сульфонимидамиды, фармацевтический состав и способ его получения

Формула изобретения

1. Сульфонимидамид общей формулы I



где R(1) - водород или алкильный остаток C₁-C₄,

один из двух заместителей R(2) и R(3) обозначает бензоилгуанидин



который в фенильной части не замещен или замещен остатком, выбираемым из группы, состоящей из алкила с 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 С-атомами, СF₃, R(22)SO₂-; R(22) означает алкил с 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 С-атомами;

каждый из других заместителей R(2) и R(3), независимо друг от друга, обозначает алкил с 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 С-атомами, (CH₂)_p R(10), где р= 0, 1, 2, 3 или 4; R(10) обозначает фенил, который не замещен или замещен 1-3 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из F, Сl, СF₃, метила;

R(4) обозначает водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами;

а также их фармацевтически приемлемые соли.

2. Соединение формулы I по п. 1, отличающееся тем, что один из двух заместителей R(2) и R(3) обозначает бензоилгуанидин



который в фенильном остатке не замещен или замещен заместителем, выбираемым из группы, состоящей из алкила с 1, 2, 3 или 4 С-атомами, СF₃, R(22)SO₂-, R(22) обозначают метил;

каждый из других заместителей R(2) и R(3), независимо друг от друга, обозначает алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 С-атомами, (CH₂)_p R(10), где р= 0, 1 или 2; R(10) обозначает фенил, который не замещен или замещен 1-2 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из F, Сl, СF₃, метила;

R(3) обозначает водород;

R(4) обозначает водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами.

3. Соединение формулы I по п. 1, отличающееся тем, что один из заместителей R(2) и R(3) обозначает бензоилгуанидин



который в фенильной части не замещен или замещен остатком, выбираемым из группы, состоящей из алкила с 1, 2, 3 или 4 С-атомами, СF₃, R(22)SO₂-; R(22) независимо обозначает метил;

каждый из других заместителей R(2) и R(3), независимо друг от друга, обозначает алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами, или фенил, который не замещен или замещен одним заместителем, выбираемым из группы, состоящей из F, Cl, СF₃, метила; или

R(3) обозначает водород;

R(4) обозначает водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами.

4. Способ получения фармацевтического состава, отличающийся тем, что эффективное количество соединения формулы I и, при необходимости, фармацевтически приемлемые добавки переводят в пригодную дозировочную форму.

5. Фармацевтический состав для ингибирования клеточного Na⁺/Н^- обмена, содержащий активное вещество и, при необходимости, фармацевтически приемлемые добавки, отличающийся тем, что в качестве активного вещества он содержит соединение формулы I или их физиологически переносимые соли в эффективном количестве.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к сульфонимидамидам формулы (I):



где по меньшей мере один из трех заместителей R(1), R(2) и R(3) обозначает бензоилгуанидин:



который в фенильной части незамещен или замещен 1-4 остатками, выбираемыми из группы, состоящей из алкила с 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 С-атомами, алкенила с 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 С-атомами, -(СН₂)_m-R(14), F, Cl, Вr, J, -С= N, СF₃, R(22)SO₂, R(23) R(24)N-СО-, R(25)-СО-, R(26)R(27)N-SO₂, -ОR(35), -SR(35) или -NR(35)R(36); m=0, 1 или 2;

R(14) обозначает - (С₃-С₈)-циклоалкил или фенил, который незамещен или замещен 1-3 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из F и Cl, -СF₃, метила, метокси-группы и -NR(15) R(16); где

R(15) и R(16), независимо друг от друга, обозначают водород или -СН₃;

R(22), R(23), R(25) и R(26), независимо друг от друга, обозначают алкил с 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 С-атомами, алкенил с 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 С-атомами, (СН₂)_nR(29) или -СF₃;

где n=0, 1, 2, 3 или 4;

R(29) обозначает -(С₃-С₇)-циклоалкил или фенил, который незамещен или замещен 1-3 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из F, Cl, -СF₃, метила, метокси-группы и -NR(3O) R(31); где

R(30) и R(31) обозначают водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами;

или

R(23), R(25) и R(26) обозначают водород;

R(24) и R(27), независимо друг от друга, обозначают водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами;

или

R(23) и R(24), а также R(26) и R(27) вместе обозначают 5 или 6 метиленовых групп, из которых одна СН₂-группа может быть заменена кислородом, серой, -NH-, -NСН₃ или -N-бензилом;

R(35) и R(36), независимо друг от друга, обозначают водород или алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 С-атомами;

или

R(35) и R(36) вместе обозначают 4-7 метиленовых групп, из которых одна СH₂-группа может быть заменена кислородом, серой, -NН-, -NСН₃ или -N-бензилом;

или

R(35) обозначает фенил, который незамещен или замещен 1-3 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из F, Сl, -СF₃, метила, метокси-группы, SO₂R(5), SO₂NR(6) R(7) и -NR(32)R(33); где

R(5) обозначает алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 С-атомами;

R(6) и R(7), независимо друг от друга, обозначают водород- или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами;

R(32) и R(33), независимо друг от друга, обозначают водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами;

или

R(35) обозначает (С₁-С₉)-гетероарил, который незамещен или замещен 1-3 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из F, Сl, СF₃, СН₂, метокси-группы, гидроксила, амино-группы, метиламино-группы и диметиламино-группы;

и каждый из других заместителей R(1), R(2) и R(3), независимо друг от друга, обозначает алкил с 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 С-атомами; (CH₂)_pR(10), где р=0, 1, 2, 3 или 4, а R(10) обозначает фенил, который незамещен или замещен 1-3 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из F, Сl, -СF₃, метила, метокси-группы, -SO₂NR(17) R(8) и -SО₂R(9);

где R(17) и R(8), независимо друг от друга, обозначают водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами;

R(9) обозначает алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами; или каждый из других остатков R(1) и R(3) обозначает водород;

R₄ обозначает водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами;

а также к их фармацевтически приемлемым солям.

