аллерготропин для лечения полинозов и способ лечения полинозов
Классы МПК: | A61K39/36 из пыльцы растений |
Автор(ы): | Петров Р.В., Хаитов Р.М., Некрасов А.В., Федосеева В.Н., Пучкова Н.Г., Камышева В.А., Мартынов А.И. |
Патентообладатель(и): | Петров Рем Викторович, Хаитов Рахим Мусаевич, Некрасов Аркадий Васильевич, Федосеева Вера Николаевна, Пучкова Наталия Григорьевна, Камышева Валерия Алексеевна, Мартынов Александр Игоревич, ГП Институт иммунологии |
Приоритеты: |
подача заявки:
2001-07-13 публикация патента:
10.06.2003 |
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии и аллергологии, и касается лечения полинозов. Сущностью изобретения является аллерготропин, содержащий аллергоид пыльцы аллергенных растений - тимофеевки, березы, полыни, полученный путем воздействия на суммарную фракцию, состоящую из главных и минорных аллергенов с М.в. 3-90 кД - соединений, включающих реакционноспособные группы белка, модифицированные преимущественно формальдегидом, и связанный с ним полиоксидоний. Для лечения полинозов пациенту вводят аллерготропины, начиная с разведения 10-4 на курс до 15 инъекций. Техническим результатом является получение аллерготропинов на основе аллергоидных форм аллергенов пыльцы растений, обладающих по сравнению с нативным аллергеном более выраженными иммуногенными и гипосенсибилизирующими свойствами. 2 с. и 2 з.п. ф-лы, 6 табл.
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6
Формула изобретения
1. Аллерготропин для лечения полинозов, характеризующийся тем, что он содержит аллергоид пыльцы аллергенных растений, полученный путем воздействия на суммарную фракцию, состоящую из главных и минорных аллергенов с М.в. 3-90 кД - соединений, включающих реакционноспособные группы белка, модифицированные преимущественно формальдегидом, и связанный с ним синтетический иммуномодулятор - полиоксидоний. 2. Аллерготропин по п.1, характеризующийся тем, что он содержит аллергоид пыльцы тимофеевки, березы или полыни. 3. Способ лечения полинозов, характеризующийся тем, что пациенту вводят аллерготропин по п. 1, при этом введение препарата начинают с разведения 10-4, на курс лечения до 15 инъекций. 4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что проводят лечение полинозов, вызванных пыльцой тимофеевки, березы или полыни.Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии и аллергологии, и касается лечения аллергических заболеваний, в частности поллинозов. Известен препарат, содержащий полимерный носитель полиоксидоний. Например, комплекс белков вируса геммаглютинина и нейраминидазы, связанных с носителем-полиоксидонием, что способствует увеличению иммуногенности (1). Известно лекарственное вещество для лечения поллинозов, представляющее собой супернатант культуры аутологичных мононуклеарных клеток, стимулированных фитогемагглютинином с концентрацией белка 150-200 мкг/мл (2). Известен также способ лечения поллинозов путем эндоназального электрофореза лекарственного вещества, представляющего собой супернатант культуры аутологичных мононуклеарных клеток, стимулированных фитогемагглютинином в количестве 1-2 мл с концентрацией белка 150-200 мкг/мл (3). Однако в настоящее время для специфической иммунотерапии (СИТ) лиц, страдающих аллергией к пыльце растений, применяют водно-солевые экстракты, недостатком которых является высокое содержание балластных веществ, являющихся потенциальными аллергенами, что создает при лечении риск - получение реакций анафилактического шока. Задачей настоящего изобретения является создание высокоэффективного средства и способа лечения поллинозов с помощью комплексного препарата (аллерготропина) на основе аллергоидных форм аллергенов пыльцы растений и иммуномодулятора - полиоксидония. Аллерготропин на основе аллергоидных форм аллергенов пыльцы растений и полиоксидония обладает, в сравнении с нативным аллергеном, более выраженными иммуногенными и гипосенсибилизирующими свойствами (уровни IgG-блокирующих антител при гипосенсибилизации лабораторных животных в 3 раза выше, чем при гипосенсибилизации нативными аллергенами). Для решения поставленной задачи и достижения указанного технического результата предложена группа изобретений, объединенных общим изобретательским замыслом. Препарат аллерготропин для лечения полинозов содержит аллергоид пыльцы растений, конъюгированный с синтетическим иммуномодулятором-полиоксидонием, при этом аллергоид получен воздействием на суммарную фракцию, состоящую из главных и минорных аллергенов с М.