способ получения и/или очистки клавулановой кислоты из ферментационного бульона посредством ультрафильтрации
Классы МПК: | C07D503/18 атомами кислорода |
Автор(ы): | ЦАПУДЕР Эгидий (SI) |
Патентообладатель(и): | Лек Фармасьютикал энд Кемикал КО. Д Д. (SI) |
Приоритеты: |
подача заявки:
1996-08-27 публикация патента:
20.06.2001 |
Изобретение относится к способу получения и/или очистки клавулановой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира, включающему в себя удаление твердых веществ из содержащего клавулановую кислоту ферментационного бульона посредством микрофильтрации с образованием первого фильтрата, имеющего рН 5,8-6,2, дальнейшее удаление твердых веществ из первого фильтрата посредством ультрафильтрации с использованием мембраны из полисульфона, имеющей отсечку молекулярной массы от 10 до 30 кДа и пропускающую способность от 10 до 30 л
м-2
ч-1, с образованием второго фильтрата, дальнейшее его концентрирование путем удаления воды и обработка концентрированного второго фильтрата с выделением клавулановой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира, при этом сокращается количество примесей, имеющих поглощение при 420 нм. Технический результат - повышение эффективности выделения и обесцвечивания клавулановой кислоты. 6 з.п. ф-лы.
![способ получения и/или очистки клавулановой кислоты из ферментационного бульона посредством ультрафильтрации, патент № 2169151](/images/patents/302/2169004/8226.gif)
![способ получения и/или очистки клавулановой кислоты из ферментационного бульона посредством ультрафильтрации, патент № 2169151](/images/patents/302/2169004/8226.gif)
Формула изобретения
1. Способ получения и/или очистки клавулановой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира, включающий в себя удаление твердых веществ из содержащего клавулановую кислоту ферментационного бульона посредством микрофильтрации с образованием первого фильтрата, имеющего рН 5,8-6,2, дальнейшее удаление твердых веществ из первого фильтрата посредством ультрафильтрации с образованием второго фильтрата, концентрирование второго фильтрата путем удаления воды и обработку концентрированного второго фильтрата с выделением клавулановой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира, отличающийся тем, что первый фильтрат фильтруют с использованием мембраны для ультрафильтрации, имеющей отсечку молекулярной массы от 10 до 30 кДа и пропускающую способность от 10 до 30 л![способ получения и/или очистки клавулановой кислоты из ферментационного бульона посредством ультрафильтрации, патент № 2169151](/images/patents/302/2169004/8226.gif)
![способ получения и/или очистки клавулановой кислоты из ферментационного бульона посредством ультрафильтрации, патент № 2169151](/images/patents/302/2169004/8226.gif)
![способ получения и/или очистки клавулановой кислоты из ферментационного бульона посредством ультрафильтрации, патент № 2169151](/images/patents/302/2169004/8226.gif)
![способ получения и/или очистки клавулановой кислоты из ферментационного бульона посредством ультрафильтрации, патент № 2169151](/images/patents/302/2169004/8226.gif)
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к процессу очистки и/или получения клавулановой кислоты и фармацевтически приемлемых солей и сложных эфиров клавулановой кислоты, в частности, но не исключительно, солей щелочных металлов, особенно клавуланата калия. Клавулановая кислота - это тривиальное название для (2R,5R,Z)-30(2-гидроксиэтилиден)-7-оксо-4-окса-1- азабицикло[3,2,0] гептан-2-карбоновой кислоты. Клавулановая кислота и ее соли щелочных металлов и сложные эфиры являются активными ингибиторами бета-лактамазы, продуцируемой некоторыми грамположительными, а также грамотрицательными микроорганизмами. В дополнение к ингибированию бета-лактамазы, клавулановая кислота и ее соли щелочных металлов также обладают синергетическим действием с пенициллиновыми и цефалоспориновыми антибиотиками. Клавулановую кислоту и ее соли используют в фармацевтических средствах для предотвращения деактивации бета-лактамовых антибиотиков. Коммерческие средства содержат клавуланат калия в комбинации с тригидратом амоксициллина. Клавуланат калия более стабилен, чем свободная кислота или другие соли. Клавулановую кислоту получают ферментацией микроорганизмом, таким как штаммы Streptomyces, такие как S.clavuligerus NRRL 3585, S.jumonjinensis NRRL 5741 и S.katsurahamanus IF013716 и Streptomyces sp. P6621FERM P2804. Водную культуру, полученную после