производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке
Классы МПК: | C07K14/00 Пептиды, содержащие более 20 аминокислот; гастрины; соматостатины; меланотропины; их производные C07K14/35 из Mycobacteriaceae (F) A61K38/16 пептиды, содержащие более 20 аминокислот; гастрины; соматостатины; меланотропины; их производные |
Автор(ы): | Дин М.Нейсон II (US), Дуглас Филлипс (US), Николас Саккомано (US), Роберт А.Волкманн (US) |
Патентообладатель(и): | Пфайзер Инк. (US), Эн-Пи-Эс Фармасьютикалз, Инк. (US) |
Приоритеты: |
подача заявки:
1993-09-28 публикация патента:
27.10.1998 |
Использование: в медицине для лечения заболеваний и состояний у млекопитающих в которых посредничает кальциевый канал. Сущность изобретения : производные полипептидов общей формулы I [A1-A5] - [B6-B10] - [C11 - C15] - [D16 - D20] - [E21 - E25] - [F26 - F30] - [G31 - G35] Z, где A: A1-A4 = Leu-Phe-Glu-Cys, Cys-Leu-Gly-Glu-, Cys-Ala-Glu-Phe-, Ser-Cys-Gly-His-, Leu-Ile-Glu-Cys-, A5= Ala, Val, Gln, Asn; B: B6- B9= - Leu-Ser-Cys-Asp-, Ser-Lys-Cys-Lys-, Gly-Thr-Pro-Cys-, -Val-Pro-Cys-Asp-, -Phe-Ser-Cys-Asp-, B10= Ile, Lys, Glu; C: C11-C14= -Lys-Lys-Asn-Gly-, Asp-Ser-Gly-Cys, -Lys-Asn-Trp-Asp-, Thr-Lys-Asn-Gly-; C15= Lys, Cys; Asp-Arg-Pro-Asn-,D: D16-D19=-Pro-Cys-Lys-Pro-, -Gly-Thr-Leu-Glu-, -Cys-Lys-Gly-Lys-, -Cys-Ser-Lys-Thr, D20= Cys, Val, Gly, Lys; E: E21-E24= -Gly-Glu-Lys-Lys-, -Ser-Pro-Thr-Trp-, -Cus-Leu-Glu-Pro-, E25 = Cys, Lys, Trp, Thr; F: F26-F30=-Ser-Gly-Gly-Trp-, -Trp-Cys-Val-Tyr-, -Lys-Leu-Cys-Ala-, -Gly-Tyr-Gly-Arg-, F30= Arg, Cys, Pro, Tyr; G: G31-G34=-Cys-Lys-Ile-Asn-, -Ser-Pro-Phe-, -Glu-Ser-Pro-Phe-, -Tyr-Ala-Ser-Tyr- -Cys-Leu-Lys-Val-, G35=Phe, Tyr, простая связь; Z =OH, -Cys-Leu-Lys-ValOH, -Cys-Leu-Lys-IleOH, -Ser-Tyr-Lys-Thr-LeuOH, причем шесть цистеиновых остатков остатков в соединении I соединенных дисульфидными связями. Способ блокирования кальциевых каналов в клетке путем введения в клетку эффективного количества полипептида по п.1. 2 с. и 1 з.п. ф-лы, 9 табл.
