n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты
Классы МПК: | C07D239/62 барбитуровые кислоты C07D239/66 тиобарбитуровые кислоты A61K31/515 барбитуровые кислоты; их производные, например натриевая соль пентобарбитала A61P31/12 противовирусные средства |
Автор(ы): | Ашкинази Р.И. |
Патентообладатель(и): | Ашкинази Римма Ильинична |
Приоритеты: |
подача заявки:
1998-05-26 публикация патента:
27.08.2002 |
Изобретение относится к медицине, точнее к фармакологии, конкретно к синтетическим биологически активным соединениям гетероциклического ряда. Задача изобретения - получение новых химических соединений, обладающих противовирусной, иммуностимулирующей, антихламидийной и противотуберкулезной активностью, а также противомикробной, антиагрегационной, антиатеросклеротической, психостимулирующей, психодепрессивной, анальгезирующей, гипогликемической, противоязвенной, гепатопротекторной и антиоксидантной активностями. Другими словами, задача изобретения - синтез биологически активного вещества, превосходящего прототип по биологической активности и по широте биологического действия. Поставленная задача решается путем синтеза группы новых химических соединений - N-замещенных производных 5-оксииминобарбитуровой (виолуровой) кислоты общей формулы (1), где значения радикалов X, R1 и R2 указаны в тексте описания. Приведены примеры синтеза веществ, данные выходов продуктов, данные элементного анализа и результаты экспериментов по определению их биологических свойств. 45 з.п.ф-лы, 19 табл.
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188196/2188196-1t.gif)
Формула изобретения
1. N-Замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой (виолуровой) кислоты общей формулы (1)![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188196/2188196-7t.gif)
где Х - атом кислорода или серы;
R1- выбран из группы: насыщенный алкан с числом атомов углерода 2-10 (за исключением н-гексила); ненасыщенный алкан с числом атомов водорода 2-10; циклоалкан; арилалкан (за исключением бензила) и арил, которые могут иметь 1-3 заместителя;
R2 - атом водорода или выбран из группы: насыщенный алкан с числом атомов углерода 1-10 или ненасыщенный алкан с числом атомов углерода 2-10; циклоалкан; арилалкан; арил (за исключением фенила),
обладающие антимикобактериальной (возбудители туберкулеза и микобактериозов), иммуностимулирующей, противохламидийной, противовирусной, противотуберкулезной, антиагрегационной, психостимулирующей, психодепрессивной, антиоксидантной, анальгезирующей, гипогликемической, антиатеросклеротической, противоязвенной и гепатопротекторной активностями. 2. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=O, Rl=n-Bu, R2=H (II). 3. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=O, R1=t-Bu, R2=H (III). 4. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=i-C6H13, R2=Н (V). 5. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=n-С7Н15, R2=Н (VI). 6. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=n-С10-Н21, R2=H (VII). 7. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=cyclohexyl, R2=Н (VIII). 8. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=O, R1=allyl, R2=H (IX). 9. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=2-(1-cyclohexenylethyl), R2=Н (X). 10. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=p-FC6H4CH2, R2=Н (XII). 11. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=р-(СН3О)С6Н4СН2, R2=Н (XIII). 12. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=PhCH2CH2, R2=Н (XIV). 13. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=р-FС6Н4СН2СН2, R2=Н (XV). 14. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=Ph(СН3)СН, R2=Н (XVI). 15. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=РhСН2(СН3)СН, R2=Н (XVII). 16. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=R2=cyclohexyl (XVIII). 17. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=O, R1=Ph, R2=H (XIX). 18. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=о-СН3С6Н4, R2=Н (XX). 19. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=m-СН3С6Н4, R2=Н (XXI). 20. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=р-СН3С6H4, R2=Н (XXII). 21. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=р-ЕtС6Н4, R2=H (XXIII). 22. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=2,4,6-(СН3)3C6Н2, R2=H (XXIV). 23. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=o-FC6H4, R2=H (XXV). 24. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=m-FC6H4, R2=Н (XXVI). 25. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=O, R1=р-FС6Н4, R2=H (XXVII). 26. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=O, R1=р-СlС6Н4, R2=H (XXVIII). 27. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=р-ВrС6Н4, R2=Н (XXIX). 28. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=O, R1=p-(EtO)C6H4, R2=H (XXX). 29. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=O, R1=2,5-(СН3О)2С6Н3, R2=Н (XXXI). 30. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1=m-(СF3)С6Н4, R2=H (XXXII). 31. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=O, R1=р-(ЕtOОС)С6Н4, R2=H (XXXIII). 32. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=О, R1 =
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188006/945.gif)
Х=О, R1=p-EtC6H4, R2=СН3 (XXXV). 34. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=S, R1=Et, R2=H (XXXVI). 35. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=S, R1=i-С6Н13, R2=Н (XXXVII). 36. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=S, R1=cyclohexylR, R2=Н (XXXVIII). 37. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=S, R1=allyl, R2=H (XXXIX). 38. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=S, R1=R2=Et (XLI). 39. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=S, R1=о-СН3С6Н4, R2=H (XLII). 40. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=S, R1=р-СН3C6H4, R2=H (XLIII). 41. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
Х=S, R1=o-FC6H4, R2=Н (XLIV). 42. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=S, R=p-FC6H4, R2=H (XLV). 43. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=S, R1=p-ClC6H4, R2=H (XLVI). 44. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=S, R1=р-(СН3О)С6Н4, R2=H (XLVII). 45. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=S, R1=Ph, R2=р-(СН3О)С6Н4 (XL VIII). 46. Вещество по п.1, отличающееся тем, что
X=S, R1=R2=р-(СН3О)С6Н4 (L).
Описание изобретения к патенту
Область техники. Изобретение относится к медицине, точнее к фармакологии, конкретно к синтетическим биологически активным соединениям гетероциклического ряда, обладающим противовирусной, иммуностимулирующсй (интерферониндуцирующей), антихламидийной, противотуберкулезной, антиагрегационной, антиатеросклеротической, психостимулирующей, психодепрессивной, анальгезирующей, гипогликемической, противоязвенной, гепатопротекторной и антиоксидантной активностями: производным 5-оксииминобарбитуровой (виолуровой) кислоты. Указанные производные имеют высокую противовирусную активность по отношению к вирусам простого герпеса, высокую активность как индукторы интерферона, высокую антихламидийную активность, а также антимикробную активность по отношению к микобактериям туберкулеза, антиаггрегационную, аитисклеротическую, психостимулирующую, психодепрессивную, анальгезирующую, гипогликемическую, противоязвенную, гепатопротекторную и антиоксидантную активности. Соединения предназначены, в основном, для использования в медицинской практике для лечения вирусных инфекций; инфекций, вызванных хламидиями; заболеваний, сопровождающихся иммунодефицитом: злокачественных новообразований; туберкулеза; микобактериозов; инфаркта миокарда; заболеваний почек, печени, нервной системы и ряда других; для использования в качестве противоболевых средств. Кроме того, указанные соединения могут быть использованы для тех же целей в ветеринарии и косметологии. Уровень техники. Как известно, одну из наиболее серьезных проблем современной медицины представляют вирусные заболевания. Как правило, вирусные инфекции, например, вызываемые вирусами группы герпеса, крайне плохо поддаются лечению. Это связано как с недостаточной эффективностью существующих препаратов, так и с быстрой изменчивостью вирусов, мутации которых приводят к появлению более устойчивых форм (Pharmaceutical microbiology. Ed. by W.B.Hugo and A.D.Russel, Blackwell Scientific Publications, Oxford, 1987; Saltzmann R., Jurewicz R., Boon B, Safety of famciclovir in patients with herpes zoster and genital gerpes, Antimicrobial agents and Chemotheraphy, 1994, V.38, No. 10). Часто вирусные заболевания протекают на фоне снижения активности иммунной системы организма) и сопровождаются вторичными инфекциями, это же относится и к онкологическим