ферментации, очищают и концентрируют в соответствии с традиционными способами, например посредством фильтрации и хроматографической очистки, как описано в патенте GB 1508977, предварительно с экстракцией водного раствора органическим растворителем для получения раствора неочищенной клавулановой кислоты в растворителе. Известно [GB 1508977] получение клавуланатов посредством фильтрации ферментационного бульона путем пропускания через анионообменную смолу. Этот способ может обеспечивать приемлемые выходы, но требует сложных хроматографических методов очистки, а использование колонок со смолой обуславливает существенные инвестиции в производство в коммерческих масштабах. Известен [GB 1543563] ферментационный способ, при котором значение pH среды поддерживают в интервале от 6,3 до 6,7. Фармацевтически приемлемые соли, такие как клавуланат калия, получают из клавуланата лития реакцией обмена. Известно [ЕР-А-0026044] использование трет-бутиламинной соли клавулановой кислоты в качестве промежуточного соединения для очистки клавулановой кислоты. Известно [ВЕ-862211 или DE 2733230], что эта соль даже более стабильна, чем клавуланаты натрия или калия. Третичный бутиламин является токсичным соединением, а также трудно удаляемым из сточных вод, что порождает серьезные проблемы загрязнения окружающей среды. Известно [ЕР-А-0562583] использование солей клавулановой кислоты с N, N"-моноэамещенными симметричными этилендиаминами, таких как N,N"-диизопропилэтилендиаммоний диклавуланат, в качестве полезных промежуточных соединений для выделения и получения чистой клавулановой кислоты или клавуланатов щелочных металлов из этилацетатного экстракта. Обычно профильтрованный ферментационный бульон, содержащий клавулановую кислоту, может содержать от 10 до 20% белков в расчете на количество клавулановой кислоты. Эти белки мешают последующему выделению и очистке клавулановой кислоты. Обработка профильтрованного бульона ионообменными смолами или флоккулянтами занимает время, дорого стоит и может усилить разрушение нестабильного продукта. Согласно настоящему изобретению предложен способ получения и/или очистки клавулановой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира, включающий:удаление твердых веществ из содержащего клавулановую кислоту ферментационного бульона посредством микрофильтрации с образованием первого фильтрата,
дальнейшее удаление твердых веществ из первого фильтрата посредством ультрафильтрации с образованием второго фильтрата,
концентрирование второго фильтрата путем удаления воды и
обработку концентрированного второго фильтрата с выделением клавулановой кислоты или ее фармацевтически приемлемой соли или сложного эфира,
отличающийся тем, что первый фильтрат фильтруют с использованием мембраны для ультрафильтрации, имеющей отсечку молекулярной массы от 10 до 30 кДа и пропускающую способность от 10 до 30 л
![способ получения и/или очистки клавулановой кислоты из ферментационного бульона посредством ультрафильтрации, патент № 2169151](/images/patents/302/2169004/8226.gif)
![способ получения и/или очистки клавулановой кислоты из ферментационного бульона посредством ультрафильтрации, патент № 2169151](/images/patents/302/2169004/8226.gif)
Используют водный профильтрованный бульон, полученный ферментацией Streptomyces sp. P6621 FERM P2804 и микрофильтрацией, как описано в WO 95/23870. Микрофильтрат, имеющий содержание клавулановой кислоты 3,5 г/л, содержание белков 0,56 г/л и светопропускание при 420 нм (после разбавления водой 1:2) 27,9%, непрерывно добавляют в устройство для двухступенчатой фильтрации типа 2NUF2000 производства компании IMP Promont Ljubljana, Словения. Два промывочных модуля ультрафильтрации типа GR62-3833/47P производства компании Filmtech (филиала Dow Chemical Со) имеют два контура с общей площадью мембраны 194,4 м2. Аппарат расположен так, чтобы ультрафильтрационные модули могли быть соединены параллельно или последовательно. Отсечка молекулярной массы мембран составляет 20 кДа. Профильтрованный бульон имеет температуру 35oC, pH между 5,8 и 6,2, и пропускающая способность составляет 12 л
![способ получения и/или очистки клавулановой кислоты из ферментационного бульона посредством ультрафильтрации, патент № 2169151](/images/patents/302/2169004/8226.gif)
![способ получения и/или очистки клавулановой кислоты из ферментационного бульона посредством ультрафильтрации, патент № 2169151](/images/patents/302/2169004/8226.gif)
Класс C07D503/18 атомами кислорода