 раза в день перед едой, в течение месяца состояние всех больных значительно улучшалось исчезла повышенная утомляемость, головная боль, субфибрильная температура, сонливость, повысилась работоспособность Достоверно возросло количество эритроцитов, гемоглобина в крови. Количество лейкоцитов при низком исходном уровне (3 4 тыс. в 1 мкл) возросло до 5 7 тыс. и наоборот, при высоком уровне снижался до 7 9 тыс. в 1 мкл периферической крови. У 18 из 32 больных активность естественных киллеров увеличилась, нормализовалось содержание иммуноглобулинов J, A, M в периферической крови. Препарат не вызывал побочных действий, хорошо дозируется.

В отделении проктологии областной клинической больницы г. Томска АБИСИБ использовали для лечения 21 человека со следующими заболеваниями: свищи прямой кишки, эпителиальные копчиковые ходы, острые парапроктиты, проктиты, сигмоидиты. Препарат применялся энтериально по 1 ст. ложке 3 раза в день, а также в виде микроклизм по 100 мл, повязок на раны, а также в виде турунд. Аналогичное действие оказывает мазь метилурациловая, левасиновая, но АБИСИБ в отличие от них способствует укорочению сроков очищения гнойных ран, активной эпителизации грануляций. Препарат наиболее эффективен для лечения гнойных вялотекущих ран, воспалительных процессов слизистых оболочек.

Кроме того, препарат был исследован на животных в хозяйствах Томской и Кемеровской областей. АБИСИБ санирует организм животных, предупреждает развитие инфекционных заболеваний. Животные, получавшие АБИСИБ, набирали вес на 15 20 больше, чем контрольные за одинаковый промежуток времени.

Препарат АБИСИБ повышает устойчивость организма при простудных и кишечных заболеваниях. Так, в эксперименте находилось 40 поросят, которые были разделены на 2 группы (по 20 в каждой). Первая группа находилась на обычном пищевом рационе и служила контролем, второй группе животных к обычному рациону добавляли ежедневно 35 40 мл препарата (опытная группа). О состоянии животных судили по общему анализу крови (эритроциты, лейкоциты, гемоглобин, СОЭ, лейкоцитарная формула), а также по привесу животных. В начальной стадии у животных наблюдалось повышенное содержание лейкоцитов, что могло свидетельствовать о наличии воспалительных процессов. Через 40 дней после начала приема препарата были проведены повторные исследования: содержание лейкоцитов в крови контрольной группы животных не изменилось и составляло 23, 22,4 тыс. в 1 мкл, в опытной же группе оно равнялось 17,31,3 тыс. Эти достоверные различия свидетельствуют о санации организма животных. Применение препарата в виде пищевой добавки приводило к увеличению привеса животных.

Апробация препарата на 10 ослабленных телятах (диарея, анорексия, кашель животные обречены на гибель) показала, что применение АБИСИБа из расчета 0,7 1,0 мл/кг массы животного ежедневно привело к тому, что уже через три дня клиническое состояние животных улучшилось: животные начали подниматься, повысилась двигательная активность, исчезла патологическая симптоматика со стороны желудочно-кишечного тракта, повысился аппетит. Через 1 месяц все животные вернулись в стадо. При дальнейших наблюдениях (3 месяца) патологий не выявлено.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет получать эффективный препарат, повышающий резистентность организма и обладающий широким спектром терапевтического действия. Способ достаточно прост в реализации и позволяет решать проблему комплексной, безотходной технологии переработки лесов Сибири.