заболеваниям. Поэтому проблема разработки эффективных противовирусных и противоопухолевых препаратов тесно связана с поиском средств для лечения иммунодефицитных состояний различного происхождения. Как известно, стимуляторы иммунной системы используются при лечении ряда онкологических заболеваний. Известные противовирусные препараты можно условно разделить на 2 группы по типам механизмов их действия. Действие препаратов первой группы связано с подавлением репродукции вирусов в организме (Pharmaceutical microbiology. Ed. by W.B.Hugo and A.D.Russel, Blackwell Scientific Publications, Oxford, 1987). К таким препаратам относятся производные адамантана -ремантадин (Машковский М. Д. Лекарственные средства. Часть II. - М.: Медицина, 1993); тиосемикарбазоны (метисазон, там же), наиболее активными являются производные и аналоги нуклеозидов - ацикловир, ганцикловир, ретровир ( Pharmaceutical microbiology. Ed. by W.B.Hugo and A.D.Russel, Blackwell Scientific Publications, Oxford, 1987) и другие. Противовирусные препараты второй группы оказывают эффект не столько за счет воздействия на сами вирусы, сколько за счет стимуляции иммунной защиты организма и усиления выработки эндогенных интерферонов (Машковский М.Д. Лекарственные средства. Часть II. - М.: Медицина, 1993). Препаратами такого типа являются арбидол (там же), неовир (заявка РФ PCT/RU 95/00079 - WO 96/07423, опубл. 14.03.96, Иммуномодулирующее лекарственное средство) и другие. Несмотря на интенсивность поисков противовирусных и иммуностимулирующих средств среди самых различных классов химических соединений, потребность в новых препаратов такого типа только возрастает, что связано как с недостаточной эффективностью имеющихся лекарств (особенно в случае иммунодефицитных состояний), так и с появлением новых форм вирусов, устойчивых к воздействию известных химиотерапевтических агентов. Анализ литературы показывает, что наибольшее количество эффективных противовирусных препаратов обнаружено среди производных пиримидина (Negwer М., Organic-chemical drugs and their synonims. Academic-Verlag, Berlin, 1987). В ряду пиримидина важное место занимают производные барбитуровой кислоты, обладающие разнообразной биологической активностью (Bojarski J.T., Mockrosz J. L. , Barton H.J., Paluchowska M.H. Advances in Het. Chem., Ed. by A.R.Katritzky, 1985, V. 38). Так, среди барбитуровых кислот было обнаружено немало активных противовирусных (Спасов А.В., Райков З.Д., авт. свид. Болгарии No. 17122, Мкл. С 07 D 51/22, заявл. 05.06.71; Ueda Т., Kato S., патент Японии 11832 ("62), Aug. 23, заявлен 10.05.1958; Misra V.S., Khan M.A., Srivastava N. , Verma H.N., Current Science, V.55, No. 23) и противоопухолевых агентов (Krepelka J. , Kotva R. , Pijman V. , Semonsky M., патенты Чехословакии NN215554; 215593; 215580, Мкл. C 07 D 239/54 от 15.04.1984; Ukita C., патент Японии 1445 ("64), Feb. 14). Соединения этого класса обладают бактериостатическим (Biswas С. Dissert. Abstracts 1964, V.24, No. 9, P.3501; Langley B. W. , патент Великобритании No. 845378 от 24.08.60), противовоспалительным (Eiden F., Kucklaender U. Ger. Offen 1944419(CI C07 D, A61k),11 mar 1991), и иммуномодулирующим (Blythin D.J., Coldwell N.J., US patent No 4272535, publ. 09.07.1981) действиями. Среди производных пиримидина существует довольно обширная группа 5-оксииминобарбитуровых (виолуровых) кислот. В отличие от других групп пиримидинов и барбитуровых кислот виолуровая кислота и ее производные крайне мало исследованы с позиции биологической активности. Виолуровая кислота и некоторые ее производные были известны давно (Hantzsch A., Isherwood P.C., Chem. Berichte, 1909, В.42),однако использовались только как аналитические реагенты и полупродукты в органическом синтезе (Ziegler M., Glemser О., Microchim. Acta, 1956, No 10; Ligten J.W., Velthuyzen H., Microchim. Acta, 1964, No 5; R.GHOSH & B.R.SINGH, "Protor Donor-Acceptor Equilibria in Solution...", Indian Jomal of Chemisrty, V.21A, January 1982; GARCIA-ESPANA, MARIA-JESUS BALESTER et al., J.CHEM.SOC.,DALTON TRANS.,1988; SANDRO GHISLA and STEPHEN G. MAYHEW, Eur.J.Biochem.63, 1976). Лишь в 1988 г. виолуровая кислота была предложена в качестве антидотного средства при отравлениях нитросоединениями (Бурбелло А. Т. Автореф. дисс. на соиск. уч. степени д.м.н., 1992). Другое производное - натриевая соль 2-метилтиовиолуровой кислоты - было использовано как противоотечный препарат при токсическом отеке легкого (Бурбелло Ф.