1-метилкарбапенем или его фармакологически приемлемые соли, композиция, способ предупреждения или лечения бактериальных инфекций

Формула изобретения

1. (1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота или его фармакологически приемлемые соли.

2. Композиция, обладающая антибактериальной активностью для предупреждения или лечения бактериальных инфекций, содержащая эффективный компонент и фармакологически приемлемую добавку, отличающаяся тем, что включает в качестве эффективного компонента 1-метилкарбапенем или его фармакологически приемлемую соль по п.1.

3. Способ предупреждения или лечения бактериальных инфекций, включающий введение теплокровному животному эффективного компонента, обладающего антибактериальной активностью, отличающийся тем, что в качестве эффективного компонента вводят 1-метилкарбапенем или его фармакологически приемлемую соль по п.1.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к 1-метилкарбапенемовым соединениям, обладающим высокой антибактериальной активностью, их фармакологически приемлемым солям или их производным; к композициям для предупреждения или лечения бактериальных инфекций, содержащим любое одно из указанных соединений, солей и производных в качестве эффективного компонента; к применению указанных соединений, солей или производных для получения лекарственного средства, используемого для предупреждения или лечения бактериальных инфекций; к способу предупреждения или лечения бактериальных инфекций, включающему введение фармакологически эффективного количества любого из указанных соединений, солей и производных в организм теплокровных животных; и к способам получения указанных соединений, солей или производных.

Производные тиенамицина, являющиеся карбапенемовыми антибиотиками, обладают высокой антибактериальной активностью, но химически низкоустойчивы и теряют активность вследствие разложения дегидропептидазой I, которая является ферментом, присутствующим в организме человека, что объясняет их низкую скорость восстановления в моче [H. Kropp et а1., Antimicrob. Agents Chemother., 22, 62 (1982); S.R.Norrby et al., там же, 23, 300 (1983)]. Кроме того, бывает, что у некоторых видов экспериментальных животных они проявляют нефротоксичность. Из производных тиенамицина уже использовали имипенем в виде смеси с циластатином, который является ингибитором дегидропептидазы I, а панипенем был выпущен на рынок в виде смеси с бетамипроном, являющимся ингибитором переноса органических анионов. Затем было обнаружено, что введение метильной группы в положение 1 карбапенемового скелета повышает химическую устойчивость и устойчивость против дегидропептидазы I, после чего на рынок поступили производные карбапенема, пригодные для применения в качестве препарата с одним единственным активным компонентом, такие как меропенем (патент США N 5122604). Однако частое применение производных 1-метилкарбапенема, таких как меропенем, в клинической практике привело к тому, что стали появляться устойчивые к нему штаммы у Pseudomonas aeruginosa и тому подобного.

Поэтому существует растущая потребность в средствах, обладающих более высокой и хорошо сбалансированной антибактериальной активностью против широкого круга бактерий, включая штаммы Pseudomonas aeruginosa, устойчивые к меропенему, и не проявляющих нефротоксичность. Производные 1-метилкарбапенема, синтезированные для удовлетворения вышеуказанной потребности, раскрыты в заявках (Kokai) на патент Японии N Hei 5-310740, N Hei 5-339269, N Hei 6-172356 и N Hei 6-199860.

Создатели настоящего изобретения провели исследования с целью устранения указанных выше недостатков производных 1- метилкарбапенема. В результате было найдено, что по сравнению с обычными производными 1-метилкарбапенема соединения (I) по настоящему изобретению обладают более высокой антибактериальной активностью, более устойчивы по отношению к дегидропептидазе I, имеют повышенные скорости восстановления в моче и более хороши по фармакокинетике, например, в отношении периода полураспада в крови. Было также обнаружено, что соединения (I) по настоящему изобретению имеют низкую нефротоксичность и потому эффективны в качестве антибактериального средства, применяемого для лечения или предупреждения (особенно лечения) бактериальных инфекций.

В заявках (Kokai) на патент Японии N Hei 5-310740, N Hei 5-339269 и N Hei 6-172356 раскрыты содержащие 3-(аминометил)пирролидин соединения [соединение, представленное формулой (I), где R¹, R² и R³ одновременно представляют водород, и тому подобное], но в них ничего не говорится о получении соединений, относящихся к настоящему изобретению и имеющих заместитель у аминовой части 3-(аминометил)пирролидиновой группы.

В соответствии с настоящим изобретением предлагаются 1-метилкарбапенемовые соединения, обладающие высокой антибактериальной активностью, их фармакологически приемлемые соли или производные; композиции для предупреждения или лечения бактериальных инфекций, содержащие любое одно из указанных соединений, солей и производных в качестве эффективного компонента; применение указанных соединений, солей или производных для получения лекарственного средства, используемого для предупреждения или лечения бактериальных инфекций; способ предупреждения или лечения бактериальных инфекций, включающий введение фармакологически эффективного количества любого из указанных соединений, солей и производных в организм теплокровных животных; и способы получения указанных соединений, солей или производных.

Производное 1-метилкарбапенема по настоящему изобретению представлено формулой



а именно представляет собой (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S, 4S)-2-[(3R)-3- метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1- карбапен-2-ем-3-карбоновую кислоту.

Соединение (I) может быть, при необходимости, преобразовано в его "фармакологически приемлемые соли".

Примеры "фармакологически приемлемых солей" включают соли минеральных кислот, такие как гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, фосфат, сульфат и нитрат; сульфонаты, такие как метансульфонат, этансульфонат, бензолсульфонат и п-толуолсульфонат; соли органических кислот, такие как оксалат, тартрат, цитрат, малеат, сукцинат, ацетат, бензоат, манделат, аскорбат, лактат, глюконат и малат; соли аминокислот, такие как соль глицина, соль лизина, соль аргинина, соль орнитина, глутамат и аспартат; неорганические соли, такие как соль лития, соль натрия, соль калия, соль кальция и соль магния; и соли с органическим основанием, такие как соль аммония, соль триэтиламина, соль диизопропиламина и соль циклогексиламина; причем из указанных солей предпочтительной является гидрохлорид, гидробромид, фосфат, сульфат, метансульфонат, п-толуолсульфонат, оксалат, тартрат, цитрат, ацетат, лактат, глутамат, аспартат, соль натрия, соль калия, соль аммония или соль триэтиламина, более предпочтительной - гидрохлорид, сульфат, метансульфонат, цитрат, ацетат или лактат, а наиболее предпочтительной - гидрохлорид или сульфат.

Соединение (I) по настоящему изобретению может поглощать воду и образовывать продукт с абсорбированной водой или гидрат, когда его оставляют на воздухе, получают путем лиофилизации его водного раствора или перекристаллизовывают. Такие соли тоже включены в объем настоящего изобретения.

Соединения (I) по настоящему изобретению включают отдельные изомеры и смеси изомеров. Предпочтительным примером изомера является соединение, которое имеет R конфигурацию в положении 1 карбапенемового скелета, (5S,6S) конфигурацию в положениях 5 и 6, как у тиенамицина, и R конфигурацию в виде гидроксилсодержащего углерода у заместителя в положении 6.

Конфигурация (2S, 4S) соответствует 2- и 4-положениям 2-(замещенный пирролидин)-4-илтиогруппы заместителя в 2-положении карбапенемового скелета.

Нет особого ограничения на конфигурацию в 3-положении 3- (замещенный аминометил)пирролидин-1-ильной группы.

Примеры других возможных соединений формулы (I) представлены в таблице 1.

В таблице 1 Me, Et и cPr представляют, соответственно, метильную, этильную и циклопропильную группы.

Из соединений, представленных в качестве примера в таблице 1, более предпочтительными являются соединения NN 1, 3, 6, 12, 13, 16, 17, 18, 34, 35, 36, 61, 62, 77, 78, 79, 94, 95 и 96.

Из них наиболее предпочтительными являются соединения под следующими конкретными химическими названиями:

стереоизомеры соединения N 1:

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S,4S)-2- [(3R)-3-метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 3)

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-2- [(2S,4S)-2-[(3S)-3-метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 5)

стереоизомеры соединения N 3:

(1R,5S,6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3- (2-гидроксиэтиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1R,5S,6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3- (2-гидроксиэтиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -1-метил-1- карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примеpa 13)

стереоизомеры соединения N 6:

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-(карбамоилметиламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R) -1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 14)

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-(карбамоилметиламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 12:

(1R,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-(аминоэтиламинометил)- пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-6-[(1R) -1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-(аминоэтиламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 13:

(1R,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-(2-N-метиламино) этиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2- ем-3-карбоновая кислота

(1R,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-(2-N-метиламино) этиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен- 2-ем-3-карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 16:

(IR, 5S, 6S)-2-[(2S, 4S)-2- [(3R)-3- формимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин- 4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3- карбоновая кислота (соединение примера 23)

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3- формимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1- карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 17:

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3- ацетимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 8)

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3- aцетимидoилaминoметилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 10)

стереоизомеры соединения N 18:

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-гуанидинометилпирролидин-1- илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1- метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 7)

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-гуaнидинoметилпиppoлидин-1- илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 11)

стереоизомеры соединения N 34:

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-N-метил-N- формимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 21)

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-N-метил-N- формимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил]пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 35:

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-N-метил-N- ацетимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 20)

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-N-метил-N- ацетимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 36:

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-(1-метилгуанидинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 19)

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-(1-метилгуанидинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 61:

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R) -3-аминометилпирролидин-1-илкарбонил]-1-метилпирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 1)

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S) -3-aминoметилпиppoлидин-1-илкарбонил]-1-метилпирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3- карбоновая кислота (соединение примера 2)

стереоизомеры соединения N 62:

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S,4S)-2-[(3R) -3-метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] -1- метилпирролидин-4-илтио] -1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 4)

(1R,5S,6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S,4S)-2- [(3S)-3-метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] -1-метилпирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 6)

стереоизомеры соединения N 77:

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3- формимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил]-1-метилпирролидин- 4-илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3- карбоновая кислота (соединение примера 26)

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3- формимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил]-1-метилпирролидин -4-илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3- карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 78:

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3- ацетимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил]-1-метилпирролидин- 4-илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3- карбоновая кислота (соединение примера 25)

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-ацетимидоиламинометилпирролидин -1-илкарбонил]-1-метилпирролидин-4-илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 79:

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-гуанидинометилпирролидин-1- илкарбонил] -1-метилпирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 24)

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-гуaнидинoметилпиppoлидин-1 -илкарбонил] -1-метилпирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 94:

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-N-метил-N- формимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] -1-метилпирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 29)

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-N-метил-N- формимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] -1- метилпиppoлидин-4-илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1- карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 95:

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-N-метил-N- ацетимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] -1-метилпирролидин- 4-илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (соединение примера 28)

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-N-метил-N- ацетимидоиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] -1-метилпирролидин-4- илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота

стереоизомеры соединения N 96:

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-(1-метилгуанидинометил) пирролидин-1-илкарбонил] -1-метилпирролидин-4-илтио] -6-[(1R) -1-гидроксиэтил] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3- карбоновая кислота (соединение примера 27)

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-(1-метилгуанидинометил) пирролидин-1-илкарбонил] -1-метилпирролидин-4-илтио]-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота.

Производные 1-метилкарбапенема по настоящему изобретению, представленные формулой (I), могут быть получены путем осуществления взаимодействия карбаменема формулы (II):



(где R^L представляет уходящую группу и R⁵ представляет карбоксизащитную группу) с производным меркаптопирролидина формулы (III):



(где R²p представляет аминозащитную грурппу или имеет такое же значение, как описанное в R¹, R²p представляет аминозащитную группу или имеет такое же значение, как описанное в R², за исключением того, что амино-, гидрокси- или иминогруппа, содержащаяся в R², может быть защищенной, R³p представляет аминозащитную группу или имеет такое же значение, как описанное в R³, за исключением того, что амино-, гидрокси- или иминогруппа, содержащаяся в R³, может быть защищенной) и затем удаления защитной группы, если это необходимо. Кроме того, они могут быть, при необходимости, преобразованы в их фармакологически приемлемые соли или производные.

Соединения (I) по настоящему изобретению могут быть получены способами A или B (см. в конце описания).

В приведенных выше формулах R¹, R², R³, R¹p, R²p и R³p имеют такие же значения, как описанные выше, и R⁵ представляет карбоксизащитную группу.

Защитная группа гидроксильной, амино- или иминогруппы, содержащейся в R¹p, R²p или R³p, представляет собой защитную группу, обычно используемую в области химии органического синтеза (Greene & Wuts, Protectivе Groups in Organic Synthesis, 2-ое издание, 1991, John Wiley & Sons, Inc.). Предпочтительные примеры включают бензильную группу, которая может иметь заместитель, такую как бензил и 4-нитробензил; бензилоксикарбонильную группу, которая может иметь заместитель, такую как бензилоксикарбонил и 4-нитробензилоксикарбонил; или аллилоксикарбонильную группу, которая может быть замещенной в положении 2, такую как аллилоксикарбонил, 2-хлораллилоксикарбонил и 2-метилаллилоксикарбонил; причем из указанных групп более предпочтительной является 4-нитробензильная или 4-нитробензилоксикарбонильная группа.

"Карбоксизащитная группа" в R⁵ представляет собой защитную группу, обычно используемую в области химии органического синтеза (Greenе & Wuts, Protectivе Groups in Organic Synthesis, 2-ое издание, 1991, John Wiley & Sons, Inc.). Примеры включают C_1-4 алкильную группу, такую как метил, этил или трет-бутил; бензильную группу, которая может иметь заместитель, такую как бензил, 4-метоксибензил, 4-нитробензил или 2-нитробензил; бензгидрильную группу; аллильную группу, которая может иметь заместитель в положении 2, такую как аллил, 2-хлораллил или 2-метилаллил; галогенэтильную, такую как 2,2,2-трихлорэтил, 2,2-дибромэтил или 2,2,2-трибромэтил; или 2-триметилсилилэтильную труппу; причем из указанных групп более предпочтительной является 4-нитробензильная или бензильная группа.

R⁶ представляет C_1-4 алкансульфонильную группу, такую как метансульфонил, трифторметансульфонил, этансульфонил, пропансульфонил, изопропансульфонил или бутансульфонил; C_6-10 арилсульфонильную группу, такую как фенилсульфонил, толилсульфонил или нафтилсульфонил; ди-(C_1-6-алкил) фосфорильную группу, такую как диметилфосфорил, диэтилфосфорил, дипропилфосфорил, диизопропилфосфорил, дибутилфосфорил, дипентилфосфорил или дигексилфосфорил; или ди(C_6-10арил) фосфорильную группу, такую как дифенилфосфорил или дитолилфосфорил; причем из указанных групп предпочтительной является дифенилфосфорильная группа.

R⁷ представляет C_1-4 алкильную группу, такую как метил, этил, пропил или изопропил; галоген-(C_1-4алкильную) группу, такую как фторметил, хлорметил, фторэтил, хлорэтил, фторпропил, дифторметил, дифторэтил, дихлорэтил, трифторметил или трифторэтил; 2-ацетиламиноэтильную группу; 2-ацетиламиновинильную группу; C_6-10 арильную группу, такую как фенил или нафтил, которая может иметь заместители (указанная арильная группа может иметь один-три заместителя. Они одинаковы или отличаются друг от друга, и каждый заместитель описан ниже. Примеры включают атом галогена, такого как фтор, хлор или бром, C_1-4 алкильную группу, такую как метил, этил, пропил и изопропил; С_1-4 алкоксигруппу, такую как метокси, этокси, пропокси и изопропокси; (С_1-4алкокси) карбонильную группу, такую как метоксикарбонил, этоксикарбонил и трет-бутоксикарбонил; карбамоильную группу; моно- или ди-(С_1-4-алкил) карбамоильную группу; нитрогруппу; гидроксильную группу и цианогруппу); или гетероарильную группу, которая имеет один или два атома азота, такую как пиридил или пиримидинил, и может иметь заместители (указанная гетероарльная группа может иметь один-три заместителя. Они одинаковы или отличаются друг от друга и каждый включает атом галогена и C_1-4 алкильную группу, которые уже указаны выше в качестве примеров заместителя для арильной группы).

Между прочим, примеры уходящей группы R^L включают группу формулы -OR⁶ или -S(O)R⁷.

В способе A соединение (I) получают путем осуществления взаимодействия соединения формулы (IV) с сульфонилирующим или фосфорилирующим агентом в присутствии основания с получением соединения формулы (V) (стадия A1); осуществления взаимодействия соединения (V) с соединением формулы (III) в присутствии основания с получением соединения формулы (VI) (стадия A2) и, наконец, удаления защитных групп из соединения формулы (VI) (стадия A3). Каждая стадия описана ниже.

(Стадия A1)

На стадии A1 соединение формулы (V) получают путем осуществления взаимодействия соединения формулы (IV) с сульфонилирующим или фосфорилирующим агентом в инертном растворителе в присутствии основания.

Примеры сульфонилирующего агента включают C_1-4 алкансульфоновые ангидриды, такие как метансульфоновый ангидрид, трифторметансульфоновый ангидрид и этансульфоновый ангидрид; и C_6-10 арилсульфоновые ангидриды, такие как бензолсульфоновый ангидрид и п-толуолсульфоновый ангидрид; причем из них предпочтительным является п-толуолсульфоновый ангидрид.

