синтетические полисахариды, способ их получения и содержащая их фармацевтическая композиция

Формула изобретения

1. Синтетический полисахарид формулы I



волнистая линия означает связь, расположенную либо выше, либо ниже плоскости пиранозного цикла



означает полисахарид Рo, содержащий n одинаковых или разных моносахаридных единиц, связанный своим аномерным углеродом с Ре;



представляет собой схематическое изображение моносахаридного остатка с пиранозной структурой, выбираемого среди гексоз, причем этот остаток связан своим аномерным углеродом с другим моносахаридным остатком и гидроксильные группы этого остатка замещены одинаковыми или разными группами X, выбираемыми среди (C₁-C₆)- алкильных групп и сульфогрупп; h = 2;

n означает целое число от 10 до 25;

Ре означает полисахарид структуры:



где R₁ означает (C₁-C₆)-алкильную группу или сульфогруппу;

R₁а имеет указанное для R₁ значение, или с атомом кислорода, с которым он связан, и с атомом углерода, содержащим карбоксильную функцию в одном и том же цикле, образует группу С-CH₂-O;

R означает (C₁-C₆)-алкильную группу;

W означает атом кислорода или метиленовую группу; или одна из его солей, в частности фармацевтически приемлемая соль.

2. Соль полисахарида по п.1, в которой катион выбирают среди катионов щелочных металлов, в частности, среди натрия и калия.

3. Полисахарид и соль по любому из п. 1 или 2 формулы I.А



где



означает особое семейство полисахаридов Ро, связанных своим аномерным углеродом с Ре, таким, как указано в формуле I;



имеет указанное для формулы I значение;

ОХ имеют указанное для формулы I значение и, в случае одного и того же моносахарида, могут быть одинаковыми или разными;

моносахариды, содержащиеся в [ ]_m образуют повторяющийся m раз дисахарид; моносахариды, содержащиеся в [ ]_t, образуют повторяющийся t раз дисахарид;

m = 1 - 8; t = 0 - 5; р = 0 - 1, при условии, что 5 m + t 12;

и его соли, в частности, фармацевтически приемлемые соли.

4. Полисахарид и соль по любому из п.1 или 2 формулы II.А



где



означает особое семейство полисахаридов Ро, связанных своим аномерным углеродом с Ре, таким, как указанный в случае формулы I;



имеет указанное для формулы I значение;

ОХ имеют указанное для формулы I значение и, в случае одного и того же моносахарида, могут быть одинаковыми или разными;

моносахарид, содержащийся в [ ]_m повторяется m" раз; моносахарид, содержащийся в [ ]_t повторяется t" раз; моносахарид, содержащийся в [ ]_p повторяется р" раз;

m" = 1 - 5; t" = 0 - 24; p" = 0 - 24, при условии, что 10 m" +t"++p" 25;

и их соли, в частности фармацевтически приемлемые соли.

5. Соль по любому из п.1 или 2, анион которой отвечает формуле I.1



где t = 5,6 или 7, катионом является фармацевтически приемлемый одновалентный катион,

а также их соответствующие кислоты.

6. Соль по любому из п. 1 или 2, анион которой отвечает формуле I.2



где t = 5, 6 или 7, катионом является фармацевтически приемлемый одновалентный катион,

а также их соответствующие кислоты.

7. Соль по любому из п.1 или 2, анион которой отвечает формуле I.3



где m = 1, 2 или 3; t = 2, 3, 4 или 5, катионом является фармацевтически приемлемый одновалентный катион,

а также их соответствующие кислоты.

8. Полисахариды по п.1, выбираемые среди следующих соединений:

-метил-O-(3-О-метил-2,4,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-[O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-мeтил-2,6-ди-O-cульфo--D-глюкoпиpaнoзил)-(1->4)]₄-O-(2,3-ди-O-метил-6-О-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-2,3,6-три-О-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

-метил-O-(3-O-метил-2,4,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-[O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)]₅-O-(2,3-ди-O-метил-6-О-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-О-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

-метил-O-(3-O-метил-2,4,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-[O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)]₆-O-(2,3-ди-O-метил-6-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозилурионовая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-2,3,6-три-O-cульфo--D-глюкoпиpaнoзид в виде натриевой соли;

-метил-O-(2,3-ди-O-метил-4,6-ди-O-сульфо--O-глюкопиранозил)-(1->4)-[O-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)] ₁₁-O-(2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

-метил-O-(2,3-ди-O-метил-4,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-[O-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)] ₁₃-O-(2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-2,3,6-тpи-O-cульфo--D-глюкoпиpaнoзид в виде натриевой соли;

-метил-O-(2,3-ди-O-метил-4,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-[O-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)] ₁₅-O-(2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-О-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

-метил-O-(3-О-метил-2,4,6-три-О-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-[O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)

(1->4)]₂-[O-(2,3,6-три-О-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)]₂-[O-(2,3-ди-О-метил-6-О--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-О-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-(2,3-ди-O-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

-метил-O-(3-O-метил-2,4,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-О-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-[О-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)] ₂-[O-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)] ₃-O-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-(2,3-ди-O-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

-метил-O-(3-O-метил-2,4,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-О-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-[O-2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)] ₄-O-(2,3-ди-O-метил-6-O-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-(2,3-ди-O-мeтил--L-идoпиpaнoзилуpoнoвaя кислота)-(1->4)-2,3,6-три-О-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

-метил-O-(3-O-метил-2,4,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-О-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-[O-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)] ₃-O-(2,3-ди-O-метил-6-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-(2,3-ди-O-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

-метил-O-(3-O-метил-2,4,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-[О-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)]₄-[O-(2,3-ди-O-метил-6-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-(2,3-ди-О-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

-метил-O-(3-O-метил-2,4,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-[О-(2,3,6-три-О-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1->4)]₅-O-(2,3-ди-O-метил-6-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-O-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-O-(2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозил)-(1->4)-O-(2,3-ди-О-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1->4)-2,3,6-три-O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли.

9. Соединение формулы II.1



где T₁ и Т_n, одинаковые или разные, означают заместитель, выбранный из ацетила, бензила, тритила, аллила, параметоксибензила или 2-(триметилсилил)этила;

Z обозначает защитную группу гидроксильной функции, выбранную из левулинила и параметоксибензила; или

OZ и OT_n образуют вместе группу 4,6-O-бензилиден или 4,6-O-изопропилиден.

10. Соединение формулы III.1



где T₁ и Т_n, одинаковые или разные, означают заместитель, выбранный из ацетила, бензила, тритила, аллила, параметоксибензила или 2-(триметилсилил)этила;

Z обозначает защитную группу гидроксильной функции, выбранную из левулинила и параметоксибензила; или

OZ и OТ_n образуют вместе группу 4,6-О-бензилиден или 4,6-O-изопропилиден.

11. Фармацевтическая композиция, обладающая антикоагулянтной или антитромботической активностью, содержащая в качестве действующего начала полисахарид или соль по любому из пп.1 - 8, в виде соли с фармацевтически приемлемым основанием или в кислотной форме, в сочетании или в смеси с инертным, нетоксичным фармацевтически приемлемым экципиентом.

12. Фармацевтическая композиция по п.11, в виде разовых доз, в которой действующее начало смешано по крайней мере с одним фармацевтическим эксципиентом.

13. Композиция по п.12, в которой каждая разовая доза содержит 0,1 - 100 мг действующего начала.

14. Композиция по п.13, в которой каждая разовая доза содержит 0,5 - 50 мг действующего начала.

15. Полисахарид или соли по пп. 1 - 8 для получения лекарственного средства, пригодного в случае патологий, зависимых от дисфункции коагуляции.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к новым синтетическим полисахаридам, обладающим ангикоагулянтной и антитромботической фармакологическими активностями гепарина. Гепарин относится к семейству гликозаминогликанов (GAGs), которые представляют собой природные гетерогенные сульфатированные полисахариды.

Гепариновые препараты представляют собой смеси цепей, включающих число моносахаридных остатков от 10 до 100 и более. К этой гетерогенности размера добавляется гетерогенность структуры на уровне природы конститутивных моносахаридов, а также на уровне имеющихся у них заместителей (L. Roden "Биохимия гликопротеинов и гликозаминогликанов", изд. Lennarz W.J., Plenum Press, Нью-Йорк и Лондон, 267-371, 1980).

Каждое семейство природных GAGs обычно обладает спектром фармакологических активностей. Все они находятся в препаратах, которые можно получать из природных продуктов. Так, например, сульфатированные гепарины и гепараны обладают антитромботической активностью, которая связана с одновременным воздействием на несколько факторов коагуляции.

Гепарин катализирует, особенно через антитромбин III (AT III), ингибирование двух ферментов, которые принимают участие в каскаде коагуляции крови, а именно фактора Ха и фактора IIa (или тромбина). Гепариновые препараты с низкой молекулярной массой (НВРМ) содержат цепи из 4-30 моносахаридов и обладают свойством более селективно воздействовать на фактор Ха, чем на тромбин.

Некоторые синтетические олигосахариды, в частности те, которые описаны в европейском патенте 84999, обладают свойством селективно ингибировать, через антитромбин III, фактор Ха без всякого воздействия на тромбин.

Известно, что ингибирование фактора Ха требует фиксации гепарина на AT III через домен связывания с антитромбином (DLA) и что ингибирование фактора IIa (тромбина) вызывает необходимость фиксации на AT (III) через DLA, а также на тромбине через менее определенный домен связывания (DLT).

Синтетические олигосахариды, соответствующие домену DLA гепарина, известны и проявляют антитромботическую активность при венозном тромбозе. Эти соединения описываются в европейских патентах 529715 и 621282 и в патенте Канады 2040905.

Эффективность этих олигосахаридов в отношении предупреждения артериального тромбоза тем не менее ограничена их неспособностью ингибировать тромбин.

Синтез гликозаминогликанов гепаринового типа, способных ингибировать тромбин через активатор AT (III), связан с большими трудностями и, фактически, он никогда не был осуществлен.

С целью выявления активности продуктов, являющихся ингибиторами тромбина и фактора Ха, было предложено связывать два олигосахарида маленького размера (DLA и DLT) с помощью остатка ("спейсера"), не участвующего в биологической активности.

В настоящее время найдено, что новые полисахаридные производные могут быть синтезированы относительно простым образом и при этом они являются биологически активными. В частности, они обладают антикоагулянтными и антитромботическими свойствами. Более того, в связи с получением синтетическим путем этих полисахаридов, можно селективно модифицировать их структуру и, в особенности, удалять нежелательные сульфатные заместители, принимающие участие во взаимодействии с некоторыми протеинами. Таким образом, можно получать полисахариды, которые являются эффективными антитромботическими и антикоагулянтными агентами и, кроме того, могут ин виво не подвергаться воздействию протеинов, таких как тромбоцитарный фактор 4 (FP4), которые нейтрализуют воздействие гепарина, в частности, на тромбин.

Таким образом, неожиданно найдено, что сульфатированные и алкилированные полисахариды могут быть эффективными антитромботическими агентами и антикоагулянтами в зависимости от положения алкильных групп и сульфатных групп, имеющихся в глицидном скелете.

Таким образом, найдено, что с помощью синтеза полисахаридных последовательностей можно с точностью модулировать активности типа GAGs и получать очень активные продукты, обладающие свойствами гепарина.

Таким образом, согласно одному из его аспектов, настоящее изобретение относится к новому синтетическому полисахариду, включающему домен связывания с антитромбином III, образованный последовательностью из пяти моносахаридов, содержащих в целом две карбоксильные функции и по крайней мере четыре сульфатные группы, причем этот домен своим невосстанавливающим концом непосредственно связан с доменом связывания с тромбином, включающим последовательность из 10-25 моносахаридных остатков, выбираемых среди гексоз, пентоз и дезоксисахаров, все гидроксильные группы которых, независимо друг от друга, превращены в простые эфирные группы с помощью (C₁-C₆)-алкильной группы или этерифицированы до сложноэфирных групп в сульфатной форме; а также к его солям, в частности фармацевтически приемлемым солям.

Предпочтительно изобретение относится к полисахариду, указанному выше, отличающемуся тем, что все его гидроксильные группы метилированы или этерифицированы до сложноэфирных групп в сульфатной форме, и его солям, в частности к фармацевтически приемлемым солям.

Продуктами настоящего изобретения являются, в частности, полисахариды, представленные следующей формулой (I):



в которой

- волнистая линия - означает связь, расположенную либо выше, либо ниже плоскости пиранозного цикла,



означает полисахарид Po, содержащий n одинаковых или разных моносахаридных остатков, связанный своим аномерным углеродом с Pe;



представляет собой схематическое изображение моносахаридного остатка с пиранозной структурой, выбираемого среди гексоз, причем этот остаток связан своим аномерным углеродом с другим моносахаридным остатком и гидроксильные группы этого остатка замещены одинаковыми или разными группами X, выбираемыми среди (C₁-C₆)-алкильных групп и сульфогрупп; h равно 2,

- n означает целое число от 10 до 25;

- Ре означает пентасахарид структуры:



где R₁ означает (C₁-C₆)-алкильную группу или сульфогруппу;

R₁a имеет указанное для R₁ значение или с атомом кислорода, с которым он связан, и атомом углерода, содержащим карбоксильную функцию, в одном и том же цикле образует группу C-CH₂-O;

- R означает (C₁-C₆) -алкильную группу;

- W означает атом кислорода или метиленовую группу; или одна из их солей, в частности фармацевтически приемлемая соль.

Следует заметить, что в настоящем описании волнистая линия означает обычно связь, расположенную либо ниже, либо выше плоскости пиранозного цикла.

Содержащиеся в Po моносахариды могут быть одинаковыми или разными одни по отношению к другим, межгликозидные связи могут быть типа или .

Эти моносахариды предпочтительно выбирают среди D- или L-гексоз, как аллоза, альтроза, глюкоза, манноза, галоза, идоза, галактоза, талоза (в это случае h = 2), или среди D- или L-пентоз, как рибоза, арабиноза, ксилоза, ликсоза (в этом случае h = 2). Могут быть также использованы другие моносахариды, такие как, например, дезоксисахара (h = 1 и/или CH₂OX = CH₃).

Когда в пентасахаридах Pe остаток W означает атом кислорода и R₁a имеет указанное для R₁ значение, эти пентасахариды представляют собой известные соединения, описанные, в частности, в европейских патентах 300099, 529715, 621282 и 649854, а также в литературе. Их получают из синтонов, также описанных в литературе (согласно С.Van Boeckel, M.Petitou, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 32 1671- 1690 (1993)).

Когда в пентасахаридах Pe R₁a имеет отличное от R₁ значение и/или W означает атом углерода, эти пентасахариды получают с помощью новых синтонов, которые составляют дальнейший аспект изобретения.

Когда в пентасахаридах Pe остаток типа L-идуроновой кислоты заменен остатком, конформация которого блокирована мостиком, эти пентасахариды получают с помощью новых синтонов, которые составляют дальнейший аспект изобретения.

Таким образом, согласно другому из его аспектов, настоящее изобретение относится к новым промежуточным продуктам, пригодным для получения соединений формулы (I).

Полисахаридная часть Po может быть образована 10-25 алкилированными и ди- или трисульфатированными моносахаридными остатками.

Полисахаридная часть Po может быть образована 10-25 алкилированными и моно- или дисульфатированными моносахаридными остатками.

Полисахаридная часть Po может быть образована 10-25 алкилированными, незамещенными и/или частично замещенными и/или полностью замещенными моносахаридными остатками.

Замещенные или незамещенные остатки могут располагаться вдоль всей цепи или, напротив, они могут быть сгруппированы в замещенных или незамещенных сахаридных доменах.

Связи могут быть типа 1,2; 1,3; 1,4; 1,5; 1,6; и типа или .

В настоящем описании дается обозначение конформаций: ¹С₄ для L-идуроновой кислоты, ⁴С₁ для D-глюкуроновой кислоты, однако следует заметить, что обычно конформация в растворе моносахаридных остатков является изменчивой.

Так, L-идуроновая кислота может иметь конформацию ¹С₄ ²S₀ или ⁴C₁.

Предпочтительными согласно изобретению соединениями являются соединения формулы (I.A):



где



означает особое семейство полисахаридов Po, связанных своим аномерным углеродом с Pe, указанным в формуле (I);



имеет указанное для формулы (I) значение,

- OX имеют указанное для формулы (I) значение и в случае одного и того же моносахарида могут быть одинаковыми или разными;

- моносахариды, содержащиеся в [ ]_m, образуют повторяющийся m раз дисахарид;

моносахариды, содержащиеся в [ ]_t образуют повторяющийся t раз дисахарид;

- m изменяется от 1 до 8; t изменяется от 0 до 5 и p изменяется от 0 до 1 при условии, что 5 m + t 12; и их соли, в частности фармацевтически приемлемые соли.

Предпочтительными соединениями являются соли, анион которых отвечает формуле (I.1):



в которой t означает 5, 6 или 7, а катионом является фармацевтически приемлемый одновалентный катион, а также соответствующие кислоты.

Также предпочтительными являются соли, анион которых отвечает формуле (I.2):



в которой t означает 5, 6 или 7, а катионом является фармацевтически приемлемый одновалентный катион; а также соответствующие кислоты.

Особенно предпочтительными являются соли, анион которых отвечает формуле (I.3):



в которой m означает 1, 2 или 3 и t означает 2, 3, 4 или 5, и катионом является фармацевтически приемлемый одновалентный катион; а также соответствующие кислоты.

Другими предпочтительными согласно изобретению соединениями являются соединения формулы (II. A):



в которых



означает особое семейство полисахаридов Po, связанных своим аномерным углеродом с Pe, указанным в формуле (I);



имеет указанное в формуле (I) значение;

- OX имеют указанное в формуле (I) значение и в случае одного и того же моносахарида могут быть одинаковыми или разными;

- моносахарид, содержащийся в [ ]_m, повторяется m" раз; мононосахарид, содержащийся в [ ]_t, повторяется t" раз; моносахарид, содержащийся в [ ]_p, повторяется p" раз;

- m" изменяется от 1 до 5; t" изменяется от 0 до 24 и p" изменяется от 0 до 24 при условии, что 10 m" + t" + p" 25;

и их соли, в частности фармацевтически приемлемые соли.

Предпочтительными согласно изобретению солями являются такие соли, катион которых выбирают среди катионов щелочных металлов, и еще более предпочтительны такие, катионом которых является Na⁺ или К⁺.

Особенно предпочтительными являются следующие полисахариды:

-метил-O-(3-О-метил-2,4,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-[O-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)]₄-O-(2,3-ди-O-метил- 6-O-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

- метил-О-(3-О-метил-2,4,6- три-О-сульфо--D- глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(3-О-метил-2,6-ди- О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(3-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(3-О-метил-2,6- ди-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)]₅-O-(2,3-ди-О-метил -6-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-O-(2,3,6-три-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-тpи-O-cульфo- -D-глюкoпиpaнoзид в виде натриевой соли;

- метил-О-(3-О-метил-2,4,6 -три-О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(3-О-метил-2,6-ди-О -сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-О-метил-2,6 -ди-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)]₆-O-(2,3-ди-О-метил -6-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3-ди-О- метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-О-(2,3,6 -три-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил--L- идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-тpи-O-cульфo- -D-глюкoпиpaниoзид в виде натриевой соли;

- метил-O-(2,3-ди-О-метил-4,6 -ди-О-сульфо--D- глюкопиранозил) (1--->4)-[O-(2,3-ди-О-метил -6-О-сульфо--D- глюкопиранозил)- (1--->4)]₁₁-O-(2,3-ди-О-метил- -D- глюкопиранозилуроновая кислота)- (1--->4)-О-(2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди-O-мeтил- -L-идoпиpaнoзилуpoнoвaя кислота) -(1--->4)-2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

- метил-О-(2,3-ди-О-метил-4,6- ди-О-сульфо--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-[О- (2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)]₁₃-O-(2,3-ди-О-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-О-(2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота)- (1--->4)-2,3,6-три-О-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

- метил-О-(2,3-ди-О-метил-4,6-ди- О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(2,3-ди-О-метил -6-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)]₁₅-O-(2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3-ди-O -метил--L-идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-три -O-сульфо--B-глюкопиранозид в виде натриевой

соли;

- метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три -О-сульфо--D- глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-O-метил-2,6 -ди-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(3-О-метил-2,6 -ди-О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6 -ди-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)] ₂-[О-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)] ₂-O-(2,3-ди-О-метил -6-О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди -O-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)- (1--->4)-O-(2,3,6-тpи -O-cульфo--D-глюкoпиpaнoзил) - (1--->4)-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

- метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -O-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)] ₂-[O-(2,3,6-три -O-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)] ₃-О-(2,3-ди-О-метил-6 -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3-ди-О-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-О-(2,3,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-2,3,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

- метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)]₄-O-(2,3-ди-О-метил-6 -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди-О-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-О-(2,3,6-три-О- сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-(2,3-ди-О-метил--L- идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-2,3,6-три -O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

- метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три -О-сульфо--D-гликопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) - (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-[О-(2,3,6-три-О-метил- -D-глюкопиранозил) - (1--->4)-О-(2,3,6-три-О-метил- -D-глюкопиранозил) - (1--->4)] ₃-О-(2,3-ди-О-метил-6-О-сульфо- -D-глюкопиранозил) - (1--->4)-О-(2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота) - (1--->4)-О-(2,3,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил) - (1--->4)-(2,3-ди-О-метил--L- идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-2,3,6-три -O-сульфо--D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

- метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(3-О-метил-2,6-ди -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(2,3,6-три -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3,6-три -O-метил--D-глюкопиранозил) - (1--->4)]₄-O-(2,3-ди-О-метил-6 -O-сульфо--D-глюкопиранозил) - (1--->4)-O-(2,3-ди -O-метил--D-глюкопиранозилуроновая кислота)- (1--->4)-О-(2,3,6-три -О-сульфо--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-(2,3-ди -О-метил--L-идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли;

- метил-О-(3-О-метил-2,4,6-три-О-сульфо- -D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(D-О-метил-2,6-ди-О-сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-[О-(2,3,6-три-О-метил- -О-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)] ₅-O-(2,3-ди-O-метил-6-O-сульфо- -D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,3-ди-О-метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-О-(2,3,6-три-О-сульфо- -D-глюкопиранозил) -(1--->4)-(2,3-ди-О-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозид в виде натриевой соли.

Настоящее изобретение также относится к способу получения соединений формулы (I), заключающемуся в том, что на первой стадии синтезируют полностью защищенный предшественник целевого полисахарида формулы (I), содержащий защищенный предшественник домена Pe (этот домен представлен в схеме 1 (см. в конце описания)), удлиненный на своем невосстанавливающем конце защищенным предшественником сульфатированного полисахарида Po, затем, во второй стадии, вводят и/или удаляют отрицательно заряженные группы.

С одной стороны, можно использовать полностью защищенный предшественник тетрасахаридной части EFGH пентасахарида. Затем добавляют полисахарид Po, который содержит на своем восстанавливающем конце отсутствующий остаток D пентасахарида Pe, с целью получения, после сочетания, полной области DLA, которая таким образом восстанавливается.

С другой стороны, можно использовать полностью защищенный предшественник дисахаридной части GH пентасахарида. Затем добавляют полисахарид Po, предшественник DLT, который содержит на своем восстанавливающем конце отсутствующий остаток DEF пентасахарида Pe, с целью получения, после сочетания, полной области DLA, которая таким образом восстанавливается.

Синтез этих предшественников Pe осуществляют как указано выше, исходя из синтонов, описанных в литературе или составляющих часть настоящего изобретения. Синтез полисахаридной части предшественника Po осуществляют согласно хорошо известным специалисту реакциям, используя способы синтеза олигосахаридов (G. J. Boons, Tetrahedron, 52, 1095-1121 (1996)) или олигосахарид, когда олигосахарид, являющийся донором гликозидной связи, сочетают с олигосахаридом, являющимся акцептором гликозидной связи, с целью получения другого олигосахарида, размер которого равен сумме величин двух реакционноспособных видов олигосахаридов.

Эту последовательность повторяют вплоть до получения целевого соединения формулы (I). Природа и профиль замещения конечного целевого соединения определяются природой остатков химических соединений, используемых в различных стадиях синтеза, согласно хорошо известным специалисту правилам.

Предпочтительный способ получения предшественников Po согласно настоящему изобретению представлен в схеме 2 (см. в конце описания).

Под временным понимают заместитель, сохраняющийся в течение ограниченного числа стадий; под полупостоянным понимают заместитель, сохраняющийся в течение гораздо большего числа стадий; и под постоянным понимают заместитель, сохраняющийся вплоть до конца синтеза; постоянные заместители удаляют во время последней стадии. Некоторые постоянные группы могут составлять часть конечной молекулы.

В схеме 2 (а) означает моносахарид, являющийся донором гликозидной связи, в котором Z означает временную защитную группу гидроксильной функции и Y означает активатор аномерного углерода, Tn, одинаковые или разные, означают временные, полупостоянные или постоянные заместители всех других гидроксильных функций.

Соединение (b), содержащее незамещенную гидроксильную группу, представляет собой моносахарид, являющийся акцептором гликозидной связи, в котором Tn, одинаковые или разные, представляют собой временные, полупостоянные или постоянные заместители гидроксильных групп. T₁ означает временную, полупостоянную или постоянную защитную группу в аномерном положении, которую удаляют, когда хотят активировать аномерный углерод.

С целью получения соединений согласно изобретению донор гликозидной связи (а) вводят во взаимодействие с акцептором гликозидной связи (b) с получением дисахарида (с).

Вышеполученный дисахарид (с) специфически превращают в дисахарид (d), являющийся донором гликозидной связи, путем удаления T₁ и введения Y и/или в акцептор гликозидной связи (е) путем удаления Z. Затем донор гликозидной связи (d) вводят во взаимодействие с акцептором гликозидной связи (е) с получением тетрасахарида (f), в котором t означает 1. Повторение этой последовательности реакций приводит к олиго- или полисахариду (f), в котором t больше 1.

Используя представленный в схеме 2 способ, также можно получать большое разнообразие полностью защищенных олиго- или полисахаридов, как (g), в котором олигосахариды [ ] _m и [ ]_t представляют собой полностью защищенные предшественники различным образом замещенных доменов соединений согласно изобретению.

На следующей стадии способа соединения (f) и (g) превращают в доноры гликозидной связи и сочетают с невосстанавливающим концевым остатком полностью защищенных предшественников Pe.

Как было указано выше, олигосахарид концевого невосстанавливающего остатка полисахарида (g), являющегося донором гликозидной связи, может образовывать часть Pe, в случае, когда (g) соединился с концевым невосстанавливающим остатком полностью защищенного олигосахарида, который является предшественником остатка структуры Pe.

Соединения согласно изобретению получают из их полностью защищенных полисахаридных предшественников, используя следующую последовательность реакций:

- спиртовые функции превращают в O-сульфогруппу и в карбоновых кислотах отщепляют защитные группы путем удаления групп Tn, используемых для защиты во время получения основной структуры, затем

- вводят сульфогруппы.

Соединения согласно изобретению, естественно, могут быть получены при использовании различных, известных специалисту путей синтеза олигосахаридов.

Вышеописанный способ представляет собой предпочтительный способ согласно изобретению. Однако соединения формулы (I) могут быть получены другими, хорошо известными в химии сахаров способами, описанными, например, в книге P. M. Collins и R.J. Ferrier "Моносахариды, их химия и их роль в природных продуктах, изд. J. Wiley and Sons, 1995 г., и G.J. Boons, Tetrahedron, 52, 1095-1121 (1996).

Предшественник части пентасахарида Pe, когда W означает атом кислорода и R₁a означает R₁, получают согласно способам синтеза олигосахаридов и особенно согласно способам, описанным в европейских патентах 84999, 301618, 454220 и 529715 и в заявках на европейские патенты 9304769 и 94202470. Когда осуществляют полную защиту, то можно, используя соответствующие защитные группы, получать свободную гидроксильную группу в положении 4 невосстанавливающего концевого остатка (D). Полностью защищенный предшественник Pe тогда сочетают по этому положению, используя известные методы синтеза олигосахаридов.

Пентасахарид Pe, в котором W означает атом углерода и R₁a означает R₁, формулы (II):



в которой R и R₁ имеют указанное для формулы (I) значение, получают из синтона формулы (II.1):



в которой T₁ и Tn одинаковые или разные, означают временный, полупостоянный или постоянный заместитель; Z означает защитную группу гидроксильной функции, причем сам синтон получают путем синтеза, осуществляемого путем радикальной реакции между моносахаридом, являющимся генератором свободных радикалов, и моносахаридом, содержащим двойную связь, превращая затем таким образом полученный C-дисахарид в синтон формулы (II.1) классическими способами, описанными выше, согласно С. Van Boeckel, М. Petitou.

