способ определения активности туберкулезных изменений в легких
Классы МПК: | G01N33/68 с использованием протеинов, пептидов или аминокислот |
Автор(ы): | Макинский А.И., Спирина А.Я., Доценко В.Л., Нешкова Е.А. |
Патентообладатель(и): | Московская медицинская академия им. И.М. Сеченова |
Приоритеты: |
подача заявки:
1999-10-07 публикация патента:
27.12.2000 |
Изобретение относится к фтизиатрии и касается определения активности туберкулезных изменений в легких. Это достигается одновременным изменением уровня лейкоцитарной эластазы, эластазоподобной активности в сыворотке крови и содержания катионных белков в нейтрофилах плазмы. Активность лейкоцитарной эластазы измеряют спектрофотометрически, предварительно высвобождая ее с помощью трис-HCl буфера из комплекса с
1 - протеиназным ингибитором. В качестве субстрата используют N-BOC-L-Alanine p-nitrophenyl ester. Эластазоподобную активность сыворотки измеряют, используя тот же субстрат. Содержание катионных белков в нейтрофилах плазмы определяют, окрашивая белки зеленым прочным с последующим разрушением клеток и измерением оптической плотности проб на сканирующем фотометре. При активности лейкоцитарной эластазы до 3,1 Ед/мл, эластазоподобной активности сыворотки крови до 183 МЕ/мл и содержании катионных белков не более 7 усл.ед. определяют неактивный туберкулез легких, при более высоких значениях этих показателей или хотя бы одного из них определяют активный туберкулез легких. Способ позволяет получить высокую воспроизводимость и информативность.
![способ определения активности туберкулезных изменений в легких, патент № 2161313](/images/patents/310/2161020/945.gif)
Формула изобретения
Способ определения активности туберкулезных изменений в легких, включающий исследование крови, отличающийся тем, что в сыворотке крови регистрируют активность лейкоцитарной эластазы и эластазоподобную активность, а в нейтрофилах плазмы крови измеряют содержание катионных белков и при активности лейкоцитарной эластазы до 3,1 Ед/мл, эластазоподобной активности сыворотки крови до 183 МЕ/мл и содержании катионных белков не более 7 усл.ед. определяют неактивный туберкулез легких, при более высоких значениях этих показателей или хотя бы одного из них определяют активный туберкулез легких.Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к медицине, в частности к фтизиатрии, и может быть использовано в противотуберкулезных учреждениях. Известен способ определения активности протеиназ гранулоцитов и их кислотостабильных ингибиторов в бронхиальном секрете (БС) больных впервые выявленным туберкулезом легких, осложненным неспецифическим эндобронхитом. Результат этой работы заключается в определении клинической значимости указанных показателей (эластазоподобной активности БС, кислотостабильных ингибиторов) у больных с впервые выявленным туберкулезом легких, осложненным неспецифическим эндобронхитом на этапах их стационарного лечения (М.В.Шестерина, О.Г.Оглоблина, Б.М.Малиев. Пробл. туберкулеза, 1983, N 2, С. 51-55). Однако, авторы не определяли эти тесты у больных с неактивными туберкулезными изменениями в легких. Известен также способ определения активности туберкулеза легких, заключающийся в измерении активности гиалуронидазы, определении белкового состава сыворотки крови, содержания сиаловой кислоты до и после подкожного введения туберкулина (Гавриленко B. C. "Критерии клинического излечения туберкулеза легких", М., Медицина, 1977, 151 с.). Недостатком этого способа является неудовлетворительная достоверность получаемых данных. Известен способ определения активности туберкулезных изменений в легких, заключающийся в определении числа нейтрофилов и альвеолярных макрофагов с НСТ-положительной реакцией в бронхо- альвеолярном смыве до и после туберкулиновой нагрузки (В.П.Костромина, Е.Д.Московенко, М.Ф.Яцына, а.с. 1755100, 5 G 01 N 1/28, опубликовано в БИ 30, 1992, С. 166). Недостатком данного метода является необходимость подкожного введения туберкулина, что может привести к известным реакциям (местная, очаговая, общая) и к обострению заболевания. Известен способ определения эластазы крови при туберкулезе и гнойно-воспалительных заболеваниях легких, основанный на использовании в качестве субстрата эластина, окрашенного орцеином (Л.А.Винник, Л.М.Герович. Проблемы туберкулеза, 1985, N 12, С. 35-39). Недостатком этого способа является то, что используя указанные субстраты, авторы определяли у больных не лейкоцитарную эластазу, а суммарную активность бактериальной, панкреатической и частично лейкоцитарной эластазы, а также то, что исследования были выполнены до лечения и через 1- 4-6 месяцев комплексной терапии и потому не посвящены вопросам клинического излечения туберкулеза легких. Данный аналог является близким по технической сущности заявленному изобретению и взят за прототип. Задача - повышение точности способа определения активности туберкулезных изменений в легких за счет одновременного измерения активности лейкоцитарной эластазы, эластазоподобной активности в сыворотке крови, содержания катионных белков в нейтрофилах плазмы. Решение задачи достигается следующим образом. В 2 пробирки, одна из которых содержит гепарин (100 Ед) и 1 мл бесцветного раствора Хенкса, отбирают по 5 мл крови из локтевой вены. Пробирку без стабилизатора центрифугируют при 1500 об/мин в течение 20 минут для получения сыворотки. Вторую пробирку со стабилизатором (гепарин) выдерживают в течение 1 часа при комнатной температуре для получения плазмы. В сыворотке крови определяют активность лейкоцитарной эластазы (полностью высвобожденной из комплекса с![способ определения активности туберкулезных изменений в легких, патент № 2161313](/images/patents/310/2161020/945.gif)
![способ определения активности туберкулезных изменений в легких, патент № 2161313](/images/patents/310/2161313/2161313t.gif)
где
![способ определения активности туберкулезных изменений в легких, патент № 2161313](/images/patents/310/2161076/916.gif)
![способ определения активности туберкулезных изменений в легких, патент № 2161313](/images/patents/310/2161076/916.gif)
![способ определения активности туберкулезных изменений в легких, патент № 2161313](/images/patents/310/2161313/2161313-2t.gif)
где
![способ определения активности туберкулезных изменений в легких, патент № 2161313](/images/patents/310/2161076/916.gif)
Класс G01N33/68 с использованием протеинов, пептидов или аминокислот