новые иминопроизводные в качестве ингибиторов резорбции кости и антагонистов рецептора витронектина

Формула изобретения

1. Соединение формулы I

R¹-Y-A-B-D-E-F-G,

в котором А означает -NR²-N= CR²-;

В означает (С₁-С₈)-алкандиил;

D означает -О-, -CO-NR²-;

Е означает 6-членную ароматическую кольцевую систему;

F имеет значения, указанные для D;

G означает



Y означает простую связь;

R¹ означает 4-10-членную моно- или полициклическую ароматическую или неароматическую кольцевую систему, которая, при необходимости, может содержать 1-4 атома N;

R² означает Н, R⁸OR⁹;

R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ значают, независимо друг от друга, Н, R⁸N(R²)R⁹, R⁸OC(O)N(R²)R⁹;

R⁸ означает Н или (С₅-С₁₄)-арил-(С₁-С₈)-алкандиил;

R⁹ означает простую связь;

R¹⁰ означает C(O)R¹¹;

R¹¹ означает ОН;

р, q независимо друг от друга 0 или 1,

во всех своих стереоизомерных формах и их смеси во всех соотношениях, а также их физиологически приемлемые соли.

2. Соединение формулы I по п. 1, в котором

А означает -NR²-N= CR²-,

В означает (С₁-С₈)-алкандиил,

D означает -О-, -CO-NR²-,

Е означает 6-членную ароматическую кольцевую систему,

F имеет значения, указанные для D,

G -



Y означает простую связь;

R¹ означает 4-10-членную моно- или полициклическую ароматическую или неароматическую кольцевую систему, которая, при необходимости, может содержать 1-4 атома N;

R² означает Н, R⁸OR⁹;

R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ означают, независимо друг от друга, Н, R⁸N(R²)R⁹, R⁸OC(O)N(R²)R⁹;

R⁸ означает Н или (С₅-С₁₂)-арил-(С₁-С₆)-алкандиил;

R⁹ означает простую связь;

R¹⁰ означает C(O)R¹¹;

R¹¹ означает ОН;

р, q независимо друг от друга 0 или 1,

во всех своих стереоизомерных формах и их смеси во всех соотношениях, а также их физиологически приемлемые соли.

3. Соединение формулы I по п. 1 или 2, в котором

А означает -NR²-N= CR²-; В означает (С₁-С₆)-алкандиил; D означает -О-, -C(O)-NR²; Е означает фенилен или пиридиндиил, который при необходимости замещен 1-3 одинаковыми или разными остатками ²; F означает -О-, -CO-NR²-; G -



Y означает простую связь; R" означает





















R² означает Н, R⁸OR⁹; R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ означают, независимо друг от друга, Н, R⁸NHR⁹, R⁸OC(O)NHR⁹; R⁸ означает Н или (С₅-С₁₀)-арил-(С₁-С₄)-алкандиил, R⁹ означает простую связь; R¹⁰ означает C(O)R¹¹; R¹¹ означает ОН; р, q независимо друг от друга 0 или 1, во всех своих стереоизомерных формах и их смеси во всех соотношениях, а также их физиологически приемлемые соли.

4. Соединение формулы I по одному или нескольким пп. 1-3, в котором А означает -NR²-N= CR²-; В означает (С₁-С₆)-алкандиил; D означает -О-, -C(O)-NR²-; Е означает фенилен или пиридиндиил, который при необходимости замещен 1 или 2 остатками R²; F означает -О-; -CO-NR²-; G -



Y означает простую связь, R¹ означает



















R² означает H, R⁸OR⁹; R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ означают, независимо друг от друга, Н, R⁸OC(O)NHR⁹; R⁸ означает Н или (С₅-С₆)-арил-(С₁-С₂)-алкандиил; R⁹ означает простую связь; R¹⁰ означает C(O)R¹¹; R¹¹ означает ОН; р, q независимо друг от друга 0 или 1, во всех своих стереоизомерных формах и их смеси во всех соотношениях, а также их физиологически приемлемые соли.

5. Соединение формулы п. 1 по одному или нескольким пп. 1-4 и/или их физиологически приемлемые соли, обладающие способностью ингибировать резорбцию кости.

6. Соединение формулы I по одному или нескольким пп. 1-4 и/или их физиологически приемлемые соли в качестве ингибиторов резорбции кости, наступившей вследствие остеокластов, в качестве ингибиторов опухолевого роста и образования метастазов опухоли, в качестве ингибиторов воспаления, для лечения или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, для лечения или профилактики нефропатии и ретинопатии или в качестве антагонистов рецептора витронектина для лечения и профилактики заболеваний, которые основаны на взаимодействии между рецепторами витронектина и их лигандами в процессах взаимодействия клетка-клетка или клетка-матрица.

7. Соединения формулы I по одному или нескольким пп. 1-4 и/или их физиологически приемлемые соли, обладающие ингибирующей активностью в отношении витронектинового рецептора _V3.

8. Способ получения соединений формулы 1 по п. 1, где R¹-Y-A обозначает



и В, D, E, F, G, R² и R³ имеют значения, указанные в п. 1, включающий конденсацию соединения формулы



с соответствующим ацеталем.

9. Фармацевтическая композиция, обладающая способностью ингибировать резорбцию кости, содержащая, по меньшей мере, одно соединение формулы I по одному или нескольким пп. 1-4 и/или их физиологически приемлемые соли наряду с фармацевтически приемлемыми носителями и вспомогательными веществами.

Описание изобретения к патенту

Предметом настоящего изобретения являются соединения формулы I, а также их физиологически приемлемые соли и фармацевтические составы, содержащие такие соединения, их получение и использование в качестве лекарственных средств, в частности, в качестве ингибиторов резорбции кости, наступившей вследствие остеокластов, в качестве ингибиторов опухолевого роста и образования метастазов опухоли, в качестве ингибиторов воспаления, для лечения или профилактики сердечно-сосудистых заболеваний, таких как артериосклероз или рестеноз, для лечения или профилактики нефропатии и ретинопатии, как например, диабетической ретинопатии, а также в качестве антагонистов рецептора витронектина для лечения и профилактики заболеваний, которые обусловлены взаимодействием между рецепторами витронектина и их лигандами в процессах взаимодействия клетка-клетка или клетка-матрица. Далее, изобретение касается применения соединений формулы I, а также их физиологически приемлемых солей и фармацевтических составов, содержащих такие соединения, в качестве лекарственных средств для профилактики или лечения заболеваний, которые, по меньшей мере частично, обусловлены нежелательной степенью резорбции кости, ангиогенезом или пролиферацией клеток гладкой мускулатуры сосудов.

Кости человека подвержены непрерывному динамическому процессу реконструкции, который включает в себя резорбцию кости и образование костной ткани. Эти процессы определяются типами клеток, которые специализируются на этом. Образование новой костной ткани основано на отложении костной матрицы вследствие остеобластов, резорбция кости основана на деструкции костной матрицы вследствие остеокластов. Многочисленные костные заболевания связаны с нарушением равновесия между процессом образования и резорбцией костной ткани. Остеопороз характеризуется утратой костной матрицы. Остеокласты в состоянии активности - это многоядерные клетки с диаметром до 400 мкм, которые удаляют костную матрицу. Остеокласты в состоянии активности образуют отложения на поверхности костной матрицы и выделяют протеолитические энзимы и кислоты в так называемую "герметичную зону", зону между их клеточной мембраной и костной матрицей. Кислое окружение и протеазы влияют на разложение кости.

Соединения формулы I по изобретению ингибируют резорбцию кости, возникшую как следствие остеокластов. Костные заболевания, против которых могут использоваться соединения по изобретению, - это прежде всего остеопороз, гиперкальциемия, остеопения, например, вызванная метастазами, заболеваниями зубов, гиперпаратиреоидизмом, периартекулярными эрозиями при ревматоидном артрите и болезни Педжета.

Далее, соединения формулы I могут использоваться для облегчения, предотвращения или лечения костных заболеваний, которые вызваны глюкокортикоидной, стероидной или кортикостероидной терапией или же недостатком полового гормона (гормонов). Все эти заболевания отличаются утратой кости, обусловленной отсутствием равновесия между процессом образования костной ткани и процессом ее разрушения.

Исследования показали, что отложение остеокластов на костях управляется интегрин-рецепторами на поверхности клеток остеокластов.

Интегрины являются суперсемейством рецепторов, к которым, кроме всего прочего, относится рецептор фибриногена _11b3 на тромбоцитах и рецептор витронектина _v3. Рецептор витронектина _v3 является мембраноустойчивым гликопротеином, который экспримируется на поверхность ряда клеток, таких как эндотелиальные клетки, клетки гладкой мускулатуры сосудов, остеокласты и опухолевые клетки. Рецептор _v3 витронектина, который экспримируется на мембране остеокластов, управляет процессом отложения на костях и процессом резорбции костей и способствует, таким образом, остеопорозу.

При этом _v3 привязывает к протеинам костной матрицы, как остеопонтину, костному сиалопротеину и тромбоспонтину, которые содержат трипептидный фрагмент Arg-Gly-Asp (или RGD).

Хортон и сотрудники описывают RGD-пептиды и анти-витронектиновый рецептор антител (23С6), которые ингибируют разложение зубов вследствие остеокластов и миграцию остеокластов (Хортон и сотр., Exp.Cell.Res., 1991, 195, 368). Сато и сотр. описывают в J.Cell Biol, 1990, 111, 1713 Эхистатин, RGD-пептид из яда змей, в качестве потенциального ингибитора резорбции костей в культуре ткани и в качестве ингибитора прикрепления остеокластов к костям. Фишер и сотр. (Endocrinology, 1993, 132, 1411) смогли продемонстрировать на крысе, что эхистатин задерживает развитие резорбции костей также in vivo.

Рецептор _v3 витронектина на человеческих клетках гладкой мускулатуры аорты стимулирует миграцию этих клеток в неоинтиму, что в конце концов ведет к артериосклерозу и рестенозу после ангиопластики (Браун и сотр., Cardiovascular Res., 1994, 28, 1815).

