производные сахарина или их фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты или основания, фармацевтическая композиция, проявляющая активность ингибитора эластазы

Формула изобретения

1. Производные сахарина формулы I



где L - O или N, когда L означает O, R¹ означает 2,6-дихлор-3-[2-(4-морфолинил)этокси]бензоил, когда L означает N, то L вместе с R¹ представляет собой 4,5-ди(трет-бутилсульфонил)-1,2,3-триазол-1-ил,

R² - первичный или вторичный алкил из 2 - 4 атомов углерода;

R³ - низший алкокси на любом из 5-, 6- или 7-положений,

или их фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты, если соединение имеет основную функциональную группу, или их фармацевтически приемлемая аддитивная соль основания, если соединение имеет кислотную функциональную группу.

2. Производное по п.1, где R² - изопропил, а R³ - низший алкокси.

3. Производное по п.1, где R³ - 6-метокси.

4. Фармацевтическая композиция, проявляющая активность ингибитора эластазы, включающая эффективное количество активного ингредиента - производного сахарида и фармацевтически приемлемые добавки, отличающаяся тем, что в качестве активного ингредиента содержит соединение формулы I по п.1.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к производным сахарина, которые ингибируют ферментную активность протеолитических ферментов, к способам их получения, к способам их применения при лечении дегенеративных заболеваний и к их фармацевтическим композициям.

Ингибиторы протеолитических ферментов используются при лечении таких дегенеративных заболеваний, как эмфизема, ревматический артрит и панкреатит, в которых протеолиз является существенным элементом. Наиболее распространенным классом протеолитических ферментов являются сериновые протеазы. Некоторые сериновые протеазы характеризуются как химотрипсинподобные или эластазаподобные на основании специфики их субстрата. Химотрипсин и химотрипсиноподобные ферменты обычно расщепляют пептидную связь белка в месте, где остаток аминокислоты на карбонильной стороне представляет собой Trp, Tyr, Phe, Met, Leu или другую аминокислоту, которая содержит ароматическую или большую алкильную боковую цепь. Эластаза и эластазаподобные ферменты обычно расщепляют пептидную связь в месте, где остаток аминокислоты на карбонильной стороне связи представляет собой Ala, Val, Ser, Leu или другую малую аминокислоту. И химотрипсино-подобные и эластазаподобные ферменты содержатся в лейкоцитах, клетках молочных желез и секрециях поджелудочной железы высших организмов и выделяются многими типами бактерий, дрожжей и паразитов.

Mulvey др. патент США N 4195023, описывает способы ингибирования эластазы и лечения эмфиземы с помощью 4, 5, 6- или 7-R₁-2-R₂CO-1,2-бензизотиазолинон-1,1-диоксид(4,5,6-или 7-R₁-2-R₂CO-сахарина), где R₁ - галоген, алкокси, алкиламино, диалкиламино, алкоксикарбонил, амино, нитро или особенно водород и R₂ - водород, алкил, алкенил, алкинил, циклоалкил, галофенил, гетероарил или замещенный гетероарил, например, 2-(2-фуроил) сахарин, и их фармацевтические композиции.

Chen, патент США N 4263393, описывает 2-ароилметилсахарины, замещенные на ароиле и на сахариновом ядре, включающие, например, такое соединение, как 12,2-[(п-фторбензоил)метил] сахарин, используемый в фотографических элементах, фотопленках и в процессах получения электронов для иммобилизации соединений, которые должны принять по меньшей мере один электрон перед тем как высвободить способный диффундировать краситель или фотографический реагент.

Jones и др. , патент США N 4276298, описывает 2-R-1,2- бензизотиазолинон-1,1-диоксиды (2-R-сахарин), где R-фенил или пиридил, замещенный 1-5 фтором, нитро, за исключением мононитро, когда R является фенилом, трифторметилом, циано, алкоксикарбонилом, алкилкарбонилом, карбоксилом, карбамоилом, алкилациламино, алкилсульфонилом, N,N-диалкилсульфамилом, трифторметокси, трифторметилтио, трифторметилсульфонилом и трифторметилсульфинилом, используемыми в способах торможения протеаз, в частности, эластазы и лечении эмфиземы, ревматического артрита и других воспалительных заболеваний.

Reczek и др. в патенте США N 4350752 описывает 2- (гетероциклилметил) сахарины, замещенные или незамещенные на гетероциклиле и на сахариновом ядре, включающие, например, соединение 28,2-[(1- фентилтетразол-5-ил)тиометил] сахарин в виде блокированных фотографических реагентов, применяемых в фотографических элементах, фотопленках и процессах.

Dunlap и др., заявка PCT WO N 90/13549 описывает сахаринпроизводные, используемые в качестве ингибиторов протеолитических ферментов со структурной формулой



где

L представляет -O-, -S-, -SO-, или -SO₂-;

m и n каждое независимо 0 или 1;

R₁ - галоген, низший алканоил, 1-оксо-феналенил, фенил (или фенил, замещенный галогеном, низшим алкилом, низшим алкокси, нитро-, амино, низшим алкиламино или диалкиламино) или гетероциклил, выбранный из 1H-(5-тетразолила), 5-оксо-1-тетразолила, 5-тиоксо-1-тетразолила (когда R₂, как описано ниже, не является фенилтио), пиримидинила, 2-бензо-ксазолила, 2-бензотиазолила, 2-фталимидила, 2-(1,3,4-тиа-диазолила), 5-(1,2,4-тиадиазолила), 5-тиоксо-3-(1,2,4-тиадиазолила), 4-(5-оксо-1,3,4-тиадиазолила), 4,5-тиоксо-1,3-4-тиадиазолила), 3-(1,2,4-триазолила), 4-(1,2, 4-триазолила), (1,2,3-триазолила), 2-имидазолила или 3-(1,2,4-триазоло-[4,3-а] пиридинила), или из таких гетероциклил-групп, замещенных на любом доступном атоме азота низшим алкилом, гидрокси низшим алкилом, цикло-алкилом, 2-, 3- или 4-пиридинилом, карбокси низшим алкилом, низшим алкоксикарбоил низшим алкилом, аминокарбонил низшим алкилом, низшим алкиламино-карбонил низшим алкилом, ди-низшим алкиламино-карбонил-низшим-алкилом, амино-низшим-алкилом, низшим-алкиламино-низшим алкилом, ди-низшим-алкиламино-низшим-алкилом, 4-морфолинил-низшим-алкилом, 1-пиперидинил-низшим-алкилом, 1-пирролидинил-низшим-алкилом или фенилом (или фенилом, замещенным амино, низшим амино, ди-низшим-амино, низшим-алканамидо, N-низшим-алкил-низшим-алканамидо, карбокси-низшим-алканамидо, карбокси, карбо-низшим-алкокси, низшим-алкокси или галогеном), или такими гетероциклил-группами, замещенными на любом доступном атоме углерода нитро, низшим алкилом, амино, низшим алкиламино, ди-низшим алкиламино, циклоалкиламино, меркапто, низшим алкилтио, амино-низшим-алкилтио, низшим-алкиламино-низшим-алкилтио, ди-низшим-алкиламино-низшим-алкилтио, 4-морфолинил-низшим-алкилтио, 1-пиперидинил-низшим-алкилтио, 1-пирролидинил-низшим- алкилтио, карбо-низшим алкокси или фенилом (или фенилом, замещенным амино, низшим-алкил-амино, ди-низшим-алкиламино, низшим-алканамидо, N-низшим-алкил-низшим-алканамидо, низшим алкилом, низшим алкокси или галогеном).

