лечебное средство против алопеции
Классы МПК: | A61K31/565 не замещенные в положении 17 бета атомом углерода, например эстран, эстрадиол A61P5/28 антиандрогены |
Автор(ы): | КОДЗИМА Коити (JP), ХАМАДА Такаказу (JP), ЙОСИОКА Сирох (JP) |
Патентообладатель(и): | САНКИО КОМПАНИ ЛИМИТЕД (JP) |
Приоритеты: |
подача заявки:
1998-07-27 публикация патента:
10.12.2002 |
Изобретение относится к новой композиции, обладающей лечебным действием при алопеции, гирсутизме по женскому типу или себореи, или обладающей профилактическим действием против метастаза в кости, вызванного раком предстательной железы, содержащей N-[1-метил-1-(4-метоксифенил)этил]-3-оксо-4-аза- 5
-андрост-1ен-17
-карбоксамид, или его фармацевтически приемлемую соль или его фармацевтически приемлемое производное. Композиция обладает повышенной эффективностью. 3 с. и 15 з.п.ф-лы, 3 табл.
Рисунок 1
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/946.gif)
Формула изобретения
1. Композиция для лечения алопеции, гирсутизма по женскому типу или себореи, или для предупреждения метастаза в кости, вызванного раком предстательной железы, содержащая фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель и эффективное количество активного ингредиента, который представляет собой N-[1-метил-1(4-метоксифенил)этил] -3-оксо-4-аза-5![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/946.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/946.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/946.gif)
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к новой композиции, полезной при лечении алопеции, гирсутизма по женскому типу или себореи, или для предупреждения метастаза в кости, вызванного раком предстательной железы. Избыточная стимуляция андрогенных гормонов, таких как дигидротестостерон (DHT), вызывает андрогензависимую алопецию (облысение по мужскому типу или подобную), угри обыкновенные, себорею, гирсутизм по женскому типу, доброкачественную гипертрофию предстательной железы и рак предстательной железы. Стероидные антиандрогенные гормоны (например, женский гормон эстроген) являются соединениями, которые, как обнаружено, способны лечить такие симптомы, вызванные избыточной стимуляцией андрогенных гормонов. Однако они имеют склонность вызывать нежелательные действия, например феминизацию, поскольку они сами обладают гормональной активностью. С другой стороны, также разработаны нестероидные антиандрогенные гормоны. Несмотря на отсутствие гормонального действия, они конкурируют с природными андрогенами за рецептор и поэтому оказывают нежелательное действие, такое как феминизация плода мужского пола или самца, или инициация механизма обратной связи, что избыточно стимулирует яичко. Так как 5![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193887/2193887-1t.gif)
Введение финастерида, который является селективным ингибитором 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/946.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/946.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193887/2193887-2t.gif)
где R1 и R2 являются одинаковыми или отличаются друг от друга, и каждый представляет атом водорода, гидроксильную группу или низшую алкоксигруппу. В формуле (I) термин "низшая алкоксигруппа" означает линейную или разветвленную C1-6-алкоксигруппу, такую как метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, изобутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, н-пентокси, изопентокси, 2-метилбутокси, неопентокси, н-гексилокси, 4-метилпентокси, 3-метилпентокси, 2-метилпентокси, 3,3-диметилбутокси, 2,2-диметилбутокси, 1,1-диметилбутокси, 1,2-диметилбутокси, 1,3-диметилбутокси или 2,3-диметилбутокси, из которых предпочтительна линейная или разветвленная C1-4-алкоксигруппа, и более предпочтительной является метоксигруппа. Термин "алопеция" означает облысение по мужскому типу и потерю волос на голове по женскому типу. Так как соединение (I) может образовывать соль, термин "фармацевтически приемлемые соли" обозначает соли соединения (I) настоящего изобретения, которое можно превратить в его соли, примерами таких солей являются предпочтительно соли щелочных металлов, такие как натриевая соль, калиевая соль и литиевая соль, соли щелочноземельных металлов, такие как кальциевая соль и магниевая соль, и соли металлов, такие как алюминиевая соль, соль железа и цинковая соль. Когда соединение (I) настоящего изобретения оставляют стоять на воздухе, оно может поглощать влагу или образовать гидрат. Такое вещество также охватывается настоящим изобретением. Соединение (I) настоящего изобретения можно получить по способу, представленному ниже:
