штамм а/47/техас/91/2/6 (h1n1) для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для детей

Формула изобретения

1 Штамм А(47)Texac/91(2)6 (H1 N 1) ГИСК N 104 для производства живой гриппозной интраназальной вакцины для детей.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в здравоохранении для профилактики эпидемического гриппа среди детей живой интраназальной гриппозной вакцинной из штамма A/47/Техас/91/2/6 (H1N1). Известный штамм утратил антигенную актуальность и вследствие этого не может вызывать защитную реакцию во время эпидемии гриппа A(H1N1).

Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является получение вакцинного штамма актуальной антигенной разновидности на основе эпидемического вируса A/Техас/36/91 (H1N1).

Вакцинный штамм A/47/Техас/91/2/6 (H1N1) получен методом генетической реассортации эпидемического вируса A/Техас/36/91 (H1N1) с холодоадаптированным штаммом А/Ленинград/134/47 (H2N2) донором аттенуации, с последующей селекцией в присутствии антисыворотки к вируса A/Ленинград/134/47/57 (H2N2).

Методом РНК: РНК гибридизации с последующим электрофорезом в полиакриламидном геле установлено, что вакционный штамм A/47/Техас/91/2/6 (H1N1) унаследовал 6 генов, кодирующих внутренние белки РВ1, РВ2, РА, NP, M, NS от донора аттенуации и 2 гена кодирующих поверхностные белки НА (гемагглютинин и NA (нейраминидазу) от эпидемического вируса. Штамм является температурочувствительным (разность титров при 32^o и 40^oC 8,0 ЭИД 50/0,2 мл) и холодоадаптированным (разность титров при 32^o и 25^oC - 3,5 lg ЭИД 50/0,2 мл).

Таким образом, представленный вакцинный штамм A/47/Техас/91/2/6 (H1N1) характеризуется сочетанием полезных признаков, необходимых вакционному штамму: антигенной специфичностью поверхностных белков эпидемического вируса A/Техас/36/91 (H1N1), структурой генома оптимальной для реассортантных вакцинных штаммов, температурочувствительностью и холодоадаптированностью, что коррелирует с аттенуацией для человека, характерной для донора аттенуации.

Морфология штамма полиморфная типичная для вируса гриппа.

Характеристика штамма.

Инфекционная активность при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах при 32^oC в течении 48 часов 7,5 lg ЭИД 50/0,2 мл.

Гемагглютинирующая активность 1:128 1:256.

Штамм проявляет генетическую стабильность биологических признаков после 9 пассажей на куриных эмбрионах (при использовании больших заражающих доз).

Штамм ареактогенен при интраназальном введении детям 3 14 лет.

Пример. Группу из 120 детей в возрасте 7 14 лет, вакцинировали интраназально в объеме 0,5 мл рекомбинантным штаммом A/47/Техас/91/2/6 (H1N1) с инфекционной активностью 7,5 lg ЭИД 50/0,2 мл. Группа детей того же возраста из 59 человек получила плацебо (таблица).

Средние реакции с кратковременным повышением температуры свыше 37,5^oC не наблюдались. Показатель реактогенности составил 0% Слабые температурные реакции до 37,5^oC в 3 случаях.

В группе детей, получивших плацебо, средние температурные реакции также не отмечались, а слабые наблюдались в 4 случаях.

Таким образом, вакцинный штамм A/47/Техас/91/2/6 (H1N1) по показателям реактогенности соответствует требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам фармакопейной статьей ФС 42-298 ВС-89 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения детям 3 14 лет.