Предпочтительными являются соединения формулы (1), в которых один из трех заместителей R(1), R(2) и R(3) обозначает бензоилгуанидин



который в фенильном кольце незамещен или замещен 1-3 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из алкила с 1, 2, 3 или 4 С-атомами, алкенила с 2, 3 или 4 С-атомами, -(СН₂)_mR(14), F, Сl, СF₃, R(22) SO₂-, R(23)R(24)N -CO-, R(25)-CO-, R(26)R(27)N -SO₂, -ОР(35), -SR(35) и -NR(35)R(36);

где R(22) и R(25), независимо друг от друга, обозначают метил или -СF₃;

R(23), R(24), R(26) и R(27), независимо друг от друга, обозначают водород или метил:

m=0, 1 или 2;

R(14) обозначает - (С₃-С₆)-циклоалкил или фенил, который незамещен или замещен 1-2 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из F или Сl, -СF₃, метила и метоксигруппы;

R(35) и R(36), независимо друг от друга, обозначают водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами;

или

R(35) и R(36) вместе обозначают 4-6 метиленовых групп, из которых одна СН₂-группа может быть заменена кислородом, серой, -NН- или -NСН₃, или

R(35) обозначает фенил, который незамещен или замещен 1-2 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из F, Cl, -CF₃, метила, метокси-группы, SO₂R(5) и SO₂NR(6) R(7), где R(5) обозначает алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами;

R(6) и R(7), независимо друг от друга, обозначают водород, метил или этил;

или

R(35) обозначает (С₁-С₉)-гетероарил, который незамещен или замещен 1-2 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из F, Сl, СF₃, СН₃ и метокси-группы;

и каждый из других заместителей R(1), R(2) и R(3), независимо друг от друга, обозначает алкил с 1, 2, 3, 4, 5 или 6 С-атомами или (СН₂)_pR(10), где р=0, 1 или 2, а

R(10) обозначает фенил, который незамещен или замещен 1-2 заместителями, выбираемыми из группы, состоящей из F, Сl, СF₃, метила, метокси-группы, -SO₂NR(17)R(8) и -SO₂R(9), где R(17) и R(8), независимо друг от друга, обозначают водород, метил или этил;

R(9) обозначает метил или этил;

или каждый из других заместителей R(1) и R(3) обозначает водород;

R(4) обозначает водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами; а также их фармацевтически приемлемые соли.

Особенно предпочтительны соединения формулы (1), в которых один из заместителей R(1), R(2) и R(3) обозначает бензоилгуанидин:



который в фенильной части незамещен или замещен 1-2 остатками, выбираемыми из группы, состоящей из алкила с 1, 2, 3 или 4 С-атомами, R(14), F, Cl, СF₃, R(22)SO₂-, R(23)R(24)N-СО-, R(25)-СО-, R(26) R(27)N-SO₂, -OR(35), -SR(35) и -NR(35)R, (36);

где R(22) и R(25), независимо друг от друга, обозначают метил или СF₃;

R(23), R(24), R(26) и R(27), независимо друг от друга, обозначают водород или метил;

R(14) обозначает (С₃-С₆)-циклоалкил или фенил, который незамещен или замещен одним заместителем, выбираемым из группы, состоящей из F и Cl, -СF₃, метила и метокси-группы;

R(35) и R(36), независимо друг от друга, обозначают водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами;

или

R(35) обозначает фенил, который незамещен или замещен одним заместителем, выбираемым из группы, состоящей из F, Cl, -CF₃ метила, метокси-группы, SO₂СН₃ и SO₂NR(6) R(7);

где R(6) и R(7), независимо друг от друга, обозначают водород, метил или этил;

или

R(35) обозначает (С₁-С₉)-гетероарил, который незамещен или замещен одним заместителем, выбираемым из группы, состоящей из F, Cl, СF₃, СН₃ и метокси-группы;

и каждый из других заместителей R(1), R(2) и R(3), независимо друг от друга, обозначает алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами или фенил, который незамещен или замещен одним заместителем, выбираемым из группы, состоящей из F, Cl, СF₃, метила, метокси-группы, - SO₂NR(17) R(8) и -SO₂СН₃; где

R(17) и R(8), независимо друг от друга, обозначают водород, метил или этил;

или

R(1) обозначает водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами; или R(3) обозначает водород;

R(4) обозначает водород или алкил с 1, 2, 3 или 4 С-атомами; а также их фармацевтически приемлемые соли.

Указанные алкильные остатки могут быть как линейными, так и разветвленными.

Под (С₁-С₉)-гетероарилом понимают остатки, которые производятся от фенила или нафтила, в которых одна или несколько СН-групп заменены на азот и/или в которых, по меньшей мере, две соседние СН-группы (при образовании пятичленного ароматического кольца) заменены на серу, NН или кислород. Далее, также один или оба атома в месте конденсации бициклических остатков (как в индолизиниле) могут быть атомами азота.