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6
Формула изобретения
1. Производные полипептидов общей формулы I[A1-A5] -[B6-B10]-[C11-C15]- [D16-D20]-[E21-E25]-[F26-F30]- [G31-G35]-Z, в которой
A: A1-A4 = Leu-Phe-Glu-Cys-; Cys-Leu-Gly-Glu-, Cys-Ala-Glu-Phe-, Ser-Cys-Gly-His-, Leu-Ile-Glu-Cys-;
A5 = Ala, Val, Gln, Asn;
B: B6-B9 = -Leu-Ser-Cys-Asp-, -Ser-Lys-Cys-Lys-, Gly-Thr-Pro-Cys-, -Val-Pro-Cys-Asp-, -Phe-Ser-Cys-Asp-;
B10 = Ile, Lys, Glu;
C: C11-C14 = -Lys-Lys-Asn-Gly-, -Asp-Ser-Gly-Cys-, -Lys-Asn-Trp-Asp-, -Thr-Lys-Asn-Glu-, -Asp-Arg-Pro-Asn-;
C15 = Lys, Cys;
D: D16-D19 = -Pro-Cys-Lys-Pro-, -Gly-Thr-Leu-Glu-, -Cys-Lys-Gly-Lys-, -Cys-Ser-Lys-Thr-;
D20 = Cys, Val, Gly, Lys;
E: E21-E24 = -Gly-Glu-Lys-Lys-, -Ser-Pro-Thr-Trp-, -Cys-Leu-Glu-Pro-;
E25 = Cys, Lys, Trp, Thr;
F: F26-F30 = -Ser-Gly-Gly-Trp-, -Trp-Cys-Val-Tyr-, -Lys-Leu-Cys-Ala-, -Gly-Tyr-Gly-Arg-;
F30 = Arg, Cys, Pro, Tyr;
G: G31-G34 = -Cys-Lys-Ile-Asn-, -Ser-Pro-Phe-, -Glu-Ser-Pro-Phe, -Tyr-Ala-Ser-Tyr-, -Cys-Leu-Lys-Val-;
G35 = Phe, Tyr, простая связь;
Z = -OH, -Cys-Leu-Lys-ValOH, -Cys-Leu-Lys-IleOH, -Ser-Tyr-Lys-Lys-Thr-LeuOH,
причем шесть цистеиновых остатков в соединении I соединены дисульфидными связями. 2. Способ блокирования кальциевых каналов в клетке, отличающийся тем, что включает введение в клетку эффективного количества полипептида по п.1. 3. Способ по п. 2, отличающийся тем, что клетка находится в нервной системе млекопитающего.
Описание изобретения к патенту
Настоящее изобретение относится к полипептидам, обнаруженным в ядре паука Theraphosidae aphonopelma, и к полипептидам, имеющим, по существу, такую же аминокислотную последовательность, и, по существу, такую же активность, как и упомянутые полипептиды. Полипептиды и их фармацевтически приемлемые соли блокируют кальциевые каналы в клетках, включая клетки нервные и мышечные, различных организмов, в том числе беспозвоночных и позвоночных. Настоящее изобретение также относится к применению упомянутых полипептидов и их солей для блокирования, самого по себе, кальциевых каналов в клетках, таких как клетки и мышечной систем организма, и для лечения заболеваний и состояний у млекопитающего, в которых посредничает кальциевый канал. Кроме того, настоящее изобретение относится к композициям, содержащим упомянутые полипептиды и их соли. Соединения, которые являются антагонистами кальция, имеют разнообразное применение. Антагонисты кальция могут находить применение в клиниках для лечения таких состояний, среди прочих, как стенокардия, гипертензия, кардиомиопатия, наджелудочковая экстрасистолия, пищеводная ахалазия, преждевременные роды и болезнь Рейно. См., например, работу W.G. Nayler, Calcium Antagonists, Academic Press, Harcourt Brace Jovanovich Publishers, New Jork, NY 1988, которая включена в настоящее в качестве ссылки. Кроме того, такие соединения полезны при исследовании физиологии таких клеток, как нервные и мышечные клетки. Полипептид, выделенный из ядра тарантула, с теми же свойствами, что и последовательность SEQ ID NO: 1, раскрывается в Biol. Chem. Hoppe-Seyler, vol. 370(5), 484-98 (1989). Этот пилипептид показывает 79,5%-ную гомологию (31/39 аминокислот) с SEQ ID NO:1. Настоящее изобретение касается полипептидов, обнаруженных в яде паука Theraphosidae aphonopelma. Полипептиды настоящего изобретения и фракции, в которых они присутствуют, в соответствии с настоящим изобретением, перечислены далее. Пептид Aphonopelma 6-6 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:1. Пептид Aphonohelma 6-8 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:2. Пептид Aphonopelma 7-6,1 имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:3. Пептид Aphonohelma 7-13,1, имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:4. Пептид Aphonopelma 7-13,2, имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:5. Пептид Aphonopelma 7-15,2, имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:6. Пептид Aphonopelma 7-17,1, имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:7. Пептид