R₂ - водород, карбо-низший-алкокси, фенил или фенилтио;

R₃ - водород, галоген, первичный или вторичный низший алкил, низший алкокси, карбо-низший-алкокси, фенил, фтор-низший-алкил, низший алкенил или циано;

R₄ - водород или 1 - 2 заместителя, выбранных из галогена, циано, нитро, амино, низшего алканамидо, фенил-низшего-алканамидо, дифенил-низшего-алканамидо, низшего алкилсульфонамино, полифтор-низшего-алкилсульфониламино, аминосульфонила, низшего алкила, полигало-низшего-алкила, циклоалкила, полигало-низшего алкокси, гидрокси, низшего алкокси, карбокси, гидроксиметила, формила, аминометила, низшего-алкил-сульфонила, полигало-низшего-алкил-сульфонила, низшего-алкил-сульфонил-амино-сульфонила и низшего-алкокси-полинизшего-алкиленокси; и где -CHR₂-группа присоединена либо к гетероатому L-половины, как описано выше, либо к гетероатому R₁-половины, с оговорками, что

(I) когда m и n равны 0, а R₂, R₃ и R₄ - все являются водородами, то R₁ не может быть галогеном;

(II) когда m-0, n-1, L-S, а R₂, R₃ и R₄ - каждый является водородом, то R₁ не может быть 1-фенил-1H-(5-тетразолилом);

(III) когда m-0, n-1, L-O или -S-, а R₂, R₃ и R₄ все являются водородами, то R₁ не может быть низшим алканоилом;

(IV) когда m-0, n-1, L-O, -S-, или -SO-, а R₂, R₃ и R₄ все являются водородами, или когда m-0, n-1, L-S, а R₂ и R₄ являются водородами и R₃ является галогеном, или когда m-0, n-1, L-SO- или -SO₂-, R₂ - карбонизший алкокси, а R₃ и R₄ оба водорода, то R₁ не может быть фенилом или замещенным фенилом.

В соответствии с одним из аспектов настоящего изобретения предлагается соединение, имеющее структурную формулу



в которой L представляет O или N, когда L означает O,

R¹ означает 2,6-дихлор-3-[2-(4-морфолинил)этокси] бензоил, когда L означает N, то L вместе с R¹ представляет собой 4,5-ди(трет-бутилсульфонил)-1,2,3-триазол-1-ил,

R² - первичный или вторичный алкил из 2 - 4 атомов углерода,

R³ - низший алкокси на любом из 5, 6- или 7-положений, или их фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты, если соединение имеет основную функциональную группу, или их фармацевтически приемлемая аддитивная соль основания, если соединение имеет кислотную функциональную группу.

Соединения формулы I ингибируют ферментную активность протеолитических ферментов и применяются в лечении дегенеративных заболеваний.

В другом аспекте изобретения дается способ получения соединения формулы I, который включает конденсирование соответствующего соединения структурной формулы II



где X - хлор или бром, с соответствующим соединением формулы: H-L"-R¹ в присутствии основания или с соответствующей основной солью соединения формулы: H-L"-R¹, где L"-N или O, для получения соответствующего соединения формулы I, где L-N или O.

Еще один аспект изобретения предусматривает способ получения соединения формулы I, который включает конденсирование соответствующего соединения формулы: X-CH₂-L"-R, где X - хлор или бром и L"-N или O, с соответствующим соединением со структурной формулой III



в присутствии основания или с его основной солью для получения соединения формулы I, где L-N или O.

Еще один аспект изобретения охватывает способ получения соединения формулы I, где L-R¹ является замещенным или незамещенным 1,2,3-триазол-1-илом, включающий конденсирование соответствующего соединения формулы II с азидом щелочного металла и затем процесс циклоприсоединения полученного 2-азидометил-4-R²-5,6 или 7-R³-сахарина с соответствующим замещенным или незамещенным ацетиленом.

В другом аспекте изобретения предлагается использование соединения формулы I для получения медикаментов для лечения у пациента дегенеративного заболевания в случае необходимости такого лечения.

И, наконец, изобретение предлагает фармацевтическую композицию для лечения дегенеративного заболевания, содержащую соединение формулы I в фармацевтическом носителе, в концентрации ингибирующей активность протеолитического фермента.

Сахарин - это 1,2-бензизотиазол-(2H)-3-он-1,1-диоксид, а соединения формулы I, которые являются 2-(R¹-L-CH₂)-4-R²-(5,6 и/или 7)-R³-1,2-бензизотиазол-(2H)-3-он-1,1-диоксидами, соответственно 2-(R¹-L-CH₂)-4-R²-(5,6 и/или 7)-R³-сахарины.

В соединениях формул I - IV "соответствующее" означает, что определенная переменная величина в одной формуле имеет такое же определение в другой.

Когда L-N, N вместе с R¹ представляет собой N-гетероциклил, то есть N является частью гетероциклического кольца и атомом, через который гетероциклическое кольцо связано с CH₂. N-гетероциклил является предпочтительно моноциклическим или бициклическим, замещенным или незамещенным, ароматическим или гидроароматическим N-гетероциклилом, а предпочтительнее всего - моноциклическим, замещенным, ароматическим N-гетероциклилом, например, 4,5-ди(т-бутилсульфонил)-1,2, 3-триазол-1-илом.

Когда L-O, связь между L и R¹ представляет собой сложноэфирную или подобную ей связь или эфирную или эфироподобную связь. Если она представляет собой сложноэфирную или ей подобную связь, R¹ предпочтительно является ацилом, где ацил - это низший алканоил или ацил аминокислоты или пептида или циклоалканкарбонил; моноциклический, бициклический или трициклический арил-низший-алканоил, незамещенный или замещенный на алканоиле гидрокси или низшим алкокси; моноциклический или бициклический, замещенный или незамещенный, ароматический или гидроароматический C-гетероциклилкарбонил; моноциклический замещенный или незамещенный арилокси-2-низший-алканоил, или более предпочтительно - моноциклический, бициклический или трициклический, замещенный или незамещенный ароил, а предпочтительнее всего - моноциклический замещаемый или незамещенный ароил.

