паращитовидный гормон и ралоксифен для увеличения массы кости, фармацевтический состав и способ увеличения костной массы

Формула изобретения

1. Средство для увеличения костной массы или для ускорения образования кости при лечении заболевания кости, содержащее паращитовидный гормон и ралоксифен, при этом молярное отношение паращитовидного гормона к ралоксифену составляет от 10:1 до 1:10.

2. Фармацевтическая композиция для увеличения костной массы или для ускорения образования кости при лечении заболеваний кости, содержащая паращитовидный гормон, ралоксифен и, по меньшей мере, один фармацевтически приемлемый носитель, при этом молярное отношение паращитовидного гормона к ралоксифену составляет от 10:1 до 1:10.

3. Способ увеличения костной массы или ускорения образования кости при лечении заболеваний кости у людей, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, паращитовидного гормона в комбинации с ралоксифеном, при этом паращитовидный гормон вводят в дозе от 0,001 до 10 мг/кг массы тела в день, а ралоксифен вводят в дозе от 0,001 до 10 мг/кг массы тела в день.

4. Способ по п.3, отличающийся тем, что паращитовидный гормон и ралоксифен вводят одновременно.

5. Способ по п.3, отличающийся тем, что паращитовидный гормон и ралоксифен вводят последовательно.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к применению паращитовидного гормона (РТН) для увеличения массы кости, когда его используют с ралоксифеном. Результатом такого терапевтического комбинированного лечения является достижение повышенной скорости образования кости и увеличение массы кости.

Предшествующий уровень техники

Известен патент США N 5118667 (Адамс и другие), в котором раскрыто применение факторов роста кости в комбинации с ингибиторами резорбции кости, причем их используют одновременно в одном составе либо последовательно, для стимулирования образования кости.

Словик и другие (в журнале "Боун энд мин.Рез., 1:377-381, 1986) сообщают о том, что стимулирование роста кости достигается за счет применения паращитовидного гормона (РТН).

Ралоксифен описан, например, в патенте США N 4418068.

Ралоксифен имеет следующую структурную формулу:



Настоящее изобретение относится к in vivo комбинированной терапии для увеличения костной массы за счет введения ралоксифена и паращитовидного гормона. Эта комбинация обеспечивает более эффективную терапию для исключения потерь костной ткани и замены кости, чем когда эти компоненты применяют в отдельности.

Краткое изложение изобретения

Настоящее изобретение касается способа увеличения костной массы у субъекта путем ввода ему паращитовидного гормона и ралоксифена.

Предметом изобретения является также способ лечения заболевания кости у субъекта путем введения паращитовидного гормона и ралоксифена.

Также изобретение касается состава паращитовидного гормона ралоксифена для увеличения костной кости у субъекта.

Еще одним предметом изобретения является состав из паращитовидного гормона и ралоксифена для лечения повреждения кости у субъекта.

Подробное описание изобретения

Что касается ралоксифена, то понятно, что он включает в себя соли и сольваты. Когда упоминают паращитовидный гормон, то подразумевают, что он включает в себя не только весь человеческий гормон, но также те его части, которые содержат долю гормона, ответственную за стимулированные роста кости, например РТН 1-34 и его аналоги, в которых порядок чередования аминокислот слегка изменен, однако свойства стимулирования роста кости все же сохраняются, например РТН-RP.

Термин "ингибирование резорбции кости" означает предотвращение потерь костной ткани, особенно ингибирование удаления имеющейся кости или из минеральной фазы, и/или из органической матричной фазы через прямое или косвенное изменение образования остеокласта или метаболизма. Итак, термин "ингибитор резорбции кости", как его применяют здесь, означает вещества, которые препятствуют потерям костной ткани за счет прямого или косвенного изменения образования остеокласта или метаболизма.

Термин "остеогенноэффективное количество" означает то количество, которое влияет на образование и дифференциацию костной ткани.

Термин "доза, эффективная для образования костной ткани", также означает "фармацевтически эффективную дозу".