Далее, соединения формулы I могут служить носителями биологически активных веществ для целенаправленной транспортировки биологически активного вещества к месту действия (Targeted Drug Delivery, R.C.Juliano, Handbook of Experimental Pharmacology, vol.100, Ed. Born, G.V.R. et al., Springer Verlag). Под биологически активными веществами понимают такие, которые могут использоваться для лечения названных выше болезней.

Брук с сотрудниками (Cell, 1994, 79, 1157) показывают, что антитела могут вызывать уменьшение опухолей, направленное против _v3 или против _v3-антагонистов, индуцируя апоптоз клеток кровеносных сосудов во время ангиогенеза. Херш и сотр. (Science, 1995, 270, 1500) описывают анти _v3-антитела или _v3-антагонисты, которые ингибируют в глазу крысы индуцированные bFGF процессы ангиогенеза, что терапевтически могло бы быть полезным при лечении ретинопатий.

В заявке WO 94/12181 описаны замещенные ароматические или неароматические кольцевые системы, в заявке WO 94/08577 - замещенные гетероциклы в качестве антагонистов фибриногенного рецептора и ингибиторов агрегации тромбоцитов. Из ЕР-А-518586 и ЕР-А-528587 известны аминоалкиловые или гетероциклические производные фенилаланина, из WO 95/32710 известны производные арила в качестве ингибиторов резорбции костей вследствие остеокластов. WO 96/00574 описывает бензодиазепины, WO 96/00730 - модель антагонистов фибриногенного рецептора, в частности, бензодиазепины, которые связаны с 5-м кислородсодержащим кольцом в качестве антагонистов рецептора витронектина.

Предметом настоящего изобретения являются соединения формулы I,

R¹-Y-A-B-D-E-F-G I,

в которой

А означает простую связь, (C₁-С₈)-алкандиил, NR²-N=СR²-, -NR²-C(O)-NR²-, -NR²-C(O)O-, -NR²-С(О)S-, -NR²-C(S)-NR²-, -NR²-C(S)-O-, NR²-C(S)-S-, -NR²-S(O)_n-NR²-, -NR²-S (O)_n-O-, -NR²-S(O) _n-, (С₃-С₁₂)-циклоалкандиил, -СС-, -NR²-C(O)-, -C(O)-NR²-, (C₅-C₁₄)-apилен-C(O)-NR²-, -O-, -S(O)_n-, (C₅-C₁₄)-арилен-, -CO-(С₅-С₁₄)-арилен-СО-, -NR²-, -SO₂-NR²-, -CO₂-, -N=CR²-, -R²C= N-, -CR²=CR³-, (C₅-C₁₄)-арилен-S (O)_n-, которые, соответственно, могут быть однократно или двукратно замещены (C₁-C₈)-алкандиилом, как например (C₁-C₈) -алкандиил-CO-NR²- (C₁-C₈) - алкандиилом, (C₁-C₈)-алкандиил-CO-NR²- или -CO-NR²- (C₁-C₈) -алкандиилом;

В означает простую связь, (C₁-C₈)-алкандиил, -CR²=CR³- или -СС-, которые соответственно могут быть однократно или двукратно замещены (C₁-C₈)-алкандиилом, как например -CH₂-CC-CH₂-, -CH₂-CR²=CR³-, или двухвалентный остаток 5- или 6-членного насыщенного или ненасыщенного цикла, который может содержать 1 или 2 атома азота и однократно или двукратно может быть замещен (C₁-C₆)-алкилом или двойным связанным кислородом или серой;

D означает простую связь, (C₁-C₈)-алкандиил или -О-, -NR²-, -CO-NR²-, -NR²-CO-, -NR²-C (О) -NR²-, -NR²-C (S)-NR²-, -OC(O)-, -C(O)O-, -CO-, -CS-, -S(O)-, -S(O)₂-, -S(O)₂-NR²-, -NR²-S(O) -, -NR²-S(O)₂-, -S-, -CR²=CR³-,-CC-, -NR²-N= CR²-, -N=CR²-, -R²C=N или -CH(OH)-, которые, соответственно, однократно или двукратно могут быть замещены (C₁-C₈)-алкандиилом;

Е означает 6-членную ароматическую кольцевую систему, которая, при необходимости, содержит до 4 N-атомов и, при необходимости, замещена 1-4 одинаковыми или разными остатками из ряда R², R³, фтор, Cl, Br, I, NO₂ и ОН;

F имеет значения, указанные для D;



Y означает прямую связь или -NR²-;

R¹ означает R²-C (=NR²)-NR²-, R²R³N-C (=NR²)-, R²R³N-C (=NR²) -NR²- или 4-10-членную моно- или полициклическую ароматическую или неароматическую кольцевую систему, которая, при необходимости, может содержать 1-4 гетероатома из ряда N, О и S и, при необходимости, может быть однократно или многократно замещена заместителями из ряда R¹², R¹³, R¹⁴ и R¹⁵;

R², R³ означают независимо друг от друга Н, (C₁-С₁₀)-алкил, который, при необходимости, однократно или многократно замещен фтором, (С₃-С₁₂)-циклоалкил, (С₃-С₁₂)-циклоалкил-(C₁-C₈)-алкандиил, (C₅-C₁₄) -арил, (C₅-C₁₄) -арил- (C₁-С₈)-алкандиил, H₂N, (R⁸O)R⁸NR⁹, R⁸OR⁹, R⁸OC(O)R⁹, R⁸- (C₅-C₁₄) -арилен-R⁹, R⁸R⁸NR⁹, HO-(C₁-C₈)-алкандиил-NR⁸R⁹, R⁸R⁸NC(O)R⁹, R⁸C(O)NR⁸R⁹, R⁸C(O)R⁹, R⁸R⁸N-C (=NR⁸)-, R⁸R⁸N-C (=NR⁸)-NR⁸- или (C₁-C₁₈) -алкилкарбонилокси- (C₁-C₆) -алкандиилоксикарбонил;

R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ означают независимо друг от друга Н, фтор, ОН, (C₁-С₈)-алкил, (С₃-С₁₂) -циклоалкил, (C₃-C₁₂)-циклоалкил-(C₁-С₈)-алкандиил, или R⁸OR⁹, R⁸SR⁹, R⁸CO₂R⁹, R⁸OC(O)R⁹, R⁸-(C₅-C₁₄)-арилен-R⁹, R⁸N(R²)R⁹, R⁸R⁸NR⁹, R⁸N (R²) С(О)OR⁹, R⁸S(O) _nN (R²) R⁹, R⁸OC(O)N(R²)R⁹, R⁸C(O)N(R²)R⁹,

R⁸N (R²) С (O) N (R²) R⁹, R⁸N(R²)S(O)_nN(R²)R⁹, R⁸S(O)_nR⁹, R⁸SC (O) N (R²) R⁹, R⁸C(O)R⁹, R⁸N(R²)C(O)R⁹, R⁸N(R²)S(O)_nR⁹;

R⁸ означает H, (C₁-C₈)-алкил, (С₃-С₁₂)-циклоалкил, (С₃-C₁₂) -циклоалкил- (C₁-C₈) -алкандиил, (C₅-C₁₄) -арил, (C₅-C₁₄) -арил-(C₁-C₈)-алкандиил, причем остатки алкила могут быть однократно или многократно замещены фтором;

R⁹ означает простую связь или (C₁-C₈) -алкандиил;

R¹⁰ означает С (O)R¹¹, C(S)R¹¹, S(O)_nR¹¹, P(O)(R¹¹)_n или 4-8-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл, который содержит 1, 2, 3 или 4 гетероатомов из ряда N, О, S, как например тетразолил, имидазолил, пиразолил, оксазолил, тиадиазолил;

R¹¹ означает ОН, (C₁-C₈)-алкокси, (С₅-С₁₄) -арил- (C₁-C₈) -алкандиилокси, (С₅-С₁₄)-арилокси, (C₁-C₈)-алкилкарбонилокси-(C₁-C₄) -алкандиилокси,

(C₅-C₁₄) -арил- (C₁-C₈) -алкандиилкарбонилокси-(C₁-C₆)-алкандиилокси, NH₂, моно- или ди-(C₁-C₈-алкил)-амино, (C₅-C₁₄)-арил-(C₁-C₈)-алкандииламино,

(C₁-C₈)-диалкиламинокарбонилметиленокси, (C₅-C₁₄) -арил- (C₁-C₈) -диалкиламинокарбонилметиленокси или (C₅-C₁₄)-ариламино или остаток L- или D-аминокислоты;

R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵ означают независимо друг от друга Н, (C₁-С₁₀)-алкил, который, при необходимости, однократно или многократно замещен фтором, (С₃-С₁₂)-циклоалкил, (С₃-С₁₂)-циклоалкил-(C₁-C₈) алкандиил, (C₅-C₁₄) -арил,

(C₅-C₁₄)-арил-(C₁-C₈)-алкандиил, H₂N, (R⁸O)R⁸NR⁹, R⁸OR⁹, R⁸OC(O)R⁹,

R⁸R⁸NR⁹, R⁸- (C₅-C₁₄) -арилен-R⁹, НО- (C₁-С₈) -алкандиил-N (R²) R⁹, R⁸N (R²) С (O) R⁹, R⁹C(O)N(R²)R⁹, R⁸C(O)R⁹, R²R³NC(=NR²)-NR²-, R²R³N-C (=NR²)-, =O, =S;

n равно 1 или 2;

p, q независимо друг от друга 0 или 1;

во всех своих стереоизомерных формах и их смеси во всех соотношениях, а также их физиологически приемлемые соли,

причем в соединениях формулы I по меньшей мере 1 из групп A, D или F представляет -NR²-N=CR²-, -N=CR²- или -R²C=N-.

Алкильные остатки в заместителях могут быть линейными или разветвленными, насыщенными или однократно или многократно ненасыщенными. То же самое относится и к производным от них остаткам, как например, алкокси. Циклоалкильные остатки могут быть моно-, би- или трицикличными.

