способ выявления микобактерий с поверхностей
Классы МПК: | C12Q1/04 установление присутствия и(или) вида микроорганизма; использование селективных сред для испытания антибиотиков или бактерицидов; составы, содержащие химический индикатор для этих целей |
Автор(ы): | Мордовской Г.Г., Зуева М.Н. |
Патентообладатель(и): | Мордовской Георгий Георгиевич, Зуева Марина Николаевна |
Приоритеты: |
подача заявки:
1999-05-13 публикация патента:
20.03.2002 |
Изобретение относится к медицинской и ветеринарной микробиологии. Может быть использовано при лабораторной диагностике туберкулеза. Способ включает сбор смоченным тампоном и культивирование микобактерий. В качестве тампона используют эластичный мелкопористый материал. Смачивание и инкубирование тампона осуществляют в растворе, ингибирующем развитие других микроорганизмов. Культивируют микобактерии, адсорбированные на тампоне и выделенные из раствора центрифугированием, раздельно на питательных средах. Изобретение направлено на повышение выявляемости микобактерий и сокращение сроков исследования. 2 з.п. ф-лы, 4 табл.
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3
Формула изобретения
1. Способ выявления микобактерий с поверхностей путем сбора смоченным тампоном и последующего культивирования микобактерий, отличающийся тем, что в качестве тампона используют эластичный мелкопористый материал, смачивание и последующее инкубирование тампона осуществляют в растворе, ингибирующем развитие других микроорганизмов, и культивируют микобактерии, адсорбированные на тампоне и выделенные из раствора центрифугированием, раздельно на питательных средах. 2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве эластичного мелкопористого материала используют поролон. 3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что смачивание осуществляют 5%-ным раствором фосфорно-кислого натрия трехзамещенного.Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к микробиологии, в частности к медицинской и ветеринарной микробиологии, и может быть использовано для лабораторной диагностики туберкулеза. Известен способ выявления микобактерий с различных поверхностей, включающий смыв ватным тампоном, смоченным изотоническим раствором хлорида натрия с последующим перенесением материалов в банку с бусами, добавлением 10-ного раствора Na3PO4 и встряхиванием в течение 10 мин, инкубацию в термостате при 37oС в течение 24 ч, перенос материала в пробирки, центрифугирование при скорости 1500 оборотов в 1 мин в течение 15 мин и посев осадка в 3-4 пробирки с питательными средами Левенштейна-Иенсена и Финн-2 (Н.И. Любкина, Бактериовыделители в условиях современной эпидемической ситуации по туберкулезу Дис... канд. мед наук. - М. - 1989). Известный способ характеризуется низкой точностью лабораторной диагностики, так как применение для смыва ватного тампона, который в дальнейшем не используется для культивирования, ведет к количественным потерям микобактерий из-за их фиксации на вате. Многочисленные манипуляции по переносу материала при обработке перед посевом повышают риск его дополнительного загрязнения другими микроорганизмами, что в дальнейшем приводит к увеличению числа проростов посторонней микрофлоры. Наличие проростов снижает выявляемость микобактерий туберкулеза, то есть точность лабораторной диагностики. Культивирование в 3-4 пробирках с питательной средой ведет к дроблению посевного материала, следовательно, к снижению выявляемости микобактерий туберкулеза и удлинению сроков их роста. Наиболее близким к данному способу по технической сущности и достигаемому результату является способ выявления микобактерий с поверхностей ватным тампоном, смоченным 5%-ным раствором хлорида натрия, включающий обработку перед посевом 4%-ным раствором КОН, нейтрализацию тампона и осадка 5%-ной лимонной кислотой, посев на плотные питательные среды Левенштейна-Иенсена и "Новая" (Н.В. Попцова Пробл. туберкулеза - 1974. - 8. - С.17-20). Недостатком указанного способа является то, что при его осуществлении не обеспечивается необходимая точность лабораторной диагностики из-за количественных потерь исследуемого материала, нарушения жизнеспособности в нем микобактерий туберкулеза. Обработка материала перед посевом для уничтожения посторонней микрофлоры 4%-ным раствором сильной щелочи снижает жизнеспособность микобактерий, так как не обеспечивает для них щадящих условий, что приводит к уменьшению выявляемости и более поздним срокам роста на питательных средах. Посев осуществляется только на плотные питательные среды, что также не позволяет повысить выявлиемость микобактерий туберкулеза и ведет к удлинению сроков культивирования. Следовательно, указанный способ не обеспечивает достаточную точность лабораторной диагностики и тем самым снижает достоверность последующего анализа результатов исследования. В основу изобретения положена задача повышения точности лабораторной диагностики путем снижения количественных потерь и сохранения жизнеспособности микобактерий туберкулеза в исследуемом материале при сокращении времени лабораторных исследований. Поставленная задача решается тем, что в известном способе выявления микобактерий с поверхностей путем сбора смоченным тампоном и последующего культивирования микобактерий в качестве тампона используют эластичный мелкопористый материал, смачивание и последующее инкубирование тампона осуществляют в растворе, ингибирующем развитие других микроорганизмов, и культивирование микобактерий, адсорбированных на тампоне и выделенных из раствора центрифугированием, производят раздельно на питательных средах. В качестве мелкопористого материала используют поролон, который хорошо адсорбирует микроорганизмы при смыве и легко выделяет их при дальнейшем культивировании, что позволяет снизить количественные потери микобактерий туберкулеза. Применение для смачивания тампона 5%-ного раствора Na3PО4, который одновременно служит для обработки материала от посторонней микрофлоры, позволяет увеличить выявляемость микобактерий, так как не нарушает их жизнеспособность и уменьшает число проростов посторонней микрофлоры, что повышает точность лабораторной диагностики. Раздельное культивирование микобактерий, адсорбированных на тампоне и выделенных из раствора центрифугированием, а также использование для культивирования микобактерий, адсорбированных на тампоне жидкой или полужидкой питательной среды, обеспечивающей более полный контакт микобактерий с питательным субстратом, ведет к сокращению сроков роста и повышению выявляемости микобактерий туберкулеза, а следовательно, повышает точность лабораторной диагностики. Пример применения способаТампон из мелкопористой поролоновой губки размером 15 мм




Класс C12Q1/04 установление присутствия и(или) вида микроорганизма; использование селективных сред для испытания антибиотиков или бактерицидов; составы, содержащие химический индикатор для этих целей