Примеры фосфорилирующего агента включают ди(C_1-4алкил) фосфорилгалогениды, такие как диметилфосфорилхлорид и диэтилфосфорилхлорид; и ди(C_6-10арил) фосфорилгалогениды, такие как дифенилфосфорилхлорид и дифенилфосфорилбромид; причем из них предпочтительным является дифенилфосфорилхлорид.

Нет особого ограничения на природу используемого растворителя, лишь бы он не оказывал вредного влияния на реакцию. Примеры подходящих растворителей включают галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид, 1,2-дихлорэтан и хлороформ; нитрилы, такие как ацетонитрил; амиды, такие как N,N-диметилформамид и N,N-диметилацетамид; сложные эфиры, такие как этилацетат и метилацетат; и простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, терагидрофуран и диоксан, причем из указанных растворителей предпочтительным является ацетонитрил, N,N-диметилформамид или тетрагидрофуран, а наиболее предпочтительным - ацетонитрил.

Нет особого ограничения на природу используемого основания, лишь бы оно не оказывало вредного влияния на другую часть соединения, в частности -лактамовое кольцо. Предпочтительные примеры основания включают органические основания, такие как триэтиламин, диизопропилэтиламин, пиридин и 4-диметиламинопиридин, из которых более предпочтительным является диизопропилэтиламин.

Хотя на температуру реакции не налагают особого ограничения, но желательно проводить реакцию при относительно низкой температуре, чтобы подавить побочные реакции. Обычно реакцию проводят при температуре от -20^oC до 40^oC (предпочтительно от -10^oC до 20^oC). Время реакции, в основном, зависит от температуры реакции или природы реагентов, но находится в пределах от 10 минут до 5 часов (предпочтительно от 15 минут до 1 часа).

По окончании реакции полученное на данной стадии соединение (V) выделяют из реакционной смеси известным методом. Например, к реакционной смеси или к остатку, полученному путем отгонки из реакционной смеси растворителя, добавляют не смешивающийся с водой органический растворитель с последующими промывкой водой и отгонкой органического растворителя. При необходимости, полученное соединение может быть дополнительно очищено известным методом, например путем перекристаллизации, переосаждения или хроматографии. При желании, полученное соединение (V) можно подвергнуть последующей реакции (стадия А2) без выделения из реакционной смеси.

(Стадия A2)

На стадии A2 соединение формулы (VI) получают путем осуществления взаимодействия соединения (V) с производным меркаптопирролидина формулы (III) в инертном растворителе в присутствии основания.

Нет особого ограничения на природу используемого растворителя, лишь бы он не оказывал вредного влияния на реакцию. Примеры подходящих растворителей включают галогенированые углеводороды, такие как метиленхлорид, 1,2-дихлорэтан и хлороформ; нитрилы, такие как ацетонитрил; амиды, такие как N,N-диметилформамид и N,N-диметилацетамид; сложные эфиры, такие как этилацетат и метилацетат; и простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, тетрагидрофуран и диоксан, причем из указанных растворителей предпочтительным является ацетонитрил, N,N-диметилформамид или тетрагидрофуран, а более предпочтительным - ацетонитрил.

Хотя нет особого ограничения на природу основания, используемого на данной стадии, но предпочтительные примеры включают органические амины, такие как триэтиламин и диизопропилэтиламин, и неорганические основания, такие как карбонат калия и карбонат натрия, причем из указанных оснований более предпочтительным является диизопропилэтиламин.

Хотя на температуру реакции не налагают особого ограничения, обычно реакцию проводят при температуре от -20^oC до 40^oC (предпочтительно от -10^oC до 20^oC). Время реакции находится в пределах от 30 минут до 108 часов (предпочтительно от 1 до 18 часов).

По окончании реакции полученное на данной стадии соединение (VI) выделяют из реакционной смеси известным методом. Например, к реакционной смеси или к остатку, полученному путем отгонки из реакционной смеси растворителя, добавляют не смешивающийся с водой органический растворитель с последующими промывкой водой и отгонкой органического растворителя. При необходимости, полученное соединение может быть дополнительно очищено известным методом, например путем перекристаллизации, переосаждения или хроматографии. При желании, полученное соединение (VI) можно подвергнуть последующей реакции (стадия A3) без выделения из реакционной смеси.

(Стадия A3)

На стадии A3 соединение (VI) преобразуют в соединение (I) путем удаления защитных групп из соединения (VI).

Метод удаления защитной группы зависит от ее природы, но обычно защитную группу удаляют методом, традиционно используемым в области химии органического синтеза (Greenе & Wuts, Protectivе Groups in Organic Synthesis, 2-ое издание, 1991, John Wiley & Sons, Inc.).

(1) Когда защитная группа R⁵ представляет собой, например бензильную группу, которая может иметь заместитель, такую как бензил или 4-нитробензил, или бензгидрильную группу, и когда защитная группа гидроксильной, амино- или иминогруппы, содержащейся в R¹p, R²p или R³p, представляет собой бензильную группу, которая может иметь заместитель, такую как бензил или 4-нитробензил, или бензилоксикарбонильную группу, которая может иметь заместитель, защитная группа может быть удалена путем осуществления взаимодействия с восстанавливающим агентом, таким как комбинация водорода с катализатором гидрирования или сульфид щелочного металла.

Примеры восстанавливающего агента включают комбинации водорода с катализатором гидрирования, таким как палладий на угле, и сульфиды щелочных металлов, такие как сульфид натрия и сульфид калия, причем из них предпочтительным является комбинация водорода с палладием на угле.

Нет особого ограничения на природу используемого растворителя, лишь бы он не оказывал вредного влияния на реакцию, но предпочтительными являются спирты, такие как метанол и этанол, простые эфиры, такие как тетрагидрофуран и диоксан, и смеси указанных органических растворителей и воды.

Температура реакции обычно находится в пределах от 0^oC до 50^oC (предпочтительно от 10^oC до 40^oC). Время реакции pависит от природы исходного соединения и восстанавливающего агента, но обычно находится в пределах от 5 минут до 12 часов (предпочтительно от 30 минут до 4 часов).

По окончании реакции соединение (I) выделяют из реакционной смеси известным методом. Например, полученное соединение может быть выделено путем отфильтровывания из реакционной смеси нерастворимого материала с последующей отгонкой растворителя.

(2) Когда защитная группа R⁵ представляет собой аллильную группу, которая может быть замещенной в положении 2, такую как аллил, 2-хлораллил или 2-метилаллил, и когда защитная группа гидроксильной группы, аминогруппы или иминогруппы, содержащейся в R¹p, R²p или R³p, представляет собой аллилоксикарбонильную группу, которая может быть замещенной в положении 2, такую как аллилоксикарбонил, 2-хлораллилоксикарбонил или 2-метилаллилоксикарбонил, защитные группы могут быть удалены путем осуществления взаимодействия с агентом для снятия защиты, например палладий-гидридом триалкилолова, таким как бис(трифенилфосфин)палладий-гидрид хлорид трибутилолова или тертакис(трифенилфосфин) палладий-гидрид трибутилолова, или палладий-соль щелочного металла органической карбоновой кислоты, такой (соль) как тетракис(трифенилфосфин)палладий-2-этилгексаноат калия или тетракис(трифенилфосфин) палладий-2-этилгексаноат натрия.

Предпочтительные агенты для снятия защиты включают бис(трифенилфосфин)палладий-гидрид хлорид трибутилолова и тетракис(трифенилфосфин)палладий-2-этилгексаноат калия.

Нет особого ограничения на природу используемого растворителя, лишь бы он не оказывал вредного влияния на реакцию. Примеры включают галогенированные углеводороды, такие как метиленхлорид, хлороформ и 1,2-дихлорэтан, сложные эфиры, такие как этилацетат, простые эфиры, такие как тетрагидрофуран, диоксан и 1,2-диметоксиэтан, нитрилы, такие как ацетонитрил, спирты, такие как метанол, этанол и пропанол, и вода, и их смеси, причем из указанных растворителей предпочтительными являются метиленхлорид, этилацетат и их смеси.

Хотя на температуру реакции не налагают особого ограничения, обычно реакцию проводят при температуре от -20^oC до 100^oC (предпочтительно от 0^oC до 60^oC). Время реакции обычно находится в пределах от 30 минут до 48 часов (предпочтительно от 30 минут до 12 часов).

По окончании реакции соединение (I) выделяют из реакционной смеси известным методом. Например, отфильтровывают из реакционной смеси нерастворимый материал, выпавший в осадок в результате реакции, и затем отгоняют растворитель с получением соединения (I).

(3) Когда защитная группа R⁵ представляет собой галогенэтильную группу, такую как 2,2-дибромэтил или 2,2,2-трихлорэтил, защитная группа может быть удалена путем осуществления взаимодействия с восстанавливающим агентом, таким как комбинация металла, такого как цинк, с кислотой, такой как уксусная кислота или хлороводородная кислота.

Предпочтительные примеры восстановителя включают комбинацию цинка с уксусной кислотой.

Нет особого ограничения на природу используемого растворителя, лишь бы он не оказывал вредного влияния на реакцию. Предпочтительные примеры включают спирты, такие как метанол и этанол, простые эфиры, такие как тетрагидрофуран и диоксан, алифатические кислоты, такие как уксусная кислота, и смеси указанных органических растворителей и воды.

Температура реакции обычно находится в пределах от 0^oC до 40^oC (предпочтительно от 10^oC до 30^oC). Время реакции зависит от природы исходного соединения и восстанавливающего агента, но обычно находится в пределах от 5 минут до 12 часов (предпочтительно от 30 минут до 4 часов).

По окончании реакции соединение (I) выделяют из реакционной смеси известным методом. Например, полученное соединение может быть выделено путем отфильтровывания из реакционной смеси нерастворимого материала с последующей отгонкой растворителя.

При необходимости полученное соединение (I) может быть очищено известным методом, например путем перекристаллизации, препаративной тонкослойной хроматографии или колоночной хроматографии.

С другой стороны, способ B является другим способом получения соединения (I). В частности, соединение формулы (VII) подвергают взаимодействию с соединением формулы (III) в присутствии основания с получением соединения формулы (VI) (стадия B1) и затем удаляют защитные группы в соединении (VI) с получением соединения (I) (стадия B2). Исходное соединение формулы (VII), используемое в этом способе синтеза, получают способом, раскрытым в заявке Kokai N SHO 62-30781 на патент Японии. Ниже дается описание каждой стадии.

(Стадия B1)

На стадии B1 получают соединение формулы (VI) путем осуществления взаимодействия соединения (VII) с производным (III) меркаптопирролидина в инертном растворителе в присутствии основания.

Нет особого ограничения на природу используемого растворителя, лишь бы он не оказывал вредного влияния на реакцию. Примеры подходящих растворителей включают тетрагидрофуран, ацетонитрил, диметилформамид, диметилсульфоксид, воду и их смеси, из которых предпочтительным является ацетонитрил.

Нет особого ограничения на природу используемого основания, лишь бы оно не оказывало вредного влияния на другую часть соединения, в частности -лактамное кольцо. Предпочтительные примеры основания включают органические основания, такие как диизопропилэтиламин, триэтиламин, N-метилпиперидин и 4-диметиламинопиридин, и неорганические основания, такие как карбонат калия и бикарбонат натрия, из которых предпочтительным является диизопропилэтиламин.

Хотя на температуру реакции не налагают особого ограничения, но является предпочтительным проводить реакцию при относительно низкой температуре, чтобы подавить побочные реакции. Обычно реакцию проводят при температуре от -20^oC до 40^oC (предпочтительно от -10^oC до 20^oC).

Время реакции, в основном, зависит от температуры реакции или природы реагентов, но обычно находится в пределах от 15 минут до 75 часов (предпочтительно от 30 минут до 18 часов).

По окончании реакции полученное на данной стадии соединение (VI) выделяют из реакционной смеси известным методом. К реакционной смеси или к остатку, полученному путем отгонки из реакционной смеси растворителя, добавляют не смешивающийся с водой органический растворитель с последующими промывкой водой и отгонкой органического растворителя. При необходимости, полученное соединение может быть дополнительно очищено известным методом, например, путем перекристаллизации, переосаждения или хроматографии. При необходимости, полученное соединение (VI) можно подвергнуть последующей реакции (стадия B2) без выделения из реакционной смеси.

(Стадия B2)

На стадии B2 соединение (I) полчают путем удаления защитных групп из соединения (VI).

Эту стадию можно проводить так же, как описано в стадии A3 способа A.

1-Метилкарбапенем формулы (I), полученный способом A или B, может быть преобразован в его фармакологически приемлемую соль или производное (предпочтительно сложноэфирное производное) методом, известным в области -лактамных антибиотиков.

Между прочим, меркаптопирролидин (IV), используемый в качестве исходного материала в каждом из способов A и B, может быть получен известным способом, например способами, описанными в I.Kawamoto et al., Synlett, 575 (1995), заявке Kokai N Hei 2-28180 на патент Японии, заявке Kokai N Hei 2-3687 на патент Японии, заявке Kokai N Hei 4-211083 на патент Японии или заявке Kokai N Hei 5-339269 на патент Японии.

Соединение формулы (I) и их фармакологически приемлемые соли по настоящему изобретению обладают сильной и хорошо сбалансированной антибактериальной активностью против широкого круга бактерий, включающего грамположительные бактерии, такие как Staphylococcus aureus и Bacillus subtilis, грамотрицательные бактерии, такие как Escherichia coli, вид Shidella, Klebsiella penumoniae, вид Proteus, вид Serratia, вид Enterobacter и Pseudomonas aeruginosa, и анаэробы, такие как Bacteroides fragilis. Они также проявляют высокую антибактериальную активность против Pseudomonas aeruginosa, обладающих резистентностью к меропенему. Кроме того, соединения (I) по настоящему изобретению проявляют высокую устойчивость против -лактамаз и против дегидропептидазы-I и высокую скорость восстановления в моче. И еще, соединения (I) по настоящему изобретению проявляют прекрасную кинетику in vivo, например, в отношении периода полураспада в крови и относительно свободны от нефротоксичности. Судя по этим достоинствам, они являются прекрасными антибиотиками.

По сравнению с аминометильными соединениями [соединения, представленные формулой (I), где R¹, R² и R³ представляют атомы водорода; Соединение A и соединение B, раскрытые в заявке Kokai N Hei 5-310740] соединения (I), имеющие заместитель по аминогруппе, обладают более высокой активностью против Pseudomonas aeruginosa, лучшей кинетикой in vivo и более низкой нефротиксичностью.

Таким образом, соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли или производные по настоящему изобретению являются превосходными антибактериальными средствами для лечения или предупреждения (предпочтительно лечения) инфекций, вызванных различными бактериями.

Возможность промышленного применения

При использовании соединений (I) или их фармакологически приемлемых солей в качестве антибактериальных средств их можно вводить перорально в форме таблеток, капсул, гранул, порошков или сиропов как таковые или в смеси с необходимыми фармакологически приемлемыми добавками, такими как наполнитель или разбавитель, или парентерально в форме растворов для инъекций.

Указанные выше лекарственные формы могут быть изготовлены известным образом с использованием добавок. Примеры добавок включают наполнители (например, производные сахаров, такие как лактоза, сахароза, декстроза, маннит или сорбит; производные крахмала, такие как кукурузный крахмал, картофельный крахмал, -крахмал, декстрин или карбоксиметильный крахмал; производные целлюлозы, такие как кристаллическая целлюлоза, низкозамещенная гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, кальций-карбоксиметилцеллюлоза или натрий-карбоксиметилцеллюлоза с внутренними поперечными связями; аравийская камедь; десктран; пуллулан; силикатные производные, такие как светлый кремниевый ангидрид, синтетический алюмосиликат или алюмометасиликат магния; фосфатные производные, такие как фосфат кальция; карбонатные производные, такие как карбонат кальция; или сульфатные производные, такие как сульфат кальция), связывающие вещества (например, указанные выше наполнители, желатин, поливинилпирролидон или Макрогол (Macrogol)), разрыхляющие вещества (например, указанные выше наполнители или химически модифицированные производные крахмала или целлюлозы, такие как натрий-кросскармеллоза, натрий-карбоксиметилкрахмал или сетчатый поливинилпирролидон), смазывающие вещества (например, тальк, стеариновая кислота, металлические соли стеариновой кислоты, такие как стеарат кальция или стеарат магния; коллоидальный диоксид кремния; пчелиный клей; воск, такой как спермацет; борная кислота; гликоль; карбоновые кислоты, такие как фумаровая кислота или адипиновая кислота; карбоксилаты натрия, такие как бензоат натрия; сульфаты, такие как сульфат натрия; лейцин; лаурилсульфаты, такие как лаурилсульфат натрия или лаурилсульфат магния; кремниевые кислоты, такие как кремниевый ангидрид или кремниевый гидрат; или производные крахмала, примеры которых даны выше для наполнителя), стабилизирующие вещества (например, п-гидроксибензоаты, такие как метил п-гидроксибензоат или пропил п-гидроксибенэоат; спирты, такие как хлорбутанол, бензиловый спирт или фенилэтиловый спирт; хлорид бензалкония; производные фенола, такие как фенол или крезол; тимеросал; уксусный ангидрид; или сорбиновая кислота), корригенты (например, традиционно используемые подслащиватели, подкисляющие вещества или ароматизаторы), суспендирующие вещества (например, Полисорбат 80 или натрий-карбоксиметилцеллюлоза), разбавители и растворители для приготовления лекарственного средства (например, вода, этанол или глицерин).

