способ выделения биологически активной суммы кислот из древесной зелени пихты

Формула изобретения

Способ выделения биологически активной суммы кислот из измельченной древесной зелени пихты, включающий выделение целевого продукта экстракцией органическим растворителем, отличающийся тем, что измельченную до 0,5 - 1 мм древесную зелень пихты с влажностью до 45% и менее предварительно обрабатывают водным раствором щелочи с концентрацией 0,5 - 50% или 1,0 - 50%-ным водным раствором карбоната щелочного металла, отделяют водно-щелочной раствор солей и разрушают соли подкислением водно-щелочного раствора или водного раствора карбоната щелочного металла до pH 2 - 3.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к получению биологически активных веществ с фунгицидной и ростстимулирующей активностью, которые могут быть использованы в сельском хозяйстве для защиты и повышения продуктивности растений.

Известен [Патент РФ N 2108803, опубл.08.04.97] способ получения биологически активной суммы тритерпеновых кислот с выходом 6,2% от абсолютно сухого сырья из высушенной и измельченной древесной зелени пихты экстракцией трет-бутилметиловым эфиром, обработкой экстракта водным раствором щелочного агента с дальнейшей переработкой водно-щелочного раствора целевого продукта.

Известен [Патент РФ N 2108107, опубл. 06.03.97] способ получения биологически активной суммы солей тритерпеновых кислот из высушенной и измельченной древесной зелени пихты экстракцией ее органическим растворителем - смесью петролейного эфира (нефраса) и этилацетата, обработкой экстракта водной щелочью, отделением водного раствора от органической фазы после его самопроизвольной нейтрализации до pH 7-8 и высушиванием его до порошка.

Однако этот способ предполагает предварительное высушивание древесной зелени, что влечет за собой дополнительные трудо- и энергозатраты или зависимость от природных условий, если сушка ведется без подогрева. Кроме того, выпаривание водно-щелочного раствора целевого продукта в вакууме требует значительных энергозатрат и не всегда гарантирует сохранение состава целевого продукта.

Задачей изобретения является разработка нового эффективного способа выделения биологически активной суммы тритерпеновых кислот из древесной зелени пихты.

Технический результат заключается в том, что разработан принципиально новый способ выделения тритерпеновых кислот с выходом целевого продукта 4,0-6,8 % от абсолютно сухого сырья (а.с.с.). Способ позволяет упростить процесс и при оптимальных параметрах процесса выделения сохранить содержание тритерпеновых кислот в продукте.

Результат достигается тем, что измельченную до 0,5-1 мм древесную зелень влажностью до 45% и менее подвергают обработке водным раствором щелочи или водным раствором карбонатов щелочных металлов, сумму кислот извлекают экстракцией органическим растворителем после разрушения их солей. Для разрушения солей к полученному водно-щелочному раствору целевого продукта добавляют водный раствор минеральной или органической кислоты до достижения pH 2-3.

Для увеличения содержания тритерпеновых кислот в целевом продукте из образовавшейся эмульсии в водно-щелочном растворе нейтральные вещества могут быть извлечены петролейным эфиром.

Существенными признаками изобретения являются: измельчение древесной зелени пихты с влажностью 45% и менее до размеров 0,5-1,0 мм, получение солей кислот непосредственно обработкой измельченного сырья 0,5- 50,0%-ным водным раствором щелочи или 1,0-50,0%-ным водным раствором карбоната щелочного металла, отделение твердой части древесной зелени от полученного раствора солей, подкисление водного раствора щелочи или водного раствора карбоната щелочного металла до pH 2-3, экстракция тритерпеновых кислот органическим растворителем, последующее удаление растворителя и получение целевого продукта.

Способ осуществляется следующим образом.

Пример 1. Древесную зелень пихты влажностью 45% измельчают на шнековом измельчителе или миксере. 63 г измельченной зелени смешивают с 780 г 2%-ного водного раствора гидроокиси натрия (соотношение хвоя:щелочной раствор 0,5:1) при комнатной температуре (t=20-25^oC). Смесь перемешивают механической мешалкой (скорость 150-300 об./мин) 30 минут. Полученную гетерогенную смесь разделяют: отделяют твердую фазу фильтрованием, жидкую фазу - водно-щелочной раствор переносят в делительную воронку и добавляют 12%-ный водный раствор серной кислоты до достижения pH 2-3. После этого трижды диэтиловым эфиром (соотношение диэтиловый эфир: раствор 1:1) экстрагируют кислоты. Экстракты промывают водой, сушат, диэтиловый эфир отгоняют и получают концентрат кислот с выходом 6,0-6,8% от а.с.с.

Выделенные кислоты по данным ТСХ и ВЭЖХ совпадают с метками тритерпеновых кислот пихты. Максимум выделенных кислот в УФ-спектре соответствует поглощению в области 236-238 нм. Хроматограмма кислот, полученная методом ВЭЖХ на жидкостном хроматографе "Милихром" с колонкой "Лихросорб" и элюентом, состоящим из смеси 0,05 М ортофосфорной кислоты и метанола (15:85) при УФ-детекции 200 и 240 нм соответствует хроматограмме суммы тритерпеновых кислот, выделенных из пихты по известному способу.

Пример 2. Выделение кислот проводят так же, как в примере 1. Обработку хвои проводят 10%-ным водным раствором карбоната натрия. Соотношение хвоя: щелочной раствор 0,5: 1. Выход концентрата кислот 3,5 - 4,0% от а.с.с. Выделенные кислоты по данным ТСХ и ВЭЖХ совпадают с метками тритерпеновых кислот пихты. Максимум выделенных кислот в УФ-спектре соответствует поглощению в области 236-238 нм. Хроматограмма кислот, полученная методом ВЭЖХ на жидкостном хроматографе "Милихром" с колонкой "Лихросорб" и элюентом, состоящим из смеси 0,05 М ортофосфорной кислоты и метанола (15:85) при УФ-детекции 200 и 240 нм соответствует хроматограмме суммы тритерпеновых кислот, выделенных из пихты по известному способу.

Таким образом, новый предложенный способ позволяет получать концентрат тритерпеновых кислот из древесной зелени пихты с выходом 4,0-6,8% от абсолютно сухого сырья (выход кислот 6,2% от а.с.с. по известному способу).