В проведении процесса получения соединения формулы I из соответствующего соединения формулы II и соответствующего соединения H-L"-R¹ или соответствующего соединения формулы III и соответствующего соединения X-CH₂-L"-R¹ в присутствии основания, основанием может служить любое основание, которое не является реагентом в условиях данной реакции, и предпочтительно представляет собой карбонат щелочного металла, алкоксид щелочного металла, три-низший алкиламин, низший алкоксид таллия, 1,8-диазабицикло-[5.4.0] ундек-7-ен или 7-метил-1,5,7-триазабицикло [4.4.0] дек-5-ен. В условиях реакции основание может образовать основную соль H-L"-R¹ или соединения формулы III, которое затем реагирует с соединением формулы I, или X-CH₂-L"-R¹ соответственно. Основная соль H-L"-R¹ или соединения формулы III может также быть получена отдельно и затем конденсироваться с соединением формулы II или X-CH₂-L"-R¹ соответственно и представляет собой предпочтительно щелочной металл, особенно цезий или его таллиевые соли. Конденсация проводится в органическом растворителе или смеси органических растворителей, инертных в условиях данной реакции, например, ацетоне, метилэтилкетоне, ацетонитриле, тетрагидрофуране, диэтиловом эфире, диметилформамиде, N-метилпирролидоне, дихлорметане, ксилоле, толуоле, низшем алканоле или их смеси при интервале температур от t окружающей среды до t кипения растворителя или смеси растворителей.

В получении соединения формулы I, где L-R¹ - замещенный или незамещенный 1,2,3-триазол-1-ил, азидом щелочного металла является предпочтительно, азит натрия. Конденсация соответствующего соединения формулы II с азидом щелочного металла проводится с нагреванием или охлаждением, или без них, предпочтительно при комнатной температуре, в инертном растворителе, например, бензоле, толуоле или диметилформамиде, с возможным использованием крон-эфира, например, 18-крон-6 эфира. Циклизация полученного 2-азидометил-4-R²-5,6 или 7-R³- сахарина с соответствующим замещенным или незамещенным ацетиленом проводится, предпочтительно, в том же инертном растворителе с нагреванием.

Соединения формул II, III, а также формул H-L-R¹ и X-CH₂-L-R¹ известны или получаются известными способами или способами, описанными ниже.

Соединение формулы III можно получить диазотированием соответствующего низшего алкил 2-амино-3,4 или сложного эфира 5-R³-6-R⁴-бензоата, хлорсульфонилированием полученной у соли 2-диазония низшего-алкил 3,4 или сложного эфира 5-R³-6-R⁴- бензоата диоксидом серы и хлоридом меди, и циклизацией полученного низшего-алкил 2-хлорсульфонил-3,4 или сложного эфира 5-R³-6-R⁴-бензоата с аммиаком. Гидроксиметилирование полученного соединения формулы III формальдегидом дает соответствующее гидрокси-соединение. Замещением гидроксила в полученном соединении хлоридом или бромидом с использованием, например, тионилхлорида, тионилбромида, трихлорида фосфора или трибромида фосфора, дает соответствующее соединение формулы II.

Соединение формулы II можно также получить фенилтиометилированием соответствующего соединения формулы III или его основной соли фенилхлорметилсульфидом и замещением фенилтио в полученном 2-фенилтиометил-4-R²-5,6 или 7-R³-сахарине хлоридом или бромидом с помощью, например, сульфурил бромида или хлорида.

Соединение формулы II, где X - хлор, можно также получить в один этап из соответствующего соединения формулы III хлорметилированием параформальдегидом и хлортриметилсиланом в присутствии хлорида олова.

Соединение формулы III можно также получить литиированием соответствующего 2-R²-3,4 или 5-R³-N, N-ди-низшего-алкил-бензамида низшим-алкил-литием, аминосульфонилированием полученного 2-R²-3,4 или 5-R³-6-литио-N,N-ди-низшего-алкилбензамида диоксидом серы, а затем гидроксиламин-0-сульфокислотой или сульфурил хлоридом, а затем аммиаком, и циклизацией полученного 2-R²-3,4 или 5-R³-6- аминосульфонил-N,N-ди-низшего-алкилбензамида в нагреваемой с обратным холодильником уксусной кислоте.

Соединение формулы III, в которой R² - первичный или вторичный алкил из 2-4 углеродных атомов, можно получить литированием соответствующего 4-метил-5,6 или 7-R³-сахарина двумя молярными эквивалентами низшего алкил-лития в инертном растворителе, например, тетрагидрофуране (ТГФ) и алкилированием полученного 4-литиометил-5,6 или 7-R³-сахарина подходящим алкилгалидом. Обе реакции проводятся при температуре, находящейся в пределах от -80 до -50^oC. Вышеописанный 2-R²-3,4 или 5-R²-N,N-ди-низший-алкилбензамид, в котором R² - первичный или вторичный алкил из 2 - 4 атомов углерода, можно получить подобной последовательностью литирование-алкилирование, начиная с соответствующего 2-метил, этил или пропил-3,4 или 5-R³-N,N-ди-низшего алкилбензамида.

Соединение формулы III, где R²- первичный или вторичный алкил из 2 - 4 углеродных атомов, можно также получить введением R² ранее в синтез. Сопряженное добавление подходящего R²-купрата к 2-циклогексенону и метоксикарбонилирование полученного энолята меди с метилцианоформатом дает соответствующий 2-метоксикарбонил-3-R²-циклогексанон. Энольная этерификация с бензилтиолом и кислой глиной дает смесь соответствующих метилового эфира 6-R²-2-бензилтио-1-цикло-гексенкарбоновой кислоты и метилового эфира 6-R²-2-бензил-тио-3-циклогексенкарбоновой кислоты, ароматизация которой дихлордицианобензохиноном дает соответствующий метиловый эфир 2-R²-6-бензилтиобензойной кислоты. Окисление-хлорирование-дебензилирование его хлором в водной уксусной кислоте дает метиловый эфир 2-R²-6-хлорсульфонилбензойной кислоты, циклизация которого с аммиаком дает соответствующий 4-R²-сахарин формулы III.

При получении соединения формулы I, где L-R¹ - замещенный или незамещенный 1,2,3-триазол-1-ил, из соответствующего 2-азидометил-4-R²-5,6 или 7-R³-сахарина, конденсация соответствующего соединения формулы II с азидом щелочного металла, предпочтительно азидом натрия, проводится в инертном растворителе, например, бензоле или толуоле, при 0 - 150^oC. Без выделения, полученный 2-азидометил-4-R²-5,6 или 7-R³-сахарин подвергается циклизации с соответствующим замещенным или незамещенным ацетиленом в таком же растворителе при 0 - 150^oC для получения соединения формулы I.

