способ лечения патологических отклонений при диабете типа ii

Формула изобретения

1. Способ терапевтической модификации и регулирования метаболизма липидов и глюкозы у животных и человека, включающий введение субъекту, нечувствительному к инсулину, или страдающему диабетом, или тем и другим, ежедневно в определенное время агониста допамина в дозе и в течение периода времени, достаточных для улучшения чувствительности субъекта к инсулину, подавления гиперинсулинемии или снижения гипергликемии, или как для подавления гиперинсулинемии, так и для снижения гипергликемии.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что после прекращения лечения агонистом допамина эффект от лечения продолжается по меньшей мере один месяц.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что агониста допамина, введенного ежедневно в определенное время указанному субъекту, достаточно для модифицирования и координации невральных фазовых колебаний как пролактина, так и глюкокортикостероидов.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что таймированные суточные дозы агониста допамина вводят ежедневно, один раз в день, в течение периода времени от 10 до 150 дней, в количестве приблизительно 3 100 мг на 1 фунт веса тела.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что таймированные суточные дозы агониста вводят ежедневно в количестве 3 40 мг на 1 фунт веса тела, в течение 10 150 дней, при лечении человека.

6. Способ по п.5, отличающийся тем, что дозу назначают в количестве, варьирующем приблизительно 3 20 мг на 1 фунт веса тела, в течение 30 120 дней.

7. Способ по п.5, отличающийся тем, что агонист допамина вводят резистентному к инсулину или резистентному к инсулину и страдающему диабетом лицу, ежедневно во время, варьирующее приблизительно 1 8 ч после времени, при котором наступает пик концентрации пролактина у худых, чувствительных к инсулину лиц, чтобы модифицировать и исправить метаболизм пациента до уровня и характеристик, существующих у худых людей.

8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что агонист допамина выбирают из 6-метил-8-бета-карбобензилокси-амино-этил-10-альфа-эрголин; 1,6-диметил-8-бета-карбобензилокси-аминометил-10-альфа-эрголин; 8-ацилоаминоэрголены; эргокорнин; 9,10 дигидроэргокорнин; бром-криптин; D-2-гало-6-алкил-8-замещенные эрголины.

9. Способ терапевтического модифицирования и корректировки невральных фазовых колебаний мозга, которые контролируют уровни пролактина в кровотоке человека, отличающийся тем, что включает введение человеку, нечувствительному к инсулину, или диабетику, или находящемуся и в том и другом состоянии агониста допамина ежедневно в час, в количестве и в течение времени, достаточных для увеличения эффектов перераспределения глюкозы, вызываемых инсулином, и понижения гиперглинемии.

10. Способ по п.9, отличающийся тем, что агонист допамина вводят человеку для снижения гиперинсулинемии.

11. Способ терапевтического модифицирования и корректировки невральных фазовых колебаний ритма пролактина или как ритма пролактина, так и ритма глюкокортикостероидов у нечувствительных к инсулину или страдающих диабетом животных или человека, отличающийся тем, что включает введение субъекту, нечувствительному к инсулину или страдающего диабетом, агониста допамина ежедневно в такое время дня, когда уровни пролактина и кортизола в крови достигают своего пика во время, сходное с тем, которое существует у худых, чувствительных к инсулину субъектов, в количестве 3 40 мг на 1 фунт веса тела, и продолжение лечения в течение 10 150 дней и достаточного для улучшения чувствительности субъекта к инсулину, подавления гиперинсулинемии или снижения гипергликемии, или как подавления гиперинсулинемии, так и для снижения гипергликемии; причем после прекращения лечения невральное фазовое колебание пролактина в организме субъекта, подвергаемого лечению, будет в значительной степени соответствовать таковому у худого, чувствительного к инсулину субъекта, и этот эффект будет продолжаться длительное время.

12. Способ по п.11, отличающийся тем, что дозы агониста допамина вводят в течение 30 120 дней.

13. Способ по п.11, отличающийся тем, что агонист допамина вводят субъекту ежедневно в такое время дня, которое соответствует тому, которое вызывает ритм пролактина в плазме или как ритм пролактина, так и ритм кортизола, достигающие пика, как у ожиревшего субъекта того же вида, для увеличения запасов в организме худого субъекта.

14. Способ по п.11, отличающийся тем, что агонист допамина вводят субъекту ежедневно для повышения чувствительности клеток к эффектам перераспределения глюкозы, вызываемым инсулином.

15. Способ по п.11, отличающийся тем, что агонист допамина вводят субъекту ежедневно для снижения гиперинсулинамии.

16. Способ по п.11, отличающийся тем, что агонист допамина вводят субъекту ежедневно для снижения гипергликемии.

17. Способ по п.11, отличающийся тем, что агонист допамина выбирают из: 6-метил-8-бетакарбобензилокси-амино-этил-10-альфа-эрголин; 1,6-диметил-8-бета-карбобензилокси-аминометил-10-альфа-эрголин; 8-ациламиноэрголены; эргокорнин; 9,10-дигидроэргокорнин; бромкриптин и D-2-гало-6-алкил-8-замещенные эрголины.