Синтон формулы (II.1), особенно пригодный для синтеза соединений формулы (II), отвечает формуле (II.1):



Этот синтон получают согласно реакционной схеме 22, приведенной в конце описания.

Пентасахарид Pe, в котором фигурирует заместитель R₁a, который включает остаток L-идуроновой кислоты блокированной конфигурации формулы (III)



в которой R и R₁ имеют указанные для формулы (I) значения и W означает атом кислорода, получают из синтона формулы (III.1)



в которой T₁ и Tn, одинаковые или разные, означают временный, полупостоянный или постоянный заместитель; Z означает защитную группу гидроксильной функции, причем сам синтон получают путем синтеза, осуществляемого согласно способам, описанным в литературе: М.К. Gurjar и др., Tetrahedron letters, 36, 11, 1937-1940, 1933-1936 (1995), и 35, 14, 2241-2244 (1994).

Синтон формулы (III.1), особенно пригодный для синтеза соединений формулы (III), отвечает формуле (III.1)



Этот синтон получают согласно реакционной схеме 34, приведенной в конце описания.

Промежуточные соединения формул (II. 1) и (III.1) представляют собой новые промежуточные продукты, особенно пригодные для получения соединений формулы (I) согласно изобретению.

Пентасахариды Pe, следовательно, могут быть получены из этих дисахаридных синтонов формулы (II.1) или (III.1) согласно способу, описанному в публикации С.A.A. Van Boeckel и М.Petitou, Angew. Chem.Int.Ed.Engl, цитированной выше.

Под используемыми выше полупостоянными группами понимают группы, удаляемые в первую очередь после реакций гликозилирования, когда глицидный скелет содержит число желаемых звеньев, без удаления или изменения других присутствующих групп, что позволяет затем вводить желаемые функциональные группы в положения, которые занимали эти полупостоянные группы.

Постоянными группами являются группы, способные сохранять защиту гидроксильных функций во время введения функциональных групп вместо полупостоянных групп.

Эти группы выбирают среди таких групп, которые совместимы с функциональными группами, введенными после удаления полупостоянных групп. Кроме того, речь идет о группах, инертных по отношению к реакциям, осуществляемым для введения этих функциональных групп, и которые легко удаляются без изменения этих функциональных групп.

Согласно изобретению постоянными группами предпочтительно являются алкильные группы с 1-6 атомами углерода.

В качестве примера полупостоянной и/или временной группы можно назвать бензильную и ацетильную, левулинильную, п-метоксибензильную и т.д. группы.

Заместители в положении 3 уроновых звеньев целевого соединения, а также заместитель R₁ могут уже присутствовать в исходных синтонах.

Защитные группы, используемые в способе получения соединений формулы (I), представляют собой группы, обычно применяемые в химии сахаров, как например описывается в книге T.W. Greene "Защитные группы в органическом синтезе", изд. John Wiley and Sons, Нью-Йорк, 1981 г.

Защитные группы предпочтительно выбирают, например, среди ацетильных, галогенметильных, бензоильных, левулинильных, бензильных, замещенных бензильных, возможно замещенных тритильных, тетрагидропиранильных, аллильных, пентенильных, трет-бутилдиметилсилильных (tBDMS) или триметилсилилэтильных групп (...).

Активирующими группами являются группы, обычно используемые в химии сахаров, например, согласно G.J. Boons, Tetrahedron, 52, 1095-1121 (1996). Эти активированные группы выбирают, например, среди имидатов, тиогликозидов, пентенилгликозидов, ксантатов, фосфитов или галогенидов.

Вышеописанный способ позволяет получать соединения согласно изобретению в форме солей. Для получения соответствующих кислот соединения согласно изобретению в форме солей вводят в контакт с катионообменной смолой в кислой форме.

Соединения согласно изобретению в форме кислот могут быть затем нейтрализованы с помощью основания для получения желаемой соли.

Для получения солей соединений формулы (I) можно использовать любое неорганическое или органическое основание, образующее с соединениями формулы (I) фармацевтически приемлемые соли.

В качестве основания предпочтительно используют гидроксид натрия, калия, кальция или магния. Натриевые и кальциевые соли соединений формулы (I) являются предпочтительными солями.

На стадии (а) способа используемыми защитными группами являются группы, обычно используемые специалистом в химии сахаров, например, согласно европейскому патенту 84999 или еще согласно T.W. Greene "Защитные группы в органическом синтезе", изд. J. Wiley and Sons, 1995 г.

Таким образом полученные соединения формулы (I) в случае необходимости могут быть превращены в соли.

Соединения вышеприведенной формулы (I) также включают такие соединения, в которых один или несколько атомов водорода или углерода заменены их радиоактивным изотопом, например, тритием или углеродом-14. Такие меченые соединения пригодны в качестве лигандов в научно-исследовательских работах, работах по изучению метаболизма или фармакокинетики, в биохимических опытах. Соединения согласно изобретению были использованы как объект биохимических и фармакологических исследований, которые показали, что они обладают очень интересными свойствами.

Соединения настоящего изобретения, которые селективно связываются с AT III со сродством, равным или выше такового гепарина, обладают антикоагулянтными и антитромботическими свойствами гепарина.

Общую антитромботическую активность продуктов формулы (I) оценивают путем введения внутривенно или подкожно крысе на модели венозного стаза и путем индукции тромбопластином согласно методу, описанному J. Reyers и др. в Thrombosis Research, 18, 669-674 (1980), так же, как на модели артериального тромбоза, вызываемого имплантированным шунтом между сонной артерией и яремной веной крыс, такой как описанная Umetsu и др., Thromb. Haemost., 39, 74-83 (1978). В случае этих двух экспериментальных моделей величина ЭД₅₀ (DE₅₀) соединений согласно изобретению по крайней мере того же порядка или ниже, чем значения того же показателя других, уже известных синтетических гепароидов (ЭД₅₀ составляет от 5 до 500 мкг/кг). Следовательно, соединения согласно изобретению обладают особенно интересным специфическим воздействием и антикоагулянтной и антитромботической активностью.

Благодаря своей биохимической и фармацевтической активности соединения настоящего изобретения представляют большой интерес как лекарственные средства. Их токсичность вполне совместима с этим использованием. Они также очень стабильны и, следовательно, применимы в качестве действующего начала в фармацевтических композициях.

Более того, соединения согласно изобретению не нейтрализуются высокими количествами тромбоцитарных катионных протеинов, таких как тромбоцитарный фактор 4 (FP4), которые увеличиваются во время их активации на протяжении процесса тромбоза. Следовательно, соединения согласно изобретению в высшей степени представляют интерес для лечения и предупреждения тромбозов артериального или венозного происхождения.

Они могут быть использованы в случае различных патологий, являющихся результатом модификации гемостаза системы коагуляции, возникающей, в частности, во время нарушений сердечно-сосудистой и церебрально-сосудистой системы, как например тромбоэмболические нарушения, связанные с артеросклерозом и диабетом, такие как нестабильная стенокардия, апоплексический удар, рестеноз после ангиопластики, эндартерэктомия, установка внутрисосудистых протезов; или тромбоэмболические нарушения, связанные с ретромбозом после тромболиза, инфарктом, деменцией ишемического происхождения, периферическими артериальными заболеваниями, гемодиализом, аурикулярными фибрилляциями, или же во время использования протезов сосудов при аортокоронарном шунтировании. Кроме того, эти продукты могут быть использованы для лечения или предупреждения тромбоэмболических патологий венозного происхождения, таких как эмболии легочных артерий. Они могут быть использованы или для предупреждения или для лечения тромботических осложнений, возникающих во время хирургических вмешательств или одновременно с другими патологиями, как раковые заболевания, бактериальные или вирусные инфекции. В случае их использования во время установки протезов соединения согласно настоящему изобретению могут покрывать протезы и таким образом делать их гемосовместимыми. В частности, они могут фиксироваться на внутрисосудистых протезах (стенты). В этом случае они могут быть при необходимости химически модифицированы за счет введения в невосстанавливающий или восстанавливающий конец соответствующего остатка, как это описывается в европейском патенте 649854.

Соединения согласно настоящему изобретению также могут быть использованы в качестве вспомогательного средства во время эндартерэктомии, осуществляемой при использовании пористых шариков.

Соединения согласно изобретению очень стабильны и, следовательно, также особенно применимы в качестве действующего начала лекарственных средств.

Согласно другому из его аспектов предметом настоящего изобретения, следовательно, является фармацевтическая композиция, содержащая в качестве действующего начала синтетический полисахарид, такой, который указан выше.

Изобретение предпочтительно относится к фармацевтическим композициям, содержащим в качестве действующего начала соединение формул (I), (I.1), (I. 2), (I. 3) или одну из его фармацевтически приемлемых солей, в случае необходимости в сочетании с одним или несколькими соответствующими инертными эксципиентами.

В каждой разовой дозе действующее начало находится в количествах, адаптированных к предусматриваемым суточным дозам. Обычно каждая разовая доза надлежащим образом составлена в зависимости от дозировки и предусматриваемого типа введения, например таблетки, желатиновые капсулы с лекарством и подобные им формы, пакетики, ампулы, сиропы и подобные им формы, капли, чрескожные или для введения через слизистую оболочку пластыри, так, что такая разовая доза содержит 0,1-100 мг, предпочтительно 0,5-50 мг действующего начала.

Соединения согласно изобретению также могут быть использованы в сочетании с другим действующим началом, пригодным для желательной терапии, такими как, например, антитромботические средства, антикоагулянты, тромбоцитарные антиагреганты, такие как, например, дипиридамол, аспирин, тиклопидин, клопидогрель, или антагонисты комплекса гликопротеина IIb/IIIa.

Фармацевтические композиции составляют для введения млекопитающим, включая человека, в целях лечения вышеуказанных заболеваний.

Таким образом, полученные фармацевтические композиции находятся предпочтительно в различных формах, таких как, например, растворы для инъекции или питья, драже, таблетки или желатиновые капсулы с лекарством. Растворы для инъекции являются предпочтительными фармацевтическими формами. Фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению особенно пригодны для профилактической обработки или лечения нарушений стенки сосуда, таких как атеросклероз, состояний гиперкоагуляции, наблюдаемых, например, вследствие хирургических операций, роста опухолей или нарушений коагуляции, вызываемых бактериальными, вирусными или ферментативными активаторами. Дозировку можно изменять в широких пределах в зависимости от возраста, массы и состояния здоровья пациента, природы и тяжести заболевания, а также от метода введения. Эта дозировка включает введение одной или нескольких доз примерно от 0,1 до 100 мг в день, предпочтительно примерно 0,5-50 мг в день, при введении внутримышечно или подкожно, непрерывно или регулярно.

Следовательно, предметом настоящего изобретения также являются фармацевтические композиции, содержащие в качестве действующего начала одно из вышеуказанных соединений, в случае необходимости в сочетании с другим действующим началом. Эти композиции составляют таким образом, чтобы их можно было вводить через пищеварительный тракт или парентерально.

В фармацевтических композициях согласно настоящему изобретению для введения перорально, подъязычно, подкожно, внутримышечно, внутривенно, чрескожно, через слизистую оболочку, локально или ректально, активный ингредиент может быть введен в единичных формах введения, в смеси с обычными фармацевтическими носителями, животным и людям. Соответствующие единичные формы введения включают пероральные формы, такие как таблетки, желатиновые капсулы с лекарством, порошки, гранулы и пероральные растворы или суспензии; подъязычные и трансбуккальные формы введения; подкожные, внутримышечные, внутривенные, внутриносовые или внутриглазные формы введения и ректальные формы введения.

Когда готовят твердую композицию в форме таблеток, соответствующий действующему началу ингредиент смешивают с фармацевтическим эксципиентом, таким как желатина, крахмал, лактоза, стеарат магния, тальк, гуммиарабик или аналогичные компоненты. Таблетки можно покрывать сахарозой или другими соответствующими веществами или же можно их обрабатывать таким образом, чтобы они обладали пролонгированной или замедленной активностью и высвобождали непрерывно заданное количество действующего начала.

Лекарственную форму в виде желатиновых капсул получают путем смешивания активного ингредиента с разбавителем и введения полученной смеси в мягкие или твердые желатиновые капсулы.

Диспергирующиеся в воде порошки или гранулы могут содержать активный ингредиент в смеси с диспергаторами или смачивателями или суспендирующими агентами, как поливинилпирролидон, точно так же, как с подслащивающими средствами или улучшающими вкус веществами.

Для ректального введения используют суппозитории, которые приготовляют со связующими, плавящимися при ректальной температуре, как например масло какао или полиэтиленгликоли.

Для парентерального, внутриносового или внутриглазного введения, используют водные суспензии, солевые изотонические растворы или стерильные растворы для инъекции, которые содержат фармакологически приемлемые диспергаторы и/или смачиватели, как например пропиленгликоль или бутиленгликоль.

Для введения через слизистую оболочку, препаративная форма действующего начала может быть получена в присутствии промотора, такого как соль желчной кислоты, гидрофильный полимер, такой как, например, гидроксипропилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, гидроксиэтилцеллюлоза, этилцеллюлоза, карбоксиметилцеллюлоза, декстран, поливинилпирролидон, пектины, крахмалы, желатина, казеин, акриловые кислоты, эфиры акриловых кислот и их сополимеры, виниловые полимеры или сополимеры, виниловые спирты, алкоксиполимеры, полимеры полиэтиленоксида, простые полиэфиры или их смесь.

Препаративная форма действующего начала также может быть получена в виде микрокапсул, в случае необходимости с одним или несколькими носителями или добавками.

Действующее начало также может находиться в форме комплекса с циклодекстрином, например с -, - или -циклодекстрином, 2-гидроксипропил--циклодекстрином или метил--циклодекстрином.

Действующее начало также может высвобождаться из содержащего его шарика или за счет внутрисосудистого расширителя, введенного в кровеносные сосуды. Фармакологическая эффективность действующего начала таким образом не ухудшается.

Предпочтительным путем введения является введение подкожно.

Нижеследующие методики, препаративные примеры и схемы иллюстрируют синтез различных промежуточных соединений, пригодных для получения полисахаридов согласно изобретению. Нижеприводимые примеры также иллюстрируют изобретение, однако никоим образом не ограничивая его объема охраны.

Dowex, Sephadex, Chelex, Toyopearl представляют собой зарегистрированные товарные знаки.

В методиках, препаративных примерах и примерах, описываемых ниже, общие методики, касающиеся каталитического сочетания имидатов, расщепления сложных левулиновых эфиров, каталитического сочетания тиогликозидов, омыления, метилирования и селективного удаления защитной п-метоксибензильной группы, удаления защитной группы и сульфатирования олиго- и полисахаридов путем гидрогенолиза сложных или простых бензиловых эфиров, омыления сложных эфиров или же сульфатирования, могут быть реализованы при использовании соответствующих нижеприводимых общих методик получения промежуточных соединений.

ОБЩИЕ МЕТОДИКИ

Методика 1. Сочетание имидатов, катализируемое трет-бутил-диметилсилил-трифлатом

Раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (1 М; 0,2 моль/моль имидата), в атмосфере аргона и при температуре -20^oC, добавляют к раствору имидата и гликозильного акцептора в дихлорметане (17,5 мл/моль) в присутствии молекулярного сита Спустя 10-20 минут (ТСХ) добавляют твердый гидрокарбонат натрия. Раствор отфильтровывают, промывают водой, сушат и выпаривают досуха.

Методика 2. Отщепление левулиновой группы

Соединение, защитную группу которого нужно удалить, растворяют в смеси этанола с толуолом в соотношении 2:1 (42 мл/ммоль) и добавляют гидразинацетат (5 моль/моль). Перемешивают в течение 15-30 минут (ТСХ) и концентрируют.

Методика 3. Сочетание тиогликозидов, катализируемое N-йодсукцинимидом и трифталатом серебра

В неактиничной стеклянной колбе тиогликозид и гликозильный акцептор растворяют в безводном толуоле (18 мл/ммоль тиогликозида) в присутствии молекулярного сита Перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. Охлаждают до температуры 0^oC и добавляют N-йодсукцинимид (3 моль/моль тиогликозида), затем трифлат серебра (0,28 моль/моль тиогликозида).

Спустя 10-15 минут (ТСХ) добавляют твердый гидрокарбонат натрия. После отфильтровывания, раствор промывают 1 M водным раствором тиосульфата натрия, водой, сушат и выпаривают.

Методика 4. Омыление, метилирование и селективное удаление защитной п-метоксибензильной группы

Омыление сложных эфиров. Омыляемое соединение растворяют в смеси дихлорметана с метанолом в соотношении 1:1 (4 мл/ммоль). Добавляют метанолят натрия, перемешивают в течение 20 минут и нейтрализуют с помощью смолы Dowex 50 H⁺. Концентрируют и это соединение используют в следующей стадии без очистки.

Метилирование. При температуре 0^oC маленькими порциями добавляют гидрид натрия к смеси вышеполученного неочищенного соединения и метилйодида в N, N-диметилформамиде (7 мл/ммоль). По окончании реакции смесь выливают в воду и экстрагируют этилацетатом. Органические фазы промывают водой, сушат и выпаривают досуха.

Отщепление п-метоксибензильной группы. Вышеполученное неочищенное соединение растворяют в смеси ацетонитрила с водой в соотношении 9:1 (20 мл/ммоль). При температуре 0^oC добавляют нитрат церия и аммония (0,5 моль/моль). Реакционную смесь перемешивают в течение двух часов (контроль с помощью ТСХ), добавляют насыщенный раствор гидрокарбоната натрия, экстрагируют этилацетатом, сушат и выпаривают.

Методика 5. Удаление защитных групп и сульфатирование олиго- и полисахаридов

Гидрогенолиз простых и сложных бензиловых эфиров. В течение 6-12 часов (ТСХ) перемешивают раствор соединения в ледяной уксусной кислоте в атмосфере водорода (40 бар) в присутствии катализатора 5%-ного палладия-на-угле (двукратная масса соединения). После отфильтровывания продукт сразу вводят на следующую стадию.

Омыление сложных эфиров. 5 M водный раствор гидроксида натрия (в таком количестве, чтобы по окончании добавления концентрация гидроксида натрия составляла 0,5 моль) добавляют к раствору сложного эфира в метаноле (150 мл/ммоль). Спустя 2-5 часов вводят воду и пропускают через колонку с гелем Sephadex G-25 (1,6 x 115 см), элюируя водой. Концентрируют, пропускают через колонку c Dowex 50 H⁺ (2 мл) и лиофилизируют. На этой стадии осуществляют контроль с помощью ¹H-ЯМР, чтобы все защитные группы были удалены. Если необходимо, продукт снова подвергают гидрированию и/или омылению.

Сульфатирование. К раствору сульфатируемого соединения в диметилформамиде (5 мг/мл) добавляют комплекс триэтиламина с триоксидом серы (5 моль/моль гидроксильной функции). После выдерживания в течение дня при температуре 55^oC раствор вносят в верхнюю часть колонки c Sephadex G-25 (1,6 x 115 см), элюируя 0,2 M раствором хлорида натрия. Содержащие продукт фракции концентрируют и обессоливают, используя ту же самую колонку при элюировании водой. Целевое соединение получают после лиофилизации.

Препарафивный пример 1

Этил-2,4,6-три-O -ацетил-3-O-метил-1 -тио--D-глюкопиранозид (2)

69 г 1,2,4,6-Тетра-O-ацетил-3 -O-метил--D-глюкопиранозы (1) (0,19 ммоль) [В. Helferich и др., J. prakt. Chem., 132, 321 (1932)] растворяют в 580 мл толуола. Добавляют 28 мл этантиола (0,38 ммоль), затем прикапывают 190 мл 1 M раствора диэтилэфирата трифторида бора в толуоле. Перемешивают в течение полутора часов, сушат и концентрируют. Хроматографирование на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/этилацетат в соотношении 3:1) дает 37 г (54%) соединения (2) (см. схему 3, приведенную в конце описания).

[]_D= -26 (с=1; дихлорметан).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

5,05-4,96 (м, 2H, H-2, H-4), 4,39 (д, 1H, J=9,5 Гц, H-1), 4,18-4,12 (м, 2H, H-6, H-6"), 3,60 (м, 1H, H-5), 3,50 (дд, 1H, J=9,3 Гц, H-3), 3,41 (с, 3H, OCH₃), 2,65-2,53 (м, 2H, SCH₂CH₃), 2,12, 2,11, 2,09 (3c, 9H, 3 ацетил), 1,25 (т, 1H, SCH₂CH₃).

Препаративный пример 2

Этил-4,6-O-бензилиден-3 -O-метил-1-тио- -D-глюкопиранозид (3)

37 г (0,1 ммоль) соединения (2) растворяют в 1,5 л смеси метанола с дихлорметаном в соотношении 1:2. Добавляют 150 мл 2 M раствора метанолята натрия. После выдерживания в течение получаса при комнатной температуре нейтрализуют с помощью смолы Dowex 50 (H⁺), отфильтровывают и концентрируют.

Вышеполученное неочищенное соединение растворяют в 1 л безводного ацетонитрила и добавляют 30 мл (0,2 моль) ,- диметокситолуола и 2,3 г (10 ммоль) камфорсульфокислоты. Перемешивают в течение полутора часов (ТСХ), добавляют 1,4 мл триэтиламина и концентрируют. Полученный остаток осаждают в диэтиловом эфире и получают 27 г (81%) соединения (3) (см. схему 3, приведенную в конце описания).

[]_D= -60 (с = 1,63; дихлорметан).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,51-7,34 (м, 5H, фенил), 5,55 (с, 1H, C₆H₅CH), 4,56 (д, 1H, J=9,2 Гц, H-1) 2,75 (м, 2H, SCH₂CH₃) 1,32 (т, 3H, SCH₂CH₃).

Анализ для C₁₆H₂₂O₅S (326,41):

рассчитано, %: C 58,58 H 6,79 S 9,82

найдено, %: C 58,99 H 6,74 S 9,75

Препаративный пример 3

Этил-2-O-бензил-4,6-O -бензилиден-3-O-метил -1-тио--D- глюкопиранозид (4)

При температуре 0^oC, 2,00 г (83,3 ммоль) гидрида натрия добавляют к раствору 23 г (71,0 ммоль) соединения (3) и 11 мл (93,0 ммоль) бензилбромида в 200 мл N,N-диметилформамида. Перемешивают в течение двух часов (ТСХ), добавляют метанол и реакционную смесь выливают в воду. Экстрагируют этилацетатом, промывают водой, сушат и концентрируют. Осаждают в диэтиловом эфире, получая 18,8 г (63%) соединения (4) (см. схему 3, приведенную в конце описания).

Т.пл. = 123^oC.

[]_D= -35 (c=0,63; дихлорметан).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,50-7,25 (M, 10H, 2 фенила), 5,55 (с, 1H, C₆H₅CH), 4,54 (д, 1H, J=9,7 Гц, H-l), 4,34 (м, 1H, H-6), 3,75 (т, 1H, J=10,2 Гц, H-6"), 3,65 (с, 3H, OCH₃), 3,60-3,33 (м, 4H, H-5, H-4, H-3, H-2), 2,75 (м, 2H, SCH₂CH₃), 1,32 (т, 3H, SCH₂CH₃).

Анализ для C₂₃H₂₈O₅S (416,54):

рассчитано, %: C 66,32 H 6,78 S 7,70

найдено, %: C 66,25 H 7,28 S 7,54

Препаративный пример 4

Этил-2,6-ди-O-бензил -3-O-метил-1-тио- -D-глюкопиранозид (5)

В атмосфере аргона, раствор 0,65 мл (4,50 ммоль) трифторуксусного ангидрида в 16 мл (0,21 моль) трифторуксусной кислоты добавляют к раствору 28,8 г (69,0 ммоль) соединения (4) и 33 мл (0,21 моль) триэтилмилана в 120 мл дихлорметана. Перемешивают в течение двух часов, разбавляют этилацетатом и добавляют водный 1 M раствор гидроксида натрия вплоть до достижения pH = 9. Экстрагируют этилацетатом, промывают водой, сушат и выпаривают досуха. Остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/этилацетат в соотношении 3:1, затем 2:1), получая 17,4 г (60%) соединения (5) (см. схему 3, приведенную в конце описания).

[]_D= -47 (с=1; дихлорметан).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,45-7,25 (м, 10H, 2 фенила), 4,47 (д, 1H, J=9,3 Гц, H-1), 3,66 (с, 3H, OCH₃), 3,61-3,40 (м, 2H, H-4 и H-5), 3,36-3,19 (м, 2H, H-2 и H-3), 2,73 (м, 2H, SCH₂CH₃), 1,31 (т, 3H, SCH₂CH₃).

Анализ для C₂₃H₃₀O₅S (418,55):

рассчитано, %: C 66,00 H 7,22 S 7,66

найдено, %: C 65,62 H 7,28 S 7,21

Препаративный пример 5

Этил-2,6-ди-O-бензил-4-O -левулинил-3-O-метил-1 -тио--D-глюкопиранозид (6)

17,3 г (41,4 ммоль) соединения (5) растворяют в 400 мл безводного диоксана. Добавляют 9,60 г (83,0 ммоль) левулиновой кислоты, 16 г (86 ммоль) 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимидгидрохлорида и 1 г (8,3 ммоль) 4-диметиламинопиридина. Перемешивают в течение четырех часов, экстрагируют этилацетатом, промывают последовательно водным 5%-ным раствором гидросульфата калия, водой, водным насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, водой, сушат и концентрируют. Очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/этилацетат в соотношении 6:1), получая 19,9 г (93%) чистого соединения (6) (см. схему 3, приведенную в конце описания).

[]_D= -5 (с= 1,46; дихлорметан).

LSIMS (положительные ионы): м/e: (тиоглицерин + NaCl) 539 (M+Na)⁺; (тиоглицерин + KF) 555 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,40-7,20 (м, 10H, 2 фенила), 4,92 (м, 1H, H-4), 2,8-2,4 (м, 6HН, SCH₂CH₃ и O(С: O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 2,16 (с, 3H, O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 1,32 (т, 1H, J=7,3 Гц, SCH₂CH₃).

Анализ для C₂₈H₃₆O₇S (516,65):

рассчитано, %: C 65,09 H 7,02 S 6,21

найдено, %: C 65,30 H 7,03 S 5,75

Препаративный пример 6

Аллил-4,6-O-бензилиден-3 -O-метил-,-D -глюкопиранозид (7)

1,10 мл (0,012 моль) трифторметансульфокислоты добавляют к суспензии 135 г (0,7 моль) продажной 3-О-метилглюкозы в 1 л аллилового спирта. Нагревают в течение двух часов при температуре 120^oC, нейтрализуют путем добавления 2 мл триэтиламина и выпаривают досуха.

К раствору вышеполученного сырого соединения в 2 л N,N-диметилформамида добавляют 136 мл (0,9 моль) ,-диметокситолуола и 25 г (0,13 ммоль) камфторсульфокислоты. Нагревают в течение 1 часа при температуре 80^oC в вакууме. Нейтрализуют путем добавления 21 мл триэтиламина и экстрагируют этилацетатом, промывают водой, сушат и концентрируют, получая 144 г (57%) твердого вещества в виде смеси / в соотношении 3/2. Перекристаллизуют из этанола с получением 60 г (26%) чистого соединения (7-). Путем хроматографирования части маточных растворов на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/этилацетат в соотношении 3:1) получают 7,6 г чистого соединения (7-), 6,8 г соединения (7-/) и 1,4 г чистого соединения (7-) (см. схему 3, приведенную в конце описания).

Соединение 7-: []_D= -43 (с = 1; дихлорметан); т.пл.= 131^oC.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,50-7,26 (м, 5H, фенил), 6,01-5,90 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,55 (с, 1H, C₆H₅CH), 5,38-5,32 (м, 2H, OCH₂(CH: CH₂)), 4,47 (д, 1H, J=7,5 Гц, H-1), 4,42-4,32 (м, 2H, H-6" и OCH₂(CH:CH₂)), 4,21- 4,15 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 3,80 (дд, 1H, J=10,2 Гц, H-6), 3,67 (с, 3H, OCH₃)

Анализ для C₁₇H₂₂O₆ (322,36):

рассчитано, %: C 63,34 H 6,88

найдено, %: C 63,23 H 7,12

Препаративный пример 7

Аллил-2-O-ацетил-4,6-O -бензилиден-3-O-метил--D- глюкопиранозид (8)

11,5 г (35,7 ммоль) соединения (7) растворяют в 100 мл дихлорметана и добавляют 4,0 мл (42,8 ммоль) уксусного ангидрида, 6,40 мл (46,4 ммоль) триэтиламина и 440 мг (3,60 ммоль) 4-диметиламинопиридина. Перемешивают в течение двух часов (ТСХ), промывают последовательно водным 5%-ным раствором гидросульфата калия, водой, водным насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, водой, сушат и выпаривают, получая 12,3 г (95%) твердого вещества (8) (см. схему 3, приведенную в конце описания).