Дозу соединений (I) меняют в зависимости от состояния и возраста пациента. Перорально их вводят в количестве 10 мг

(предпочтительно 50 мг) как нижнем пределе разовой дозы и 2000 мг (предпочтительно 1000 мг) как верхнем пределе разовой дозы, а внутривенно их вводят в количестве 10 мг (предпочтительно 100 мг) как нижнем пределе разовой дозы и 3000 мг (предпочтительно 2000 мг) как верхнем пределе разовой дозы. Желательно взрослому вводить их в виде разовой дозы или в виде разделенной на сутки дозы (на шесть раз) в зависимости от состояния пациента.,

Наилучшие способы осуществления изобретенияя

Настоящее изобретение описано далее более подробно на примерах, ссылочных примерах, испытаниях и примерах приготовления лекарственных средств. Однако настоящее изобретение не ограничивается этими примерами. Между прочим, для получения спектра ядерного магнитного резонанса в примерах и ссылочных примерах использовали натрия триметилсилилпропионат-d₄ в качестве внутреннего стандарта для измерения в тяжелой воде и тетраметилсилан в качестве внутреннего стандарта для измерения в других растворителях, если не указано иное.

Пример 1

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-Аминометилпирролидин-1- илкарбонил]-1-метилпирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1- метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 61)



(1) К раствору 4-нитробенэил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-(дифенилфосфорилокси)-1-карбапен-2-ем-3- карбоксилата (0,72 г) в безводном ацетонитриле (7 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,21 мл) и раствор (2S,4S)-4-меркапто-1-метил-2-[(3R)-3-(4- нитробензилоксикарбониламинометил) пирролидин-1- илкарбонил] пирролидина (0,54 г) в безводном ацетонитриле (10 мл). Полученную смесь перемешивали в течение всей ночи при 0^oC. Прибавляли к реакционной смеси этилацетат. Полученную смесь промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 7/3) и в результате получили 4-нитробензил (1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил] -1-метил-2- [(2S,4S)-1-метил-2-[(3R)- 3- (4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоксилат (0,74 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1771, 1721, 1637, 1608, 1522, 1490, 1274, 1245, 1210, 1181, 1137, 1107, 1074, 1046, 1026, 1014.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,27 (3H, д, J= 7,3 Гц), 1,36 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,45-2,80 (5H, м), 2,31 2,31 (ЗH, сх2), 2,98-3,90 (13H, м), 4,18-4,30 (2H, м), 5,10-5,50 (4H, м), 7,48 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,63 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,20 (4H, д, J=8,6 Гц).

(2) К раствору соединения (0,73 г), которое было получено в (1), в тетрагидрофуране (40 мл) и воде (28 мл) прибавляли 10% палладий на угле (1,46 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 1,5 часа при перемешивании при наружной температуре 30^oC. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат промывали эфиром и этилацетатом, после чего концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток разделяли путем колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 6/94-1/9 (элюирование с постепенным увеличением концентрации ацетонитрила от 6% до 10%)] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили неочищенное указанное в заголовке соединение (246 мг) в виде порошка.

Отделяли от 246 мг неочищенного указанного в заголовке соединения 230 мг часть и очищали ее через препаративную колонку для ВЭЖХ ["Cosmosil 5C18-AR" (NACALAI TESQUE, INC. ), ацетонитрил/вода = 6/94-1/9 (элюирование с постепенным увеличением концентрации ацетонитрила от 6% до 10%)] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили указанное в заголовке соединение (156 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1758, 1633, 1594, 1488, 1455, 1385, 1340, 1313, 1253, 1225, 1210, 1181, 1149, 1095.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,21 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,63-1,86 (2H, м), 2,14-2,93 (4H, м), 2,32 (3H, с), 3,03- 4,01 (13H, м), 4,17-4,30 (2H, м).

Пример 2.

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-Аминометилпирролидин-1- илкарбонил]-1-метилпирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 61)



(1) К раствору 4-нитробензил (1R,5s,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-(дифенилфосфорилокси)-1-карбапен-2-ем-3- карбоксилата (0,73 г) в безводном ацетонитриле (7 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,22 мл) и раствор (2S,4S)-4-меркапто-1-метил-2- [(3S)-3-(4-нитробенэилоксикарбониламинометил)пирролидин-1- илкарбонил]пирролидина (0,57 г) в безводном ацетонитриле (10 мл). Полученную смесь перемешивали в течение всей ночи при 0^oC. Прибавляли к реакционной смеси этилацетат. Полученную смесь промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 7/3) и в результате получили 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S,4S)-1-метил-2-[(3S)-3-(4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоксилат (0,78 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1771, 1721, 1638, 1608, 1522, 1490, 1453, 1375, 1347, 1324, 1274, 1246, 1210, 1181, 1137.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,25 (3H, д, J= 7,3 Гц), 1,36 (3H, д, J=6,6 Гц), 1,46-2,80 (5H, м), 2,31 (3H, с), 2,98-4,00 (13H, м), 4,18-4,31 (2H, м), 5,11-5,50 (4H, м), 7,42-7,67 (4H, м), 8,13-8,25 (4H, м).

(2) К раствору соединения (0,76 г), которое было получено в (1), в тетрагидрофуране (40 мл) и воде (28 мл) прибавляли 10% палладий на угле (1,55 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 1,5 часа при перемешивании при наружной температуре 30^oC. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат промывали эфиром и этилацетатом, после чего концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток разделяли путем колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 6/94-1/9] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили неочищенное указанное в заголовке соединение (248 мг) в виде порошка. Отделяли от 248 мг неочищенного указанного в заголовке соединения 189 мг часть и очищали ее через препаративную колонку для ВЭЖХ ["Cosmosil 5C18-AR" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 6/94-1/9] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили указанное в заголовке соединение (125 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1759, 1633, 1595, 1488, 1455, 1384, 1253, 1211, 1180, 1148, 1095.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,21 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,63- 1,87 (1H, м), 2,13-2,40 (1H, м), 2,31, 2,30 (3H, сх2), 2,53-2,93 (3H, м), 3,08-3,90 (11H, м), 4,18-4,29 (2H, м).

Пример 3

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S,4S)-2- [(3R)-3-метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4- илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 1)



(1) К раствору 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-(дифенилфосфорилокси) -1-карбапен-2-ем- 3-карбоксилата (1,76 г) в безводном ацетонитриле (20 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,51 мл) и раствор (2S,4S)-4-меркапто-2- [(3S)-3-(N-метил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] -1-(4-нитробензилоксикарбонил) пирролидина (1,92 г) в безводном ацетонитриле (20 мл). Полученную смесь перемешивали в течение всей ночи при 0^oC. Прибавляли к реакционной смеси этилацетат. Полученную смесь промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол=95/5-9/1) и в результате получили 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-2-[(2S, 4S)-2-[(3S)-3- (N-метил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил) -1-(4-нитробензилоксикарбонил)-пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоксилат (2,52 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1774, 1707, 1652, 1607, 1522, 1441, 1404, 1346, 1295, 1210, 1143, 1110.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,29 (3H, д, J=7,2 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,l Гц), 1,55-2,73 (5H, м), 2,93-4,58 (18H, м), 5,02- 5,52 (6H, м), 7,40-7,70 (6H, м), 8,15-8,30 (6H, м).

(2) К раствору соединения (2,52 г), которое было получено в (1), в тетрагидрофуране (120 мл) и воде (84 мл) прибавляли 10% палладий на угле (5,07 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 1,5 часа при перемешивании при наружной температуре 30^oC. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат промывали эфиром и этилацетатом, после чего концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 6/94- 8/92] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили указанное в заголовке соединение (406 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1757, 1634, 1598, 1456, 1386, 1311, 1284, 1257, 1225, 1180, 1148, 1099.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,22 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,58-1,87 (2H, м), 2,16-2,31 (1H, м), 2,58-2,80 (2H, м), 2,76 (3H, м), 3,03-4,07 (12H, м), 4,18-4,29 (2H, м).

Пример 4.

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S,4S)-2- [(3R)-3-метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] -1- метилпирролидин-4-илтио] -1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 62)



(1) К раствору 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-(дифенилфосфорилокси)-1-карбапен-2-ем-З- карбоксилата (0,72 г) в безводном ацетонитриле (5 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,21 мл) и раствор (2S,4S)-4-меркапто-1-метил-2-[(3S)-3-(N-метил-N- 4-нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1- илкарбонил] пирролидина (0,54 г) в безводном ацетонитриле (5 мл). Полученной смеси давали реагировать в течение всей ночи при 0^oC. Прибавляли к реакционной смеси этилацетат. Полученную смесь промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 6/4) и в результате получили 4-нитробензил (1R, 5S,6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S, 4S)-1-метил- 2-[(3S)-3-(N-метил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -1-карбапен-2-ем-3- карбоксилат (0,46 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1770, 1705, 1640, 1607, 1522, 1489, 1452, 1403, 1376, 1346, 1278, 1210, 1143, 1106.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,27 (3H, д, J= 7,3 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,49-2,83 (5H, м), 2,31, 2,35 (3H, с2), 2,95-3,80 (13H, м), 4,20-4,30 (2H, м), 5,16- 5,53 (4H, м), 7,52 (2H, д, J=8,8 Гц), 7,64, 7,65 (2H, дх2, J=8,8 Гц), 8,22, 8,23 (4H, дх2, J=8,8 Гц).

(2) К раствору соединения (0,46 г), которое было получено в (1), в тетрагидрофуране (22 мл) и воде (15 мл) прибавляли 10% палладий на угле (0,93 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 1,5 часа при перемешивании при наружной температуре 30^oC. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат промывали эфиром и этилацетатом, после чего концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 6/94-8/92] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили указанное в заголовке соединение (150 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1760, 1634, 1598, 1486, 1454, 1383, 1314, 1279, 1253, 1221, 1180, 1148, 1095.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,21 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,65- 1,86 (2H, м), 2,15-2,30 (1H, м), 2,38 (3H, с), 2,57-3,00 (2H, м), 3,10- 3,99 (12H, м), 4,18-4,29 (2H, м).

Пример 5

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S,4S)-2- [(3S)-3-метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4- илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 1)



(1) К раствору 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-(дифенилфосфорилокси)-1-карбапен-2-ем- 3-карбоксилата (0,85 г) в безводном ацетонитриле (5 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,25 мл) и раствор (2S,4S)-4-меркапто-2- [(3R)-3-(N-метил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] -1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидина (0,90 г) в безводном ацетонитриле (10 мл). Полученную смесь перемешивали в течение всей ночи при 0^oC. Прибавляли к реакционной смеси этилацетат. Полученную смесь промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 95/5-9/1) и в результате получили 4- нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-2- [(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(N-метил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил) -1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоксилат (1,07 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1773, 1707, 1645, 1607, 1522, 1441, 1404, 1373, 1346, 1295, 1210, 1180, 1143, 1110, 1047, 1015.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,27 (3H, д, J=7,3 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,50-2,72 (5H, м), 2,90-4,31 (14H, м), 4,40-4,55 (1H, м), 5,01-5,52 (6H, м), 7,41- 7,67 (6H, м), 8,13-8,27 (6H, м).

(2) К раствору соединения (1,05 г), которое было получено в (l) в тетрагидрофуране (50 мл) и воде (35 мл), прибавляли 10% палладий на угле (2,10 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 1,5 часа при перемешивании при наружной температуре 30^oC. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат промывали эфиром и этилацетатом, после чего концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 6/94-1/9] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили указанное в заголовке соединение (127 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1756, 1633, 1598, 1457, 1387, 1311, 1285, 1258, 1226, 1181, 1149, 1096, 1074.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,22 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,59-1,87(2Н, м), 2,16-2,32 (1H, м), 2,58-2,81 (2H, м), 2,77 (3H, с), 3,05-3,86 (12H, м), 3,94-4,03 (1H, м), 4,18-4,28 (2H, м).

Пример 6.

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S,4S)-2- [(3S)-3-метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] -1- метилпирролидин-4-илтио] -1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 62)



(1) К раствору 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-(дифенилфосфорилокси)-1-карбапен-2-ем- 3-карбоксилата (0,66 г) в безводном ацетонитриле (5 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,19 мл) и раствор (2S,4S)-4-меркапто-1-метил-2-[(3R)-3-(N-метил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1- илкарбонил] пирролидина (0,53 г) в безводном ацетонитриле (5 мл). Полученной смеси давали реагировать в течение всей ночи при ^oC. Прибавляли к реакционной смеси этилацетат. Полученную смесь промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 6/4) и в результате получили 4-нитробензил (1R, 5S,6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S, 4S)-1- метил-2-[(3R)-3-(N-метил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -1- карбапен-2-ем-3-карбоксилат (0,43 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1771, 1734, 1705, 1639, 1608, 1522, 1489, 1452, 1403, 1375, 1346, 1278, 1246, 1210, 1142.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,27 (3H, д, J=7,2 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,52-2,78 (8H, м), 2,94-3,82 (13H, м), 4,19-4,30 (2H, м), 5,12-5,50 (4H, м), 7,50-7,68 (4H, м), 8,21-8,23 (4H, м).

(2) К раствору соединения (0,42 г), которое было получено в (1), в тетрагидрофуране (20 мл) и воде (15 мл) прибавляли 10% палладий на угле (0,83 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 1,5 часа при перемешивании при наружной температуре 30^oC. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат промывали эфиром и этилацетатом, после чего концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 6/94-8/92] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили указанное в заголовке соединение (28 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1757, 1642, 1597, 1489, 1457, 1384, 1251, 1210, 1158, 1095, 1028.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м. д.: 1,21 (3H, д, J=7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,67-1,88 (2H, м), 2,17-2,32 (1H, м), 2,51 (3H, ш.с), 2,57-2,75 (1H, м), 2,76 (3H, с), 2,87-3,01 (1H,м), 3,05-3,87 (11H, м), 3,90-4,00 (1H, м), 4,18-4,29 (2H, м).

Пример 7.

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-Гуанидинометилпирролидин-1- илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1- метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 18)



(1) К раствору 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-(дифенилфосфорилокси)-1-карбапен-2-ем-3- карбоксилата (0,70 г) в безводном ацетонитриле (10 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,21 мл) и раствор (2S,4S)-4-меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2- [(3R)-3-(4-нитробензилоксикарбонилгуанидинометил)пирролидин-1- илкарбонил] пирролидина (1,28 г) в безводном ацетонитриле (10 мл). Полученной смеси давали реагировать в течение всей ночи при 0^oC. Прибавляли к реакционной смеси этилацетат. Полученную смесь промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 95/5-9/1-6/4), в результате получили 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил] -1-метил-2-[(2S,4S)-1-(4-нитробензилоксикарбонил) -2-[(3R)-3-(4-нитробензилоксикарбонилгуанидинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3- карбоксилат (0,97 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr _макс. см ^-1: 1772, 1709, 1647, 1608, 1522, 1491, 1440, 1404, 1378, 1346, 1322, 1287, 1210, 1178, 1133, 1109.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,28 (3H, д, J=7,4 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,50-2,77 (8H, м), 2,94-4,05 (12H, м), 4,18-4,28 (2H, м), 4,40-4,55 (1H, м), 5,10-5,51 (6H, м), 7,37-7,68 (6H, м), 8,10-8,27 (6H, м).

(2) К раствору соединения (0,95 г), которое было получено в (1), в тетрагидрофуране (50 мл) и воде (35 мл) прибавляли 10% палладий на угле (1,90 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 1,5 часа при перемешивании при наружной температуре 30^oC. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат промывали эфиром и этилацетатом, после чего концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем колоночной хроматографии с обращенной фазой ["CosmosiI 75C18-PREP" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 8/92-12/88] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили неочищенное указанное в заголовке соединение (224 мг) в виде порошка. Неочищенное указанное в заголовке соединение очищали через препаративную колонку ВЭЖХ ["Cosmosil 5C18-AR" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 8/92-12/88] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили указанное в заголовке соединение (166 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1757, 1630, 1455, 1386, 1313, 1283, 1260, 1224, 1182, 1147, 1102, 1074.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,22 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,55-1,84 (2H, м), 2,18-2,23 (1H, м), 2,52-2,78 (2H, м), 3,06 (1H, дд, J= 12,3, 3,6 Гц), 3,13-3,85 (10H, м), 3,96-4,03 (1H, м), 4,18-4,29 (2H, м).

Пример 8

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-Ацетимидоиламинометилпирролидин -1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1 -карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 17)



(1) К раствору 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-(дифенилфосфорилокси)-1-карбапен-2-ем-3- карбоксилата (0,81 г) в безводном ацетонитриле (10 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,44 мл) и раствор (2S,4S)-4-меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)- 2-[(3R)-3-(4-нитробензилоксикарбонилацетимидоиламинометил)пирролидин -1-илкарбонил]пирролидина (1,35 г) в безводном ацетонитриле (15 мл). Полученной смеси давали реагировать в течение всей ночи при 0^oC. Прибавляли к реакционной смеси этилацетат. Полученную смесь промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 95/5-9/1-8/2) и в результате получили 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-2-[(2S,4S)-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)-3-(4- нитробензилоксикарбонилацетимидоаминометил)пирролидин-1- илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоксилат (1,15 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1773, 1709, 1650, 1607, 1556, 1522, 1494, 1441, 1404, 1373, 1246, 1278, 1237, 1212, 1126, 1110.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,29 (3H, д, J=7,1 Гц), 1,37 (3H, д, J=6,1 Гц), 1,50-2,72 (9H, м), 2,98-4,06 (12H, м), 4,22-4,30 (2H, м), 4,46-4,57 (1H, м), 5,16-5,52 (6H, м), 7,43-7,67 (6H, м), 8,17-8,27 (6H, м).