18. Способ модифицирования и регулирования метаболизма глюкозы и липидов у нечувствительного к инсулину, страдающего гиперинсулинемией или диабетом человека, отличающийся тем, что включает введение субъекту, демонстрирующему одно из этих или все перечисленные патологические состояния, характерные для диабета типа II, в течение периода времени от 30 до 120 дней, в количестве 3

40 мг на 1 фунт веса тела, ежедневных доз агониста допамина 1 10 ч после нормального времени дня, в которое уровень пролактина достигает своего пика у худого субъекта того же вида и пола, не имеющего какой-либо из перечисленных патологий, чтобы вызвать изменение в нейроэндокринной системе подвергаемого лечению человека, имитирующее таковую у худого субъекта; в результате чего чувствительность в инсулину подвергаемого лечению субъекта улучшается, гиперинсулинемия подавляется, или снижается гипергликемия, или как подавляется гиперинсулинемия, так и снижается гипергликемия, и все эти параметры, которые являются характерными для развития диабета типа II, изменяются на длительное время.

19. Способ по п.18, отличающийся тем, что агонист допамина вводят ежедневно в определенное время, достаточное для модифицирования и корректировки невральных фазовых колебаний нейроэндокринной системы подвергаемого лечению субъекта.

20. Способ по п.18, отличающийся тем, что агонист допамина выбирают из 6-метил-8-бета-карбобензилокси-аминоэтил-10-альфа-эрголина, 1,6-диметил-8-бета-карбобензилокси-аминометил-10-альфа-эрголина, 8-ациламиноэрголенов, эргокорнина, 9,10-дигидроэргокорнина, бром-криптина и D-2-гало-6-алкил-8-замещенных эрголинов.

Описание изобретения к патенту

Диабет - одно из самых распространенных заболеваний, начало которого протекает без явных симптомов, может также возникать неожиданно или оставаться недиагностированным годами, все это время неблагоприятно воздействуя на нервы и кровеносные сосуды. Диабетики значительно чаще подвержены слепоте, сердечным заболеваниям, инсульту, заболеваниям почек, потере и снижению слуха, гангрене и импотенции. Одна треть всех обращений к врачам вызвана этим заболеванием, а его осложнения являются главной причиной смерти в этой стране.

Диабет неблагоприятно воздействует на то, как организм использует сахара и крахмал, которые в процессе переваривания превращаются в глюкозу. Инсулин, гормон поджелудочной железы, делает глюкозу доступной для клеток тела, которые используют ее для получения энергии. В мышечной, жировой и соединительной ткани инсулин облегчает проникновение глюкозы в клетки посредством воздействия на клеточные мембраны. Проникшая в клетки глюкоза в норме превращается в печени в CO₂ и H₂O (50%), в гликоген (5%) и в жир (30-40%), который запасается в жировых депо. Жирные кислоты циркулируют в крови, возвращаются в печень и превращаются в кетоновые тела для утилизации в тканях. Жирные кислоты метаболизируются также и в других органах, в которых образование жира является основным путем утилизации углеводов. Эффект инсулина заключается в том, что он способствует хранению и использованию углеводов, белка и жира. Дефицит инсулина является распространенным и серьезным патологическим состоянием человека. При диабете типа I поджелудочная железа производит мало инсулина или не производит его вовсе и инсулин должен вводиться диабетику ежедневно для выживания. При диабете типа II поджелудочная железа вырабатывает инсулин, но его количество недостаточно, или он не полностью активен вследствие резистентности клеток, или и то и другое одновременно. При обеих формах возникает множество отклонений и в организме, но фундаментальными дефектами, к которым могут привести эти отклонения, являются сниженное проникновение глюкозы в различные "периферические" ткани и увеличенное высвобождение глюкозы из печени в циркулирующую кровь (возросший печеночный глюкогенез). Таким образом, существует избыток внеклеточной глюкозы и недостаток внутриклеточной глюкозы, что можно назвать "голодом среди изобилия". Наблюдается также снижение проникновения аминокислот в мышечную ткань и усиление липолиза. Таким образом, все это приводит, как следствие диабетического процесса, к повышению уровня глюкозы в крови и пролонгированию высокого содержания сахара в крови, что является показательным для состояния, вызывающего повреждение кровеносных сосудов и нервов. Ожирение или избыток жировых запасов часто связано с увеличением резистентности клеток к инсулину, что предшествует началу очевидного диабета. До начала диабета поджелудочная железа у страдающих ожирением усиленно производит добавочный инсулин, однако с течением времени, возможно, через несколько лет, выработка инсулина падает и развивается диабет.