в.=3-90 кД - соединений, включающих реакционноспособные группы белка, модифицированные преимущественно формальдегидом. Аллергоид может быть получен путем воздействия на суммарную фракцию, состоящую из главных и минорных аллергенов (с М.в=3-90 кД), альдегидами или другими соединениями, блокирующими реакционноспособные группы белка, в данном случае - формальдегидом. Аллергоид представляет собой химически модифицированный пыльцевой аллерген и имеет преимущества перед последним, т.к. при химической модификации наблюдается снижение аллергенности и риска наведения анафилактического шока. Предложен также способ лечения лиц, страдающих аллергией к пыльце растений: тимофеевке, березы, полыни, с использованием аллерготропина. Препарат аллерготропин начинают вводить пациенту с разведения 10-4 на курс лечения до 15 инъекций. Среди лечебно-профилактических мероприятий, направленных на борьбу с атопическими аллергическими заболеваниями, важнейшим этапом является специфическая гипосенсибилизирующая терапия, которая обеспечивает этиопатогенетический подход при лечении больных, страдающих пыльцевой аллергоид. Однако применение существующих коммерческих аллергенов не удовлетворяет всем требованиям клиницистов-аллергологов, так как препараты обладают выраженной аллергенной активностью и в ряде случаев стимулируют возникновение местных и общих аллергических реакций, особенно у высокочувствительных пациентов. Подобные осложнения приводят обычно к тому, что курс предсезонной специфической иммунотерапии (СИТ) становится более продолжительным. Возникают препятствия для достижения оптимальной конечной дозы до начала сезона цветения аллергенных растений, что существенно отражается на эффективности проводимого лечения у пациентов, чувствительных к пыльце растений. Для устранения указанных недостатков водно-солевые экстракты пыльцы растений химически модифицировали формальдегидом (4, 5), глютаральдегидом (6, 7), мочевиной (8), полиэтиленгликолем (9, 10). Обработка аллергена формальдегидом способствует присоединению аминокислот, входящих в состав аллергена, друг к другу. Такой процесс конденсации молекул белка с низкомолекулярными соединениями, обусловливающий увеличение молекулярной массы, изучался Райкисом Б.И. и Ворониным Н.И., 1987 (11). Увеличение молекулярной массы аллергоида обусловливает адъювантное их действие на организм. Присутствие в инкубационной среде с формальдегидом лизина и аргинина в некоторых случаях повышает иммуногенность аллергоида. Некоторые авторы считают, что необходимо использовать в лечебном препарате как можно больший комплекс компонентов пыльцы с аллергенной активностью, способных вызывать сенсибилизацию больных. Здесь следует заметить, что вне зависимости от степени очистки исходного аллергена удается достичь резкого снижения аллергенности и сохранения иммуногенности в аллергоидных формах аллергена. Не исключено, что некоторые белковые соединения, являясь более лабильными, чем главные аллергены, инактивируются в процессе формалинизации. Гомоцитотропные антитела чувствительны к действию 2-меркаптоэтанола, наблюдается их значительное снижение. Гомоцитотропные антитела на аллергоид у кроликов появляются в более поздние сроки, в сравнении с аллергеном. Различия фракционного состава аллергоида и исходного аллергена, определяемые в гель-фильтрации и электрофорезе, объясняются, по-видимому, влиянием формальдегида на диализованный экстракт и развитием процесса конденсации, "сшивающего" высоко- и низкомолекулярные компоненты исходного аллергена метиленовыми мостиками. Есть основания полагать, что низкомолекулярные компоненты исходного аллергена не являются балластом и необходимо обеспечить их сохранность в аллергоиде. В основе изготовления аллергоида лежит взаимодействие реакционноспособных альдегидных групп с аминогруппами аллергена. Формалинизированный аллерген содержит смесь компонентов с различными молекулярными массами, в основном димеров и тримеров, что происходит за счет присоединения к молекуле аллергена относительно низкомолекулярных азотистых соединений и обусловлено процессом полимеризации. Превращение аллергена в аллергоид путем химической модификации в присутствии формальдегида, приводящее к взаимодействию высоко- и низкомолекулярных компонентов, способствует сохранению свойств аллергоида индуцировать синтез антител. Это действие усиливается и за счет жесткой, стабильной структуры молекулы аллергоида, устойчивой к влиянию денатурирующих агентов в отличии от исходного аллергена, а также способствует пролонгированию действия аллергоида, так как разрушение его в организме больного будет происходить медленнее. Н.