(2) К раствору соединения (1,13 г), которое было получено в (1), в тетрагидрофуране (60 мл) и воде (42 мл) прибавляли 10% палладий на угле (2,28 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 1,5 часа при перемешивании при наружной температуре 30^oC. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат промывали эфиром и этилацетатом, после чего концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 8/92-12/88] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили соединение (337 мг) в виде порошка.

Полученное соединение очищали через препаративную колонку для ВЭЖХ ["Cosmosil 5C18-AR" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 8/92-12/88] с последующей концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили указанное в заголовке соединение (254 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1756, 1684, 1633, 1593, 1455, 1386, 1312, 1284, 1261, 1226, 1182, 1284, 1261, 1226, 1182, 1148.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,22 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,56-1,67 (1H, м), 1,69-1,87 (1H, м), 2,12-2,26 (1H, м), 2,25 (3H, с), 2,58- 2,78 (2H, м), 3,06 (1H, дд, J=12,3, 3,5 Гц), 3,14-3,85 (10H, м), 3,96-4,04 (1H, м), 4,18-4,28 (2H, м).

Пример 9

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-Циклопропиламинометилпирролидин -1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил- 1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 15)



(1) К раствору 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-(дифенилфосфорилокси)-1-карбапен-2-ем-3- карбоксилата (0,66 г) в безводном ацетонитриле (7 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,19 мл) и раствор (2S,4S)-4-меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)- 2-[(3S)-3-(N-циклопропил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидина (0,14 г) в безводном ацетонитриле (8 мл). Полученной смеси давали реагировать в течение всей ночи при 0^oC. Прибавляли к реакционной смеси этилацетат. Полученную смесь промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 95/5) и в результате получили 4-нитробензил (1R,5S, 6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил] -1-метил-2-[(2S,4S)-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2- [(3S)-3-(N-циклопропил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -1-карбапен-2-ем-3- карбоксилат (0,80 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1774, 1708, 1652, 1607, 1522, 1496, 1444, 1404, 1346, 1287, 1210, 1181, 1138, 1110.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, CDCl₃) м.д.; 0,92 (4H, м), 1,29 (3H, дх, J=7,4 Гц), 1,37, 1,38 (3H, дх2, J=6,3 Гц), 1,48-2,74 (6H, м), 3,00-4,05 (11H, м), 4,22-4,30 (2H, м), 4,36-4,56 (1H, м), 5,16-5,52 (6H, м), 7,43-7,68 (6H, м), 8,17-8,26 (6H, м).

(2) К раствору соединения (0,78 г), которое было получено в (1), в тетрагидрофуране (40 мл) и воде (28 мл) прибавляли 10% палладий на угле (1,57 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 1,5 часа при перемешивании при наружной температуре 30^oC. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат промывали эфиром и этилацетатом, после чего концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 6/94- 1/9] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили указанное в заголовке соединение (106 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1759, 1637, 1599, 1455, 1386, 1312, 1283, 1259, 1224, 1180, 1147, 1103.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м. д.: 0,73-0,88 (4H, м), 1,22 (3H, д, J=7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,63-1,86 (2H, м), 2,14-2,30 (1H, м), 2,58-2,83 (3H, м), 3,08-3,92 (11H, м), 4,06-4,14 (1H, м), 4,19-4,30 (2H, м).

Пример 10

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-Ацетимидоиламинометилпирролидин -1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил- 1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 17)



(1) К раствору 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-(дифенилфосфорилокси)-1-карбапен-2-ем-3- карбоксилата (0,58 г) в безводном ацетонитриле (10 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,17 мл) и раствор (2S,4S)-4-меркапто-1-(4- нитробензилоксикарбонил) 2-[(3S)-3-(4- нитробензилоксикарбонилацетимидоиламинометил)пирролидин-1- илкарбонил]пирролидина (0,93 г) в безводном ацетонитриле (10 мл). Полученную смесь перемешивали в течение всей ночи при 0^oC. Прибавляли к реакционной смеси этилацетат. Полученную смесь промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 9/1) и в результате получили 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-2-[(2S, 4S)-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)-3-(4- нитробензилоксикарбонилацетимидоиламинометил)пирролидин-1- илкарбонил]пирролидин-4-илтио] -1-карбапен-2-ем-3-карбоксилат (0,61 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1774, 1709, 1651, 1607, 1558, 1522, 1496, 1441, 1404, 1373, 1346, 1278, 1238, 1212, 1126, 1110, 1074, 1015.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,29 (3H, д, J=7,l Гц), 1,37 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,55-2,75 (9H, м), 3,05-4,06 (11H, м), 4,22-4,27 (2H, м), 4,44-4,60 (1H, м), 5,17-5,53 (6H, м), 7,42-7,68 (6H, м), 8,15- 8,26 (6H, м).

(2) К раствору соединения (0,58 г), которое было получено в (1), в тетрагидрофуране (30 мл) и воде (20 мл) прибавляли 10% палладий на угле (1,15 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 1,5 часов при перемешивании при наружной температуре 30^oC. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат промывали эфиром и этилацетатом, после чего концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 6/94-1/9] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили указанное в заголовке соединение (156 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1756, 1687, 1633, 1592, 1454, 1386, 1313, 1284, 1261, 1226, 1182.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,22 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,2 Гц), 1,57-1,67 (1H, м), 1,70-1,85 (1H, м), 2,12- 2,27 (1H, м), 2,25 (3H, с), 2,58- 2,79 (2H, м), 3,03-3,85 (11H, м), 3,92-4,01 (1H, м), 4,18-4,29 (2H, м).

Пример 11

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-Гуанидинометилпирролидин-1- илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-1- карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 18)



(1) К раствору 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-(дифенилфосфорилокси)-1-карбапен-2-ем-3-карбоксилата (874 мг) в безводном ацетонитриле (9 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане N,N-диизопропилэтиламин (0,256 мл) и раствор (2S,4S)-4-меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2- [(3S)-3-(4-нитробензилоксикарбонилгуанидинометил)пирролидин-1- илкарбонил] пирролидина (926 мг) в безводном ацетонитриле (1,0 мл). Полученную смесь перемешивали в течение всей ночи при 0^oC. Прибавляли к реакционной смеси этилацетат. Полученную смесь промывали водой и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении.

Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 7/1) и в результате получили 4-нитробензил (1R,5S, 6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-2-[(2S, 4S)-1-(4- нитробензилоксикарбонил)-2-[(3S)-3-(4- нитробензилоксикарбонилгуанидинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоксилат (1,23 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1773, 1710, 1656, 1607, 1521, 1438, 1404, 1385, 1346, 1285, 1208, 1177, 1135, 1109, 1030.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,28 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,34 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,65-1,85(1H, м), 1,90-2,10 (2H, м), 2,15-2,80 (5H, м), 3,05-3,70 (11H, м), 4,00-4,10 (1H, м), 4,10-4,30(2H, м), 4,45-4,60 (1H,м), 5,00- 5,55 (6H, м), 7,40-7,70 (6H, м), 8,15- 8,30 (6H, м).

(2) К раствору соединения (1,14 г), которое было получено в (1), в тетрагидрофуране (38 мл) и воде (19 мл) прибавляли 10% палладий на угле (2,3 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 1,2 часа при перемешивании при наружной температуре 30^oC. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат промывали эфиром, после чего концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" (NACALAI TESQUE, INC.), ацетонитрил/вода = 8/92] с последующими концентрацией путем выпаривания при пониженном давлении и лиофилизацией, в результате чего получили указанное в заголовке соединение (187 мг) в виде порошка.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, D₂O, натрия триметилсилилпропионат-d₄ в качестве внутреннего стандарта) м.д.: 1,25 (3H, д, J=7,0 Гц), 1,33 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,55-1,90 (2H, м), 2,10-2,30 (1H, м), 2,50-2,90 (2H, м), 3,05-3,35 (4H, м), 3,35-3,50 (3H, м), 3,60-3,75 (2H, м), 3,78-3,90 (1H, м), 3,90-4,10 (1H, м), 4,20-4,35 (2H, м).

Пример 12

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил] -1-метил-2-[(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(пирролидин-1-илметил) пирролидин-1-илкарбонил] пиppoлидин-4-илтиo]-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 54)



(1) К раствору 4-нитробензил (1R,5S,6A)-2- (дифенилфосфорилокси)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-1-карбапен- 2-ем-3-карбоксилата (225 мг) в безводном диметилформамиде (3 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане раствор (2S, 4S)-4- меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)-3-(пирролидин-1- илметил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидина (198 мг) в безводном диметилформамиде (1 мл) и диизопропилэтиламин (97 мкл). Полученную смесь перемешивали в течение 20 часов при той же самой температуре. Реакционную смесь концентрировали путем выпаривания при понижненном давлении. Остаток растворяли в этилацетате. Полученную смесь промывали последовательно водой и насыщенным солевым раствором и сушили над безводным сульфатом натрия. Затем отгоняли растворитель. Остаток подвергали хроматографии через колонку с силикагелем и из фракции, элюированной смесью (этилацетат/метанол = 4/1, получили 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S, 4S)-1-(4-нитробензилоксикарбонил) -2-[(3R)-3-(пирролидин-1-илметил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоксилат (235 мг).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 3351, 2970, 1773, 1709, 1697, 1525, 1447, 1246.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,20-1,30 (3H, м), 1,34 (3H, д, J= 6,1 Гц), 1,40-2,10 (6H, м), 2,00-3,00 (8H, м), 3,10-3,80 (6H, м), 3,80-4,40 (4H, м), 4,50-4,70 (1H, м), 5,00-5,40 (3H, м), 5,40-5,55 (1H, м), 7,40-7,55 (2H, м), 7,60-7,70 (2H, м), 8,15-8,25 (4H, м).

(2) Соединение (161 мг), полученное в (1), растворяли в тетрагидрофуране (3 мл) и воде (1,5 мл) с последующим прибавлением 10% палладия на угле (320 мг) в качестве катализатора. Полученную смесь гидрировали при комнатной температуре в течение 90 минут. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении для удаления тетрагидрофурана. Остаток промывали эфиром и водный слой концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток подвергали колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" производства NACALAI TESQUE, INC.) и фракцию, элюированную смесью ацетонитрил/вода = 2/98-1/9, лиофилизировали с получением указанного в заголовке соединения (51 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. cм^-1: 3378, 1763, 1655, 1593, 1489, 1376.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,20 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,28 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,65-1,90 (2H, м), 1,95-2,40 (9H, м), 2,65-2,80 (1H, м), 3,00-3,25 (3H, м), 3,30-3,40 (2H, м), 3,40-3,55 (2H, м), 3,60-4,00 (4H, м), 4,00- 4,10 (1H, м), 4,20-4,30 (2H, м), 4,65-4,75 (1H, м).

Пример 13

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил]-2-[(2S,4S)-2-[(3S)-3-(2- гидроксиэтиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4- илтио] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 3)



(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(N-2-Гидроксиэтил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -4- меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин (214 мг) обрабатывали аналогично тому, как описано в примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения (85,1 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1; 3409, 1747, 1644, 1601, 1455, 1386.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.:

1,22 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,70- 1,95 (2H, м), 2,15-2,35 (2H, м), 2,60-2,85 (2H, м), 2,85-2,95 (1H, м), 3,15-3,30 (3H, м), 3,30-3,50 (5H, м), 3,55-3,90 (2H, м), 3,90-4,00 (1H, м), 4,20-4,40 (5H, м).

Пример 14.

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-(Карбамоилметиламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R) -1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 6)



(2S, 4S)-2-[(3S)-3-(N-Карбамоилметил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -4- меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин (368 мг) обрабатывали аналогично тому, как описано в примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения (158 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 3401, 1745, 1695, 1645, 1597, 1455.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,22 (3H, д, J= 7,2 Гц) 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,70-1,90 (1H, м), 1,90-2,05 (1H, м), 2,20-2,35 (1H, м), 2,65-2,80 (1H, м), 2,95-3,10 (1H, м), 3,10-3,22 (2H, м), 3,22-3,30 (1H, м), 3,35-3,60 (4H, м), 3,60-3,95 (5H, м), 4,00-4,08 (1H, м), 4,22-4,70 (1H, м).

Пример 15.

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-(2-Аминоэтиламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 12)



(2S, 4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3S) -3-(N-4-нитробензилоксикарбониламино)этил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин (248 мг) обрабатывали аналогично тому, как описано в примере 12 (1) и (2), получая указанное в заглавии соединение (48,5 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 3370, 1758, 1648, 1603, 1455, 1386.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,22 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,70-1,90 (1H, м), 1,90-2,05 (1H, м), 2,15-2,33 (1H, м), 2,55-2,70 (1H, м), 2,97-3,13 (4H, м), 3,15-3,33 (5H, м), 3,34-3,52 (3H, м), 3,57- 3,67 (1H, м), 3,68-3,90 (3H, м), 4,21-4,30 (2H, м), 4,60-4,67 (1H, м).

Пример 16.

(1R,5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-(2- Диметиламиноэтиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин- 4-илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3- карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 14)



(2S, 4S)-2-[(3S)-3-(N-2-Диметиламиноэтил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -4-меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин (428 мг) обрабатывали аналогично тому, как описано в примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения (109 мг) в виде порошка.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, D₂O) м.д.: 1,22 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,60-1,90 (2H, м), 2,10-2,25 (1H, м), 2,45-2,60 (1H, м), 2,77 (3H, с), 2,79 (3H, с), 2,70-3,00 (2H, м), 3,00-3,10 (1H, м), 3,31-3,53 (5H, м), 3,55-3,87 (3H, м), 3,88-4,00 (1H, м), 4,20-4,30 (2H, м), 4,30-4,40 (1H, м).

Пример 17.

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил] -1-метил-2-[(2S,4S)-2- [(3R)-3-(N-метил-N-2-метиламиноэтиламинометил)пирролидин-1- илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-З-карбоновой кислоты гидрохлорид (стереоизомер соединения N 31)



(1) (2S, 4S)-4-Меркапто-2-[(3R)-3-[N-2-(N-метил-N-4- нитробензилоксикарбониламино)этил-N-метиламинометил] пирролидин-1-илкарбонил]-1-(4-нитробензилоксикарбонил) пирролидин (617 мг) обрабатывали аналогично тому, как описано в примере 12 (1), с получением 4-нитробензил (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-2-[(2S,4S)-1- (4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)-3-[N-2-(N- метил-N-4-нитробензилоксикарбониламино)этил-N-метиламинометил] пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -1-карбапен-2-ем- 3-карбоксилата (527 мг) в виде порошка.

(2) Соединение (202 мг), полученное в (1), растворяли в воде (1,5 мл), 1н хлороводородной кислоте (0,201 мл) и тетрагидрофуране (3 мл), после чего добавляли 10% палладий на угле (400 мг) в качестве катализатора. Полученную смесь гидрировали при комнатной температуре в течение 45 минут. Затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении для удаления тетрагидрофурана. Остаток промывали эфиром и водный слой концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток подвергали колоночной хроматографии с обращенной фазой ["Cosmosil 75C18-PREP" производства NACALAI TESQUE, INC.) и фракцию, элюированную водой, лиофилизировали с получением указанного в заготовке соединения (61 мг) в виде порошка.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,21 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,29 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,70-1,87 (1H, м), 1,96-2,05 (1H, м), 2,22-2,34 (1H, м), 2,60-2,69 (1H, м), 2,75 (3H, с), 2,90 (3H, с), 3,00-3,10 (1H, м), 3,10-3,35 (7H, м), 3,35-3,44 (1H, м), 3,45-3,60 (3H, м), 3,62-3,92 (3H, м), 4,01-4,08 (1H, м), 4,20-4,27 (2H, м), 4,65-4,79 (1H, м).

Пример 18.

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(2-Фторэтиламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1- гидроксиэтил] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 4)



(2S, 4S)-2-[(3S)-3-(N-2-Фторэтил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -4- меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин может быть обработан аналогично тому, как описано в примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Пример 19.

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-(1-Метилгуанидинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1- гидроксиэтил] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 36)



(2S, 4S)-4-Меркапто-2-[(3R)-3-[1-метил-2,3-бис (4-нитробензилоксикарбонил)гуанидинометил] пирролидин-1-илкарбонил] -1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин (996 мг) обрабатывали аналогично тому, как описано в примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения (149 мг).

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,22 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,30 (3H, д, J=6,4 Гц), 1,55-1,70 (1H, м), 1,70-1,85 (1H, м), 2,10-2,25 (1H, м), 2,65-2,80 (2H, м), 3,09 (3H, с), 3,15-3,30 (2H, м), 3,35-3,55 (6H, м), 3,70-3,85 (2H, м), 3,95-4,05 (1H, м), 4,20-4,30 (2H, м).

Пример 20.

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(N-Ацетимидоил-N- метиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6- [(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 35)



(2S, 4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)- 3-(N-4-нитробензилоксикарбонилацетимидоил-N- метиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин может быть обработан аналогично тому, как описано в примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Пример 21.