Т, Денисенко П. П., Слесарев В.И., Сафонова А.Ф., Краснов К.А., Баскович Г.А., Авт. свидетельство СССР N 4774701, приоритет 15.01.1989). В работе (Шугалей И. В. , Целинский И.В., Краснов К.А., Седельникова Н.А., Журн. Общей Химии, 1993, Т. 63, Вып. 7) показано, что виолуровая кислота обладает свойством стабилизировать гемоглобин, препятствуя его окислению в метгемоглобин на моделях in vitro. Виолуровую кислоту получают из барбитуровой кислоты с помощью реакции нитрозирования (Hantzsch A. , Isherwood P.C., Chem. Berichte, 1909, В.42). Реакция имеет общий характер, то есть другие (N-замещенные) производные виолуровой кислоты могут быть получены таким же путем из соответствующих производных барбитуровой кислоты. Необходимые для синтеза производные барбитуровой кислоты получают из соответствующих замещенных мочевин. При этом для получения барбитуровых кислот, имеющих заместитель при только одном атоме азота используют, как правило, метод Фишера (Fischer E., Diltey A., Lieb. Annalen, 1904, В.335), то есть конденсацию монозамещенной мочевины с малоновым эфиром в присутствии этилата натрия. Для получения барбитуровых кислот, имеющих два заместителя, при атомах азота N1 и N3, используют конденсацию соответствующей N, N"-дизамещенной мочевины с малоновой кислотой в присутствии PCl5 или РОС13 (Senda S., Fujimura H., Izumi M., патент Японии 29856("64), Dec. 22). Наконец, необходимые для синтеза производные мочевины и тиомочевины получают общедоступными методами, рассмотренными в работе (Вишнякова Т.И., Голубева И.А., Глебова Е.В., Усп. Химии, 1985, T.LIV). В качестве прототипа выбрана 5-оксииминобарбтуровая (виолуровая) кислота (Hantzsch A., Isherwood Р.С., Chem. Berichte, 1909, В.42). Выбор обусловлен тем обстоятельством, что виолуровая кислота, обладающая биологической активностью, является среди известных соединений наиболее близким по химической структуре к заявляемому веществу. Задача изобретенияЗадачей изобретения является получение новых химических соединений, обладающих противовирусной активностью (по отношению к вирусам простого герпеса), иммуностимулирующей активностью (за счет индукции выработки эндогенных интерферонов в организме), антихламидийной и противотуберкулезной активностью, а также антиагрегационной, антиатеросклеротической, психостимулирующей, психодепрессивной, анальгезирующей, гипогликемической, противоязвенной, гепатопротекторной и антиоксндантной активностями. Другими словами, задача изобретения сводится к химическому синтезу биологически активного вещества, превосходящего прототип по биологической активности и по широте биологического действия. Сущность изобретения
Поставленная задача решается путем синтеза группы новых химических соединений - N-замещенных производных 5-оксииминобарбитуровой (виолуровой) кислоты общей формулы (1)
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188196/2188196-3t.gif)
где X - атом кислорода или серы;
R1 выбран из группы: насыщенный алкан с числом атомов углерода 2-10 (за исключением н-гексила); ненасыщенный алкан с числом атомов водорода 2-10; циклоалкан: арилалкан (за исключением бензила) и арил, которые могут иметь 1-3 заместителя;
R2 - атом водорода или выбран из группы: насыщенный алкан с числом атомов углерода 1-10 или ненасыщенный алкан с числом атомов углерода 2-10; циклоалкан; арилалкан; арил (за исключением фенила). На момент подачи заявки наилучшее решение поставленной задачи получено заявителем при сочетаниях, приведенных в конце текста после таблиц. Заявляемые вещества является новыми, поскольку они неизвестны из доступных источников информации. Следует отметить, что использование остальных представителей групп, указанных в формуле (1) (из которых производится выбор), не имеет принципиального значения для решения задачи настоящего изобретения, поскольку факт наличия заявляемой биологической активности обнаруживается в той или иной степени у всех представителей данной группы при Х, R1, R2, перечисленных в общей формуле. Способ синтеза заявляемых веществ является также общим для всех членов группы. Таким образом, принципиальное значение имеет не конкретная структура радикалов R1 и R2, которая влияет лишь на количественный уровень биологической активности, а принадлежность этих радикалов к химическим группам, перечисленным