В качестве гетероарила имеют значение, в частности, фуранил, тиенил, пирролил, имидазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, индолил, индазолил, хинолил, изохинолил, фталазинил, хиноксалинил, хиназолинил, циннолинил.

Если один из заместителей R(1):R(4) содержит один или несколько асимметрических центров, то они, независимо друг от друга, могут иметь конфигурацию как S, так и также R. Соединения могут находиться в виде оптических изомеров, в виде диастереомеров, в виде рацематов или в виде их смесей.

Указанные алкильные остатки могут быть как линейными, так и также разветвленными.

Изобретение относится далее к способу получения соединений формулы (1), отличающемуся тем, что соединения формулы (II):

НS-R(2)" (II),

где R(2)" обозначает в случае необходимости пригодным образом защищенный остаток R(2), вводят во взаимодействие с получаемым in situ по общеизвестным способам монохлор- или монобромамином. Это взаимодействие осуществляют в инертном растворителе, таком как СН₂Сl₂, СНСl₃ или ССl₄, при температуре от комнатной до температуры плавления используемого раствора, предпочтительно при 0-40^oC. В некоторых случаях можно также использовать предшествующий галогенамину амин или также воду в качестве растворителя. Получают сульфонимидамиды формулы (III):



где R(1)", R(2)", R(3)" и R(4)" обозначают в случае необходимости пригодным образом защищенный или "временный" остаток R(1), R(2), R(3) и R(4). Последующее введение остатка R(3) можно осуществлять путем ароматических нуклеофильных замещений, которые общеизвестны для аналогичных сульфонимидамидам формулы (III) сульфонамидов.

Гуанилирование функции бензойной кислоты осуществляют по известным в принципе методам, тем, что легко нуклеофильно отщепляемую удаляемую группу L в соединении формулы (IV), в котором, по меньшей мере, один из заместителей R(1""), R(2"") или R(3"") имеет значение R(1), R(2) и R(3), однако вместо гуанидиновой группы содержит легко отщепляемую удаляемую группу L:



замещают гуанидином.

Введение замещенных в фенильной части нуклеофилами серы, кислорода или азота производных бензойной кислоты осуществляют известными из литературы методами нуклеофильного замещения в ароматических углеводородах. В качестве удаляемой группы в производном бензойной кислоты оказываются пригодными при этом замещении галогениды и трифторметансульфонаты. Работают предпочтительно в диполярном органическом растворителе, как ДМФ или тетра-метилмочевина, при температуре от 0^oC вплоть до температуры кипения растворителя, предпочтительно от 80^oC до температуры кипения растворителя. В качестве акцептора кислоты служит предпочтительно соль щелочного или щелочноземельного металла с анионом высокой основности и незначительной нуклеофильности, например К₂СО₃ или СSСО₃.

Функциональные группы в остатки R(1)-R(4), которые могут функционировать в качестве восстановителя, предпочтительно вводят после введения сульфонимидамидной группы. Потребности в защитных группах во время введения сульфонимидамидной функциональной группы проистекают от типа реакций. При этом речь идет об окислении сильным окислителем. Азотсодержащие гетероароматические соединения, как, например, пиридильные группы, можно защищать в форме соответствующих N-оксидов.

Окисление азота в гетероарильных заместителях удается осуществлять в пригодных промежуточных соединениях, как в сложном эфире бензойной кислоты, с помощью в принципе известных методов. Оказывается пригодной, например, м-хлорнадбензойная кислота в инертном растворителе, как метиленхлорид, при температуре от -30^oС до температуры кипения растворителя. Способы восстановления гетероарил-N-оксидов, как, например, пиридин-N-оксидов, также в принципе известны. Оказывается пригодным, например, взаимодействие с трифенилфосфином или триметилфосфитом (C. Kaneko, A. Yamamоto, M. Gomi, Heterocycles, 12, 227 (1979)).

Введение алкильных или арильных заместителей осуществляют известными из литературы способами перекрестных сочетаний, в присутствии палладия, арилгалогенидов, например, с цинкоорганическими соединениями, оловоорганическими соединениями, борорганическими кислотами или органоборанами.

Сульфонимидамиды формулы (I) представляют собой, в общем, слабые основания и могут связываться с кислотами при образовании солей.

В качестве солей присоединения кислот принимают во внимание соли любых фармакологически приемлемых кислот, например, как галогениды, в частности гидрохлориды, аскорбаты, лактаты, сульфаты, цитраты, тартраты, ацетаты, фосфаты, метилсульфонаты, п-толуолсульфонаты.

В патенте США 5 091 394 (НОЕ 89/F 288) и в выложенном описании изобретения к неакцептованной заявке на европейский патент 0 556 674 (НОЕ 92/F 034) описываются бензоилгуанидины, в которых, однако, заместители не имеют значений, заявляемых согласно настоящему изобретению. Не описываются никакие бензолсульфонимидамидные производные. Кроме того, водорастворимость этих известных бензоилгуанидинов оставляет желать лучшего.