Моноцикличными циклоалкильными остатками являются, в частности, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил и циклооктил, которые могут быть также замещены, например, (C₁-C₄)-алкилом. В качестве примеров замещенных циклоалкильных остатков можно назвать 4-метилциклогексил и 2,3-диметилциклопентил.

Бициклические и трициклические циклоалкильные остатки могут быть незамещенными или замещенными в любых подходящих позициях одной или несколькими оксогруппами и/или одной или несколькими одинаковыми или разными (C₁-C₄)-алкильными группами, например метильными или изопропильными группами, предпочтительно метильными группами. Свободная связь би- или трициклического остатка может находиться в любой позиции молекулы, остаток может быть связан через основной мостиковый атом или другой атом в мостике. Свободная связь может находиться в любой стереохимической позиции, например в экзо- или эндопозиции.

Примерами 6-членных ароматических кольцевых систем являются фенил, пиридил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, 1,3,5-триазинил, 1,2,4-триазинил, 1,2,3-три-азинил, тетразинил.

Примерами основных тел бициклических кольцевых систем являются норборнан (=бицикло[2.2.1]гептан), бицикло[2.2.2]-октан и бицикло[3.2.1]октан. Примером системы, замещенной оксогруппой, является камфер (=1,7,7-триметил-2-оксо-бицикло[2.2.1]гептан).

Примерами основы трициклических систем являются твистан (= трицикло[4.4.0.0^3,8] декан), адамантан (=трицикло [3. 3.1.1^3,7] -декан), норадамантан (=трицикло[3.3.1.0^3,7] нонан), трицикло-[2.2.1. 0^2,6] гептан, трицикло [5.3.2.0^4,9] додекан, трицикло-[5. 4.0.0. ^2,9]yндeкaн или трицикло [5. 5.1.0^3,11] тридекан.

Арилом является, например, фенил, нафтил, бифенилил, антрил или флуоренил, причем предпочтительными являются 1-нафтил, 2-нафтил и, в частности, фенил. Арильные остатки, в частности фенильные остатки, могут быть замещены однократно или многократно, предпочтительно однократно, двукратно или трехкратно, одинаковыми или разными остатками из ряда (C₁-C₈)-алкил, в частности (C₁-C₄) -алкил, (C₁-C₈)-алкокси, в частности (C₁-C₄) -алкокси, галоген, как например фтор, хлор и бром, нитро, амино, трифторметил, гидрокси, метилендиокси, циано, гидроксикарбонил, аминокарбонил, (C₁-C₄)-алкоксикарбонил, фенил, фенокси, бензил, бензилокси, тетразолил, (R¹⁷O)₂Р(О)- и (R¹⁷O)₂Р(О)-О-, при этом R¹⁷ представляет Н, (C₁-С₁₀)-алкил, (C₆-C₁₄)-арил или (С₆-С₁₄) -арил- (C₁-C₈) -алкил.

В монозамещенных фенильных остатках заместитель может находиться во 2-й, 3-й или 4-й позиции, причем предпочтительны 3-я и 4-я позиции. Если фенил замещен двукратно, то заместители могут находиться относительно друг друга в 1,2-, 1,3- или 1,4-позициях. Предпочтительно, в двузамещенных фенильных остатках оба заместителя располагаются в 3-й и 4-й позициях относительно места связывания.

Далее, арильные группы могут представлять собой моноциклические или полициклические ароматические кольцевые системы, в которых 1-5 атомов углерода могут быть замещены 1-5 гетероатомами, как например 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, пирролил, фурил, тиенил, имидазолил, пиразолил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, изотиазолил, тетразолил, пиридил, пиразинил, пиримидинил, индолил, изоиндолил, индазолил, фталазинил, хинолил, изохинолил, хиноксалинил, хиназолинил, циннолил, -карболинил или бенз-анеллированное, циклопента-, циклогекса- или циклогепта-анеллированное производное этих остатков.

Эти гетероциклы могут быть замещены одинаковыми заместителями, как например, названными выше карбоциклическими арильными системами.

В ряду этих арильных групп предпочтительны моно- или бициклические ароматические кольцевые системы с 1-3 гетероатомами из ряда N, О, S, которые могут быть замещены 1-3 заместителями из ряда (C₁-C₆)-алкила, (C₁-C₆)-алкокси, фтора, Cl, NO₂, NH₂, трифторметила, ОН, (C₁-C₄)-алкоксикарбонила, фенила, фенокси, бензилокси или бензила.

Особенно предпочтительны при этом моно- или бициклические ароматические 5-10-членные кольцевые системы с 1-3 гетероатомами из ряда N, О, S, которые могут быть замещены 1-2 заместителями из ряда (C₁-C₄)-алкила, (C₁-C₄) -алкокси, фенила, фенокси, бензила или бензилокси.

Предпочтительными являются также соединения формулы I, которые включают липофильный остаток R⁴, R⁵, R⁶ или R⁷, как например бензилоксикарбониламино, циклогексилметилкарбониламино и т.д.

L- или D-аминокислоты могут быть натуральными или ненатуральными аминокислотами. Предпочтительными являются -аминокислоты. Например, можно было бы назвать (сравни Губен-Вейль, Методы органической химии, том XV/1 и 2, издательство Georg Thieme Verlag, Штуттгарт, 1974 г.):

Aad, Abu, Abu, ABz, 2ABz, Aca, Ach, Acp, Adpd, Ahb, Aib, Aib, Ala, Ala, А1а, Alg, All, Ama, Amt, Ape, Apm, Apr, Arg, Asn, Asp, Asu, Aze, Azi, Bai, Bph, Can, Cit, Cys, (Cys)₂, Cyta, Daad, Dab, Dadd, Dap, Dapm, Dasu, Djen, Dpa, Dtc, Fel, Gln, Glu, Gly, Guv, hAla, hArg, hCys, hGln, hGlu, His, hlle, hLeu, hLys, hMet, hPhe, hPro, hSer, hTrp, hTyr, Hyl, Hyp, 3Нур, Ilе, Ise, Iva, Kyn, Lant, Lcn, Leu, Lsg, Lys, Lys, Lys, Met, Mim, Min, nArg, Nle, Nva, Oly, Orn, Pan, Pec, Pen, Phe, Phg, Pic, Pro, Рго, Pse, Pya, Pyr, Pza, Qin, Ros, Sar, Sec, Sem, Ser, Thi, Thi, Thr, Thy, Thx, Tia, Tle, Tly, Trp, Trta, Tyr, Val, трет. -бутилглицин (Tbg), неопентилглицин (Npg), циклогексилглицин (Chg), циклогексилаланин (Cha), 2-тиенилаланин (Thia), 2,2-дифениламино-уксусная кислота, 2-(п-толил)-2-фениламиноуксусная кислота, 2 -(п-хлорфенил)-аминоуксусная кислота;

далее:

пирролидин-2-карбоновая кислота; пиперидин-2-карбоновая кислота; 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота; декагидроизохинолин-3-карбоновая кислота; октагидроиндол-2-карбоновая кислота; декагидрохинолин-2-карбоновая кислота; октагидроциклопента[b] пиррол-2-карбоновая кислота; 2-азабицикло[2.2.2] октан-3-карбоновая кислота; 2-азабицикло[2.2.1]-гептан-3-карбоновая кислота; 2-азабицикло[3.1.0.]гексан-3-карбоновая кислота; 2-азаспиро[4.4]нонан-3-карбоновая кислота; азаспиро[4.5]декан-3-карбоновая кислота; спиро-(бицикло[2.2.1]гептан)-2,3-пирролидин-5-карбоновая кислота; спиро(бицикло[2.2.2] октан)-2,3-пирролидин-5-карбоновая кислота; 2-азатрицикло[4.3.0.1^6,9] декан-3-карбоновая кислота; декагидроциклогепта[b]пиррол-2-карбоновая кислота; декагидроциклоокта[с]пиррол-2-карбоновая кислота; октагидроциклопента[с] пиррол-2-карбоновая кислота; октагидроизоиндол-1-карбоновая кислота; 2, 3,3а,4,6а-гексагидроциклопента[b]-пиррол-2-карбоновая кислота; 2,3,3а,4,5,7а-гексагидроиндол-2-карбоновая кислота; тетагидротиазол-4-карбоновая кислота; изоксазолидин-3-карбоновая кислота; пиразолидин-3-карбоновая кислота; гидроксипирролидин-2-карбоновая кислота, которые, при необходимости, все могут быть замещены (смотри следующие формулы):



























Гетероциклы, лежащие в основе названных выше остатков, известны, например, из US-A 4.344.949; US-A 4.374.847; US-A 4.350.704; ЕР-А 29.488; ЕР-А 31.741; ЕР-А 46.953; ЕР-А 49.605; ЕР-А 49.659; ЕР-А 50.800; ЕР-А 51.020; ЕР-А 52.870; ЕР-А 79.022; ЕР-А 84.164; ЕР-А 89.637; ЕР-А 90.341; ЕР-А 90.362; ЕР-А 105.102; ЕР-А 109.020; ЕР-А 111.873; ЕР-А 271.865 и ЕР-А-344.682.

Далее, аминокислоты могут присутствовать также и в виде сложных эфиров или амидов, как например метиловый, этиловый, изопропиловый, изобутиловый, трет. -бутиловый и бензиловый эфиры, этиламид, семикарбазид или -амино-(С₂-С₈)-алкиламид.

Функциональные группы аминокислот могут присутствовать в защищенном виде. Соответствующие защитные группы, как например уретановые и карбоксильные защитные группы, а также защитные группы с боковыми заместителями, описаны в Hubbuch, Kontakte (Merck), 1979, Nr. 3, стр.14-23 и в Buellesbach, Kontakte (Merck), 1980, Nr. 1, стр.23-35. В частности, можно назвать: Aloc, Pyoc, Fmoc, Tcboc, Z, Вос, Ddz, Врос, Adoc, Msc, Мос, Z(NO₂), Z (Hal_n), Bobz, Iboc, Adpoc, Mboc, Acm, трет.-бутил, OBzl, ONbzl, OMbzl, Bzl, Mob, Piс, Trt.

