производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция
Классы МПК: | C07C323/41 Y - водород или ациклический атом углерода C07C323/60 с атомом углерода по меньшей мере одной из карбоксильных групп, связанным с атомами азота C07H15/248 колхициновые радикалы, например колхикозиды A61K31/70 углеводы; сахара; их производные |
Автор(ы): | Эцио Бомбарделли (IT), Бруно Габетта (IT) |
Патентообладатель(и): | Индена С.П.А. (IT) |
Приоритеты: |
подача заявки:
1995-09-27 публикация патента:
20.02.2000 |
Описываются новые производные колхицина формулы (I), где значения R1, R2, X, Me, Y указаны в п.1 формулы, обладающие антипролиферативной, противоопухолевой и противовоспалительной активностями. Новые соединения обладают цитотоксичностью по отношению к опухолевым клеточным линиям человека, сравнимой с таковой колхицина, но по сравнению с последним они являются менее токсичными и более избирательными, особенно по отношению к клеткам, устойчивым к обычным лекарственным средствам. Некоторые соединения обладают выраженной активностью по отношению к ФНО и интерлейкину-2 и, таким образом, являются очень мощными противовоспалительными средствами. Они могут быть включены в фармацевтические составы, применимые для парентерального, перорального и местного введения. Описывается также способ их получения и фармацевтическая композиция на основе соединений формулы (I). 3 с. и 3 з.п. ф-лы, 1 табл.
Рисунок 1
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598t.gif)
Формула изобретения
1. Производные колхицина общей формулы I![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-10t.gif)
где R1 и R2 одинаковые или различные, представляют собой неразветвленную или разветвленную алкильную группу C1 - C6, циклоалкильную группу C5, ненасыщенную ацильную группу C16 - C22 или остаток
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145007/946.gif)
X - атом серы;
Y - группа формулы
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-11t.gif)
метиленовая группа которой присоединена к углероду в положении 5, а метиновая группа, имеющая ту же абсолютную конфигурацию, что и колхицин, присоединена к трополоновому кольцу, или группа =CH-CH2-OR4, метиновая группа которой присоединена к углероду в положении 5 или к трополоновому кольцу и имеет абсолютную конфигурацию s; R3 - ацильная группа C2 - C6, имеющая 1 - 3 атома галогена, предпочтительно фтора, или ацильная группа природной аминокислоты, где аминогруппа может быть защищена в виде трифторацетамида, при условии, что когда R1 и R2 - метил, R3 не является -COCH2F; R4 - ацильный остаток дикарбоновой кислоты C4 - C6 или гликозидный остаток, содержащий D-глюкозу. 2. Соединение по п.1, где R1 и R2, одинаковые или различные, представляют собой неразветвленную или разветвленную алкильную группу C1 - C6 или циклоалкильную группу C5. 3. Соединение по п.1 или 2, где Y - группа формулы
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-12t.gif)
как указано выше. 4. Способ получения производных колхицина общей формулы I по п.1, отличающийся тем, что 3-0-диметилколхицин подвергают одному или нескольким из следующих взаимодействий: а) алкилированию, ацилированию или гликозилированию фенольных групп; б) N-дезацетилированию в условиях кислотного катализа с последующим ацилированием первичной аминогруппы кислотой R3-COOH или ее производным, где R3 указан в п.1; в) N-дезацетилированию с последующей обработкой нитритом натрия и уксусной кислотой с получением соединения I, где Y - группа формулы
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-13t.gif)
и последующим взаимодействием с производным дикарбоновой кислоты или реакционноспособным производных D-глюкозы. 5. Фармацевтическая композиция, обладающая антипролиферативной, противоопухолевой и противовоспалительной активностью, содержащая в качестве активного ингредиента производное колхицина общей формулы I по любому из пп.1 - 3 в смеси с подходящим носителем, особенно с природными или синтетическими фосфолипидами. 6. Соединение по любому из пп.1 - 3, обладающее антипролиферативной, противоопухолевой и противовоспалительной активностью.