Aphonopelma 7-17,3, имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:8. Пептид Aphonopelma 7-17,4, имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO:9. Полипептиды настоящего изобретения блокируют кальциевые каналы в клетках. Соответственно, такие полипептиды пригодны для блокирования кальциевых каналов в клетках, самого по себе. Такие полипептиды также пригодны для борьбы с беспозвоночными паразитами (вредителями), и для лечения заболеваний или состояний у млекопитающих, передаваемых через функционирование кальциевых каналов в клетках. Также в объем настоящего изобретения входят полипептиды, которые, по существу, имеют такую же аминокислотную последовательность, и, по существу, такую же активность при блокировании кальциевого канала, как и описанные выше полипептиды. Подробное описание изобретения. Яд паука Theraphosidae aphonopelma получают извлечением при электростимуляции в соответствии со стандартными методами, хорошо известными специалистам в этой области техники. Предлагается, что используемый метод является таким методом, который гарантирует от загрязнения яда абдоминальным извержением или гемолимфой. Такие способы также хорошо известны специалистам в этой области техники. Полученный таким образом цельный яд хранят в замороженном состоянии при -78oC до тех пор, пока не используют его для очистки, как описано ниже. Очистку составляющих от цельного яда осуществляют жидкостной хроматографией высокого разрешения (ЖХВР) с обращенной фазой на различных препаративных и полупрепаративных колонках, таких как колонки C-4 и C-18 Vydac Vydac![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120302/174.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120023/183.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120023/183.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120302/174.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120945/2120945t.gif)
Фракция 7 - 37,3 - 39,5 мин
Фракция 8 - 39,5 - 40,1 мин
Фракция 9 - 40,1 - 40,9 мин
Фракция 10 - 40,9 - 41,8 мин
Каждую из упомянутых выше фракций, из серии опытов, концентрируют лиофилизацией. Дальнейшее фракционирование выполняют так, как описано ниже. Стадия II. Субфракционирование (разделение на более мелкие фракции) фракций стадии I. A) Субфракционирование фракции 6. Вещество фракции 6 со стадии I, описанной выше, полученное из
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
Фракция 6 - 7 - 25,0 - 25,4 мин
Фракция 6 - 8 - 25,6 - 26,5 мин
Фракция 6 - 9 - 27,0 - 28,7 мин
Фракция 6 - 13 - 33,5 - 34,3 мин
Фракция 6 - 14 - 34,4 - 35,4 мин
Каждую из упомянутых фракций, из серии опытов, концентрируют лиофилизацией. B) Субфракционирование фракции 7. Вещество фракции 7 со стадии 1, описанной выше, полученное из
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
Фракция 7 - 9 - 24,8 - 25,5 мин
Фракция 7 - 11 - 26,1 - 26,7 мин
Фракция 7 - 12 - 27,1 - 27,6 мин
Фракция 7 - 13 - 27,6 - 28,9 мин
Фракция 7 - 14 - 29,7 - 30,8 мин
Фракция 7 - 15 - 31,0 - 32,3 мин
Фракция 7 - 16 - 32,5 - 33,1 мин
Фракция 7 - 17 - 34,2 - 36,0 мин
Каждую из упомянутых выше фракций, из серии опытов, концентрируют лиофилизацией. C) Субфракционирование фракции 8. Вещество фракции 8 со стадии I, описанной выше, полученное из
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120302/174.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120945/2120945-2t.gif)
Фракция 8 - 6 - 21,3 - 22,5 мин
Фракция 8 - 7 - 25,9 - 26,5 мин
Фракция 8 - 8 - 27,4 - 28,3 мин
Каждую из упомянутых выше фракций, из серии опытов, концентрируют лиофилизацией. Стадия III. Субфракционирование фракций стадии II. A) Субфракционирование фракции 7 - 6. Вещество фракции 7 - 6 со стадии II-B, описанной выше, полученное из
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120302/174.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120945/2120945-3t.gif)
Фракция 7 - 6,2 - 35,5 - 36,2 мин
Каждую из упомянутых выше фракций, из серии опытов, концентрируют лиофилизацией. B) Субфракционирование фракции 7 - 9,