Физиологически приемлемые соли соединений формулы I - это, в частности, фармацевтически применимые или нетоксичные соли. Такие соли образуются, например, соединениями формулы I, которые содержат кислые группы, например карбокси, с щелочными и щелочноземельными металлами, как например Na, К, Мg и Са, а также с физиологически приемлемыми органическими аминами, как например триэтиламин, этаноламин или трис-(2-гидроксиэтил)-амин. Соединения формулы I, содержащие основные группы, например аминогруппу, амидиногруппу или гуанидиногруппу, образуют соли с неорганическими кислотами, как например соляной, серной или фосфорной кислотами, и с органическими карбоновыми или сульфоновыми кислотами, как например уксусной, лимонной, бензойной, малеиновой, фумаровой, винной, метансульфоновой или п-толуолсульфоновой кислотами.

Соединения формулы I по изобретению могут содержать оптически активные атомы углерода, которые независимо друг от друга могут иметь R- или S-конфигурацию и, таким образом, присутствовать в форме чистых энантиомеров или чистых диастереомеров или в форме смеси энантиомеров или диастереомеров. Чистые энантиомеры и их смеси, а также диастереомеры и смеси диастереомеров, являются предметом настоящего изобретения. Изобретение включает смеси двух и более двух стереоизомеров формулы I и все соотношения стереоизомеров в смесях.

Соединения формулы I по изобретению могут присутствовать в качестве смесей E/Z-изомеров, поскольку, по меньшей мере один из остатков A, D или F независимо друг от друга является -NR²-N=CR²-, -N=CR²- или -R²C=N-, и в случае, если один или несколько остатков в формуле I представляют -CR²=CR³-. Предметом настоящего изобретения являются как чистые Е- или Z-изомеры, так и смеси E/Z-изомеров во всех соотношениях. Диастереомеры, включая E/Z-изомеры, можно посредством хроматографии разделить на отдельные изомеры. Рацематы путем хроматографии можно разделить на хиральные фазы или путем рацематного расщепления на оба энантиомера.

Соединения формулы I по изобретению могут, кроме того, содержать подвижные атомы водорода, а также находиться в различных таутомерных формах. Также и эти таутомеры являются предметом настоящего изобретения.

Предпочтительными являются соединения формулы I, в которой

А означает простую связь, (C₁-C₆)-алкандиил, -NR²-N=CR²-, -NR²-C(O)-NR²-, -NR²-C(O)O-, -NR²-C(O)S-, -NR²-C (S) -NR²-, -NR²-C(S)-O-, -NR²-C(S)-S-, -NR²-S(O)_n-NR²-, -NR²S (O) _n-O-, -NR²-S(O)_n-, (С₃-С₈)-циклоалкандиил,

-CC-, -NR²-C (O) -, -С (О) -NR²-, (С₅-С₁₂)-арилен-С(O)-NR²-, -O-, -S(O)_n-, (C₅-C₁₂)-арилен-, -СО-, (С₅-С₁₂)-арилен-СО-, -NR²-, -SO₂-NR²-, -CO₂-, -N= CR²-, -R²C= N-, -CR²=CR³-, (C₅-C₁₂)-арилен-S (O)_n-, которые соответственно могут быть однократно или двукратно замещены (C₁-C₈)-алкандиилом;

В означает простую связь, (C₁-C₈)-алкандиил, -CR²=CR³- или -СС-, которые, соответственно, могут быть однократно или двукратно замещены (C₁-C₈)-алкандиилом;

D означает простую связь, (C₁-C₈)-алкандиил или -О-, -NR²-, -CO-NR²-, -NR²-CO-, -NR²-C (О) -NR²-, -NR²-C (S) -NR²-, -OС(О)-, -С (О) О-, -СО-, -CS-, -S(O)-, -S(O)₂-, -S(O)₂-NR²-, -NR²-S(O)-, -NR²-S(O)₂- -S-, -CR²=CR³-, -CC-, -NR²-N= CR²-, -N=CR²-, -R²C=N или -CH(OH)-, которые соответственно однократно или двукратно могут быть замещены (C₁-C₆)-алкандиилом;

Е означает 6-членную ароматическую кольцевую систему, которая, при необходимости, содержит 1 или 2 N-атомов и, при необходимости, замещена 1-3 одинаковыми или разными остатками из ряда R², R³, фтор, Сl или ОН;

F имеет значения, указанные для D;

G



Y означает простую связь или -NR²-;

R¹ означает R²-C (=NR²) -NR³-, R²R³N-C (=NR²) -, R²R³N-C (=NR²) -NR²- или 4-10-членную моно- или полициклическую ароматическую или неароматическую кольцевую систему, которая, при необходимости, может содержать 1-4 гетероатома из ряда N, О и S и, при необходимости, может быть однократно или многократно замещена заместителями из ряда R¹², R¹³, R¹⁴ и R¹⁵;

R², R³ означают независимо друг от друга Н,- (C₁-С₈)-алкил, который, при необходимости, однократно или многократно замещен фтором, (С₃-С₈) -циклоалкил, (С₃-С₈)-циклоалкил-(C₁-C₆)-алкандиил, (C₅-C₁₂) -арил, (C₅-C₁₂) -арил- (C₁-С₆)-алкандиил, H₂N, (R⁸O)R⁸NR⁹, R⁸OR⁹, R⁸OC(O)R⁹, R⁸-(C₅-C₁₂)-арилен-R⁹,

R⁸R⁸NR⁹, HO-(C₁-C₈)-алкандиил-NR⁸R⁹, R⁸R⁸NC(O)R⁹, R⁸C(O)NR⁸R⁹,

R⁸C(O)R⁹, R⁸R⁹N-C(=NR⁸)-, R⁸R⁸N-C (=NR⁸)-NR⁸- или (C₁-С₁₀) -алкилкарбонилокси- (C₁-C₄) -алкандиилоксикарбонил;

R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ означают независимо друг от друга Н, фтор, ОН, (C₁-C₈)-алкил, (С₃-С₈) -циклоалкил, (С₃-С₈) -циклоалкил- (C₁-С₈)-алкандиил, или R⁸OR⁹, R⁸SR⁹, R⁸CO₂R⁹, R⁸OC(O)R⁹, R⁸-(C₅-C₁₂)-арилен-R⁹, R⁸N(R²)R⁹, R⁸R⁸NR⁹, R⁸N (R²) С (О) OR⁹, R⁸S (О)_nN (R²) R⁹, R⁸OС(O)N(R²)R⁹, R⁸C(O)N(R²)R⁹, R⁸N(R²)C(O)N(R²)R⁹, R⁸N(R²)S(O)_nN(R²)R⁹, R⁸S(O)_nR⁹, R⁸SC (О) N (R²) R⁹, R⁸C(O)R⁹, R⁸N(R²)C(O)R⁹, R⁸N(R²)S(O)_nR⁹;

R⁸ означает Н, (C₁-С₆)-алкил, (С₃-С₈)-циклоалкил, (С₃-С₈)-циклоалкил- (C₁-C₆) -алкандиил, (C₅-C₁₂) -арил, (C₅-C₁₂) -арил- (C₁-C₆)-алкандиил, причем остатки алкила могут быть однократно или многократно замещены фтором;

R⁹ означает простую связь или (C₁-C₆)-алкандиил;

R¹⁰ означает C(O)R¹¹, C(S)R¹¹, S(O)_nR¹¹, P(O)(R¹¹)_n, или 4-8-членный насыщенный или ненасыщенный гетероцикл, который содержит 1, 2, 3 или 4 гетероатома из ряда N, О, S;

R¹¹ означает ОН, (C₁-C₆) -алкокси, (C₅-C₁₂)-арил-(C₁-C₆)-алкандиилокси, (C₅-C₁₂)-арилокси, (C₁-C₆)-алкилкарбонилокси-(C₁-C₄) -алкандиилокси, (C₅-C₁₂) -арил- (C₁-C₆) -алкандиилкарбонилокси-(C₁-C₆)-алкандиилокси, NН₂, моно- или ди-(C₁-C₆-алкил)-амино, (C₅-C₁₂)-арил-(C₁-C₆)-алкандииламино,

(C₁-C₆)-диалкиламинокарбонилметиленокси;

R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵ означают независимо друг от друга Н, (C₁-C₈)-алкил, который, при необходимости, однократно или многократно замещен фтором, (С₃-С₈)-циклоалкил, (С₃-С₈)-циклоалкил-(C₁-C₆) алкандиил, (C₅-C₁₂) -арил, (С₅-С₁₂) -арил- (C₁- C₆)-алкандиил, H₂N, (R⁸O)R⁸NR⁹, R⁹OR⁹, R⁸OC(O)R⁹,

R⁸-(C₅-C₁₂)-арилен-R⁹, R⁸R⁸NR⁹, НО-(C₁-C₈)-алкандиил-N (R²) R⁹, R⁸N (R²) С (O) R⁹, R⁸C(O)N(R²)R⁹, R⁸C(O)R⁹, R²R³N-C(=NR²)-, R²R³N-C (=NR³)-NR²-, =O, =S;

n равно 1 или 2;

p, q независимо друг от друга 0 или 1;

во всех своих стереоизомерных формах и их смеси во всех соотношениях, а также их физиологически приемлемые соли.