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(N-Формимидоил-N- метиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6- [(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 34)



(2S, 4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)- 3-(N-4-нитробензилоксикарбонилформимидоил-N-метиламинометил) пирролидин-1-илкарбрнил] пирролидин может быть обработан аналогично тому, как описано в примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Пример 22.

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил] -1-метил-2-[(2S, 4S)-2- [(3R)-3-(2,2,2-трифторэтиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 5)



(2S, 4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3S)-3- (N-4-нитробензилоксикарбонил-N-2,2,2-трифторэтиламинометил) пиppoлидин-1-илкapбoнил] пиppoлидин может быть обработан аналогично тому, как описано в примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Пример 23.

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-Формимидоиламинометилпирролидин -1-илкарбонил] пирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил- 1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 16)



(2S, 4S)-4-меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)- 3-(4-нитробензилоксикарбонилформимидоиламинометил)пирролидин-1- илкарбонил]пирролидин может быть обработан аналогично тому, как описано в примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Пример 24.

(1R, 5S,6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-Гуанидинометилпирролидин- 1-илкарбонил] -1-метилпирролидин-4-илтио] -6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 79)



(2S, 4S)-2-[(3R)-3-[2,3-Бис(4-нитробензилоксикарбонил) гуанидинометил] пирролидин-1-илкарбонил] -4-меркапто-1- метилпирролидин может быть обработан аналогично тому, как описано в примере 4 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Пример 25.

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S, 4S)-2-[(3R)-3-Ацетимидоиламинометил -пирролидин-1-илкарбонил] -1-метилпирролидин-4-илтио]-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 78)



(2S, 4S)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3R)-3-(N-4- нитробензилоксикарбонилацетимидоил-N-метиламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин может быть обработан аналогично тому, как описано в примере 4 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Пример 26.

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-Формимидоиламинометилпирролидин -1-илкарбонил] -1-метилпирролидин-4-илтио]-6- [(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 77)



(2S, 4S)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3R)-3-(4- нитробензилоксикарбонилформимидоиламинометил)пирролидин- 1-илкарбонил] пирролидин может быть обработан аналогично тому, как описано в примере 4 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Пример 27.

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S,4S)-2-[(3R)-3-(1- Метилгуанидинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -1-метилпирролидин- 4-илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил]-1-метил-1-карбапен-2-ем-3- карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 96)



(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(2,3-Бис(4-нитробензилоксикарбонил) -1-метилгуанидинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -4-меркапто-1- метилпирролидин может быть обработан аналогично тому, как описано в примере 4 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Пример 28.

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(N-Ацетимидоил-N- метиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -1-метилпирролидин-4- илтио]-6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3- карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 95)



(2S, 4S)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3R)-3-(N-4- нитробензилоксикарбонилацетимидоил-N-метиламинометил)пирролидин -1-илкарбонил] пирролидин может быть обработан аналогично тому, как описано в примере 4 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Пример 29.

(1R, 5S, 6S)-2-[(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(N-Формимидоил-N- метиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -1-метилпирролидин-4-илтио] - 6-[(1R)-1-гидроксиэтил] -1-метил-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 94)



(2,4S)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3R)-3-(N-4- нитробензилокрикарбонилформимидоил-N-метиламинометил)пирролидин-1- илкарбонил] пирролидин может быть обработан аналогично тому, как описано в примере 4 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Пример 30.

(1R, 5S, 6S)-6-[(1R)-1-Гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S,4S)-2- [(3R)-3-метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил] пирролидин-4- илтио]-1-карбапен-2-ем-3-карбоновая кислота (стереоизомер соединения N 1)



К водному раствору (2 мл) (1R,5S,6S)-6-[(1R)-1- гидроксиэтил]-1-метил-2-[(2S, 4S)-2-[(3R)-3- метиламинометилпирролидин-1-илкарбонил]пирролидин-4-илтио]-1- карбапен-2-ем-3-карбоновой кислоты (59,7 мг), полученной в примере 3, прибавляли 1н хлороводородную кислоту (0,122 мл). Полученный водный раствор подвергали колоночной хроматографии с обращенной фазой ("Cosmosil 75C18-PREP" производства NACALAI TESQUE, INC.) и из фракции, элюированной водой, получили указанное в заголовке соединение (46 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см ^-1: 3409, 1757, 1634, 1598, 1456, 1386.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, D₂O) м.д.: 1,21 (3H, д, J= 7,2 Гц), 1,29 (3H, д, J=6,3 Гц), 1,70-1,87 (1H, м), 1,96-2,05 (1H, м), 2,20-2,32 (1H, м), 2,60-2,70 (1H, м), 2,75 (3H, с), 3,00-3,10 (1H, м), 3,10-3,35 (3H, м), 3,35-3,45 (1H, м), 3,45-3,50 (3H, м), 3,60-3,90 (4H, м), 4,02-4,09 (1H, м), 4,21-4,28 (2H, м), 4,66-4,78 (1H, м).

Ссылочный пример 1.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3R)-3-(4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин

(1) К раствору (240 мл) (3S)-3-гидроксиметил-1-[(1R)-1- фенилэтил]пирролидина (11,5 г) в этаноле прибавляли гидроксид палладия на угле (11,6 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 3 часов при перемешивании при наружной температуре 40^oC. Затем отфильтровывали катализатор с последующим концентрированием путем выпаривания при пониженном давлении. В остаток (6,01 г) вливали ацетонитрил (60 мл) и затем к полученной смеси в ледяной бане прибавляли ди-трет-бутилкарбонат (14 мл). Дав температуре реакционной смеси подняться до комнатной температуры, смесь перемешивали в течение одного часа. Затем в реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, после чего ее экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженным давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат), получив в результате (3S)-1-трет-бутоксикарбонил-3-гидроксиметилпирролидин (8,66 г).

Оптическое вращение: []²_D⁵ = -16,5^o (C=1,0, CHCl₃).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 3432, 1698, 1675, 1479, 1454, 1418, 1367.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,46 (9H, с), 1,61-1,80 (1H, м), 1,92-2,30 (2H, м), 2,37-2,47 (1H, м), 3,07-3,17 (1H, м), 3,30-3,69 (5H, м).

(2) К раствору соединения (1,30 г), полученного в ссылочном примере 1(1), в тетрагидрофуране (13 мл) последовательно прибавляли в ледяной бане триэтиламин (0,99 мл) и метансульфонилхлорид (0,55 мл) с последующим перемешиванием в течение одного часа. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, после чего ее экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. В остаток (1,83 г) вливали N,N- диметилформамид (20 мл), к которому прибавляли азид натрия (1,26 г). Полученную смесь перемешивали при 80^oC в течение 1,5 часа. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, после чего ее экстрагировали три раза диэтиловым эфиром. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (н-гексан/этилацетат = 7/3), получив в результате (3S)-3-азидометил-1-трет-бутоксикарбонилпирролидин (1,39 г).

(3) К раствору соединения (1,23 г), полученного в ссылочном примере 1(2), в ацетонитриле (13 мл) прибавляли трифенилфосфин (1,50 г) и полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение одного часа. К реакционной смеси последовательно прибавляли 4- нитробензилхлорформиат (1,52 г) и 1н водный раствор гидроксида натрия (7 мл). Дав температуре подняться до комнатной температуры, перемешивали смесь в течение 30 минут. Реакционную смесь разбавляли водой и затем экстрагировали три раза метиленхлоридом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (н-гексан/этилацетат = 4/6), получив в результате (3R)-1-трет-бутоксикарбонил-3-(4-нитробензилоксикарбониламинометил) пирролидин (1,97 г).

Оптическое вращение: []²_D⁵ = -14,3^o (C=1,0, CHCl₃).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 3326, 1727, 1683, 1524, 1413, 1348, 1250.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д: 1,45 (9H, с), 1,55-1,66 (1H, м), 1,92-2,03 (1H, м), 2,35-2,45 (1H, м), 2,95-3,55 (6H, м), 5,18 (1H, ш.с), 5,20 (2H, с), 7,51 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,6 Гц).

(4) К раствору (20 мл) соединения (1,90 г), полученного в ссылочном примере 1(3), в метиленхлориде прибавляли в ледяной бане трифторуксусную кислоту (3,9 мл). Дав температуре реакционной смеси подняться до комнатной температуры, перемешивали смесь в течение 2 часов. Реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом и затем экстрагировали три раза водой. В объединенные водные слои вливали 1н водный раствор (60 мл) гидроксида натрия для получения щелочного раствора. Смесь экстрагировали три раза метиленхлоридом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении, получив в результате (3S)-3-(4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин (1,38 г) в виде неочищенного продукта.

(5) К раствору (2S,4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-метил-2- пирролидинкарбоновой кислоты (0,69 г) в тетрагидрофуране (7 мл) прибавляли в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,43 мл) и пивалоилхлорид (0,30 мл). Полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 10 минут. К реакционной смеси прибавляли раствор смеси соединения (0,68 г), полученного в ссылочном примере 1(4), и N, N-диизопропилэтиламина (0,43 мл) в ацетонитриле (8 мл) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 30 минут. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, после чего ее экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 7/3), получив в результате (2S,4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-метил-2-[(3R)-3-(4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин (0,73 г).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 1772, 1639, 1610, 1585, 1513, 1445, 1373, 1347, 1322, 1302, 1247, 1177, 1144, 1109.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,50-2,62 (5H, м), 2,29, 2,31 (3H, сх2), 3,02-3,83 (10H, м), 3,69, 3,70 (2H, сх2), 3,79 (3H, с), 4,98-5,18 (1H, м), 5,19 (2H, с), 6,83 (2H, д, J=6,6 Гц), 7,21 (2H, д, J=6,6 Гц), 7,50 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,6 Гц).

(6) К раствору соединения (0,65 г), полученного в ссылочном примере 1 (5), в смеси анизола (0,65 мл) и трифторуксусной кислоты (6,5 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,27 мл). Дав температуре реакционной смеси подняться до комнатной температуры, перемешивали смесь в течение одного часа. Отгоняли при пониженном давлении трифторуксусную кислоту и остаток промывали н-гексаном и диэтиловым эфиром для удаления анизола. К остатку прибавляли этилацетат. Полученную смесь промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (0,54 г).

[Другой способ синтеза указанного в заголовке соединения]

(7) В безводном пиридине (100 мл) растворяли (3R)-1-трет-бутоксикарбонил-3-пирролидинол (10,0 г). К полученному раствору прибавляли в ледяной бане диметиламинопиридин (652 мг) и п-толуолсульфонилхлорид (15,3 г) с последующим перемешиванием в течение 48 часов в ледяной бане. Удаляли при пониженном давлении растворитель. Остаток растворяли в метиленхлориде (200 мл) с последующей промывкой водой. Затем водный слой экстрагировали два раза метиленхлоридом и все органические слои сушили над безводным сульфатом магния и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении с получением 24,2 г неочищенного продукта. Полученный неочищенный продукт очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (элюент: метиленхлорид/ацетонитрил = 40/1), получив в результате (3R)-1-трет-бутоксикарбонил-3-п- толуолсульфонилоксипирролидин (16,8 г).

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,43 (9H, с), 2,25-1,90 (2H, м), 2,46 (3H, с), 3,60-3,30 (4H, м), 5,05 (1H, м), 7,35 (2H, д, J=7,9 Гц), 7,79 (2H, д, J=7,9 Гц).

(8) Соединение (12,2 г), полученное в (7), растворяли в безводном ацетонитриле (122 мл). К раствору прибавляли 1,8- диазабицикло[5,4,0]-7-ундецен (8,02 мл) и ацетонциангидрин (6,53 мл), после чего полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 10 часов. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (1 литр) и промывали пять раз водой (200 мл) и один раз насыщенным водным раствором хлорида аммония (200 мл). Органический слой сушили безводным сульфатом магния и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении с получением неочищенного продукта (9,10 г). Полученный неочищенный продукт очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (элюент: бензол/этилацетат = 17/1), получив в результате (3R)-1-трет-бутоксикарбонил-3-цианпирролидин (4,41 г).

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,47 (9H, с), 2,35-2,15 (2H, м), 3,15-3,00 (1H, м), 3,75-3,35 (4H, м).

(9) В безводном тетрагидофуране (21 мл) растворяли соединение (2,10 г), полученное в (8). К раствору прибавляли в ледяной бане литийалюминийгидрид (2,03 г) с последующим перемешиванием в ледяной бане в течение 20 минут и при комнатной температуре в течение 50 минут. К реакционной смеси прибавляли тетрагидрофуран (40 мл) и воду (4,6 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут. Удаляли при пониженном давлении растворитель. К остатку прибавляли метиленхлорид (250 мл) и безводный сульфат натрия (24 г) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. После фильтрования отгоняли при пониженном давлении растворитель. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (элюент: этилацетат/метанол = 1/1), получив в результате (3R)-3-аминометил-1-трет-бутоксикарбонилпирролидин (703 мг).

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,30-1,50 (2H, ш. с), 1,46 (9H, с), 1,50-1,65 (1H, м), 1,90-2,10 (1H, м), 2,15-2,30 (1H, м), 2,65-2,80 (2H, м), 2,90-3,10 (1H, м), 3,20-3,60 (3H, м).

(10) В безводном ацетонитриле (5,5 мл) растворяли соединение (550 мг), полученное в (9). К раствору прибавляли в ледяной бане диизопропилэтиламин (0,575 мл) и п-нитробензилхлорформиат (711 мг) с последующим перемешиванием в течение 5 минут в ледяной бане. Удаляли при пониженном давлении растворитель. Остаток растворяли в метиленхлориде (50 мл) и полученный раствор промывали водой. Водный слой экстрагировали два раза метиленхлоридом. Все органические слои промывали насыщенным солевым раствором. Органические слои сушили над безводным сульфатом натрия. Отгоняли при пониженном давлении растворитель. Затем остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (элюент: бензол/ацетонитрил = 8/1), получив в результате (3R)-1-трет-бутоксикарбонил-3-(4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин (599 мг). Полученный продукт полностью совпадал с полученным в (3) по данным оптического вращения, спектра инфракрасного излучения и спектра ядерного магнитного резонанса.

Ссылочный пример 2.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3S)-3-(4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин

(1) К раствору (250 мл) (3R)-3-гидроксиметил-1-[(1R)-1- фенилэтил]пирролидина (12,6 г) в этаноле прибавляли гидроксид палладия на угле (12,5 г) в качестве катализатора. Полученной смеси давали возможность поглощать водород в течение 5 часов при перемешивании при наружной температуре 40^oC. Затем отфильтровывали катализатор с последующим концентрированием путем выпаривания при пониженном давлении. В остаток (7,08 г) вливали ацетонитрил (70 мл) и затем к полученной смеси в ледяной бане прибавляли ди-трет- бутилкарбонат (16 мл). Дав температуре реакционной смеси подняться опять до комнатной температуры, смесь перемешивали в течение одного часа. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1(1), получив в результате (3R)- 1-трет-бутоксикарбонил-3-гидроксиметилпирролидин (10,6 г).

Оптическое вращение: []²_D⁵ = +16,7^o (C=1,0, CHCl₃).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 3434, 1698, 1675, 1479, 1454, 1418, 1367.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,46 (9H, с), 1,61-1,80 (2H, м), 1,92-2,30 (1H, м), 2,37-2,47 (1H, м), 3,07-3,17 (1H, м), 3,30-3,69 (5H, м).

(2) К раствору соединения (1,55 г), полученного в ссылочном примере 2(1), в тетрагидрофуране (16 мл) последовательно прибавляли в ледяной бане триэтиламин (1,18 мл) и метансульфонилхлорид (0,66 мл) с последующим перемешиванием в течение одного часа. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию. Полученную смесь экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. В остаток (2,19 г) вливали N, N- диметилформамид (20 мл) с последующим прибавлением азида натрия (1,50 г). Полученную смесь перемешивали при 80^oC в течение 1,5 часа. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1(2), получив в результате (3R)-3- азидометил-1-трет-бутоксикарбонилпирролидин (1,43 г).

(3) К раствору соединения (1,00 г), полученного в ссылочном примере 2(2), в ацетонитриле (10 мл) прибавляли трифенилфосфин (1,22 г) и полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение одного часа. К реакционной смеси последовательно прибавляли 4-нитробензилхлорформиат (1,24 г) и 1н водный раствор гидроксида натрия (6 мл). Дав температуре подняться до комнатной температуры, перемешивали смесь в течение 30 минут. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1(3), получив в результате (3S)-1-трет- бутоксикарбонил-3-(4-нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин (1,51 г).

Оптическое вращение: []²_D⁵ = +14,5^o (C=1,0, CHCl₃).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 3325, 1726, 1682, 1524, 1414, 1348, 1249.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д: 1,45 (9H, с), 1,55-1,66 (1H, м), 1,92-2,03 (1H, м), 2,35-2,45 (1H, м), 2,95-3,55 (6H, м), 5,06 (1H, ш.с), 5,19 (2H, с), 7,51 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,6 Гц).

(4) К раствору соединения (1,51 г), полученного в ссылочном примере 2(3), в метиленхлориде (17 мл) прибавляли в ледяной бане трифторуксусную кислоту (3,1 мл). Дав температуре реакционной смеси подняться до комнатной температуры, перемешивали смесь в течение двух часов. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1(4), получив в результате (3R)-3-(4-нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин (1,16 г) в виде неочищенного продукта.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,42-1,60 (1H, м), 1,90-2,07 (1H, м), 2,27-2,50 (1H, м), 2,52-3,28 (7H, м), 5,13-5,31 (1H, м), 5,19 (2H, с), 7,51 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,6 Гц).

