производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция
Классы МПК: | C07D305/14 конденсированные с карбоциклическими кольцами или циклическими системами A61K31/335 только с атомами кислорода в качестве гетероатомов, например фунгихромин |
Автор(ы): | Эцо Бомбарделли (IT), Бруно Габетта (IT) |
Патентообладатель(и): | Индена С.п.А. (IT) |
Приоритеты: |
подача заявки:
1993-03-04 публикация патента:
27.09.1998 |
Изобретение относится к новым производным таксана III формулы 1, в которой R1 - H; R14 - H, C2-C9-алканоил, незамещенный атомом галогена, или R1 и R14, взятые вместе, представляют собой карбонил или низший алкилиден; R7= R10 - H, три(низший алкил)силил или C2-C9-алканоил, незамещенный или моно-, ди-, тризамещенный атомом галогена; R13 - H, -COCHOHCH-(C6H5) NHCOC6H5 или -COCHOHCH (C6H5)NHCOOC(CH3)3-группа; Ас - ацетил, эти соединения обладают противоопухолевой активностью. Изобретение включает также способы получения соединений формулы 1, где R1=R7=R10=R13=R14 - H из надземных частей растений Taxus Walliсhiana, а также способы соединений формулы 1 с различными значениями радикалов R1, R7, R10, R13 и R14, а также фармацевтическую композицию на основе производных таксана формулы 1
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119485/2119485t.gif)
8 с. и 4 з.п.ф-лы, 2 табл.
Рисунок 1, Рисунок 2
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119485/2119485t.gif)
8 с. и 4 з.п.ф-лы, 2 табл.
Формула изобретения
1. Производные таксана III формулы I![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119485/2119485-6t.gif)
в которой R1, взятый в отдельности, является атомом водорода;
R14, взятый в отдельности, представляет собой атом водорода или алканоил с 2 - 9 углеродными атомами, незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный атомом галогена,
или R1 и R14, вместе взятые, представляют собой карбонил или низший алкилиден;
R7 представляет собой атом водорода, три(низший алкил)-силил или алканоил с 2 - 9 углеродными атомами, незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный атом галогена;
R10 - атом водорода, алканоил с 2 - 9 углеродными атомами, незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный атомом галогена,
R13 - атом водорода, -COCHOHCH- (C6H5) NHCOC6H5 или -COCHOHCH(C6H5) NHCOOC(CH3)3 группа,
AC - ацетил. 2. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R1, R7, R10, R13 и R14 одновременно являются атомами водорода. 3. Соединение по п.1, отличающееся тем, что R7 представляет собой алканоил с 2 - 9 углеродными атомами. 4. Соединение по п. 1, отличающееся тем, что R10 - алканоил с 2 - 9 атомами углерода, незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный атомом галогена. 5. Способ получения соединения формулы I по п.1, где R1 = R7 = R10 = R13 = R14 = H, из надземных частей растений Taxus Walliehiana, включающий следующие стадии: а) экстрагирование растительного материала смешивающимся с водой растворителем или его смесью с водой; б) отгонку растворителя и отфильтровывание нерастворимых остатков; в) обработку несмешивающимся с водой растворителем и выпаривание досуха; г) очистку колоночной хроматографией и кристаллизацию целевого соединения. 6. Способ получения соединения формулы I по п.1, где R1 = R7 = R10 = R13 = R14 = H, из надземных частей растений Taxus Walliehiana, включающий следующие стадии: а) экстрагирование растительного материала смешивающимся с водой растворителем или его смесью с водой; б) выпаривание растворителя; в) обработку водноспиртовым раствором и выпаривание досуха; г) очистку колоночной хроматографией и кристаллизацию целевого соединения. 7. Способ получения соединения формулы I по п.1, в котором по меньшей мере один из R7, R10 и R14 представляет собой алканоил с 2 - 9 углеродными атомами, незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный атомом галогена, отличающийся тем, что соединение формулы I, где R1, R7, R10, R13 и R14 одновременно являются атомами водорода, подвергают взаимодействию с кислотой формулы II
R5COOH,
где R5 представляет собой алкильную группу с 1 - 8 углеродными атомами, незамешенную или моно-, ди- или тризамещенную атомом галогена,
или с ее активированным производным. 8. Способ получения соединений формулы I, отличающийся тем, что включает взаимодействие соединения по п.2 с кислотой формулы R5COOH или с ее активированным производным. 9. Способ получения соединений формулы I по п.1, где R7 и R10 - алканоил с 2 - 9 углеродными атомами, незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный атомом галогена, отличающийся тем, что соединение формулы I, где R1, R7, R10, R13, R14 одновременно являются атомами водорода, подвергают взаимодействию с хлорфомиатом. 10. Способ получения соединения формулы I по п.1, где R7 - три(низший алкил)силил, отличающийся тем, что соединение формулы I, где R1, R7, R10, R13, R14 одновременно являются атомами водорода, подвергают взаимодействию с силилирующим агентом. 11. Соединения по п.1, обладающие противоопухолевой активностью. 12. Фармацевтическая композиция, обладающая противоопухолевой активностью, включающая производное таксана в качестве активного компонента и целевые добавки, отличающаяся тем, что в качестве указанного производного содержит соединение формулы I по п.1 в эффективном количестве.