Вследствие своих фармакологических свойств соединения превосходно пригодны в качестве антиаритмических лекарственных средств с кардиозащитными компонентами для профилактики инфаркта и лечения инфаркта, а также для лечения стенокардии, причем они профилактически также ингибируют или в сильной степени уменьшают патофизиологические процессы при возникновении ишемически индуцированных повреждений, в особенности при провоцировании ишемически индуцируемых аритмий сердца. Из-за их защищающих действий против патологических гипоксических и ишемических ситуаций предлагаемые согласно изобретению соединения формулы (I) вследствие ингибирования клеточного механизма Nа⁺/Н⁺-обмена могут применяться для лечения любых острых или хронических, провоцированных ишемией повреждений или индуцированных благодаря этому первичных или вторичных заболеваний. Это касается их применения в качестве лекарственных средств при оперативных вмешательствах, например при трансплантациях органов, причем соединения могут применяться как для защиты органов у донора до и во время изъятия, для защиты извлекаемых органов, например, в случае обработки с помощью или при их хранении в физиологических жидкостях, также при перенесении в организм реципицента. Соединения также представляют собой ценные, профилактически эффективные лекарственные средства при осуществлении ангиопластических оперативных вмешательств, например, на сердце, а также в случае периферических сосудов. В соответствии с их профилактическим действием против ишемически индуцируемых повреждений соединения также пригодны в качестве лекарственных средств для лечения ишемий нервной системы, в особенности центральной нервной системы, причем они пригодны, например, для лечения инсульта или отека мозга. Сверх того, предлагаемые согласно изобретению соединения формулы (I) также пригодны для лечения форм шока, как, например, аллергического, кардиогенного, гиповолемического и бактериального шока.

Сверх того, предлагаемые в изобретении соединения формулы (I) характеризуются сильным ингибирующим воздействием на пролиферации клеток, например на пролиферацию фибробластовых клеток и пролиферацию клеток гладкой мускулатуры сосудов. Поэтому соединения формулы (I) принимают во внимание в качестве ценных терапевтических средств для лечения заболеваний, в случае которых пролиферация клеток представляет собой первичную или вторичную причину, и поэтому их можно применять в качестве антиатеросклеротических средств, средств против поздних осложнений при диабете, раковых заболеваниях, фибротических заболеваниях, как фиброз легких, фиброз печени или фиброз почек; против гипертрофии и гиперплазии органов, в частности при гиперплазии простаты, соответственно гипертрофии простаты.

Предлагаемые согласно изобретению соединения являются эффективными ингибиторами клеточного натрий-протонного антипорта (Nа⁺/Н⁺ - обмен), который в случае многочисленных заболеваний (эссенциальная гипертония, атеросклероз, диабет и т.д.) также повышен в таких клетках, которые легко доступны измерениям, как, например, в эритроцитах, тромбоцитах или лейкоцитах. Предлагаемые согласно изобретению соединения поэтому пригодны в качестве превосходного и простого научного "инструмента", например, при их применении в качестве диагностических средств для определения и распознавания определенных форм гипертонии, однако, также атеросклероза, диабета, пролиферативных заболеваний и т.д. Сверх того, соединения формулы (I) пригодны для профилактической терапии с целью предотвращения генеза высокого кровяного давления, например эссенциальной гипертонии.

По сравнению с большинством известных соединений соединения согласно изобретению обладают значительно улучшенной водорастворимостью. Поэтому они значительно в лучшей степени пригодны для внутривенного введения.

Предлагаемые согласно изобретению соединения по сравнению с известными, хорошо растворимыми в воде соединениями отличаются своей отличной биодоступностью и фармакокинетикой.

Лекарственные средства, которые содержат соединение формулы (I), при этом можно вводить орально, парентерально, внутривенно, ректально или путем ингаляции, причем предпочтительное применение зависит от соответствующей клинической картины заболевания. Соединения формулы (I) при этом можно применять индивидуально или вместе с галеновыми вспомогательными веществами, а именно в ветеринарии, также в медицине.

Какие вспомогательные вещества пригодны для желательной формулировки лекарственного средства, известно специалисту на основании его специального знания. Наряду с растворителями, гелеобразователями, основами свечей, вспомогательными веществами для таблеток и другими носителями биологически активных веществ, можно применять, например, антиоксиданты, диспергаторы, эмульгаторы, антивспениватели, улучшающие вкус вещества, консерванты, агенты растворения или красители.

Для оральной формы применения активные соединения смешивают с пригодными добавками, как носители, стабилизаторы или инертные разбавители, и обычными методами доводят до пригодных дозировочных форм, как таблетки, драже, разъемные капсулы, водные, спиртовые или масляные растворы. В качестве инертных носителей можно применять, например, гуммиарабик, магнезию, карбонат магния, фосфат калия, молочный сахар, глюкозу или крахмал, в особенности кукурузный крахмал. При этом приготовление можно осуществлять как в виде сухого, так и в виде влажного гранулята. В качестве масляных носителей или в качестве растворителей принимают во внимание, например, растительные или животные масла, как подсолнечное масло или рыбий жир.

Для подкожного или внутривенного введения активные соединения, в желательном случае вместе с обычными для этой цели веществами, как агенты растворения, эмульгаторы или другие вспомогательные вещества, растворяют, суспендируют или эмульгируют. В качестве растворителей принимают во внимание, например, воду, физиологический раствор хлорида натрия или спирты, например, как этанол, пропанол, глицерин, наряду с которыми также растворы cахаров, как растворы глюкозы или маннита, или также смеси из различных указанных растворителей.