Вещество фракции 7 - 9 со стадии II-B, описанной выше, полученное
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120302/174.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120945/2120945-4t.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120302/174.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120945/2120945-5t.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120302/174.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120945/2120945-6t.gif)
Фракция 7 - 12,2 - 38,4 - 39,6 мин
E) Субфракционирование фракции 7 - 13. Вещество фракции 7 - 13 со стадии II-B, описанной выше, полученное из
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120302/174.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120945/2120945-7t.gif)
Фракция 7 - 13,2 - 35,1 - 36,5 мин. Каждую из перечисленных выше фракций, из серии опытов, концентрируют лиофилизацией. F) Субфракционирование фракции 7 - 15. Вещество фракции 7 - 15 со стадии II-B, описанной выше, полученное из
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120302/174.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120945/2120945-8t.gif)
Фракция 7 - 15,2 - 34,5 - 36,2 мин
Фракция 7 - 15,3 - 37,7 - 39,1 мин. Каждую из перечисленных выше фракций, объединенную из серии опытов, концентрируют лиофилизацией. G) Субфракционирование фракции 7 - 16. Вещество фракции 7 - 16 со стадии II-B, описанной выше, полученное из
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120302/174.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120945/2120945-9t.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120028/8776.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120302/174.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120945/2120945-10t.gif)
Фракция 7 - 17,2 - 18,5 - 19,4 мин
Фракция 7 - 17,3 - 27,1 - 28,6 мин
Фракция 7 - 17,4 - 28,6 - 30,1 мин
Фракция 7 - 17,5 - 30,1 - 31,9 мин
Фракция 7 - 17,6 - 31,9 - 33,5 мин. Каждую из упомянутых выше фракций, полученную в серии опытов, концентрируют лиофилизацией. Пример 1. Пептид Aphonopelma 6-6. Структуру пептида 6-6, полученного на стадии II-A, описанной выше, определяют и подтверждают следующими методами. Проводят РТС аминокислотный анализ на 1 - 10 нмоль, используя систему Waters Pico-Tag, при трехкратном повторе. N-концевое секвенирование осуществляют на импульсном жидкостном (pulse - liquid) секвенаторе (ABI) как в случае природного так и в случае восстановленного и пиридилэтилированного пептида. Данные масспектрального анализа получают на масс-спектрометре с ионным распылением SCI-EX API III. Полученные данные, все вместе, подтверждают, что пептид 6-6 имеет строение, показанное ниже. Последовательность SEQ ID NO:1, 39 остатков, 6 цистеинов, 3 дисульфидных связи. Вычисленная масса = 4382.3. Наблюдаемая масса = 4382,16
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120024/177.gif)
Полученные данные, все вместе, подтверждают, что пептид 6 - 8 имеет строение, показанное ниже. Последовательность SEQ ID NO:2, 39 остатков, 6 цистеинов,3 дисульфидных связи. Вычисленная масса = 4369,2. Наблюдаемая масса = 4368,26
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120024/177.gif)
Пример 3. Пептид Aphonopelma 7-6.1. Строение пептида 7-6,1, полученного на стадии III-A, описанной выше, определяют и подтверждают следующими методами. Проводят РТС аминокислотный анализ на 1 - 10 нмоль, используя систему Waters Pico-Tag, при трехкратном повторе. Осуществляют N-концевое секвенирование на импульсном жидкостном секвенаторе (ABI) как природного, так и восстановленного и пиридилэтилированного пептида. Данные масс-спектрального анализа получают на масс-спектрометре с ионным распылением SCI-EX API III>
Полученные данные, все вместе, подтверждают, что пептид 7-6,1 имеет строение, показанное ниже. Последовательность SEQ ID NO:3, 33 остатка, 6 цистеинов, 3 дисульфидных связи. Вычисленная масса = 3786,2. Наблюдаемая масса = 3784,54 (м.-с. с ион. распыл.)