Описание изобретения к патенту
Изобретение касается новых таксанов формулы 1, способов их получения и их фармацевтического использования:![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119485/2119485-2t.gif)
В общей формуле 1 R1, взятый отдельно, является водородом и R14, взятый отдельно, является водородом, три-/низший алкил/-силилом или алканоилом с 2-9 углеродными атомами, незамещенным или моно-, ди- или тризамещенным атомом галогена или монозамещенным фенилом, который является незамещенным или моно-, ди- или тризамещенным атомом галогена, низшим алкокси или низшим галоалкокси; или
R1 и R14, вместе взятые, являются карбонилом или низшим алкилиденом, незамещенным или замещенным фенилом;
каждый из R7 и R10 является водородом, три-/низший алкил/-силилом или алканоилом с 2-9 углеродными атомами, незамещенным или моно-, ди- или тризамещенным атомом галогена или монозамещенным фенилом, который незамещен или моно-, ди- или тризамещен атомом галогена, низшим алкокси или низшим галоалкокси, и
R13 представляет собой водород, триалкилсилил, -COCHOHCH-/C6H5/NHCOC6H5, -COCHOHCH-/C6H5/NHCOОС/CH3/3, алканоил с 2-9 углеродными атомами, незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный атомом галогена или монозамещенный фенилом, который незамещен или моно-, ди- или тризамещен атомами галогена, низшим алкокси или низшим галоалкокси;
Ac является ацетилом. Термин "низший алкил" означает одновалентную насыщенную разветвленную или прямую углеводородную цепь, содержащую от 1 до 8 углеродных атомов. Представителями таких алкильных групп являются метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, неопентил, трет-пентил, гексил, изогексил, гептил, октил и тому подобные. Термин "низший алкокси" означает низшую алкильную группу, присоединенную к остальной молекуле через эфирную кислородную связь. Представителями таких алкоксигрупп являются метокси, этокси, пропокси, изопропокси, бутокси, изобутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, пентокси, изопентокси, неопентокси, трет-пентокси, гексокси, изогексокси, гептокси, октокси и тому подобные. Термин "низший алкилиден" означает изначально двухвалентную насыщенную разветвленную или прямую углеводородную цепь, содержащую от 1 до 8 углеродных атомов. Представителями таких алкилиденовых групп являются метилиден, этилиден, пропилиден, изопропилиден, бутилиден, изобутилиден, пентилиден, неопентилиден, гексилиден, гептилиден, октилиден и тому подобные. Представителями низших галоалкоксигрупп являются дифторметокси, трифторметокси. Соединение формулы 1, в которой R1=R7=R10=R13=R14=H /соединение формулы 1а/, является новым таксаном, который может быть выделен по-существу в чистой форме из растительного материала рода Taxus, главным образом из надземных частей растения Taxus Wallichiana. Этот вид распространен в Азии, в частности в отрогах Гималаев. Структура соединения формулы 1а отнесена к новому таксану посредством ядерного магнитного резонанса /на ядрах 1H и 13C/ и рентгеноструктурного анализа. Оно содержит дополнительные оксигруппы в положении 14
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
вычислено: C 62,13; H 6,47%,
найдено: C 62,07; H 6,53%. Пример 2. Выделение 14-окси-10-деацетилбаккатина III, соединение 1a /соединение 1, в котором R1=R7=R10=R13=R14=H/ из листьев Taxus Wallichiana. 1 кг листьев Taxus Wallichiana, высушенных в вакууме при 35oC, подвергали тонкому помолу и экстрагировали 6 порциями толуола по 3 литра каждая при перемешивании при комнатной температуре, при этом каждая экстракция длилась шесть часов. Собранные экстракты концентрировали при пониженном давлении до объема 500 мл и обрабатывали 3 частями 20% водного метанола по 70 мл каждая. Толуоловую фазу концентрировали в вакууме досуха и остаток растворяли в 500 мл хлористого метилена. Полученный раствор очищали колоночной хроматографией, как описано в примере 1, и получали чистое соединение 1a, точка плавления 215-217oC. Пример 3. Получение соединения 1b /соединение 1, в котором R7=R10 - -COCH2CCl3, R13 - H, R1 и R14, вместе взятые, образуют CO/. 300 мг соединения 1a /0,53 ммоля/ растворяли в 6 мл безводного пиридина и обрабатывали пять минут при 80oC 0,49 мл /3,41 ммоля/ трихлорацетилхлорформиата. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, затем добавляли несколько капель метанола для разложения избыточного реактива. Реакционную смесь разбавляли водой и экрагировали хлористым метиленом. Органическую фазу отделяли, сушили над сульфатом натрия и концентрировали досуха. Остаток очищали через хроматографическую колонку, содержащую 7 г силикагеля, и элюировали смесью гексан-этилацетат в отношении 1:1. Получали 295 мг /50%/ соединения 1b. M+ /масс-спектр/ при m/z 955 /937 + H4/. Элементный анализ для C36H35O16Cl6:
