способ ферментативного получения цефалоспорина с
Классы МПК: | C12P35/00 Получение соединений, содержащих 5-тиа-1-азабицикло [420] октановую циклическую систему, например цефалоспорина C12P35/06 цефалоспорин C; его производные C12P37/00 Получение соединений, содержащих 4-тиа-1-азабицикло [320] гептановую циклическую систему, например пенициллина |
Автор(ы): | Томас Байер[DE], Вильхельм Шрамм[DE], Вольфанг Ратшек[DE] |
Патентообладатель(и): | Хехст АГ (DE) |
Приоритеты: |
подача заявки:
1992-08-08 публикация патента:
27.10.1997 |
Использование: микробиология, в частности получение антибиотиков. Сущность изобретения: ферментационное получение цефалоспорина С предусматривает ферментацию продуцента Acremonium chrysogenum в питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли в аэробных условиях, с последующей фильтрацией ферментационного раствора через фильтрационную систему в поперечном потоке, в качестве которой применяют полимерный или керамический фильтр с размером пор 4 - 200 нм со скоростью протекания через поверхность фильтра 1 - 10 м/с, при этом фильтрацию раствора проводят во время ферментации с замещением количества фильтрата в ферментере водой или питательным раствором. 3 з. п. ф-лы, 2 табл.
Рисунок 1
Формула изобретения
1. Способ ферментативного получения цефалоспорина С, предусматривающий ферментацию продуцента Acremonium chrysogenum в питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли в аэробных условиях с последующей фильтрацией ферментационного раствора через фильтрационную систему в поперечном потоке и выделением целевого продукта, отличающийся тем, что фильтрацию ферментационного раствора проводят во время ферментации с замещением количества фильтрата в ферментере. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве фильтрационной системы в поперечном потоке применяют полимерный или керамический фильтр с размером пор 4 200 нм. 3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что скорость перетекания через поверхность фильтра составляет 1 10 м/с. 4. Способ по пп. 1 3, отличающийся тем, что фильтрат в ферментере замещают водой или питательным раствором.Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к способам ферментативного получения цефалоспорина С с помощью Acremokium chrisogenum. Переработку содержащих антибиотики культуральных бульонов осуществляют, как правило, после достижения максимального содержания. В большинстве случаев в качестве первой стадии осуществляют отделение клеток и твердых веществ путем фильтрации или центрифугирования, после чего можно осуществлять обогащение ценного вещества путем экстракции или адсорбции. Очищенный продукт затем, как правило, кристаллизуют и он может быть далее переработан в полусинтетические антибиотики. При этом постадийном способе обращает на себя внимание в отрицательном плане нестабильность многих молекул антибиотиков, как, например, цефалоспорина С (СРС). Уже во время ферментации происходит разрушение СРС, которое может происходить как чисто химически путем воздействия воды на![способ ферментативного получения цефалоспорина с, патент № 2094463](/images/patents/378/2094044/946.gif)
Среда для предварительной, г/л:
Зерновая замочка (Cornsteep) 11,75
Ацетат аммония 4,5
Сахароза 20,0
CaSO4
![способ ферментативного получения цефалоспорина с, патент № 2094463](/images/patents/378/2094011/183.gif)
MgSO4
![способ ферментативного получения цефалоспорина с, патент № 2094463](/images/patents/378/2094011/183.gif)
pH 7,0 [установлено с помощью 15 мас. NaOH]
Ферментационная среда, г/л:
Обезжиренная арахисовая мука 100,0
Ацетат аммония 6,0
Моногидрат глюкозы 5,0
Метилолеат 5,0
D, L-метионин 3,0
CaSO4
![способ ферментативного получения цефалоспорина с, патент № 2094463](/images/patents/378/2094011/183.gif)
MgSO4
![способ ферментативного получения цефалоспорина с, патент № 2094463](/images/patents/378/2094011/183.gif)
CaCO3 5,0
Антивспениватель 5,0
Исходный раствор:
Моногидрат глюкозы 500,0
D, L-метионин 24,75
Культуры, выросшие на косом агаре, применяют для инокулирования 100 мл среды для предварительной культуры (колбы для встряхивания емкостью 500 мл с 4 зубцами). Колбы инкубируют в течение 48 ч при 150 об/мин и при 25 28oC. Эти культуры применяют для инокулирования другой предварительной культуры (1000 мл среды; колбы емкостью 5000 мл; 25-28oC; 120 об/мин; 58 60 ч). Второй предварительной культурой инокулируют 60 л среды для ферментации в ферментере с перемешиванием. Ферментацию осуществляют при 25oC. Пропускание газа регулируют таким образом, что pO2 в ферментационном питательном растворе составляет свыше 20%
После ферментации в течение 74 ч. начинается фильтрация с помощью керамического модуля в поперечном потоке [фирма "Membraflow", a-Al2O3] с поверхностью фильтра 0,2 м2 и размером пор 0,2 мкм. При этом соблюдаются следующие параметры процесса:
Скорость перетекания 2 м/с
Скорость перекачивания 1500 л в ч
Производительность фильтрации 2 л в ч
Время фильтрации 68 ч
В табл. 1 показаны результаты исследований после 142 ч. ферментации без фильтрации (А) и с фильтрацией в поперечном потоке (В). Пример 2. Ферментацию осуществляют как в примере 1. В табл. 2 приводятся результаты после 167 ч ферментации с фильтрацией в поперечном потоке (В) по сравнению с параллельной ферментацией без фильтрации (А), которую прекращают спустя 142 ч.
Класс C12P35/00 Получение соединений, содержащих 5-тиа-1-азабицикло [420] октановую циклическую систему, например цефалоспорина
Класс C12P35/06 цефалоспорин C; его производные
способ биосинтеза цефалоспорина с с использованием нового штамма acremonium chrysogenum вкм f-4081d - патент 2426793 (20.08.2011) | |
способ выделения цефалоспорина с - патент 2241039 (27.11.2004) |
Класс C12P37/00 Получение соединений, содержащих 4-тиа-1-азабицикло [320] гептановую циклическую систему, например пенициллина