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193887/2193887-3t.gif)
где R1 и R2 имеют указанные выше значения. В способе А соединение (I) получают посредством конденсации производного карбоновой кислоты с аминопроизводным. На стадии A1 соединение (I) получают с использованием соединения (II) или его реакционноспособного производного и соединения (III). Данную стадию осуществляют обычным методом, используемым в синтезе пептидов, например азидным методом, способом с активным сложным эфиром, способом со смешанным ангидридом или в процессе конденсации. Среди указанных способов азидный метод включает обработку азида амином (III). Азид получают посредством взаимодействия азотистой кислоты с гидразидом аминокислоты, который получают посредством взаимодействия соединения (II) или его эфира с гидразином при температуре приблизительно комнатной в инертном растворителе (например, диметилформамиде). Примерами соединений азотистой кислоты, используемых здесь, являются нитриты щелочных металлов, такие как нитрит натрия, и алкилнитриты, такие как изоамилнитрит. Взаимодействие осуществляют предпочтительно в инертном растворителе, и примерами растворителя, используемого здесь, являются амиды, такие как диметилформамид и диметилацетамид, сульфоксиды, такие как диметилсульфоксид, и пирролидоны, такие как N-метилпирролидон. Вторую стадию реакции при этом способе осуществляют обычным путем в одном реакторе. Температура реакции колеблется в интервале от -50 до 0oС на первой стадии, в то время как на второй стадии она находится в интервале от -10 до 10oС. Время, требуемое для реакции, составляет от 5 мин до 1 ч на первой стадии, в то время как на второй стадии оно находится в интервале от 10 ч до 5 сут. Способ с активным эфиром осуществляют посредством взаимодействия соединения (II) с активным этерифицирующим агентом с образованием активного эфира соединения (II), с последующим взаимодействием полученного соединения с амином (III). Обе реакции осуществляют предпочтительно в инертном растворителе, и примерами используемого здесь растворителя являются галогенсодержащие углеводороды, такие как метиленхлорид и хлороформ, простые эфиры, такие как диэтиловый эфир и тетрагидрофуран, амиды, такие как диметилформамид и диметилацетамид, и нитрилы, такие как ацетонитрил. Примерами используемого здесь этерифицирующего агента являются N-гидроксисоединения, такие как N-гидроксисукцинимид, 1-гидроксибензотриазол, N-гидрокси-5-норборнен-2,3-дикарбоксиимид, и дисульфиды, такие как дипиридилдисульфид. Этерификацию осуществляют, как правило, в присутствии конденсирующего агента, такого как дициклогексилкарбодиимид, карбонилдиимидазол или трифенилфосфин. Температура реакции составляет от -10 до 100oС при этерификации, в то время как при реакции активного эфира с амином (III) температура примерно комнатная. Время, необходимое для реакции, составляет от 30 мин до 80 ч при каждой реакции. При взаимодействии активного эфира с амином можно добавить 4-диметиламинопиридин или подобное соединение. Способ со смешанным ангидиридом осуществляют посредством взаимодействия смешанного ангидрида соединения (II) с амином. Реакцию получения смешанного ангидрида осуществляют путем взаимодействия соединения (II) с агентом, образующим смешанный ангидрид. Примерами такого агента являются низший (C1-C4)-алкилгалогенированный карбонат, такой как этилхлоркарбонат или изобутилхлоркарбонат, низший алканоилгалогенид, такой как пивалоилхлорид, (низший алкил)- или диарилцианофосфорная кислота, такая как диэтилцианофосфорная кислота или дифенилцианофосфорная кислота, или сульфонилгалогенид, такой как 2,4,6-триизопропилбензолсульфонилхлорид, пара-толуолсульфонилхлорид или метансульфонилхлорид. Взаимодействие осуществляют, как правило, в присутствии органического амина, такого как триметиламин или N-метилморфолин, при температуре от -10 до 50oС. Время, необходимое для реакции, составляет от 30 мин до 20 ч. Взаимодействие смешанного ангидрида и амина (III) проводят, как правило, в инертном растворителе (например, в