Снижение жировых запасов организма домашних животных на постоянной основе экономически выгодно для человека, поскольку животные поставляют большую часть рациона человека, и жир животных в будущем составит жировые запасы самого человека. Снижение жировых запасов тела человека также обладает значительным преимуществом, как косметическим, так и физиологическим. В самом деле, ожирение и устойчивость к инсулину, которая сопровождается гиперинсулинемией и гипергликемией, или и тем и другим, являются отличительными признаками диабета типа II. Ограниченное питание и физические упражнения могут дать лишь скромные результаты в уменьшении жировых запасов организма. К несчастью, до настоящего времени не было найдено эффективного способа лечения, контролирующего как гиперинсулинемию, так и резистентность к инсулину. Гиперинсулинемия - это повышенное содержание инсулина в крови. Резистентность к инсулину можно определить как состояние, при котором нормальное количество инсулина вызывает субнормальный биологический ответ. Считается, что у диабетиков, которых лечат инсулином, существует резистентность к инсулину, во всех случаях, когда терапевтическая доза инсулина превышает секторный уровень этого гормона у здоровых людей. Устойчивость к инсулину также определяется повышенным уровнем инсулина в крови, т.е.гиперинсулинемией, при наличии нормального или повышенного уровня глюкозы в крови. Несмотря на десятилетия исследований по этой серьезной проблеме, этиология ожирения и резистентности к инсулину остается неизвестной. Принципиальные механизмы биологического измерения времени, циркадный или дневной ритм, присутствуют на всех уровнях организации. Сообщалось о дневных ритмах для множества гормонов, включая стероиды надпочечников, например, глюкокортикостероиды, а именно кортизол и пролактин, гормон, секретируемый гипофизом. В давней статье, обсуждавшей состояние вопроса в то время, писали: "Несмотря на то, что существует корреляция между гормональными ритмами и другими ритмами, существует мало доказательств того, что время дневного присутствия или пик уровня гормонов имеет важное физиологическое значение". (Temporal Synergism of Prolactin and Adrenal Steroids, авторы Albert H.Meier, General and Comparative Endocrinology, Supplement 3, 1972 Copyright 1972 by Academic Press, Inc.) Статья затем описывает физиологическую реакцию птиц на инъекции пролактина, которые производились с дневными интервалами. Эта реакция включала повышения и понижения жировых запасов тела в зависимости от времени дня, когда производилась инъекция, и времени года, причем время года являлось определяющим фактором нормального веса тела и, как следствие, малых запасов жира у животных. Таким образом, было обнаружено, что пролактин стимулирует ожирение, только когда вводится в определенное время суток, а время реакции различалось у худых животных и ожиревших животных. В статье, озаглавленной "Циркадные и сезонные колебания концентраций плазменного инсулина и кортизола у сирийских хомячков", написанной Christopher J. de Souza и Albert H.Meier, Chronobiology International, том 4, N 2, стр.141-151, 1987, сообщается об изучении циркадных колебаний плазменного инсулина и кортизола у скотосенситивных и скоторефрактерных сирийских хомячков, которых содержали в условиях укороченного и удлиненного светового дня, для определения возможных сезонных колебаний их дневных ритмов. Основная концентрация инсулина оказалась более высокой у самок (по сравнению с самцами) скотосенситивных хомячков в условиях короткого светового дня. Это различие может быть отнесено на счет более высокого жирового запаса самок по сравнению с низким запасом у самцов скотосенситивных хомячков, содержащихся в условиях короткого светового дня. Концентрации в плазме как инсулина, так и кортизола варьировали в течение дня для групп животных, но были неэквивалентными. Циркадные колебания кортизола были сходными, независимо от пола, сезона и продолжительности светового дня. Циркадные колебания инсулина, напротив, имели выраженные различия. Ни ежедневное потребление пищи, ни концентрация глюкозы не варьировали сколько-нибудь значительно в зависимости от сезона или продолжительности светового дня. Докладывали, что ни время дня, ни сезон не влияли на концентрацию глюкозы или уровень кортизола. Принималось без доказательств, что дневные ритмы кортизола и инсулина регулируются разными нервными пейсмейкерными системами и что изменения соотношений фаз в циркадных системах происходят частично вследствие сезонных изменений в жировых запасах тела. Циркадные ритмы пролактина и глюкокортикоидных гормонов, например кортизола, были восприняты таким образом, как имеющие далеко не ясные роли в регуляции суточных и сезонных колебаний жировых запасов организма и в организации и интеграции общего метаболизма животных. (См."Circadi an Hormone Rhythms in Lipid Regulation, Albert H.Meier и John T.Burns, Amer.Zool. 16:649-659 (1976).