Особенно предпочтительными являются соединения формулы I, в которой даются следующие значения:

А означает простую связь, (C₁-C₆)-алкандиил, -NR²-N=CR²-, -NR²-C(O)-, -C(O)-NR²-, (С₅-С₁₀)-арилен, -СО-, -NR²-, -CO₂-, -N=CR²-, -R²C=N-, -CR²= CR³-, которые соответственно могут быть однократно или двукратно замещены (C₁-С₆)-алкандиилом;

В означает простую связь, (C₁-C₆)-алкандиил, -CR²=CR³-, который соответственно может быть однократно или двукратно замещен (C₁-C₆)-алкандиилом;

D означает простую связь, (C₁-C₆) -алкандиил, -О-, -NR²-, -NR²-CO-, -C(O)-NR²-, -NR²-C(O)-NR²-, NR²-C (S)-NR²-, -OC(O)-, -C(O)-, -CR²=CR³-, -NR²-S(O)₂-, -N= CR²- или -R²C= N, которые соответственно однократно или двукратно могут быть замещены (C₁-C₆) -алкандиилом;

Е означает фенилен или пиридиндиил, который при необходимости замещен 1-3 одинаковыми или разными остатками из ряда R² и R³;

F означает простую связь, (C₁-C₆)-алкандиил, -О-, СО-NR²-, -NR²-CO-, -NR²-C(O)-NR²-, -ОС (О)-, -С (О)-О-, -СО-, -S(O)₂-, S(O)₂-NR²-, -NR²-S(O)₂-, -CR²=CR³-, -CC-, которые соответственно однократно или двукратно могут быть замещены (C₁-C₆) -алкандиилом;

G



Y означает простую связь или -NH-;

R¹ означает R²-C (=NR²) -NR²-, R²R³N-C (=NR²)-,

































R², R³ означают независимо друг от друга Н, (C₁-C₆)-алкил, который, при необходимости, однократно или многократно замещен фтором, предпочтительно одно-шестикратно, (С₃-С₆)-циклоалкил, (С₃-С₆) -циклоалкил- (C₁-C₄) -алкандиил, (C₅-С₁₀)-арил, (С₅-С₁₀)-арил-(C₁-C₄)-алкандиил, H₂N, R⁸ОR⁹, R⁸R⁸NR⁹, R⁸NНС(O)R⁹, H₂N-C(=NH)-, H₂N-C(=NH)-NH-;

R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ означают независимо друг от друга Н, фтор, ОН, (C₁-C₆)-алкил, (С₃-С₆)-циклоалкил, (С₃-С₆) -циклоалкил- (C₁-C₆)-алкандиил, или R⁸OR⁹, R⁸CO₂R⁹, R⁸OC(O)R⁹, R⁸-(С₅-С₁₀)-арилен-R⁹, R⁸NHR⁹, R⁸R⁸NR⁹, R⁸NHC(O)OR⁹, R⁸S(O)_nNHR⁹, R⁸ОС(O)NНR⁹, R⁸C(O)NHR⁹, R⁸C(O)R⁹, R⁸NHC(O)NHR⁹,

R⁸NHS (O)_nNHR⁹, R⁸NH(CO)R⁹, R⁸NНS(O)_nR⁹;

R⁸ означает Н, (C₁-C₆)-алкил, (С₃-С₆)-циклоалкил, (С₃-С₆) -циклоалкил-(C₁-C₄)-алкандиил, (С₅-С₁₀) -арил, (С₅-С₁₀)-арил-(C₁-C₄)-алкандиил, причем остатки алкила могут быть замещены атомами фтора;

R⁹ означает простую связь или (C₁-C₆)-алкандиил;

R¹⁰ означает C(O)R¹¹;

R¹¹ означает ОН, (C₁-C₆)-алкокси, (С₅-С₁₀) -арил- (C₁-C₆) -алкандиилокси, (С₅-С₁₀)-арилокси, (C₁-C₆)-алкилкарбонилокси-(C₁-C₄) -алкандиилокси,

(C₅-C₁₀) -арил- (C₁-C₄) -алкандиилкарбонилокси- (C₁-C₄) -алкандиилокси, H₂N, моно- или ди-(C₁-C₆-алкил)-амино;

R¹² означает Н, (C₁-C₆) -алкил, который, при необходимости, однократно или многократно замещен фтором, (С₃- C₆)-циклоалкил, (С₃-С₆)-циклоалкил-(C₁-C₄)-алкандиил, (C₅-C₁₀)-арил, (С₅-С₁₀)-арил-(C₁-C₄)-алкандиил, H₂N,

R⁸OR⁹, R⁸OC(O)R⁹, R⁸-(C₅-C₁₀)-apилeн-R⁹, R⁸R⁸NR⁹, R⁸NHC(O)R⁹,

R⁸C(O)NHR⁹, H₂N-C(=NH)-, H₂N-C(=NH)-NH-, =O;

n равно 1 или 2;

p, q независимо друг от друга 0 или 1;

во всех своих стереоизомерных формах и их смеси во всех соотношениях, а также их физиологически приемлемые соли.

Наиболее предпочтительны соединения формулы I, в которой

А означает простую связь, -NR²-N=CR²-, -N=CR²-;

В означает простую связь, (C₁-C₆)-алкандиил;

D означает простую связь, (C₁-C₄)-алкандиил, -О-, -NR²-, -NR²-CO-, -C(O)-NR²-, -NR²-C(O)-NR²-, -N=CR²- или -R²C=N-, которые соответственно однократно или двукратно могут быть замещены (C₁-C₆)-алкандиилом;

Е означает фенилен или пиридиндиил, который, при необходимости, замещен 1 или 2 остатками из ряда R² и R³;

F означает прямую связь, (C₁-C₆)-алкандиил, -О-, -СО-NR²-, -NR²-CO-, -NR²-C(O)-NR²-, -CR²= CR³- или -СС-, которые соответственно однократно или двукратно могут быть замещены (C₁-C₄) -алкандиилом;

G



Y означает прямую связь или -NH-;

R¹ означает R²R³N-C (=NR²) -,























R², R³ означают независимо друг от друга Н, (C₁-C₆)-алкил, трифторметил, пентафторэтил, (C₅-C₆)-циклоалкил, (С₅-С₆)-циклоалкил-(C₁-C₂)-алкандиил, фенил, бензил, H₂N, R⁸OR⁹, R⁸R⁸NR⁹, R⁸NHC(O)R⁹, H₂N-C(=NH)-, Н₂N-С (=NH)-NH-;

R⁴, R⁵, R⁶, R⁷ означают независимо друг от друга Н, фтор, ОН, (C₁-C₆) -алкил, (C₅-С₆) -циклоалкил, (C₅-C₆)-циклоалкил-(C₁-C₆)-алкандиил, или R⁸OR⁹, R⁸-(С₅-С₁₀)-арилен-R⁹, R⁸R⁸NR⁹, R⁸NHC(O)OR⁹, R⁸S(O)_nNHR⁹, R⁸OC(O)NHR⁹, R⁸C(O)NHR⁹;

R⁸ означает H, (C₁-C₆)-алкил, (C₅-C₆) -циклоалкил, (C₅-C₆)-циклоалкил-(C₁-C₂)-алкандиил, (C₅-C₆)-арил, (C₅-C₆)-арил-(C₁-С₂)-алкандиил;

R⁹ означает простую связь или (C₁-C₆)-алкандиил;

R¹⁰ означает C(O)R¹¹;

R¹¹ означает ОН, (C₁-C₆)-алкокси, фенокси, бензилокси, (C₁-C₄)-алкилкарбонилокси-(C₁-C₄)-алкандиилокси, NH₂, моно- или ди- (C₁-С₆-алкил) -амино;

n равно 1 или 2;

p, q независимо друг от друга 0 или 1;

во всех своих стереоизомерных формах и их смеси во всех соотношениях, а также их физиологически приемлемые соли.

Соединения формулы I могут быть, в основном, получены, например, в ходе конвергентного синтеза путем связывания двух или большего числа фрагментов, которые можно вывести из формулы I ретросинтетическим способом. При получении соединений формулы I в процессе синтеза, в основном, появляется необходимость путем стратегии защитных групп, соответствующей задачам синтеза, на время блокировать функциональные группы, которые могут приводить к нежелательным побочным реакциям, что специалисту известно. Метод связывания фрагментов не ограничивается приводимыми ниже примерами, а может применяться вообще для синтеза соединений формулы I.

Например, соединения формулы I типа

R²-Y-A-B-D-E-C (О) NR²-G,

в которой F в формуле I обозначает -C(O)NR²-, могут быть получены путем конденсации соединения формулы II

R¹-Y-A-B-D-E-M, II,

причем М представляет гидроксикарбонил, (C₁-C₆)-алкоксикарбонил, активированные производные карбоновой кислоты, такие как хлориды кислоты, активные сложные эфиры или смешанные ангидриды, с HNR²-G.

Для конденсации двух фрагментов с образованием амидной связи используют предпочтительно способы связывания, известные сами по себе из пептидной химии (см., например, Губен-Вейль, Методы органической химии, том 15/1 и 15/2, издательство Georg Thieme, Штуттгарт, 1974). Для этого, как правило, необходимо, чтобы имеющиеся непрореагировавшие аминогруппы были защищены во время конденсации обратимыми защитными группами. То же самое имеет место и для карбоксильных групп, не принявших участие в реакции, которые используют, предпочтительно, в виде (C₁-C₆)-алкильного, бензилового или трет.-бутилового эфира. Защита аминогрупп имеет место, если генерируемые аминогруппы присутствуют еще в качестве нитро- или цианогрупп и образуются после сочетания путем гидрирования. После сочетания существующие защитные группы соответствующим образом отщепляются. Например, группы NO₂ (гуанидиновая защита), бензил-оксикарбонильные группы и бензиловый эфир могут удаляться гидрированием. Защитные группы трет.-бутилового типа отщепляются в кислых условиях, в то время как 9-флуоренилметилоксикарбонильный остаток удаляется посредством вторичных аминов.

Соединения формулы I, в которых R¹ имеет указанное значение, Y представляет -NR²- и А представляет -С(О)-, могут быть получены, например, согласно общеизвестным методам связывания пептидной химии путем связывания R¹NR²H с НО₂С-В-D-E-F-G.