А.Иллютович (1983) наблюдала, что содержание специфических IgG-антител у больных, лечившихся аллергоидом, в 1,7 раза превышало уровень "блокирующих" антител у лиц, получавших аллерген (12). Выявлена прямая зависимость между величинами конечных доз и содержанием "блокирующих" антител у больных, леченных аллергеном. Снижение аллергенности в полимеризованных аллергенах связано, с одной стороны, с уменьшением числа антигенных детерминант в результате их реакции с альдегидными группами, а с другой стороны - недоступностью для реагинов остальных детерминант, скрытых внутри высокомолекулярного полимера. Положительное влияние на иммуногенность оказывает увеличение молекулярной массы и создание более жестких внутримолекулярных связей. Изготовление лечебных аллергенов высокой степени очистки является дорогостоящим и трудоемким процессом. Это усугубляется еще и тем, что при аллергических заболеваниях чаще всего наблюдается полисенсибилизация ко многим аллергенам разнообразной природы, а очистка каждого из них имеет свои особенности. Одним из бесспорных достоинств аллергоидных форм аллергена при правильно разработанной схеме СИТ является то, что он не вызывал системных реакций, таких, как генерализованная крапивница, зуд с сухостью в горле, назальные симптомы с астмой и без нее. При проведении СИТ аллергеном появляющиеся системные реакции устраняли антигистаминными препаратами. Аллергоиды, полученные в результате обработки аллергена глютаральдегидом имеет, на наш взгляд, ряд недостатков: препарат не стабилен, в течение 6 месяцев продолжается полимеризация и деполимеризация. Неизвестен путь утилизации глютаральдегида в организме человека. Реакция полимеризации не контролируется, невозможен направленный синтез. Одним из этапов разработки препаратов для терапии пыльцевой аллергии (аллергии к пыльце тимофеевки, березы и др. растений) явилось создание аллерготропинов на основе аллергоидов пыльцы указанных растений, связанных с высокомолекулярным иммуномодулятором полиоксидонием, т.е. препаратов с выраженными иммуногенными свойствами, но обладающих низкой аллергенной активностью. При разработке указанных препаратов были приняты во внимание преимущества составляющих его компонентов, каждый из которых используется в лечебной практике: аллергоида и полиоксидония. Полиоксидоний - отечественный препарат с широким спектором фармакологического действия, не имеющий аналогов в мире как по структуре, так и по свойствам [1]. Препарат применяется как иммуномодулятор, детоксикант, иммуностимулирующий и пролонгирующий носитель фармакологически активных соединений. Полиоксидоний (ПО) разрешен к применению с 1996 года, рег.номер 96/302/9, ФС 42-3906-00. Трехлетний опыт применения ПО показал его высокую клиническую эффективность в комплексном лечении практически всех вторичных иммунодефицитных состояний. ПО относится к классу водорастворимых производных гетероцепных алифатических полиаминов. ПО обладает широким спектром иммунофармакологических свойств, принципиально важных для создания на его основе вакцин, высокой биодоступностью, способностью выведения из организма, безопасностью применения. ПО в широком диапазоне доз активирует макрофагальное звено, гуморальный иммунный ответ, обладает антиинфекционной и противоопухолевой активностью, повышает резистентность клеточных мембран к цитотоксическому действию и снижает токсичность лекарственных препаратов при совместном введении. При создании вакцинирующих и лечебных препаратов нового поколения именно высокомолекулярный иммуностимулятор-носитель антигенов и аллергоидов ПО обеспечивает большую стабильность антигенов, усиление иммуногенности при снижении прививочной