(5) К раствору (2S, 4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-метил- 2-пирролидинкарбоновой кислоты (0,70 г) в тетрагидрофуране (7 мл) прибавляли в ледяной бане N,N-диизопропилэтиламин (0,43 мл) и пивалоилхлорид (0,31 мл). Полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 10 минут. К реакционной смеси прибавляли раствор смеси соединения (0,70 г), полученного в ссылочном примере 2(4), и N,N-диизопропилэтиламина (0,43 мл) в ацетонитриле (8 мл) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 30 минут. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (5), и в результате получили (2S, 4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-метил-2- [(3S)-3-(4-нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1- илкарбонил]пирролидин (0,75 г).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 1772, 1639, 1610, 1585, 1513, 1445, 1347, 1302, 1248, 1176, 1144, 1120, 1109.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,52-2,61 (5H, м), 2,30 (3H, с), 3,03-3,78 (10H, м), 3,70 (2H, с), 3,79, 3,80 (3H, сх2), 5,04-5,05 (1H, м), 5,19 (2H, с), 6,83, 6,84 (2H, дх2, J=8,6 Гц), 7,20, 7,22 (2H, дх2, J=8,6 Гц), 7,51 (2H, дх, J=8,6 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,6 Гц).

(6) К раствору соединения (0,67 г), полученного в ссылочном примере 2 (5), в смеси анизола (0,67 мл) и трифторуксусной кислоты (6,7 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,27 мл). Дав температуре реакционной смеси подняться до комнатной температуры, перемешивали смесь в течение одного часа. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (6), с получением указанного в заголовке соединения (0,57 г).

Ссылочный пример 3.

(2S, 4S)-4-Меркапто-2-[(3S)-3-(N-метил-N-(4- нитробензилоксикарбонил)аминометил)пирролидин-1-илкарбонил] -1-(4- нитробензилоксикарбонил)пирролидин

(1) К раствору соединения (0,82 г), полученного в ссылочном примере 1 (1), в тетрагидрофуране (8 мл) последовательно прибавляли триэтиламин (0,62 мл) и метансульфонилхлорид (0,35 мл). Полученную смесь перемешивали в течение одного часа. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, после чего ее экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженным давлении.

К остатку (1,16 г) прибавляли 40%-ный метаноловый раствор (18 мл) метиламина и смесь нагревали в толстостенной склянке при 100^oC в течение 4 часов. Дав температуре реакционной смеси снизиться до комнатной температуры, смесь концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. К раствору остатка (1,32 г) в ацетонитриле (15 мл) прибавляли в ледяной бане N,N- диизопропилэтиламин (1,4 мл) и 4-нитробензилхлорформиат (1,73 г) с последующим перемешиванием при 0^oC в течение 2 часов. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, и полученную смесь экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (н- гексан/этилацетат = 4/6-3/7), получив в результате (3R)-1-трет- бутоксикарбонил-3-[N-метил-N-(4-нитробензилоксикарбонил) аминометил]пирролидин (1,42 г).

Оптическое вращение: []²_D⁵ = -6,9^o (C=1,0, CHCl₃).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 1696, 1608, 1524, 1480, 1455, 1404, 1366, 1347, 1293, 1255, 1211, 1191, 1170, 1152, 1125.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,45 (9H, с), 1,56-1,68 (1H, м), 1,89-2,01 (1H, м), 2,45-2,55 (1H, м), 2,98 (3H, c), 2,98-3,10 (1H, м), 3,27-3,57 (5H, м), 5,23 (2H, с), 7,51 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,23 (2H, д, J=8,6 Гц).

(2) К раствору соединения (1,96 г), полученного в ссылочном примере 3 (1), в метиленхлориде (25 мл) прибавляли в ледяной бане трифторуксусную кислоту (3,8 мл) с последующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (4), получив в результате (3S)-3-[N-метил-N-(4- нитробензилоксикарбонил)аминометил]пирролидин (1,55 г).

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,30-1,51 (1H, м), 1,81-1,97 (1H, м), 2,20-2,69 (3H, м), 2,85-3,06 (6H, м), 3,20-3,35 (2H, м), 5,22 (2H, с), 7,51 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,6 Гц).

(3) К раствору (2S, 4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1- (4-нитробензилоксикарбонил)-2-пирролидинкарбоновой кислоты (1,52 г) в тетрагидрофуране (15 мл) прибавляли в ледяной бане N,N- диизопропилэтиламин (0,59 мл) и пивалоилхлорид (0,42 мл). Полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 10 минут. К реакционной смеси прибавляли раствор смеси соединения (1,00 г), полученного в ссылочном примере 3 (2), и N,N-диизопропилэтиламина (0,59 мл) в ацетонитриле (15 мл) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 30 минут. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (5), и в результате получили (2S,4S)-4-(4- метоксибензилтио)-2-[(3S)-3-(N-метил-N-(4-нитробензилоксикарбонил) аминометил) пирролидин-1-илкарбонил]-1-(4- нитробензилоксикарбонил)пирролидин (2,08 г).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 1706, 1654, 1608, 1585, 1520, 1439, 1403, 1346, 1299, 1249, 1210, 1194, 1175, 1140, 1110.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,50-2,70 (5H, м), 2,92-4,08 (12H, м), 3,74 (2H, с), 3,80, 3,81 (3H, сх2), 4,22-4,45 (1H, м), 4,98-5,33 (4H, м), 6,87 (2H, д, J =8,6 Гц), 7,22-7,56 (6H, м), 8,20-8,30 (4H, м).

(4) К раствору соединения (2,03 г), полученного в ссылочном примере 3 (3), в смеси анизола (2 мл) и трифторуксусной кислоты (20 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,62 мл). Затем полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (6), с получением указанного в заголовке соединения (1,92 г).

[Другой способ синтеза указанного в заголовке соединения].

(5) К раствору (2S,4S)-4-гидрокси-1-(4-нитробензилоксикарбонил) пролина (4,65 г) в безводном диметилформамиде (60 мл) прибавляли (3S)-3-[N-метил-N-(4-нитробензилоксикарбонил) аминометил] пирролидингидрохлорид (4,95 г), диизопропилэтиламин (5,23 мл), 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимидгидрохлорид (4,03 г) и 1-гидроксибензотриазол (2,23 г). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов. Реакционную смесь концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате. Полученный раствор промывали водой и органический слой сушили над безводным сульфатом натрия. Отгоняли растворитель и остаток хроматографировали через колонку с силикагелем. Из фракций, элюированных смесью этилацетат/метанол = 9/1, получили (2S,4S)-4- гидрокси-2-[(3S)-3-[N-метил-N-(4-нитробензилоксикарбонил) аминометил] пирролидин-1-илкарбонил]-1-(4- нитробензилоксикарбонил)пирролидин (8,70 г) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 3402, 1706, 1654, 1607, 1522, 1436, 1346.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, DMCO-d₆) м.д.: 1,30- 2,20 (3H, м), 2,30-2,60 (1H, м), 2,80-3,00 (3H, м), 3,00-3,80 (10H, м), 4,20-4,40 (1H, м), 4,40-4,60 (1H, м), 5,00-5,30 (4H, м), 7,50-7,70 (4H, м), 8,10-8,30 (4H, м).

(6) Соединение (8,70 г), полученное в (5), растворяли в безводном ацетонитриле (87 мл). К раствору прибавляли в ледяной бане триэтиламин (2,72 мл) и метансульфонилхлорид (1,34 мл) с последующим перемешиванием при той же самой температуре в течение 5 минут. Реакционную смесь концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате. Полученный раствор промывали последовательно водой и насыщенным солевым раствором и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Остаток хроматографировали через колонку с силикагелем. Из фракций, элюированных смесью этилацетат/метанол = 18/1-14/1, получили (2S,4S)- 4-метансульфонилокси-2-[(3S)-3-[N-метил-N-(4- нитробензилоксикарбонил)аминометил] пирролидин-1-илкарбонил] -1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин (9,33 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1706, 1652, 1607, 1522, 1441, 1405, 1347.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, DMCO-d₆) м.д.: 1,50-2,20 (3H, м), 2,30-2,80 (3H, м), 2,90-3,05 (3H, м), 3,08 (3H, с), 3,10-3,70 (6H, м), 3,80-4,10 (2H, м), 4,50-4,70 (1H, м), 5,20-5,40 (4H, м), 7,40-7,55 (4H, м), 8,15-8,25 (4H, м).

(7) Соединение (2,00 г), полученное в (6), растворяли в безводном диметилформамиде (25 мл). К раствору прибавляли тиоацетат калия (520 мг) и полученную смесь перемешивали при 75^oC в течение 1,5 часа. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали водой и насыщенным солевым раствором и затем сушили над безводным сульфатом натрия. Остаток хроматографировали через колонку с силикагелем. Из фракций, элюированных смесью этилацетат/метанол - 100/1, получили (2S/4S)-4-ацетилтио-2-

[(3S)-3-[N-метил-N-(4-нитробензилоксикарбонил) аминометил] пирролидин-1-илкарбонил]-1-(4- нитробензилоксикарбонил)пирролидин (1,60 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1705, 1654, 1607, 1522, 1437, 1404, 1346.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, DMMCO-d₆) м.д.: 1,70-2,10 (3H, м), 2,34 (3H, с), 2,40- 2,70 (2H, м), 2,90-3,10 (3H, м), 3,10-3,70 (6H, м), 3,80-4,10 (2H, м), 4,11 (1H, т, J=9,1 Гц), 4,40-4,60 (1H, м), 5,00-5,40 (4H, м), 7,40-7,60 (4H, м), 8,15-8,30 (4H, м).

(8) Соединение (1,48 г), полученное в (7), растворяли в метаноле (30 мл) и метиленхлориде (4,4 мл). К полученному раствору прибавляли в ледяной бане 1н раствор метоксида натрия в метаноле (2,3 мл) с последующим перемешиванием при той же самой температуре в течение 10 минут. К реакционной смеси прибавляли 1н хлороводородную кислоту (2,4 мл) и полученную смесь концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток растворяли в этилацетате. Полученный раствор промывали последовательно водой и насыщенным солевым раствором и сушили над безводным сульфатом натрия. Отгоняли при пониженном давлении растворитель с получением указанного в заголовке соединения (1,34 г) в виде порошка. Полученное соединение совпадало с полученным в (4) по спектру инфракрасного излучения и спектру ядерного магнитного резонанса.

Ссылочный пример 4.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3S)-3-[N-метил-N-(4- нитробензилоксикарбонил)аминометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин

(1) К раствору (2S,4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-метил-2- пирролидинкарбоновой кислоты (0,49 г) в тетрагидрофуране (5 мл) прибавляли в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,30 мл) и пивалоилхлорид (0,21 мл). Полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 10 минут. К реакционной смеси прибавляли раствор смеси соединения (0,46 г), полученного в ссылочном примере 3 (2), и N, N-диизопропилэтиламина (0,30 мл) в ацетонитриле (10 мл) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 30 минут. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, после чего ее экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол - 6/4), получив в результате (2S, 4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-метил-2-[(3S)-3-(N-метил-N-(4- нитробензилоксикарбонил)аминометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин (0,76 г).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 1734, 1705, 1646, 1609, 1585, 1513, 1440, 1403, 1373, 1346, 1301, 1248, 1212, 1191, 1149, 1107.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,55-2,18 (2H, м), 2,35, 2,37 (3H, сх2), 2,41-2,70 (3H, м), 3,04, 3,06 (3H, сх2), 3,10-3,88 (10H, м), 3,75 (2H, с), 3,85 (3H, с), 5,27 (2H, с), 6,89 (2H, д, J= 8,6 Гц), 7,27 (2H, д, J=7,9 Гц), 7,57 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,28 (2H, д, J= 7,9 Гц).

(2) К раствору соединения (0,64 г), полученного в ссылочном примере 4 (1), в смеси анизола (0,65 мл) и трифторуксусной кислоты (6,5 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,26 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1(6), с получением указанного в заголовке соединения (0,54 г).

Ссылочный пример 5.

(2S, 4S)-4-Меркапто-2-[(3R)-3-(N-метил-N-(4- нитробензилоксикарбонил)аминометил)пирролидин-1-илкарбонил] -1-(4- нитробензилоксикарбонил)пирролидин

(1) К раствору соединения (1,17 г), полученного в ссылочном примере 2 (1), в тетрагидрофуране (12 мл) последовательно прибавляли в ледяной бане триэтиламин (0,89 мл) и метансульфонилхлорид (0,50 мл). Полученную смесь перемешивали в течение одного часа. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, после чего ее экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. К остатку (1,66 г) прибавляли 40%-ный метаноловый раствор (25 мл) метиламина и смесь нагревали в толстостенной склянке при 100^oC в течение 4 часов. Дав температуре реакционной смеси снизиться до комнатной температуры, смесь концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. К раствору остатка (1,89 г) в ацетонитриле (20 мл) прибавляли в ледяной бане N,N-диизопропилэтиламин (1,84 мл) и 4- нитробензилхлорформиат (2,28 г) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 2 часов. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 3 (1), получив в результате (3S)-1-трет-бутоксикарбонил-3-[N-метил-N-(4- нитробензилоксикарбонил)аминометил]пирролидин (1,92 г).

Оптическое вращение: []²_D⁵ = +7,2^o (C=1,0, CHCl₃).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1696, 1608, 1524, 1480, 1455, 1404, 1366, 1347, 1293, 1255, 1211, 1191, 1170, 1152, 1125.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CHCl₃) м.д.: 1,45 (9H, с), 1,56-1,68 (1H, м), 1,89-2,01 (1H, м), 2,45-2,55 (1H, м), 2,98 (3H, с), 2,98-3,10 (1H, м), 3,27-3,57 (5H, м), 5,22 (2H, с), 7,51 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,23 (2H, д, J=8,6 Гц).

(2) К раствору соединения (0,84 г), полученного в ссылочном примере 5 (1), в метиленхлориде (8 мл) прибавляли в ледяной бане трифторуксусную) кислоту (1,6 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (4), получив в результате (3R)-3-[N-метил-N- (4-нитробензилоксикарбонил)аминометил]пирролидин (0,58 г).

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CHCl₃) м.д.: 1,30-1,51 (1H, м), 1,81-1,97 (1H, м), 2,20-2,69 (3H, м), 2,85-3,06 (6H, м), 3,20-3,35 (2H, м), 5,22 (2H, с), 7,51 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,22 (2H, д, J=8,6 Гц).

(3) К раствору (2S, 4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-(4- нитробензилоксикарбонил)-2-пирролидинкарбоновой кислоты (0,92 г) в тетрагидрофуране (10 мл) прибавляли в ледяной бане N,N-диизопропилэтиламин (0,36 мл) и пивалоилхлорид (0,25 мл) с последующим перемешиванием при 0^oC в течение 10 минут. К реакционной смеси прибавляли раствор смеси соединения (0,55 г), полученного в ссылочном примере 5(2), и N,N-диизопропилэтиламина (0,36 мл) в ацетонитриле (10 мл) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 30 минут. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (5), и в результате получили (2S,4S)-4-(4-метоксибензилтио)-2-[(3R)-3-(N-метил-N-(4- нитробензилоксикарбонил)аминометил)пирролидин-1-илкарбонил]-1-(4- нитробензилоксикарбонил)пирролидин (1,00 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1706, 1654, 1608, 1585, 1520, 1438, 1403, 1346, 1299, 1249, 1210, 1194, 1175, 1148, 1109.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CHCl₃) м.д.: 1,50-2,68 (5H, м), 2,92-4,08 (9H, м), 2,97 (3H, с), 3,73 (2H, с), 3,79, 3,80 (3H, сх2), 4,30-4,46 (1H, м), 4,97-5,35 (4H, м), 6,85 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,24 (2H, д, J= 8,6 Гц), 7,46 (2H, д, J= 8,6 Гц), 7,51 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,23 (4H, д, J=8,6 Гц).

(4) К раствору соединения (0,99 г), полученного в ссылочном примере 5 (3), в смеси анизола (1,0 мл) и трифторуксусной кислоты (10 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,30 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (6), с получением указанного в заголовке соединения (0,90 г).

Ссылочный пример 6.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3R)-3-(N-метил-N-(4- нитробензилоксикарбонил)аминометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин

(1) К раствору (2S,4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-метил-2- пирролидинкарбоновой кислоты (0,50 г) в тетрагидрофуране (5 мл) прибавляли в ледяной бане N, N-диизопропилэтиламин (0,31 мл) и пивалоилхлорид (0,22 мл). Полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 10 минут. К реакционной смеси прибавляли раствор смеси соединения (0,47 г), полученного в ссылочном примере 5(2), и N, N-диизопропилэтиламина (0,31 мл) в ацетонитриле (10 мл) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 30 минут. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 4 (1), получив в результате (2S, 4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-метил-2-[(3R)-3-(N-метил-N-(4- нитробензилоксикарбонил)аминометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин (0,67 г).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 1705, 1647, 1609, 1585, 1512, 1440, 1403, 1346, 1301, 1248, 1212, 1191, 1149, 1107.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CHCl₃) м.д.: 1,50-2,12 (2H, м), 2,29, 2,32 (3H, сх2), 2,37-2,66 (3H, м), 3,00, 3,02 (3H, сх2), 3,00-3,88 (10H, м), 3,72 (2H, с), 3,81 (3H, с), 5,23 (2H, с), 6,85 (2H, д, J= 8,6 Гц), 7,23 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,53 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,24 (2H, д, J= 8,6 Гц).