Т.пл, = 115^oC; []_D= -68 (с = 1; дихлорметан).

LSIMS (положительные ионы): м/e: (тиоглицерин + NaCl)⁺ 387 (M+Na)⁺; (тиоглицерин + KF) 403 (М+К)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,51-7,34 (м, 5H, фенил), 5,98-5,78 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,56 (с, 1H, C₆H₅CH), 5,32-5,17 (м, 2H, OCH₂(CH:CH₂)), 4,49 (дд, J=8 Гц, 1H, H-2), 4,55 (д, J=7,9 Гц, 1H, H-1), 4,39-4,29 (м, 2H, H-6 и OCH₂(CH:CH₂)), 4,14-4,04 (м, 1H, OCH₂(CH: CH₂)), 3,82 (т, J=10,2 Гц, 1H, H-6"), 3,60 (с, 3H, OCH₃), 2,12 (с, 3H, ацетил).

Анализ для C₁₉H₂₄O₇ (366,39):

рассчитано, %: C 62,63 H 6,64

найдено, %: C 62,63 H 6,64

Препаративный пример 8

Аллил-2-О-ацетил-6 -O-бензил-3-О-метил--D- глюкопиранозид (9)

При температуре 0^oC к раствору 12,0 г (33,3 ммоль) соединения (8) и 21,3 мл (133 ммоль) триэтилсилана в 50 мл безводного дихлорметана добавляют раствор 306 мкл (2,10 ммоль) трифторуксусного ангидрида в 10 мл трифторуксусной кислоты.

Перемешивают в течение четырех часов (ТСХ), разбавляют этилацетатом и добавляют 1 M водный раствор гидроксида натрия вплоть до достижения pH 9. Экстрагируют этилацетатом, промывают водой, сушат и концентрируют. Очищают на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/ацетон в соотношении 8:5), получая 10 г (82%) чистого соединения (9) (см. схему 3, приведенную в конце описания).

[]_D= -40 (с = 1,06; дихлорметан);

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,35-7,28 (м, 5H, фенил), 5,87-5,79 (м, 2H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,28-5,14 (м, 2H, OCH₂(CH: CH₂)), 4,43 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1), 4,41-4,28 (м, 1H, OCH₂(CH: CH₂)), 4,10-4,02 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 3,77-3,75 (м, 2H, H-6 и H-6"), 3,51 (с, 3H, OCH₃), 3,30 (дд, 1H, J=8,9 Гц, H-3), 2,8 (д, 1H, OH).

Анализ для C₁₉H₂₆O₇ (366,39):

рассчитано, %: C 62,28 H 7,15

найдено, %: C 61,73 H 7,19

Препаративный пример 9

Аллил-2-О-ацетил-6-O -бензил-3-О-метил-4-O- (2,6-ди-О-бензил-4-О-левулинил -3-О-метил--D- глюкопиранозил)--D- глюкопиранозид (10)

17,4 г (33,7 ммоль) тиогликозида (6) и 10,3 г (28,1 ммоль) гликозильного акцептора (9) растворяют в 150 мл дихлорэтана. Добавляют молекулярное сито и перемешивают в течение 1 часа. При температуре -20^oC и в атмосфере аргона, добавляют раствор 8,30 г (33,7 ммоль) N-йодсукцинимида и 0,30 мл (3,30 ммоль) трифторметансульфокислоты в 415 мл смеси дихлорэтана с диэтиловым эфиром в соотношении 1:1. Перемешивают в течение 10 минут (ТСХ), добавляют гидрокарбонат натрия, отфильтровывают и промывают последовательно 1 M водным раствором тиосульфата натрия, водой, водным насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, водой, сушат и концентрируют. Очищают на колонке с диоксидом кремния (дихлорметан/этилацетат в соотношении 11:1), получая 11,7 г (52%) чистого дисахарида (10-) (см. схему 4, приведенную в конце описания).

[]_D= +38 (c = 1,01; дихлорметан).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,35-7,23 (м, 15H, 3 фенил), 5,90-5,80 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,47 (д, 1H, J=3,6 Гц, H-1"), 5,27-5,14 (м, 2H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,05-4,90 (м, 2H, H-4" и H-2), 4,42 (д, 1H, J-7,6 Гц, H-1), 4,38-4,32 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 4,15-4,0 (м, 1H, OCH₂(CH: CH₂)), 3,90 (дд, 1H, J=8,8 Гц, H-4), 3,54, 3,34 (2c, 6H, 2 OCH₃), 2,75-2,40 (м, 4H, O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 2,16, 2,10 (2c, 6H, ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Анализ для C₄₅H₅₆O₁₄ (820,94):

рассчитано, %: C 65,84 H 6,88

найдено, %: C 65,74 H 6,90

Препаративный пример 10

Проп-1"-енил-2-O-ацетил -6-O-бензил-3-O-метил -4-O-(2,6-ди-O-бензил-4-O-левулинил -3-O-метил--D- глюкопиранозил)--D-глюкопиранозид (11)

5,80 мг (0,70 мкмоль) 1,5-циклооктадиен-бис[метилдифенилфосфин] иридийгексафторфосфата добавляют к раствору 1,36 г (1,66 ммоль) соединения (10) в 4,30 мл тетрагидрофурана без пероксидов. Раствор дегазируют, создают атмосферу аргона и вводят водород. Перемешивают в течение 10 минут (ТСХ), затем выпаривают. Остаток обрабатывают дихлорметаном, промывают дихлорметановую фазу водным насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, водой, сушат и концентрируют. Очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/этилацетат в соотношении 3: 1), получая 1,04 г (76%) чистого соединения (11) (см. схему 4, приведенную в конце описания).

[]_D= +47 (с = 1,1; дихлорметан).

LSIMS (положительные ионы): м/е; (тиоглицерин + NaCl) 951 (M+Na)⁺; (тиоглицерин + KF) 967 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,34-7,23 (м, 15H, 3 фенил), 6,21-6,16 (м, 1H, O(CH:CH)CH₃), 5,45 (д, 1H, J=3,5 Гц, H-1"), 5,13-4,97 (м, 3H, H-4", H-2 и O(CH:CH)CH₃), 4,6 (д, 1H, J= 7,55 Гц, H-1), 3,96 (дд, 1H, J=8,9 Гц, H-4"), 3,54, 3,34 (2c, 6H, 2OCH₃), 2,74-2,36 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,15, 2,08 (2c, 6H, ацетил и O(C: O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 1,56-1,51 (дд, 3H, O(CH:CH)CH₃).

Анализ для C₄₅H₅₆O₁₄ (820,94):

рассчитано, %: C 65,84 H 6,88

найдено, %: C 66,21 H 6,92

Препаративный пример 11

2-O-Ацетил-6-O-бензил -3-O-метил-4-O-(2,6-ди- O-бензил-4-O-левулинил-3-O -метил--D-глюкопиранозил)-,-D- глюкопираноза (12)

Раствор 3,9 г (14,3 ммоль) хлорида ртути в 26 мл смеси ацетона с водой в соотношении 5:1 прикапывают к раствору 7,8 г (9,53 ммоль) соединения (11) и оксида ртути в 80 мл того же самого растворителя. Перемешивают в течение 1 часа, отфильтровывают и концентрируют. Экстрагируют дихлорметаном, экстракт промывают водным насыщенным раствором йодида калия, водой, сушат и концентрируют. Очищают на колонке с диоксидом кремния (дихлорметан/ацетон в соотношении 10:1, затем 4:1), получая 6,70 г (90%) соединения (12) (см. схему 4, приведенную в конце описания).

[]_D= +92 (c = 1,37; дихлорметан).

ТСХ: R_F = 0,31 (дихлорметан/ацетон в соотношении 14:1).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,37-7,24 (м, 15H, 3 фенил), 5,46 (д, 1H, J=3,5 Гц, H-1"), 5,37 (д, J= 3,6 Гц, H-1), 4,58 (д, J=8 Гц, Н-1), 3,54, 3,39, 3,36 (3c, 6H, 2OCH₃), 2,75-2,4 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,16, 2,15 (2c, 6H, ацетил и 0(C: O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Анализ для C₄₂H₅₂O₁₄ (780,83):

рассчитано, %: C 64,60 H 6,71

найдено, %: C 65,09 H 6,82

Препаративный пример 12

2-O-Ацетил-6-O-бензил -3-O-метил-4-O-(2,6-ди-О -бензил-4-O-левулинил-3 -О-метил--D-глюкопиранозил)-,-D- глюкопиранозатрихлорацетимидат (13)

5,00 г (6,4 ммоль) соединения (12) растворяют в 50 мл дихлорметана и в атмосфере аргона добавляют 3,9 мл (38,8 ммоль) трихлорацетонитрила и 1,6 г (11,6 ммоль) карбоната калия. Перемешивают в течение 16 часов (ТСХ) и отфильтровывают. Очищают на колонке с диоксидом кремния (дихлорметан/ацетон в соотношении 8: 1, затем 4:1), получая 5,22 г (87%) смеси / = 60/40) имидатов (13) (см. схему 4, приведенную в конце описания).

ТСХ : R_F = 0,66 и 0,51 (дихлорметан/ацетон в соотношении 20:1).;

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

8,62-8,59 (2c, 1H, N: H- и ), 7,37-7,23 (м, 15H, 3 фенил), 6,51 (д, J= 3,7 Гц, H-1), 5,81 (д, J=7,1 Гц, H-1), 5,50 (д, 1H, J=3,5 Гц, H-1"), 3,55, 3,41, 3,37 (3c, 9H, 3OCH₃), 2,75-2,40 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,16, 2,07, 2,04 (3c, 6H, ацетил и O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Анализ для C₄₄H₅₂Cl₃NO₁₄ (925,26):

рассчитано, %: C 57,12 H 5,66 N 1,51

найдено, %: C 57,31 H 5,87 N 1,55

Препаративный пример 13

Аллил-2-O-ацетил-6-O -бензил-3-O-метил-4-O-(2,6-ди -О-бензил-3-О- метил--D-глюкопиранозил)- -D-глюкопиранозид (14)

3,11 г (3,80 ммоль) соединения (10) обрабатывают согласно Методике 2 с получением 2,70 г (97%) соединения (14) (см. схему 4, приведенную в конце описания).

[]_D= +25 (с = 1,7; дихлорметан).

LSIMS (положительные ионы): м/e; (тиоглицерин + NaCl) 745 (M + Na)⁺; (тиоглицерин + KF) 761 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,20 (м, 15H, 3 фенил), 5,87-5,78 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,50 (д, 1H, J= 3,5 Гц, H-1"), 5,30-5,17 (м, 2H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,02 (дд, 1H, H-2), 4,43 (д, 1H, J=7,6 Гц, 1-H), 4,34-4,28 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 4,12-4,02 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 3,63, 3,36 (2c, 6H, 2 OCH₃), 2,10 (c, 3H, ацетил).

Анализ для C₄₀H₅₀O₁₂ (722,84):

рассчитано, %: C 66,47 H 6,97

найдено, %: C 66,31 H 7,24

Препаративный пример 14

Аллил-О-(2,6-ди-O-бензил-4 -O-левулинил-3-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -О(2-O-ацетил-6-O-бензил -3-O-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,6-ди-О-бензил -3-О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-2-O-ацетил-6-O-бензил- 3-O-метил--D-глюкопиранозид (15)

Смесь 4,22 г (4,56 ммоль) имидата (13) и 2,63 г (3,64 ммоль) гликозильного акцептора (14) обрабатывают согласно Методике 1. Очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/диэтиловый эфир в соотношении 3:2, затем 1:1), получая 4,31 г (80%) тетрасахарида (15) (см. схему 5, приведенную в конце описания).

[]_D= +52 (c = 0,66; дихлорметан).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,35-7,23 (м, 30H, 6 фенил), 5,83-5,79 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,47 (д, 2H, J=3,5 Гц, Н-1""" и H-1"), 5,25-5,14 (м, 2H, OCH₂(CH:CH₂)), 4,38 (д, 1H, J= 7,7 Гц, H-1"""), 4,30 (д, 1H, J=8 Гц, H-1), 4,32-4,25 (м, 1H, OCH₂(CH: CH₂)), 4,08-4,02 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 3,56, 3,53, 3,34, 3,27 (4c, 12H, 4 OCH₃), 2,78-2,40 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,15, 2,09, 1,85 (3c, 9H, 2 ацетил и O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Анализ для C₈₂H₁₀₀O₂₅ (1485,7):

рассчитано, %: C 66,29 H 6,78

найдено, %: C 66,10 H 6,79

Препаративный пример 15

О-(2,6-ди-O-бензил-4-O -левулинил-3-O-метил--D-

глюкопиранозил)-(1--->4)-О-(2-O-ацетил -6-O-бензил-3-O- метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2,6-ди-О-бензил -3-О- метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-2-O-ацетил-6-O-бензил-3-O- метил-,-D-глюкопираноза (16)

2,30 г (1,54 ммоль) соединения (15) обрабатывают описываемым в препаративном примере 10 образом. Спустя 10 минут к реакционной смеси добавляют раствор 0,30 г (1,70 ммоль) N-бромсукцинимида в 15 мл дихлорметана и 5,50 мл воды. Перемешивают в течение 5 минут (ТСХ), разбавляют дихлорметаном, промывают водным насыщенным раствором гидросульфата натрия, водой, сушат и концентрируют. Остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/этилацетат в соотношении 3: 2), получая 1,57 г (71% в расчете на две стадии) чистого соединения (16) (см. схему 5, приведенную в конце описания).

[]_D= +69 (с = 0,87; дихлорметан).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,38-7,20 (м, 30H, 6 фенил), 5,47 (д, 1H, J=3,5 Гц, H-1""" и H-1"), 5,36 (д, 1H, J= 3,5 Гц, H-1), 4,55 (д, 1H, J=8 Гц, H-1), 4,36 (д, 1H, J=8 Гц, H-1""), 3,56, 3,54, 3,39, 3,36, 3,28 (5c, 9H, 3 OCH₃), 2,75-2,35 (м, 4H, O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃), 2,16, 2,13, 2,12, 1,86 (4c, 9H, 2 ацетил и O(C: O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Препаративный пример 16

О-(2,6-ди-О-бензил-4-О-левулинил -3-О-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-О-(2-O -ацетил-6-O-бензил-3-O-метил--D -глюкопиранозил-(1--->4)-O-(2,6-ди -О-бензил-3-О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-2-O-ацетил-6 -O-бензил-3-O-метил-,-D-глюкопираноза -трихлорацетимидат (17)

В течение 16 часов при комнатной температуре перемешивают смесь 1,5 г (1,04 ммоль) соединения (16), 0,63 мл (6,22 ммоль) трихлорацетонитрила и 0,26 г (1,87 ммоль) карбоната калия в 15 мл дихлорметана. Раствор отфильтровывают и концентрируют. Остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон [в соотношении 4: 1] +1/ триэтиламина), получая 1,47 г (89,6%) соединения (17).

ТСХ: R_F = 0,5 (толуол/ацетон в соотношении 7:2).

Препаративный пример 17

Аллил-O-(2,6-ди-O-бензил -3-О-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(2-O-ацетил-6-O-бензил -3-O-метил--D-глюкопиранозил- (1--->4)-О-(2,6-ди-О-бензил -3-О-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-2-О-ацетил-6-О-бензил -3-О-метил--D-глюкопиранозид (18)

Для удаления левулиновой группы 1,3 г (0,87 ммоль) соединения (15) обрабатывают согласно Методике 2, получая 1,05 г (86%) соединения (18) (см. схему 5, приведенную в конце описания).

[]_D= +40 (с=0,6; дихлорметан).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,36-7,23 (м, 30H, фенил), 5,83-5,78 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,50 (д, 1H, J= 3,5 Гц, H-1"""), 5,47 (д, 1H, J=3,5 Гц, Н-1"), 5,25-5,21 (дд, 1H, J=1,6 гц, J= 17 Гц, OCH₂(CH:CH₂)), 5,16-5,13 (дд, 1H, J=1,4 Гц, J=10 Гц, OCH₂(CH: CH₂)), 4,38 (д, 1H, J=6,5 Гц, H-1""), 4,31 (д, 1H, J=6,5 Гц, H-1), 4,08-4,02 (м, 1H, OCH₂(CH: CH₂)), 3,59 (м, 1H, H-4"""), 3,67, 3,53, 3,39, 3,29 (4c, 12H, 4 OCH₃), 2,09, 1,86 (2c, 6H, 2 ацетил).

Препаративный пример 18

Аллил-O-(2,6-ди-O-бeнзил-4 -O-лeвулинил-3-O-мeтил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -[О-(2-O-ацетил-6-O-бензил-3 -O-метил--D-глюкопиранозил- (1--->4)-О-(2,6-ди-О-бензил -3-О-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)]₃-2-O-ацетил-6-O-бензил- 3-O-метил--D-глюкопиранозид (19)

Смесь 842 мг (0,53 ммоль) соединения (18) и 1,17 г (0,74 ммоль) соединения (17) обрабатывают согласно Методике 1. Очищают на колонке с Toyopearl HW-50 (110 х 3,2 см; дихлорметан/этанол в соотношении 1:1), получая 1,44 г (85 %) соединения (19) (см. схему 5, приведенную в конце описания).

[]_D= +57 (с = 1,01 дихлорметан).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,35-7,20 (м, 60H, 12 фенил), 5,83-5,78 (м, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,24-5,21 (дд, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 5,16-5,13 (дд, 1H, OCH₂(CH:CH₂)), 3,59, 3,56, 3,51, 3,47, 3,33, 3,26 (6c, 24H, 8 OCH₃), 2,75-2,35 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,15, 2,09, 1,85, 1,84 (4c, 15H, 4 ацетил и O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

(м.д.) Основных аномерных протонов: 5,48; 4,37; 4,29; 4,23.

Анализ для C₁₅₆H₁₈₈O₄₇ (2815,51):

рассчитано, %: C 66,56 H 6,73

найдено, %: C 66,22 H 6,75

Препаративный пример 19

О-(2,6-ди-O-бензил-4-O-левулинил -3-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -[О-(2-О-ацетил-6-О-бензил -3-О-метил--D-глюкопиранозил- (1--->4)-О-(2,6-ди-О-бензил -3-О-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)] ₃-2-O-ацетил-6- O-бензил-3-O-метил-,-D-глюкопираноза (20)

720 мг (0,25 ммоль) соединения (19) обрабатывают как описывается в препаративном примере 15. Очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/этилацетат в соотношении 3:2, затем 4:3), получая 555 мг (78%) соединения (20) (см. схему 6, приведенную в конце описания).

[]_D= +70 (с = 0,94 дихлорметан).

ТСХ: R_F = 0,43 (толуол/этилацетат в соотношении 1:1).

Препаративный пример 20

О-(2,6-ди-O-бензил-4-O-левулинил -3-O-метил--D глюкопиранозил)-(1--->4)-[О-(2 -О-ацетил-6-О-бензил-3 -О-метил--D-глюкопиранозил- (1--->4)-O-(2,6-ди-О-бензил -3-О-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)] ₃-2-O-ацетил-6-O-бензил- 3-O-метил-,-D-глюкопираноза -трихлорацетимидат (21)

540 мг (0,195 ммоль) соединения (20) обрабатывают как описывается в препаративном примере 16. Очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/этилацетат [в соотношении 3:2] +1/ триэтиламина), получая 455 мг (80%) смеси ( , = 27/73) имидатов (21) (см. схему 6, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,48 (толуол/этилацетат в соотношении 3 : 2).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

8,60, 8,59 (2c, 1H, N:H и ), 7,35-7,21 (м, 60H, 12 фенил), 2,75-2,40 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,16, 2,06, 2,04, 1,85, 1,84 (5c, 15H, 4 ацетил и O(C:O) CH₂CH₂(C:O)CH₃).

H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.) основных аномерных протонов: 6,50; 5,79; 5,51; 5,48; 4,29; 4,25.

Препаративный пример 21

Фенил-2,4,6-три-O-ацетил-3 -O-метил-1-тио--D- глюкопиранозид (22)

5,23 г (14,4 ммоль) 1,2,4,6-Тетра-О-ацетил-3 -О-метил--D-глюкопиранозы (1) растворяют в 45 мл толуола. Добавляют 3,0 мл (28,8 ммоль) тиофенола и прикапывают 1,77 мл (14,4 ммоль) диэтилэфирата трифторида бора, затем нагревают при температуре 50^oC в течение получаса. Разбавляют дихлорметаном, промывают водным насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, водой, сушат, концентрируют. Очищают на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/этилацетат в соотношении 5:2), получая 1,00 г (17%) соединения (22-) и 2,71 г (46%) соединения (22-).

Соединение 22-:

R_F = 0,44 (циклогексан/этилацетат в соотношении 3:2);

[]_D= +230 (с = 1; дихлорметан);

ESIMS (положительные ионы): м/e (+ NaCl) 435 (M + Na)⁺; (+ KF) 451 (М+К)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,46-7,27 (м, 5H, фенил), 5,89 (д, 1H, J=5,6 Гц, H-1), 5,05-4,97 (м, 2H, H-2 и H-4), 4,49-4,42 (м, 1H, H-5), 4,25-4,18 (м, 1H, H-6), 4,05-4,00 (м, 1H, H-6"), 3,66 (дд, 1H, J=9,5 Гц, H-3), 3,51 (с, 3H, OCH₃), 2,16, 2,12, 2,00 (3c, 9H, 3 ацетил).

Анализ для C₁₉H₂₄O₈S (412,46):

рассчитано, %: C 55,33 H 5,87 S 7,77

найдено, %: C 55,25 H 5,90 S 7,75

Препаративный пример 22

Фенил-4,6-О-бензилиден-2,3-ди -O-метил-1-тио--D- глюкопиранозид (23)

970 мг (2,35 ммоль) соединения (22) растворяют в 18 мл смеси метанола с дихлорметаном в соотношении 2:1. Добавляют 150 мл 2 M раствора метанолята натрия. После выдерживания в течение получаса при комнатной температуре нейтрализуют с помощью Dowex 50 (H⁺), отфильтровывают и концентрируют.

К вышеполученному сырому остатку в 22 мл ацетонитрила добавляют 0,7 мл (4,0 ммоль) (,-диметокситолуола и 51 мг) (0,22 ммоль) камфорсульфокислоты. Перемешивают в течение 1 часа, нейтрализуют путем добавления 0,50 мл триэтиламина и концентрируют.

При температуре 0^oC к раствору вышеполученного сырого соединения и 163 мкл (4,0 ммоль) метилйодида в 9 мл N,N-диметилформамида добавляют 73,0 мг (2,80 ммоль) гидрида натрия. Перемешивают в течение 1 часа и добавляют метанол. Экстрагируют этилацетатом, промывают водой, сушат и концентрируют, получая 840 мг (94%) соединения (23) в твердой форме (см. схему 7, приведенную в конце описания). Т.пл. = 178^oC.

[]_D= +330 (с = 1; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+ NaCl) 411 (M + Na)⁺; (+ KF) 427,4 (М + К)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,50-7,24 (м, 10H, 2 фенил), 5,71 (д, 1H, J=3,4 Гц, H-1), 5,52 (с, 1H, C₆H₅CH), 3,62 (с, 3H, OCH₃), 3,55 (с, 3H, OCH₃).

Анализ для C₂₁H₂₄O₅S (388,48):

рассчитано, %: C 64,92 H 6,23 S 8,25

найдено, %: C 64,87 H 6,17 S 7,85

Препаративный пример 23

Фенил-6-О-бензил-2,3-ди -O-метил-1-тио--D- глюкопиранозид (24)

792 мг (0,47 ммоль) соединения (23) обрабатывают, как описывается в препаративном примере 4. Очищают на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/этилацетат в соотношении 7:2, затем 2:1), получая 318 мг (80%) соединения (24) (см. схему 7, приведенную в конце описания).

[]_D= +243 (с = 1; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+ NaCl) 413 (M + Na)⁺; (+ KF) 429 (М + К)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,52-7,22 (м, 10H, 2 фенил), 5,71 (д, 1H, J=5,3 Гц, H-1), 3,64 и 3,49 (2c, 6H, 2 OCH₃), 3,36 (дд, 1H, H-3).

Анализ для C₂₁H₂₆O₅S (390,50):

рассчитано, %: C 64,59 H 6,71 S 8,21

найдено, %: C 64,05 H 6,88 S 7,74

Препаративный пример 24

Фенил-О-(2,6-ди-O-бензил-4-O -левулинил-3-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-О-(2 -O-ацетил-6-O-бензил-3 -O-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-6-О-бензил-2,3-ди -O- метил-1-тио--D -глюкопиранозид (25)

Смесь из 436 мг (0,47 ммоль) соединения (13) и 153 мг (0,39 ммоль) соединения (24) обрабатывают согласно Методике 1. Очищают на колонке c Sephadex LH 20 (этанол/дихлорметан в соотношении 1:1), получая 309 мг (68%) чистого соединения (25).

[]_D= +144 (c = 1; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+ NaCl) 1175 (M + Na)⁺; (+ KF) 1191 (M + K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,51-7,21 (м, 25H, 5 фенил), 5,73 (д, 1H, J=5,2 Гц, H-1), 5,48 (д, J=3,5 Гц, H-1"", 4,46 (д, 1H, J=8 Гц, H-1"), 3,7, 3,54, 3,5, 3,31 (4c, 12H, 4 OCH₃), 2,70-2,41 (м, 4H, O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 2,16, 2,01 (2c, 6H, 1 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃).

Анализ для C₆₃H₇₆O₁₈S:

рассчитано, %: C 65,61 H 6,64 S 2,78

найдено, %: C 65,02 H 6,60 S 2,72

Препаративный пример 25

Метил-O-(2,6-ди-O-бензил-4-O -левулинил-3-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -О-(2-O-ацетил-6-O-бензил-3 -O-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(6-О-бензил-2,3-ди -О-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(бензил-2,3-ди -О-метил--D-глюкопиранозилуронат)- (1--->4)-О-(3,6-ди-О-ацетил-2-О- бензил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(бензил-2,3-ди-О- метил--L-идопиранозилуронат)- (1--->4)-2,3,6-три-О- бензил--D-глюкопиранозид (27)

При температуре -25^oC и в атмосфере аргона раствор 92 мг (0,38 ммоль) N-йодсукцинимида и 37,5 мкл (0,38 ммоль) трифторметансульфокислоты в 22 мл смеси 1,2-дихлорэтана с ди- этиловым эфиром в соотношении 1:1 добавляют к смеси из 451 мг (0,39 ммоль) соединения (25) и 434 мг (0,31 ммоль) соединения (26) [P. Westerduin и др., BioOrg, Med. Chem, 2, 1267 (1994)] в 7,5 мл 1,2-дихлорэтана в присутствии 400 мг молекулярного сита Спустя 30 минут добавляют твердый гидрокарбонат натрия. Раствор отфильтровывают, промывают раствором тиосульфата натрия, водой, сушат и выпаривают. Очищают на колонке с Sephadex LH-20 (дихлорметан/этанол в соотношении 1:1), затем на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/этилацетат в соотношении 1:1, затем 2:3), получая 487 мг (64%) чистого соединения (27) (см. схему 7, приведенную в конце описания).

[]_D= +63 (с = 0,54; дихлорметан).

ТСХ: R_F = 0,28 (циклогексан/этилацетат в соотношении 2:1).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+ NaCl) 2454 (M+Na)⁺; (+ KF) 2469 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,38-7,2 (м, 50H, 10 фенил), 3,56, 3,52, 3,48, 3,46, 3,44, 3,42, 3,39, 3,30, 3,17, (9c, 27H, 9 OCH₃), 2,75-2,4 (м, 4H, O(С:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,15, 1,98, 1,97, 1,87 (4c, 12H, 3 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃).

Основные аномерные протоны: 5,57; 5,47; 5,30; 5,18; 4,57; 4,29; 4,08.