Соединения формулы I, в которой R¹-Y-A представляет



или циклические гуанилгидразоны типа



получают, например, путем конденсации



с кетонами или альдегидами типа О=C(R²)- или соответствующими ацеталями или кеталями согласно общеупотребительным способам, представленным в литературе, например, аналогично Н. Дезидер и сотр.. Arch.Phann., 325 (1992), 773-777; А.Алвес и сотр., Eur. J.Med.Chem. Chim.Ther.21, (1986), 297-304; Д. Хебер и сотр., Pharmazie, 50, (1995), 663-667; Т.П.Вунц и сотр., J.Med.Chem. , 30, (1987), 1313-1321; К. Х. Буххайт и сотр., J.Med.Chem., 38, (1995), 2331-2338, или как описано в примере 1 (конденсация в условиях солянокислого катализа в уксусной кислоте).

Вышеуказанные гуанилгидразоны могут, при необходимости, выпадать в осадок в виде смеси E/Z-изомеров, которые могут быть отделены в соответствии с общеупотребительными методами хроматографии.

Соединения формулы I, в которых R¹-Y-A представляет R²-С (=NR²) -NR²-N= C(R²) или содержащую моно- или полицикл систему типа



могут быть получены аналогичным образом.

Соединения формулы I, в которых D представляет -N=C(R²)-, получают, например, путем конденсации кетонов или альдегидов типа O=С (R²)-E-F-G с аминами типа R¹-Y-A-B-NH₂, согласно общеупотребительным способам, представленным в литературе (см., например, J.March, Advanced Organic Chemistry, Third Edition, John Wiley & Sons, 1985, стр.796). Соединения формулы I, в которых D представляет -R²C=N-, могут быть получены, например, аналогичным образом путем конденсации кетонов или альдегидов типа R¹-Y-А-В-С-(R²) =O с аминами типа H₂N-E-F-G.

Соединения формулы I, в которой F представляет -N=C(R²)- или -R²C=N-, могут быть получены так, как это описано выше в части соединений формулы I, в которых D -N=C(R²) или -R²C=N.

Соединения формулы I с R¹⁰ = SO₂R¹¹ получают, например, способом, описанным в литературе (см. Губен Вейль, Методы органической химии, том Е12/2, издательство Georg Thieme Verlag, Штуттгарт, 1985, стр.1058), согласно которому соединения формулы I с R¹⁰=SH окисляют до соединения формулы I с R¹⁰= SО₃Н, из которых затем непосредственно или через соответствующие галогениды сульфоновой кислоты путем этерификации или связывания амидной связи получают соединения формулы I с R¹⁰=SO₂R¹¹ (R¹¹ОН). Чувствительные к окислению группы в молекуле, как например амино-, амидино- или гуанидиновые группы, при необходимости, перед проведением окисления защищают подходящими защитными группами.

Соединения формулы I с R¹⁰=S(O)R¹¹ получают, например, путем перевода соединения формулы I с R¹⁰=SH в соответствующий сульфид (R¹⁰=S), а затем мета-хлорпербензойной кислотой окисляют до получения сульфиновых кислот (R¹⁰= SO₂H) (см. Губен Вейль, Методы органической химии, том Е11/1, издательство Georg Thieme Verlag, Штуттгарт, 1985, стр.618), из которых затем в соответствии с методами, известными из литературы, можно получать соответствующие сложные эфиры сульфиновой кислоты или амиды сульфиновой кислоты R¹⁰= S(O)R¹¹ (R¹¹OH). Находят применение и другие известные из литературы методы получения соединений формулы I с помощью R¹⁰=S(O)_nR¹¹ (n=1, 2) (см. Губен Вейль, Методы органической химии, том E11/1, издательство Georg Thieme Verlag, Штуттгарт, 1985, стр.618, или том Е11/2, Штуттгарт, 1985, стр.1055).

Соединения формулы I с R¹⁰= P(O)(R¹¹)_n (n=1, 2) синтезируют в соответствии с известными из литературы способами (см. Губен Вейль, Методы органической химии, том Е1 и Е2, издательство Georg Thieme Verlag, Штуттгарт, 1982), на соответствующих предварительный стадиях, причем выбранный метод синтеза должен соответствовать целевой молекуле.

Соединения формулы I с R¹⁰=C(S)R¹¹ могут быть получены в соответствии с известными из литературы способами (см. Губен Вейль, Методы органической химии, том Е5/1 и Е5/2, издательство Georg Thieme Verlag, Штуттгарт, 1985).

Соединения формулы I с R¹⁰=S(O)_nR¹¹ (n=1, 2), R¹⁰=P(O) (R¹¹)_n (n=1, 2) или C(S)R¹¹ могут быть получены также путем связывания фрагментов, как это описано выше, что, к примеру, и рекомендуется в том случае, если в F-G формулы I, например, содержатся аминосульфоновая кислота (имеющаяся в продаже), аминосульфиновая кислота, аминофосфоновая кислота или аминофосфиновая кислота или полученные их производные, такие, как сложный эфир или амиды.

Соединения формулы I, в которых R¹-Y-A- представляет



или циклические ацилгуанидины типа



могут быть, например, получены путем взаимодействия соединения формулы III,

Q(O)C-B-D-E-F-G III,

в которой Q представляет легко нуклеофильно замещаемую удаляемую группу, с соответствующим гуанидином (производным гуанидина) типа



или циклическим гуанидином (производным гуанидина) типа



Вышеуказанные активированные производные кислоты формулы III, в которой Q означает алкоксигруппу, предпочтительно метоксигруппу, феноксигруппу, фенилтиогруппу, метилтиогруппу, 2-пиридилтиогруппу, гетероцикл азота, предпочтительно 1-имидазолил, получают, предпочтительно, известным способом из исходных карбоновых кислот (Q=OH) или хлоридов карбоновых кислот (Q=Cl). Последние получают опять же известным способом из исходных карбоновых кислот (Q=OH), например путем реакции с тионилхлоридом.

Наряду с хлоридами карбоновой кислоты (Q=Cl) известным способом можно получать также и другие активированные производные кислоты типа Q(О)C- непосредственно из исходных карбоновых кислот (Q=OH), как например, сложный метиловый эфир (Q= ОСН₃) путем обработки газообразным НСl в метаноле, имидазолиды (Q= 1-имидазолил) путем обработки карбонилдиимидазолом [сравни Staab, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 1, 351-367 (1962)], смешанные ангидриды (Q= С₂Н₅ОС (О) О или TosO) путем обработки Сl-СООС₂Н₅ или тозилхлоридом в присутствии триэтиламина в инертном растворителе. Активирование карбоновых кислот может происходить также с помощью дициклогексилкарбодиимида (DCCI) или с помощью O-[(циано(этоксикарбонил)метилен)амино]-1,1,3,3-тетраметилуроний-тетрафторбората ("TOTU") [Weiss und Krommer, Chemiker Zeitung, 98, 817 (1974)] , а также других, используемых в пептидной химии, активирующих реактивов. Ряд соответствующих методов получения активированных производных карбоновой кислоты формулы II указан в литературном источнике, J.March, Advanced Organic Chemistry, Third Edition (John Wiley & Sons, 1985, с.350).

Реакция превращения активированного производного карбоновой кислоты формулы III с соответствующим гуанидином (производным) происходит известным образом в протонном и апротонном полярном, но инертном органическом растворителе. При этом в процессе взаимодействия метилового эфира (Q=ОСН₃) с соответствующими гуанидинами пригодны метанол, изопропанол или ТГФ от 20^oС до температуры кипения этих растворителей. В большинстве реакций превращения соединений формулы III с не содержащими солей гуанидинами работают, предпочтительно, в апротонных инертных растворителях, таких как ТГФ, диметоксиэтан, диоксан. Но также, при использовании основания (как, например, NaOH), можно использовать и воду в качестве растворителя при превращении соединений формулы III с гуанидинами. Если Q означает Cl (Q = Cl), то работают, предпочтительно, при использовании улавливателя кислоты, например, в виде избыточного гуанидина (производного) для связывания галогенводородной кислоты.

Соединения формулы I, в которых R¹-Y-A- представляет R²-C (=NR²) -С (О) - или содержащую моноцикл или полицикл систему типа



могут быть получены аналогичным образом.

Соединения формулы I, в которых R¹-Y-A- представляет собой сульфонильный или сульфоксильный гуанидин типа R²R³N-С (=NR²) -NR²-S (O)_n- (n=1, 2) или сульфонильный или сульфоксильный аминогуанидин типа R²R³N-C (= NR²) -NR²-NR²-S (O)_n- (n=1, 2) или соответственно



(n=1, 2) или



(n=1, 2) или

получают согласно известным из литературы способам путем реакции R²R³N-C (=NR²) -NR²H или R²R³N-C (=NR²)-NR²-NR²H или соответственно



с производными сульфиновой или сульфоновой кислоты формулы IV,

Q-S(O)_n-B-D-E-F-G, IV

в которых Q означает, например, Сl или NH₂, аналогично S.Birtwell et al. , J. Chem.Soc., (1946), 491 или Губен Вейль, Методы органической химии, том Е4, издательство Georg Thieme Verlag, Штуттгарт, 1983, стр. 620 ff.

Соединения формулы I, в которых R¹-Y-A- представляет R²-C(= NR²)-NR²-S(O)_n- (n= 1, 2) или R²-C (=NR²) -NR²-NR²-S(О)_n- (n=1, 2) или соответственно содержащую моноцикл или полицикл систему типа



(n=1, 2), могут быть получены аналогичным образом.