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к новым производным колхицина, обладающим антипролиферативной, противоопухолевой и противовоспалительной активностями, способам их получения и содержащим их фармацевтическим составам. Колхицин представляет собой известный псевдоалкалоид, широко применявшийся в течение длительного времени в терапии для лечения подагры; он действует очень быстро и специфично, даже несмотря на то, что его следует применять в течение коротких промежутков времени из-за его токсичности. Кроме того, колхицин является очень сильным средством, препятствующим клеточному росту, чье действие связано с механизмом, блокирующим образование митотического веретена во время клеточного деления; этот последний аспект тщательно исследовался на предмет какой-либо противоопухолевой активности, и было получено значительное количество производных колхицина данного назначения. Колхицин как таковой и ряд его полученных производных не могут применяться из-за их высокой токсичности с точки зрения отношения риск/выгода. Лишь одно производное колхицина, демеколцин, применяют в некоторой степени в онкологии для лечения некоторых форм лейкоза. Что касается применения с целью оказания противовоспалительного эффекта, единственным продажным производным колхицина является тиоколхикозид, несущий тиометильный радикал в C10 и молекулу глюкозы при гидроксиле в C3; к терапевтическим применениям данного производного относят эффект мышечной релаксации и противовоспалительный эффект. Продукты по изобретению отличаются от таковых, существовавших ранее в данной области, высоким терапевтическим индексом. В области противоопухолевого действия исследования были сосредоточены на разработке продуктов, обладающих, помимо нормальной цитотоксичности, цитотоксичностью, направленной на клеточные линии, устойчивые к обычным лекарственным средствам, препятствующим клеточному росту. Производные по настоящему изобретению имеют общую формулу I![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-2t.gif)
где X может представлять собой атом кислорода или серы; R1 и R2, которые могут быть одинаковыми или различными, представляют собой неразветвленные или разветвленные алкильные группы или циклоалкильные группы, содержащие от 1 до 6 атомов углерода; или насыщенные или ненасыщенные ацильные группы, содержащие от 16 до 22 атомов углерода, или остаток
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145007/946.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145007/946.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-3t.gif)
метиленовая группа которой присоединена к углероду в положении 5, а метиновая группа, имеющая ту же абсолютную конфигурацию, что и колхицин, присоединена к трополоновому кольцу, или группу
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-4t.gif)
метиновая группа которой присоединена к углероду в положении 5 и к трополоновому кольцу и имеет абсолютную конфигурацию S; R3 представляет собой ацильную группу, содержащую от 2 до 6 атомов углерода, несущих от одного до трех атомов галогена, предпочтительно фтор или хлор, или ацильную группу природной аминокислоты, где аминогруппа может быть свободной или защищенной по типу трифторацетамида или бензамида;
R4 представляет собой ацильный остаток дикарбоновой кислоты, содержащий от 4 до 6 атомов углерода, или ацильный остаток природной аминокислоты, где аминогруппа может быть свободной или защищенной по типу трифторацетамида или бензамида, или гликозидный остаток, содержащий D-глюкозу, D-галактозу, L-фукозу или L-рамнозу. В данном случае сахара играют роль хемотактического агента для меланоцитов, гепатоцитов, фибробластов или они могут давать производное, характеризующее пролекарство. Предпочтительными соединениями формулы I являются такие, где X представляет собой серу. R1 и R2, которые являются одинаковыми или различными, предпочтительно представляют собой водород или C1-C6-алкил. Y предпочтительно представляет собой группу формулы
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-5t.gif)
как указано выше. Используемыми при получении продуктов по изобретению исходными продуктами являются природные вещества колхицин (1; X = 0; R1=R2=Me; Y=CH2-CH-NHAc), 2-O-деметилколхицин (1; X=O; R1=H; R2=Me; Y=CH2-CH-NHAc), 3-O-деметилколхицин (1; X=O; R1=Me; R2=H; Y=CH2-CH-NHAc), колхикозид (1; X=O; R1=Me; R2 =
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145007/946.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145007/946.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145007/946.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145005/945.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145007/946.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-6t.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-7t.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-8t.gif)
(J. Med. Chem. 36, 544, 1993). Полученный радикал первичного спирта путем взаимодействия с подходящими активированными дикарбоновыми кислотами или с активированными природными аминокислотами, где аминогруппа может быть свободной или защищенной по типу трифторацетамида или бензамида, или с реакционноспособной формой сахаров D-глюкозы, D-галактозы, L-фукозы или L-рамнозы приводит к получению производных общей формулы I, где
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145598/2145598-9t.gif)