Препаративный пример 26

Метил-О-(2,6-ди-О-бензил-3 -О-метил--D-глюкопиранозил) - (1--->4)-О-(2-O-ацетил-6-O-бензил-3 -O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-О-(6-О-бензил-2,3 -ди-О-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -О-(бензил-2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозилуронат)-(1--->4) -О-(3,6-ди-О-ацетил-2-О-бензил--D-глюкопиранозил)-(1--->4) -О-(бензил-2,3-ди-О-метил--L-идопиранозилуронат)-(1--->4) -2,3,6-три-О-бензил--D- глюкопиранозид (28)

Для удаления левулиновой группы 498 мг (0,2 ммоль) соединения (27) обрабатывают согласно Методике 2, получая 402 мг (84%) соединения (28) (см. схему 7, приведенную в конце описания).

[]_D= +64 (с = 1; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/е 2352,9 (M+NH₄)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,38-7,20 (м, 50H, 10 фенил), 3,67, 3,52, 3,49, 3,46, 3,44, 3,41, 3,40, 3,28, 3,17 (9c, 27H, 9 ацетил), 2,65 (д, 1H, J=2,14 Гц, OH), 1,98, 1,96, 1,87 (3c, 9H, 3 ацетил).

Основные аномерные протоны: 5,55; 5,49; 5,30; 5,18; 4,56; 4,31; 4,08.

Анализ для C₁₂₇H₁₅₂O₄₁ (2334,48):

рассчитано, %: C 65,34 H 6,56

найдено, %: C 65,40 H 6,62

Препаративный пример 27

Метил-О-(2,6-ди-О-бензил-4-О -левулинил-3-О-метил--D- (глюкопиранозил)-(1--->4)-О-(2-O -ацетил-6-O-бензил-3-O-метил--D -глюкопиранозил)-(1--->4)-[О-(2,6 -ди-О-бензил-3-О-метил--D -глюкопиранозил)-(1--->4)-О-(2-O-ацетил-6-O-бензил-3 -O-метил--D-глюкопиранозил-(1--->4)] ₄-O-(6-О-бензил -2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4) -О-(бензил-2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозилуронат)-(1--->4)-О-(3,6-ди -О-ацетил-2-О-бензил-- D-глюкопиранозил)-(1--->4)-О-(бензил -2,3-ди-О-метил--L-идопиранозилуронат) -(1--->4)-2,3,6-три -О-бензил--D-глюкопиранозид (29)

Смесь из 340 мг (1,16 ммоль) соединения (21) и 256 мг (1,09 ммоль) соединения (28) обрабатывают согласно Методике 1. Остаток очищают на колонке c Toyopearl HW-40 (3,2 х 70 см; дихлорметан/этанол в соотношении 1:1), получая 421 мг (76%) чистого 15-мера (29) (см. схему 8, приведенную в конце описания).

[]_D= +65 (c = 1; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+KF) 2584,3 (М+2K)²⁺; 1736,5 (М+3K)³⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,35-7,18 (м, 105H, 21 фенил), 2,75-2,4 (м, 4H, O(С:O)CH₂CH₂(C+O)CH₃), 2,15, 1,97, 1,95, 1,87, 1,84, 1,83 (6c, 24H, 7 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(C: O)CH₃).

Основные аномерные протоны: 5,55; 5,48, 5,30, 5,18, 4,56, 4,29; 4,22, 4,08.

Препаративный пример 28

Метил-О-(2,6-ди-О-бензил -3-О-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(2-O-ацетил-6-O-бензил -3-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-[O-(2,6-ди -О-бензил-3-О-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-О-(2-О-ацетил -6-О-бензил-3-О-метил--D -глюкопиранозил-(1--->4)] ₄-O-(6-О-бензил -2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(бензил-2,3-ди -О-метил--D- глюкопиранозилуронат)-(1--->4)-O-(3,6-ди -О-ацетил-2-О-бензил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(бензил-2,3-ди -О-метил--L-идопиранозилуронат) -(1--->4)-2,3,6-три-О-бензил--D -глюкопиранозид (30)

342 мг (0,067 ммоль) соединения (29) обрабатывают согласно Методике 2, получая 253 мг (75%) соединения (30) (см. схему 8, приведенную в конце описания).

[]_D= +59 (с = 0,92; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+KF) 2535,6 (М+2K)²⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.) основных аномерных протонов: 5,55; 5,50; 5,48; 5,30; 4,56; 4,30; 4,22; 4,08.

Анализ для C₂₇₅H₃₂₈O₈₅ (4993,37):

рассчитано, %: C 65,57 Н 6,60

найдено, %: C 65,09 H 6,57

Препаративный пример 29

Метил-O-(2,6-ди-O-бензил-4-O-левулинил -3-О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(2-O-ацетил-6 -O-бензил-3-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -[О-(2,6-ди-О-бензил -3-О-метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4) -О-(2-О-ацетил-6-О-бензил-3 -О-метил--D-глюкопиранозил- (1--->4)]₆-O-(6-О- бензил-2,3 -ди-О-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О- (бензил-2,3-ди -О-метил--D-глюкопиранозилуронат)- (1--->4)-О-(3,6-ди-O-ацетил-2-O -бензил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-О-(бензил-2,3-ди-О -метил--L-идопиранозилуронат) -(1--->4)-2,3,6-три -О-бензил--D-глюкопиранозид (31)

Смесь из 32,7 мг (20,6 ммоль) соединения (17) и 80,7 мг (16,3 ммоль) соединения (30) обрабатывают согласно Методике 1. Очищают на колонке c Toyopearl HW-40 (дихлорметан/этанол в соотношении 1:1), получая 60 мг (59%) 19-мера (31) (см. схему 8, приведенную в конце описания).

[]_D= +61 (с = 0,82; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+NaCl) 2162,4 (M+3Na)⁺; (+KF) 2178,5 (М+3K)⁺.

⁺H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.) основных аномерных протонов: 5,55; 5,48; 5,30; 5,17; 4,56; 4,28; 4,22; 4,08.

Препаративный пример 30

Этил-О-(4,6-О-бензилиден--D -глюкопиранозил)-(1--->4) -6-O-тритил-1-тио--D- глюкопиранозид (33)

К суспензии 50,0 г (0,105 моль) соединения (32) [J.Westman и M. Nilsson, J. Carbohydr. Chem., 14(7), 949-960 (1995)] в 620 мл дихлорметана в атмосфере аргона добавляют 35 мл (0,252 моль) триэтиламина, 29,3 г (О, 105 моль) тритилхлорида и 1,28 г (10 ммоль) 4-диметиламинопиридина. Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником в течение двух часов (ТСХ), оставляют ее охлаждаться до комнатной температуры, разбавляют с помощью 500 мл дихлорметана, затем промывают ее последовательно холодным водным 10%-ным раствором гидросульфата калия, водой и насыщенным раствором хлорида натрия. Сушат, концентрируют и фильтруют через колонку с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 65:35, затем 50:50), получая сырой продукт (33) достаточной степени чистоты для использования в следующей стадии (см. схему 9, приведенную в конце описания). Образец для анализа хроматографируют.

[]_D= +53 (с = 0,74; дихлорметан).

ESIMS (отрицательные ионы): м/e 715 (M-H)^-.

¹H-ЯМР (CD₂Cl₂); (м.д.):

7,52-7,25 (м, 20H, 4 фенил), 5,42 (с, C₆H₅CH), 4,97 (д, J=3,5 Гц, H-1"), 4,40 (д, J=9,6 Гц, H-1), 3,82 (т, J=9,3 Гц, H-3"), 3,70, 3,68 (м, 2H, H-3, H-4), 3,60 (дд, J2,0, 11,0 Гц, H-6a), 3,55 (дт, J=5,2 9,7 9,7 Гц, H-5"), 3,49-3,45 (м, 3H, H-2, H-2", H-5), 3,38 (дд, J=10,5 Гц, H-6"a), 3,33 (дд, H-6"b), 3,30-3,27 (м, 2H, H-4", H-6b), 2,90-2,77 (м, 2H, SCH₂CH₃), 1,40-1,37 (т, 3H, CH₂CH₃).

Анализ для C₄₀H₄₄O₁₀S:

рассчитано, %: C 67,02 H 6,19 S 4,47

найдено, %: C 66,83 H 6,19 S 4,19

Препаративный пример 31

Этил-O-(4,6-O-бензилиден-2,3-ди -О-метил--D- глюкопиранозил) (1--->4)-2,3-ди-O-метил-6 -O-тритил-1-тио--D -глюкопиранозид) (34)

В атмосфере аргона 34 мл (0,536 моль) метилйодида прикапывают к раствору 64,1 г соединения (33) в 600 мл N,N-диметилформамида. Охлаждают до температуры 0^oC и медленно добавляют 13,5 г (0,536 моль) гидрида натрия. Суспензию перемешивают в течение двух часов при комнатной температуре, затем охлаждают до температуры 0^oC, прикапывают 35 мл метанола и после перемешивания в течение двух часов смесь выливают в 500 мл этилацетата и 600 мл воды. Водную фазу экстрагируют этилацетатом, органические фазы промывают водой, сушат и концентрируют. Остаток (34) имеет достаточную степень чистоты для использования в следующей стадии (см. схему 9, приведенную в конце описания). Образец для анализа очищают на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/ацетон в соотношении 70:30).

[]_D= +45 (c = 0,83; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/е (+NaCl) 795 (M+Na)⁺; (+KF) 811 (M + K)⁺;

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,52-7,19 (м, 20H, 4 фенил), 5,51 (д, J=3,3 Гц, H-1"), 5,43 (с, C₆H₅CH), 4,45 (д, J=9,8 Гц, H-1), 3,60, 3,59, 3,51, 3,49 (4c, 12H, 40CH₃), 2,86 (к, 2H, J=7,5 Гц, SCH₂CH₃), 1,40 (т, 3H, SCH₂CH₃).

Анализ для C₄₄H₅₂O₁₀S:

рассчитано, %: C 68,37 H 6,78 S 4,15

найдено, %: C 68,28 H 6,98 S 4,09

Препаративный пример 32

Этил-O-(2,3-ди-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -2,3-ди- О-метил-1-тио--D -глюкопиранозид (35)

Суспензию 67,4 г сырого продукта (34) в 470 мл водного 60%-ного раствора уксусной кислоты нагревают при температуре 80^oC в течение двух часов. Охлаждают, отфильтровывают и реакционную смесь концентрируют. Остаток обрабатывают с помощью 940 мг метанолята натрия в 200 мл метанола в течение 1 часа. Затем раствор нейтрализуют с помощью смолы Dowex 50 WX 4 (H⁺), отфильтровывают, концентрируют и остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 60:40), получая 27,9 г (60% в расчете на три стадии) соединения (35) (см. схему 9, приведенную в конце описания).

[]_D= +26 (с = 1,07; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+NaCl) 465 (M+Na)⁺; (+KF) 481 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

5,62 (д, J=3,9 Гц, H-1), 4,35 (д, J=9,8 Гц, H-1), 3,64, 3,64, 3,59, 3,58 (4c, 12H, 4OCH₃), 1,29 (т, 3H, J=7,4 Гц SCH₂CH₃).

Анализ для C₁₈H₃₄O₁₀S:

рассчитано, %: C 46,94 H 7,87 S 6,96

найдено, %: C 47,19 H 7,72 S 6,70

Препаративный пример 33

Этил-O-(6-О-ацетил-2,3-ди -О-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-6-О-ацетил-2,3-ди -О-метил-1-тио--D-глюкопиранозид (36)

Раствор 5,86 г (13,2 ммоль) триола (35) и 3,21 г (29,1 ммоль) N-ацетилимидазола в 120 мл 1,2-дихлорэтана кипятят с обратным холодильником в течение 16 часов. Добавляют еще порцию 440 мг (3,96 ммоль) N-ацетилимидазола и перемешивают в течение четырех часов. Оставляют стоять для доведения температуры до комнатной, затем добавляют 2 мл метанола. Снова перемешивают в течение 1 часа, после чего смесь разбавляют с помощью 1 л дихлорметана и промывают последовательно холодным водным 1 М раствором соляной кислоты, холодной водой, водным насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, водой, сушат и концентрируют. Остаток хроматографируют (толуол/ацетон в соотношении 3,5:1), получая 3,97 г (57%) диацетата (36) (см. схему 9, приведенную в конце описания).

[]_D= +33 (с = 1,90; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+NaCl) 549 (M+Na)⁺; (+KF) 565 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

5,51 (д, J= 3,9 Гц, H-1"), 4,34 (д, J=9,8 Гц, H-1), 3,64, 3,63, 3,59, 3,56 (4c, 12H, 40CH₃), 2,11, 2,06 (2c, 6H, 2 ацетил), 1,31 (т, 3H, J=7,4 Гц, SCH₂CH₃).

Анализ для C₂₂H₃₈O₁₂:

рассчитано, %: C 50,17 H 7,27 S 6,09

найдено, %: C 50,15 H 7,49 S 5,89

Препаративный пример 34

Этил-O-(6-O-ацетил-4-O-левулинил -2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-6-О-ацетил -2,3-ди-O-метил-1-тио--D- глюкопиранозид (37)

В атмосфере аргона, к раствору 19,4 г (36,8 ммоль) диацетата (36) в 400 мл диоксана добавляют 7,53 мл (73,5 ммоль) левулиновой кислоты, 14,1 г (73,5 ммоль) 1-(3-диметиламинопропил) -3-этилкарбодиимидгидрохлорида и 900 мг (7,35 ммоль) 4-диметиламинопиридина. Смесь перемешивают в течение 3,5 часов, разбавляют с помощью 1,5 л дихлорметана, затем промывают последовательно водой, водным 10%-ным раствором гидросульфата калия, водой, водным 2%-ным раствором гидрокарбоната натрия, водой, затем сушат и концентрируют. Остаток хроматографируют (дихлорметан/ацетон в соотношении 97:3, потом 79:21), получая 21,8 г (95%) производного (37).

[]_D= +40 (с = 0,72; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+NaCl) 647 (M+Na)⁺; (+KF) 663 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР(дейтерохлороформ); (м.д.):

5,56 (д, J=3,9 Гц, H-1), 4,35 (д, J=9,8 Гц, H-1), 3,64, 3,60, 3,58, 3,55 (4c, 12H, 4OCH₃), 2,76-2,71 (м, 4H, O(С:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,19, 2,08, 2,07 (3c, 9H, 2 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 1,31 (т, 3H, J=7,4 Гц, SCH₂CH₃).

Анализ для C₂₇H₄₄O₁₄S:

рассчитано, %: C 51,91 H 7,10 S 5,13

найдено, %: C 51,88 H 7,05 S 4,96

Препаративный пример 35

О-(6-O-Ацетил-4-O-левулинил- 2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-6-О-ацетил -2,3-ди-O-метил-,- D-глюкопираноза-трихлорацетимидат (38)

К раствору 9,53 г (15,3 ммоль) тиогликозида (37) в 180 мл смеси дихлорметана с диэтиловым эфиром в соотношении 1:1 добавляют 1,4 мл (76,3 ммоль) воды, 6,84 г (30,5 ммоль) N-йодсукцинимида и 0,51 г (1,98 ммоль) трифлата серебра. Спустя 15 минут (ТСХ) добавляют 5 мл водного насыщенного раствора гидрокарбоната натрия и реакционную смесь разбавляют с помощью 1,5 л дихлорметана, промывают ее водой, водным 1 М раствором тиосульфата натрия, водным 2%-ным раствором гидрокарбоната натрия. Сушат, концентрируют и остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (этилацетат/циклогексан в соотношении 80: 40, затем 100:0), получая твердое вещество, которое используют без охарактеризовывания в следующей стадии.

Раствор 7,88 г (13,6 ммоль) вышеполученного соединения в 120 мл дихлорметана в атмосфере аргона обрабатывают с помощью 7,08 г (21,7 ммоль) карбоната цезия и 6,81 мл (67,9 ммоль) трихлорацетонитрила. Спустя 40 минут (ТСХ) смесь отфильтровывают, концентрируют ее и очищают (толуол/ацетон в соотношении 85:15), получая 9,16 г (83% в расчете на две стадии) имидата (38) (см. схему 10, приведенную в конце описания).

[]_D= +118 (c = 1,00; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+NaCl) 746 (M+Na)⁺; 741 (М+NH₄)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

8,66, 8,65 (2c, 1H, и N:H), 6,52 (д, J=3,6 Гц, H-1), 5,70 (д, J=7,5 Гц, H-1), 5,58 (д, J= 3,7 Гц, H-1), 2,78- 2,57 (м, 4H, O(С:O)CH₂CH₂(C: O)CH₃), 2,18, 2,07, 2,06 (3c, 9H, 2 ацетил и O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Анализ для C₂₇H₄₀Cl₃NO₁₅ 0,5 H₂O:

рассчитано, %: C 44,18 H 5,63 N 1,98

найдено, %: C 44,14 H 5,61 N 1,97

Препаративный пример 36

2-(Триметилсилил)этил-O-(6-O-ацетил-4-O-левулинил-2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-6-О-ацетил-2,3-ди -О-метил-,-D-глюкопиранозид (39)

10,6 г (16,94 ммоль) тиогликозида (37) обрабатывают согласно Методике 3 с помощью 4,8 мл (33,90 ммоль) 2- (триметилсилил)этанола в 105 мл смеси дихлорметана с диэтиловым эфиром в соотношении 1:2. Полученный остаток очищают путем хроматографирования (ацетон/дихлорметан в соотношении 1:1), получая 9,80 г (85%) соединения (39) в виде смеси аномеров (/= 65:35) (см. схему 10, приведенную в конце описания).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+NaCl) 703 (M+Na)⁺.

¹H-ЯМР(дейтерохлороформ); (м.д.):

5,58 (д, J=3,9 Гц, H-1"), 4,94 (д, J=3,5 Гц, H-1), 4,26 (д, J=7,7 Гц, H-), 2,76-2,56 (м, 4H, O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 2,17, 2,08, 2,05 (3c, 9H, 2 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 1,18-0,88 (м, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,02 (с, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₃₀H₅₂O₁₅Si:

рассчитано, %: C 52,92 H 7,69

найдено, %: C 53,29 H 7,75

Препаративный пример 37

2-(Триметилсилил)этил-О-(6-О-ацетил -2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-6-О-ацетил -2,3-ди-О-метил-,-D- глюкопиранозид (40)

9,41 г (13,82 ммоль) соединения (39) обрабатывают согласно Методике 2 с помощью гидразинацетата (10 моль/моль) в смеси толуола с этанолом в соотношении 1:2 (21 мл/ммоль). Остаток хроматографируют (ацетон/толуол в соотношении 60: 40), получая 4,81 г (60%) соединения (40), так же, как 3,06 г (37%) смеси (40/) (см. схему 10, приведенную в конце описания).

Соединение (40):

[]_D= +132 (с = 0,61; дихлорметан);

ESIMS (положительные ионы): м/е (+NaCl) 605 (M+Na)⁺; (+KF) 621 (М+К)⁺;

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

5,55 (д, J=3,8 Гц, H-1"), 4,95 (д, J=3,6 Гц, H-1), 2,10, 2,08 (2с, 6H, 2 ацетил), 1,16-0,89 (м, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,02 (c, 9H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₂₅H₄₆O₁₃Si:

рассчитано, %: C 51,53 H 7,96

найдено, %: C 51,37 H 8,06

Препаративный пример 38

2-(Триметилсилил)этил-О-(6-O-ацетил -4-O-левулинил-2,3- ди-О-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)[О-(6-О- ацетил-2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозил- (1--->4)]₂-6-O-ацетил-2,3-ди-О- метил--D-глюкопиранозид (41)

4,21 г (6,74 ммоль) тиогликозида (37) и 3,57 г (6,13 ммоль) гликозильного акцептора (40) в 105 мл смеси дихлорметана с диэтиловым эфиром в соотношении 1: 2 обрабатывают согласно Методике 3. Остаток очищают путем хроматографирования на диоксиде кремния (ацетон/циклогексан в соотношении 3:1, затем 9:1), получая 4,81 г (69%) соединения (41) (см. схему 11, приведенную в конце описания).

[]_D= +143 (с = 0,56; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/е (+NaCl) 1167 (M+Na)⁺; (+KF) 1183 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР(дейтерохлороформ); (м.д.):

5,57 (д, J=3,9 Гц, Н-1"""), 5,54, 5,41 (2д, J=3,8 Гц, H-1"", Н-1"), 4,96 (д, J= 3,6 Гц, H-1), 2,78-2,58 (м, 4H, O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 2,18 2,12, 2,12, 2,09, 2,06 (5c, 15H, 4 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 1,21-0,97 (м, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₅₀H₈₄O₂₇Si:

рассчитано, %: C 52,44 H 7,39

найдено, %: C 52,29 H 7,46

Препаративный пример 39

Этил-O-(6-O-ацетил-4-O-левулинил -2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)[O-(6-O-ацетил -2,3-ди-O-метил--D- глюкопиранозил-(1--->4)]₂-6-O-ацетил -2,3-ди-O- метил-1-тио--D-глюкопиранозид (42)

Раствор 1,10 г (1,52 ммоль) имидата (38) и 806 мг (1,38 ммоль) гликозильного акцептора в 22 мл смеси дихлорметана с диэтиловым эфиром в соотношении 1: 2 обрабатывают согласно Методике 1. Очищают путем хроматографирования на диоксиде кремния (этилацетат/циклогексан в соотношении 2,5:1, затем 3:1), получая 1,12 г (71%) соединения (42) (см. схему 12, приведенную в конце описания).

[]_D= +95 (с = 1,00; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+NaCl) 1111 (M+Na)⁺; (+KF) 1127 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

5,55 (д, J=3,9 Гц, Н-1"""), 5,39, 5,37 (2д, J=3,8 и 3,9 Гц, H-1"", H-1"), 4,34 (д, J= 9,7 Гц, H-1), 2,84-2,51 (м, 6H, SCH₂CH₃, O(С:O)CH₂CH₂(С: O)CH₃), 2,17, 2,10, 2,09, 2,08, 2,04 (5c, 15H, 4 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(С: O)CH₃), 1,30 (т, 3H, J=7,4 Гц, SCH₂CH₃).

Анализ для C₄₇H₇₆O₂₆S:

рассчитано, %: C 51,83 H 7,03 S 2,94

найдено, %: C 51,66 H 7,02 S 2,94

Препаративный пример 40

2- Триметилсилил)этил-[О-(6-О-ацетил -2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)]₃-6-O-ацетил-2,3-ди-O- метил--D-глюкопиранозид (43)

4,71 г (4,11 ммоль) соединения (41) вводят во взаимодействие, как указано в препаративном примере 37, получая после колоночной хроматографии (циклогексан/ацетон в соотношении 3:2), 4,11 г (95%) производного (43) (см. схему 13, приведенную в конце описания).

[]_D= +154 (с = 0,63; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+NaCl) 1069 (M+Na)⁺; (+KF) 1085 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

5,46, 5,46, 5,41 (2д, 3H, J=3,9 Гц, H-1", H-1"", H-1"""), 4,95 (д, J=3,5 Гц, H-1), 2,81 (д, J= 4,4 Гц, OH), 2,11, 2,09, 2,08 (3c, 12H, 4 ацетил), 1,19-0,97 (м, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,03 (с, 9H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₄₅H₇₈O₂₅Si:

рассчитано, %: C 51,61 H 7,51

найдено, %: C 51,39 7 H,54

Препаративный пример 41

2-(Триметилсилил)этил-О-(6-O-ацетил-4 -O-левулинил-2,3-ди- О-метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4) -[О-(6-О-ацетил-2,3-ди- О-метил--D-глюкопиранозил-(1--->4)]₆ -6-О-ацетил-2,3-ди- О-метил--D-глюкопиранозид (44)

3,86 г (3,54 ммоль) тиогликозида (42) и 3,60 г (3,44 ммоль) гликозильного акцептора (43) обрабатывают согласно препаративному примеру 38. Подвергают хроматографированию (дихлорметан/ацетон в соотношении 7:2, затем 2:1), получая 5,71 г (80%) соединения (44) (см. схему 13, приведенную в конце описания).

[]_D= +161 (с = 0,65; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 2072,8; химическая масса = 2074,2; экспериментальная масса = 2074 1 отн.масс. ед. (относительных массовых единиц).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

5,54 (д, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR), 5,47-5,40 (м, 6H, H-1), 4,95 (д, J= 3,7 Гц, H-1, остаток R), 2,84-2,51 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,17, 2,13, 2,12, 2,11, 2,11, 2,08, 2,05 (7c, 27H, 8 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(С: O)CH₃), 1,18-0,97 (м, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)), 0,03 (с, 9H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₉₀H₁₄₈O₅₁Si:

рассчитано, %: C 52,12 H 7,19

найдено, %: C 51,98 H 7,25

Препаративный пример 42

2-(Триметилсилил)этил-[О-(6-О-ацетил- 2,3-ди-О-метил--D -глюкопиранозил)-(1--->4)]₇-6-О-ацетил -2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозид (45)

При температуре 0^oC 7,3 мл 1 M раствора гидразингидрата в смеси ледяной уксусной кислоты с пиридином в соотношении 3:2 добавляют к раствору 3,00 г (1,45 ммоль) соединения (44) в 5 мл пиридина. После перемешивания в течение 20 минут реакционную смесь выпаривают, разбавляют с помощью 400 мл дихлорметана, промывают водным 10%-ным раствором гидросульфата калия, водой, водным 2%-ным раствором гидрокарбоната натрия и водой. Сушат, концентрируют и остаток хроматографируют, получая 2,43 г (85%) соединения (45) (см. схему 13, приведенную в конце описания).

[]_D= +167 (с = 0,57; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 1974,8; химическая масса = 1976,1; экспериментальная масса = 1975 2 отн.масс.ед.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

5,47-5,40 (м, 7H, H-1), 4,95 (д, J=3,7 Гц, H-1 остаток R), 2,80 (д, J= 4,4 Гц, OH), 2,13, 2,11, 2,10, 2,08, 2,07 (5c, 24H, 8 ацетил), 1,18-0,97 (м, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,03 (c, 9H OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₈₅H₁₄₂O₄₉Si:

рассчитано, %: C 51,66 H 7,24

найдено, %: C 51,32 H 7,26

Препаративный пример 43

2-(Триметилсилил)этил-О-(6-O-ацетил -4-O-левулинил-2,3-ди- О-метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4)-[О-(6-О-ацетил-2,3-ди-О-метил--D-глюкопиранозил-(1--->4)]₁₀ -6-О-ацетил-2,3- ди-О-метил--D-глюкопиранозид (46)

1,35 г (1,24 ммоль) соединения (42) и 2,38 г (1,20 ммоль) соединения (45) обрабатывают согласно препаративному примеру 38. Остаток подвергают хроматографированию (циклогексан/ацетон в соотношении 4:3), получая 2,56 г (71%) соединения (46) (см. схему 13, приведенную в конце описания).

[]_D= +166 (c = 0,88; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 3001,3; химическая масса = 3003,2; экспериментальная масса = 3004 + 1 отн.масс.ед.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

5,54 (д, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR), 5,47-5,40 (м, 10H, H-1), 4,95 (д, J= 3,7 Гц, H-1 остаток R), 2,81-2,51 (м, 4H, O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 2,17, 2,13, 2,12, 2,11, 2,11, 2,08, 2,05 (7c, 39H, 12 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 1,17-0,96 (м, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,03 (с, 9H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₁₃₀H₂₁₂O₇₅Si:

рассчитано, %: C 51,99 H 7,12

найдено, %: C 51,63 H 7,12

Препаративный пример 44

(6-O-Ацетил-4-O-левулинил -2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(6-О-ацетил-2,3-ди -О-метил--D-глюкопиранозил- (1--->4)]₁₀-6-O-ацетил-2,3-ди -О-метил-,-D- глюкопиранозатрихлорацетимидат (47)

(а) В течение 1,5 часа (ТСХ) перемешивают раствор 400 мг (0,133 ммоль) гликозида (46) в 2 мл смеси трифторуксусной кислоты с дихлорметаном в соотношении 2:1. Разбавляют с помощью 12 мл смеси толуола с н-пропилацетатом в соотношении 2: 1, концентрируют и выпаривают совместно с толуолом (5 раз по 10 мл). Остаток очищают (ацетон/циклогексан в соотношении 4:3), получая 364 мг твердого вещества.