Фармацевтически приемлемой аддитивной солью кислоты или основания может служить любая фармацевтически приемлемая аддитивная соль кислоты или основания, но предпочтительно та, которая имеет распространенный анион, например, хлористоводородная соль, или распространенный катион, например, соль натрия или калия соответственно. Если соль, имеющая распространенный анион или катион, неприемлема из-за ее некристалличности или недостаточной растворимости или гигроскопичности, можно использовать соль, имеющую менее распространенный анион, например, метансульфонат, или менее распространенный катион, например соль диэтиламмония. Во всяком случае, в применении к млекопитающим соль кислотного или основного присоединения должна быть нетоксичной и не должна мешать действию торможения эластазы в форме свободного основания или кислоты соединения формулы I.

pK_k-значения соединений формулы H-L-R¹ известны или могут быть определены любым из нескольких известных методов, например, как описано Adrien Albert и E.P.Serjeant (The Determination of Ionization Constans, A. Laboratory Manual, Third Edition, Chapman and Hall, London and New York, 1984) титрованием в воде (главы 2 и 3) или ультрафиолетовым спектрометрическим определением в воде (глава 4), или могут быть рассчитаны из известных или таким образом определенных значений pK_k близких соединений. CRC Handbook of Chemistry and Phisics (72nd Edition, CRC Press, Inc., Boca Raton-Ann Arbor-Boston, 1991, с. 8 - 39 и 8 - 40) дает константы диссоциации и значения pK (pK_k) несколько сотен органических кислот. G.Kortum, W.Vogel и K.Andrussow (Dissociation Constans of Organic Acids in Aqueous Solutions, Butterworths, London, 1961) дает константы диссоциации 1056 органических кислот.

В процессах получения и примерах, описанных ниже, предполагается, что структуры продуктов известны из структур исходных материалов и реакций. Очищение или чистота и подтверждение строения исходных материалов и продуктов определялись или измерялись диапазоном температур плавления (д. п.), оптическим вращением, элементарным анализом, инфракрасным спектральным анализом, ультрафиолетовым спектральным анализом, масс-спектральным анализом, ЯМР-спектральным анализом, газ-хроматографией, колонной хроматографией, высокоэффективной жидкостной хроматографией, жидкостной хроматографией среднего давления и/или тонкослойной хроматографией (т. с.х).

Следующие примеры иллюстрируют изобретение, но их ни в коем случае нельзя рассматривать как ограничивающие его объем.

Пример 1. Получение исходного материала 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарин [II; R² = i-Pr, R³ = 6-MeO, X=Cl]

(а) 2- аминосульфонил 6-изопропил-4-метокси-N,N-диэтил- бензамид

К раствору 300 мл N, N, N", N"- тетраметилэтилендиамина (1,99 моль) в 4 л безводного эфира добавлялось 1550 мл втор-BuLi (1,3 М) и смесь охлаждалась до -70^oC в атмосфере азота. По каплям в течение 30 мин добавлялся раствор 454,2 г 2-изопропил-4-метокси-N, N-диэтилбензамида (1,82 моль) в 300 мл безводного эфира. Во время добавления температура поддерживалась на уровне или ниже -60^oC:. После добавления смесь перемешивалась при -70^oC в течение 1 ч, выстаивалась до подогрева до -50^oC, поддерживалась при -50^oC 30 мин и затем снова охлаждалась до -70^oC. С помощью канюльной трубки добавлялся раствор 200 г SO₂ в 200 мл сухого эфира, охлажденного предварительно до -40^oC, при положительном давлении азота в течение периода 20 мин. Температура реакционной смеси в течение добавления поддерживалась на уровне ниже -40^oC. Белый порошкообразный осадок сульфината арил-лития выделялся почти сразу же.

После добавления охлаждающая ванна удалялась, и смесь перемешивалась при температуре окружающей среды в течение 2 ч, затем охлаждалась до -5^oC. При помешивании по каплям в течение 15 мин добавлялось 190 мл хлорида сульфурила, температура во время добавления поддерживалась ниже 10^oC. После дальнейшего перемешивания в течение 30 мин при 0 - 5^oC, белый нерастворимый осадок отфильтровывался и промывался 2 л безводного эфира. Удаление растворителя при атмосферном давлении давало полученный сульфонилхлорид (неочищенное темное масло), который растворялся в 1,4 л ТГФ. Раствор охлаждался до -10^oC и в него добавлялось порциями в течение 15 мин 540 мл концентрированного водного раствора аммиака (28%). Температура поддерживалась на уровне 15^oC или ниже в продолжение добавления. После 15 мин перемешивания при температуре окружающей среды ТГФ и избыток аммиака удалялись под вакуумом, что давало темное масло, которое разбавлялось 6,0 воды и подкислялось до pH 1 3NHCl. Полученное твердое вещество желтого цвета собиралось фильтрацией, промывалось 800 мл воды, высушивалось при 60^oC под вакуумом в течение 18 ч перекристаллизовывалось из смеси 800 мл этилацетата и 3 л гексана для выхода 429,6 г (72%) 2-аминосульфонил-6-изопропил-4-метокси-N,N-диэтилбензамида, т.пл. 122 - 125^oC.

(b) 4-изопропил 6-метоксисахарин

Раствор 429,6 г диэтилбензамида (1,31 моль) в 1,5 л уксусной кислоты нагревался с обратным холодильником 20 ч, затем охлаждался до комнатной температуры. Растворитель удалялся под вакуумом. Маслянистый остаток растворялся в 6 л воды и pH доводился до 1 с помощью 6NHCl. Неочищенный продукт собирался фильтрацией, промывался 2 л воды, высушивался при 60^oC в вакууме 18 ч и перекристаллизовался из этилацетата/гексана для выхода 303 г (91%) 4-изопропил-6-метоксисахарина, т.пл. 188^oC.

(с) 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарин

К суспензии 24 г параформальдегида (0,8 моль) и 86,4 г хлортриметилсилана (1,6 моль) в 200 мл 1,2-дихлорэтана добавлялось 0,8 мл безводного хлорида олова (IV) и полученный раствор перемешивался на паровой бане 1 ч. К чистому раствору добавлялся 4-изопропил-6-метоксисахарин (51,4 г, 0,2 моль) и смесь нагревалась с обратным холодильником 18 ч, охлаждалась до комнатной температуры и выливалась в воду. Органический слой отделялся, промывался 50 мл 2N раствором гидроксида натрия, высушивался над безводным сульфатом магния и концентрировался под вакуумом. Остаток очищался кристаллизацией из этилацетата/гексана для выхода 57 г (87%) 2-хлорметил-4-изопропил-6-метокси-сахарина, т.пл. 151^oC.

Получение соединений формулы I

2-(4,5-ди(т-бутилсульфонил)- 1,2,3-триазол-1-ил] метил-4-изопропил-6-метоксисахарин

[I; R² = iPr, R³ = 6-MeO, L-R¹ = 4,5-ди(т-BuSO₂-1,2,3-триазол-1-ил)]

Раствор 18-крон-6 эфира (0,60 г) и бензола (60 мл) нагревался с обратным холодильником с водным сепаратором в течение 1 ч, затем охлаждался до комнатной температуры. Добавлялись 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарин (3,03 г) и азид натрия (0,65 г) и смесь перемешивалась в течение 1 нед при комнатной температуре, затем хроматографировалась на силикагелевой колонке (силикагель 60, 83 г) с использованием бензола в качестве элюента. Фракции, содержащие продукт, определенный т.с.х., соединялись и концентрировались, давая 2-азидометил-4-изопропил-6-метоксисахарин в виде раствора в бензоле (250 мл).