Пример 4. Пептид Aphonopelma 7-13.1. Строение пептида 7-13,1, полученного на стадии III-E, описанной выше, определяют и подтверждают следующими методами. Проводят РТС аминокислотный анализ на 1-10 нмоль, используя систему Waters Pico-Tag, при трехкратном повторе. Осуществляют N-концевое секвенирование как природного пептида, так и восстановленного и пиридилэтилированного пептида на импульсном жидкостном секвенаторе (ABI). Данные масс-спектрального анализа получают на масс-спектрометре с ионным распылением SCI-EX API III. Полученные данные, все вместе, подтверждают что пептид 7-13,1 имеет строение, показанное ниже. Последовательность SEQ IDNO: 4,34 остатка, 6 цистеинов, 3 дисульфидных связи. Вычисленная масса = 3814,32
Наблюдаемая масса = 3813,67
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120024/177.gif)
Пример 5. Пептид Aphonopelma 7-13.2. Строение пептида 7-13.2, полученного на стадии III-E, описанной выше, определяют и подтверждают следующими методами. Проводят РТС аминокислотный анализ на 1-10 нмоль, используя систему Waters Pico-Tag, при трехкратном повторе. Осуществляют N-концевое секвенирование на импульсном жидкостном секвенаторе (ABI) как природного пептида, так и восстановленного и пиридилэтилированного пептида. Данные масс-спектрального анализа получают на масс-спектрометре с ионным распылением SCI-EX API III. Полученные данные, все вместе, подтверждают, что пептид 7-13,2 имеет строение, показанное ниже. Последовательность SEQ ID NO:5,42 остатка, 6 цистеинов, 3 дисульфидных связи. Вычисленная масса = 4844,45. Наблюдаемая масса = 4844,66 (м.с.-с., с ион. распыл.). Пример 6. Пептид Aphonopelma 7-15.2. Строение пептида 7-15.2, полученного на стадии III-F, описанной выше, определяют и подтверждают следующими методами. Проводят РТС аминокислотный анализ 1-10 нмоль, используя систему Waterrs Pico-Tag, при трехкратном повторе. Осуществляют N-концевое секвенирование на импульсном жидкостном секвенаторе (ABI) как природного, так и восстановленного и пиридилэтилированного пептида. Данные масс-спектрального анализа получают на масс-спектрометре с ионным распылением SCI-EX API III. Полученные данные, все вместе, подтверждают, что пептид 7-15.2 имеет строение, показанное ниже. Последовательность SEQ ID NO:6,39 остатков, 6 цистеинов, 3 дисульфидных связи. Вычисленная масса = 4342,19. Наблюдаемая масса = 4341,84
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120024/177.gif)
Пример 7. Пептид Ahhonopelma 7-17.1. Строение пептида 7-17.1, полученного на стадии III-H, описанной выше, определяют и подтверждают следующими методами. Проводят РТС аминокислотный анализ на 1-10 нмоль, используя систему Waters Pico-Tag, при трехкратном повторе. Осуществляют N-концевое секвенирование на импульсном секвенаторе (ABI) как природного, так и восстановленного и пиридилэтилированного пептида. Данные масс-спектрального анализа получают на масс-спектрометре с ионным распылением SCI-EX API III. Полученные данные, все вместе, подтверждают, что пептид 7-17.1 имеет строение, показанное ниже. Последовательность SEQ ID N0:7,39 остатков, 6 цистеинов, 3 дисульфидных связи. Вычисленная масса = 4383,28. Наблюдаемая масса = 4382,33