(б) Вышеполученное твердое вещество растворяют в 2,5 мл дихлорметана, добавляют 65 мг (0,200 ммоль) карбоната цезия и 63 мл (0,620 ммоль) трихлорацетонитрила. Смесь перемешивают в течение 2,5 часов, затем отфильтровывают (целит), концентрируют и остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/ацетон/триэтиламин в соотношении 50:50:0,1), получая 348 мг (86%) имидата (47) (см. схему 13, приведенную в конце описания).

[]_D= +185 (с = 0,91; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 3044,1; химическая масса = 3047,3; экспериментальная масса = 3046,9 0,2 отн.масс.ед.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

8,61, 8,58 (2c, 1H, и N:Н), 6,35 (д, J=3,7 Гц, Н-1 остаток R), 5,59 (д, J= 7,5 Гц, Н-1 остаток R), 5,38 (д, J=3,8 Гц, H-1 достаток NR), 5,32-5,25 (м, 10H, H-1), 2,64-2,40 (м, 4H, O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 2,02, 1,96, 1,95, 1,94, 1,93, 1,89 (6c, 39H, 12 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃).

Анализ для C₁₂₇H₂₀₀Cl₃NO₂₅:

рассчитано, %: C 50,06 H 6,61 N 0,46

найдено, %: C 49,93 H 6,52 N 0,42

Препаративный пример 45

(6-O-Ацетил-4-O-левулинил-2,3 -ди-О-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-[O-(6-О-ацетил -2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозил-(1--->4)]₂-6-O -ацетил-2,3-ди-O-метил-,-D- глюкопиранозатрихлорацетимидат (48)

200 мг (0,174 ммоль) соединения (41) обрабатывают согласно препаративному примеру 44. Реакционную смесь очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 3:2), получая 230 мг (77%) имидата (48) (см. схему 14, приведенную в конце описания).

ESIMS (положительные ионы): м/e (+NaCl) 1210 (M+Na)⁺; (+KF) 1226 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

8,66-8,64 (2c, 1H, и N:H), 6,51 (д, J=3,6 Гц, H-1), 5,71 (д, J=7,5 Гц, H-1), 2,90-2,52 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃), 2,17, 2,11, 2,11, 2,09, 2,05 (5c, 4 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃).

Препаративный пример 46

Метил-О-(6-O-ацетил-4-O-левулинил-2,3 -ди-O-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(6-О-ацетил-2,3- ди-O-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)]₃-O-(бензил-2,3-ди -О-метил--D-глюкопиранозилуронат) -(1--->4)-O-(3,6-ди-O-ацетил -2-O-бензил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(бензил-2,3-ди -О-метил--L-идопиранозилуронат)-(1--->4) -2,3,6-три-O-бензил--D -глюкопиранозид (49)

73 мг (0,061 ммоль) имидата (48) и 82 мг (0,059 ммоль) гликозильного акцептора (26) обрабатывают согласно препаративному примеру 39. Соединение очищают при использовании хроматографической колонки с Sephadex LH-20 (дихлорметан/этанол в соотношении 1:1), затем на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 3: 1), получая 98 мг (69%) производного (49) (см. схему 14, приведенную в конце описания).

[]_D= +95 (с = 1,01; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 2414,97; химическая масса = 2416,54; экспериментальная масса = 2416,2.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,43-7,20 (м, 30H, 6 фенил), 5,55 (д, J=3,9 Гц, Н-1 остаток NR), 5,50 (д, J=3,9 Гц, H-1 остаток NR-3), 5,44, 5,38 (2д, J=3,7 и 3,9 Гц, H-1 остаток NR-1, остаток NR-2), 5,29 (д, J=6,8 Гц, H-1 остаток R-1), 5,17 (д, J=3,5 Гц, H-1 остаток R-2), 4,56 (д, J=3,7 Гц, H-1 остаток R), 4,10 (д, J=7,9 Гц, H-1 остаток R-3), 2,81-2,50 (м, 4H, O(С:O) CH₂CH₂(С:O)CH₃), 2,17, 2,15, 2,11, 2,09, 2,05, 2,00 (7c, 21H, 6 ацетил и O(С:O)CH₂CH₂(С:O)CH₃).

Анализ для C₁₂₀H₁₅₈O₅₁:

рассчитано, %: C 59,63 H 6,59

найдено, %: C 59,23 H 6,58

Препаративный пример 47

Метил-[О-(6-О-ацетил-2,3-ди -О-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)]₄-O-(бензил-2,3-ди -О-метил--D-глюкопиранозилуронат) -(1--->4)-О-(3,6-ди-O-ацетил -2-O-бензил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-О-(бензил-2,3-ди-О- метил--L-идопиранозилуронат)- (1--->4)-2,3,6-три-О -бензил--D-глюкопиранозид (50)

120 мг (0,050 ммоль) октасахарида (49) вводят во взаимодействие, как описано в препаративном примере 37. Остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 3:1), получая 95 мг (83%) соединения (50) (см. схему 14, приведенную в конце описания).

[]_D= +80 (с = 0,62; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 2316,9; химическая масса = 2318,4; экспериментальная масса = 2318,2 0,4 отн.масс.ед.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,42-7,12 (м, 30H, 6 фенил), 5,50, 5,46, 5,43, 5,40 (4д, J=3,9, 3,9, 3,7, 3,7 Гц, H-1 остаток NR, остаток NR-1, остаток NR-2, остаток NR-3), 2,14, 2,10, 2,09, 2,08, 2,00, 1,88 (6c, 18H, 6 ацетил).

Анализ для C₁₁₅H₁₅₂O₄₉:

рассчитано, %: C 59,57 H 6,60

найдено, %: C 59,49 H 6,61

Препаративный пример 48

Метил-О-(6-O-ацетил-4-O-левулинил -2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)- [О-(6-О-ацетил-2,3-ди -О-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)] ₁₅-O-(бензил -2,3-ди-О-метил--D- глюкопиранозилуронат)-(1--->4) -О-(3,6-ди-О-ацетил -2-О- бензил--D-глюкопиранозил)-(1--->4) -О-(бензил-2,3-ди-О-метил--L-идопиранозилуронат)-(1--->4)-2,3,6-три-О-бензил--D-глюкопиранозид (51)

84 мг (0,027 ммоль) Имидата (47) обрабатывают с помощью 62 мг (0,027 ммоль) гликозильного акцептора (50) согласно препаративному примеру 39. Остаток очищают сначала на колонке с Toyopearl HW-40, затем на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/ацетон в соотношении 1:1), получая 71 мг (51%, не оптимизировано) производного (51) (см. схему 15, приведенную в конце описания).

[]_D= +136 (с = 0,95; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 5200,11; химическая масса = 5203,39; экспериментальная масса = 5203,5.

¹H-ЯМР(дейтерохлороформ); (м.д.):

7,42-7,18 (м, 30H, 6 фенил), 5,54 (д, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR), 5,51-5,40 (м, 15 H-1), 5,30 (д, J=6,8 Гц, H-1 остаток R-1), 5,17 (д, J=3,5 Гц, H-1 остаток R-2), 4,56 (д, J=3,7 Гц, H-1 остаток R), 4,09 (д, J=7,9 Гц, H-1 остаток R-3), 2,85-2,53 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,17, 2,16, 2,13, 2,11, 2,08, 2,05, 2,00, 1,88 (8c, 57H, 18 ацетил и O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Анализ для C₂₄₀H₃₅₀O₁₂₃4H₂O:

рассчитано, % C 54,64 H 6,84

найдено, %: C 54,51 H 6,79

Препаративный пример 49

Этил-O-(4,6-О-п-метоксибензилиден- -D-глюкопиранозил- (1--->4)-1-тио- -D-глюкопиранозид (53)

При температуре +5^oC и в атмосфере аргона, 35,8 мл (0,21 моль) диметилацеталя анисового альдегида и 4,44 г (19,1 ммоль) камфорсульфокислоты добавляют к раствору 73,89 г (0,19 моль) соединения (52) [W.E. Dick Jr и J.E. Hodge "Методы в химии углеводов", 7, 15-18 (1976)] в 990 мл смеси ацетонитрила с N,N-диметилформамидом в соотношении 3,5:1. После перемешивания в течение полутора часов при комнатной температуре нейтрализуют путем добавления 2,96 мл (21,0 экв.) триэтиламина, концентрируют и полученный сироп очищают на колонке с диоксидом кремния (дихлорметан/метанол в соотношении 100: 0, затем 50: 50), получая 58,6 г (61%, не оптимизировано) соединения (53) (см. схему 16, приведенную в конце описания).

[]_D= +47 (с = 1,03; метанол).

ESIMS (отрицательные ионы): м/е 503 (М-H)^-.

¹H-ЯМР (CD₃OD); (м.д.):

7,41, 6,89 (2д, 4H, CH₃OC₆H₄), 5,51 (с, CHC₆H₄), 5,20 (д, J=3,6 Гц, H-1"), 4,39 (д, J=7,1 Гц, H-1), 3,78 (с, 3H, CH₃OC₆H₄), 2,75 (к, 2H, J=7,0 Гц, SCH₂CH₃), 1,29 (т, 3H, SCH₂CH₃).

Анализ для C₂₂H₃₂O₁₁S:

рассчитано, %: C 52,37 H 6,39 S 6,35

найдено, %: C 52,15 H 6,61 S 5,84

Препаративный пример 50

Этил-O-(2,3-ди-О-ацетил-4,6 -п-метоксибензилиден--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-2,3,6 -три-O-ацетил-1-тио--D- глюкопиранозид (54)

При температуре 0^oC, 65 мл (0,47 моль) триэтиламина и 89 мл (0,94 моль) уксусного ангидрида прикапывают к суспензии 47,22 г (93,6 ммоль) соединения (53) в 450 мл дихлорметана. Затем добавляют 5,71 г (46,8 ммоль) 4-диметиламинопиридина и перемешивают в течение полутора часов при комнатной температуре. Реакцию прекращают путем добавления 45 мл (1,12 моль) метанола, затем реакционную смесь промывают последовательно холодным водным 10%-ным раствором гидросульфата калия, водой, насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и водой. Сушат, концентрируют и кристаллизуют (из смеси циклогексана с этилацетатом), получая 64,9 г (97%) соединения (54) (см. схему 16, приведенную в конце описания).

[]_D= +21 (с = 1,00 дихлорметан); т.пл.= 213-215^oC.

ESIMS (положительные ионы): м/е (+NaCl) 737 (M+Na)⁺; (+KF) 753 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,34, 6,86 (2д, 4H, CH₃OC₆H₄), 5,43 (с, CHC₆H₄), 5,34 (д, J=4,1 Гц, H-1"), 4,54 (д, J= 9,9 Гц, H-1), 3,78 (с, 3H, CH₃OC₆H₄), 2,74-2,60 (м, 2H, SCH₂CH₃), 2,10, 2,06, 2,03, 2,01 (4c, 15H, 5 ацетил), 1,26 (т, 3H, SCH₂CH₃).

Анализ для C₃₂H₄₂O₁₆S:

рассчитано, %: C 53,78 H 5,92 S 4,49

найдено, %: C 53,74 H 6,08 S 4,40

Препаративный пример 51

Этил-О-(2,3-ди-O-ацетил-4- п-метоксибензил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-2,3,6-три-O-ацетил- 1-тио--D-глюкопиранозид (55) и этил-O-(2,3-ди-O-ацетил-4 -п-метоксибензил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-2,3-ди-O-ацетил- 1-тио--D-глюкопиранозид (56)

Суспензию 25,0 г (35,0 ммоль) соединения (54), 20,4 г (0,28 моль) комплекса борана с триметиламином и 33 г молекулярного сита в 810 мл толуола перемешивают в течение 1 часа в атмосфере аргона. Охлаждают до температуры 0^oC и медленно добавляют 14,0 г (0,11 моль) хлорида алюминия. Перемешивают в течение 25 минут (ТСХ), реакционную среду выливают в холодный водный 20%-ный раствор гидросульфата калия и перемешивают в течение 1 часа при температуре 0^oC, затем отфильтровывают (целит). Органическую фазу промывают водой, 2%-ным водным раствором гидрокарбоната натрия, водой, сушат и концентрируют. Остаток очищают на колонке с диоксидом кремния, получая 7,37 г (29%, не оптимизировано) соединения (55) и 1,36 г (6%) соединения (56) (см. схему 16, приведенную в конце описания). Образец для анализа соединения (55) кристаллизуют из смеси циклогексана с этилацетатом.

[]_D= +30 (с = 1,00; дихлорметан); т.пл. = 151-153^oC.

ESIMS (положительные ионы): м/е (+NaCl) 739 (M+Na)⁺; (+KF) 755 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР(дейтерохлороформ); (м.д.):

7,19, 6,87 (2д, 4H, CH₃OC₆H₄), 5,36 (д, J = 3,5 Гц, H-1"), 4,54 (с, 2H, C₆H₄CH₂), 4,53 (д, J=9,0 Гц, H-1), 2,70-2,65 (м, 2H, SCH₂CH₃).

Анализ для C₃₂H₄₂O₁₆S:

рассчитано, %: C 53,62 H 6,19 S 4,47

найдено, %: C 53,57 H 6,21 S 4,43

Соединение (56):

[]_D= +19 (с = 1,11; дихлорметан);

ESIMS (положительные ионы): м/е (+NaCl) 697 (M+Na)⁺; (+KF) 713 (M+K)⁺;

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,17, 6,84 (2с, 4H, CH₃OC₆H₄), 5,36 (д, J=4,5 Гц, H-1"), 4,54 (д, J=10,1 Гц, H-1), 4,49 (с, 2H, C₆H₄CH₂), 2,69-2,64 (м, 2H, SCH₂CH₃), 2,02, 2,01, 2,00, 1,96 (4c, 12H, 4 ацетил), 1,25 (т, 3H, SCH₂CH₃).

Анализ для C₃₀H₄₂O₁₅S:

рассчитано, %: C 53,40 H 6,27 S 4,75

найдено, %: C 53,29 H 6,39 S 4,53

Препаративный пример 52

Этил-O- (2,3,6-три-O-ацетил-4-п -метоксибензил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-2,3,6 -три-O-ацетил-1-тио--D- глюкопиранозид (57)

При температуре 0^oC 1,47 мл (15,5 ммоль) уксусного ангидрида добавляют к смеси из 5,6 г (7,77 ммоль) соединения (55), 1,19 мл (8,54 ммоль) триэтиламина и 190 мг (1,55 ммоль) 4-диметиламинопиридина в 40 мл дихлорметана. После перемешивания в течение 40 минут при комнатной температуре (ТСХ) смесь разбавляют с помощью 50 мл дихлорметана и промывают холодным водным 10%-ным раствором гидросульфата калия, водой, насыщенным раствором гидрокарбоната натрия и водой. Сушат, концентрируют и очищают на колонке с диоксидом кремния (этилацетат/циклогексан в соотношении 35:65), получая 5,66 г (96%) соединения (57) (см. схему 16, приведенную в конце описания).

[]_D= +44 (с = 1,03; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/е (+NaCl) 781 (M+Na)⁺; (+KF) 797 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР(дейтерохлороформ); (м.д.):

7,15, 6,85 (2д, 4H, CH₃OC₆H₄), 5,30 (д, J=4,2 Гц, H-1"), 4,53 (д, J=10,0 Гц, H-1), 2,69-2,64 (м, 2H, SCH₂CH₃), 2,09, 2,07, 2,04, 2,01, 2,00, 1,98 (6c, 18H, 6 ацетил), 1,25. (т, 3H, SCH₂CH₃).

Анализ для C₃₄H₄₆O₁₇S:

рассчитано, %: C 53,82 H 6,11 S 34,22

найдено, %: C 53,77 H 6,24 S 4,09

Препаративный пример 53

Этил-4,6-O-бензилиден-2,3-ди- O-метил-1-тио--глюкопиранозид (59)

При температуре 0^oC 500 мг (19,9 ммоль) гидрида натрия добавляют к смеси из 2,59 г (8,29 ммоль) соединения (58) [А.Ф. Божков и др., Изв. Акад. Наук СССР, серия химическая, 1, 179 (1968)] и 1,70 мл (19,9 ммоль) метилйодида в 25 мл N,N-диметилформамида и оставляют температуру повышаться до 20^oC. Перемешивают в течение 30 минут (ТСХ), затем добавляют метанол. Смесь выливают в воду и экстрагируют этилацетатом. Экстракт промывают последовательно 1 М водным раствором тиосульфата натрия, водой, сушат и концентрируют. Остаток порошкуют в диэтиловом эфире, получая 0,42 г (15%) соединения (59) (см. схему 17, приведенную в конце описания); очистка маточных растворов на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 12:1) с последующей кристаллизацией позволяет получить дополнительное количество соединения (59), составляющее 1,6 г (общий выход равен 71%).

[]_D= -78 (c = 1,00; дихлорметан); т.пл. = 108^oC.

LSIMS (положительные ионы): м/е (тиоглицерин + NaCl) 363 (M+Na)⁺; (тиоглицерин +KF) 379 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,51-7,33 (м, 5H, фенил), 5,52 (с, 1H, C₆H₅CH), 4,45 (д, 1H, J=9,8 Гц, H-1), 3,64 (с, 3H, OCH₃), 3,62 (с, 3H, OCH₃), 2,78-2,68 (м, 2H, SCH₂CH₃), 1,31 (т, 3H, J=2,7 Гц, SCH₂CH₃).

Анализ для C₁₇H₂₄O₅S:

рассчитано, %: C 59,98 H 7,11 S 9,42

найдено, %: C 59,91 H 7,15 S 8,96

Препаративный пример 54

2-(Триметилсилил)этил-4,6-O-бензилиден -2,3-ди-O-метил--D-глюкопиранозид (60)

23,0 г (67,5 ммоль) соединения (59) и 19,4 мл (135 ммоль) 2-(триметилсилил) этанола растворяют в 345 мл смеси диэтилового эфира с дихлорметаном в соотношении 2:1 и добавляют 11 г молекулярного сита Перемешивают в течение 1 часа при температуре 25^oC, добавляют 49,7 г (220 ммоль) N-йодсукцинимида, затем, при температуре 0^oC, добавляют 2,20 г (8,78 ммоль) трифлата серебра. Перемешивают в течение 20 минут (ТСХ), затем добавляют твердый гидрокарбонат натрия. Разбавляют дихлорметаном, фильтруют через целит, промывают последовательно 1 М водным раствором тиосульфата натрия, водой, сушат и выпаривают досуха. Остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/этилацетат в соотношении 15:1, затем 5:1), получая 4,20 г (15%) соединения (60 и 8,40 г (31%) соединения (60) (см. схему 17, приведенную в конце описания).

Соединение (60):

[]_D= +96 (с = 0,4; дихлорметан);

ESIMS (положительные ионы): м/е 419 (M+Na)⁺; 435 (M+K)⁺;

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,52-7,35 (м, 5H, фенил), 5,54 (с, 1H, C₆H₅CH), 4,98 (д, 1H, J=3,7 Гц, H-1), 3,64 (с, 3H, OCH₃), 3,62 (с, 3H, OCH₃), 1,24-0,96 (м, 2H, OCH₂CH₂Si(CH₃)з), 0,00 (с, 9H, OCH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₂₀H₃₂O₆S (396,56):

рассчитано, %: C 60,58 H 8,13

найдено, %: C 60,26 H 8,39

Препаративный пример 55

2-(Триметилсилил)этил-6-O-бензил -2,3-ди-O-метил--D- глюкопиранозид (61)

21,1 г (53,3 ммоль) соединения (60) растворяют в 154 мл дихлорметана. При комнатной температуре добавляют 34 мл (213 ммоль) триэтилсилана, затем прикапывают смесь из 16,3 мл (213 ммоль) трифторуксусной кислоты и 0,49 мл (3,47 ммоль) трифторуксусного ангидрида. Перемешивают в течение двух часов и добавляют 1 М водный раствор гилроксида натрия вплоть до достижения щелочного значения pH. После декантации водную фазу экстрагируют этилацетатом, затем органические фазы объединяют, сушат и концентрируют. Остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (дихлорметан/ацетон в соотношении 14:1, затем 12:1), получая 12,5 г (59%) соединения (61) (см. схему 17, приведенную в конце описания).

[]_D= +100 (c = 1,45; дихлорметан).

¹H-ЯМР; (м.д.):

7,40-7,20 (м, 5H, фенил), 4,98 (д, 1H, J=3,5 Гц, H-1), 3,62 (с, 3H, OCH₃), 3,49 (с, 3H, OCH₃), 1,14-0,91 (м, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (с, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₂₀H₃₀O₆Si (398,58):

рассчитано, %: C 60,27 H 8,60

найдено, %: C 60,18 H 8,81

Препаративный пример 56

2-(Триметилсилил)этил-O-(2,3,6-три -O-ацетил-4-O-п-метоксибензил-- D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-ацетил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-6-O-бензил -2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозид (62)

Смесь 19,1 г (25,1 ммоль) тиогликозида (57) и 7,5 г (18,7 ммоль) гликозильного акцептора (61) обрабатывают согласно Методике 3 с получением, после очистки на колонке с диоксидом кремния (дихлорметан/ацетон в соотношении 20: 1, затем 10: 1), 19,7 г (95%) соединения (62) (см. схему 17, приведенную в конце описания).

[]_D= +90 (с = 1,15; дихлорметан).

Анализ для C₅₂H₇₄O₂₃Si (1095,24):

рассчитано, %: C 57,03 H 6,81

найдено, %: C 57,38 H 6,85

Препаративный пример 57

2-(Триметилсилил)этил-O-(2,3,6-три -O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-6-O-бензил -2,3-ди-O-метил--D- глюкопиранозид (63)

19,7 г (18,0 ммоль) соединения (62) обрабатывают согласно Методике 4 с получением, после очистки на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 3:1, затем 2:1), 11,2 г (79% в расчете на три стадии) соединения (63) (см. схему 18, приведенную в конце описания).

[]_D= +95 (с = 1,15; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/е (+ NaCl) 829 (M+Na)⁺; (+ KF) 845 (М+К)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,34-7,25 (м, 5H, фенил), 5,60 (д, 1H, J=3,8 Гц, H-1""), 4,96 (д, 1H, J= 3,8 Гц, H-1), 4,29 (д, 1H, J=8,0 Гц, H-1"), 1,08-0,91 (м, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃). 0,00 (с, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Препаративный пример 58

2-(Триметилсилил) этил-O-(2,3,6-три-O-ацетил -4-O-п-метоксибензил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3,6-три -О-ацетил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3,6-три-O- метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3,6-три-O -метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4)-6-O-бензил-2,3-ди-O-метил--D-глюкопиранозид (64)

Смесь 6,87 г (9,10 ммоль) тиогликозида (57) и 6,67 г (8,30 ммоль) гликозильного акцептора (63) обрабатывают согласно Методике 3 и остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 2:5), получая 10,7 г (86%) соединения (64) (см. схему 18, приведенную в конце описания).

[]_D= +90 (c = 0,83; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): м/е (+NaCl) 1525 (M+Na)⁺; (+KF) 1541 (M+K)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,25 (м, 5H, фенил), 7,15-6,84 (м, 4H, C₆H₄OCH₃), 5,56 (д, 1H, J= 3,9 Гц, H-1""), 5,29 (д, 1H, J=4,0 Гц, H-1""""), 4,97 (д, 1H, J=3,7 Гц, H-1), 4,71 (д, 1H, J=8,l Гц, H-1"""), 4,27 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1"), 1,08- 0,91 (м, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (с, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₇₀H₁₀₆O₃₃Si (1503,69):

рассчитано, %: C 55,91 H 7,11

найдено, %: C 56,05 H 7,24

Препаративный пример 59

2-(Триметилсилил)этил-[О-(2,3,6- три-O-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил --D-глюкопиранозил)- (1--->4)]₂-6-O-бензил-2,3-ди -O-метил--D-глюкопиранозид (65)

10,7 г (7,2 ммоль) соединения (64) обрабатывают согласно Методике 4, и остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 2: 1, затем 6: 5), получая 6,50 г (74% в расчете на три стадии) соединения (65) (см. схему 18, приведенную в конце описания).

[]_D= +102 (с = 0,68; дихлорметан).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,25 (м, 5H, фенил), 5,65 (л, 1H, J=3,8 Гц, H-1""""), 5,62 (д, 1H, J= 3,8 Гц, H-1""), 4,98 (д, 1H, J=3,7 Гц, H-1), 4,31 (д, 1H, J=8,1 Гц, H-1"""), 4,29 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1"), 1,08-0,91 (м, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (с, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₅₆H₉₈O₂₆Si (1215,48):

рассчитано, %: C 55,34 H 8,13

найдено, %: C 55,31 H 8,19

Препаративный пример 60

2-(Триметилсилил) этил-O-(2,3,6-три-O-ацетил -4-O-п-метоксибензил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6 -три-O-ацетил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-[О-(2,3,6 -три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)] ₂-6-O-бензил-2,3-ди -O-метил--D- глюкопиранозид (66)

Смесь 4,03 г (5,31 ммоль) тиогликозида (57) и 5,78 г (4,75 моль) гликозильного акцептора (65) обрабатывают согласно Методике 3, и остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 2:5), получая 8,63 г (95%) соединения (66) (см. схему 18, приведенную в конце описания).

[]_D= +94 (с = 0,74; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 1910,83; химическая масса = 1912,14; экспериментальная масса = 1911,61 0,12 отн. масс. ед.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,25 (м, 5H, фенил), 7,15-6,83 (м, 4H, C₆H₄OCH₃), 5,62 (д, 1H, J= 3,8 Гц, H-1 остаток R-2), 5,60 (д, 1H, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR-2), 5,30 (д, 1H, J= 4,0 Гц, H-1 остаток NR), 4,98 (д, 1H, J=3,7 Гц, H-1 остаток R), 4,71 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1 остаток NR-1), 4,30 (д, 1H, J=8,1 Гц, H-1 остаток C), 4,29 (д, 1H, J=8,4 Гц, H-1 остаток R-1), 2,08 (с, 3H, ацетил), 2,07 (с, 3H, ацетил), 2,03 (с, 3H, ацетил), 1,99 (с, 3H, ацетил), 1,98 (с, 3H, ацетил), 1,96 (с, 3H, ацетил), 1,08-0,91 (м, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (с, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₈₈H₁₃₈O₄₃Si (1912,14):

рассчитано, %: C 55,28 H 7,27

найдено, %: C 55,61 H 7,35

Препаративный пример 61

2-(Триметилсилил)этил-[О-(2,3,6-три -O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4)]₃-6 -O-бензил-2,3-ди-O-метил- -D глюкопиранозид (67)

8,63 г (4,50 ммоль) соединения (66) обрабатывают согласно Методике 4, и остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 3: 2, затем 4: 3), получая 5,67 г (77% в расчете на три стадии) соединения (67) (см. схему 19, приведенную в конце описания).

[]_D= +102 (c = 0,70; дихлорметан).

LSIMS (положительные ионы): м/е (тиоглицерин + NaCl) 1645 (M+Na)⁺.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,32 (м, 5H, фенил), 5,65 (д, 2H, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR и H-1 остаток NR-2), 5,62 (д, 1H, J=3,8 Гц, H-1 остаток R-2), 4,98 (д, 1H, J=3,7 Гц, H-1 остаток R), 4,31 (д, 1H, J=8,1 Гц, H-1 остаток NR-1), 4,30 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1 остаток C), 4,29 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1 остаток R-1), 1,08-0,91 (м, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (с, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₇₄H₁₃₀O₃₆Si (1912,14):

рассчитано, %: C 54,73 H 8,07

найдено, %: C 54,61 H 8,07

Препаративный пример 62

2-(Триметилсилил)этил-O-(2,3,6-три -O-ацетил-4-O-п- метоксибензил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O- ацетил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-[О- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-[O- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)]₃-6 -O-бензил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозид (68)

Смесь 1,47 г (1,95 ммоль) тиогликозида (57) и 2,89 г (1,77 ммоль) гликозильного акцептора (67) обрабатывают согласно Методике 3. Остаток фильтруют через колонку с диоксидом кремния (циклогексан/ацетон в соотношении 3:2), получая 3,71 г (92%) соединения (68) (см. схему 19, приведенную в конце описания). Образец для анализа очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 3:2).