В качестве фармацевтической формулировки для введения в форме аэрозолей или пульверизуемых композиций пригодны, например, растворы, суспензии или эмульсии биологически активного вещества формулы (I) в фармацевтически приемлемом растворителе, как в особенности этанол или вода, или в смеси таких растворителей. Формулировка в зависимости от потребности может также содержать еще другие фармацевтические вспомогательные вещества, как поверхностно-активные агенты, эмульгаторы и стабилизаторы, а также рабочий газ. Такая композиция содержит обычно биологически активное вещество в концентрации примерно 0,1-10, в особенности примерно 0,3-3 мас.%.

Дозировка вводимого биологически активного вещества формулы (I) и частота приема зависят от эффективности и длительности действия используемых соединений, кроме того, также от рода и интенсивности излечиваемого заболевания, а также от пола, возраста, веса и индивидуальной предрасположенности излечиваемого млекопитающего.

В среднем суточная доза соединения формулы (I) в случае пациентов весом примерно 75 кг составляет, по меньшей мере, 0,001 мг/кг веса тела, предпочтительно, по меньшей мере, 0,01 мг/кг веса тела, вплоть до самое большее 10 мг/кг веса тела, предпочтительно вплоть до самое большее 1 мг/кг веса тела. При острых вспышках болезни, например непосредственно после перенесения инфаркта сердца, могут быть необходимыми также еще более высокие и прежде всего более частые дозировки, например вплоть до 4 разовых доз в день. В особенности при внутривенном введении, например, в случае пациентов с инфарктом в больнице могут требоваться вплоть до 100 мг в день.

Перечень сокращений

АИБН= = , -азо-бис-изобутиронитрил; Вп = бензил; рассол = насыщенный водный раствор хлорида натрия; СН₂Сl₂ = дихлорметан; DCl = десорбционно-химическая ионизация; ДИП = диизопропиловый эфир; ДМА = диметилацетамид; ДМЭ = диметоксиэтан; ДМФ = N,N-диметилформамид; ЕЕ = этилацетат; Еl = электронный удар; экв. = эквивалент; ES = ионизация электрораспылением; Et = этил; FАВ = бомбардировка быстрыми атомами; ГЕП = н-гептан; НОАс = уксусная кислота; Me = метил; МеОН = метанол; т.пл. = температура плавления; МТБ = метил-трет. -бутиловый простой эфир; NБC = N-бром-сукцинимид; NМП = N-метилпирролидон; КТ = комнатная температура; ТГФ = тетрагидрофуран; ТММ = N, N, N", N"-тетраметилмочевина; Тол = толуол; ЦНС = центральная нервная система.

Экспериментальная часть

Общая методика получения бензоил-гуанидинов формулы (I)

Вариант А: из бензойных кислот (формула (II); L=ОН).

0,01 моль производного бензойной кислоты формулы (II) растворяют или суспендируют в 60 мл безводного ТГФ и затем смешивают с 1,78 г (0,011 моль) карбонилдиимидазола. После перемешивания в течение 2-х часов при комнатной температуре в реакционный раствор вносят 2,95 г (0,05 моль) гуанидина. После перемешивания в течение ночи ТГФ отгоняют при пониженном давлении (роторный испаритель), остаток смешивают с водой, с помощью 2 н. НСl устанавливают рН 6-7 и отфильтровывают соответствующий бензоилгуанидин (формулы (I)). Таким образом, полученные бензоилгуанидины путем обработки с помощью водного метанольного или эфирного раствора хлороводорода или других фармакологически приемлемых кислот можно переводить в соответствующие соли.

Общая методика получения бензоилгуанидинов формулы (I):

Вариант Б: из сложных алкиловых эфиров бензойной кислоты (формула (II); L=0-алкил).

5 ммоль Сложного алкилового эфира бензойной кислоты формулы (II), а также 25 ммоль гуанидина (свободное основание) растворяют в 15 мл изопропанола или суспендируют в 15 мл ТГФ и кипятят с обратным холодильником вплоть до полного взаимодействия (контроль путем тонкослойной хроматографии) (обычное время реакции 2-5 часов). Растворитель отгоняют при пониженном давлении (роторный испаритель), остаток обрабатывают в 300 мл этилацетата и полученный раствор промывают 3 раза по 50 мл раствором бикарбоната натрия. Сушат над сульфатом натрия, растворитель отгоняют в вакууме и хроматографируют на силикагеле с помощью пригодного элюирующего средства, например с помощью смеси этилацетата с метанолом в соотношении 5:1 (Солеобразование см. вариант А).

Пример 1: 4-(4-Фторбензол-N,N-диэтилсульфимидамоил)-3-метилсульфонилбензоилгуанидин-дигидрохлорид



а) N,N"-Диэтилимидамид 4-фторбензолсульфокислоты

146 мл 70%-ного водного раствора этиламина при -30^oС смешивают с 30,8 мл брома. Оставляют нагреваться до -5^oС, затем прикапывают 19,2 мл 4-фтор-тиофенола и после этого перемешивают в течение 5 часов при комнатной температуре. Затем реакционный раствор смешивают сначала со 100 мл насыщенного водного раствора Nа₂SO₃, потом с 200 мл насыщенного водного раствора карбоната натрия и экстрагируют 5 раз по 200 мл этилацетатом. Сушат экстракт над сульфатом натрия, растворитель удаляют в вакууме и остаток хроматографируют на силикагеле с помощью смеси этилацетата с толуолом и метанолом в соотношении 5: 5: 2. Получают 1,8 г бесцветного масла. Рf (этилацетат (толуол)метанол = 5:5:2) = 0,68. Масс-спектр (ЕS): 231 (М+Н)⁺.