Термин "субъект", как он применяется здесь, означает позвоночное животное, например млекопитающее или птицу, которое нуждается в лечении или замене кости. Такая необходимость возникает локально в случае повреждения, несращения, дефекта кости, вживления протеза и т.п. Такая необходимость также возникает в случае систематической боли в костях, как, например, при рыхлости и пористости костей, остеоартритах, болезни Пагета, размягчении костей, при уменьшении содержания солей в костях, опухолях по типу клеток костного мозга и других формах рака, а также в случае потери костной массы, связанной с возрастом.

Термин "лечение", как он применяется здесь, означает (1) обеспечение субъекта некоторым количеством лекарства, которое достаточно, чтобы действовать профилактически для устранения развития ослабленного и/или нездорового состояния; или (2) обеспечения субъекта достаточным количеством лекарства, чтобы уменьшить или устранить болезненное состояние и/или симптомы болезненного, ослабленного и/или нездорового состояния.

Ралоксифен можно получить известными способами, например, теми, которые подробно описаны в патенте США N 4418068. Паращитовидный гормон можно получить известными способами синтетическим путем или путем рекомбинации. Паращитовидный гормон, РТН - 1 - 34, можно купить у фирмы Bachem of Jorrence, Калифорния.

Лекарства, которые препятствуют заболеванию кости, восстанавливают костную ткань и/или увеличивают массу костной ткани, можно испытать на крысах с удаленными яичниками. Эта модель испытания на животном хорошо известна (см. , например, статью Вронского и другие 1985 г. в "Calcif. Tissue Int" 37: 324-328; статью Киммела и другие 1990 г., "Calsif Tessue Int", 46: 101-110; и статью Дурбриджа и другие 1990 г., "Calsif Tissue Int", 47:383-387; которые указаны для справки. Вронский и другие описывают (в "Calsif. Tissue Int", 1985, 43, стр. 179-183) ассоциацию потерь костной ткани у крыс с удаленными яичниками. Хок и другие описывают использование молодых крыс для исследования (см. "Эндокринология, 1988, т. 122, стр. 2899-2904).

Паращитовидный гормон и ралоксифен можно принимать последовательно, совместно или одновременно в одном составе. Если его назначают для последовательного применения, то период между вводом паращитовидного гормона и ралоксифена будет обычно составлять от одной недели до одного года, а оптимально от одной недели до шести месяцев. В предпочтительном варианте ралоксифен будут вводить пациенту, после приема паращитовидного гормона с ралоксифеном или без него, после прекращения приема паращитовидного гормона.

Фармацевтические составы в соответствии с изобретением, которые включают в себя паращитовидный гормон и/или ралоксифен, будут обычно включать в себя эффективное количество для образования кости фактора роста для стимулирования роста кости ткани дополнительно к фармацевтически приемлемому инертному наполнителю. Соответствующие инертные наполнители включают в себя большинство носителей для приема лекарства, одобренных для парэнтерального применения, включая воду, соленый раствор, раствор Рингера, раствор Хэнка и растворы глюкозы, лактозы, декстрозы, этанола, глицерола, альбумина и т.п. Эти составы могут включать в себя стабилизаторы, антиоксиданты, противомикробные вещества, противокоагулирующие средства, буферные агенты, поверхностно-активные вещества и другие вспомогательные добавки. Паращитовидный гормон и/или ралоксифен можно также вводить в ионтофорезном пластыре. Детальное обсуждение соответствующих носителей для парэнтерального применения лекарства можно найти у Е.У. Мартина в "Ремингтон"з Фармацевтикэл Сайнсез" (Мак Паб.Ко., разделы в последнем издании, относящиеся к носителям восприемлющего средства и к составам, указаны здесь для справки). Такие составы в общем известны специалистам в данной области медицины и их вводят постоянно для систематического лечения.

Если комбинацию вводят в виде одного состава, то молярное отношение паращитовидного гормона к ралоксифену будет составлять примерно от 10:1 до 1: 10, предпочтительно от 5:1 до 1:5, а оптимально 1:1. Также если ее вводят в виде одного состава, то она может состоять из отдельных компонентов состава либо компоненты могут быть сопряжены друг с другом.