(2) К раствору соединения (0,59 г), полученного в ссылочном примере 6 (1), в смеси анизола (0,6 мл) и трифторуксусной кислоты (6,0 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,24 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (6), с получением указанного в заголовке соединения (0,53 г).

Ссылочный пример 7.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R) -3-(4-нитробензилоксикарбонилгуанидинометил)пирролидин-1- илкарбонил]пирролидин

(1) К раствору соединения (1,50 г), полученного в ссылочном примере 1 (2), в ацетонитриле (15 мл) прибавляли трифенилфосфин (1,83 г) и полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение одного часа. К реакционной смеси прибавляли гидрат сульфата натрия (2,24 г), после чего нагревали с обратным холодильником в течение одного часа. Дав температуре подняться до комнатной температуры, отфильтровывали нерастворимый материал. Затем фильтрат концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. В остаток вливали диэтиловый эфир и отфильтровывали выпавший при этом в осадок нерастворимый материал. Фильтрат концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении.

К раствору остатка (1,90 г) в этаноле (20 мл) прибавляли 1H-пиразол-1-карбоксамидингидрохлорид (1,02 г) и полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. Дав температуре реакционной смеси снизиться до комнатной температуры, концентрировали смесь путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток промывали диэтиловым эфиром.

К раствору остатка (2,86 г) в смеси тетрагидрофуран (25 мл) - вода (25 мл) последовательно прибавляли в ледяной бане 4-нитробензилхлорформиат (3,57 г) и 1н водный раствор (33 мл) гидроксида натрия с последующим перемешиванием при ^oC в течение 30 минут. Реакционную смесь разбавляли водой и затем экстрагировали три раза метиленхлоридом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным суьфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Полученный остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 9/1), получив в результате (3R)-1- трет-бутоксикарбонил-3-(4-нитробензилоксикарбонилгуанидинометил) пиррролидин (1,29 г).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 3393, 3327, 1693, 1652, 1641, 1604, 1523, 1408, 1347, 1289.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,44 (9H, с), 1,68-1,52 (1H, м), 1,95-2,04 (1H, м), 2,36-2,48 (1H, м), 3,03 (1H, дд, J= 11,2, 7,2 Гц), 3,15-3,54 (5H, м), 5,19 (2H, с), 6,72 (2H, ш.с), 7,54 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,20 (2H, д, J=8,6 Гц).

(2) К раствору соединения (1,23 г), полученного в ссылочном примере 7 (1), в метиленхлориде (13 мл) прибавляли в ледяной бане трифторуксусную кислоту (2,2 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 часов. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (4), получив в результате (3S)- 3-(4-нитробенэилоксикарбонилгуанидинометил)пирролидин (0,72 г).

(3) К раствору (2S, 4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-(4- нитробензилоксикарбонил)-2-пирролидинкарбоновой кислоты (1,05 г) в тетрагидрофуране (10 мл) прибавляли в ледяной бане N,N- диизопропилэтиламин (0,41 мл) и пивалоилхлорид (0,29 мл). Полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 10 минут. К реакционной смеси прибавляли раствор смеси соединения (0,72 г), полученного в ссылочном примере 7 (2), и N,N-диизопропилэтиламина (0,41 мл) в ацетонитриле (10 мл) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 30 минут. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, после чего ее экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 9/1), получив в результате (2S,4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-(4- нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)-3-(4- нитробензилоксикарбонилгуанидинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин (0,93 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1707, 1651, 1609, 1521, 1432, 1405, 1346, 1319, 1287, 1251, 1207, 1174, 1110.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,55-2,71 (5H, м), 2,96-4,40 (10H, м), 3,72, 3,74 (2H, сх2), 3,79 (3H, с), 4,97-5,38 (4H, м), 6,81-6,88 (2H, м), 7,20-7,25 (2H, м), 7,39-7,56 (4H, м), 7,99-8,25 (4H, м).

(4) К раствору соединения (0,88 г), полученного в ссылочном примере 7 (3), в смеси анизола (1,4 мл) и трифторуксусной кислоты (14 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,31 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (6), с получением указанного в заголовке соединения (1,28 г).

Ссылочный пример 8.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)- 3-(4-нитробензилоксикарбонилацетимидоиламинометил)пирролидин-1- илкарбонил]пирролидин

(1) К раствору соединения (1,00 г), полученного в ссылочном примере 1 (2), в ацетонитриле (10 мл) прибавляли трифенилфосфин (1,22 г). Полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение одного часа. К реакционной смеси прибавляли декагидрат сульфата натрия (1,50 г), после чего нагревали с обратным холодильником в течение одного часа. Дав температуре подняться до комнатной температуры, отфильтровывали нерастворимый материал. Фильтрат концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. В остаток вливали диэтиловый эфир. Выпавший при этом в осадок нерастворимый материал отфильтровывали и фильтрат концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. К раствору остатка (1,27 г) в ацетонитриле (25 мл) прибавляли в ледяной бане 4н этилацетатный раствор (1,1 г) хлороводорода с последующим перемешиванием при 0^oC в течение 15 минут. К реакционной смеси прибавляли в ледяной бане N-(4-нитробензилоксикарбонил)ацетамидин (1,15 г) и полученную смесь перемешивали при 50^oC в течение 1,5 часа. Дав температуре реакционной смеси снизиться до комнатной температуры, разбавляли ее этилацетатом. Разбавленный раствор промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Полученный остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем, получив в результате (3R)-1-трет-бутоксикарбонил-3-[N-(4- нитробензилоксикарбонил)ацетимидоиламинометил]пиррролидин (1,66 г).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 3313, 3112, 1687, 1564, 1523, 1411, 1346, 1220.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,46 (9H, с), 1,58-1,72 (1H, м), 1,95-2,12 (1H, м), 2,16, 2,25 (3H, сх2), 2,39-2,53 (1H, м), 3,00-3,11 (1H, м), 3,28-3,62 (5H, м), 5,20, 5,23 (2H, сх2), 7,57 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,21 (2H, д, J=8,6 Гц).

(2) К раствору соединения (1,66 г), полученного в ссылочном примере 8 (1), в метиленхлориде (17 мл) прибавляли в ледяной бане трифторуксусную кислоту (2,9 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (4), получив в результате (3S)-3-[N-(4- нитробензилоксикарбонил)ацетимидоиламинометил)пирролидин (0,81 г).

(3) К раствору (2S, 4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-(4- нитробензилоксикарбонил)-2-пирролидинкарбоновой кислоты (1,18 г) в тетрагидрофуране (12 мл) прибавляли в ледяной бане N,N- диизопропилэтиламин (0,46 мл) и пивалоилхлорид (0,33 мл). Полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 10 минут. К реакционной смеси прибавляли раствор смеси соединения (0,81 г), полученного в ссылочном примере 8 (2), и N,N-диизопропилэтиламина (0,46 мл) в ацетонитриле (10 мл) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 30 минут. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, после чего ее экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Полученный описанным образом остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 95/5-9/1), получив в результате (2S, 4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1- (4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)-3-(4- нитробензилоксикарбонил)ацетимидоиламинометил)пирролидин-1- илкарбонил]пирролидин (1,05 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. cм^-1: 3300, 3113, 3080, 1709, 1651, 1608, 1585, 1564, 1520, 1439, 1404, 1346, 1301, 1241, 1213, 1176, 1110.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CHCl₃) м.д.: 1,49-2,77 (8H, м), 3,03-4,12 (10H, м), 3,79 (2H, с), 3,84 (3H, с), 4,30-4,50 (1H, м), 5,04-5,40 (4H, м), 6,90 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,29 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,43-7,65 (4H, м), 8,16-8,32 (4H, м).

(4) К раствору соединения (1,02 г), полученного в ссылочном примере 8 (3), в смеси анизола (1,5 мл) и трифторуксусной кислоты (15 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,36 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (6), с получением указанного в заголовке соединения (1,35 г).

Ссылочный пример 9.

(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(N-Циклопропил-N-(4-нитробензилоксикарбонил) аминометил)пирролидин-1-илкарбонил] -4-меркапто-1-(4- нитробензилоксикарбонил)пирролидин

(1) К раствору соединения (1,00 г), полученного в ссылочном примере 1 (1), в тетрагидрофуране (10 мл) последовательно прибавляли триэтиламин (0,83 мл) и метансульфонилхлорид (0,46 мл). Полученную смесь перемешивали в течение одного часа. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, после чего ее экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженным давлении. К раствору остатка (1,53 г) в метаноле (10 мл) прибавляли циклопропиламин (10 мл) и полученную смесь нагревали в толстостенной склянке при 100^oC в течение 4 часов. Дав температуре реакционной смеси снизиться до комнатной температуры, смесь концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении.

К раствору остатка (1,93 г) в ацетонитриле (20 мл) прибавляли в ледяной бане N,N-диизопропилэтиламин (0,95 мл) и 4- нитробензилхлорформиат (1,18 г) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, и полученную смесь экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (н-гексан/этилацетат - 4/6), получив в результате (3S)-1-трет-бутоксикарбонил-3-[N- циклопропил-N-(4-нитробензилоксикарбонил)аминометил]пиррролидин (0,95 г).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 1697, 1607, 1524, 1494, 1479, 1453, 1405, 1366, 1346, 1288, 1258, 1210, 1171, 1141, 1111.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 0,63-0,71 (2H, м), 0,78-0,87 (2H, м), 1,45 (9H, с), 1,55-1,68 (1H, м), 1,90-2,00 (1H, м), 2,50-2,67 (2H, м), 2,96-3,09 (1H, м), 3,18-3,59 (5H, м), 5,23 (2H, с), 7,53 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,23 (2H, д, J=8,6 Гц).

(2) К раствору соединения (0,77 г), полученного в ссылочном примере 9(1), в метиленхлориде (12 мл) прибавляли в ледяной бане трифторуксусную кислоту (1,4 мл) с после дующим перемешиванием при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (4), получив в результате (3S)-3-[N-циклопропил-N-(4- нитробензилоксикарбонил)аминометил) пирролидин (0,72 г).

(3) К раствору (2S, 4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-(4- нитробензилоксикарбонил)-2-пирролидинкарбоновой кислоты (1,00 г) в тетрагидрофуране (10 мл) прибавляли в ледяной бане N,N- диизопропилэтиламин (0,39 мл) и пивалоилхлорид (0,28 мл). Полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 10 минут. К реакционной смеси прибавляли раствор смеси соединения (0,72 г), полученного в ссылочном примере 9 (2), и N,N- диизопропилэтиламина (0,39 мл) в ацетонитриле (10 мл) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 30 минут. В реакционную смесь вливали насыщенный солевой раствор, чтобы прекратить реакцию, после чего ее экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Полученный описанным образом остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат), получив в результате (2S,4S)-2-[(3S)-3-(N- циклопропил-N-(4-нитробензилоксикарбонил)аминометил) пирролидин-1-илкарбонил] -4-(4-метоксибензилтио)-1-(4- нитробензилоксикарбонил)пирролидин (0,93 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1707, 1655, 1609, 1585, 1521, 1440, 1404, 1346, 1289, 1250, 1210, 1176, 1139, 1110.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: О,50-0,75 (2H, м), 0,75-0,95 (2H, м), 1,47-2,02 (3H, м), 2,32-2,74 (3H, м), 2,92-4,08 (9H, м), 3,73 (2H, с), 3,79, 3,80 (3H, сх2), 4,26-4,45 (1H, м), 4,97-5,34 (4H, м), 6,85 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,23, 7,25 (2H, д2, J=8,6 Гц), 7,46, 7,53 (4H, дх2, J=8,6 Гц), 8,23 (4H, д, J=8,6 Гц).

(4) К раствору соединения (0,82 г), полученного в ссылочном примере 9 (3), в смеси анизола (0,8 мл) и трифторуксусной кислоты (8 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,24 мл), после чего полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение одного часа. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (6), с получением указанного в заголовке соединения (0,77 г).

Ссылочный пример 10.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3S) -3-(4-нитробензилоксикарбонилацетимидоиламинометил)пирролидин- 1-илкарбонил]пирролидин

(1) К раствору соединения (1,00 г), полученного в ссылочном примере 2 (2), в ацетонитриле (10 мл) прибавляли трифенилфосфин (1,22 г) и полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение одного часа. К реакционной смеси прибавляли декагидрат сульфата натрия (1,50 г), после чего нагревали с обратным холодильником в течение одного часа. Дав температуре подняться до комнатной температуры, отфильтровывали нерастворимый материал. Фильтрат концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. В остаток вливали диэтиловый эфир и выпавший при этом в осадок нерастворимый материал отфильтровывали. Затем фильтрат концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. К раствору остатка (1,33 г) в ацетонитриле (25 мл) прибавляли в ледяной бане 4н этилацетатный раствор хлороводорода (1,1 г) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 15 минут. К реакционной смеси прибавляли в ледяной бане N-(4- нитробензилоксикарбонил)ацетамидин (1,15 г). Полученную смесь перемешивали при 50^oC в течение 1,5 часа. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как писано в ссылочном примере 8 (1), получив в результате (3S)-1-трет-бутоксикарбонил-3-[N-(4- нитробензилоксикарбонил)ацетимидоиламинометил]пиррролидин (1,58 г).

Спектр инфракрасного излучения (жидкая пленка) _макс. см^-1: 3314, 3112, 1690, 1565, 1523, 1409, 1346, 1221.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,46 (9H, с), 1,58-1,72 (1H, м), 1,95-2,12 (1H, м), 2,16, 2,25 (3H, сх2), 2,39-2,53 (1H, м), 3,00-3,11 (1H, м), 3,28 (5H, м), 5,20, 5,23 (2H, сх2), 7,57 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,21 (2H, д, J=8,6 Гц).

(2) К раствору соединения (1,58 г), полученного в ссылочном примере 10 (1), в метиленхлориде (15 мл) прибавляли в ледяной бане трифторуксусную кислоту (2,9 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (4), получив в результате (3S)-3-[N-(4-нитробензилоксикарбонил) ацетимидоиламинометил)пирролидин (0,97 г).

(3) К раствору (2S, 4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-(4- нитробензилоксикарбонил)-2-пирролидинкарбоновой кислоты (1,06 г) в тетрагидрофуране (10 мл) прибавляли в ледяной бане N,N- диизопропилэтиламин (0,41 мл) и пивалоилхлорид (0,29 мл). Полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 10 минут. К реакционной смеси прибавляли раствор смеси соединения (0,76 г), полученного в ссылочном примере 10 (2), и N,N- диизопропилэтиламина (0,41 мл) в ацетонитриле (10 мл) и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 30 минут. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 8(3), получив в результате (2S,4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1- (4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)-3-(N-(4- нитробензилоксикарбонил)ацетимидоиламинометил)пирролидин-1- илкарбонил]пирролидин (1,00 г).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 3296, 3113, 3080, 1708, 1680, 1652, 1608, 1584, 1564, 1521, 1432, 1405, 1346, 1301, 1239, 1216, 1176, 1110.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,60-1,80 (8H, м), 3,02-4,10 (9H, м), 3,78 (2H, с), 3,83 (3H, с), 4,32-4,52 (1H, м), 5,02-5,38 (4H, м), 6,90 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,28 (2H, д, J=8,6 Гц), 7,45-7,69 (4H, м), 8,20-8,34 (4H, м).

(4) К раствору соединения (1,00 г), полученного в ссылочном примере 10 (3), в смеси анизола (1 мл) и трифторуксусной кислоты (10 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,20 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение двух часов. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (6), с получением указанного в заголовке соединения (0,93 г).

Ссылочный пример 11.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2- [(3S)-3-(4-нитробензилоксикарбонилгуанидинометил)пирролидин-1- илкарбонил]пирролидин

(1) К раствору соединения (1,01 г), полученного в ссылочном примере 2 (2), в безводном ацетонитриле (10 мл) прибавляли трифенилфосфин (1,23 г) и полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение одного часа. К реакционной смеси прибавляли 1,51 г декагидрата сульфата натрия, после чего смесь нагревали с обратным холодильником в течение одного часа. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь фильтровали. Затем фильтрат концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 1/1), получив в результате (3S)-3-аминометил-1-трет-бутоксикарбонилпирролидин (840 мг). Продукт полностью совпадал с соединением, полученным в ссылочном примере 1 (9), по данным ВХЖХ и ЯМР.

(2) К раствору соединения (840 мг), полученного в (1), в этаноле (14 мл) прибавляли 1H-пиразол-1-карбоксамидингидрохлорид (686 мг) и полученную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 3 часов. Дав температуре реакционной смеси снизиться до комнатной температуры, концентрировали смесь путем выпаривания при пониженным давлении. Остаток промывали диизопропиловым спиртом.

К раствору остатка (1,50 г) в смеси тетрагидрофуран (20 мл) - вода (20 мл) последовательно прибавляли 4-нитробензилхлорформиат (2,41 г) и 1н водный раствор (22 мл) гидроксида натрия и полученную смесь перемешивали при 0^oC в течение 30 минут. Реакционную смесь разбавляли водой и затем экстрагировали три раза этилацетатом. Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 25/1), получив в результате (3S)-1-трет-бутоксикарбонил-3- (4-нитробензилоксикарбонилгуанидинометил)пирролидин (746 мг).