Б) 5-Карбокси-2-фторбензолсульфиновая кислота

15,6 г (0,24 моль) Сульфита натрия при 70^oС растворяют в 120 мл воды. При сохранении температуры одновременно и порциями добавляют 23,8 г (0,1 моль) 4-фтор-3-хлор-сульфонилбензойной кислоты и 10 н. раствор NaOH так, чтобы сохранялось рН-значение в пределах 9-10 (экзотермическая реакция). Перемешивают следующие 3 часа при 70^oС, перемешивают далее в течение 15 минут с активным углем и после этого отфильтровывают. Фильтрат при охлаждении льдом с помощью концентрированной соляной кислоты доводят до рН 0-1 и отфильтровывают кристаллическую 5-карбокси-2-фторбензолсульфиновую кислоту. Бесцветные кристаллы. Т.пл. 167-170^oС.

в) Динатриевая соль 5-карбокси-2-фторбензолсульфиновой кислоты

Эту соль получают путем внесения 17,2 г (0,084 моль) карбокси-2-фторбензолсульфиновой кислоты в перемешиваемый раствор 6,72 г (0,168 моль) гидроксида натрия в смеси из 150 мл метанола и 30 мл воды. После отфильтровывания от мелкодисперсных частиц веществ растворитель отгоняют в вакууме и остаток вносят в ацетон для кристаллизации. Бесцветное кристаллическое вещество; т.пл. >320^oС.

г) Метиловый эфир 4-фтор-3-метилсульфонилбензойной кислоты

В суспензию 15 г (0,06 моль) динатриевой соли 5-карбокси-2-фторбензолсульфиновой кислоты в 80 мл безводного ДМФ добавляют 30 г (0,21 моль) метилиодида, перемешивают в течение 6 часов при 60^oС, растворитель отгоняют и остаток смешивают с водой. Перемешивают в течение 30 минут при охлаждении льдом и осадок отфильтровывают. Бесцветное кристаллическое вещество. Т.пл. 102-105^oС.

д) Метиловый эфир 4-(4-фторбензол-N,N",-диэтилсульфимидамоил)-3-метилсульфонилбензойной кислоты

461 мг N,N"-Диэтилимидамида 4-фторбензолсульфокислоты и 464 мг метилового эфира 4-фтор-3-трифторметил-бензойной кислоты растворяют в 10 мл NMП, добавляют 2,0 г карбоната цезия и перемешивают 3 часа при 100^oС. После охлаждения реакционную смесь разбавляют с помощью 300 мл этилацетата и промывают 3 раза по 100 мл водой. Сушат над сульфатом натрия и остаток хроматографируют на силикагеле с помощью диизопропилового эфира. Получают 440 мг бесцветного масла. Rf (диизопропиловый эфир)=0,27. Масс-спектр (FAB); 443 (М+Н)⁺.

е) 4-(4-Фтopбeнзoл-N, N"-диэтилcyльфимидaмoил)-3-метилсульфонил-бензоилгуанидин-дигидрохлорид

180 мг Метилового эфира 4-(4-фторбензол-N,N"-диэтилсульфимидамоил)-3-метилсульфонилбензойной кислоты вводят во взаимодействие согласно общей методике получения бензоилгуанидинов, вариант Б. Получают 140 мг бесцветного масла, которое с помощью водного раствора НСl переводят в дигидрохлорид. Т. пл. (дигидрохлорид) = 193^oС (разложение) Rf (этилацетат) = 0,31. Масс-спектр (ЕS): 470 (М+Н)⁺.

Целевое соединение примера 2 получают аналогично примеру 1 из метилового эфира 4-фтор-3-трифторметил-бензойной кислоты.

Пример 2: 4-(4-Фтopбeнзoл-N,N"-диэтилcyльфимидaмoил)-3-три-фторметил-бензоилгуанидин-дигидрохлорид



Аморфное твердое вещество без определенной точки плавления. Rf (этилацетат) = 0,51. Масс-спектр (ЕS): 460 (М+Н)⁺.

а) Метиловый эфир 4-фтор-3-трифторметил-бензойной кислоты

5 г 4-Фтор-3-трифторметил-бензойной кислоты и 9 мл SOCl₂ в 50 мл метанола перемешивают в течение 8 часов при 60^oС. Затем удаляют летучие компоненты в вакууме и получают 5,1 г бесцветного масла, которое без очистки используют далее. Rf (этилацетат/метанол = 10:1)=0,74; Масс-спектр (DСl): 223 (М+Н)⁺.

Пример 3: 3-Метилсульфонил-4-(4-фторбензолсульфимидамоил)-бензоил-гуанидин



a) N,N"-бис-трет.-бутилимидамид-4-фторбензолсульфокислоты

100 мл трет. -Бутиламина в 30 мл воды охлаждают до -30^oС, и при этой температуре прикапывают 6,2 мл брома. Продолжают перемешивать при этой температуре в течение 30 минут, затем нагревают до -5^oС и прикапывают 4,6 г 4-фтортиофенола. Смесь оставляют стоять для повышения ее температуры до комнатной и перемешивают при этой температуре в течение 10 часов. Реакционную смесь при перемешивании вносят в 200 мл насыщенного водного раствора Na₂SO₃, добавляют 200 мл насыщенного водного раствора карбоната натрия и перемешивают в течение 30 минут. Экстрагируют 4 раза по 150 мл этилацетатом, сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют в вакууме. Остаток обрабатывают с помощью 200 мл водного 1 н. раствора НСl, перемешивают в течение 1 часа, затем с помощью карбоната натрия устанавливают рН 9 и экстрагируют 3 раза по 150 мл этилацетатом. Сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле с помощью смеси этилацетата с гептаном в соотношении 1:2. Получают 3,2 г бесцветного масла. Rf (диизопропиловый эфир) = 0,40. Масс-спектр (ЕS):287 (М+Н)⁺.