вычислено: C 46,10; H 3,84; Cl 22,73%,
найдено: C 45,98; H 3,91; Cl 22,67%. Пример 4. Получение соединения 1c / соединение 1, в котором R7=R10=R13 - H; R14 и R1, вместе взятые, являются C/CH3/2/. 100 мг соединения 1a растворяли в 17 мл ацетона, предварительно отогнанного через сульфат меди, и обрабатывали 7 мл 2,2-диметоксипропана и 150 мг пара-толуолсульфоната пиридина при помешивании при комнатной температуре. Затем реакционную смесь выпаривали досуха и остаток извлекали хлористым метиленом. Органический раствор промывали водой для удаления соли пиридиния, сушили над сульфатом магния и растворитель отгоняли при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с 5 г силикагеля, используя в качестве элюента этиловый эфир. Получали 82 мг /76%/ соединения 1c, точка плавления 166-170oC, масс-спектр M+ при m/z 618/600 + NH4/. Элементный анализ для C32H40O11:
вычислено: C 64,00; H 6,67%,
найдено: C 63,89; H 6,71%. Пример 5. Получение 14
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
вычислено: C, 50,00; H 4,54; Cl 17,93%;
найдено: C 49,86; H 4,71; Cl 17,01%. Пример 6. Получение 10-деацетил-14
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119485/2119485-3t.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119485/2119485-4t.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119485/2119485-5t.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119068/946.gif)
Соединения, полученные по примерам 9 и 10, подвергали испытаниям in vitro на цитотоксичность и противоопухолевую активность в сравнении со стандартными продуктами паклитаксел (paclitaxel) и доцетаксел (docetaxel). Цитотоксическая активность. Продукты испытывали по обычно известным специалистам методикам на следующим клеточных линиях:
A 121 : карцинома яичников человека
A 159 : (CCL70) рак легких человека
HT 29 : (HT B-38) аденокарцинома ободочной кишки человека
MCF 7 : аденокарцинома молочной железы человека
MCF 7-ADR : устойчивая в адриамицину аденокарцинома молочной железы
Приведенные в таблице 1 результаты указывают на то, что соединения, являющиеся предметом настоящего изобретения, обладают значительной цитотоксической активностью и отличаются от соединений, обычно известных как удивительно активные в отношении клеток, устойчивых к адриамицину, что можно видеть из соотношения между клетками MCF 7-ADR и клетками MCF 7. Данные, полученные in vitro. Противоопухолевая активность соединений в примерах 9 и 10 была рассчитана по следующей экспериментальной модели. "Атимичные (лишенные тимуса) мыши Balb/c nu/nu возраста шесть недель (самки) получены от Harlan/Sprague-Dawley и использованы как реципиенты опухолевой молочной железы человека (MCF 7) после периода карантина 2 недели. Мышам имплантируют подкожно примерно 50 мг фрагментов неомертвевшей опухоли с использованием обычной техники трансплантации троакаром (12 калибра). Хемотерапию начинают через 4-10 дней после имплантации опухоли, когда опухоль является осязаемой (размера 100 мм3). Рост опухоли отслеживают два раза в неделю путем измерения циркулем в двух направлениях. Для определения противоопухолевой активности аналогов паклитаксела рассчитывают величину ингибирования роста опухоли (величину O/K). Одновременно для подвергнутой обработке и контрольной групп определяют вес опухоли. Когда вес опухоли в контрольной группе (K) достигает 1-1,5 г, определяют вес опухоли в каждой группе, подвергнутой обработке (O), включая животных без видимых опухолей. Величину O/K рассчитывают как отношение веса опухоли обработанных животных к весу опухоли контроля. Веса опухолей оценивают из размера опухолей на основе предположения, что 1 мм3 = 1 мг. Полагают, что O/K
![производные таксана ш, способы их получения и фармацевтическая композиция, патент № 2119485](/images/patents/352/2119011/8773.gif)
Соединение примера 9 - 9 мг
Кремофор EL - 175 мг
Спирт абсолютн. - g.s. до 0,4 мг
Пример 12. Таблетки для орального применения содержат
Соединение примера 10 - 50 мг
Поперечно-сшитая натрий-карбоксиметилцеллюлоза - 12,5 мг
Лактоза (высушенная распылением) - 133,75 мг
Микрокристаллическая целлюлоза - 50 мг
Коллоидная двуокись кремния - 1,25 мг
Стеарат магния - 2,5 мгп
Класс C07D305/14 конденсированные с карбоциклическими кольцами или циклическими системами
Класс A61K31/335 только с атомами кислорода в качестве гетероатомов, например фунгихромин