указанных выше в качестве примеров галогенсодержащем углеводороде, амиде или простом эфире) в присутствии органического амина, примеры которого указаны выше. Температура реакции составляет от 0 до 80oС, а необходимое для реакции время составляет от 1 до 48 ч. С другой стороны, способ А осуществляют в смеси соединения (II), соединения (III) и агента, образующего соответствующий смешанный ангидрид, без выделения смешанного ангидрида. Процесс конденсации осуществляют путем непосредственного взаимодействия соединения (II) с амином (III) в присутствии конденсирующего агента, такого как дициклогексилкарбодиимид, карбонилдиимидазол, 1-метил-2-хлорпиридинийиодидтриэтиламин. Это взаимодействие осуществляют в условиях, используемых в описанной выше реакции получения активного эфира. Когда R1 или R2 содержит защищенную гидроксильную группу, защитную группу можно удалить обычным способом. Исходное соединение (II) или его активный эфир являются известными соединениями, или их можно получить с помощью процедуры, известной специалистам в этой области техники [см., например, J. Med. Chem., 27, 1690 (1984); J. Med. Chem., 29, 2298 (1986)]. Соединение (III) является известным соединением или его получает специалист в этой области техники [см., например, Synthesis, 593 (1976); J. Org. Chem. , 36, 305 (1971); Angew. Chem., 82, 138 (1970); Synthesis, 24 (1978); Synthetic Commun., 18, 777 (1988); Synthetic Commun., 18, 783 (1988); Organic Reaction, 3, 337 (1946); Org. Synthesis, 51, 48 (1971); Tetrahedron, 30, 2151 (1974); J. Org. Chem., 37, 188 (1972)]. Например, H2N-C(Me)(Me)-Ph(R1) (R2), который является исходным соединением настоящего изобретения, можно получить так, как показано на приведенной далее реакционной схеме:
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193887/2193887-4t.gif)
где R1 и R2 имеют указанные выше значения. Me представляет метильную группу, a Ph представляет фенильную группу, посредством реакции Гриньяра, реакции замещения гидроксильной группы азидной группой и последующим восстановлением азидной группы способом, подобным способу, описанному в Synthesis, 24 (1978). Соединение (I) вводят перорально в форме таблеток, капсул, гранул, порошков, сиропов или подобной форме, и местно в форме раствора в этаноле, очищающей пены, очищающего крема, геля для кожи, лосьона для кожи, шампуня-геля, шампуня в виде крема или подобной форме. Пероральные фармацевтические композиции получают посредством процедур, известных специалистам в этой области техники, с использованием эксципиентов (примерами которых являются органические эксципиенты, например сахара, такие как лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и сорбит; производные крахмалов, такие как кукурузный крахмал, картофельный крахмал,
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Настоящее изобретение будет описано далее более конкретно с помощью испытаний, ссылочных примеров и препаративных примеров. Пример испытаний 1
Способ определения ингибирующего действия против 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
(1) Получение рекомбинатных 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
а) Клонирование 2 кДНК рекомбинатных 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Для того чтобы клонировать полностью транслированные области 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Антисмысловой праймер типа I: 5"-CAGAGCTTGAAATTCTGACCTGTTA-3" (последовательность 2)
Смысловой праймер типа II: 5"-ACGGCGCGATGCAGGTTCAGTG-3" (последовательность 3)
Антисмысловой праймер типа II: 5"-AGCATTGTGGGAGCTCTGCTCTT-3" (последовательность 4)
В качестве матрицы для метода CPR используют кДНК QUICK-CloneТМ печени человека и кДНК QUICK-CloneТМ предстательной железы человека (продукты CLONTECH Laboratories, Inc.). PCR осуществляют с использованием 1 мкл кДНК, 5 мкл фиксированного буфера для PCR, 1 мкл 10 мМ раствора смешанного dNTP, по 1 мкл каждого из описанных выше смысловых и антисмысловых праймеров в концентрации 20 мкМ, 1 мкл полимеразы Taq TaKaRa при содержании 5 единиц/мл, и 40 мкл дистиллированной воды для получения реакционного объема 50 мкл. Для PCR цикл реакций при 94oС в течение 20 с, при 55oС в течение 1 мин и при 72oС в течение 1 мин повторяют 25 раз, а затем хранят при 4oС. Когда часть реакционной смеси после PCR примерно в 5 мкл подвергают электрофорезной хроматографии в 0,8% агарозном геле, обнаруживают две полосы (тип I: 1021 п.