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,44 (9H, с), 1,68-1,52 (1H, м), 1,95-2,04 (1H, м), 2,36-2,48 (1H, м), 3,03 (1H, дд, J= 11,1, 7,1 Гц), 3,15-3,54 (5H, м), 5,19 (2H, с), 6,70 (1H, ш.с), 7,54 (2H, д, 8,6 Гц), 8,20 (2H, д, J=8,6 Гц).

(3) К раствору соединения (701 мг), полученного в (2), в этилацетате (7 мл) прибавляли 4н этилацетатный раствор (3,3 мл) хлороводородной кислоты и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали. Остаток промывали этиловым эфиром с получением (3S)-3-(4-нитробензилоксикарбонилгуанидинометил) пирролидингидрохлорида (647 мг).

(4) К (2S,4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-(4- нитробензилоксикарбонил)-2-пирролидинкарбоновой кислоте (947 мг) в N,N-диметилформамиде (10 мл) прибавляли N,N-диизопропилэтиламин (0,369 мл), соединение, полученное в (3), (649 мг), 1-этил-3-(3- диметиламинопропил)карбодиимидгидрохлорид (406 мг) и 1- гидроксибензотриазол (286 мг) и полученную смесь перемешивали всю ночь при комнатной температуре. К реакционной смеси прибавляли этилацетат. Полученную смесь промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Полученный описанным образом остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 12/1), получив в результате (2S,4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2- [(3S)-3-(4-нитpoбензилoкcикарбонилгуанидинометил) пирролидин-1-илкарбонил]пирролидин

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1708, 1520, 1251, 1031, 739.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,5-2,7 (5H, м), 2,9-3,6 (10H, м), 3,71, 3,73 (2H, сх2), 3,77 (3H, с), 3,80-3,90 (1H, м), 4,95-5,25 (4H, м), 6,87 (2H, д, J=8,45 Гц), 7,25-7,28 (2H, м), 7,45-7,65 (4H, м), 8,15-8,3 (4H, м).

(5) К раствору соединения (1,10 г), полученного в (4), в смеси анизола (1,65 мл) и трифторуксусной кислоты (8,0 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,26 мл). Полученную смесь перемешивали при той же самой температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 1 (6), с получением указанного в заголовке соединения (926 мг).

Ссылочный пример 12.

(2S,4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)- 3-(пирролидин-1-илметил)пирролидин-1-илкарбонил]пирролидин

(1) К раствору (3S)-3-(пирролидин-1-илметил) пирролидингидрохлорида (367 мг), полученного из (3R)-1-трет- бутоксикарбонил-3-гидроксиметилпирролидина, в безводном диметилформамиде (10 мл) прибавляли (2S,4S)-4-(4-метоксибензилтио)-1-(4-нитробензилоксикарбонил) -2-пирролидинкарбоновую кислоту (804 мг), диизопропилэтиламин (1,16 мл), 1-гидроксибензотриазол (243 мг) и 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимидгидрохлорид (483 мг). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 часов. Отгоняли при пониженном давлении растворитель. Остаток растворяли в этилацетате. Полученный раствор промывали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и затем концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении. Остаток очищали путем хроматографии через колонку с силикагелем (этилацетат/метанол = 5/1-1/1), получив в результате (2S,4S)-4-(4-метоксибензилтио)-2-[(3R)-3- (пирролидин-1-илметил)пирролидин-1-илкарбонил]-1-(4- нитробензилоксикарбонил)пирролидин (362 мг).

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д.: 1,00-2,00 (3H, м), 2,00-3,00 (2H, м), 3,00-4,20 (17H, м), 3,73 (2H, с), 3,79 (3H, с), 4,32-4,46 (1H, м), 4,90-5,40 (2H, м), 6,85 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,24 (2H, д, J=8,5 Гц), 7,46 (2H, д, J=8,6 Гц), 8,23 (2H, д, J=8,6 Гц).

(2) К раствору соединения (362 мг), полученного в (1), в смести анизола (0,68 мл) и трифторуксусной кислоты (3,4 мл) прибавляли при перемешивании в ледяной бане трифторметансульфоновую кислоту (0,14 мл). Полученную смесь перемешивали при той же самой температуре в течение 30 минут. Отгоняли при пониженном давлении трифторуксусную кислоту. Остаток промывали гексаном и эфиром, сушили при пониженном давлении, экстрагировали этилацетатом после добавления насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и затем промывали насыщенным солевым раствором. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали путем выпаривания при пониженном давлении с получением указанного в заголовке соединения (287 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1697, 1525, 1246.

Ссылочный пример 13.

(2S, 4S)-2-[(3R)-3-(N-2-Гидроксиэтил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] - 4-меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

(3R)-3-(N-2-Гидроксиэтил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил) пирролидингидрохлорид (197 мг) обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения (214 мг) в виде порошка.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃) м.д. 1,50-2,20 (2H, м), 2,50-2,90 (2H, м), 2,90-4,10 (12H, м), 4,15-4,30 (2H, м), 4,40-4,55 (1H, м), 5,20-5,30 (4H, м), 7,50-7,60 (4H, м), 8,19-8,28 (4H, м).

Ссылочный пример 14.

(2S, 4S)-2-[(3S)-3-(N-Карбамоилметил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -4- меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

(3S)-3-(N-Карбамоилметил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил) пирролидингидрохлорид (261 мг) обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения (368 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 3371, 2948, 2879, 1706, 1645, 1608, 1522, 1347, 1259.

Спектр ядерного магнитного резонанса (400 МГц, ДМСО-d₆ м.д.: 1,40-2,05 (2H, м), 2,30-2,75 (3H, м), 2,90-3,60 (5H, м), 3,60-4,95 (4H, м), 4,30-4,60 (1H, м), 5,00-5,30 (4H, м), 7,40-7,70 (4H, м), 8,10-8,30 (4H, м).

Ссылочный пример 15.

(2S,4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3S) -3-[N-2-(4-нитробензилоксикарбониламино)этил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил] пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин

(3S)-3-[N-2-(4-Нитробензилоксикарбониламино)этил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил] пирролидингидрохлорид (195 мг) обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения (248 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1705, 1648, 1607, 1521, 1437, 1347.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, CDCl₃+CD₃OD) м.д.: 1,50-2,10 (3H, м), 2,60-2,80 (2H, м), 3,00-3,70 (11H, м), 3,80-4,00 (1H, м), 4,00- 4,20 (1H, м), 4,40-4,60 (1H, м), 5,15-5,30 (6H, м), 7,45-7,60 (6H, м), 8,10-8,30 (6H, м).

Ссылочный пример 16.

(2S, 4S)-2-[(3S)-3-(N-2-Диметиламиноэтил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -4- меpкaпaтo-1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

(3S)-3-(N-2-Диметиламиноэтил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидиндигидрохлорид (302 мг) обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения (461 мг) в виде порошка.

Ссылочный пример 17.

(2S, 4S)-4-Меркапто-2-[(3R)-3-[N-2-(N-метил-N-4- нитробензилоксикарбониламино)этил-N-метиламинометил] пирролидин -1-илкарбонил]-1-(4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

(3S)-3-[N-2-(N-метил-N-4-нитробензилоксикарбониламино) этил)-N-метиламинометил] пирролидиндигидрохлорид (580 мг) обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения (628 мг) в виде порошка.

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1699, 1645, 1523, 1442, 1347.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, ДМСО-d₆) м.д.: 1,40-2,00 (3H, м), 2,00-4,10 (21H, м), 4,30-4,60 (1H, м), 5,00-5,30 (4H, м), 7,51-7,65H (4H, м), 8,21-8,28 (4H, м).

Ссылочный пример 18.

(2S, 4S) - [(3S)-3-2-Фторэтил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] -4-меркапто-1-(4- нитробензилоксикарбонил)пирролидин

(3S)-3-(N-2-Фторэтил-N-4-нитробензилоксикарбониламинометил) пирролидингидрохлорид обрабатывают аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Ссылочный пример 19.

(2S, 4S)-4-Меркапто-2-[(3R)-3-[1-метил-2,3-бис(4- нитробензилоксикарбонил)гуанидинометил] пирролидин-1-илкарбонил] -1- (4-нитробензилоксикарбонил)пирролидин

(3S)-3-[1-Метил-2,3-бис(4-нитробензилоксикарбонил) гуанидинометил] пирролидингидрохлорид (1,20 г) обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения (996 мг).

Спектр инфракрасного излучения (KBr) _макс. см^-1: 1754, 1709, 1645, 1608, 1521, 1441, 1405, 1347.

Спектр ядерного магнитного резонанса (270 МГц, ДМСО-d₆) м.д.: 1,50-2,00 (2H, м), 2,60-2,80 (1H, м), 2,90-3,05 (4H, м), 3,10-3,60 (7H, м), 3,65-3,80 (2H, м), 3,80- 4,05 (1H, м), 4,30-4,60 (1H, м), 5,00-5,30 (6H, м), 7,45-7,70 (6H, м), 8,05-8,30 (6H, м).

Ссылочный пример 20.

(2S,4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R) -3-[N-(4-нитробензилоксикарбонилацетимидоил-N-метиламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин

(3S)-3-(N-(4-Нитробензилоксикарбонилацетимидоил-N- метиламинометил)пирролидингидрохлорид обрабатывали аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Ссылочный пример 21.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-[(3R)- 3-(N-4-нитробензилоксикарбонилформимидоил-N-метиламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин

(3S)-3-(N-4-Нитробензилоксикарбонилформимидоил-N- метиламинометил] пирролидингидрохлорид обрабатывают аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Ссылочный пример 22.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2-(3S) -3-(N-2,2,2-тpифтopметил-N-4-нитpoбензилoкcикapбониламинометил) пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин

(3S)-3-(N-2,2,2-Трифторфенил-N-4- нитробензилоксикарбониламинометил)пирролидингидрохлорид обрабатывают аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Ссылочный пример 23.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-(4-нитробензилоксикарбонил)-2- [(3R)-3-(4-нитробензилоксикарбонилформимидоиламинометил) пирролидин-1-илкарбонил]пирролидин

(3S)-3-(4-Нитробензилоксикарбонилформимидоиламинометил) пирролидингидрохлорид обрабатывают аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Ссылочный пример 24.

(2S, 4S)-2-[(3S)-3-[2,3-Бис(4-нитробензилоксикарбонил) гуанидинометил] пирролидин-1-илкарбонил]-4-меркапто-1- метилпирролидин

(3S)-3-[2,3-Бис(4-нитробензилоксикарбонил) гуанидинометил] пирролидин обрабатывают аналогично тому, как описано в ссылочном примере 4 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Ссылочный пример 25.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3S)-3-(4- нитробензилоксикарбонилацетимидоиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин

(3S)-3-(4-Нитробензилоксикарбонилацетимидоиламинометил) пирролидин обрабатывают аналогично тому, как описано в ссылочном примере 4 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Ссылочный пример 26.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3S)-3-(4- нитробензилоксикарбонилформимидоиламинометил)пирролидин-1-илкарбонил] пирролидин

(3S)-3-(4-Нитробензилоксикарбонилформимидоиламинометил) пирролидин обрабатывают аналогично тому, как описано в ссылочном примере 4 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Ссылочный пример 27.

(2S, 4S)-2-[(3R)-3-[1-Метил-2,3-бис(4-нитробензилоксикарбонил) гуанидинометил]-4-меркапто-1-метилпирролидин-1- илкарбонил]пирролидин

(3S)-3-[1-Метил-2,3-бис(4-нитробензилоксикарбонил) гуанидинометил]пирролидин обрабатывают аналогично тому, как описано в ссылочном примере 12 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Ссылочный пример 28.

(2S, 4S)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3S)-3-[N-4- нитробензилоксикарбонилацетимидоил-N-метиламинометил) пирролидин-1-илкарбонил]пирролидин

(3S)-3-(N-4-Нитробензилоксикарбонилацетимидоил-N- метиламинометил)пирролидин обрабатывают аналогично тому, как описано в ссылочном примере 4 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Ссылочный пример 29.

(2S, 43)-4-Меркапто-1-метил-2-[(3R)-3-[N-4- нитробензилоксикарбонилформимидоил-N-метиламинометил)пирролидин-1- илкарбонил]пирролидин

(3S)-3-(N-4-Нитробензилоксикарбонилформимидоил-N- метиламинометил)пирролидин обрабатывают аналогично тому, как описано в ссылочном примере 4 (1) и (2), с получением указанного в заголовке соединения.

Испытание 1.

Антибактериальная активность In vitro

Антибактериальную активность измеряли методом разведения в чашке с агаровой средой, в соответствии с которым определяли минимальную ингибирующую концентрацию (MIC: мкг/мл) против различных болезнетворных бактерий. Результаты испытания на антибактериальную активность соединений по настоящему изобретению примеров 3 и 7 против Staphylococcus aureus 209P, Escherichia coil NIHJ и Pseudomonas aeruginosa N 7 показаны в таблице 2.

Соединения A и B, использованные для сравнения, представляют собой соединения примера 3 в заявке Kokai N Hei 5-310740 на патент Японии [соединения, представленные формулой (I) по настоящему изобретению, где R¹, R² и R³ представляют атомы водорода]. Соединение A имеет R конфигурацию в месте связи с аминометильной группой. Соединение B имеет S конфигурацию в месте связи с аминометильной группой.

Использованной для измерения средой был агар II Мюллера-Хинтона (Mueller-Hinton) (MHA, Becton Dikinson Microbiology Systems).

Испытание 2.

Антибактериальная активность in vitro

Результаты испытания антибактериальной активности соединений по настоящему изобретению примеров 3 и 7 и меропенема против Staphylococcus aureus 209P, Escherichia coli NIHJ и Pseudomonas aeruginosa 3719 (штамм, устойчивый к меропенему) показаны в таблице 3.

Использованной для измерения средой был питательный агар Eiken (eiken Chemicals Co., Ltd.).

Испытание 3

И. Антибактериальная активность in vivo (лечение инфекций)

Культура испытуемого бактериального штамма была привита внутрибрюшинно группам мышей (SPF, DDY, самцы), каждая из которых состояла из 7 животных. Раствор испытуемого соединения вводили мышам подкожно, в общем, два раза, один раз сразу же и один раз через четыре часа после прививки. По коэффициенту выживания через пять дней после заражения определяли 50%-ную эффективную дозу (ED₅₀: мг/кг) путем пробит-анализа и указывали разовую дозу испытуемого соединения.

Результаты испытания соединения примера 3, соединения A и меропенема против Pseudomonas aeruginosa 1008 показаны в таблице 4. Кстати, соединение A является таким же, как описанное выше.

Приведенные выше результаты показывают, что соединения по настоящему изобретению обладают высокой бактериальной активностью при испытании in vitro и дают превосходные результаты лечения инфекций при испытании in vivo. В частности, по сравнению с аминометильными соединениями [соединения, представленные формулой (I) по настоящему изобретению, где R₁, R² и R³ представляют атомы водорода; соединения A и B, раскрытые в заявке Kokai N Hei 5-3107401 как соединение 2-58] соединения по настоящему изобретению (например, соединение примера 3) обладают более высокой активностью против Psеudomonas aеruginosa. Кроме того, соединения по настоящему изобретению обладают высокой антибактериальной активностью против Pseudomonas aeruginosa 3719, устойчивого к меропенему.

При использовании условий, аналогичных для испытания 3, заявленное в п. 1 уточненной формулы изобретения соединение было испытано на антибактериальную активность in vivo против других бактериальных штаммов. Для сравнения в этих испытаниях было взято соединение из наиболее близкого уровня техники, а именно соединение A заявки (Kokai) на патент Японии N Hei 5-310740.

Антибактериальная активность (ED₅₀ мг/кг) для этих соединений представлена в табл.5.

Представленные данные дополнительно очень четко подтверждают, что соединения настоящего изобретения используются для предупреждения и лечения бактериальных инфекций. Заявитель подчеркивает, что испытания проведены in vivo на адекватных, используемых в данной области моделях животных и заболеваний, что позволяет с достаточной степенью достоверности утверждать, что данные соединения применимы для предупреждения и лечения бактериальных инфекций при введении теплокровным животным.

Кроме того, соединения по настоящему изобретению (например, соединение примера 3) обладают превосходными фармакокинетическими свойствами, такими как период полураспада в крови. Когда соединения по настоящему изобретению были введены кроликам, концентрация их в корковом веществе почки была относительно низкой. Когда соединение примера 3 вводили внутривенно кроликам при дозе 200 мг/кг, у кроликов не было признаков проявления нефротоксичности.

Пример 1 приготовления лекарственных средств.

Инъекционные растворы

В 5 мл дистиллированной воды для инъекции растворяли 500 мг соединения примера 3. Раствор пропускали через фильтр для стерилизации, после чего лиофилизировали с получением лиофилизированного препарата для инъекции.

Пример 2 приготовления лекарственных форм

Таблетки мг:

Соединение примера 3 - 50

Лактоза - 126

Кукурузный крахмал - 23

Стеарат магния - 1

Итого - 200

Указанные выше компоненты (каждый в порошкообразном виде) смешивали, подвергали мокрому гранулированию с кукурузным крахмалом, высушивали и затем таблетировали на таблеточной машине, в результате чего получили таблетки массой 200 мг каждая. Полученные описанным образом таблетки могут быть при необходимости покрыты сахаром.