Инсулин является гормоном множественного биологического действия; многие его воздействия тканеспецифичны. Например, инсулин может увеличивать секрецию молочных желез, стимулировать синтез жиров в печени, ускорять транспорт глюкозы в мышечную ткань, стимулировать рост соединительной ткани и т. д. Воздействие молекул инсулина на одну ткань вовсе не обязательно зависит от его воздействия на другие ткани. Это означает, что эти воздействия инсулина могут быть и являются различными на молекулярном уровне. В противовес ранее приведенным данным Meier и Cincotta о том, что агонисты допамина (например, бромкриптин) ингибируют липогенный (или липосинтетический) ответ печеночных клеток на инсулин, новая методика, описанная и продемонстрированная в настоящем документе, свидетельствует о том, что ежедневно в должное время введение агониста допамина (например, бромкриптина) обладает новой и уникальной лекарственной способностью стимулировать гипогликемический (или перераспределительный в отношении глюкозы) ответ всех тканей организма (прежде всего мышечной) на инсулин. Это открытие нового медицинского применения агонистов допамина (например бромкриптина) представляет полностью противоположный эффект на совершенно другую биологическую активность молекулы инсулина и на совершенно иную ткань тела, в отличие от предыдущей, показанной в работе Meier и Cincotta.

Главной целью настоящего изобретения является создание способа или метода регулирования и исправления инсулинчувствительного уровня глюкозы в плазме и уровня инсулина в крови позвоночных, т.е. животных, включая человека.

В частности, целью является создание способа для исправления циркадных нервных центров животных, включая человека, для получения долгосрочных изменений количества животных жировых запасов организма, чувствительности клеточного ответа на инсулин и преодоление гиперинсулинемии и/или гипергликемии, которая обычно сопутствует резистентности к инсулину.

Более конкретной целью является создание способа для исправления цикадных нервных центров животных, включая человека, для уменьшения ожирения и поддержания жировых запасов у худых людей и животных на более нормальном уровне и долгосрочной основе.

Дополнительной и равно специфической целью является создание способа, нормализующего на долгосрочной основе циркадные нервные центры, особенно у человека, для повышения и улучшения чувствительности и способности к ответу на инсулин клеток и подавления гиперинсулинемии и гипергликемии или обоих состояний.

Эти и другие цели достигаются в соответствии с настоящим изобретением и характеризуются как способ или метод регуляции метаболизма липидов и глюкозы для достижения долгосрочных, продолжительных и постоянных эффектов посредством введения ежедневно в определенное время доз агониста допамина или ингибитора пролактина, такого как L-допа и различные родственные спорынье соединения, позвоночным животным или человеку. Введение этих препаратов на суточной основе продолжается в течение периода времени, достаточного для нормализации фазовых колебаний ритма пролактина или колебаний как пролактина, так и глюкокортикостероидов, которые являются выражением колебаний нервных центров пролактина и глюкокортикостероидов, соответственно. Соотношение фаз колебаний пролактина и, предпочтительно, обоих нервных центров модифицируются и исправляются таким образом, что при прекращении ежедневного введения агониста допамина или ингибитора пролактина жировой обмен животного или человека продолжает оставаться в течение длительного периода времени (по крайней мере, один месяц), если не навсегда, на измененном метаболическом уровне.

Агонист допамина или ингибитор пролактина вводят предпочтительно орально, сублингвально или путем подкожной или внутримышечной инъекции. Таким образом, ингибирующее пролактин соединение, предпочтительно препарат спорыньи, вводят пациенту, имеющему один или более симптомов, которые желательно изменить, например, ожирение, резистентность к инсулину, гиперинсулинемию или гипергликемию. Примерами пролактинингибирующих соединений, препаратов спорыньи, являются: 2 - бром-альфа-эргокриптин; 6-метил-8-бета-карбобензилокси-аминометил-10- альфа-эрголин; 1,6-диметил-8-бета-карбобензилокси-аминометил-10- альфа-эрголин; 8-ациламиноэрголены, такие как 6-метил-8-альфа-(N-ацил)-амино-9-эрголен и 6 метил-8- альфа- (N-фенилацетил)амино-9-эрголен; эргокорнин; 9, 10-дигидроэргокорнин и D-2-гало-6-алкил-8-замещенные эрголины, такие как D-2-бром-6-метил-8-цианометилэрголин. Помимо этого, в практике настоящего изобретения также полезны нетоксичные соли пролактин-ингибирующих соединений спорыньи, образованные с фармацевтически приемлемыми кислотами. Было обнаружено, что в практике настоящего изобретения особенно полезен бромкриптин или 2-бром-альфа-эргокриптин.