Необходимая точная дозировка будет зависеть от возраста, размера тела, состояния субъекта, характера и сложности заболевания, требующего лечения и т.п., таким образом нельзя заранее определить точное эффективное количество, которое будет устанавливаться теми, кто будет оказывать медицинскую помощь. Однако соответствующее количество можно определить экспериментальным путем на моделях животных. В общих чертах эффективная доза паращитовидного гормона для систематического лечения будет составлять от примера 0,001 миллиграмм на кг до примерно 10 мг/кг массы тела в день. Эффективная доза ралоксифена примерно от 0,001 мг/кг до 10 мг/кг массы тела в день.

Способы и составы в соответствии с изобретением можно использовать для лечения переломов костей, дефектов и таких расстройств, которые обычно возникают в ослабленных костях, например при рыхлости или пористости костей, остеоартритах, болезни Пагета, уменьшении количества солей в костях, остеомалации, потерях костной ткани в результате образования опухоли по типу клеток костного мозга и других формах рака, при заболевании кости в результате побочных эффектов другого лечения (например, стрероиды) и потерь костной массы, связанных с возрастом пациента.

В соответствии с одним способом применения паращитовидный гормон и ралоксифена можно вводить систематически внутрь и/или парентерально, включая подкожные или внутривенные инъекции и/или через нос.

В соответствии с другим способом применения паращитовидный гормон можно вводить локально в определенном месте, где требуется рост или исправление кости с одновременным вводом ралоксифена в этом месте или вводом ралоксифена в отдельном носителе, причем это можно вводить локально с применением паращитовидного гормона в отдельном носителе. Таким образом паращитовидный гормон и/или ралоксифен можно вводить непосредственно на участке, требующем лечения, например путем инъекции или хирургической имплантации. Соответствующие носители включают в себя гидрогели, управляемые или ручные устройства для инъекции (например, шприцы Alzet), полимолочные кислоты и коллагеновые матрицы. В настоящее время предпочтительными носителями являются те, которые состоят из порошкообразных минеральных компонентов фосфата кальция, содержащих ателопептидный коллаген, например, комбинации гомологического или ксенографического фибриллярного ателопептидного коллагена (например, имплантат из коллагена Zyderm, поставляемый фирмой Коллаген Корпорейш, Пало Алто, Калифорния) с оксиапиттрикальцийфосфатом (НА-ТСР, поставляется фирмой Zimmer, Inc. Варшава).

Зубные и ортопедические протезы можно покрыть паращитовидным гормоном в комбинации с ралоксифеном для повышения прочности крепления протеза и кости. Либо паращитовидный гормон можно использовать для покрытия имплантата, при этом ралоксифен можно вводить одновременно или последовательные в отдельном носителе и наоборот.

В общих чертах имплантируемые устройства можно покрыть паращитовидным гормоном и/или ралоксифеном следующим образом.

Паращитовидный гормон (и ралоксифен, если это потребуется) растворяют при концентрации в пределах от 0,01 мг/мл до 200 мг/мл в фосфатном буферном солевом растворе (PBS), содержащем 2 мг/мл сывороточного альбумина. Пористый конец имплантата окунают в раствор и сушат на воздухе (или лиофилизируют) или сразу вживляют на месте кости. Если это требуется, то вязкость покрывного раствора можно увеличить путем добавки гиалуроната при окончательной концентрации 0,1 мг/мл - 100 мг/мл или добавки других фармацевтически приемлемых восприемлющих средств. Либо раствор, содержащий паращитовидный гормон (и ралоксифен, если это требуется), смешивают с коллагеновым гелем или человеческим коллагеном (например, коллагеновый имплантат Zyderm фирмы Коллаген Корп., Пало Алто, Калифорния) до конечной концентрации коллагена 2 мг/мл - 100 мг/мл для образования пасты или геля, который затем используют для покрытия пористого конца имплантируемого устройства. Имплантируемое устройство с покрытием помещают на месте кости сразу или его сначала сушат на воздухе и повторно гидратируют фосфатным буферным солевым раствором до его имплантирования для максимизации образования новой кости в имплантате, при этом уменьшая вростание мягкой ткани в имплантат.