о, тип II: 812 п.о.), соответствующие полосам, ожидаемым на основании сведений из указанной выше литературы. Затем остальную часть реакционной смеси после PCR очищают посредством электрофорезной хроматографии в 5% акриламидном геле. Очищенный таким образом фрагмент кДНК субклонируют с использованием набора ТА CloningТМ (продукт Invitrogen Corporation). В результате анализа полной последовательности оснований каждой из субклонированных кДНК типов I и II методом красителя-терминатора подтвердилось, что их последовательности такие же, как последовательности в указанных сообщениях. кДНК типа I и типа II, чьи последовательности оснований подтверждены таким образом, встраивают в экспрессионный вектор, экспрессируют и затем используют. б) Получение экспрессионных плазмид человека типа I и типа II
Штамм Escherichia coli DH5 (supE44, hsdR17, recAl, endAl, gyrA96, thil, relAl) (закупают у Toyobo Co. , Ltd. ) трансформируют с ипользованием pME18sH5Rl или pME18sH5R2, т.е. экспрессионной плазмидой человека типа I или типа II, с помощью способа, описанного в инструкции, приложенной к набору ТА CloningТМ. Примерно 10 мкл раствора первичной культуры рекомбинантного штамма имплантируют в 50 мл среды 2xLB (20 г бактотриптона (продукт DIFCO Labs. ), 10 г экстракта бактодрожжей (продукт DIFCO Labs.), 10 г хлорида натрия и 2 г глюкозы на 1 л), содержащей 50 мкг/мл ампициллина (продукт GIBCO BRL), с последующей инкубацией при 37oС в течение примерно 40 ч. Культуральный раствор подвергают центрифугированию (5000 об/мин, 10 мин) и собирают клетки. Из полученных клеток получают pME18sH5Rl или pME18sH5R2 с использованием набора QIAGEN Plasmid Maxi (продукт Qiagen Inc). в) Экспрессия и получение белков человека типа I и типа II
В 2х106 клеток в 0,5 мл COS-1 вводят 10-20 мкг pME18sH5Rl или pME18sH5R2 методом электропорации (Gene PulserTM; продукт Bio-Rad Laboratories, 960 мкФ, 200 Ом, 300 В). После введения смесь инкубируют в течение примерно 48 ч, и собирают клетки. Клетки гомогенизируют (1000 об/мин, 30 с) с помощью POLYTRON (изделие KINEMATIKA GmbH) в буферном растворе (20 мМ калийфосфатный буферный раствор, рН 7,4, 10% глицерина, 0,33 М сахарозы, 50 мкМ восстановленной формы никотинамидадениндинуклеотидфосфата (NADPH) и 0,001% фенилметилсульфонилфторида (PMSF)) на ледяной бане, а затем центрифугируют (10000 х g, 1 ч). Выпавший осадок снова суспендируют в буферном растворе, и полученную суспензию хранят при -80oС. Суспензию используют в качестве 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Содержание белка определяют по методу Брэдфорда (анализ белков Bio-Rad, Biorad) с использованием бычьего гамма-глобулина (бычья II фракция Коэна, продукт Sigma) в качестве стандартного продукта. (3) Определение активности 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Активность 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Влияние на снижение содержания дигидростерона в крови человека
В организм человека вводят перорально 1-10 мг на индивидуума соединения I или 5 мг на индивидуума финастерида и определяют содержание в крови дигидротестостерона (DHT) и тестостерона (Т). Вычисляют их соотношение (DHT/T) перед введением (рrе) и по прошествии некоторого времени (10 и 18 ч), из которого вычисляют (DHT/T)/(DHT/T)pre. Результаты приводятся в табл.3 (n=4-6). Пример испытаний 3
Испытание с использованием клеток волосяных сосочков человека
Волосяной сосочек представляет собой массу клеток, небольшое количество которых имеется в волосяных фолликулах. В настоящее время полагают, что они являются стволовыми клетками для формирования базы для роста волос. Обнаружено, что эта клетка обладает активностью 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Предупреждение эпиляции и стимулирование роста волос у бесхвостого макака (1)