При лечении животного или человека жировые запасы организма могут быть уменьшены или увеличены, и воздействие продолжается до тех пор, пока жировые запасы организма не стабилизируются на оптимальном или близком к оптимальному уровню, в зависимости от желаемого уровня жировых запасов для конкретного объекта лечения, в течение периода времени, достаточного для того, чтобы после прекращения лечения ритм пролактина, а предпочтительно, и ритм пролактина, и ритм глюкокортикостероидов, был исправлен настолько, чтобы в течение длительного времени поддерживать уменьшенные или увеличенные уровни веса тела. Для человека, почти без вариантов, целью обычно является уменьшение жировых запасов тела и ожирения. Было установлено, что существует зависимость между ожирением и резистентностью к инсулину и что ожирение может привести к увеличению резистентности к инсулину. Подобно этому было установлено, что циркадные ритмы концентрации в плазме пролактина и глюкокортикостероидов, соответственно, вызывают важные последствия в том, что касается регуляции жировых запасов организма и что соотношения фаз уровней пролактина и глюкокортикостероидов, соответственно, различаются у худых и толстых животных. У толстых животных пролактин достигает пикового уровня от данного часа через 24 ч (у людей обычно около полудня), а уровень пролактина у худых животных - в другое время суток (у людей обычно во время сна). У худых уровень глюкокортикостероидов, например кортизола, достигает пика в течение 24-часового периода от данного часа (обычно во время, отличающееся от пролактина); у людей обычно спустя несколько часов после пробуждения. Таким образом, фазовые отношения ритмов кортизола и пролактина отличаются у худых и ожиревших животных. Пиковые периоды выработки пролактина и глюкокортикостероидов, соответственно, могут до некоторой степени различаться у самцов и самок отдельного вида. Было обнаружено, что ежедневные дозы агониста допамина или ингибитора пролактина, даваемые ожиревшему объекту лечения сразу после того времени дня, которое в норме дает пик пролактина у худых объектов того же вида и пола, приводят к снижению веса ожиревшего животного (или человека). Такое лечение, если продолжается достаточное время, нормализует на долгосрочной или постоянной основе фазы неавральных колебаний ритмов как пролактина, так и глюкокортикостероидов ожиревших животных до уровня, который существует у худых животных. Ожиревший объект в начале лечения агонистом допамина или ингибитором пролактина будет терять вес, а его жировые запасы, если продолжать лечение на ежедневной основе, будут сокращаться и стабилизируются на уровне, существующем у худых представителей того же вида. При прекращении ежедневного лечения подъемы и падения уровней пролактина и глюкокортикостероидов в крови пациента будут соответствовать таковым у худых представителей того же вида и длиться достаточного продолжительное время. Эффект такого налаживания ритмов пролактина или и пролактина, и глюкокортикостероидов, выражается также в повышении чувствительности клеток пациента к инсулину, снижает гиперинсулинемию или гипергликемию, или оба этих параметра и, таким образом, изменяет патологические параметры, присущие началу развития диабета типа II, на продолжительный срок.

При лечении позвоночных, в основном, дозировки агониста допамина или ингибитора пролактина дают ежедневно один раз в день, обычно от 10 до 150 дней, в количествах, варьирующих приблизительно от 3 до 100 микрограммов на фунт веса тела (1 фунт 0,454 кг) для нормализации циркадного ритма плазменного пролактина. При лечении человека, агонист допамина или ингибитор пролактина дают ежедневно, предпочтительно, при уровнях доз, варьирующих приблизительно от 3 до 40 микрограммов, более предпочтительно от 3 до 20 микрограммов на фунт веса тела. Такое лечение, которое продолжается приблизительно от 10 до 150 дней, предпочтительно от 30 до 120 дней, более предпочтительно от 30 до 90 дней, наиболее предпочтительно от 30 до 60 дней, получаемое ожиревшим пациентом короткий период времени после - обычно от 1 до 8 ч, предпочтительно от 4 до 8 ч после наступления пика концентрации пролактина у худых людей, модифицирует и налаживает липидный метаболизм ожиревшего пациента до параметров, существующих у худых представителей того же вида. Пролактин достигает пика у худых, чувствительных к инсулину пациентов во время сна, обычно около его середины, и, следовательно, это время для введения агониста допамина с целью снижения жировых запасов у ожиревших пациентов для улучшения чувствительности пациента к инсулину, подавления гиперинсулинемии или гипергликемии или снижении того и другого, и варьирует приблизительно от 1 до 10 ч от середины периода сна, предпочтительно от 1 до 8 ч, более предпочтительно от 1 до 4 ч после середины периода сна. Запасы жира в организме ожиревшего пациента, включая жир артериальных стенок, плазмы и жировой ткани, будут снижаться и после окончания лечения поддерживаться на уровне, существующем у худых людей в течение продолжительного периода времени. Худые или ожиревшие пациенты, проявляющие признаки резистентности к инсулину, или гиперинсулинемию и/или гипергликемию, или как признаки резистентности к инсулину, так и гиперинсулинемию и/или гипергликемию, которых лечат агонистом допамина или ингибитором пролактина, становятся более чувствительными к инсулину (т.е. снижают резистентность к инсулину), а эффекты гиперинсулинемии и/или гипергликемии снижаются на длительный срок. Таким образом, инъекции агониста допамина или ингибитора пролактина исправляют соотношения фаз двух невральных колебаний и их многочисленных циркадных проявлений, изменяя метаболизм на длительный срок, если не навсегда. Другими словами, результатом приуроченных к определенному времени суток ежедневных доз агониста допамина или ингибитора пролактина становится долгосрочное устранение основных патологический изменений, связанных с развитием диабета типа II. Уровни запасов жира в организме, концентрации инсулина в плазме и резистентность к инсулину, гипергликемия или все эти патологические изменения могут быть сведены к минимуму на длительные сроки посредством подобного лечения, от высоких уровней, часто наблюдающихся у страдающих ожирением пациентов с гиперинсулинемией, до более низких и более желательный уровней, присущих худым и чувствительным к инсулину людям.

