способ получения трансплантатов для заполнения костных дефектов при хирургическом лечении воспалительных заболеваний пародонта
Классы МПК: | A61F2/28 кости A61K6/00 Стоматологические препараты A61K35/42 легкие A61K33/42 фосфор; его соединения A61K38/39 пептиды соединительной ткани, например коллаген, эластин, ламинин, фибронектин, витронектин, холодный нерастворимый глобулин (CIG) C12N5/08 клетки или ткани человека |
Автор(ы): | Глинских Н.П., Новикова И.А., Ронь Г.И., Устьянцев И.В. |
Патентообладатель(и): | Глинских Нина Поликарповна, Новикова Ирина Андреевна |
Приоритеты: |
подача заявки:
2001-12-07 публикация патента:
20.08.2003 |
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии. Сущность способа: остеопластический материал Гапкол или Коллапан замачивают на 24 ч в растворе антисептика хлоргексидина глюконата или метронидазола, после чего раствор антисептика сливают, остеопластический материал замачивают на 5 ч в среде ИГЛА, отмывают стерильной средой ИГЛА три раза по 10 мин каждый раз, затем отмытый остеопластический материал помещают в стерильный сосуд, куда вносят взвесь клеток фибробластов из расчета 60 х 103 - 80 х 103 кл/мл среды роста. В качестве культуры фибробластов используют штамм диплоидных клеток легкого эмбриона человека ЛЭЧ-4(81), в качестве среды роста используют среду ИГЛА-МЕМ с добавлением 10% сыворотки крови плодов крупного рогатого скота из расчета 10% - сыворотка, 90% - ИГЛА-МЕМ, рН среды роста 7,2-7,4. Подготовленную взвесь клеток с остеопластическим материалом помещают в термостат и выдерживают при температуре 35-37oС 48-72 ч. Трансплантат хранят при температуре 4-6oС в течение 3-4 суток. Способ обеспечивает получение трансплантата, обладающего высокой эффективностью.
Формула изобретения
Способ получения трансплантатов для заполнения костных дефектов при хирургическом лечении воспалительных заболеваний пародонта, включающий субкультивирование фибробластов человека на остеопластическом подсадочном материале, отличающийся тем, что остеопластический материал Гапкол или Коллапан замачивают на 24 ч в растворе антисептика хлоргексидина глюконата или метронидазола, после чего раствор антисептика сливают, остеопластический материал замачивают на 5 ч в среде ИГЛА, отмывают стерильной средой ИГЛА три раза по 10 мин каждый раз, затем отмытый остеопластический материал помещают в стерильный сосуд, куда затем вносят взвесь клеток фибробластов из расчета 60 х 103 - 80 х 103 клеток на 1 мл среды роста, в качестве культуры фибробластов используют штамм диплоидных клеток легкого эмбриона человека ЛЭЧ-4(81), в качестве среды роста используют среду ИГЛА-МЕМ с добавлением 10% сыворотки крови плодов крупного рогатого скота из расчета 10% - сыворотка, 90% - ИГЛА-МЕМ, рН среды роста 7,2-7,4, подготовленную взвесь клеток с остеопластическим материалом помещают в термостат, где выдерживают при температуре 35-37oС 48-72 ч, подготовленный трансплантат хранят при температуре 4-6oС в течение 3-4 суток.Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к способам изготовления трансплантатов с использованием культуры фибробластов человека и может быть использовано в стоматологии для заполнения дефектов при хирургическом лечении воспалительных заболеваний пародонта. Проблема заболеваний пародонта в настоящее время приобрела особое значение, так как по данным ВОЗ пародонтитом страдает более 95% населения старше 40 лет. Новое направление в хирургической пародонтологии связано с использованием культур клеток гомологического костного мозга, аутологичной тромбоцитарной массы и искусственно синтезированных факторов роста, влияющих на пролиферацию и дифференцировку клеток пародонта. К числу наиболее эффективных тканевых трансплантатов, используемых при хирургическом лечении заболеваний пародонта, относятся препараты фирмы "Geistlich" (Bio-Oss, Bio-Gide, Resor Pin). Перед применением гранулы Bio-Oss смачивают физиологическим раствором, либо кровью из раневой поверхности, либо взвесью фибробластов человека (ж. "Новое в стоматологии", 8, 2001, с.72-77). Известно применение культуры аллофибробластов в комплексном лечении заболеваний пародонта. Культура аллофибробластов заселяется на твердую мозговую оболочку. На первом этапе получают культуру фибробластов человека путем фрагментации и ферментной обработки дермы плодов человека. После получения первичной культуры фибробластов изготавливают трансплантаты путем культивирования клеток фибробластов на подсадочных материалах ("Наука практике". Материалы научной сессии ЦНИИС. М., 1998, с.164-166) прототип. Исследована активность фибробластов, культивируемых in vitro с различными видами подсадочных материалов (ж. "Цитология"), 9, т.43. 2001 г., с. 854). Подсадочный материал (рассмотрены такие материалы: Гапкол, Гапкол Л, Гапкол ЛМ, Колапол КП-2, Колапол КП-2Л, Гидрокиапол ГАП-85д, Коллапан АН-Г, Коллапан Ан-Д, Коллапан Ан-К, Коллапан Ан-Л, Коллапан Ан). Материал помещают в стерильный пенициллиновый флакон, туда же вносят суспензию культивируемых фибробластов человека М-22 в концентрации 140![способ получения трансплантатов для заполнения костных дефектов при хирургическом лечении воспалительных заболеваний пародонта, патент № 2210341](/images/patents/260/2210004/8226.gif)
![способ получения трансплантатов для заполнения костных дефектов при хирургическом лечении воспалительных заболеваний пародонта, патент № 2210341](/images/patents/260/2210004/8226.gif)
Класс A61K6/00 Стоматологические препараты
Класс A61K33/42 фосфор; его соединения
Класс A61K38/39 пептиды соединительной ткани, например коллаген, эластин, ламинин, фибронектин, витронектин, холодный нерастворимый глобулин (CIG)
Класс C12N5/08 клетки или ткани человека