Бесхвостый макак страдает от алопеции, которая схожа с алопецией по мужскому типу. Алопеция у бесхвостого макака начинается сразу после полового созревания (в возрасте примерно 4 лет). Алопеция поражает почти всех как самцов, так и самок бесхвостого макака и она зависит от содержания андрогена. Поэтому бесхвостый макак является полезной животной моделью алопеции по мужскому типу у человека. Самцов бесхвостого макака (в возрасте 3-16 лет) делят на группы, в каждую из которых входят 3-6 животных. Волосистую часть головы бесхвостого макака четко делят на переднюю область и затылочную область, и одну из этих областей маркируют, например, тушью. Волосы на маркированном участке сбривают. Готовят раствор или порошок испытываемого соединения в разных дозах и в разных сочетаниях, и эти образцы равномерно применяют в области, с которой сбриты волосы, или вводят их перорально. Контрольному животному вводят такое же количество растворителя (например, диметилсульфоксида), крема (подкожное введение) или плацебо (пероральное введение).Волосы на маркированном участке сбривают с интервалом в 4-6 недель и определяют массу сбритых волос. Введение продолжают на протяжении периода от 6 недель до 2 лет. Финастерид является ингибитором 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Предупреждение эпиляции и стимулирование роста волос у бесхвостого макака (2)
Самцов и самок бесхвостого макака (в возрасте 3-16 лет) делят на группы, в каждую из которых входят 3-6 животных. Готовят раствор или порошок испытываемого соединения в разных дозах и в разных сочетаниях и равномерно применяют к волосистой части головы на передней области или вводят их перорально один раз в сутки. Введение продолжают от 6 недель до 2 лет. Контрольному животному вводят такое же количество растворителя (например, диметилсульфоксида), крема (подкожное введение) или плацебо (пероральное введение). За состоянием волос на передней области наблюдают с интервалом в 1 месяц, и действие испытываемого соединения оценивают по величине диаметра волоса, плотности и области роста волос со временем. В то же время осуществляют описание бесхвостого макака, и по этим описаниям судят о действии в целом. Часть кожи (кружок диаметром 4 мм) передней части головы иссекают для образца биопсии в начале испытаний и через 3 месяца и 6 месяцев после начала испытаний, и посредством гистологического анализа исследуют действие на стадии роста волосяных корней. Обнаружено, что соединения формулы (I) эффективны против алопеции. Пример испытаний 6
Испытания с использованием волосатых крыс
Волосатая крыса является андрогензависимой моделью животного, которая показывает аномально активную пролиферацию и секрецию из клеток сальных желез при волосяном корне. Ее волосяные корни в ювенильной стадии (возраст примерно 4 недели) представляют собой, главным образом, корни в стадии роста. После полового созревания (примерно 8 недель) волосяные корни растут в стадии покоя. Поэтому это животное можно использовать в качестве животной модели для исследования влияния на рост волос. Волосатых крыс (самцы, возраст 2-12 недель) делят на группы, каждая из которых состоит из 5-6 крыс. Готовят раствор или порошок испытываемого соединения в разных дозах и в разных сочетаниях и равномерно применяют к коже в области спины, или вводят его перорально один раз в сутки. Введение продолжают в течение 4-8 недель. Животным контрольной группы вводят такое же количество растворителя (например, диметилсульфоксида), крема (подкожное введение) или плацебо (пероральное введение). На следующий день после завершения введения животных декапитируют. Иссекают ткань кожи (кружок диаметром 4 мм) в области спины. Действие на сальные железы и стадию роста волос в волосяном корне исследуют посредством гистологического анализа. Обнаружено, что соединения формулы (I) эффективны против себореи и алопеции. Так же, как в описанных выше испытаниях, рост волос можно оценить в соответствии с методом, описанным в литературе (В de Brouwer et al., Br. J. Dermatol., 137, 699-702 (1997)), с использованием голых мышей. Ссылочный пример 1
N-[1-Метил-1-(4-метоксифенил)этил] -3-оксо-4-аза-5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/946.gif)
К 30 мл сухого толуола добавляют последовательно 1,0 г 3-оксо-4-аза-5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/946.gif)
