способ получения бактериохлорофилла а
Классы МПК: | C12P17/16 содержащих два или более гетероциклических кольца C07D487/22 в которых конденсированная система содержит четыре или более гетероциклических кольца |
Автор(ы): | Миронов А.Ф., Ефремов А.В. |
Патентообладатель(и): | Московская государственная академия тонкой химической технологии им.М.В.Ломоносова |
Приоритеты: |
подача заявки:
1996-07-12 публикация патента:
10.01.2000 |
Изобретение относится к химии биологически активных соединений и применяется в фотодинамической терапии рака. Бактериохлорофилл а экстрагируют диоксаном с последующим переводом пигмента в петролейный эфир. Целевой продукт отделяют при уменьшении содержания диоксана в петролейном эфире. Проводят очистку целевого продукта переосаждением бактериохлорофилла а из хлорированных углеводородов насыщенными углеводородами. Способ позволяет повысить выход целевого продукта и снизить его себестоимость.
Формула изобретения
Способ получения бактериохлорофилла путем разрушения клеточных стенок в биомассе пурпурных бактерий, экстракции природного пигмента органическим растворителем и очистки целевого продукта, отличающийся тем, что экстракцию бактериохлорофилла а ведут диоксаном с последующим переводом пигмента в петролейный эфир и отделением целевого продукта при уменьшении содержания диоксана в петролейном эфире, а очистку целевого продукта проводят путем переосаждения бактериохлорофилла а из хлорированных углеводородов насыщенными углеводородами.Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к химии биологически активных соединений и касается усовершенствования способа получения бактериохлорофилла a, который используется в качестве исходного сырья при создании сенсибилизаторов второго поколения для фотодинамической терапии рака. Бактериохлорофилл a представляет из себя сложную молекулу тетрагидропорфирина:![способ получения бактериохлорофилла а, патент № 2144085](/images/patents/327/2144085/2144085t.gif)
Известен единственный способ получения бактериохлорофилла a, основанный на экстракции пигментов метанолом из биомассы пурпурных фототрофных бактерий родов Rhodopseudomonas viridis и Rhodospirillum rubrum, упаривании экстракта под вакуумом, с последующей очисткой бактериохлорофилла a с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии [1]. К недостаткам этого метода следует отнести:
1) большие потери бактериохлорофилла a на стадиях упаривания и хроматографической очистки за счет интенсивного окисления,
2) высокую стоимость и сложность процесса высокоэффективной жидкостной хроматографии,
3) низкую производительность и выход процесса по бактериохлорофиллу a. Целью изобретения является улучшение способа получения бактериохлорофилла a и повышение его выхода. Поставленная цель достигается следующим образом. Биомассу пурпурных фотосинтетических бактерий Rhodopseudomonas capsulata заливают диоксаном, перемешивают и подвергают центрифугированию. Полученный раствор разбавляют петролейным эфиром и встряхивают в делительной воронке. Образуется два слоя. Нижний водно-диоксановый слой содержит водорастворимые вещества из экстракта, верхний - бактериохлорофилл a, каротиноиды, липиды и другие жирорастворимые продукты. Легкую фракцию отделяют и разбавляют двумя объемами воды. При встряхивании диоксан перераспределяется из петролейного эфира в воду и бактериохлорофилл a постепенно начинает выпадать в осадок. Суспензии дают отстояться и затем отфильтровывают. Полученный бактериохлорофилл a - сырец, растворяют в хлороформе (20 мл на 1 г бактериохлорофилла) и переосаждают петролейным эфиром (10 мл на 1 мл хлороформа) и затем отфильтровывают. Операцию переосажления повторяют несколько раз до тех пор, пока спектральные характеристики и ТСХ не подтвердят гомогенность соединения. Выход целевого продукта составляет от 1.2 до 1.5 г на 1 кг биомассы. Отличительными признаками заявляемого способа являются:
1) замена метанола на диоксан при экстракции бактериохлорофилла а из биомассы пурпурных бактерий,
2) осаждение бактериохлорофилла, что позволяет существенно ускорить очистку целевого продукта,
3) отказ от хроматографических методов очистки, ведущих к значительному окислению бактериохлорофилла. Пример 1. 500 г замороженной биомассы Rhodopseudomonas capsulata (20% воздушно-сухой массы) заливают 1.1 л диоксана, после размораживания перемешивают, центрифугируют в течение 10 мин со скоростью 3000 об/мин, декантируют и помещают в двухлитровую делительную воронку вместе с 0.5 л петролейного эфира (т.кип. 70 - 90oC). Смесь встряхивают и дают отстояться. Верхний слой отделяют и встряхивают с 1 л воды для частичной экстракции диоксана, при этом из петролейного эфира постепенно выпадает осадок бактериохлорофилла. Водный слой сливают, а углеводородный слой фильтруют под вакуумом. Осадок высушивают, растворяют в 20 мл хлороформа и заливают 200 мл петролейпого эфира. Выпавший осадок бактериохлорофилла отфильтровывают. Операцию переосаждения повторяют два раза. Выход 0.60 г. Электронный спектр в хлороформе,
![способ получения бактериохлорофилла а, патент № 2144085](/images/patents/327/2144010/955.gif)
1. Berger, G.; Kleo, J.; Andrianambinintsoa, S.; Neumann, J. M; Leonhard, M.// Preparation and purification of chlorophylls, bacteriochlorophylls and of their derivatives. // J. Liq. Chromatogr., 13(2), 333-44, 1990.5
Класс C12P17/16 содержащих два или более гетероциклических кольца
Класс C07D487/22 в которых конденсированная система содержит четыре или более гетероциклических кольца