Соединения формулы I, в которых Y имеет указанное значение, А представляет -NR²-C (О) -NR²-, -NR²-C(O)O-, -NR²-C(O)S-, a R¹ представляет R²R³N-C (= NR²) -, R²-C(=NR²)- или 4-10-членную моноциклическую или полициклическую, ароматическую или неароматическую кольцевую систему, которая определяется в соответствии с вышеуказанным, может быть замещена, как описано выше, получают, например, взаимодействием соединения формулы V

Q-B-D-E-F-G, V

в которой Q представляет HNR²-, НО- или HS-, с подходящим производным угольной кислоты, предпочтительно фосгеном, дифосгеном (трихлорметиловым эфиром хлормуравьиной кислоты), трифосгеном (бис-трихлорметиловым эфиром угольной кислоты), этиловым эфиром хлормуравьиной кислоты, изо-бутиловым эфиром хлормуравьиной кислоты, бис-(1-гидрокси-1-Н-бензотриазолил) карбонатом или N, N"-карбонилдиимидазолом в инертном, в противоположность использованным реактивам, растворителе, предпочтительно ДМФ, ТГФ или толуоле, при температуре между -20^oС и точкой кипения растворителя, предпочтительно между 0^oС и 60^oС, сначала до получения замещенного производного угольной кислоты формулы VI

, VI

в которой R означает -NR²-, -О- или -S- и Q" в зависимости от используемого производного угольной кислоты - хлора, этокси, изобутокси, бензотриазол-1-окси или 1-имидазолила.

Превращение этих производных в случае, если Y означает простую связь, с R²R³N-C (= NR²) -NR²H или, соответственно, R²-C(=NR²)-NR²H или, если Y представляет -NR²-, с R²R³N-C (=NR²) -NR²-NR²H или, соответственно, R²-C (= NR²) -NR²-NR²H или с содержащими моноцикл или полицикл системами типа





осуществляют, как описано выше, при получении ацилгуанидина (производных).

Соединения формулы I, в которых F представляет -R²N-C(O)-NR² или -R²N-C(S)-NR²-, получают, например, превращением соединения формулы VII

R¹-Y-A-B-D-E-NHR² VII

с изоцианатом OCN-G или изоцианатом SCN-G по методам, описанным в литературе.

Соединения формулы I, в которых F означает -C(O)NR²-, -SO₂NR², -С (О) О-, могут быть получены, например, путем превращения

R¹-Y-A-B-D-E-C(O)Q или же R¹-Y-A-B-D-E-SO₂Q

(Q представляет легко нуклеофильно замещаемую удаляемую группу, как например ОН, Сl, ОСН₃ и т.д.) с HR²-B или НО-G, согласно способам, описанным в литературе.

Соединения формулы I, в которых Y является связью, a R¹-А- содержит моноцикл или полицикл типа



могут быть получены, например, взаимодействием соединения формулы VIII

HR²N-B-D-E-F-G VIII

с моноциклом или полициклом типа



в которой Х представляет собой нуклеофильно удаляемую замещением группу, как например галоген или SH, SСН₃, SОСН₃, SО₂СН₃ или HN-NO₂, в соответствии со способами, известными из литературы (смотри, например, A.F.McKay et al., J. Med. Chem., 6 (1963) 587, M.N.Buchmann et al., J.Am.Chem.Soc., 71 -(1949) 766, F. Jung et al., J.Med.Chem., 34 (1991) 1110 или G.Sorba et al., Eur.J. Med.Chem., 21 (1986) 391).

Соединения формулы I, в которых Y является связью, а R¹-A- содержит моноцикл или полицикл типа



могут быть получены, например, взаимодействием соединения формулы VIII с соединением типа



в которой Х представляет собой удаляемую группу, как например -SСН₃, в соответствии со способами, известными из литературы (смотри, например, T. Hiroki et al., Synthesis (1984) 703 или M.Purkayastha et al., Indian J.Chem. , Sect. В 30 (1991) 646).

Соединения формулы I, в которых D представляет собой -СС-, могут быть получены, например, взаимодействием соединения формулы IX,

X-E-F-G, IX

в которой Х означает I или Вr, в катализируемую палладием реакцию с соединением типа R¹-Y-A-B-CCH, как это, например, описано у A.Arcadi et al. , Tetrahedron Lett. , 1993, 34, 2813 или E.C.Taylor et al., J.Org.Chem., 1990, 55, 3222.

Аналогичным образом могут быть получены соединения формулы I, в которых F представляет собой -СС-, например путем связывания соединений формулы X

R¹-Y-A-B-D-E-X, X

в которой Х означает I или Вr, в процессе катализируемой палладием реакции с соединением типа НСС-G.

Известными из литературы способами получения являются, например, описанные в J. March, Advenced Organic Chemistry, Third Edition (John Wiley & Sons, 1985).

Соединения формулы I и их физиологически приемлемые соли могут быть применены для животных, предпочтительно для млекопитающих, и, в частности, для человека индивидуально в качестве лекарственного средства, в смесях друг с другом или в форме фармацевтических препаратов, которые позволяют осуществлять энтеральное или парентеральное применение и которые, наряду с обычными фармацевтически приемлемыми носителями и вспомогательными веществами, в качестве активного компонента содержат эффективную дозу по меньшей мере одного соединения формулы I или его соли. Препараты содержат обычно около 0,5-90 вес.% терапевтически эффективно действующего соединения.

Лекарственные средства могут применяться орально, например в форме пилюль, таблеток, таблеток с покрытием, драже, гранул, капсул с твердым и мягким желатином, растворов, сиропов, эмульсий, суспензий или аэрозольных смесей. Применение может быть также ректальным, например в форме геморроидальных свечек, или парентерально, например в форме инъекцируемых или инфузионных растворов, микрокапсул или анатомических палочек (Rods), через кожу, например в форме мазей или настоек, или через нос, например в форме спрея для носа.

Изготовление фармацевтических препаратов осуществляется известным образом, причем применяются фармацевтически инертные неорганические или органические носители. Для изготовления пилюль, таблеток, драже и капсул с твердым желатином можно применять, например, лактозу, кукурузный крахмал или их производные, тальк, стеариновую кислоту или их соли и т.п. Веществами-носителями для капсул с мягким желатином и геморроидальных свеч являются, например, жиры, воски, полутвердые и жидкие полиолы, натуральные или твердые масла и т.п. В качестве носителей для получения растворов и сиропов пригодны, например, вода, сахароза, инвертный сахар, глюкоза, полиолы и т.п. В качестве носителей для получения инъекцируемых растворов пригодны вода, глицерин, полиолы, растительные масла и т.п. В качестве носителей для микрокапсул, имплантатов или анатомических палочек пригодными являются сополимеры гликолевой и молочной кислот.

Фармацевтические препараты могут содержать наряду с активными веществами и носителями еще и целевые добавки, как например наполнители, разбавители, разбрызгивающие вещества, связующие, мягчители, смачиватели, стабилизаторы, эмульгаторы, консерванты, средства, улучшающие вкус, красители, вкусовые или ароматизирующие добавки, загустители, разбавители, буферные соединения, далее растворители или агенты растворения или средства для обеспечения пролонгированного действия, а также соли для изменения осмотического давления, покрывные средства или антиоксиданты. Они могут содержать также два или несколько соединений формулы I или их физиологически приемлемые соли; далее, наряду, по меньшей мере, с одним соединением формулы I, еще одно или несколько других терапевтически эффективных веществ.

Доза может варьироваться в определенных пределах и в каждом отдельном случае может быть приведена в соответствие с индивидуальными показаниями. При оральном применении суточная доза составляет в основном от 0,01 до 50 мг/кг, предпочтительно от 0,1 до 5 мг/кг, в особенности от 0,3 до 0,5 мг/кг веса тела, для получения эффективных результатов. При внутривенном введении суточная доза составляет в основном около от 0,01 до 100 мг/кг, предпочтительно от 0,05 до 10 мг/кг веса тела. Суточная доза может, в частности при введении больших количеств, быть разделена, например, на 2, 3 или 4 частичные дозы. При необходимости, в зависимости от индивидуальных характеристик, возможны отклонения от указанной суточной дозы в большую или меньшую сторону.

Ингибирование резорбции костей с помощью соединений по изобретению можно определить, например, с помощью теста резорбции остеокластов ("PIT ASSAY"), например аналогично WO 95/32710. Методы тестирования, по которым может определяться антагонистическое действие соединений по изобретению на рецептор _v3 витронектина, описаны ниже.

Метод тестирования 1:

Ингибирование связывания человеческого витронектина (Vn) к рецептору (VnR) _v3 человеческого витронектина (ELISA-Test).

1. Очистка человеческого витронектина

Человеческий витронектин выделяют из человеческой плазмы и очищают афинной хроматографией по методу Yatohyo et al., Cell Structure and Funktion, 1988, 23, 281-292.

2. Очистка рецептора (_v3) человеческого витронектина

Рецептор человеческого витронектина получают из человеческой плаценты по методу Pytela et al., Methods Enzymol, 144, 475. Рецептор _v3 человеческого витронектина может быть получен также и из отдельных линий клеток (например, из 293 клеток эмбриональной линии клеток почек человека), которые выделены с помощью последовательности DNA для обеих подгрупп _v и ₃ рецептора витронектина. Подгруппы экстрагируют с помощью октилгликозида, а затем хроматографируют через конкавалин А, гепарин-сепарозу и S-300.

3. Моноклональные антитела

Мышиные моноклональные антитела, специфичные для подгруппы ₃ рецептора витронектина, получают, используя метод Newman et al., Blood, 1985, 227-232, либо какой-либо аналогичный способ. Кроличий Fab-2 антимышиный Fc конъюгат с пероксидазой хрена (ХРП) (антимышиные антитела-ХРП) был получен от Pel Freeze (каталог 715305-1).