К части (75 мл) раствора 2-азидометил-4-изопропил-6-метоксисахарина в бензоле добавлялся ди(т-бутилсульфонил) ацетилен (1,50 г). Полученный раствор нагревался с обратным холодильником 65 ч, затем подвергался хроматографии на силикагеле (Kieselqel 60, 68 г) с использованием в качестве элюента сначала бензола, а затем циклогексан-этилацетата (90:10, затем 85:15, затем 75:25). Фракции, содержащие продукт, определенный т.с.х., соединялись и перекристаллизовывались из бензол-циклогексана. Часть полученного продукта (1,5 г, т.пл. 204 - 205^oC, выход обоих этапов 26%) перекристаллизовывалась дважды из этилацетата, давая 2-[4,5-ди(т-бутил-сульфонил)-1,2,3-триазол-1-ил] метил-4-изопропил-6-метокси-сахарин в виде бледно-желтых удлиненных призм (0,15 г, т.пл. 207,5 - 209^oC).

Титрованием в воде значения pK_k 1,2,3-триазол-4,5-динитрила и диметилового эфира 1,2,3-триазол-4,5-дикарбоновой кислоты были найдены как 1,6 и 4,4 соответственно. Ультрафиолетовым спектрофотометрическим определением в воде значение pK_k 1,2,3-триазол-4,5-дикарбоксамида было найдено как 5,3. Путем сравнения с этими значениями pK_k значение pK_k 4,5-ди(т-бутилсульфонил)-1,2,3-триазола оценивалось равным 2 или менее.

Пример 2.

2-{ 2, б-дихлор-3-[2-(4-морфолинилэтокси)] бензилоксиметил}-4-изопропил-6-метоксисахарин

[I; R² = iPr, R³ = 6-MeO, L = O, R¹ = 2,6-ди-C1-3-[2-(4-морфолинилэтокси)бензоил]

Смесь 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарина (3,12 г), 2,6-дихлор-3-[2-(4-морфолинилэтокси)] бензойной кислоты (3,0 г), карбоната калия (1,93 г) и бромида тетрабутиламмония (0,75 г) в диметилформамиде (50 мл) нагревалась при 75^oC в течение 1,5 ч, охлаждалась до комнатной температуры и выливалась в воду (400 мл). Полученный осадок собирался фильтрацией, промывался водой (200 мл) и гексаном (200 мл) и высушивался, давая 2-{2,6-дихлор-3-[2-(4-морфолинилэтокси)] бензоилоксиметил}-4-изопропил-6-метоксисахарин (6,1 г; теория, 5,50 г).

Подобная конденсация 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарина и 2,6-дихлор-3-[2-(4-морфолинилэтокси)] бензойной кислоты с карбонатом калия в N-метилпирролидоне при комнатной температуре и перекристаллизация продукта из этанола давали 2-{2,6-дихлор-3-[2-(4-морфолинилэтокси)]бензоилоксиметил}-4-изопропил-6-метоксисахарин с выходом 69% (т.пл. 146^oC).

Насыщенный эфирный хлорид водорода добавлялся к раствору 2-{2,6-дихлор-3-[2-(4-морфолинилэтокси)] бензоилоксиметил} -4-изопропил-6- метоксисахарина (4,6 г из первого вышеописанного его получения) в эфир-дихлорметане (9: 1, 100 мл). Полученный осадок собирался фильтрацией, промывался эфиром и циклогексаном и высушивался, давая хлористоводородную соль 2-{2,6-дихлор-3-[2-(4-морфолинилэтокси)] бензоилоксиметил}-4-изопропил-6-метоксисахарина (3,9 г, выход обоих этапов 89%).

Путем сравнения с известными значениями pK_k известных замещенных бензойных кислот, значение pK_k 2,6-дихлоро-3-[2- (4-морфолинилэтокси)]бензойной кислоты оценено от 2 до 3.

Пример 3.

2-(1-фенилтетразол-5-ил)тиометил-4-иэопропил-6-метоксисахарин

[I; R² = iPr, R³ = 6-MeO, L = S, R¹ = 1- фенилтетразол-5-ил]

Смесь 2-хлорметил-4-изопропил-6-метоксисахарина (0,25 г) и натриевой соли 1-фенилтетразол-5-теола (0,173 г) в диметилформамиде (10 мл) нагревалась при 60 - 80^oC 8 ч, затем выливалась в воду со льдом, содержащую насыщенный водный бикарбонат натрия. Полученная смесь экстрагировалась эфиром. Эфирная вытяжка промывалась водой и насыщенным водным хлоридом натрия, пропускалась через силикагель и освобождалась от эфира, давая 2-(1- фенилтетразол-5-ил)тиометил-4-изопропил-6-метоксисахарин в виде пены (0,3 г, 83%).

Ультрафиолетовым спектрофотометрическим определением в воде значение pK_k 1-фенилтетразол-5-тиола было определено как 2,9.

Пример 4.

2-(1-фенилтетразол-5-ил)сульфинилметил-4-изопропил-6-метоксисахарин

[I; R² = iPr, R³ = 6-MeO, L = SO, R¹ = 1- фенилтетразол-5-ил]

Окисление 2-(1-фенилтетразол-5-ил)тиометил-4-изопропил-6-метоксисахарина одним молярным эквивалентом м-пербензойной кислоты в инертном растворителе дает 2-(1-фенилтетразол-5-ил) сульфинилметил-4-изопропил-6-метоксисахарин.

Пример 5.

2-(1-фенилтетразол-5-ил)сульфонилметил-4-изопропил-6-метоксисахарин

[I; R² = iPr, R³ = 6-MeO, L = SO₂, R¹ = 1- фенилтетразол-5-ил]

Окисление 2-(1-фенилтетразол-5-ил)сульфинилметил-4-изопропил- 6-метоксисахарина одним молярным эквивалентом м-пербензойной кислоты в инертном растворителе дает 2-(1-фенилтетразол-5-ил) сульфонилметил-4-изопропил-6-метокси-сахарин.

Пример 6.

2-(4-фенил-5-тионо-4,5-дигидротетразол-1- ил)метил-4-изопропил-6-метоксисахарин

[I; R² = iPr, R³ = 6-MeO, L-P¹ = -N-N=N-N (Ph)-C(=S)-, где первое N присоединено к C]

Конденсация натриевой соли 4-изопропил-6-метоксисахарина с 2-хлорметил-4-фенил-5-тионо-4,5-дигидротетразолом в диметилформамиде с нагреванием дает 2-(4-фенил-5-тионо-4,5-дигидротетразол-1-ил)метил-4-изопропил-6-метоксисахарин.

Пример 7.

2-ацетоксиметил-4-изопропил-6-метоксисахарин

[I; R² = ipr, R³ = 6-MeO, L = O, R¹ = CH₃CO]

Конденсация 4-изопропил-6-метоксисахарина с водным формальдегидом в этаноле дает 2-гидроксиметил-4-изопропил-6-метоксисахарин, ацетилирование которого с уксусным ангидридом и каталитическим количеством серной кислоты дает 2-ацетоксиметил-4-изопропил-6-метоксисахарин.