Примеры

Приводимые ниже примеры полностью иллюстрируют изобретение, а также полностью описывают, как использовать составы и способы в соответствии с изобретением, и не предназначены для ограничения объема изобретения.

Крысам возрастом 4 недели, у которых удалены яичники (OVX), вводили специально воспринимающее средство (V) или человеческий паращитовидный гормон, hРТН 1-34 (P) в количестве 8 мг/100 г в день отдельно или в комбинации с ралоксифеном (R) в количестве 0,3 мг/100 г в день следующим образом: воспринимающее средство (V) вводили в течение 24 дней; ралоксифен (R) - 24 дня; паращитовидный гормон (P) - 24 дня; паращитовидный гормон и ралоксифен (P и R) - 24 дня; паращитовидный гормон (P) - в течение 12 дней, затем вводили воспринимающее средство (V) в течение 12 дней; паращитовидный гормон - 12 дней; ралоксифен - 12 дней; воспринимающее средство - 12 дней; ралоксифен - 12 дней. На 24-ый день крыс умертвили, а кровь, бедренные кости, поясничные позвонки и почки собраны. Массу кости измерили в значении содержания кальция (Cа) и сухого веса (DW) периферических полубедренных костей; позвонки обработали для гистоморфометрии.

Когда окончательная масса тела крыс с удаленными яичниками, которым вводили ралоксифен, была меньше массы тела крыс с удаленными яичниками (OVX) или у нетронутых крыс, данные откорректировали на 100 г массы тела. Содержание кальция и сухой вес в периферической полубедренной кости уменьшились на 15% у крыс OVX в сравнении с "контрольными" крысами (Sham). Масса кости увеличивалась примерно на 25% при введении ралоксифена в течение 24 дней и примерно на 42% при введении паращитовидного гормона в течение 24 дней. Анаболический эффект паращитовидного гормона исчез после его удаления (введение паращитовидного гормона (P) в течение 12 дней и воспринимающего средства (V) в течение 12 дней). Ралоксифен имел дополнительный эффект, когда его вводили одновременно с паращитовидным гормоном (увеличение на 65% в сравнении с контрольной группой OVX). Длина бедренной кости, содержание кальция в сыворотке и почках были одинаковыми между всеми группами (табл. 1).

Данные были выражены как среднее значение sem для групп из 8 крыс. Было отмечено значительное различные, P<0,05, A в сравнении с группой Shаm, которым вводили средство для лекарства (носитель), C в сравнении с группой крыс OVX, которым вводили ралоксифен (12+12 дней).

У крыс возрастом 4 недели, у которых были удалены яичники и которых умертвили примерно после 10 недель, прирост в весе был больше, чем у крыс одного возраста без удаления яичников. Паращитовидный гормон не изменяет этот прирост в весе. Ралоксифен препятствует увеличению массы тела, связанного с удалением яичников, в присутствии или отсутствии паращитовидного гормона. Крысы, которым вводили ралоксифен в течение 12 дней и затем среду для лекарства еще в течение 12 дней, показали меньше прирост в весе, чем контрольные крысы группы OVX, однако прирост в весе был больше, чем у крыс, которым продолжали вводить ралоксифен. Отсутствие эффекта на длину бедренной кости, которая является мерилом увеличения длины кости, означает то, что изменения в массе тела не показывают изменения в росте ног (крысы становятся более толщины) (табл. 2, 3, 4).

P < 0,05, a - в сравнение с паращитовидным гормоном;

b - в сравнении с паращитовидным гормоном и ралоксифеном;

c - в сравнении с ралоксифеном;

d - в сравнении с OVX (с крысами, у которых удалены яичники);

V = среда для лекарства (носитель);

R = релоксифен;

P = паращитовидный гормон;

Ca - сухой вес = общей массе костной ткани в параферических (DW) бедренных костях.

P < 0,05a, b в сравнении со всеми другими группами. Показывает увеличение внутреннего диаметра как trabecular, так и cortical костей.

Таким образом, лечение крыс, у которых удалили яичники, паращитовидным гормоном приводит к повышенному образованию кости. Однако образование кости значительно ускорилось за счет одновременного ввода ралоксифена.