[]_D= +99 (с = 0,58; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 2319,03; химическая масса = 2320,59; экспериментальная масса = 2319,03 0,12 отн. масс. ед.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,32 (м, 5H, фенил), 7,15-6,83 (м, 4H, C₆H₄OCH₃), 5,62 (д, 1H, J= 3,8 Гц, H-1 остаток R-2), 5,60 (д, 2H, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR-2 и остаток C), 5,29 (д, 1H, J=4,0 Гц, H-1 остаток NR), 4,97 (д, 1H, J=3,7 Гц, H-1 остаток R), 4,70 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1 остаток NR-1), 4,30 (д, 2H, J=8,1 Гц, H-1 остаток NR-3 и остаток R-3), 4,29 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1 остаток R-1), 2,08 (с, 3H, ацетил), 2,06 (с, 3H, ацетил), 2,02 (с, 3H, ацетил), 1,99 (с, 3H, ацетил), 1,98 (с, 3H, ацетил), 1,96 (с, 3H, ацетил), 1,08-0,91 (м, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (с, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₁₀₆H₁₇₀O₅₃Si (2320,59):

рассчитано, %: C 54,86 H 7,38

найдено, %: C 54,76 H 7,45

Препаративный пример 63

2-(Триметилсилил)этил-[О-(2,3,6- три-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)]₄-6-O-бензил-2,3 -ди-O-метил--D- глюкопиранозид (69)

3,61 г (1,55 ммоль) соединения (68) обрабатывают согласно Методике 4, затем остаток очищают на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 4: 5), получая 2,22 г (70% в расчете на три стадии) соединения (69) (см. схему 19, приведенную в конце описания).

[]_D= +103 (с = 0,80; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 2031,01; химическая масса = 2032,38; экспериментальная масса = 2032,38 отн. масс. ед.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,32 (м, 5H, фенил), 5,65 (д, 1H, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR), 5,64 (д, 1H, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR-2), 5,62 (д, 2H, J=3,8 Гц, H-1 остаток C и остаток R-2), 4,97 (д, 1H, J=3,7 Гц, H-1 остаток R), 4,30 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1 остаток NR-1), 4,29 (д, 3H, J=7,9 Гц, H-1 остаток R-1, остаток R-3 и остаток NR-3), 1,08-0,91 (м, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0,00 (с, 9Н, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₉₂H₁₆₂O₄₆Si (2032,38):

рассчитано, %: C 54,37 H 8,03

найдено, %: C 54,51 H 8,04

Препаративный пример 64

2-(Триметилсилил)этил-O-(4-O -левулинил-2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6 -три-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-[О-(2,3,6 -три-O-метил--D- глюкопиранозил)-((1--->4)-O-(2,3,6 -три-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)]₃-6-O -бензил-2,3-ди-O-метил--D- глюкопиранозид (70)

855 мг (0,42 ммоль) соединения (69) растворяют в 8 мл дихлорметана и при температуре 25^oC добавляют 83 мкл (0,59 ммоль) триэтиламина, 5,14 мг (0,04 ммоль) 4-диметиламино-пиридина и 117 мг (0,55 ммоль) левулинового ангидрида. Перемешивают в течение двух часов (ТСХ), затем добавляют дихлорметан, промывают водным 10%-ным раствором гидросульфата калия, потом водой, сушат и выпаривают досуха. Это соединение может быть использовано без очистки в следующей стадии. Образец для анализа очищают на колонке с диоксидом кремния (циклогексан/ацетон в соотношении 5:4) с получением чистого соединения (70) (см. схему 19, приведенную в конце описания).

[]_D= +101 (с = 0,89; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 2129,05; химическая масса = 2130,48; экспериментальная масса = 2130,00 отн. масс. ед.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,32 (м, 5H, фенил), 5,65 (д, 3H, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR, остаток NR-2 и остаток C), 5,63 (д, 2H, J=3,8 Гц, H-1 остаток R-2), 5,02 (т, 1H, J= 10,1 Гц, H-4 остаток NR), 4,98 (д, 1H, J=3,7 Гц, H-1 остаток R), 4,32 (д, 1H, J= 7,9 Гц, H-1 остаток NR-1), 4,30 (д, 2H, J=7,9 Гц, H-1 остаток NR-3 и остаток R-3), 4,29 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1 остаток R-1), 2,80-2,50 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,18 (с, 3H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 1,08-0,91 (м, 2H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃), 0.00 (с, 9H, CH₂CH₂Si(CH₃)₃).

Анализ для C₉₇H₁₆₈O₄₈Si (2032,38):

рассчитано, %: C 54,69 H 7,95

найдено, %: C 54,55 H 8,07

Препаративный пример 65

О-(4-O-Левулинил-2,3,6-три -O-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)- [О-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)]₃-6 -O-бензил-2,3-ди-О- метил-,-D-глюкопираноза (71)

876 мг (0,41 ммоль) соединения (70) обрабатывают как описано в препаративном примере 44 (а). Остаток очищают на колонке с диоксидом кремния, получая 600 мг (50% в расчете на две стадии) соединения (71) в виде смеси изомеров (/ = 60/40) (см. схему 19, приведенную в конце описания).

[]_D= +89 (с = 0,74; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 2028,97; химическая масса = 2030,24; экспериментальная масса = 2030,19 0,09 отн. масс. ед.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,32 (м, 5H, фенил), 5,65 (д, 3H, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR, остаток NR-2 и остаток C), 5,63 (д, 1H, J=3,8 Гц, H-1 остаток R-2), 5,33 (д, 1H, J= 3,2 Гц, H-1 остаток R), 5,02 (т, 1H, J=10,1 Гц, H-4 остаток NR), 4,59 (д, 1H, J= 5,3 Гц, H-1 остаток R), 4,32 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1 остаток NR-1), 4,30 (д, 2H, J=7,9 Гц, H-1 остаток NR-3 и остаток R-3), 4,29 (д, 1H, J=7,9 Гц, H-1 остаток R-1), 2,80-2,50 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,18 (с, 3H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Препаративный пример 66

О-(4-O-Левулинил-2,3,6-три -O-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)- [O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)] ₃-6 -O-бензил-2,3-ди-О-метил-,-D -глюкопираноза-трихлорацетимидат (72)

К раствору 593 мг (0,29 ммоль) соединения (71) в 7 мл дихлорметана добавляют 72,2 мг (0,52 ммоль) карбоната калия и 176 мкл (1,75 ммоль) трихлорацетонитрила. Перемешивают в течение 16 часов, отфильтровывают и выпаривают. Фильтруют через силикагель (циклогексан/ацетон [в соотношении 5:4] 1/ триэтиламина), получая 414 мг (46%) имидата (72) в виде смеси аномеров (/ = 47/53) (см. схему 19, приведенную в конце описания).

[]_D= +86 (с = 0,84; дихлорметан).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,32 (м, 5H, фенил), 6,50 (д, 1H, J=3,5 Гц, H-1 остаток R), 5,65 (д, 1H, J=8,2 Гц, H-1 остаток R), 5,65 (д, 1H, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR), 5,64 (д, 2H, J=3,8 Гц, H-1 остаток NR-2 и остаток C), 5,61 (д, 1H, J=3,8 Гц, H-1 остаток R-2), 5,02 (т, 1H, J=10,1 Гц, H-4 остаток NR), 4,37 (д, 1H, J= 7,9 Гц, H-1 остаток R-1), 4,30 (д, 3H, J=7,9 Гц, H-1 остаток NR-1, остаток NR-3 и остаток R-3), 2,80-2,50 (м, 4H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 2,18 (с, 3H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃).

Препаративный пример 67

Метил-O-(4-O-Левулинил- 2,3,6-три-О-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)- [О-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)] ₃ -O-(6-O-бензил-2,3-ди-O- мeтил--D-глюкoпиpaнoзил) -(1--->4)-O-(бензил-2,3-ди -О-метил--D- глюкопиранозилуронат)-(1--->4)-O-(3,6-ди -О-ацетил-2-O -бензил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(бензил-2,3-ди-O- метил--L-идопиранозилуронат- (1--->4)-O-2,3,6-три-O -бензил--D-глюкопиранозид (73)

220 мг (0,16 ммоль) гликозильного акцептора (26) и 344 мг (0,16 ммоль) имидата (72) растворяют в 5 мл смеси дихлорметана с диэтиловым эфиром в соотношении 1:2. Добавляют 750 мг/ммоль молекулярного сита и перемешивают в течение 1 часа при температуре 25^oC. Смесь охлаждают до температуры -25^oC и добавляют 1 М раствор третбутилдиметилсилилтрифлата в дихлорметане (0,20 моль/моль имидата). Перемешивают в течение 15 минут, затем добавляют твердый гидрокарбонат натрия, отфильтровывают и концентрируют. Остаток вносят в колонку Toyopearl HW-50 (дихлорметан/этанол в соотношении 1:1) и содержащую гликозильный акцептор фракцию отбирают для возвращения ее снова в реакцию, обрабатывая ее как описано выше. Осуществляют последовательные очистки на колонке с диоксидом кремния (толуол/ацетон в соотношении 5:4, затем 1:1), получая фракцию 107 мг соединения (73) в виде смесит / = 7/3 и фракцию 201 мг соединения (73) в виде смеси / = 9/1 с общим выходом 57% (308 мг) (см. схему 20, приведенную в конце описания).

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,25 (м, 35H, 7 фенил), 5,65 (д, 3H, J=3,5 Гц, H-1 остаток A, остаток C, остаток E), 5,57 (д, 1H, J=3,9 Гц, H-1 остаток G), 5,52 (д, 1H, J= 3,3 Гц, H-1 остаток I), 5,29 (д, 1H, J=6,8 Гц, H-1 остаток L), 5,17 (т, 1H, J= 3,5 Гц, H-1 остаток К), 4,56 (д, 1H, J=3,5 Гц, H-1 остаток М), 4,31 (д, 3H, J=7,9 Гц, H-1 остаток В, остаток D и остаток F), 4,27 (д, 1H, J=8,0 Гц, H-1 остаток H), 4,08 (д, 1H, J=8,0 Гц, H-1 остаток J), 2,80-2,50 (м, 4H, O(C: O)CH₂CH₂(C: O)CH₃), 2,18 (с, 3H, O(C:O)CH₂CH₂(C:O)CH₃), 1,97 (с, 3H, ацетил), 1,81 (с, 3H, ацетил).

Препаративный пример 68

Метил-[O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)]₄ -O-(6-О-бензил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (бензил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозилуронат)-(1--->4) -O-(3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)- O-(бензил-2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуронат-(1--->4)- 2,3,6-три-O-бензил--D-глюкопиранозид (74)

130 мг (38,2 мкмоль) соединения (73) обрабатывают согласно Методике 2, и сырой продукт очищают на колонке с диоксидом кремния, получая 118 мг (93%) соединения (74) (см. схему 21, приведенную в конце описания).

[]_D= +78 (с = 0,48; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 3301,49; химическая масса = 3303,65; экспериментальная масса = 3302,40 отн. масс. ед.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.):

7,33-7,25 (м, 35H, 7 фенил), 5,64 (д, 3H, J=3,5 Гц, H-1 остаток A, остаток C, остаток E), 5,57 (д, 1H, J=3,9 Гц, H-1 остаток G), 5,52 (д, 1H, J= 3,3 Гц, H-1 остаток I), 5,29 (д, 1H, J=6,8 Гц, H-1 остаток L), 5,17 (т, 1H, J= 3,5 Гц, H-1 остаток К), 4,56 (д, 1H, J=3,5 Гц, H-1 остаток М), 4,31 (д, 3H, J=7,9 Гц, H-1 остаток В, остаток D и остаток F), 4,27 (д, 1H, J=8,0 Гц, H-1 остаток H), 4,08 (д, 1H, J=8,0 Гц, H-1 остаток J), 1,97 (с, 3H, ацетил), 1,81 (с, 3H, ацетил).

Препаративный пример 69

Метил-O-(2,6-ди-O-бензил-4-O -левулинил-3-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2-O -ацетил-6-O-бензил-3-O- метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,6-ди-O-бензил-3 -O-метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2-O-ацетил-6-O- бензил-3-O-метил--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-[О-(2,3,6-три -O-метил--D -глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6- три-O-метил--D- глюкопиранозил-(1--->4)] ₄-O- (6-O-бензил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозонил)-(1--->4)-O- (бензил-2,3-ди-O- метил--D-глюкопиранозилуронат) -(1--->4)-O- (3,6-ди-O-ацетил-2-O-бензил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (бензил-2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуронат)- (1--->4)-2,3,6-три-O- бензил--D-глюкопиранозид (75)

112 мг (33,9 мкмоль) гликозильного акцептора (74) и 59,1 мг (37,2 мкмоль) имидата (17) (см. препаративный пример 16) растворяют в 2 мл толуола. Добавляют 42 мг молекулярного сита и перемешивают в течение 1 часа при температуре 25^oC. Смесь охлаждают до температуры -20^oC и добавляют 1 М раствор трет-бутилдиметилсилилтрифлата в толуоле (0,20 моль/моль ими дата). Перемешивают в течение 15 минут, затем добавляют твердый гидрокарбонат натрия, отфильтровывают и концентрируют. Вносят в колонку c Toyopearl HW-50 (дихлорметан/этанол в соотношении 1:1), содержащую акцептор, и 17-мер. фракцию отбирают для возвращения ее снова в реакцию, обрабатывая ее как описано

выше. Подвергают последовательной очистке на колонке с Toyopearl HW-50 и на колонке с диоксидом кремния, получая 71 мг (44%) соединения (75) (см. схему 21, приведенную в конце описания).

[]_D= +80 (с = 0,26; дихлорметан).

ESIMS (положительные ионы): моноизотопная масса = 4728,10; химическая масса = 4731,26; экспериментальная масса = 4731,27 0,39 отн. масс. ед.

¹H-ЯМР (дейтерохлороформ); (м.д.) основных аномерных протонов: 5,64; 5,57; 5,52; 5,48; 5,47; 5,29; 5,17; 4,56; 4,50; 4,29; 4,27; 4,08.

Препаративный пример 70

Метил-2,3-ди-O-метил-6-O-трет -бутилдиметилсилил--D- глюкопиранозид (77)

В атмосфере аргона, 14,0 г (92,9 ммоль) трет-бутилдиметилсилилхлорида, 15 мл (108 ммоль) триэтиламина и 260 мг (2,13 ммоль) 4-диметиламинопиридина добавляют к раствору 15,84 г (71,3 ммоль) соединения (76) [D. Trimmell, W.M. Doane, C. B. Russel, C.E. Rist, Carbohydr. Res., 11, 497 (1969)] в 300 мл дихлорметана. После перемешивания в течение 15 часов при комнатной температуре раствор разбавляют дихлорметаном, промывают насыщенным водным раствором гидрокарбоната натрия, сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и концентрируют. Остаток очищают методом флеш-хроматографии (циклогексан/этилацетат в соотношении 1,3:1), получая 22,79 г (95%) соединения (77) (см. схему 22, приведенную в конце описания) в виде бесцветного сиропа.

[]_D= +87 (с = 1,2; хлороформ).

Препаративный пример 71

Метил-2,3-ди-O-метил-6-O-трет- бутилдиметилсилил--D-ксило-4- гексопиранозид (78)

В атмосфере аргона и при температуре -70^oC 8,7 мл (123 ммоль) раствора диметилсульфоксида в 20 мл дихлорметана добавляют к раствору 5,4 мл (61,9 ммоль) оксалилхлорида в 120 мл дихлорметана. Спустя 15 минут прикапывают раствор 18,78 г (55,8 ммоль) соединения (77) в дихлорметане. После перемешивания в течение 15 минут с помощью магнитной мешалки добавляют 37 мл (265 ммоль) триэтиламина и спустя 15 минут оставляют стоять для повышения температуры до комнатной. Добавляют 150 мл воды, водную фазу экстрагируют с помощью 150 мл ди- хлорметана. Органические фазы объединяют, промывают водным насыщенным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом магния и концентрируют. Остаток очищают методом флеш-хроматографии (циклогексан/этилацетат в соотношении 9: 1, затем 4:1), получая 17,3 г (93%) соединения (78) в виде бесцветного масла (см. схему 22, приведенную в конце описания).

[]_D= +98 (с = 1,0; хлороформ).

Препаративный пример 72

Метил-4-дезокси-2,3-ди-O-метил -4-C-метилен-6-O-трет- бутилдиметилсилил- -D-ксило-4-гексопиранозид (79)

В атмосфере аргона 75 мл 1,6 М раствора н-бутиллития в н-гексане прикапывают к суспензии 43,3 г (127 ммоль) метилтрифенилфосфонийбромида в 250 мл тетрагидрофурана. После выдерживания в течение 30 минут при комнатной температуре смесь охлаждают до температуры -70^oC, затем добавляют раствор 13,97 г (41,8 ммоль) соединения (78) в 60 мл тетрагидрофурана. После выдерживания в течение 30 минут при температуре -70^oC смесь оставляют стоять для повышения ее температуры до комнатной. Спустя 1 час добавляют 300 мл водного насыщенного раствора хлорида аммония и водную фазу экстрагируют диэтиловым эфиром. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и концентрируют. Остаток очищают методом флеш-хроматографии (циклогексан/этилацетат в соотношении 7:1, затем 4:1), получая 8,30 г (60%) соединения (79) в виде бесцветного масла (см. схему 22, приведенную в конце описания).

[]_D= +151 (с = 1,3; хлороформ).

Препаративный пример 73

Метил-4-дезокси-2,3-ди-O-метил -4-C-метилен- -D-ксило- гексопиранозид (80)

Камфорсульфокислоту (pH = 1) добавляют к раствору 8,50 г (25,6 ммоль) соединения (79) в 250 мл смеси дихлорметана с метанолом в соотношении 5:1. После полного исчезновения исходного продукта (ТСХ; циклогексан/этилацетат в соотношении 1:1) раствор нейтрализуют путем добавления триэтиламина. Остаток после концентрирования очищают методом флеш-хроматографии (циклогексан/этилацетат в соотношении 1:1, затем 1:2), получая 5,32 г (95%) соединения (80) в виде бесцветного сиропа (см. схему 22, приведенную в конце описания).

[]_D= +239 (с = 1,0; хлороформ).

Препаративный пример 74

Фенил-2,4,6-три-O-ацетил-3 -O-метил-1-селено- -D- глюкопиранозид (83)

МЕТОДИКА 1:

В атмосфере аргона, 5,7 мл (53,7 ммоль) селенофенола добавляют к раствору 13,05 г (36,0 ммоль) соединения (81) (смесь аномеров 1:1) [E.L. Hirst, E. Persival, Methods Carbohydrate Chem., 2, 145 (1963)] в 120 мл дихлорметана. Реакционную смесь охлаждают до температуры 0^oC и прикапывают 8,8 мл 48%-ного раствора диэтилэфирата трифторида бора (71,9 ммоль). После выдерживания в течение трех часов при комнатной температуре реакционную смесь разбавляют с помощью 100 мл дихлорметана, промывают водным насыщенным раствором гидрокарбоната натрия, сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и концентрируют. Сырое соединение (83) в количестве 8,17 г (68% в расчете на соединение (81)) прямо используют в реакции дезацетилирования (см. схему 22, приведенную в конце описания).

МЕТОДИКА 2:

При температуре 0^oC и в атмосфере аргона 510 мг (14,6 ммоль) боргидрида натрия добавляют к суспензии 2,27 г (7,27 ммоль) дифенилселенида в этаноле. Если реакционная смесь не потеряла своей первоначальной желтой окраски в течение 15 минут, то добавляют новую порцию диэтилэфирата трифторида бора. Этот раствор в атмосфере аргона добавляют к раствору 4,22 г (11,0 ммоль) соединения (82) [А.К. Sen, К.К. Sakar, N. Banerji, J. Carbohydr. Chem., 7, 645 (1988)] в 25 мл дихлорметана. После кипячения с обратным холодильником в течение трех часов реакционную смесь оставляют охлаждаться до комнатной температуры, отфильтровывают бромид натрия и концентрируют. Остаток растворяют в 100 мл дихлорметана и промывают 50 мл 1 М водного раствора гидроксида натрия и 50 мл водного насыщенного раствора хлорида аммония. Водные фазы экстрагируют дихлорметаном (20 мл), органические фазы сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и концентрируют. Остаток очищают методом флеш-хроматографии (циклогексан/этилацетат в соотношении 1,7:1), затем кристаллизуют из этилацетата, получая 4,35 г (86%) соединения (83) (см. схему 22, приведенную в конце описания); т.пл. = 101- 102^oC.

[]_D= -20 (с = 1,0; хлороформ).

Препаративный пример 75

Фенил-3-O-метил-1-селено- -D-глюкопиранозид (84)

32,3 г (84,3 ммоль) сырого соединения (83), полученного из соединения (82), растворяют в 500 мл метанола и медленно добавляют 1,2 г натрия. Спустя 1 час раствор нейтрализуют путем добавления смолы IR-120 (H⁺), отфильтровывают и концентрируют. Остаток очищают методом флеш-хроматографии (циклогексан/этилацетат/ацетон в соотношении 1,5:1:1), получая 22,7 г (81% в расчете на соединение (82)) соединения (84) в виде сиропа (см. схему 22, приведенную в конце описания).

[]_D= -58 (с = 1,0; метанол).

Препаративный пример 76

Фенил-4,4-O-бензилиден-3-O -метил-1-селено- -D глюкопиранозид (85)

В атмосфере аргона, 45 мг п-толуолсульфокислоты и 5,4 мл (36,0 ммоль) бензальдегиддиметилацеталя добавляют к раствору 7,65 г (23,0 ммоль) триола (84) в 150 мл ацетонитрила. После перемешивания в течение двух часов при комнатной температуре добавляют 1,5 г карбоната калия. Спустя 30 минут раствор отфильтровывают, после чего концентрируют. Остаток очищают методом флеш-хроматографии (циклогексан/этилацетат в соотношении 3,5:1), получая 8,55 г (88%) соединения (85) в виде кристаллов белого цвета (см. схему 22, приведенную в конце описания); т.пл. = 123-124^oC (циклогексан/этилацетат).

[]_D= -38 (с = 1,0; хлороформ).

Препаративный пример 77

Фенил-4,6-O-бензилиден-3-O-метил -2-O-(метил-4-дезокси-6-O- диметилсилил-2,3-ди-O-метил-4 -C-метилен--D-ксило -гексопиранозид)-1-селено- -D-глюкопиранозид (86)

В атмосфере аргона и при температуре -70^oC 7,0 мл 1,6 М раствора н-бутиллития (11,2 ммоль), находящегося в склянке Шленка, добавляют к раствору 4,30 г (10,2 ммоль) соединения (85) в 30 мл тетрагидрофурана. Спустя 10 минут добавляют 5,0 мл (41,2 ммоль) дихлордиметилсилана и реакционную среду нагревают до комнатной температуры. Спустя 3 часа ее концентрируют и добавляют раствор 2,10 г (9,62 ммоль) соединения (80) и 985 мг (14,4 ммоль) имидазола в 20 мл тетрагидрофурана. После выдерживания в течение 30 минут при комнатной температуре раствор концентрируют, добавляют 50 мл воды и экстрагируют дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и концентрируют. Образец для анализа соединения (86) очищают методом флеш- хроматографии (смесь толуол/ацетон в соотношении 25:1, содержащая 0,5% триэтиламина). Получают бесцветный сироп с выходом 90% (см. схему 22, приведенную в конце описания).

¹H-ЯМР (400 МГц; гексадейтеробензол); (м.д.):

7,77-6,99 (м, 10H, ароматические), 5,51 (м, 1H, C:CH₂), 5,24 (м, 1H, C: CH₂), 5,16 (с, 1H, CH фенил), 4,85 (д, 1H, J=3,7 Гц, H-1), 4,81 (д, 1H, J= 9,8 Гц, H-1"), 4,45 (м, 1H, H-5), 4,38 (дд, 1H, J=10,8 Гц, 4,8 Гц, H-6а), 4,33 (дд, 1H, J=6,2 Гц, H-6b), 4,20 (м, 1H, J=9,2 Гц, H-3), 4,05 (дд, 1H, J= 10,3 Гц, 4,9 Гц, H-6a"), 3,87 (дд, 1H, J=8,1 Гц, H-2"), 3,52, 3,38, 3,31 и 3,27 (с, 3H, OCH₃), 3,37 (т, 1H, J=10,3 Гц, H- 6b"), 3,35 (т, 1H, H-4"), 3,32 (дд, 1H, H-2), 3,22 (дд, 1H, J=9,3 Гц, H-3"), 3,05 (ддд, 1H, J=9,3 Гц, H-5"), 0,38 и 0,37 (с, 3H, Si(CH₃)₂).

Масс-спектр: м/е 714 (M+NH₄)⁺.

Препаративный пример 78

Реакция радикальной циклизации (образование соединения 87) и расщепление простого тетраэфира (88)

Раствор 6,1 мл (22,7 ммоль) трибутилоловогидрида и 200 мг (1,22 ммоль) 2,2"-азобисизобутиронитрила в 14 мл дегазированного толуола в течение 8 часов добавляют к раствору неочищенного соединения (86), полученного из 10,2 ммоль соединения (85) и 9,62 ммоль соединения (80), в 850 мл толуола.

После радикальной циклизации реакционный раствор концентрируют и остаток растворяют в тетрагидрофуране. Добавляют избыток (20 эквивалентов) 40%-ного водного раствора фтороводорода. После полного десилилирования (ТСХ; толуол/ацетон в соотношении 4:1) раствор нейтрализуют путем добавления твердого гидрокарбоната натрия, отфильтровывают и концентрируют. Имеющееся в преобладающем количестве соединение (88) (см. схему 22, приведенную в конце описания) может быть очищено путем кристаллизации; т.пл. = 105^oC.

[]_D= +119 (с= 1,1; хлороформ).

¹³C-ЯМР (62,896 МГц; дейтерохлороформ); (м.д.):

137,29 (С четвертичные ароматические), 128,88-125,96 (С ароматические), 101,11 (CH фенил), 97,64 (С-1), 83,52 (C-2), 82,76, 81,95, 80,84, 72,01, 71,92 и 64,31 (C-3, C-5, C-2", C-3", C-4", C-5"), 75,19 (C-1"), 69,41 (C-6"), 62,69 (C-6), 60,93, 60,70, 58,31 и 55,20 (OCH₃), 38,80 (C-4), 25,58 (C метилен).

Анализ для C₂₄H₃₆O₁₀ H₂O (502,558):

рассчитано, %: C 57,36 H 7,62

найдено, %: C 57,31 H 7,54

Препаративный пример 79

Метил-6-O-ацетил-4-C-(2-O-ацетил -4,6-O-бензилиден-3-O-метил- -D-глюкопиранозил-метил)-4 -дезокси-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозид (89)

Соединение (88) количественно ацетилируют в смеси уксусного ангидрида с пиридином в соотношении 1:1 в присутствии каталитического количества 4-диметиламинопиридина. Продукт получают после концентрирования и хроматографирования (см. схему 22, приведенную в конце описания).

[]_D= +87 (с = 1,0; хлороформ).

¹H-ЯМР (500 МГц; дейтерохлороформ): см. Таблицу 1.

¹³C-ЯМР (62,896 МГц; дейтерохлороформ); (м.д.):

170,81, 169,80 (C: O), 137,18 (C четвертичные ароматические), 128,92-125,95 (C ароматические), 101,31 (CH фенил), 97,51 (C-1), 83,22 (C-2), 81,94, 69,25 и 63,83 (C-5, C-4", C-5"), 81,81 (C-3), 78,78 (C-3"), 72,74 (C-2"), 71,96 (C-1"), 69,49 (C-6"), 64,17 (C-6), 60,64, 59,82, 58,30, и 55,19 (OCH₃), 39,00 (C-4), 26,47 (C метилен), 20,91, 20,76 (OCOCH₃).

Масс-спектр, м/е 586 (M+NH₄)⁺; 569 (М+H)⁺; 554 (M-OMe + NH₃)⁺; 537 (M-OMe)⁺.

Анализ для C₂₈H₄₀O₁₂ H₂O (586,632):

рассчитано, %: C 57,33 H 7,22

найдено, %: C 57,28 H 7,07

Последняя часть синтеза состоит в превращении соединения (89) в имидат (90). Для этого бензилиден раскрывают, используя цианоборгидрид натрия и соляную кислоту. Таким образом высвобожденную гидроксильную группу временно защищают в форме простого п-метоксибензилового эфира. После дезацетилирования первичную спиртовую функцию защищают путем селективного введения трет-бутилдиметилсилильного простого эфира и таким образом полученное соединение метилируют. Окисление в условиях реакции Джонса приводит к образованию уроновой кислоты, которую бензилируют. Простой п-метоксибензиловый эфир затем отщепляют, после чего в это положение вводят сложный эфир левулиновой кислоты. Используемая система, представляющая собой смесь серной кислоты с уксусной кислотой и уксусным ангидридом, приводит к ацетолизу аномерной метильной группы, а также простого бензилового эфира в положении 6", и получают смесь двух аномерных ацетатов. Селективное дезацетилирование в положении 1 осуществляют при использовании гидразина в диметилформамиде, и смесь аномеров, растворенную в дихлорметане, превращают в соединение (90) с помощью трихлорацетонитрила в присутствии 1,8-диазабицикло [5.4.0] ундец-7-ена (см. схему 22, приведенную в конце описания).

