способ прогнозирования индивидуальной радиочувствительности в условиях гипоксии
Классы МПК: | G01N33/48 биологических материалов, например крови, мочи; приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) A61N5/00 Лучевая терапия |
Автор(ы): | Корденко Анатолий Николаевич, Ушаков Игорь Борисович |
Патентообладатель(и): | Корденко Анатолий Николаевич, Ушаков Игорь Борисович |
Приоритеты: |
подача заявки:
1992-04-09 публикация патента:
10.03.1997 |
Использование: в области медицины, в частности в радиобиологии, и может применяться для прогнозирования радиозащитного действия гипоксии при лучевой терапии и при профотборе лиц для работ, связанных с повышенной радиационной опасностью. Сущность изобретения: проводят гипоксическую пробу, двухкратную биопсию кожи до и после пробы, гистологическую обработку биоптатов с выявлением тканевых базофилов путем метахромазии с тиазиновым красителем, а затем подсчет всех структурно-метаболических форм тканевых базофилов и определение прогноза расчетным методом. Способ позволяет увеличить точность прогноза радиочувствительности.
Рисунок 1
Формула изобретения
Способ прогнозирования индивидуальной радиочувствительности в условиях гипоксии, включающий гипоксическую пробу с определением гистологических показателей до и после нее, отличающийся тем, что определяют гистологически в биоптате кожи содержание дегранулированных тканевых базофилов и по повышению их количества относительно исходного уровня прогнозируют индивидуальную радиочувствительность в условиях гипоксии.Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области радиобиологии и может быть использовано для прогнозирования эффективности радиозащитного действия гипоксии при лучевой терапии и при профессиональном отборе лиц для работ, связанных с повышенной радиационной опасностью. Известны способы прогнозирования индивидуальной радиочувствительности, основанные на общности реакции организма на воздействие различных физических факторов: постоянного магнитного поля, термонагрузки (Даренская Н.Г. Григорьев А. Ю. Кузнецова С.С. Общность реакции организма на воздействие различных физических факторов и ионизирующего излучения как основа для прогнозирования радиочувствительности организма. //Радиация и организм. Обнинск, 1984, с. 28 29). Наиболее близким к заявляемому является способ определения индивидуальной радиочувствительности посредством проведения кратковременной гипоксической пробы с определением уровня основного обмена, времени рефлекса сохранения и восстановления позы до и после пробы (там же, с. 29 31). К недостаткам этого способа можно отнести следующее:малая точность прогноза, составившая максимально 65,8%
не предусмотрена возможность его применения для прогнозирования радиочувствительности в условиях гипоксии;
невозможно проведение работы вне больничного или исследовательского учреждения, т.к. требуется специально оборудованное помещение. Задачей изобретения является: увеличение точности прогнозирования; реализация возможности прогнозирования радиочувствительности в условиях гипоксии и возможности проведения обследования вне медицинского или исследовательского учреждения (обследование по месту работы или жительства). Сущность изобретения заключается в том, что в способе прогнозирования индивидуальной радиочувствительности в условиях гипоксии, включающем гипоксическую пробу с определением лабораторных показателей до и после нее, в котором новым является то, что в качестве лабораторных показателей используют содержание тканевых базофилов кожи, определяемое при гистологическом исследовании биоптатов, у индивидуумов в интактном состоянии производят биопсию кожи, после чего выполняют гипоксическую пробу и повторно делают биопсию, оба биоптата фиксируют в жидкости Бэкера, обезвоживают и заливают в парафин, изготавливают гистологические срезы, окрашивают их тиазиновым красителем для получения метахромазии и под микроскопом подсчитывают количество всех структурно-метаболических форм тканевых базофилов с последующим определением прогноза расчетным методом. Поставленная задача может быть достигнута только при использовании совокупности всех заявляемых признаков, которая является новой: гипоксической пробы, биопсии кожи до и после нее, гистологического выявления и подсчета содержания тканевых базофилов в биоптатах. Пример 1. В опытах на 82 крысах для гипоксической пробы использовали гипоксическую газовую смесь, содержащую 8% кислорода и 92% азота. Перед пробой и после нее производили биопсию кожи ушных раковин. Для выявления тканевых базофилов биоптаты фиксировали в жидкости Бэкера, обезвоживали в диоксане, заливали в парафин, изготавливали на микротоме гистологические срезы, которые окрашивали тиазиновым красителем 0,1% раствором толуидинового синего при рН 4,2 для получения метахромазии. Под микроскопом подсчитывали количество тканевых базофилов кожи. Обозначение количества различных структурно-метаболических форм этих клеток см. в таблице. Для прогнозирования радиочувствительности в условиях гипоксии рассчитывали ожидаемую величину продолжительности жизни, для чего подставляли полученные значения признаков тканевых базофилов в формулу:
Y = A+BiXi
где y прогнозируемая продолжительность жизни,
А свободный член,
Хi величина отдельного признака,
Bi коэффициент. Через 7 суток после гипоксической пробы и взятия биопсий производили общее гамма-облучение крыс в дозе 11 Гр в условиях газовой гипоксической среды с содержанием кислорода 8% Оценивали реальную индивидуальную продолжительность жизни. При сопоставлении прогнозируемой продолжительности жизни с ее реальной величиной, при величинах коэффициентов: A -6463, В1 18, B2 19, B3 20, B4 27, B5 16, B6 16, B7 43, B8 45, B9 48, B10 52, B11 48, B12 48, точность прогнозирования составила 77,3%
Пример 2. В опытах на 44 крысах исследовали возможность прогнозирования отдельных проявлений первичной лучевой реакции при облучении в условиях гипоксии. Все процедуры, используемые для прогнозирования: проведение гипоксической пробы, биопсии и их гистологической обработки, подсчета тканевых базофилов были полностью идентичны описанным в примере 1. Облучение производили в дозе 100 Гр, в условиях гипоксии, создаваемой газовой смесью с содержанием кислорода 8% В связи с особенностями механизмов лучевого воздействия в этой дозе были подобраны другие коэффициенты в формулу: A 3,6, B4 19,4, B6 41,1, B10 17,9, B12 4,1. При сопоставлении расчетных и реальных значений отдельных синдромов, точность прогнозирования составила: для рвотного синдрома 75,4% адинамии 67,1% тремора 84,4%
Таким образом, предлагаемый способ прогнозирования радиочувствительности в условиях гипоксии дает возможность прогнозирования не только по критерию продолжительности жизни, но и по степени первичной лучевой реакции.
Класс G01N33/48 биологических материалов, например крови, мочи; приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры)
Класс A61N5/00 Лучевая терапия