в общей формуле (1). Заявляемое решение является неочевидным. Никаких данных о противовирусной, иммунотропной, антихламидийной, антибактериальной, антиагрегационной, антиатеросклеротической, психостимулирующей, психодепрессивной, анальгезирующей, гипогликемической, противоязвенной, гепатопротекторной и антиоксидантной активности 5-оксииминобарбитуровой кислоты и ее производных ранее не было известно. Таким образом, получение группы новых производных 5-оксииминобарбитуровой (виолуровой) кислоты и обнаружение у них противовирусной, иммуностимулирующей (интерферониндуцирующей), антихламидийной, противотуберкулезной, антиагрегационной, антиатеросклеротической, психостимулирующей, психодепрессивной, анальгезирующей, гипогликемической, противоязвенной, гепатопротекторной и антиоксидантной активностей никак не вытекает очевидным образом из современного уровня техники. Раскрытие изобретения. Сущность изобретения поясняется приведенными ниже примерами синтеза промежуточных веществ и общим примером синтеза заявляемых веществ, данными выходов промежуточных и целевых продуктов, данными элементного анализа целевых продуктов и результатами 14 серий экспериментов по определению их биологических свойств. Примеры 1 и 2 - варианты синтеза промежуточных веществ (LI-IC) (получение производных барбитуровой кислоты, перечисленных в Таблицах 1 и 2). Это первый этап синтеза заявляемых веществ. Пример 3 - вариант синтеза заявляемых веществ (получение целевых продуктов (II-L), т.е. производных 5-оксииминобарбитуровой кислоты, перечисленных в Таблице 3 ). Это второй этап синтеза заявляемых веществ. Таблица 1 - исходные продукты для синтеза промежуточных веществ, температуры плавления и выход промежуточных веществ (LI-XCII), т.е. N-монозамещенных производных барбитуровой кислоты. Таблица 2 - исходные продукты для синтеза промежуточных веществ, температуры плавления и выход промежуточных веществ (XCIII-IC), т.е. N,N"-дизамещенных производных барбитуровой кислоты. Таблица 3 - выход и температуры плавления целевых продуктов (II-L), т.е. N-замещенных производных 5-оксииминобарбитуровой кислоты. Таблица 4 - данные элементного анализа целевых продуктов (II-XXXV). Таблица 5 - данные элементного анализа целевых продуктов (XXXVI-L). Данные четырнадцати серий экспериментов по определению биологической активности заявляемых соединений содержат:
Эксперимент 1 - Определение антимикробного (М. smegmatis, M. tuberculosis) действия заявленных веществ (с Таблицей 6)
Эксперимент 2 - Определение максимально переносимой дозы заявленных веществ ( с Таблицей 7). Эксперимент 3 - Определение действия заявленных веществ на вирус герпеса (с Таблицей 8). Эксперимент 4 - Определение интерферониндуцирующей активности заявленных веществ (с Таблицей 9). Эксперимент 5 - Определение действия заявленных веществ на Chlamydia trachomatis (с Таблицей 10). Эксперимент 6 - Определение антиаггрегационных свойств заявленных веществ (с Таблицей 11). Эксперимент 7 - Определение антиатеросклеротических свойств заявленных веществ (с Таблицей 12). Эксперимент 8 - Определение психостимулирующей активности заявленных веществ (с Таблицей 13). Эксперимент 9 - Определение психодепрессивной активности заявленных веществ (с Таблицей 14). Эксперимент 10 - Оценка анальгезирующей активности заявленных веществ (с Таблицей 15). Эксперимент 11 - Оценка гипогликемического действия заявленных веществ (с Таблицей 16). Эксперимент 12 - Определение противоязвенного действия заявленных веществ (с Таблицей 17). Эксперимент 13 - Определение гепатопротекторной активности
заявленных веществ (с Таблицей 18). Эксперимент 14 - Определение антиоксидантного действия заявленных веществ (с Таблицей 19). Примеры синтеза заявленных веществ. Лучший известный авторам способ синтеза заявленных веществ состоит из двух основных этапов:
1) синтезируют соответствующее производное барбитуровой кислоты (LI-IC) из соответствующих производных мочевины (C-CXLVIII, смотри Таблицы 1 и 2) и малоновой кислоты (CIL, CL);
2) получают целевые соединения (II-L) из синтезированных на первом этапе промежуточных веществ (LI-IC) путем их обработки NaNO2 и кислотой. Способ является общим для всех заявляемых соединений
Пример 1. Вариант синтеза промежуточных веществ (LI-XCII), т.е. N-монозамещенных производных барбитуровой кислоты, - вариант первого этапа синтеза заявленных веществ.
