средство для заместительной терапии заболеваний дыхательных путей

Формула изобретения

Средство для заместительной терапии заболеваний дыхательных путей преимущественно при синдроме удушья, представляющее собой суспензию физиологически приемлемого поверхностно-активного вещества, содержащего связанные с ним кальциевые и/или магниевые ионы, в водном растворе хлорида натрия, отличающееся тем, что в качестве поверхностно-активного вещества оно содержит вещества природного происхождения, включающие фосфолипиды, нейтральные липиды и ассоциированные с ними белки и/или синтетические, включающие синтетические липиды и рекомбинантные белки, содержащие 25 70 ммоль кальциевых и/или магниевых ионов на моль органически экстрагируемых фосфолипидов, при концентрации в водном растворе указанных ионов 1 3,5 ммоль/л, хлорида натрия 33 150 ммоль/л и количестве поверхностно-активного вещества 60 250 мг/мл.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к заместительной терапии заболеваний дыхательных путей, в частности к средству для заместительной терапии заболеваний дыхательных путей, преимущественно при синдроме удушья.

Известно средство для заместительной терапии заболеваний дыхательных путей, преимущественно при синдроме удушья, которое представляет собой суспензию естественного легочного поверхностно-активного вещества в водной среде, содержащей поваренную соль, причем концентрация поверхностно-активного вещества в средстве обычно составляет до 55 мг/мл (см. Зу Йу и др. Bovine Pulmonary Surfactant, Lipids, том 18, N 8, с.552-529, 1983). Согласно литературным данным (см. Вебер М.Й. Поссмайер Ф. Calcium interactions in pulmonary surfactant, Biochim Biophys. Acta N 796, с. 83-91, 1984), легочное поверхностно-активное вещество имеет содержание кальция (и/или магния), не превышающее 16 ммоль на моль органически экстрагируемых фосфолипидов.

Недостаток известного средства заключается в том, что при более высокой концентрации поверхностно-активного вещества ( 60 мг на мл) вязкость средства или сразу, или же после недлительного хранения повышается настолько, что применение средства больше невозможно.

Задачей изобретения является предоставление стабильного при хранении высококонцентрированного средства для заместительной терапии заболеваний дыхательных путей, преимущественно при синдроме удушья.

Поставленная задача решается в средстве для заместительной терапии заболеваний дыхательных путей, преимущественно при синдроме удушья, в виде суспензии поверхностно-активного вещества, содержащего связанные с ним кальциевые и/или магнитные йоны, в водной среде, содержащей поваренную соль, за счет того, что оно содержит поверхностно-активное вещество, имеющее содержание связанных с ним кальциевых и/или магниевых йонов, равное 25 70 ммоль на моль органически экстрагируемых фосфолипидов, а водная, содержащую поваренную соль, среда содержит 1 3,5 ммоль кальциевых и/или магниевых йонов, и 33 150 ммоль/л хлористого натрия, причем концентрация поверхностно-активного вещества в средстве составляет 60 250 мг/мл.

Как правило, поверхностно-активное вещество имеет меньшее, чем указанное содержание связанных с ним кальциевых и/или магниевых йонов. Поэтому осуществляют предварительную обработку поверхностно-активного вещества раствором физиологически переносимой соли кальция и/или магния в органическом растворителе, например, метаноле, с последующим удалением растворителя.

В зависимости от исходного содержания связанных с поверхностно-активным веществом кальциевых и/или магниевых йонов предварительную обработку осуществляют при температуре от -10 до +30^oC, предпочтительно при комнатной температуре, в течение 0,1 до 10 мин.

Поверхностно-активное вещество может быть естественного или синтетического происхождения, причем синтетическое поверхностно-активное вещество должно содержать рекомбинантный белок.

В случае использования получаемого из легких животного поверхностно-активного вещества предварительное доведение содержания связанных кальциевых и/или магниевых йонов до заданного значения можно осуществлять тем, что к используемым на отдельных стадиях выделения средам добавляют соли кальция и/или магния в требуемых количествах.

В случае естественного легочного поверхностно-активного вещества речь идет о поверхностно-активном агрегате, состоящем главным образом из фосфолипидов, нейтральных липидов и ассоциированных с поверхностно-активным веществом гидрофобных белков. Полученное синтетическим путем поверхностно-активное вещество главным образом состоит из синтетических липидов и рекомбинантных белков.

Предлагаемое средство приготовляют простым смешиванием обоих компонентов.

Изобретение и его положительный эффект поясняются с помощью ниже следующих примеров.

