способ культивирования микроорганизмов
Классы МПК: | C12N1/38 химическая стимуляция роста или активности путем введения химических соединений, не являющихся существенными факторами роста; стимуляция роста путем удаления химического соединения |
Автор(ы): | |
Патентообладатель(и): | Виноходов Владимир Олегович |
Приоритеты: |
подача заявки:
1995-06-29 публикация патента:
10.12.1997 |
Использование: биотехнология, микробиология. Сущность изобретения: способ включает в себя культивирование микроорганизмов в присутствии стимулятора - циклического аденозин-3,5-монофосфата в концентрации 1
10-12-1
10-6 моль/л, который вводят в культуральную жидкость на 4-5 ч ферментации, на стадии, предшествующей лаг-фазе. 1 з.п. ф-лы.
![способ культивирования микроорганизмов, патент № 2098482](/images/patents/374/2098007/183.gif)
![способ культивирования микроорганизмов, патент № 2098482](/images/patents/374/2098007/183.gif)
Формула изобретения
1. Способ культивирования микроорганизмов путем выращивания их в питательной среде, содержащей источники углерода, азота и минеральные соли, в присутствии стимулятора роста, отличающийся тем, что в качестве стимулятора на стадии, предшествующей лагфазе, вводят циклический 3,5-монофосфат в концентрации 1![способ культивирования микроорганизмов, патент № 2098482](/images/patents/374/2098007/183.gif)
![способ культивирования микроорганизмов, патент № 2098482](/images/patents/374/2098007/183.gif)
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к прикладной биотехнологии, а именно к способам получения биопрепаратов с использованием добавок, стимулирующих продуцирующую способность микроорганизмов. Известно получение биопрепаратов таких, как антибиотики, аминокислоты, витамины, органические кислоты и т.п. с использованием таких добавок, как сульфит калия, тиогликолевая кислота и т.д. [1]Недостатком их является недостаточная эффективность, необходимость последующего отделения стимуляторов от конечного продукта. Известен способ получения биопрепаратов с использованием в качестве стимулятора веществ, являющихся естественными компонентами микробиологических процессов, например, гидролизатов или экстрактов культуральной жидкости [2, 3]
Недостатком способа является недостаточная эффективность, видостпецифичность добавки. Прототипом данного изобретения является способ культивирования микроорганизмов-продуцентов нейтральной протеазы, в котором в качестве стимулятора в среду вводят 0.01-0.2% полимера полиоксипропиленгликолевого эфира [4]
Недостатком стимулятора является ограниченная применимость, малая эффективность, необходимость введения в КЖ посторонних веществ. Задачей, стоявшей перед авторами, являлось создание способа получения биопрепаратов путем введения природного компонента, обладающего повышенной эффективностью. Задача решается введением в КЖ после начала культивирования, но до начала лог-фазы роста, циклического аденозин-3,5-монофосфата (ЦАМФ) в концентрации 1
![способ культивирования микроорганизмов, патент № 2098482](/images/patents/374/2098007/183.gif)
![способ культивирования микроорганизмов, патент № 2098482](/images/patents/374/2098007/183.gif)
Крахмал картофельный 10,
Дрожжи кормовые 0,2
Соевая мука 0,2
Кукурузный экстракт 1,0
KCl 0,15
CaCl2 0,01
NaCl 0,0001
Li2SO4 0,003
ZnSO4 0,003
CuCl2 0,00033
(NH4)2HPO4 1,2
Амилосубтилин ГЗх 0,15
Вода Остальное
Введение ЦАМФ перед посевом в дозе 10-5-10-13 моль/л позволило получить концентрацию нейтральной протеазы (ПА) в ед/мл при дозе 10-10 28.8 (83.7%), 10-11 27.3 (79.4%), 10-12 32.9 (101.9%). Контроль 32.3-34.4 ед/мл. При введении ЦАМФ на шестом часу культивирования ПА составила при дозе 10-5 29.0 (80%), 10-6 38.2 (116%), 10-7 42.2 (126%), 10-10 39.4 (114.5%), 10-11 37.4 (115.8%), 10-12 32.7 (95.1%). При введении ЦАМФ в дозе 10-7 моль/л на втором часу культивирования концентрация составила 37.6 (116.1%), на двенадцатом часу 32 (94%). Литература:
1. Работнова И.Л. Роль физико-химических условий в жизнедеятельности микроорганизмов. М. 1957. 2. Yoshikawa H. Biochem. Biophys. Acta, 1960, v. 45, p. 270-276. 3. Павлович Н. М. в сб. "Получение и применение регуляторов роста". Л. ЛТН, 1986, с. 59. 4. А. с. СССР 502023, кл. C 12 N 1/38, 1976. (прототип). 5. Botsford T. Microbiol. Rev. 1981, v. 45, 4, p. 620.
Класс C12N1/38 химическая стимуляция роста или активности путем введения химических соединений, не являющихся существенными факторами роста; стимуляция роста путем удаления химического соединения