Препаративный пример 80

Этил-O-(2,3-ди-O-бензоил- 4,6-O-бензилиден- -D глюкопиранозил)-(1--->4)-2,3,6 -три-O-бензоил-1-тио- -D глюкопираноза (92)

К охлажденному до температуры 0^oC раствору 16,7 г (35,2 ммоль) соединения... [J. Westman и М. Nilsson, J. Carbohydr. Chem., 14(7), 949-960 (1995)] в 202 мл пиридина в течение 20 минут прикапывают 24,5 мл (211 ммоль) бензоилхлорида. Реакционную смесь перемешивают в течение 20 часов при комнатной температуре; ТСХ показывает конверсию около 50%. Смесь разбавляют водой и дихлорметаном. После экстракции органическую фазу промывают 10%-ным раствором гидрокарбоната натрия, водой, сушат над сульфатом магния и концентрируют. Остаток снова обрабатывают бензоилхлоридом согласно вышеописанной методике. Сырой продукт очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 22 г соединения (92) (см. схему 23, приведенную в конце описания).

ТСХ; R_F = 0,80 (силикагель; толуол/этанол в объемном соотношении 9:1).

Препаративный пример 81

О-(2,3-ди-O-бензоил-4,6 -O-бензилиден- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-бензоил- -D-глюкопиранозил)(1--->4)-1,6- ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (94)

Смесь 1,05 г (1,05 ммоль) тиогликозида (92), 200 мг (1,05 ммоль) соединения (93) [Jeanioz и др., J. Org. Chem., 26, 3939-3944 (1961)] и 1,1 г молекулярного сита в виде порошка в 18 мл толуола перемешивают в атмосфере азота в течение 15 минут. Смесь охлаждают до температуры -20^oC и в нее вводят свежеприготовленный раствор 1,11 ммоль N-йодсукцинимида и 0,125 ммоль трифторметансульфокислоты в 6 мл смеси дихлорметана с диоксаном в объемном соотношении 1: 1. Спустя 10 минут реакционную смесь красного цвета отфильтровывают, разбавляют дихлорметаном, экстрагируют, промывают последовательно 10%-ным раствором тиосульфата натрия, 10%-ным раствором гидрокарбоната натрия и водой, сушат над сульфатом магния, затем концентрируют в вакууме. Очистку остатка осуществляют путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 1,25 г соединения (94) (см. схему 23, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,55 (силикагель; гептан/этилацетат в объемном соотношении 4: 6).

Препаративный пример 82

O-(4,6-O-Бензилиден- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-1,6 -ангидро-2,3-ди-O-метил- -D- глюкопираноза (95)

К раствору 1,24 г (1,11 ммоль) соединения (94) в 7 мл смеси метанола с диоксаном в объемном соотношении 1:1 добавляют около 50 мг трет-бутилата калия. Перемешивают в течение часа, затем добавляют снова 50 мг трет-бутилата калия, после чего смесь перемешивают еще в течение 60 минут. Реакционную смесь нейтрализуют с помощью смолы Dowex 50WX8 (H⁺), отфильтровывают и концентрируют в вакууме. После хроматографирования на колонке с силикагелем получают 665 мг соединения (95) в виде масла (см. схему 23, приведенную в конце описания).

TCX: R_F = 0,50 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 85:15).

Препаративный пример 83

О-(4,6-O-Бензилиден- 2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил) - (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-1,6- ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (96)

К охлажденному до температуры 5^oC раствору 660 мг (1,1 ммоль) соединения (95) в 8 мл безводного тетрагидрофурана, в атмосфере азота, добавляют 387 мг (9,65 ммоль) гидрида натрия, прикапывают 0,51 мл (8,22 ммоль) метилйодида и смесь перемешивают в течение 20 часов при комнатной температуре. Избыток гидрида натрия разлагают с помощью метанола и смесь выливают в 50 мл ледяной воды. После экстракции 3 раза по 20 мл этилацетатом органическую фазу промывают раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом магния и концентрируют, получая 690 мг чистого соединения (96) (см. схему 23, приведенную в конце описания).

TCX: R_F = 0,25 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 95:5).

Препаративный пример 84

O-(2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-1,6 -ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (97)

690 мг (1,03 ммоль) чистого соединения (96) растворяют в 7,3 мл 80%-ной уксусной кислоты и перемешивают в течение 20 часов при температуре 40^oC. Смесь концентрируют в вакууме и выпаривают совместно с толуолом. Хроматографирование на колонке с силикагелем при использовании смеси дихлорметан/этилацетат/метанол в соотношении 8:1:1 позволяет получить 569 мг соединения (97) (см. схему 23, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,40 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 9:1).

Препаративный пример 85

O-(6-O-Бензоил)-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)- O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-1,6-ангидро- 2,3-ди-O-метил- -глюкопираноза (98)

К раствору 560 мг (0,96 ммоль) соединения (97) в дихлор метане добавляют 227 мг (1,05 ммоль) 1-бензоилокси-1H- бензотриазола и 1,15 ммоль триэтиламина, затем смесь перемешивают в течение 20 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляют дихлорметаном, промывают 10%-ным раствором гидрокарбоната натрия и водой. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и выпаривают досуха. Продукт очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 600 мг соединения (98) (см. схему 23, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,50 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 9:1).

Препаративный пример 86

О-(2,3-Ди-O-бензоил-4,6 -O-бензилиден- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-бензоил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (6-O-бензоил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-О- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-((1--->4)-1,6-ангидро- 2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (99)

Соединение (98) превращают в соединение (99) согласно методике, описанной для получения соединения (94). Реакцию сочетания проводят при температуре 5^oC.

ТСХ: R_F = 0,50 (силикагель; гептан/этилацетат в объемном соотношении 2: 8).

Препаративный пример 87

O-(4,6-O-Бензилиден- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(- D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-1,6- ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (100)

Соединение (99) превращают в соединение (100) согласно той же методике, что и описанная для получения соединения (95) (см. схему 24, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,35 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 9:1).

Препаративный пример 88

O-(4,6-O-Бензилиден-2,3 -ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O- метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -1,6-ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (101)

Соединение (100) превращают в соединение (101) согласно той же методике, что и описанная для получения соединения (96) (см. схему 24, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,50 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 9:1).

Препаративный пример 89

О-(2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6 -три-O-метил- -D-глюкопиранозил) -(1--->4)-1,6-ангидро-2,3-ди-O-метил-- D-глюкопираноза (102)

Соединение (101) превращают в соединение (102) согласно той же методике, что и описанная для получения соединения (97) (см. схему 24, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,35 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 9:1).

Препаративный пример 90

О-(6-O-Бензоил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O- метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -глюкопиранозил)-(1--->4)-1,6- ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (103)

Соединение (102) превращают в соединение (103) согласно той же методике, что и описанная для получения соединения (98) (см. схему 24, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,40 (силикагель; толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 7,0:1,5:1,5).

Препаративный пример 91

O-(2,3-Ди-O-бензоил-4,6-O-бензилиден--D- глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O- бензоил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)- O-(6-O-бензоил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -(2,3,6-три-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)-1,6 -ангидро-2,3-ди-O-метил--D- глюкопираноза (104)

Реакцию сочетания соединения (103) с дисахаридом (2) проводят согласно методике, описанной для получения соединения (99) (см. схему 24, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,40 (силикагель; толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 7,0:1,5:1,5).

Препаративный пример 92

O-(4,6-O-Бензилиден- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -1,6-ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (105)

Соединение (104) превращают в соединение (105) согласно той же методике, что и описанная для получения соединения (95) (см. схему 25, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_f = 0,60 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 9:1).

Препаративный пример 93

O-(4,6-O-Бензилиден-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)- [О-(2,3,6-три-О-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4)]₂-1,6-ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (106)

Соединение (105) превращают в соединение (106) согласно той же методике, что и описанная для получения соединения (96) (см. схему 25, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,70 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 9:1).

Препаративный пример 94

О-(2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O- метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4)-[О-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)]₂-1,6-ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (107)

Раствор 5,05 г (2,0 ммоль) соединения (106) в 50 мл 80%-ной уксусной кислоты перемешивают в течение 20 часов при температуре 40^oC. Смесь концентрируют в вакууме и выпаривают совместно с толуолом. Остаток растворяют в этилацетате и экстрагируют водой. Водную фазу экстрагируют дихлорметаном и органическую фазу сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и выпаривают досуха, получая 2,68 г соединения (107) (см. схему 25, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,50 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 9:1).

Препаративный пример 95

О-(6-O-Бензоил-2,3-ди-O-метил--D -глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил--D -глюкопиранозил)-(1--->4)-[О- (2,3,6-три- О-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O- метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4)] ₂-1,6-ангидро-2,3- ди-O-метил--D-глюкопираноза (108)

Соединение (107) превращают в соединение (108) согласно той же методике, что и описанная для получения соединения (98) (см. схему 25, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,80 (силикагель; толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 7,0:1,5:1,5).

Препаративный пример 96

O-(2,3-Ди-O-бензоил-4,6-O-бензилиден- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-бензоил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(6-O-бензоил-2,3-ди- O-метил--глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-[О-(2,3,6-три-О-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)] ₂-1,6 -ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (109)

Смесь 1,97 г (2,0 ммоль; 3,5 экв.) тиогликозида (92), 0,86 г (0,57 ммоль) гептасахарида (108) и молекулярного сита в виде порошка в 22 мл толуола перемешивают в атмосфере азота в течение 15 минут. После этого при комнатной температуре прикапывают свежеприготовленный раствор, содержащий 496 мг (2,2 ммоль) N-йодсукцинимида и 0,808 ммоль трифторметансульфокислоты в 12 мл смеси дихлорметана с диоксаном в объемном соотношении 1:1. Спустя 10 минут реакционную смесь отфильтровывают, разбавляют дихлорметаном, экстрагируют, промывают 10%-ным раствором тиосульфата натрия и 10%-ным раствором гидрокарбоната натрия, сушат над сульфатом магния и концентрируют в вакууме. Сырой продукт очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 1,09 г соединения (109) (см. схему 25, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,80 (силикагель; толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 6:2:2).

Препаративный пример 97

O-(4,6-O-Бензилиден- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(-D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-[(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O- метил- -D-глюкопиранозил)]₂-(1--->4)- 1,6-ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (110)

Соединение (109) превращают в соединение (110) согласно той же методике, что и описанная для получения соединения (95) (см. схему 26, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,25 (силикагель, толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 5,0:2,5:2,5)

Препаративный пример 98

O-(4,6-O-Бензилиден-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)- -[О-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)] -O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)]₃-1,6-ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (111)

Соединение (110) превращают в соединение (111) согласно той же методике, что и описанная для получения соединения (96) (см. схему 26, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,50 (силикагель; толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 6:2:2).

Препаративный пример 99

О-(2,3-Ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O- метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-[О-(2,3,6-три-O-метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O- метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4)] ₃- 1,6-ангидро-2,3-ди-О-метил- -D-глюкопираноза (112)

Соединение (111) превращают в соединение (112) согласно той же методике, что и описанная для получения соединения (97) (см. схему 26, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_f = 0,20 (силикагель; толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 6:2:2).

Препаративный пример 100

О-(6-O-Бензоил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-[O-(2,3,6-три-О-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6- три-O-метил- -D глюкопиранозил)-(1--->4)] ₃-1,6-ангидро -2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (113)

Соединение (112) превращают в соединение (113) согласно той же методике, что и описанная для получения соединения (98) (см. схему 26, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,20 (силикагель; толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 6:2:2).

Препаративный пример 101

О-(6-O-Бензоил-4-O-левулинил -2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4)- [О-(2,3,6-три-O-метил- -D глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4)]₃ -1,6-ангидро-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопираноза (114)

К раствору 320 мг (0,167 ммоль) соединения (113) в 1 мл диоксана добавляют 48 мг (0,25 ммоль) 1-(3-диметиламино-пропил)-3- этилкарбодиимидгидрохлорида, 29 мг (0,25 ммоль) левулиновой кислоты и 4 мг (0,033 ммоль) диметиламинопиридина. Реакционную смесь перемешивают в течение трех часов при комнатной температуре в атмосфере азота. После этого добавляют дихлорметан и воду и после экстракции органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и концентрируют. Сырой продукт очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 312 мг соединения (114) (см. схему 26, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,50 (силикагель; толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 6:2:2).

Препаративный пример 102

О-(6-O-Бензоил-4-O-левулинил-2,3-ди-O-метил- -D- глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)- (1--->4)-[О-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)- (1--->4)] ₃-1,6-ди-O-ацетил-2,3-ди-O- метил-,-D-глюкопираноза (115)

Раствор 312 мг (0,155 ммоль) соединения (114) в смеси из 2,25 мл уксусного ангидрида, 50 мкл уксусной кислоты и 0,14 мл трифторуксусной кислоты перемешивают в течение 4-х часов при комнатной температуре. После добавления 10 мл толуола смесь концентрируют и выпаривают совместно с толуолом (3 раза по 10 мл). После хроматографирования на колонке с силикагелем выделяют 324 мг соединения (115) (см. схему 26, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,65 (силикагель; толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 6:2:2).

Препаративный пример 103

О- (6-O-Бензоил-4-O-левулинил -2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)- [О-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)] ₃-6 -O-ацетил-2,3-ди-O-метил-,-D- глюкопираноза (116)

Раствор 324 г (0,153 ммоль) соединения (115) и 22,3 мкл (0,256 ммоль) морфолина в 2 мл толуола перемешивают в течение 4-х часов при температуре 35^oC. Затем снова добавляют 22,3 мкл морфолина и реакционную смесь перемешивают в течение 20 часов при температуре 35^oC. Смесь быстро охлаждают с помощью воды. После экстракции дихлорметаном органическую фазу промывают последовательно 0,1 н. соляной кислотой и водой, сушат и выпаривают досуха. После хроматографирования на колонке с силикагелем выделяют 280 мг соединения (116) (см. схему 27, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,45 (силикагель; толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 6:2:2).

Препаративный пример 104

О-(6-O-Бензоил-4-O- левулинил-2,3-ди-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4) -[О-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4)] ₃ -6-O-ацетил-2,3-ди-O -метил-,-D-глюкопираноза-трихлорацетимидат (117)

39 мкл (0,39 ммоль) Трихлорацетонитрила и 4,7 мг карбоната цезия добавляют к раствору 138 мг (0,066 ммоль) соединения (116) в 1,5 мл дихлорметана. После перемешивания в течение двух часов смесь отфильтровывают, концентрируют и остаток хроматографируют на колонке с силикагелем, получая 152 мг имидата (117) (см. схему 27, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,35 (силикагель; толуол/этилацетат/этанол в объемном соотношении 8:1:1).

Препаративный пример 105

Метил-2-O-бензил -4,6-O-бензилиден- -D-глюкопиранозид (119)

60 г Соединения (118) (имеется в продаже) растворяют в 858 мл диметилформамида с 50,5 мл бензилбромида. После охлаждения до 10^oC прикапывают 20%-ный водный раствор гидроксида натрия. После перемешивания в течение 1 часа повышают температуру до 20^oC и смесь перемешивают в течение дополнительных 20 часов. После этого раствор выливают в смесь ледяной воды с толуолом и экстрагируют. Органическую фазу концентрируют и сырой продукт очищают путем кристаллизации, получая 30,0 г соединения (119) (см. схему 28, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,60 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 7: 3).

Препаративный пример 106

Метил-2-O-бензил-4,6-O-бензилиден -3-O-п-метоксибензил- -D-глюкопиранозид (120)

26,4 г Соединения (119) растворяют в 211 мл диметилформамида и охлаждают до температуры 5^oC. В атмосфере азота добавляют 2,5 г гидрида натрия, затем прикапывают 13,3 г 4-метоксибензилхлорида и смесь перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. Смесь разбавляют этилацетатом, промывают 2 раза водой и концентрируют, получая 40,7 г соединения (120) (см. схему 28, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,80 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 7: 3).

Препаративный пример 107

Метил-2-O-бензил-3-O-п-метоксибензил- -D-глюкопиранозид (121)

34,9 г соединения (120) растворяют в 60%-ном водном растворе уксусной кислоты и перемешивают в течение 4-х часов при температуре 60^oC. Смесь разбавляют толуолом и концентрируют. Очистка путем хроматографирования на колонке с силикагелем позволяет получить 26,4 г соединения (121) (см. схему 28, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,07 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 7: 3).

Препаративный пример 108

Метил-2-O-бензил-3-O -п-метоксибензил-6-O-метил--D- глюкопиранозид (122)

26,4 г соединения (121) в атмосфере азота растворяют в 263 мл дихлорметана. При комнатной температуре добавляют 11,6 г триметилоксонийтетрафторбората и 17,4 г 2,6-ди- трет-бутил-4-метилпиридина. Спустя 4 часа смесь выливают в ледяную воду и экстрагируют дихлорметаном. Органическую фазу промывают раствором гидрокарбоната натрия и концентрируют. Очистка сырого продукта путем хроматографирования на колонке с силикагелем позволяет получить 18,5 г соединения (122) (см. схему 28, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,25 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 7: 3).

Препаративный пример 109

Этил-2,4,6-три-O- ацетил-3-O-метил-1-тио- -L- идопираноза 124

48,4 г соединения (123) (1,2,4,6-тетра-O- ацетил-3-O-метил--L-идопираноза) [Jaurand и др., Bio. Med. Chem. Lett., 2 897-900 (1992)] растворяют в 175 мл толуола. В атмосфере азота добавляют 20 мл этантиола и 134 мл эфирата трифторида бора в толуоле. После перемешивания в течение 1 часа добавляют 400 мл водного раствора гидрокарбоната натрия и смесь перемешивают в течение часа. Затем смесь выливают в этилацетат, органическую фазу промывают два раза водой и концентрируют. Очистка путем хроматографирования на колонке с силикагелем позволяет получить 29,6 г соединения (124) (см. схему 28, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,45 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 6: 4).

Препаративный пример 110

Метил-O-(2,4,6-три-O-ацетил-3-O-метил- -L-идопиранозил)- (1--->4)-2-O-бензил-3-O- п-метоксибензил-6-O-метил- -D-глюкопиранозид (125)

17,5 г соединения (122) и 28,2 г соединения (124) в атмосфере азота растворяют в 525 мл толуола. После добавления молекулярного сита реакционную смесь охлаждают до температуры -20^oC. При непрерывном токе азота прикапывают свежеприготовленный 0,1 М раствор N-йодсукцинимида (17,4 г) и трифторметансульфокислоты (1,38 мл) в смеси диоксана с дихлорметаном в объемном соотношении 1:1. Спустя 10 минут реакционную смесь красного цвета отфильтровывают и промывают последовательно водным раствором тиосульфата натрия и водным раствором гидрокарбоната натрия. Органическую фазу концентрируют в вакууме и выделяют 30,0 г соединения (125) (см. схему 28, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,45 (силикагель; дихлорметан/этилацетат в объемном соотношении 8:2).

Препаративный пример 111

Метил-O-(3-O-метил- -L-идопиранозил)-(1--->4)-2-O- бензил-3-O-п -метоксибензил-6-O-метил- -L-глюкопиранозид (126)

30,0 г соединения (125) растворяют в 460 мл смеси метанола с диоксаном в объемном соотношении 1:1 и добавляют третбутилат калия. Спустя 15 минут смесь нейтрализуют с помощью смолы Dowex 50WX8 (H⁺) и концентрируют в вакууме. Очистку осуществляют путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 17,4 г соединения (126) (см. схему 28, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,25 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 95:5).

Препаративный пример 112

Метил-O-(4,6-O-изопропилиден-3-O-метил- -L-идопиранозил)- (1--->4)-2-O-бензил-3-O -п-метоксибензил-6-O-метил- -D-глюкопиранозид (127)

В атмосфере азота 17,4 г соединения (126) растворяют в 77 мл диметилформамида. Добавляют 26 мл 2,2-диметоксипропана и п-толуолсульфокислоту и смесь затем перемешивают в течение 30 минут. Разбавление смеси водным раствором гидрокарбоната натрия, затем ее экстракция этилацетатом позволяет получить, после выпаривания растворителя, 19,7 г соединения (127) (см. схему 28, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,45 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 95:5).

Препаративный пример 113

Метил-O-(4,6-O- изопропилиден-2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозил)- (1--->4)-2-O-бензил-3-O-п -метоксибензил-6-O-метил- -D-глюкопиранозид (128)

18,5 г соединения (127) растворяют в 24,4 мл диметилформамида и охлаждают до температуры 0^oC. В атмосфере азота добавляют 1,47 г (60%-ная дисперсия в масле) гидрида натрия и 2,36 мл подметана. Спустя один час избыток гидрида натрия разлагают с помощью метанола и смесь экстрагируют дихлорметаном, экстракт концентрируют и получают 20,0 г соединения (128) (см. схему 28, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,85 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 95:5).

Препаративный пример 114

Метил-O-(4,6-O-изопропилиден-2,3-ди-O-метил- -L- идопиранозил)-(1--->4)-2-O-бензил-6-O-метил- -D- глюкопиранозид (129)

18,4 г соединения (128) растворяют в 838 мл дихлорметана и 168 мл воды. Добавляют 7,1 г 2,3-дихлор-5,6-дициано-1,4- бензохинона и смесь перемешивают в течение 18 часов при температуре 4^oC. Смесь выливают в водный раствор гидрокарбоната натрия и экстрагируют дихлорметаном. Концентрирование органической фазы дает 12,7 г соединения (129) (см. схему 29, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,40 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 95:5).

Препаративный пример 115

Метил-O-(4,6-O-изопропилиден -2,3-ди-O-метил- -L- идопиранозил)-(1--->4)-2,3-ди -O-бензил-6-O-метил- -D- глюкопиранозид (130)

10,5 г соединения (129) в атмосфере азота растворяют в 178 мл безводного диметилформамида, затем охлаждают до температуры 0^oC. Добавляют 1,91 г (60%-ная дисперсия в масле) гидрида натрия, затем прикапывают 3,3 мл бензилбромида. Спустя 30 минут реакция прекращается и избыток гидрида натрия разлагают с помощью метанола. Добавляют воду и смесь экстрагируют два раза этилацетатом. Выпаривание растворителя позволяет получить 13,6 г соединения (130) (см. схему 29, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,50 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 1: 1).

Препаративный пример 116

Метил-O-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозил)-(1--->4)-2,3- ди-O-бензил-6-O-метил- -D-глюкопиранозид (131)

Соединение (130) растворяют в смеси уксусной кислоты с водой в объемном соотношении 77: 33 и перемешивают в течение ночи. Смесь выпаривают два раза совместно с толуолом и очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 11,5 г соединения (131) (см. схему 29, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,09 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 1: 1);

R_F = 0,68 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 9:1).

Препаративный пример 117

Метил-O-(2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуроновая кислота)- (1--->4)-2,3-ди-O-бензил-6-O-метил- -D-глюкопиранозид (132)

К раствору 11,6 г соединения (131) в 60 мл дихлорметана добавляют 33 мг 2,2,6,6-тетраметил-1-пиперидинилоксида, 40 мл раствора гидрокарбоната натрия, 218 мг бромида калия и 289 мг тетрабутиламмонийхлорида. Смесь охлаждают до температуры 0^oC и в течение 15 минут добавляют смесь 44 мл насыщенного раствора хлорида натрия, 21,8 мл насыщенного раствора гидрокарбоната натрия и 50 мл 1,3 М раствора гипохлорита натрия. После перемешивания в течение 1 часа смесь разбавляют водой и экстрагируют 3 раза дихлорметаном. Органическую фазу промывают водным раствором хлорида натрия, сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и выпаривают досуха, получая 13,4 г сырого соединения (132) (см. схему 29, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,14 (силикагель; дихлорметан/метанол в объемном соотношении 9:1).

Препаративный пример 118

Метил-O-(бензил-2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуронат) (1--->4)-2,3-ди-O-бензил-6-O-метил- -D-глюкопиранозид (133)

В атмосфере азота соединение (132) растворяют в 110 мл диметилформамида. Добавляют 6,7 г гидрокарбоната калия и 10,7 мл бензилбромида и смесь перемешивают в течение 90 минут. Добавляют этилацетат и воду, затем после экстракции органическую фазу концентрируют. Очистка путем хроматографирования на колонке с силикагелем позволяет получить 9,9 г соединения (133) (см. схему 29, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,43 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 4: 6).

Препаративный пример 119

Метил-O-(бензил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозилуронат)- (1--->4)-2,3-ди-O-бензил-6-O-метил- -D-глюкопиранозид (134)

9,9 г соединения (133) растворяют в 300 мл метанола и кипятят с обратным холодильником в атмосфере азота. Прикапывают 65,2 мл 1 М раствора метилата натрия в метаноле и смесь перемешивают и кипятят с обратным холодильником в течение трех часов. Смесь затем охлаждают до комнатной температуры, добавляют 22,2 мл 1 н. раствора гидроксида натрия и реакционную смесь перемешивают еще в течение 90 минут. После нейтрализации с помощью смолы Dowex 50WX8 (H⁺) и отфильтровывания смесь концентрируют. В атмосфере азота чистый продукт растворяют в 192 мл диметилформамида и добавляют молекулярное сито. Добавляют 3,2 г гидрокарбоната калия и 4,8 мл бензилбромида и смесь перемешивают в течение 5 часов. После добавления этилацетата и воды, экстракции и разделения двух фаз органическую фазу концентрируют. Сырой продукт очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 6,19 г соединения (134) и 1,88 г исходного соединения (133) (см. схему 29, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,55 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 4: 6).

Препаративный пример 120

(Метил-O-(бензил-4-O- левулинил-2,3-ди-O-метил- -D- глюкопиранозилуронат) -(1--->4)-2,3-ди-O-бензил-6-O-метил- -D- глюкопиранозид (135)

6,2 г соединения (134) растворяют в 40 мл диоксана. Добавляют 2,1 г левулиновой кислоты, 3,75 г дициклогексилкарбодиимида и 0,2 г 4-диметиламино пиридина и смесь перемешивают в течение двух часов, в атмосфере азота. Добавляют 95 мл диэтилового эфира и осадок отфильтровывают. Фильтрат промывают водным раствором гидросульфата калия, сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и концентрируют. Кристаллизация из смеси диэтилового эфира с гептаном позволяет получить 6,2 г соединения (135) (см. схему 29, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,26 (силикагель; дихлорметан/ацетон в объемном соотношении 95:5).

Препаративный пример 121

Метил-O-(бензил-4-O-левулинил -2,3-ди-O-метил- -D- глюкопиранозилуронат)-(1--->4) -1,3-ди-O-ацетил-O-бензил-6-O- метил-,-D-глюкопираноза (136)

6,1 г соединения (135) в атмосфере азота растворяют в 256 мл уксусного ангидрида и охлаждают до температуры -20^oC. В течение 30 минут прикапывают смесь 4,9 мл серной кислоты в 49 мл уксусного ангидрида. Спустя 60 минут добавляют ацетат натрия вплоть до получения смеси с нейтральным значением pH. Тогда добавляют этилацетат и воду и органическую фазу концентрируют. Очистка путем хроматографирования на колонке с силикагелем позволяет получить 4,2 г соединения (136) (см. схему 29, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,24 (силикагель; дихлорметан/этилацетат в объемном соотношении 8:2).

Препаративный пример 122

О-(Бензил-4-O-левулинил-2,3 -ди-O-метил--D- глюкопиранозилуронат)- (1--->4)-3-O-ацетил-2-O-бензил-6-O- метил-, -D-глюкопираноза (137)

4,2 г соединения (136) растворяют в 42 мл тетрагидрофурана и добавляют 4,1 мл пиперидина. Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Добавляют этилацетат и смесь промывают 0,5 н. соляной кислотой. Органическую фазу концентрируют и остаток очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 3,2 г соединения (137) (см. схему 29, приведенную в конце описания).

ТСХ: RF = 0,33 (силикагель; дихлорметан/этилацетат в объемном соотношении 1:1).