трифенилфосфина и 1,4 г 2,2"-дипиридилдисульфида. Полученную смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь подвергают колоночной хроматографии на 35 г силикагеля с элюированием смесью ацетона и метиленхлорида (от 1:9 до 1:1) и получают 1,11 г 2-пиридилтиоэфира. К 30 мл сухого метиленхлорида последовательно добавляют 5,0 г 2-пиридилтиоэфира и 5,0 г 1-(4-метоксифенил)-1-метилэтиламина, и полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 сут. После разбавления 100 мл метиленхлорида смесь последовательно промывают 1 N соляной кислотой, водой, водным раствором бикарбоната натрия и рассолом, сушат над безводным сульфатом магния и концентрируют при пониженном давлении. Остаток подвергают колоночной хроматографии на 15 г силикагеля с элюированием смесью ацетона и метиленхлорида (от 1:9 до 1:1) и получают 5,2 г названного в заголовке соединения. Спектр ЯМР (СDС13)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193028/948.gif)
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193049/957.gif)
Таблетки (5-мг таблетка)
Компонент - Состав основы (мг/таблетку)
Соединение ссылочного примера 1 - 5
Гидроксипропилметилцеллюлоза - 15
Натрийкарбоксиметилкрахмал - 9,5
Кристаллическая целлюлоза - 30,5
Натрийкросскармелоза - 20
Лактоза (после просеивания) - 38,75
Желтый полуторный оксид железа - 0,05
Стеарат магния (после просеивания) - 1,2
Таблетки - 120,0
Препаративный пример 2
Раствор в спирте
Соединение ссылочного примера 1 - 15,0 (мас.%)
Вода - 45
Этанол - 40
Препаративный пример 3
Очищающая пена
Соединение ссылочного примера 1 - 10,00 (мас.%)
Вода - 70,439
Ромашка - 0,01
Гель Aloe vera - 0,01
Аллантоин - 0,001
Триэтаноламин - 0,02
Метоцель (METHOCELТМ 40-100 (Dow)) - 1,50
Глицерин - 3,00
Лаурилсульфат натрия - 15,00
Витамин А маслорастворимый - 0,01
Витамин Е маслорастворимый - 0,01
Препаративный пример 4
Очищающий крем
Соединение ссылочного примера 1 - 5,0 (мас.%)
Синтетический пчелиный воск - 14,0
РРG2-миристилпропионат - 5,0
Спирт ланолина - 0,5
Минеральное масло - 36,0
Пропилпарабен - 0,15
Бура - 1,0
Вода - 38,35
PPG - полиэтиленгликоль-полипропиленгликоль
Препаративный пример 5
Гель для кожи
Соединение ссылочного примера 1 - 2,00 (мас.%)
РРG2-миристилпропионат - 45,0
Цетиловый эфир PPG10 - 5,0
Триглицерид C18-C36 - 4,0
Миристилмиристат - 3,0
Глицерилтрибегенат - 2,0
Циклометикон - 34,00
Полиэтилен - 5,00
Препаративный пример 6
Лосьон для кожи
Соединение ссылочного примера 1 - 1,0 (мас.%)
Оleth-3 фосфат диэтаноламина - 1,0
Эмульгируемый воск - 2,0
Насыщенная (C18-С36)-алифатическая кислота - 1,0
РРG2-миристилпропионат - 5,0
Глицерин - 3,0
Триэтаноламин - 0,5
Вода - 86,5
Препаративный пример 7
Шампунь-гель
Соединение ссылочного примера 1 - 2,0 (мас.%)
Изопропаноламинлаурилсульфат - 81,5
Диэтаноламид алифатической кислоты кокосового масла - 8,0
Эфир глицерина и насыщенной кислоты - 4,5
C18-С36
PPG5-ceteth-10 фосфат - 4,0
Препаративный пример 8
Шампунь в виде крема
Соединение ссылочного примера 1 - 0,1 (мас.%)
Лаурилсульфат натрия - 65,0
Глицерилтрибегенат - 2,0
Гидролизованный коллаген - 1,0
Диэтаноламид лауриновой кислоты - 5,0
Вода - 26,9
Промышленная применимость
Финастерид является соединением, которое продается на европейском рынке как лечебное средство против доброкачественной гипертрофии предстательной железы, а в настоящее время проходит клинические испытания как лечебное средство против алопеции. Соединение (I) настоящего изобретения и родственные ему соединения обладают более сильным ингибирующим действием против изозима типа II, чем финастерид. Они обладают также сильным ингибирующим действием против изозима типа I. Они также сильнее понижают содержание в крови DHT, чем финастерид, и также имеют низкую токсичность, поэтому они полезны в качестве активного ингредиента композиции для лечения алопеции, гирсутизма по женскому типу или себореи, или композиции для предупреждения метастаза в кости, вызванного раком предстательной железы. Перечень последовательностей:
Последовательность 1
Описание синтезированной последовательности: праймер, созданный на основе последовательности кДНК, кодирующей 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Описание синтезированной последовательности: праймер, созданный на основе последовательности кДНК, кодирующей 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Описание синтезированной последовательности: праймер, созданный на основе последовательности кДНК, кодирующей 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Описание синтезированной последовательности: праймер, созданный на основе последовательности кДНК, кодирующей 5
![лечебное средство против алопеции, патент № 2193887](/images/patents/277/2193022/945.gif)
Класс A61K31/565 не замещенные в положении 17 бета атомом углерода, например эстран, эстрадиол