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120024/177.gif)
Пример 8. Пептид Aphonopelma 7-17.3. Строение пептида 7-17.3, полученного на стадии III-H, описанный выше, определяют и подтверждают следующими методами. Проводят РТС аминокислотный анализ на 1-10 нмоль, используя систему Waters Pico-Tag, при трехкратном повторе. Осуществляют N-концевое секвенирование на импульсном жидкостном секвенаторе (ABI) как природного, так и восстановленного и пиридилэтилированного пептида. Данные масс-спектрального анализа получают на масс-спектрометре с ионным распылением SCI-EX API III. Полученные данные, все вместе, подтверждают, что пептид 7-17.3 имеет строение, показанное ниже. Последовательность SEQ ID N0:8. Наблюдаемая масса = 4368,23
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120024/177.gif)
![производные полипептидов, способ блокирования кальциевых каналов в клетке, патент № 2120945](/images/patents/351/2120024/177.gif)
Список последовательностей
(I) Общая информация
(i) Заявитель:
(A) NAME: Pfizer Inc
(B) STREET: 235 East 42nd Street
(C) CITY: New York
(D) STATE: New York
(E) COUNTRY: U.S.A. (F) POSTAL CODE(ZIP) : 10017
(G) TELEPHONE: (203) 441-4905
(H) TELEFAX: (203) 441-5221
(A) NAME" NPS Pharmaceuticals, Inc. (B) STREET: 420 Chipeta Way
(C) CITY: Salt Lake City
(D) STATE: Utah
(E) CUNTRY: U.S.A. (F) POSTAL CODE(ZIP) : 84108
(G) TELEPHONE: (801) 583-4939
(H) TELEFAX: (801) 583-4961
(ii) Название изобретения: Блокирующие кальциевый канал полипептиды
(iii) Число последовательностей: 9
(iv) Форма компьютерного считывания
(A) Тип среды: дискета
(B) Компьютер: совместимый с IBM PC
(C) Операционная система: PC-DOS/MS-DOS
(D) Программное обеспечение: PatentIn Release # 1,0, версия # 1,25 (EPO)
(vi) Сведения о предшествующей заявке:
(A) Номер заявки US 07/973323
(B ) Дата регистрации: 3 ноября 1992
(2) Информация о последовательности SEQ ID NO : 1 (см. схему 1)
(i) Характеристики последовательности
(A) Длина: 39 аминокислот
(B) Тип: аминокислотная
(C) Число нитей: одна (однонитевая)
(D) Топология: линейная
(ii) Тип молекулы: пептид
(iii) Гипотетичность: нет
(iv) Античувствительность: нет
(vi) Происхождение исходного материала
(A) Организм: Theraphosidae aphonopelma
(F) Тип ткани: яд
(xi) Описание последовательности:SEQ ID N 0:1
(2) Информация о последовательности SEQ ID NO: 2 (см. схему 2). (i) Характеристики последовательности
(A) Длина: 39 аминокислот
(B) Тип: аминокислотная
(C) Число нитей: одна
(D) Топология: линейная
(ii) Тип молекулы: пептид
(iii) Гипотетичность: нет
(iv) Античувствительность: нет
(vi) Происхождение исходного материала
(A) Организм: Theraphosidae aphonopelma
(F) Тип ткани: яд
(xi) Описание последовательности SEQ ID NO: 2
(2) Информация о последовательности SEQ ID NO: 3 (см. схему 3). (i) Характеристики последовательности
(A) Длина: 33 аминокислоты
(B) Тип: аминокислотная
(C) Число нитей: одна
(D) Топология: линейная