Если речь идет о человеке, "ожирение можно определить как 20% превышение веса тела по сравнению с идеальным весом тела для данной популяции" (R.H.Williams, Textbook of Endocrinology, 1974, стр. 904-916). Время суток, в которое уровни пролактина и глюкокортикостероидов, соответственно, достигают пика в крови людей в течение дня, различается у худых и ожиревших субъектов, а пик у каждого типа субъектов можно без труда определить. Для других видов животных можно также легко определить, что представляют из себя худые и ожиревшие представители вида, путем соотнесения образцов веса тела с уровнями пролактина и глюкокортикостероидов в плазме, соответственно, худых и ожиревших особей. Эти уровни различаются у представителей разных видов, но среди представителей одного и того же вида существует тесная взаимосвязь между уровнями пролактина и глюкокортикостероидов, соответственно, в определенное время дня, в зависимости от тучности или худобы данного представителя.

Эти и другие черты настоящего изобретения можно лучше понять из данных экспериментальных работ с животными и людьми. В примерах обозначение СТ относится к циклу свет-темнота; первое число, следующее за СТ, относится количеству часов со светом; второе - к количеству часов в темноте в цикле. Так, СТ 14:10 относится к циклу, в котором 14 ч света и 10 ч темноты, а период дня выражается исходя из 2400 ч. Буква n относится к количеству животных в группе, а ВТ означает вес тела, г представляет граммы и МКГ выражает микрограммы.

Пример 1. Шести взрослым самкам свиней производили имплантацию с бромкриптином(10 мг на животное в день) в течение периода времени, во время которого изменялись периоды дневного света и темноты (12:12). Ожидалось, что бромкриптин из имплантатов будет проникать в кровоток в больших количествах ближе к началу дневной активности животных. Контрольную группу из шести свиней сходным образом подвергали периодам смены дневного света и темноты, но не вводили бромкриптин. Период темноты продолжался от 18.00 до 06.00, а период дневного света - от 06.00 до 18.00. Ежедневно у животных брали кровь с интервалами в четыре часа в течение 14 дней для того, чтобы определить уровень кортизола в плазме (мкг/дл) и уровень пролактина в плазме (мкг/мл). Средние значения в каждой серии тестов и для каждой группы были следующими (см. табл. 1 и 2).

Эффекты имплантатов с бромкриптином на жировые запасы и концентрации в плазме триглицерида, глюкозы и инсулина приведены в табл.3.

Плазму исследовали в 16.00, 20.00 и 24.00 спустя две недели после лечения. Образцы брали у всех животных экспериментальной и контрольной групп.

Эти данные со всей очевидностью показывают, что имплантанты с бромкриптином изменяли фазовые отношения циркадных ритмов концентраций кортикостероидов и пролактина в плазме и вызывали изменения, благоприятные для диабетиков. Эти данные свидетельствуют о том, что ближе к заходу солнца, когда липогенез свиней в норме наибольший, бромкриптин снижал концентрацию триглицерина в плазме на 48%. Поскольку липид вырабатывается в печени и транспортируется кровью в жировую ткань, снижение триглицеридов является дополнительным свидетельством того, что бромкриптин обладает ингибирующим действием на синтез и депонирование жиров. Кроме того, хотя снижение концентрации инсулина в плазме и не было статистически значимым, бромкриптин снижал уровни глюкозы в плазме на 13% во время раннего периода темноты (2000-2400). Снижение уровня глюкозы в крови без повышения уровня инсулина можно объяснить снижением резистентности к инсулину (увеличенный гипогликемический ответ на инсулин). Бромкриптин уменьшал жировые запасы тела на 14% за 28 дней лечения.

Дальнейшие исследования были выполнены на людях, и они показали, что симптомы инсулин-независимого диабета (тип II), можно уменьшить посредством лечения бромкриптином. Ниже приводится примеры.

Пример 2. 50-летней женщине с симптомами диабета ежедневно давали таблетки бромкриптина (1,25-2,50 мг в день) сразу после пробуждения. В начале лечения концентрация глюкозы в крови была определена стандартной методикой и составила приблизительно 250 мг/дл. В течение недель последующего лечения уровни глюкозы в крови пациентки падали до 180 мг/дл, 155 мг/дл, 135 мг/дл, 97 мг/дл и 101 мг/дл. Уровни ниже 120 мг/дл натощак считаются нормальным. Вес тела и показатели жировых запасов также снизились на 12% в течение лечения.