причем R4 имеет значение, указанное выше. В таблице показано антимитотическая активность некоторых производных по изобретению на опухолевых клеточных линиях. Таксол и колхицин являются веществами сравнения. Данная таблица свидетельствует, что новые производные имеют значительные преимущества на резистентных клеточных линиях, которые являются основной мишенью цитотоксических лекарственных средств. Продукты по настоящему изобретению могут входить в состав фармацевтических препаратов, используемых для введения лекарственного средства. Препараты для парентерального, перорального, чрескожного, накожного введения могут быть легко приготовлены. Среди наполнителей, используемых для приготовления указанных препаратов, природные и синтетические фосфолипиды особенно применимы для приготовления липосомальных форм для парентерального, чрескожного или накожного путей введения; причем последние два препарата особенно получены при лечении воспалительных состояний суставов и периферических вен; причем указанные составы также применимы при местном лечении кожных эпителиом и в случае кожных гиперпролиферативных состояний, таких как псориаз. Оказалось, что в специфичной противоопухолевой области, помимо фосфолипидов, позволяющих вводить лекарственное средство в липосомальной форме, особенно применимы некоторые поверхностно-активные вещества, такие как полиэтоксилированное касторовое масло, как, например, Хемоформ L50, или полисорбат, как, например, Твин, действующие синергично с активным ингредиентом. В онкологии продукты применяют в дозах от 1 до 100 мг/м2, тогда как в качестве противовоспалительного средства доза изменяется от 1 до 20 мг на стандартную дозу, один или несколько раз в день. Все фармацевтические препараты, такие как ампулы, капсулы, кремы и так далее, могут быть приготовлены с большей частью указанных производных. Следующие примеры дополнительно иллюстрируют изобретение. Пример I. Получение N-дезацетил-N-трифторацетил-3-O-деметил- 3-O-циклопентилтиоколхицина, соединение IZ (1; X=S; R1=Me; R2=C5H9; Y=CH2CHNH-COCF3). 20 г 3-O-Деметилтиоколхицина (1; X=S; R1=Me; R2=H; Y=CH2CHNHAc) растворяют в 300 мл 20% серной кислоты и обрабатывают при 100oC в атмосфере азота в течение 36 ч. Реакционную смесь нейтрализуют, выделяя таким образом 12 г N-дезацетил-3-O-деметилтиоколхицина (1; X=S; R1=Me; R2=H; Y=CH2CHNH2). Данный продукт растворяют в ацетоне и подвергают взаимодействию с 3 эквивалентами трифторуксусного ангидрида при сильном перемешивании в присутствии безводного Na2CO3. Через 2 ч реакционную смесь фильтруют и раствор выпаривают досуха. Остаток, содержащий 3-O-деметил-N,3-O- бистрифторацетилтиоколхицин, гидролизуют в метаноле, содержащем NH4Cl. Реакционную смесь выпаривают досуха в вакууме и остаток обрабатывают ацетоном. Ацетоновый раствор фильтруют и нагревают с обратным холодильником в течение восьми часов с 5 эквивалентами циклопентилбромида в присутствии карбоната натрия. Соли отфильтровывают, раствор выпаривают досуха и остаток очищают с помощью хроматографии на колонке с силикагелем, используя в качестве элюента этилацетат. Путем кристаллизации из ацетона/гексана получают 8,6 г продукта, M+a m/z 523. Пример II. Получение N-дезацетил-N-трифторацетил-3-O-деметил- 3-O-изопропилтиоколхицина, соединение IIZ (1; X= S; R1=Me; R2=изо-Pr; Y=CH2-CH-NHCOCF3). Для получения данного производного повторяют методику примера I, используя изопропилбромид вместо циклопентилбромида. После очистки сырого продукта реакции на силикагеле и кристаллизации получают 7,6 г продукта, M+a m/z 497. Пример Ill. Получение N-дезацетил-N-трифторацетилтиоколхикозида, соединение IIIZ (1; X=S; R1=Me; R2=
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145007/946.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145007/946.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145005/945.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145005/945.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145005/945.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145319/8801.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145007/946.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145007/946.gif)
![производные колхицина, способ их получения, фармацевтическая композиция, патент № 2145598](/images/patents/326/2145005/945.gif)
Композиция на 100 мг-овую таблетку, мг:
Соединение IIZ (по примеру II) - 10
Лактоза - 50
Микрокристаллическая целлюлоза - 32
Поперечносшитая натрий карбоксиметилцеллюлоза - 5
Коллоидный диоксид кальция - 1
Тальк - 1
Стеарат магния - 1д
Класс C07C323/41 Y - водород или ациклический атом углерода
Класс C07C323/60 с атомом углерода по меньшей мере одной из карбоксильных групп, связанным с атомами азота
Класс C07H15/248 колхициновые радикалы, например колхикозиды
Класс A61K31/70 углеводы; сахара; их производные