Вязкость получаемых согласно примерам суспензий определяли после указанного срока хранения при комнатной температуре с помощью капиллярного вискозиметра. Речь здесь идет о модифицированном капиллярно-вискозиметрическом методе, описанном Веллером и др. в Wiener Medizinische Wochenzeitschrift suppl. 33, с. 7-12, 1975 г. и Веллером в Viskosimetrie inhomogener Flussigkeiten, Изд-во Дустри, Мюнхен, с. 21-41. Согласно данному методу пробу подают в шприц для инъекции, из которого ее с заданной определенной скоростью пропускают через измерительный капилляр. При этом также возможно обнаружить возможно имеющиеся негомогенности. Скорость сдвига известна, она имеет постоянную величину. Калибровку проводят с использованием эталонных масел. Давление перед капилляром является мерой вязкости и постоянно записывается с помощью соответствующего прибора.

Определение кальция осуществляется путем атомно-сорбиционной фотометрии после сгорания пригодной разбавленной суспензии поверхностно-активного вещества в ацетиленовом пламени при температуре примерно 3000^oC. При такой температуре высвобождается и правильно регистрируется также связанный с белковой матрицей кальций.

Пример 1. 1,5 естественного легочного поверхностно-активного вещества, состоящего примерно из 88% фосфолипидов, 4% холестерина, 1% ассоциированных с поверхностно -активным веществом гидрофобных белков, 0,6% свободных жирных кислот и триглицеридов и содержащего 16 ммоль связанного кальция на моль органически экстрагируемых фосфолипидов, подают в метанольный раствор 3 ммоль/л хлористого кальция. По истечении 1,5 мин при комнатной температуре поверхностно-активное вещество вынимают из раствора и удаляют прилипающий к нему метанол. Содержание связанных с поверхностно-активным веществом кальциевых йонов теперь составляет 48 ммоль на моль органически экстрагируемых фосфолипидов. Затем поверхностно-активное вещество в инъекционной бутылке смешивают с 8,5 мл водного раствора, содержащего 75 ммоль/л поваренной соли и 3 ммоль/л хлористого кальция. Инъекционную бутылку встряхивают, чем суспендируется поверхностно-активное вещество. Суспензию, имеющую концентрацию поверхностно-активного вещества 150 мг/мл, с помощью инъекционной канюли размером 1 (20 G) подают в шприц для инъекции, затем ее подают обратно в инъекционную бутылку через канюлю размером 18 (26 G). Эту обратную в инъекционную бутылку осуществляют в целях обеспечения отсутствия комочек в суспензии. Вязкость полученной суспензии составляет после 5-минутного хранения при комнатной температуре 7 мПас. По истечении часа вязкость достигает 13 мПас.

Полученное средство имеет ту же активность, что и известное средство.

Пример 2. Повторяют пример 1 с той разницей, что поверхностно-активное вещество берут в количестве 2,5 г и подают его в 7,5 мл водного раствора, содержащего 150 ммоль/л поваренной соли и 3,0 ммоль/л хлористого кальция. Получают суспензию с концентрацией поверхностно-активного вещества 250 мг/мл, в которой содержание связанных с поверхностно-активным веществом йонов кальция составляет 48 ммоль на моль органически экстрагируемых фосфолипидов. Вязкость полученной суспензии составляет после 5-минутного хранения при комнатной температуре 12 мПас. По истечении 60 мин вязкость достигает 22 мПас.

Полученное средство имеет ту же активность, что и известное средство.

Сравнительный опыт I. Повторяют пример 1 с той разницей, что поверхностно-активное вещество суспендируют в водном растворе без предварительной обработки метанольным раствором. Полученная суспензия после 10-минутного хранения имеет вязкость 40 мПас, а по истечении 30 мин вязкость достигает уже 160 мПас. Теперь суспензия имеет консистенцию сбитых сливок и поэтому больше не годится для интратрахеальной инстилляции.

Сравнительный опыт II. Повторяют пример 1 с той разницей, что предварительно обработанное метанольным раствором хлористого кальция поверхностно-активное вещество суспендируют в воде, содержащей лишь 3 ммоль/л хлористого кальция. Полученная суспензия после 10-минутного хранения при комнатной температуре имеет вязкость 304 мПас и поэтому больше не годится для интратрахеальной инстилляции.

Сравнение примера 1 со сравнительным опытом II показывает, что и наличие хлористого натрия в суспендирующей среде необходимо для решения поставленной задачи.

Сравнительный опыт III. Повторяют пример 1 с той разницей, что предварительно обработанное метанольным раствором хлористого кальция поверхностно-активное вещество суспендируют в воде, содержащей лишь 75 ммоль/л хлористого натрия. Полученная суспензия после 5-минутного хранения при комнатной температуре имеет вязкость 11 мПас, по истечении 45 мин 37 мПас, а по истечении 60 мин вязкость достигает даже 118 мПас, т.е, после 60-минутного хранения суспензии не годится для интратрахеальной инстилляции.

Сравнение примера 1 со сравнительным опытом III показывает, что благодаря наличию хлористого кальция в суспендирующей среде дальше повышается стабильность суспензии при хранении.