Пример 3. 45-летнюю женщину лечили гипогликемическим препаратом (диабеназой), который снизил уровень глюкозы в крови с 250 мг/дл до приблизительно 180 мг/дл в течение года лечения. После ежедневного орального введения бромкриптина (парлодел, 1,25-2,5 мг в день) приблизительно спустя час после пробуждения, уровень глюкозы в крови резко упал до 80 мг/дл за 2 недели. Отмена гипогликемического препарата позволила уровню глюкозы несколько подняться и оставаться около 100 мг/дл (нормальный уровень) в последующие два месяца. В результате лечения бромкриптином вес тела и жировые запасы сократились примерно на 10%.

Пример 4. 55-летний мужчина, страдавший диабетом и весивший около 300 фунтов, не поддавался предыдущим попыткам лечения. В начале орального применения бромкриптина (парлодел, 2,5 мг в день), который давали между двумя и тремя часами после пробуждения, концентрация глюкозы в плазме составляла в среднем около 350 мг/дл. В течение 2,5 месяцев лечения бромкриптином вес тела и концентрация глюкозы в плазме постепенно, но постоянно снижались. Вес тела уменьшился на 22 фунта, а уровень глюкозы в плазме понизился до 160 мг/дл.

Следующие примеры демонстрируют эффект бромкриптина при лечении группы пациентов, мужчин и женщин, имеющих диагноз инсулин-независимого, типа II, диабета. Отдельные субъекты, упомянутые в примерах 2, 3 и 4, включены в популяцию в табл. 4.

Пример 5. Пятнадцать человек, страдавших инсулин-независимым (тип II) диабетом, лечили бромкриптином для установления эффектов лечения на жировые запасы тела и гипергликемию. Семерых пациентов (2 мужчин и 5 женщин) лечили оральным введением стимуляторов эндогенной секреции инсулина (гипогликемические лекарства: диабеназа и микроназа), а еще семеро пациентов (2 мужчин и 5 женщин) получали ежедневные инъекции (утром и вечером) инсулина. Только те из пациентов, кто показывали высокую гипергликемию (т.е. голодные уровни глюкозы натощак, превышающие 160 мг/дл) по утрам перед введением инсулина, или принимающие другие лекарства, были взяты для этого исследования. Одному пациенту мужского пола с ожирением, который отказался от традиционного способа лечения диабета, было разрешено принять участие в исследовании с бромкриптином, и его включили в группу, получающую гипогликемические препараты.

Бромкриптин принимали орально каждый день во время суток, рассчитанное для исправления циркадных гормональных ритмов, с целью получить соотношение фаз, приводящее к потере жировых запасов тела. В целом, бромкриптин вводился по утрам в течение 5 ч после пробуждения. Тошноты обычно избегали, начиная с более низких доз (1,25 мг) в течение 2-3 дней, и затем повышая уровни доз до 2,5 мг ежедневно У 10% пациентов наблюдалась легкая тошнота, которая быстро проходила, продолжалась только первые несколько дней. Пациентов инструктировали с тем, чтобы они не изменяли свою привычную дневную активность и пищу в течение лечения. Пациенты дисциплинированно выполняли все условия эксперимента, что подтверждалось еженедельными опросами пациентов, которые следили за количеством принятой пищи, и преходящие эффекты анорексии, иногда вызываемые большими дозами бромкриптина, в этом исследовании не наблюдались.

Толщина кожной складки измерялась на левой стороне тела специалистом по антропометрии в четырех областях: на бицепсе, на трицепсе, над лопаткой и над повздошной костью, согласно рекомендации Международной биологической программы. Процент телесного жира устанавливали из общего логарифма суммы четырех кожных складок, применяя уравнения Durnin и Rahman и Siri. Недавние исследования показали весьма точное совпадение данных о телесном жире, полученных методами гидроденситометрии и методами измерения толщины кожных складок. Измерения кожных складок производили в начале исследования и с последующими недельными интервалами. Одновременно измеряли давление крови. Натощак уровни глюкозы в плазме по утрам измеряли у пациентов диабетической группы по утрам и в начале лечения и спустя 4-8 недель. Результаты представлены в табл.4.

У каждого пациента с диабетом после 4-8 недель лечения бромкриптином снижались как концентрации глюкозы в крови, так и толщина кожных складок, как видно из табл. 4. Начальные концентрации глюкозы в крови натощак перед приемом утром диабетических лекарств составляли 28314 мг/дл и 23119 мг/дл для пациентов, принимавших инсулин и гипогликемические препараты, соответственно. Спустя 4-8 недель, средние концентрации глюкозы снизились (p <0,05 по таблице Стюдента) до 184 22 мг/дл (инсулин) и до 16619 мг/дл (гипогликемические препараты). Во время лечения бромкриптином трем пациентам полностью отменили оральные гипогликемические препараты, и при этом уровень глюкозы в крови оставался в пределах нормы (<120 мг/дл) в течение по меньшей мере двух месяцев после прекращения лечения бромкриптином, у трех остальных пациентов во время лечения бромкриптином были сокращены дозы гипогликемических препаратов и инсулина.