б) Имидамид 4-фторбензолсульфокислоты

3,1 г N,N"-бис-трет.-Бутилимидамида 4-фторбензолсульфокислоты растворяют в 55 мл 33%-ного раствора бромоводорода в ледяной уксусной кислоте и перемешивают в течение 10 часов при комнатной температуре. Реакционную смесь медленно при перемешивании вносят в 400 мл насыщенного водного раствора карбоната натрия и экстрагируют 4 раза по 150 мл этилацетатом. Сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют в вакууме. Хроматография на силикагеле с помощью метил-трет.-бутилового эфира дает 1,4 г бесцветных кристаллов. Т.пл. =111^oС. Rf (этилацетат/метанол = 10:1) = 0,44; Масс-спектр (Е): 175 (М+Н)⁺.

в) Метиловый эфир 3-метилсульфонил-4-(4-фторбензолсульфимидамоил)-бензойной кислоты

350 мг Имидамида 4-фторбензолсульфокислоты, 460 мг метилового эфира 4-фтор-3-метилсульфонилбензойной кислоты и 1,96 г карбоната цезия растворяют в 10 мл N-метилпирролидона и перемешивают 4 часа при 100^oС. Реакционную смесь затем вносят при перемешивании в 100 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, экстрагируют 3 раза по 100 мл этилацетатом и органическую фазу промывают 3 раза по 50 мл водой. Сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют в вакууме. Хроматография на силикагеле с помощью метил-трет. -бутилового эфира дает 130 мг бесцветного масла. Rf (метил-трет.-бутиловый эфир) = 0,58.

г) 3-Метилсульфонил-4-(4-фторбензолсульфимидамоил)-бензоилгуанидин

120 мг Метилового эфира 3-метилсульфонил-4-(4-фторбензолсульфимидамоил)-бензойной кислоты гуанилируют по общей методике получения бензоил-гуанидинов, вариант Б, с помощью 90 мг гуанидина в 1 мл изопропанола. Продолжительность реакции 3 часа при кипячении с обратным холодильником. Хроматография на силикагеле смесью этилацетата с метанолом в соотношении 5:1 дает 70 мг бесцветного масла. Т.пл. дигидрохлорида: 240^oС. Rf (этилацетат/метанол = 5:1) = 0,14; Масс-спектр (ЕS):414 (М+Н)⁺.

Пример 4: N,N"-Диметилимидамид 2-изопропил-5-гуанидинокарбонил-бензолсульфокислоты



a) N,N"-Диметилимидамид 2-изопропилбензолсульфокислоты

110 мл 40%-ного Водного раствора метиламина при -30^oС смешивают с 5,7 мл брома. Дополнительно перемешивают в течение 30 минут при этой температуре, затем нагревают до -5^oС и прикапывают 5,0 мл 2-изопропилтиофенола. Перемешивают 5 часов при комнатной температуре, после чего реакционную смесь вносят при перемешивании в 200 мл насыщенного водного раствора Na₂SО₃. Добавляют 200 мл насыщенного водного раствора карбоната натрия и перемешивают 1 час при комнатной температуре. Затем экстрагируют 3 раза по 150 мл этилацетатом. Сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют в вакууме. Хроматография на силикагеле с помощью этилацетата дает 2,8 г бесцветного твердого вещества; т.пл. 84-85^oС. Rf (этилацетат) = 0,48.

б) N,N"-Диметилимидамид 2-изопропил-5-иод-бензолсульфокислоты

2,7 г N,N"-Диметилимидамида 2-изопропилбензолсульфокислоты растворяют в 10 мл СF₃SО₃Н, затем добавляют 2,7 г N-иодсукцинимида и перемешивают 4 часа при комнатной температуре. Реакционную смесь медленно прикапывают к смеси из 150 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и 150 мл насыщенного водного раствора карбоната натрия. Экстрагируют 3 раза по 150 мл этилацетатом, сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют в вакууме. Хроматография на силикагеле с помощью метил-трет.-бутилового эфира дает 3,6 г бесцветного масла. Rf (метил-трет.-бутиловый эфир) = 0,51; Масс-спектр (ЕS): 353 (М+Н)⁺.

в) N, N"-Диметилимидамид 2-изопропил-5-н-бутоксикарбонил-бензолсульфокислоты

3,6 г N,N"-Диметилимидамида 2-изопропил-5-иод-бензол-сульфокислоты, 37,6 мг ацетата палладия-(П), 69,2 мг 1,3-бис-(дифенилфосфино)-пропана и 5,1 мл три-н-бутиламина растворяют в 11 мл н-бутанола и 22 мл ДМФ и перемешивают 6 часов при 100^oС. Реакционную смесь обрабатывают с помощью 250 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия, добавляют 100 мл воды и экстрагируют 3 раза по 150 мл этилацетатом. Сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют в вакууме. Хроматография в вакууме с помощью смеси этилацетата с гептаном в соотношении 1:1 дает 340 мг бесцветного масла.