дозы антигенов, более эффективное формирование иммунологической памяти к антигенам и повышение профилактической эффективности вакцины, а также повышенную безопасность вакцины. Модификация антигенов различной природы высокомолекулярным иммуностимуляторам ПО позволяет усилить иммуногенную активность. Присоединение ПО к аллергоидам приводит к снижению аллергенной активности, повышению безопасности препарата и уменьшению риска возникновения осложнений при введении их в сенсибилизированный организм. Связывание аллергоидов с ПО дает возможность значительно усилить иммунный ответ, стимулировать высокий уровень выработки аллергенспецифических IgG-антител, обеспечивающих защиту больного поллинозом при попадании аллергенсодержащей пыльцы в его организм. При разработке нового поколения аллерготропинов выбор полиоксидония в качестве высокомолекулярного иммуностимулирующего носителя антигенов был обусловлен полученным ранее положительным опытом. Наиболее перспективными направлениями в области дальнейших разработок модифицированных форм аллергенов мы считаем аллерготропины: конъюгированные формы аллергоида и иммуностимулятора. В настоящее время разработан и получен аллерготропин, созданный на основе аллергоидов из пыльцы тимофеевки, березы и полыни и полиионного носителя - синтетического высокомолекулярного иммуностимулятора - полиоксидония. Пример 1. Аллерготропин из пыльцы тимофеевки, названный "Тимпол", представляет собой аллергоид пыльцы тимофеевки, приготовленный из очищенного аллергенспецифического, лиофильно высушенного экстракта пыльцы, связанный с синтетическим высокомолекулярным иммуномодулятором полиоксидонием (сополимер N-окиси 1,4-этиленпиперазина и (N-карбоксиэтил)1,4-этиленпиперазиний бромида). Это голубоватого цвета порошок, содержащий конъюгат аллергоидной формы главных и минорных пыльцевых аллергенов (с М.в. от 3 до 90 кД) и полиоксидония. Аллерготропин жидкий (для инъекций), получен при растворении сухого препарата в 1 мл стандартной разводящей жидкости для аллергена, содержит 1000![аллерготропин для лечения полинозов и способ лечения полинозов, патент № 2205661](/images/patents/265/2205002/177.gif)
![аллерготропин для лечения полинозов и способ лечения полинозов, патент № 2205661](/images/patents/265/2205002/177.gif)
![аллерготропин для лечения полинозов и способ лечения полинозов, патент № 2205661](/images/patents/265/2205002/177.gif)
![аллерготропин для лечения полинозов и способ лечения полинозов, патент № 2205661](/images/patents/265/2205002/177.gif)
![аллерготропин для лечения полинозов и способ лечения полинозов, патент № 2205661](/images/patents/265/2205002/177.gif)
![аллерготропин для лечения полинозов и способ лечения полинозов, патент № 2205661](/images/patents/265/2205002/177.gif)
1. Патент RU 1580617, 1997, МПК А 61 К 39/145. 2. Патент RU 2139742, 1999 г., А 61 К 35/14. 3. Патент RU 2139742, 1999 г., А 61 К 35/14. 4. Carter E.B., Detoxified pollen extract., U.S.A., 1935, Pat. 20198088. 5. Marsh D. G. , Lichtenstein L.M., Studies on allergoid., J. Allergy, 1970, v.45, n2, p. l25. 6. Patterson R., Suszko I.M., McIntire F.C., Polimerised Ragweed antigen E.I. Preparation and immunologic studies., J. Immunol., 1973 a, v. 110, n.5, p. l402. 7. Patterson R., Suszko I.M., Pruzansky J.J. et al., Polimerised radweed antigen E. II. In vivo elimination studies and reactivity with antibody systems. J. Immunol., 1973 b, v. 110, n.5, p. 1413. 8. King Т. P., Norman P.S., Tao N., Chemical modification of the major allergen of ragweed pollen antigen E., Immunochemistry, 1974, v. 11, p. 83. 9. Lee W.J., Sehon A.H., Suppression of reaginic antibodies with modified allergens. Reduction in allergencity of protein allergens by conjugation to polyethylene glycol. Int. Arch. Allerg. Appl. Immunol., 1978, v. 6, n. 2, p.159. 10. Lee W. J., Sehon A.H., Suppression of reaginic antibodies with modifided allergtns. Abrogation of reaginic antibodies with allergens conjugated to polyethylen glycol. Int. Arch. Allergy appl. Immunol., 1978, v.56, n. 3, p. 193. 11. Райкис Б.Н., Воронкин Н.И. "Лечебные аллергены". Л., Мед., 1987, 155 ст. 12. Иллютович Н.А. Биологические свойства аллергоида из пыльцы амброзии. Канд. дисс. 1983 год.
Класс A61K39/36 из пыльцы растений