Дополнительные примеры соединений формулы I были получены способами, описанными выше и в вышеупомянутых заявках сер. 07/514920 и Сер. 07/782016 и описываются ниже в значениях переменных величин R³, R² и L-R¹.

Были получены соединения формулы I, в которой R² - этил, н-пропил, изопропил, 2-бутил, диметиламино, метокси, этокси, и изопропокси.

Были получены соединения формулы I, в которой R³ - водород, 7-метил, 6-(4-метил-1-пиперазинил), 6-(1-метил-2-пирролил), 6-диметиламино, 5-нитро, 6-нитро, 6-гидрокси, 7-гидрокси, 5-метокси, 6-метокси, 7-метокси, 5,6-диметокси, 5,7-диметокси, 6,7-диметокси, 6-этокси, 6-изопропокси, 6-циклобутилокси, 6-[2-(4-морфолинил)этокси], 6-[(2,3-дигидрокси)-пропокси], 6-[(2,3-пропилендиокси)пропокси] , 6-[2,3-диметоксипропокси] , 6-[2-(2-метоксиэтокси)этокси] , 7-[2-(2- метоксиэтокси)этокси], 7-карбоксиметокси, 6-метоксикарбонилметокси, 6-(т-бутоксикарбонил) метокси, 6-бензилоксикарбонилметокси, 7-(т- бутоксикарбонил)метокси, 7-диметиламинокарбонил-окси, 6,7- метилендиокси, 6-фторо, 7-хлоро, 6-(н-пропил)-7-метокси, 6-метил-5,7-диметокси, 5-гидрокси-6-метокси и 6-диметиламино-7-хлор.

Были получены соединения формулы I, где L-N и N, взятое вместе с R¹ образует N-гетероциклил, где N-гетероциклил: 4,5-ди(т-бутилсульфонил)-1,2,3-триазол-1-ил, 4-фенил-5-тионо-4,5-дигидротетразол-1-ил, 4-(3-пиридил)-5-тионо-4,5-дигидротетразолил-1-ил, 1,1,3-триоксотетрагидро-1,2,5-тиадиазол-2-ил, 4,5-ди(метоксикарбонил)-1,2,3-триазол-1-ил, 4-фенисульфонил-1,2,3-триазол-1-ил, 4-метоксикарбонил-1,2,3-триазол-1-ил, 5-метоксикарбонил-1,2,3-триазол-1-ил, 4-фенил-5-этоксикарбонил-1,2,3-триазол-1-ил, 4-этоксикарбонил-5-фенил-1,2,3-триазол-1-ил, 4-карбокси-1,2,3-триазол-1-ил, 4-триметилсилил-5-фенилсульфонил-1,2,3-триазол-1-ил, 5-фенилсульфонил-1,2,3-триазол-1-ил, 4-фенилсульфонил-5-изопропил-1,2,3-триазин-1-ил, 4-изопропил-5-фенилсульфонил-1,2,3-триазол-1-ил, 4,5-ди(аминокарбонил)-1,2,3-триазол-1-ил, 4,5-дикарбокси-1,2,3- триазол-1-ил и соль мононатрия, 4-триметилсилил-5-диметиламиносульфонил-1,2,3-триазол-1-ил, 2-тионо-2,3-дигидро-5-(2-пиридил)-1,3,4-тиадиазол-3-ил, 4-(т-бутил)-5- диметиламиносульфонил-1,2,3-триазол-1-ил, 4-диметил-аминосульфонил-5-(т-бутил)-1,2,3-триазол-1-ил, 4-триметилсилил-1,2,3-триазол-1-ил, 4,5-дициано-1,2,3-триазол-1-ил, 4,5-ди(1-пиперидинилкарбонил)-1,2,3-триазол-1-ил, 4,5-ди (трифторметил)-1,2,3-триазол-1-ил, 4,5-ди(1-пиперидинилкарбонил)-1,2,3-триазол-2-ил, 3-бензилокси-4,5-дигидро-5-оксо-1,2, 4-оксадиазол-4-ил и 4,5-дициано-1,2,3-триазол-2-ил.

Было получено соединение формулы I, где L-O, а R¹ - низший алканоил, где низший алканоил - 2,2-диметилпропаноил.

Было получено соединение формулы I, где L-O, а R¹ - ацил аминокислоты или пептида, где ацил пептида - (N-бензоилглицил)- фенилаланил.

Было получено соединение формулы I, где L-O, а R¹ - циклоалканкарбонил, где циклоалканкарбонил - циклопропанкарбонил.

Были получены соединения формулы I, где L-О, а R¹ - арил-низший-алканоил, незамещенный или замещенный гидрокси или низшим алкокси, где замещенный или незамещенный арил-низший-алканоил: 2- метил-2-фенилпропаноил, 2-метил-2-(4-хлорфенил)пропаноил, 2-(2-хлорфенил)пропаноил, 2-гидрокси-2-фенилацетил, 2-метокси-2-фенилацетил или 2-гидрокси-2-фенил-пропаноил.

Были получены соединения формулы I, где L-О, а R¹ - моноциклический, замещенный или незамещенный, ароматический или гидроароматический С-гетероциклилкарбонил, где C-гетероциклилкарбонил : 3, 5-дихлорпиридил-4-карбонил, 3,5-дихлор-2-[2-(4-морфолинил) этокси] пиридил-4-карбонил, 3,5-дихлор-2-[2-(диметиламино)этокси] пиридил-4-карбонил, тиофен-3-карбонил, 3-метилтиофен-2-карбонил, тиофен-2-карбонил, 3-хлортиофен-2-карбонил, 2-оксопирролидинил-5-карбонил, 3,5-диметил-изоксазол-4-карбонил, 2,4-диметилпиридил-3- карбонил и 1-фенил-3,5-диметилпиразол-4-карбонил.

Было получено соединение формулы I, где L-О, а R¹ - моноциклический замещенный арилокси-2-низший алканоил, где арилокси-2- низший-алканоил: 2-метил-2-(4-хлорфенокси)пропионил.

Было получено соединение формулы I, где L-0,а R¹ - бициклический или трициклический незамещенный ароил, где ароил: 2- нафтоил или 4-антраценоил.