Препаративный пример 123

О-(Бензил-4-O-левулинил -2,3-ди-O-метил- -D- глюкопиранозилуронат)-(1--->4) -3-O-ацетил-2-O-бензил-6-O- метил- -D-глюкопираноза-трихлорацетимидат (138)

1,59 г соединения (137) в атмосфере азота растворяют в безводном дихлорметане. Добавляют 1,1 мл трихлорацетонитрила и 72 мг карбоната цезия и смесь перемешивают в течение 1 часа. Карбонат цезия отфильтровывают и фильтрат концентрируют. Очистка путем хроматографирования на колонке с силикагелем позволяет получить 1,57 г соединения (138) (см. схему 29, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,60 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 3: 7).

Препаративный пример 124

Метил-O-(Бензил-4-O-левулинил-2,3-ди-O-метил- -D- глюкопиранозилуронат)-(1--->4) -O-(3-O-ацетил-2-O-бензил-6-O- метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(бензил-2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуронат)-(1--->4) -2,3-ди-O-бензил-6-O-метил- -D-глюкопиранозид (139)

В атмосфере азота смесь 300 мг соединения (133) и 455,6 мг соединения (138) выпаривают совместно с толуолом и растворяют в 6 мл дихлорметана. После добавления молекулярного сита реакционную смесь охлаждают до температуры -20^oC. После перемешивания в течение 20 минут добавляют триметилсилилтрифторметансульфонат (15 мол.% по отношению к соединению (138)). Спустя 10 минут реакцию прекращают с помощью водного раствора гидрокарбоната натрия. После отфильтровывания молекулярного сита фильтрат разбавляют дихлорметаном, промывают водой, концентрируют и очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 560 мг соединения (139) (см. схему 30, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,50 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 3: 7).

Препаративный пример 125

Метил-O-(бензил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозилуронат)- (1--->4)-O-(3-O -aцeтил-2-O-бeнзил-6-O-мeтил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(бензил-2,3-ди-O-метил--L- идопиранозилуронат)-(1--->4)-2,3-ди -O-бензил-6-O-метил--D- глюкопиранозид (140)

532,6 мг соединения (139) растворяют в 1,9 мл пиридина и добавляют, при комнатной температуре, смесь 2,4 мл уксусной кислоты, 0,3 мл гидразингидрата в 1,9 мл пиридина. После перемешивания в течение 9 минут добавляют дихлорметан и воду. Органическую фазу отделяют и промывают последовательно 0,1 н. соляной кислотой, водным раствором гидрокарбоната натрия и водой. Органическую фазу концентрируют и очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 451 мг соединения (140) (см. схему 30, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,45 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 3: 7).

Препаративный пример 126

Метил-O-(6-O-бензоил-4-O-левулинил -2,3-ди-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -[О-(2,3,6-три-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)] ₃ -O-(6-O-ацетил-2,3-ди-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(бензил-2,3-ди-O-метил--D- глюкопиранозилуронат)-(1--->4) -O-(3-O-ацетил-2-O-бензил-6-O- метил--D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(бензил-2,3-ди-O- метил--L-идопиранозилуронат) -(1--->4)-2,3-ди-O-бензил-6-O-метил--D- глюкопиранозид (141)

Смесь 144 мг (0,064 ммоль) соединения (117) и 76 г (0,058 ммоль) соединения (140) выпаривают совместно с толуолом и остаток растворяют в 3,0 мл смеси дихлорметана с диэтиловым эфиром в соотношении 1:2. В атмосфере азота добавляют 140 мг молекулярного сита и смесь охлаждают до температуры 0^oC. Добавляют 128 мкл 0,1 М раствора третбутилдиметилсилилтрифторметансульфоната в дихлорметане и спустя 15 минут реакцию прекращают с помощью раствора гидрокарбоната натрия. После экстракции водой и дихлорметаном органическую фазу сушат и концентрируют. Продукт очищают сначала путем хроматографирования на Sephadex LH-20 (дихлорметан/метанол в объемном соотношении 1:1), затем путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 124 мг соединения (141) в виде смеси / = 8/2 (см. схему 31, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,60 (силикагель; толуол/ацетон в объемном соотношении 1:1).

Препаративный пример 127

Метил-O-(6-O-бензоил-2,3 -ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-[О- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O- метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)] ₃-O-(6-O-ацетил-2,3-ди-O- метил-,-D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(бензил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозилуронат)- (1--->4)-O-(3-O-ацетил-2-O-бензил-6- О-метил- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(бензил-2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуронат)- (1--->4)-2,3-ди-O-бензил-6-O-метил- -D-глюкопиранозид (142)

Соединение (141) превращают в соединение (142) согласно методике, описанной для получения соединения (140). Соединение (142) выделяют в виде смеси / = 8/2 (см. схему 31, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,45 (силикагель; толуол/ацетон в объемном соотношении 1:1).

Препаративный пример 128

O-(2,3,4,6-Тетра-O-ацетил- -глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-ацетил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-1,2,3,6-тетра- О-ацетил--D-глюкопираноза (144)

7 г (13,9 ммоль) мальтотриозы (имеется в продаже) при температуре 155^oC добавляют маленькими порциями к суспензии 7 г (85 ммоль) ацетата натрия в 70 мл уксусного ангидрида. Спустя 15 минут прозрачный раствор охлаждают и реакцию прекращают с помощью 700 мл ледяной воды. После экстракции этилацетатом органическую фазу промывают водой, сушат над сульфатом магния, отфильтровывают и концентрируют, получая 13,1 г соединения (144) (см. схему 32, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,53 (силикагель; дихлорметан/этилацетат в объемном соотношении 7:3).

Препаративный пример 129

Этил-O-(2,3,4,6-Тетра-O-ацетил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-ацетил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-2,3,6-три-O- ацетил-1-тио- -D-глюкопиранозид (145)

13 г (13,5 ммоль) соединения (144) растворяют в 80 мл толуола. В атмосфере азота добавляют 1,97 мл (26,9 ммоль) этантиола и 13,7 мл 1 М раствора в толуоле диэтилэфирата трифторида бора. После перемешивания в течение 60 часов смесь разбавляют водой и дихлорметаном. После экстракции органическую фазу промывают 10%-ным раствором гидрокарбоната натрия и водой, сушат, отфильтровывают и концентрируют. Сырой продукт очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем, получая 8,6 г соединения (145) (см. схему 32, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,60 (силикагель; дихлорметан/этилацетат в объемном соотношении 7:3).

Препаративный пример 130

Этил-O--D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -1-тио--D-глюкопиранозид (146).

Соединение (145) превращают в соединение (146) согласно методике, описанной для получения соединения (95).

ТСХ: R_F = 0,80 (силикагель; этилацетат/пиридин/уксусная кислота/вола в объемном соотношении 13:7:1,6:4).

Препаративный пример 131

Этил-O-(2,3,4,6-Тетра-O-бензоил- -глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(2,3,6-три-O-бензоил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -2,3,6-три-O-бензоил-1-тио- -D-глюкопиранозид (147)

Соединение (146) превращают в соединение (147) согласно методике, описанной для получения соединения (92).

ТСХ: R_F = 0,50 (силикагель; толуол/этилацетат в объемном соотношении 9: 1).

Препаративный пример 132

Метил-O-(2,3,4,6-тетра-O-бензоил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)- O-(2,3,6-три-O-бензоил--D -глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6- три-O-бензоил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(6-O-бензоил-2,3- ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил-(1--->4)-[O-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4)] ₃-O-(6-O-ацетил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(бензил-2,3-ди-O-метил- -D- глюкопиранозилуронат)-(1--->4)-O-(3-O-ацетил-2-O-бензил-6-O- метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(бензил-2,3-ди-O-метил- -L-идопиранозилуронат)-(1--->4)-2,3-ди-O-бензил-6-O-метил--D- глюкопиранозид (148)

105 мг (0,066 ммоль) тиогликозида (147) 55 мг (0,017 ммоль) акцептора (142) (/ = 8/2) сочетают согласно методике, описанной для получения (109). Продукт очищают сначала путем хроматографирования на Sephadex LH-20 (дихлорметан/метанол в соотношении 1:1), затем путем хроматографирования на колонке с силикагелем (диэтиловый эфир/этилацетат/этанол в объемном соотношении 9:0,5:0,5), получая 49 мг соединения (148) (см. схему 33, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,30 (силикагель; диэтиловый эфир/этилацетат/ этанол в объемном соотношении 85:7,5:7,5).

Препаративный пример 133

Метил-O-(2,3,4,6-тетра-O-бензоил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)- O-(2,3,6-три-O-бензоил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6- три-O-бензоил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(6-O-бензоил-2,3- ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-О-метил- -D-глюкопиранозил-(1--->4)-[O-(2,3,6-три-O- метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)] ₃-O-(6-O-ацетил-2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(бензил-2,3-ди-O-метил--D- глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-O-(3-O-ацетил-6- O-метил--D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил--L- идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-6-O-метил- -D- глюкопиранозид (149)

Раствор 47 мг (0,01 ммоль) соединения (148) в 10 мл этилацетата перемешивают, в атмосфере азота, в присутствии 10%-ного палладия-на-угле (90 мас.% по отношению к соединению (148)) в течение трех часов. Фильтрат концентрируют с получением 42 мг соединения (149) (см. схему 33, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,35 (силикагель; этилацетат/пиридин/уксусная кислота/вода в объемном соотношении 20:7:1,6:4).

Препаративный пример 134

Метил-O--D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-- D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(-D-глюкопиранозил) -(1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил-(1--->4) -[O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4)] ₃ -O-(2,3-ди-O-метил- -D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3-ди-O-метил- -D- глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4) -O-(6-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3-ди-O-метил--L- идопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-6-O-метил--D- глюкопиранозид (150)

Смесь 0,22 мл метанола и 0,66 мл 0,66 н. раствора гидроксида натрия добавляют к 41 мг (0,01 ммоль) соединения (149), затем перемешивают в течение 20 часов при комнатной температуре. Смесь разбавляют водой и подкисляют с помощью 0,5 н. раствора соляной кислоты для достижения значения pH 6,5. После концентрирования, чистый продукт обессоливают на колонке с Sephadex G-25, используя смесь воды с ацетонитрилом в объемном соотношении 9:1. Содержащие гексадекасахарид фракции объединяют и лиофилизируют, получая 26 мг соединения (150) в виде белого аморфного порошка (см. схему 33, приведенную в конце описания).

ТСХ: R_F = 0,35 (силикагель; этилацетат/пиридин/уксусная кислота/вода в объемном соотношении 8:7:1,6:4).

Препаративный пример 135

6-O-Трет-бутилдиметилсилил-1,2-O-изопропилиден-3-O-метил--D-глюкофураноза (152)

Поглощают 10 г (42,7 ммоль) диола (151) в 100 мл безводного дихлорметана и добавляют 7,1 г (47,3 ммоль) трет-бутилдиметилсилилхлорида и 5,8 г (85,3 ммоль) имидазола. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре. Спустя 2 часа смесь разбавляют дихлорметаном и промывают водой. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют и остаток очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем (этилацетат/циклогексан в объемном соотношении 1:9), получая 11,9 г (80%) целевого продукта (152) в виде сиропа (см. схему 34, приведенную в конце описания).

[]_D= -34 (с = 1,9; хлороформ).

Препаративный пример 136

6-O-Трет-бутилдиметилсилил-1,2-O-изопропилиден-3-O-метил-5-C-винил--D-глюкофураноза (154)

При температуре -78^oC в 40 мл безводного дихлорметана добавляют 3,2 мл (36,8 ммоль) оксалилхлорида и 5,2 мл (73,4 ммоль) диметилсульфоксида и перемешивают в течение 30 минут. Затем добавляют 6,4 г (18,4 ммоль) соединения (152) и смесь перемешивают еще в течение 1 часа. После этого добавляют 15,3 мл (110,0 ммоль) триэтиламина и спустя 30 минут реакционную смесь разбавляют дихлорметаном. Обычная обработка позволяет получить 5-улозное соединение (153), которое сразу используют в следующей реакции. Сырой кетон (153) обрабатывают с помощью 100 мл безводного тетрагидрофурана и при температуре 0^oC добавляют 28 мл 1 М раствора винилмагнийбромида (27,6 ммоль) в тетрагидрофуране. Спустя 1 час реакционную смесь разбавляют (раствором) хлорида аммония и промывают водой. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют и остаток очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем (этилацетат/циклогексаи в объемном соотношении 1:9), получая 4,8 г (70%) целевого соединения (154) в виде сиропа (см. схему 34, приведенную в конце описания).

[]_D= -40 (с = 1,3; хлороформ).

Анализ:

рассчитано, %: C 57,72 H 9,15

найдено, %: C 57,77 H 9,23.

Препаративный пример 137

1,2,4,6-Тетра-O-ацетил -3-O-мегил-5-C-винил- -D- глюкопираноза (156)

3,5 г (9,4 ммоль) соединения (154) вносят в 50 мл воды, затем туда добавляют 1 г смолы IR-120 и нагревают при температуре 80^oC в течение 6 часов. Смолу отфильтровывают и фильтрат концентрируют. Сырой продукт (155) ацетилируют, используя 12 мл уксусного ангидрида и 13 мл пиридина. Избыток уксусного ангидрида разлагают с помощью метанола и растворители концентрируют. Остаток экстрагируют водой и дихлорметаном. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют и после очистки путем хроматографирования на колонке с диоксидом кремния (этилацетат/циклогексан в объемном соотношении 3: 2) получают 2,7 г (75%) тетраацетатного соединения (156) в виде твердого вещества (см. схему 34, приведенную в конце описания). Т.пл. = 50^oC.

[]_D= -84 (с = 1,6; хлороформ).

Анализ:

рассчитано, %: C 52,47 H 6,19

найдено, %: C 52,51 H 6,19

Масс-спектрометрия (химическая ионизация): 406 (M+NH₄); 389 (M+1).

Препаративный пример 138

Метил-2,3,6-три-О-бензил-4 -O-(2,4,6-три-O-ацетил-3-O-метил-5- C-винил--D-глюкопиранозил)- -D-глюкопиранозид (158)

1,6 г (4,1 ммоль) соединения (156) и 2,1 г (4,5 ммоль) соединения (157) [P.J. Garegg и H. Hultberg, Carbohydr. Res., 93, C10 (1981)] растворяют в 50 мл безводного дихлорметана и добавляют 4,0 г молекулярного сита. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение одного часа, затем при температуре -78^oC добавляют 0,95 мл (5,2 ммоль) триметилсилилтрифлата. После этого реакционную смесь медленно доводят до комнатной температуры. Спустя 2 часа реакционную смесь нейтрализуют с помощью триэтиламина и фильтруют через целит; фильтрат промывают водой. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют и остаток очищают путем хроматографирования на диоксиде кремния (этилацетат/циклогексан в объемном соотношении 4:1), получая 2,77 г (85%) целевого соединения (158) в виде твердого вещества (см. схему 34, приведенную в конце описания). Т.пл. = 47^oC.

[]_D= -36 (с = 0,6; хлороформ).

Анализ:

рассчитано, %: C 65,14 H 6,61

найдено, %: C 65,09 H 6,70

Препаративный пример 139

Метил-2,3,6-три-O-бензил-4 -O-(4,6-O-изопропилиден-3-O-метил- 5-C-винил--D-глюкопиранозил)- -D-глюкопиранозид (160)

2,7 г (3,4 ммоль) соединения (158) растворяют в 40 мл метанола, при температуре 0^oC добавляют каталитическое количество натрия и перемешивают при комнатной температуре в течение трех часов. Растворитель удаляют и остаток (159) обрабатывают с помощью 40 мл безводного ацетона и добавляют 2 мл 2,2-диметоксипропана и каталитическое количество п-толуолсульфокислоты. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель выпаривают, остаток обрабатывают хлороформом и промывают водой. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют и остаток очищают путем хроматографирования на колонке с диоксидом кремния (этилацетат/циклогексан в объемном соотношении 1:1), получая 1,7 г (70%) (4", 6 "-изопропилиден-O-)-производного (160) в виде твердого вещества (см. схему 34, приведенную в конце описания). Т.пл.= 55^oC.

[]_D= +13 (с = 0,8; хлороформ).

Анализ:

рассчитано, %: C 67,97 H 7,13

найдено, %: C 67,87 H 7,16

Масс-спектрометрия (химическая ионизация): 724 (M+NH₄); 707 (M+1).

Препаративный пример 140

Метил-2,3,6-три-O-бензил -4-O-(4,6-O-изопропилиден-3-O-метил- 5-C-винил--D-маннопиранозил)- -D-глюкопиранозид (162)

0,35 мл (4,0 ммоль) Оксалилхлорида и 0,57 мл (8,0 ммоль) безводного диметилсульфоксида в 10 мл безводного дихлорметана перемешивают в течение 30 минут при температуре -78^oC. К раствору добавляют 1,4 г (2,0 ммоль) соединения (160) в 10 мл безводного дихлорметана и перемешивают еще в течение 45 минут. Реакционную смесь нейтрализуют путем добавления 1,7 мл (12,0 ммоль) безводного триэтиламина, затем разбавляют дихлорметаном. После промывки реакционной смеси водой, органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют и остаток (161) без очистки сразу используют в следующей реакции. Кетон (161) вносят в 15 мл безводного тетрагидрофурана и при температуре -78^oC добавляют 4 мл 1 н. раствора супергидрида (4,0 ммоль) в тетрагидрофуране. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 часа и затем добавляют 2 мл 5%-ного раствора гидроксида натрия и 1 мл пероксида водорода. Растворитель выпаривают и остаток обрабатывают этилацетатом и промывают водой. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют и остаток очищают путем хроматографирования (этилацетат/циклогексан в объемном соотношении 2:1), получая 1,0 г (70%) соединения (162) (см. схему 34 , приведенную в конце описания).

[]_D= -11 (с = 0,5; хлороформ).

Масс-спектрометрия (химическая ионизация): 724 (М+18); 707 (М+1).

Препаративный пример 141

Метил-2,3,6-три-O-бензил-4 -O-(2-O-ацетил-3-O-метил-5-C-винил- -D-маннопиранозил)- -D-глюкопиранозид (164)

940 мг (1,3 ммоль) соединения (162) растворяют в 3 мл пиридина и добавляют 0,3 мл уксусного ангидрида. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение трех часов. Избыток пиридина и уксусного ангидрида удаляют и остаток (163) прямо используют для удаления изопропилиденовой защитной группы с помощью 5 мл 80%-ной уксусной кислоты при температуре 60^oC в течение двух часов. Избыток уксусной кислоты удаляют путем выпаривания и остаток очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем (этилацетат/циклогексан в объемном соотношении 4:1), получая 660 мг (70%) диола (164) в виде твердого вещества (см. схему 34, приведенную в конце описания). Т.пл. = 53^oC.

[]_D= -10 (с = 0,8; хлороформ).

Масс-спектрометрия (химическая ионизация): 726 (М+18); 709 (М + 1).

Препаративный пример 142

Метил-2,3,6-три-O-бензил-4-(2-О-ацетил -3-O-метил-6-O-тозил- 5-C-винил--D-маннопиранозил)- -D-глюкопираноза (165)

600 мг (0,9 ммоль) соединения (164) растворяют в 3 мл пиридина и добавляют 240 мг (1,3 ммоль) тозилхлорида. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение трех часов. Растворитель выпаривают, остаток разбавляют хлороформом и промывают водой. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют и остаток очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем (этилацетат/циклогексан в объемном соотношении 1: 1), получая 297 мг (80%) тозилированного соединения (165) в виде сиропа (см. схему 34, приведенную в конце описания).

[]_D= -26 (с = 0,8; хлороформ).

Препаративный пример 143

Метил-2,3,6-три-O-бензил-4-(2,6- ангидро-3-O-метил-5-C-винил- -D-маннопиранозил)- -D-глюкопиранозид (166)

550 мг (0,6 ммоль) соединение (165) вносят в 3 мл этанола и затем добавляют 5 мл 0,1 н. раствора гидроксида натрия в этаноле. Реакционную смесь нагревают при температуре 70^oC в течение трех часов, затем нейтрализуют с помощью смолы IR-120 (форма H⁺) и фильтруют через целит. Остаток после концентрирования очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем (этилацетат/циклогексан в объемном соотношении 1:1), получая 292 мг (70%) соединения (166) в виде сиропа (см. схему 34, приведенную в конце описания).

[]_D= +13 (с = 0,5; хлороформ).

Масс-спектрометрия: 666 (М+18).

Препаративный пример 144

Метил-2,3,6-три-O-бензил -4-(бензил-3-O-метил-2-O-5-C- метилиден- -L-идопирануроиат)- -D-глюкопиранозид (167)

260 мг (0,4 ммоль) соединения (166) растворяют в 20 мл дихлорметана, раствор перемешивают при температуре -78^oC, затем в течение 30 секунд пропускают путем барботирования озон. Окраска раствора становится бледно-желтой. К раствору добавляют диметилсульфид, затем реакционную смесь промывают водой. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют и без дополнительной очистки прямо используют в следующей реакции. Сырой альдегид вносят в 16 мл трет-бутанола и добавляют 5 мл 2-метилбут- 2-ена и 16 мл воды. После этого к смеси добавляют последовательно 700 мг NaH₂PO₄ и 700 мг NaClO₂. Суспензию интенсивно перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, разбавляют водой и экстрагируют этилацетатом. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют, затем прямо используют в следующей реакции. Сырую кислоту вносят в 25 мл диметилформамида и добавляют 0,7 г (2,0 ммоль) тетрабутиламмониййодида, 0,25 г (2,5 ммоль) гидрокарбоната калия и 0,250 мл (2,1 ммоль) бензилбромида. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 часов, затем экстрагируют водой и диэтиловым эфиром. Эфирную фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют и остаток очищают путем хроматографирования на колонке с силикагелем (этилацетат/циклогексан в объемном соотношении 2:1), получая 236 мг (80%) производного (167) в виде сиропа (см. схему 34, приведенную в конце описания).

Масс-спектрометрия (химическая ионизация): 774 (М + 18).

ПРИМЕРЫ

Пример 1

Метил-O-(3-O-метил -2,4,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)- O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-[О- (3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)₆-O- (2,3-ди-O-метил-6-O- сульфо--Dглюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3-ди-O-метил--D глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-O-(2,3,6 -три-O- сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3-ди-O-метил--L- идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-2,3,6 -три-O-сульфо--D- глюкопиранозид в виде натриевой соли (168)

Соединение (31) обрабатывают согласно Методике 5, получая соединение (168) (80% в расчете на три стадии).

[]_D= -41 (с = 0,8; вода).

ESIMS (отрицательные ионы): моноизотопная масса = 7133,26; химическая масса = 7138,90; экспериментальная масса = 7137,26 0,0 отн. масс. ед.

¹H-ЯМР (D₂O): (м.д.) основных аномерных протонов: 5,71; 5,48; 5,46; 5,44; 5,17; 5,08; 4,81; 4,78; 4,67.

Идентичная методика позволяет получить соединения (169) и (170) (см. табл. I).

Пример 4

Метил-O-(2,3-ди-O-метил -4,6-ди-сульфо- -D- глюкопиранозил)-(1--->4) -[О-(2,3-ди-O-метил-6-O-сульфо- -D- глюкопиранозил)-(1--->4)]₁₅ -O-(2,3-ди-O-метил- -D- глюкопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-O-(2,3,6-три-O- сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил- -L- идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-2,3,6-три-O-сульфо--D- глюкопиранозид в виде натриевой соли (171)

55 мг (10,5 ммоль) cоединения (51) обрабатывают согласно Методике 5, получая после лиофилизации 50 мг (77% в расчете на три стадии) сульфатированного продукта (171).

[]_D= +107 (с = 0,52; вода).

ESIMS (отрицательные ионы): моноизотопная масса = 6194,16; химическая масса = 6198,83; экспериментальная масса = 6195,33 1,79.

¹H-ЯМР (D₂O): (м.д.) основных аномерных протонов: 5,71; 5,67; 5,48; 5,43; 5,17; 5,10; 4,68.

Идентичная методика позволяет получить соединения (172) и (173) (см. табл. II).

Пример 7

Метил-O-(3-O-метил- 2,4,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-O-(3-O-метил-2,6-ди-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)- (1--->4)-[О-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)]₄-O-(2,3-ди-O- (метил-6-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3-ди-O- метил- -D-глюкопиранозилуроновая кислота-(1--->4)-O-(2,3,6-три- О-сульфо- -глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3-ди-O-метил- -L- идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-2,3,6 -три-O-сульфо--D- глюкопиранозид в виде натриевой соли (174)

Соединение (75) обрабатывают согласно Методике 5, получают соединение (174) (84% в расчете на три стадии).

[]_D= +62 (с = 0,46; вода).

ESIMS (отрицательные ионы): моноизотопная масса = 4966,39; химическая масса = 4970,04; экспериментальная масса = 4969,63 0,78 отн. масс. ед.

¹H-ЯМР (D₂O): (м.д.) основных аномерных протонов: 5,69; 5,63; 5,57; 5,46; 5,44; 5,41; 5,15; 5,06; 4,79; 4,66; 4,62; 4,41.

Следуя методике примера 7 и используя адекватные промежуточные продукты, получают соединения примеров 8-12, описанных в табл. III.

Пример 13

Метил-O-(2,3,4,6-тетра-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4)-O- (2,3,6-три-O-сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три- О-сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3-ди-O-метил-6-O- сульфо- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил- -D-глюкопиранозил)-(1--->4) -[O-(2,3,6-три-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3,6-три-O-метил--D- глюкопиранозил)-(1--->4)]₃ -O-(2,3-ди-O-метил-6-O-сульфо--D- глюкопиранозил)-(1--->4) -O-(2,3-ди-O-метил- -D- глюкопиранозилуроновая кислота) -(1--->4)-O-(6-O-метил- 2,3-ди-O-сульфо--D -глюкопиранозил)-(1--->4)-O-(2,3-ди-O-метил--L-идопиранозилуроновая кислота)-(1--->4)-6-O-метил-2,3-ди-O-cульфo- -D-глюкопиранозид (180)

26 мг (0,0084 ммоль) гексадекасахарида, из которого полностью удалены защитные группы, растворяют в 0,87 мл диметилформамида. В атмосфере азота добавляют 125 мг (0,67 ммоль, 80 экв.) комплекса триоксида серы с триэтиламином и смесь перемешивают в течение 16 часов при температуре 50^oC. Смесь охлаждают до температуры 0^oC и добавляют раствор 227 мг (2,6 ммоль) гидрокарбоната натрия в воде. Смесь концентрируют до маленького объема и вносят в колонку с Sephadex G-25, элюируя смесью воды с ацетонитрилом в объемном соотношении 9:1. Соответствующие фракции отделяют, концентрируют до маленького объема, вносят в колонку с ионообменной смолой Dowex XW4 (Na⁺) (вода) и элюат лиофилизируют, получая 37 мг соединения (180) в виде порошка белого цвета (см. схему 35, приведенную в конце описания).

[]_D= +67,6 (c = 1; вода).

ESIMS: молекулярная масса составляет 4370,6 (H⁺-форма).

C₁₂₈H₂₂₂O₁₁₃S₁₆ (теоретически рассчитанная молекулярная масса = 4370,14).

ЯМР; сдвиг аномерных протонов (м.д.): остаток 1: 5,17; остаток 2: 5,03; остаток 3: 5,41; остаток 4: 4,42; остаток 5: 5,49; остаток 6: 4,66; остатки 7, 9 и 11: 5,67; остатки 8, 10 и 12: 4,46; остаток 13: 5,61; остаток 14: 4,94; остаток 15: 5,59; остаток 16: 5,69.

Биологические испытания

Биологический тест на антитромботическую активность был осуществлен следующим образом.

Крысам вводили внутривенно исследуемые соединения и определяли величину ED₅₀ (эффективную дозу) на модели венозного стаза и индукции тромбопластином согласно методу, описанному J. Reyers и др. в Trombosis Research, 1980, 18, 669-674. Этот же показатель определялся на модели артериального тромбоза, вызванного имплантированным шунтом между сонной артерией и яремной веной крысы, согласно методике, описанной Umettsu и др. в Tromb. Haemost., 1978, 39, 74-83.

Результаты сведены в табл. IV.

Пример композиции в форме раствора:

Соединение примера 7 - 40 мг

вода до - 0,4 мл

При получении фармацевтических композиций используют традиционные методы в зависимости от желаемой препаративной формы. В данном случае получают раствор действующего начала путем растворения соединения в виде натриевой соли, выпускаемой в виде порошка, растворимого в воде.