4. ELISA-тест

Пластины сорбента Nunc Maxisorp с 96 лунками для микротитрования покрывают раствором человеческого витронектина (0,002 мг/мл, 0,05 мл/лунку) в PBS (фосфатный буферный раствор поваренной соли и оставляют на ночь при 4^oС. Пластины промывают два раза PBS/0,05% Твин 20 (Tween 20) и блокируют путем инкубирования (60 мин) альбумином сыворотки крови крупного рогатого скота (BSA, 0,5% RIA сорта или лучше) в трис-НСl (50 мл), NaCl (100 мМ), MgCl₂ (1 мМ), CaCl₂ (1 мМ), MnCl₂ (1 мМ), рН 7. Получают растворы известных ингибиторов и тестовых субстанций в концентрации 210^-12-210^-6 моль/л используемого буфера [BSA (0,5%, сорта RIA или лучше) в трис-НСl (50 мМ/л), NaCl₂ (100 мМ), MgCl₂ (1 мМ), CaCl₂ (1 мМ), MnCl₂ (1 мМ), рН 7]. Блокированные пластины освобождают и 0,025 мл этого раствора, который содержит определенную концентрацию (210^-12-210^-6), наливают в каждую лунку, либо известный ингибитор, либо тестовую субстанцию. 0,025 мл раствора рецептора витронектина в тестовом буфере (0,03 мг/мл) прикапывают пипеткой в каждую лунку пластины, и пластину инкубируют путем встряхивания в течение 60-180 мин при комнатной температуре. В промежутке получают раствор (6 мл/пластину) мышиных моноклональных антител, специфичных для ₃-подгруппы рецептора витронектина, в используемом буфере (0,0015 мг/мл). К этому раствору добавляют вторые кроличьи антитела (0,001 мл концентрированного запасного раствора/6 мл раствора мышиных моноклональных анти-₃-антител), которые представляют собой конъюгат антимышиных антител с ХРП, и эту смесь из мышиных анти-₃-антител и кроличьего конъюгата мышиных антител Fc с ХРП подвергают инкубированию в период инкубации ингибитора рецептора.

Тестовые пластины промывают 4 раза раствором PBS, который содержит 0,05% Твин-20, прикапывают пипеткой соответственно 0,05 мл/лунку смеси антител в каждую лунку пластины и инкубируют в течение 60-180 мин. Пластину промывают 4 раза PBS/0,05% Твин-20, а затем обрабатывают 0,05 мл/лунку раствором PBS, который содержит 0,67 мг/мл о-фенилендиамина и 0,012% H₂O₂. В качестве альтернативы можно использовать о-фенилендиамин в буферном растворе (рН 5), который содержит Nа₃РO₄ (50 мМ) и лимонную кислоту (0,22 мМ). Изменение цвета останавливают с помощью 1N H₂SO₄ (0,05 мл/лунку). Абсорбцию каждой лунки замеряют при 492-405 нм, а данные обрабатывают по стандартной методике.

Метод тестирования 2:

Ингибирование связывания кистрина к рецептору человеческого витронектина (VnR) _v3 (ELISA-тест).

(Результаты тестирования 2 обозначены далее как кистрин/VnR)

1. Очистка кистрина

Кистрин очищают с использованием метода Денниса с сотр., описанного в Proc.Natl.Acad.Sci., USA, 1989, 87, 2471-2475 и PROTEINS: Structure, Function and Genetics, 1993, 15, 312-321.

2. Очистка рецептора человеческого витронектина (_v3)

Смотри метод тестирования 1.

3. Моноклональные антитела

Смотри метод тестирования 1.

4. ELISA-тест

Способность веществ ингибировать связывание кистрина к рецептору витронектина можно определить с помощью ELISA-теста. Для этой цели пластины Nunc с 96 лунками для микротитрования покрывают раствором кистрина (0,002 мг/мл) по методу Денниса, как описано в PROTEINS: Structure, Function and Genetics, 1993, 15, 312-321. Дальнейшее проведение ELISA-теста осуществляют аналогично методике тестирования 1, пункт 4.

Метод тестирования 3:

Ингибирование связывания трансфицированных _v3 293 клеток человеческого витронектина.

Клеточный тест

293 клетки, эмбриональная линия клеток почек человека, которые с помощью последовательности DNA сотрансфицированы для подгрупп _v и ₃ рецептора _v3 витронектина, селектируют по методу FASC с точки зрения высокого фиксированного значения (>500000 _v3 рецепторов/на клетку). Выбранные клетки культивируют и отсортировывают заново методом FASC для получения стабильной линии клеток (15D) с фиксированным значением > 1000000 копий на _v3 на каждую клетку.

Пластину для культуры ткани Limbro (96 лунок) с плоским дном покрывают человеческим витронектином (0,01 мг/мл, 0,05 мл на лунку в фосфатном буферном растворе поваренной соли (PSB) и оставляют на ночь при 4^oС, а затем блокируют с помощью 0,5%-ного BSA. Готовят растворы тестируемых соединений с концентрацией 10^-10-210^-3 моль/л в глюкозосодержащей среде DMEM и выливают на пластину, соответственно, 0,05 мл/на лунку раствора. Клетки, которые экспримируют высокий уровень _v3 (например, 15D), суспендируют в содержащей глюкозу среде DMEM, суспензия содержит от 25000 клеток/0,05 мл среды. 0,05 мл этой клеточной суспензии добавляют в каждую лунку, а пластину инкубируют при 37^oС в течение 90 мин. Пластину промывают трижды теплым PBS для удаления несвязанных клеток. Постепенно снижают температуру связанных клеток в цитратном буфере (25 мМоль, рН 5,0), который содержит 0,25% Тритон X-100. Затем добавляют субстрат гексосеамидазы п-нитрофенил-N-ацетил--D-глюкозаминида, а пластину инкубируют 90 мин при 37^oС. Реакцию останавливают добавлением буфера глицин (50 мМоль)/ЕDТА (5 мМоль) (рН 10.4), а абсорбцию каждой лунки замеряют при 405-650 нм. Данные обрабатывают по стандартным методам.

Получены следующие результаты теста:

Соединение - Кистрин/VnR IC₅₀ (мкм)

Соединение примера 1 - 0,03

Примеры

Продукты идентифицированы масс-спектрами и/или спектрами ЯМР.

Пример 1

Гидробромид 4-[2-(N-(имидазолин-2-ил)гидразоноэтилокси)]-бензоил-(2S)-2-бензилоксикарбониламино--аланина

Синтез осуществляют в соответствии со следующей последовательностью реакций, приведенной в конце описания.

1a) Трет. -бутиловый эфир (2S)-3-амино-2-бензилоксикарбониламино-пропионовой кислоты (1.1)

10 г (42 мМоль) (2S)-3-амино-2-бензилоксикарбониламинопропионовой кислоты встряхивают в смеси из 100 мл диоксана, 100 мл изобутилена и 8 мл конц. Н₂SO₄ в течение 3 дней в автоклаве при давлении азота 20 атм. Избыток изобутилена удаляют, к оставшемуся раствору добавляют 150 мл насыщенного раствора NаНСО₃. Фазы разделяют, а водную фазу экстрагируют 2 раза, каждый раз 100 мл диэтилэфира. Объединенные органические фазы промывают 2100 мл Н₂О и сушат над Nа₂SO₄. После удаления растворителя в вакууме получают (1.1) в виде бледно-желтого масла.

1б). Трет. -бутиловый эфир 4-гидроксибензоил-(2S)-2-бензилоксикарбониламино--аланина (1.2)

1,41 г (10,2 мМоль) 4-гидроксибензойной кислоты и 3 г (10,2 мМоль) (1.1) суспендируют в 25 мл ДМФ. Добавляют 1,38 г (10,2 мМоль) 1-гидроксибензотриазола (HOBt) и при 0^oС дициклогексилкарбодиимида (DCCI). Перемешивают в течение 1 часа при 0^oС и оставляют на ночь при комнатной температуре. После фильтрования в вакууме удаляют растворитель, а остаток хроматографируют с помощью гептана/уксусной кислоты (1/1) микронасадочной жидкостной хроматографией MPLC на силикагеле.

Получают (1.2) в виде бесцветного твердого вещества; точка плавления 69^oС.

1в). Трет. -бутиловый эфир 4-(2,2-диметокси-этилокси)-бензоил-(2S)-2-бензилоксикарбониламино--аланина (1.3)

К суспензии 176 г 55%-ной суспензии гидрида натрия в масле (4.07 мМоль гидрида натрия) в 10 мл абс. ДМФ добавляют 1,8 г (4,34 мМоль) (1.2) и перемешивают до окончания выделения водорода (около 30 мин). Затем добавляют 620 мг (3,7 мМоль) смеси бромацетальдегида и диметилацеталя и нагревают 8 часов до температуры 50^oС и 2 часа до температуры 70^oС. После повторного добавления 18 мг суспензии гидрида натрия в масле (0,41 мМоль гидрида натрия) нагревают до температуры 70^oС в течение следующих 4 часов. После отстаивания в течение ночи реакционную смесь разделяют, а остаток распределяют между Н₂О и CH₂Cl₂. Органическую фазу отделяют, сушат над МgSО₄, а растворитель удаляют в вакууме. Остаток хроматографируют MPLC смесью гептан/уксусный эфир над силикагелем.

Получают (1.3) в виде бесцветного твердого вещества; точка плавления 115^oС.

1г). Гидробромид трет.-бутилового эфира 4[2-(N-(имидазолин-2-ил)гидразоноэтилокси)]бензоил-(2S)-2-бензилоксикарбониламино--аланина (1.4)

150 мг (0,3 мМоль) (1.3) и 54 мг (0,3 мМоль) 2-гидразино-2-имидазолингидробромида растворяют в 3 мл конц. уксусной кислоты и смешивают с 1 каплей конц. соляной кислоты. Спустя 5 часов при комнатной температуре реакционную смесь выливают в диэтиловый эфир. Осадок центрифугируют, растирают в диэтиловом эфире и снова центрифугируют, а после сушки в вакууме сразу же подвергают взаимодействию в (1.5) (смотри 1д).

1д). Гидробромид 4[2-(N-имидазолин-2-ил)гидразоноэтилокси)] бензоил-(2S)-2-бензилоксикарбониламино--аланина (1.5)

Сырой продукт (1.4) из 1г) смешивают с 90%-ной трифторуксусной кислотой. Спустя 1 час при комнатной температуре в вакууме удаляют трифторуксусную кислоту, а остаток кристаллизуют смесью Н₂О/н-бутанол/НОАс (43/4,3/3,5).

Получают (1.5) в виде бесцветного твердого вещества; точка плавления 219^oС (разложение).