Были получены соединения формулы I, где L-O, а R¹ - моноциклический замещенный или незамещенный ароил, где моноциклический замещенный или незамещенный ароил: 2,6-дихлор-3-[2-(4-морфолинил) этокси] бензоил, бензоил, 2,6-дихлорбензоил, 2, 6-дихлор-3-(4-морфолинилсульфонил) бензоил, 2,6-дихлор-3-(4-метил-1-пиперазинил сульфонил)бензоил, 2, 6-дихлор-3-(карбоксиметиламиносульфонил)бензоил, 2,6-дихлор-3-[N-(4-изопропил-2-сахаринилметил)-N-(бензилоксикарбонил)аминосульфонил бензоил, 2,6-дихлор-3-(1-пиперазинил сульфонил)бензоил, 2,6-дихлор-3-[N-(2-диметиламиноэтил)-N-(метил) аминосульфонил бензоил, 2,6-дихлор-3-гидроксибензоил, 2,6-дихлор-3-бензилоксибензоил, 3-бензилоксибензоил, 2,6-дихлор-3-(4-бензил-1-пиперазинилсульфонил) бензоил, 2, 6-дихлор-3-карбокси- метоксибензоил, 2,6-дихлор-3-метоксибензоил, 2,6-дихлор-4-метоксибензоил, 2,6-дихлор-3-[2-(диметиламино)этокси] бензоил, 2,6-дихлор-3-[N-(3-диметиламинопропил)-N-(метил) аминосульфонил]бензоил, 2,6-дифтор-3-(4-метил-1-пиперазинилсульфонил) бензоил, 2,4,6-трихлорбензоил, 2,6-дифторбензоил, 2,6-диметилбензоил, 2,4-дихлорбензоил, 2,6-дихлор-4-[2-(4-морфолинил)-этокси]бензоил, 2,6-дихлор-3-[2- (1-пирролидинилэтокси] бензоил, 2, 6-дихлор-3-[2-(1-пиперидинил)этокси] бензоил, 2,6-дихлор-3-[2-(диэтиламино)этокси]бензоил, 2,6-дифтор-4-метоксибензоил, 2,6-диметокси-4-бензилоксибензоил, 2,4,6-триметоксибензоил, 2,6-дихлор-4-этоксикарбонил-бензоил, 2-изопропилбензоил, 2,6-диметокси-4-ацетиламинобензоил, 2, 6-диметил-4-бензилоксибензоил, 2,6-диметил-4-нитробензоил, 2-изопропил-4-метоксибензоил, 2,6-диметокси-3- метилсульфониламинобензоил и 2-изопропил-4,5-диметоксибензоил.

Было получено соединение формулы I, где L-О, а R¹ - арил-низший-алкиламинокарбонил, где арил-низший-алкиламинокарбонил: фенилметиламинокарбонил.

Было получено соединение формулы I, где L-О, а R¹ - (моно или ди-низший-алкил, фенил или низший алкоксифенил) фосфинил, где (моно или ди-низший алкил, фенил или низший алкоксифенил) фосфинил дифенилфосфинил.

Было получено соединение формулы I, где L-О, а R¹ - (моно или ди-низший-алкил, фенил или фенил-низший-алкил) фосфоно, где (моно или ди-низший-алкил, фенил или фенил-низший-алкил) фосфоно: диэтилфосфоно.

Были получены соединения формулы I, где L-О, а R¹-C-гетероциклил, где C-гетероциклил: 2-метил-4-пирон-3-ил, 6- гидроксиметил-4-пирон-3-ил, 3,4-дихлорпиридазин-2-ил, 3-фенилкумарин-7-ил, 4-фенилкумарин-7-ил, 6-хлор-4-трифтор-метилкумарин-7-ил, 4-метилкумарин-7-ил, 3-(бензотиазол-2-ил) кумарин-7-ил, сахарин-6-ил, 4-(4-морфолинил)-1,2,5-тиадиазол-3-ил, 5-фенил-1,3,4-тиадиазол-2-ил, 5-фенил-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 3-метилтио-6-метил-1,2,4- триазин-5-ил, 4-этоксикарбонилизоксазол-5-ил, 1,2,5-тиадиазол-3-ил, 2, 5-диоксопирролидин-1-ил, 2-метил-4,5-ди(гидроксиметил)-3-пиридил, 5-метоксикарбонилизоксазол-3-ил и 1-метил-2-этоксикарбонилиндол-3-ил.

Были получены соединения формулы I, где L-О, а R¹- остаток оксима, где остаток оксима: 2,5-диоксопирролидин-1-ил и 3,4-дигидро-3-оксо-5-фенилпиразол-4-имино.

Было получено соединение формулы I, где L-О, а R¹ - трициклический замещенный арил, где трициклический замещенный арил: 1-оксо-7-феналенил.

Были получены соединения формулы I, где L-О, а R¹ - моноциклический замещенный арил, где моноциклический замещенный арил: 2,5-дифтор-4-(4-морфолинилсульфонил)фенил, 2,4-дихлор-3-[2-(4-морфолинил)этоксикарбонил)]фенил, 2,4-дихлорфенил, 2,4,6-трихлорфенил, 2,4-дихлор-3- (4-метилпиперазинилкарбонил)фенил, 2,4-дихлор-3-карбоксифенил, 3-[2-(4-морфолинил)этоксикарбонил)] фенил, 3-(4- метилпиперазинилкарбонил)фенил, 2,4-дихлор-3-[2-(4-морфолинил) этиламинокарбонил] фенил, 4-(4-морфолинилсульфонил)фенил, 2,4-дихлор-6-(4-морфолинилсульфонил)фенил, 2-хлор-4-(4- морфолинилсульфонил)фенил, 2-метоксикарбонил-5-метоксифенил, 2-фтор-4-(4-морфопинилсульфонил)фенил, 2-хлор-4-(4- тиаморфолинилсульфонил)фенил, 2-хлор-4-(4,4-диокси-4- тиаморфолинилсульфонил)фенил, 2,6-дифтор-4-(4-морфолинилсульфонил) фенил, 2,4-дифтор-6-(4-морфолинилсульфонил)фенил, 3,4-дифтор-6-(4-морфолинилсульфонил)фенил, 2-(4-морфолинилсульфонил)-4-фторфенил, 4-[2-(4-морфолинил)этиламинокарбонил] фенил, пентафторфенил, 3-(4-метилпиперазинилсульфонил) фенил, 3-(4-морфолинил-этокси) фенил, 3-[2-(диметиламино этил)метиламиносульфонил] фенил, 4-метилсульфонилфенил, 3-диэтоксифосфонилфенил, 2- трифторметил-4-(4-морфолинилсульфонил) фенил, 2,6-дихлор-4-(4,5-дигидрооксазол-2-ил)фенил, 3,5-дифтор-4-(4-морфолинилкарбонил)фенил, 3,5-дифторфенил, 2,5-дифтор-4-(4-метилпиперазинилсульфонид)фенил, 2,6-дифтор-4-(4-метилпиперазинилсульфонил) фенил, 3,5-дифтор-4-(4- морфолинилсульфонил) фенил, 2,6-дихлор-4-этоксикарбонилфенил, 1- оксоциклогептатриен-2-ил и 3,5,6-триметилхинон-2-ил.

Было получено соединение формулы I, где L-О, а R¹ - моноциклический замещенный гидроароматический 3-оксокарбоцикл-1-енил, где 3-оксокарбоцикл-1-енил; 2-метил-3-оксо-1-циклопентенил.

Было получено соединение формулы I, где L-O, а R¹ - моноциклический замещенный ароматический 3-оксо-C-гетеро-цикл-1-енил, где 3-оксо-C-гетероцикл-1-енил: 6-метил-1-пирон-4-ил.

Были получены соединения формулы I, где L-S, а R¹-циано, бензоил и этокситиокарбонил.