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188196/2188196-4t.gif)
4,6 г (0,2 моль) металлического натрия растворяют в 100 мл абсолютного этанола. К полученному раствору прибавляют 16 г (0,1 моль) малонового эфира и перемешивают 5 минут. Затем прибавляют 0,1 моль производного мочевины (C-CXLIII) и перемешивают 6 часов при кипячении смеси с обратным холодильником Затем охлаждают смесь до 25oС и прибавляют 30 мл воды. Раствор фильтруют от осадка, после чего подкисляют НС1 до рН 1, охлаждают до 5oС и выдерживают при этой температуре 3 часа. Выпавший осадок фильтруют, промывают водой и сушат. Продукт перекристаллизовывают из спирта. Выходы и температуры плавления приведены в Таблице 1. Пример 2. Вариант синтеза промежуточных веществ (XCIII-IC), т.е. N,N"-дизамещенных производных барбитуровой кислоты - вариант выполнения первого этапа синтеза заявленных веществ.
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188196/2188196-5t.gif)
Прибавляют к 10,4 г (0,1 моль) малоновой кислоты (CL) 25 мл хлороформа и перемешивают. К полученной смеси прибавляют 31,4 г (0,15 моль) пятихлористого фосфора и перемешивают при 40oС до полного растворения продуктов. Затем прибавляют 0,1 моль производного мочевины (CXLII CXLVIII) и перемешивают 12 часов при кипячении смеси с обратным холодильником. Затем охлаждают смесь до 25oС, прибавляют 50 мл воды, перемешивают и отделяют водный слой. Повторно экстрагируют органический слой 50 мл воды. Затем прибавляют к органическому слою 30 мл 25%-ного раствора аммиака и 50 мл воды, смесь тщательно взбалтывают и отделяют водно-аммиачный слой. Водно-аммиачный раствор выдерживают 3 часа при 25oС, после чего фильтруют от осадка и фильтрат подкисляют НС1 до рН 1. Выпавший осадок фильтруют, промывают водой и сушат. Продукт перекристаллизовывают из спирта. Выходы и температуры плавления приведены в Таблице 2. Пример 3. Вариант синтеза заявляемых веществ (получение целевых продуктов (II-L), т.е. производных 5-оксииминобарбитуровой кислоты) - вариант выполнения второго этапа синтеза заявленных веществ.