(ii) Тип молекулы: пептид
(iii) Гипотетичность: нет
(iv) Античувствительность: нет
(vi) Происхождение исходного материала
(A) Организм: Theraphosidae aphonopelma
(F) Тип ткани: яд
(xi) Описание последовательности: SEQ ID NO: 3. (2) Информация о последовательности SEQ ID NO: 4 (см. схему 4). (i) Характеристики последовательности
(A) Длина: 34 аминокислоты
(B) Тип: аминокислотная
(С) Число нитей: одна
(D) Топология: линейная
(ii) Тип молекулы: пептид
(iii) Гипотетичность: нет
(iv) Античувствительность: нет
(vi) Происхождение исходного материала
(A) Организм: Theraphosidae aphonopelma
(F) Тип ткани: яд
(xi) Описание последовательности: SEQ ID NO: 4
(2) Информация о последовательности SEQ ID NO: 5 (см. схему 5). (i) Характеристики последовательности
(A) Длина: 42 аминокислоты
(B) Тип: аминокислотная
(C) Число нитей: одна
(D) Топология: линейная
(ii) Тип молекулы: пептид
(iii) Гипотетичность: нет
(iv) Античувствительность: нет
(vi) Происхождение исходного материала
(A) Организм: Theraphosidae aphonopelma
(F) Тип ткани: яд
(xi) Описание последовательности: SEQ ID NO: 5
(2) Информация о последовательности SEQ ID NO: 6 (см. схему 6). (i) Характеристики последовательности:
(A) Длина: 39 аминокислот
(B) Тип: аминокислотная
(C) Число нитей: одна
(D) Топология: линейная
(ii) Тип молекулы: пептид
(iii) Гипотетичность: нет
(iv) Античувствительность: нет
(vi) Происхождение исходного материала
(A) Организм: Theraphosidae aphonopelma
(F) Тип ткани: яд
(xi) Описание последовательности: SEQ ID NO: 6
(2) Информация о последовательности SEQ ID NO: 7 (см.схему 7). (i) Характеристики последовательности
(A) Длина: 39 аминокислот
(B): Тип: аминокислотная
(C) Число нитей: одна
(D) Топология: линейная
(ii) Тип молекулы: пептид
(iii) Гипотетичность: нет
(iii) Античувствительность: нет
(vi) Происхождение исходного материала
(A) Организм: Theraphosidae aphonopelma
(F) Тип ткани: яд
(xi) Описание последовательности: SEQ ID NO: 7
(2) Информация о последовательности SEQ ID NO: 8 (см.схему 8). (i) Характеристики последовательности:
(A) Длина: 35 аминокислот
(B) Тип: аминокислотная
(C) Число нитей: одна
(D) Топология: линейная
(ii) Тип молекулы: пептид
(iii) Гипотетичность: нет
(iv) Античувствительность: нет
(vi) Происхождение исходного материала
(A) Организм: Theraphosidae aphonopelma
(F) Тип ткани: яд
(xi) Описание последовательности: SEQ ID NO: 8
(2) Информация о последовательности SEQ ID NO: 9 (см. схему 9). (i) Характеристики последовательности
(A) Длина: 39 аминокислот
(B) Тип: аминокислотная
(C) Число нитей: одна
(D) Топология: линейная
(ii) Тип молекулы: пептид
(iii) Гипотетичность: нет
(iv) Античувствительность: нет
(vi) Происхождение исходного материала
(A) Организм: Theraphosidae aphonopelma
(F) Тип ткани: яд
(xi) Описание последовательности: SEQ ID NO: 9о
Класс C07K14/00 Пептиды, содержащие более 20 аминокислот; гастрины; соматостатины; меланотропины; их производные
Класс C07K14/35 из Mycobacteriaceae (F)
Класс A61K38/16 пептиды, содержащие более 20 аминокислот; гастрины; соматостатины; меланотропины; их производные