Жировые отложения существенно уменьшились в результате лечения бромкриптином пациентов с инсулин-независимым диабетом, принимавших гипогликемические препараты, о чем свидетельствует среднее уменьшение на 21% толщины кожных складок в четырех взятых областях. Это уменьшение количественно выражалось в средней потере веса на 10 фунтов для каждого пациента и уменьшении общих жировых отложений на 10,7% в течение 4-8 недель. У пациентов, получавших инсулин, эти величины сокращались в меньшей степени: кожные складки - 16%, жировые отложения - 3,1 фунта, % жировых отложений - 5,1. Вес тела был слегка снижен (2,4 фунта у каждого, статистически недостоверно) у пациентов, принимавших гипогликемические препараты, и вовсе не снизился у пациентов, принимавших инсулин.

Эти результаты показывают, что лечение бромкриптином может радикально снизить жировые запасы у человека. Лечение бромкриптином также существенно понижало гипергликемию в течение двух месяцев у пациентов с инсулин-независимым (тип II) диабетом. Эти результаты были достигнуты без изменения индивидуальных привычных диет и физических упражнений.

Удивительно, что сокращения жировых запасов тела (4,4% от веса тела), достигнутые в настоящем исследовании через 6 недель без какого-либо ограничения в диете, являются эквивалентными сокращениям, которых достигают низкокалорийной диетой (420 ккал в день) за тот же период времени. Напротив. Amatruda и соавторы сообщают о 8%-ном уменьшении веса тела у пациентов с ожирением, страдавших инсулин-независимым диабетом, из которых менее 50% могут быть отнесены за счет потерянного жира. Помимо этого, Kanders и др. сообщали о средней потере веса тела в 2,3 фунта за неделю у женщин с ожирением, не страдающих диабетом, соблюдавших ту же весьма низкокалорийную диету. Это также количественно выражается в потере приблизительно одного фунта жира в неделю при этих условиях низкокалорийной диеты, что на 1,4 фунта в неделю меньше, чем в среднем достигается при лечении бромкриптином в настоящем исследовании.

Сокращение телесного жира, получаемое при лечении бромкриптином, существенно отличается от сокращения, получаемого при ограничении потребляемых калорий. При очень низкокалорийных диетах только около 45% потерянного веса приходятся на жир: остальное приходится на белок, углеводы и воду.

Эти данные показывают, что метаболический статус, по крайней мере, частично регулируется взаимодействием циркадных нейроэндокринных ритмов. Эта гипотеза предполагает, что суточные ритмы кортизола и пролактина являются индивидуальными отражениями двух отдельных циркадных систем и что ежедневные инъекции этих гормонов могут скоординировать фазовые отношения этих двух систем. Таким образом, на модели хомячков было обнаружено, что 0-часовое отношение координирует циркадные колебания до образца, существующего у худых и чувствительных к инсулину животных, а 12-часовое отношение обеспечивает сохранение образца, существующего у ожиревших и устойчивых к инсулину животных. Другим важным добавлением к настоящему исследованию является то, что эффекты таймированных инъекций агониста допаминовых рецепторов или пролактин-ингибирующего препарата является продолжительными по времени. Однажды отрегулированное, фазовое отношение двух циркадных колебаний имеет тенденцию сохраняться на измененном уровне.

Изменение фазовых отношений двух циркадных нейроэндокринных колебаний подтверждаются изменениями фазовых отношений их циркадных проявлений. Эти ожидания полностью оправдались в том, что касается ритмов глюкокортикостероидов плазмы и пролактина. В некоторых видах животных фазовые отношения этих двух гормональных ритмов различаются у худых и ожиревших животных.

Показано, что фазовое отношение между циркадным ритмом концентрации инсулина в плазме и ритмом липогенного ответа на инсулин различно у худых и ожиревших животных. Несмотря на то, что дневные интервалы способности к липогенному ответу остаются около начала дня, фазы инсулинового ритма выраженно варьируют. Пик концентрации инсулина, например, наблюдается около начала светового периода у ожиревших самок хомячков, содержавшихся в условиях короткого светового дня. То есть дневные пики липогенного стимулятора (т.е. инсулина) и липогенного ответа на инсулин совпадают у ожиревших животных и не совпадают у худых животных.

Фазовые отношения пролактинового и инсулинового ритмов, а также ритмов тканевых ответов на эти гормоны, являются важными элементами регуляции липогенеза. Все эти ритмы, таким образом, должны быть скоординированы по фазам для регулирования липогенеза. Фазовые координации этих и, возможно, других ритмов, могут также отвечать за резистентность к инсулину.

Очевидно, что могут существовать различные модификации и изменения без отступления от идеи и рамок настоящего изобретения.