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188196/2188196-6t.gif)
Растворяют 0,1 моль производного барбитуровой кислоты (LI-IC) в 60 мл воды, содержащей 6,0 г (0,15 моль) NaOH. К полученному прозрачному раствору прибавляют 10 мл спирта, затем приливают раствор 7,6 г (0,11 моль) нитрита натрия в 30 мл воды и затем перемешивают. Охлаждают смесь до 10oС, затем при перемешивании прибавляют 18 г (0,3 моль) уксусной кислоты и выдерживают смесь при 25oС 1 час. К полученной смеси прибавляют 25 мл 30%-ной соляной кислоты и перемешивают 10 минут. Выпавший осадок фильтруют, промывают 50%-ным спиртом, затем водой. Продукт перекристаллизовывают из водного спирта и сушат в вакууме в присутствии P2O5. Выходы и температуры плавления приведены в Таблице 3, данные элементного анализа - в Таблицах 4 и 5. Экспериментальная проверка биологической активности заявляемых соединений. Эксперимент 1. Определение антимикробного (М. smegmatis, M. tuberculosis) действия заявляемых веществ. Для определения антимикробной активности были использованы стандартные штаммы Mycobacteium smegmatis ATCC607 и Mycobacterium tuberculosis H37Rv, чувствительные ко всем антимикробным веществам. Оценку антимикобактериального действия проводили методом серийных разведений [1] . М. smegmatis ATCC607 для засева выращивали на жидкой синтетической среде N-1. Вещества растворяли в диметилсульфоксиде (ДМСО) и титровали в среде N-1 так, что данный препарат содержался в отдельных пробирках со средой в концентрациях от 200 до 0,025 мг/л. Концентрация вещества в среде соседних пробирок отличалась в два раза. В контроле использовали ДМСО, который титровали так же, как и препарат. Тест-штамм бактерий добавляли в количестве 1-2
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188002/8226.gif)
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188002/8226.gif)
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188002/8226.gif)
1) контроль спонтанной продукции интерферонов (ИФН) лимфоцитами,
2) контроль протекания процесса при воздействии стандартизированного индуктора ИФН - N-метил-N-(а,D-глюкопиранозил)аммоний-10-метиленкарбоксилат акридона (циклоферон),
3) контроль протекания процесса при воздействии стандартизированного индуктора ИФН - Неовира (натрия 10-метиленкарбоксилат-9-акридон) с соответствующим содержанием DMCO в опытных пробах,
4) контроль спонтанной продукции интерферонов в присутствии DMCO в количестве, соответствующем испытуемым образцам. Контрольные и опытные образцы инкубировали 24 часа при 37oС. После инкубации пробы центрифугировались при 2000 g для осаждения клеточных элементов и из проб отбирался ИФН-содержащий супернатант, который анализировали на количественное содержание ИФН. Осадок клеток ресуспендировали в прежнем объеме питательной среды, окрашивали витальным красителем - трипановым синим - и подсчитывали число клеток в камере Горяева (как описано выше) для определения цитотоксического действия препаратов. Количественное определение содержания ИФН в контрольных и опытных образцах производили с использованием иммуноферментной тест-системы ProCon IF2 plus на ИФН-а производства ТОО "Протеиновый контур". Для определения количества интерферона в пробе использовали твердофазный иммуноферметный метод с использованием пероксидазы хрена в качестве индикаторного фермента. Активность связанной пероксидазы измеряли с использованием автоматического фотометра для микропланшетов с микропроцессором при длине волны 450 нм. Для подсчета результатов параллельно определяли активность ИФН у станартных растворов ИФН, содержащих известное количество препарата. На основании полученных результатов строилась калибровочная кривая, позволяющая при использовании микропроцессора автоматического фотометра получать данные, выраженные в Международных Единицах активности (ME). Результаты анализа выражаются в ME активности ИФН на 1 мл в данной индукционной системе, содержащей 3