Были получены соединения формулы I, где L-S, SO₂ или SO, а R¹ - моноциклический замещенный арил, где моноциклический замещенный арил: 2-фтор-4-(4-морфолинилсульфонил)фенил.

Были получены соединения формулы I, где L-S, а R¹ - моноциклический замещенный ароматический C-гетероцикл, где моноциклический замещенный ароматический C-гетероцикл; 1-фенилтетразол-5-ил, 1-[2-(4-морфолинил)этил]тетразол-5-ил, 1-(диметиламинокарбонилметил)тетразол-5-ил, 1-(3-пиридил)тетразол-5-ил, 1-метилтетразол-5-ил, 5-метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил, 5-циклогексиламино-1,3,4-тиадиазол-2-ил, 1-(4-морфолинилпропил)- тетразол-5-ил, 5-[2-(4-морфолинил)этилтио] -1,3,4-тиадиазол-2-ил, 5-[2-(1-пиперидинил)этилтио]-1,3,4-тиадиазол-2-ил, 5-(2-диэтиламиноэтил)-1,3,4-тиадиазол-ил, 5-(2-ди-метиламиноэтилтио)-1,3,4-тиадиазол-ил, 5-[2-(4-морфолинил)этил] -1,3,4-тиадиазол-2- ил, 5-[2-(1-пиперидинил)этил]-1,3,4-тиадиазол-2-ил, 5-фенил-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 5-(2-фурил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 1-(3-сукциноиламинофенил)тетразол-5-ил, 5-бензил-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 5- гидрокси-6-метил-6,7-дигидро-1Н-1,2,4-триазоло[3,4-в] [1,3] тиазин-3-ил, 5-(3-пиридил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 1-метил-5-этокси-1,3,4-триазол-2-ил, 5-(4-трифторметилфенил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 5-(4-метоксифенил)-1,3,4-оксадиол-2-ил, 5-(4-пиридид)-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 5-(4-бифенилил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 5-(2-пиразинил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 4-(этоксикарбонилметил) -тиазол-2-ил, 5-(2-пиридил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 5-(3-фурил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 4-этоксикарбонил-5-метилтиазол-2-ил, 4-фенилтиазол-2-ил, 4,5-диметилтиазол-2-ил, 4-(4-морфолинил)-1,2,5-тиадиазол-2-ил, 3-фенил-2-тионо-2,3-дигидро-1,3,4-тиадиазол-5-ил, 4-метил-5-оксо-6-гидрокси-4,5-дигидро-1,2,4-триазин-3-ил, 5-[4-(н-пентилокси)фенил]-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 5-{4-[2-(2-метоксиэтокси)этокси] фенил} -1,3,4-оксадиазол-2-ил, 5-(3,4-метилендиоксифенил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 5-(2,5-диметоксифенил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил, 5-(2-метоксифенил)-1,3,4-оксадиазол-2-ил и 5-фенилоксазол-2-ил.

Как указывалось выше, соединения формулы I ингибируют ферментную активность протеолитических ферментов и используются при лечении дегенеративных заболеваний. Более конкретно, они ингибируют эластазу человеческих лейкоцитов и химотрипсиноподобные ферменты, и используются при лечении эмфиземы, ревматического артрита, панкреатита, кистозного фибриоза, хронического бронхита, респираторных заболеваний у взрослых, воспалительных заболеваний кишечника, псориаза, пузырчатого пемфигоида и альфа-1-антитрипсиновой недостаточности. Их применение демонстрировалось испытанием in vitro торможением соединений формулы 1 против эластазы человеческих лейкоцитов.

Измерение константы ингибирования (K_и-комплекса ингибитора эластазы человеческих лейкоцитов описан (Cha, Biochemical Pharmacology, том 24, с. 2177 - 2185, 1975) для реверсивных констант реверсивного ингибирования относительно конкурирующих ингибиторов. Соединения формулы I не совсем образуют комплексы реверсивного ингибитора, а потребляются ферментом до некоторой степени. Поэтому, вместо таких величин определялась K^*_и , которая определялась как скорость реактивации фермента, деленная на скорость инактивации фермента (Koff/on). Измерялись величины Koff и Kon и затем рассчитывалось K^*_и .

Величина Kon определялась измерением активности фермента аликвоты фермента как функция времени после добавления испытуемого соединения (ингибитора). Показанием логарифма активности фермента а зависимости от времени с помощью уравнения K_набл. = 1n2/t^1/2, была получена наблюдаемая скорость инактивации (K_набл.), в уравнении t^1/2 - время, требуемое для снижения активности фермента на 50%. Затем была получена величина Kon с помощью уравнения Kon = K_набл./[1], в котором [1]- концентрация ингибитора. Таким же образом определялась величина Koff, и затем с помощью уравнения K^*_и = Koff/Kon было получено K^*_и .

Результаты, показанные в таблице, были получены для соединений формулы I примеров 1 - 3.

Таблица. Ингибирование эластазы человеческих лейкоцитов

Соединение формулы I Примера - K^*_и (НМ)

1 - 0,024

2 - 0,014

3 - 0,27

Другие примеры соединений формулы 1 имеют K^*_и величины в пределах от 1000 М до 0,01 М. Ингибирующее количество протеолитического фермента соединения формулы I можно определить из результатов испытания ингибирования эластазы человеческих лейкоцитов и дополнительно изменять для определенного пациента в зависимости от его физического состояния, вида назначения, длительности лечения и ответной реакции пациента. Поэтому эффективная доза соединения формулы I может быть определена только врачом с учетом всех критериев и реакции пациента.

Соединение формулы I можно подготовить для фармацевтического применения введением его в фармацевтическую композицию для орального, парентерального или аэрозольного применения для вдыхания. Это может быть в твердой или жидкой дозирующей форме, включающей таблетки, капсулы, растворы, суспензии и эмульсии, которые могут содержать один или несколько наполнителей. Предпочтительны твердые дозировки в виде таблеток или капсул для орального назначения. Для этой цели наполнителем может быть одно или несколько из следующих веществ: карбонат кальция, крахмал, лактоза, тальк, стеарат магния и аравийская камедь. Композиции готовятся обычной фармацевтической технологией.

Ниже даны примеры фармацевтических составов.

Пример 8. Таблетки - общий пример)

Ингредиенты - % в/в

Соединение примеров 1-7 - 32 - 62

Дезинтегрирующий агент - 28 - 36

Связывающий агент - 10 - 20

Смазывающий агент - 0,1 - 0,5

Другие экспипиенты - 2 - 5

Примечание; в качестве дезинтегратора используют различные крахмалы, в качестве связывающего агента - различную целлюлозу, в качестве смазывающего агента - тальк, силикагель и стеарат магния.

Пример 9. (Таблетки)

Ингредиенты - мг/таблетку

Соединение примера 1 - 150

Моногидрат лактозы - 100

Гидроксипропилцеллюлоза - 50

Поливинилпирролидон - 20

Стеарат магния - 2

Пример 10.

Ингредиенты - мг/таблетку

Соединение примера 3 - 140

Остальные ингредиенты как в примере 9в