Rf (этилацетат/гептан = 1:1): 0,21. Масс-спектр (ЕS)=327 (М+Н)⁺.

г) N, N-Диметилимидамид 2-изопропил-5-гуанидинокарбонил-бензолсульфокислоты

177 мг Гуанидин-гидрохлорида растворяют в 2,5 мл ДМФ и добавляют раствор 190 мг трет.-бутилата калия в 2,5 мл ДМФ. Перемешивают 1 час при комнатной температуре, затем добавляют раствор 110 мг N,N"-диметилимидамида 2-изопропил-5-н-бутокси-карбонил-бензолсульфокислоты в 5 мл ДМФ. Перемешивают 24 часа при комнатной температуре, реакционную смесь выливают при перемешивании в 100 мл насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и экстрагируют 3 раза по 100 мл этилацетатом. Сушат над сульфатом натрия и растворитель удаляют в вакууме. Остаток хроматографируют на силикагеле смесью этилацетата с метанолом в соотношении 1:8, получая 32 мг белого твердого вещества. Т.пл.= 148^oС (при разложении). Rf (этилацетат/метанол = 1:8) = 0,21. Масс-спектр (ЕS): 312 (М+Н)⁺.

Фармакологические данные:

Ингибирование Nа⁺-/Н⁺-обмена в эритроцитах кролика

Белые новозеландские кролики (Ivanovas) получают стандартную пищу с 2% холестерина в течение 6 недель, чтобы активировать Na⁺/Н⁺ - обмен и таким образом, чтобы можно было пламенно-фотометрически определить приток Na⁺ в эритроциты через Nа⁺/Н⁺-обмен. Кровь отбирают из ушных артерий и придают ей несвертываемость за счет 25 1Е калий-гепарина. Одну часть каждой пробы используют для двойного определения гематокрита путем центрифугирования. Аликвоты, каждая по 100 мкл, служат для измерения исходного содержания Na⁺ в эритроцитах.

Для определения чувствительного к амилориду притока натрия, 100 мкл каждой пробы крови в 5 мл, каждая, гиперосмолярной среды соль-сахароза (ммоль/л: 140 NaCl; 3 КСl; 150 сахарозы; 0,1 уабаина, 20 трис-гидроксиметил-аминометана) инкубируют при рН 7,4 и 37^oС. Эритроциты затем промывают трижды с помощью охлажденного льдом раствора МgСl₂-уабаин (ммоль/л: 112 МgСl₂; 0,1 уабаина) и гемолизируют в 2,0 мл дистиллированной воды. Внутриклеточное содержание натрия определяют пламенно-фотометрически.

Рассчитывают нетто-приток ионов натрия из разности между исходным содержанием натрия и содержанием натрия в эритроцитах после инкубации. Подавляемый амилоридом приток натрия получают из разницы в содержании натрия в эритроцитах после инкубации с амилоридом 310^-4 моль/л и без него. Таким образом поступают также в случае предлагаемых согласно изобретению соединений.

Результаты

Ингибирование Nа⁺/Н⁺ - обмена (см. в табл.1).

Приведенные в табл.2 данные получены в соответствии с нижеописанным способом измерения.

Для экспериментов использовали мужские особи крыс Spraque -Dawley весом от 240 до 350 г. Крыс анестезировали тиопенталом натрия (Trapanal^R, Gulden, Konstanz) при дозе 100 мг/кг внутрибрюшинно (i.p.). Системное кровяное давление измеряли непосредственно в левой каротидной артерии с использованием датчика давления Statham (P23Db).

Искусственную вентиляцию легких осуществляли при помощи комнатного воздуха при объеме 10-12 мл/кг и скорости 54 пульсации/мин.

Грудную клетку вскрывали торакотомией у грудины и раздвигали при помощи расширителя небольшого размера. После рассечения перикарда, чтобы получить доступ к левой коронарной артерии (LCA), вокруг коронарной артерии примерно на расстоянии 2-3 мм от начала LCA помещали атравматическую иглу с тонкой шелковой нитью (mth 1,5 метрический, 4-0) для последующего наложения лигатуры.

Для перорального введения соединения растворяли в ДМСО, разбавленном дистиллированной водой (5% ДМСО), и вводили за 30 минут до окклюзии (за 15 минут до анестезии). Вводимый объем для обоих соединений и для всех доз составлял 1 мл/кг для перорального введения (р.о.). После периода уравновешивания в течение 5 минут осуществляли окклюзию LCA на период 15 минут.

Для внутривенного введения соединения также растворяли в ДМСО, разбавленном дистиллированной водой (5% ДМСО), и вводили за 5 минут до окклюзии непосредственно в левую яремную вену. Доза и вводимый объем для обоих соединений составили 1 мг/кг и 1 мл/кг соответственно. Период окклюзии также составил 15 минут.

Давление крови и электрокардиограмму измеряли при помощи мостикового усилителя постоянного тока и модуля частоты сердечных сокращений (PLUGSYS; Hugo Sachs Elektronik, March, Germany). Регистрацию данных осуществляли при помощи персонального компьютера через аналоговый цифровой преобразователь. Ранние желудочковые экстрасистолы (VPB), желудочковую пароксизмальную тахикардию (VT) и фибрилляцию желудочков (VF) оценивали в соответствии с указаниями Lambeth Convention (Лондон 1987 г.). Результаты представлены в виде средних значений.