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188002/8226.gif)
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188002/8226.gif)
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188003/177.gif)
![n-замещенные производные 5-оксииминобарбитуровой кислоты, патент № 2188196](/images/patents/282/2188002/8226.gif)
1. Pharmaceutical microbiology. Ed. by W.B.Hugo and A.D.Russel Blackwell Scientific Publications, Oxford, 1987, 511 p. 2. Saltzmann R., Jurewicz R., Boon B, Safety of famciclovir in patients with herpes zoster and genital gerpes, Antimicrobial agents and Chemotheraphy, 1994, vol.38, N. 10, p.2454-2457. 3. Машковский М. Д. Лекарственные средства. Часть II - М.: Медицина, 1993. - 688 с. 4. Заявка РФ РСТ/RU 95/00079 (WO 96/07423, опубл.14.03.96). Иммуномодулирующее лекарственное средство, авторы-заявители О.Травкин и Д.Генкин. 5. Negwer M. Organic-chemical drugs and their synonims, Academic-Verlag, Berlin, 1987. 6. Bojarski J.T., Mockrosz J.L., Barton H.J., Paluchowska M.H. Advances in Het. Chem., Ed. by A.R.Katritzky, 1985, v.38, p. 229-297. 7. Спасов А. В., Райков З.Д. Авт.свид.Болгарии N. 17122, м. кл. C 07 D 51/22, заял.05.06.71. 8. Ueda T. , Kato S. , патент Японии 11832 (1962), Aug. 23, заяв. 10.05.1958. 9. Misra V.S., Khan M.A., Srivastava N., Verma H.N. Current Science. v. 55, N, 23, p.1167-1171. 10. Krepelka j., Kotva R., Pijman V., Semonsky M. Патенты Чехословакии N 215554; 215593; 215580, м.кл. C 07 D 239/54 от 15.04.1984. 11. Ukita C. Патент Японии 1445 (1964) Feb. 14, заяв.11.02.1960. 12. Biswas C. Dissert. Abstracts 1964, vol.24, N.9, p.3501. 13. Langley B.W. Патент Великобритании N. 845378 от 24.08.60. 14. Eiden F., Kucklaender U. Ger. Offen 1.944.419 (C1 C07 D, A61k), 11 mar 1991, Appl. 02 Sep. 1969. 15. Blythin D.J., Coldwell N.J. Patent US No 4272535, publ. 09.07.1981 (appl. 27.07.79). 16. Hantzsch A. , Isherwood P.C., Chem. Berichte, 1909, B.42, S. 986-1000. 17. Ziegler M., Glemser O. Microchim. Acta, 1956, 10, s.1515-1517. 18. Ligten J.W., Velthuyzen H., Microchim. Acta, 1964, 5, s.759-763. 19. Бурбелло А.Т. Автореф.дисс. на соиск. уч. степени д.м.н. 1992, 40 с. 20. Бурбелло Ф.Т., Денисенко П.П., Слесарев В.И., Сафонова А.Ф., Краснов К.А., Баскович Г.А., Авт. свид.СССР N 4774701, приоритет 15.01.1989. 21. Шугалей И.В., Целинский И.В., Краснов К.А., Седельникова Н.А., журн. Общая химия, 1993, Т.63, Вып.7, С.1649-1650. 22. Fischer E., Diltey A., Lieb. Annalen, 1904, B.335, S.334-368. 23. Senda S., Fujimura H., Izumi M. Патент Японии 29.856("64), Dec. 22, заявл. Oct.05.1961 (4 pp). 24. Вишнякова Т.И., Голубева И.А., Глебова Е.В. Усп. Химии, 1986, T.LIV, C.429-449. 25. Irwin S., Psychopharmacology, 1968, 13, 222-257. 26. Gentry G.A., Lawrency N., Lushbaugh N. Isolation and differentiation of Herpes simplex virus and Trichomoonas vaginalis in cell culturre, J. of Clinical Microbiology 1985, vol.22, 2, p.199-204. 27. Wang S-P. , Grayston J.T. Serotypiong of Clamydia trachomatis by inderect fluoresceent-antibody staining of inclusions in cell culture with monoclonal antibodies. J. of Clinical Microbiology, 1991, vol.29, 7, p. 1295-1298. 28. Judson B. A., Lambert P.P. Improved Syva Micro Trac Clamydia trachomatis direct test method, Journal of Clinical Microbiology, 1988, vol.26, 12, p.2657-2658. 29. R.Chosh & B.r.Singh Protor Donor-Acceptor Equilibria in Solution..., Indian Jornal of Chemisrty, vol.21A, January 1982, p.20-22
30. GARCIA-ESPANA, MARIA-JESUS BALESTER et al., J.CHEM.SOC., DALTON TRANS., 1988, p.101-103. 31. SANDRO GHISLA and STEPHEN G.MAYHEW, Eur.J.Biochem.63, 1976, p.373-390. 32. Авторское свидетельство СССр N 1380611 от 07.03.1988 (автор - Сапос С.А.)1
Класс C07D239/62 барбитуровые кислоты
Класс C07D239/66 тиобарбитуровые кислоты
Класс A61K31/515 барбитуровые кислоты; их производные, например натриевая соль пентобарбитала
Класс A61P31/12 противовирусные средства