применение производных фумаровой кислоты в трансплантационной медицине

Формула изобретения

1. Фармацевтическая композиция для лечения, смягчения или подавления отторжения трансплантата при трансплантации органов и клеток, отличающаяся тем, что в качестве биологически активного вещества содержит один или несколько моно-(C₁-C₅)-алкиловых эфиров фумаровой кислоты в форме соли с одно- или двухвалентными катионами или в форме свободной кислоты индивидуально или в сочетании с ди-(C₁-C₅) -алкилфумаратом, причем общая масса биологически активных веществ составляет 10-300 мг, и в случае необходимости обычные фармацевтически приемлемые вещества и носители.

2. Фармацевтическая композиция по п. 1, отличающаяся тем, что содержит в качестве биологически активного вещества одну или несколько солей одно- или двухвалентных катионов моноалкиловых эфиров фумаровой кислоты общей формулы



в случае необходимости в смеси с диалкилфумаратом формулы



причем А означает двухвалентный катион из ряда Са, Мg, Zn или Fe или одновалентный катион из ряда Li, Na или К;

n = 1 или 2 в зависимости от рода катиона;

и/или один или несколько алкилгидрофумаратов общей формулы



в случае необходимости, в смеси с диалкилфумаратом формулы



для лечения реакции "трансплантат против хозяина".

3. Фармацевтическая композиция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что в качестве биологически активного вещества содержит кальциевую соль монометилового или моноэтилового эфира фумаровой кислоты.

4. Фармацевтическая композиция по п. 1 или 2, отличающаяся тем, что в качестве биологически активного вещества содержит одну или несколько солей кальция, магния и/или цинка моноэтилового эфира фумаровой кислоты в смеси с диметилфумаратом.

5. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что применяется орально в виде таблеток, микротаблеток, пилюль или гранулятов в капсулах или в виде капсул.

6. Фармацевтическая композиция по п. 5, отличающаяся тем, что содержит кальциевую соль моноалкилового эфира фумаровой кислоты в количестве 10-300 мг.

7. Фармацевтическая композиция по п. 5, отличающаяся тем, что содержит 10-290 мас. ч. кальциевой соли моноалкилового эфира фумаровой кислоты и 290-10 мас. ч. диметилфумарата, причем общая масса биологически активных веществ составляет 20-300 мг.

8. Фармацевтическая композиция по п. 5, отличающаяся тем, что содержит 10-250 мас. ч кальциевой соли моноалкилового эфира фумаровой кислоты, 1-50 мас. ч. диметилфумарата и 1-50 мас. ч. цинковой соли моноалкилового эфира фумаровой кислоты, причем общая масса биологически активных веществ составляет 20-300 мг.

9. Фармацевтическая композиция по п. 5, отличающаяся тем, что содержит 10-250 мас. ч кальциевой соли моноалкилового эфира фумаровой кислоты, 250-10 мас. ч. диметилфумарата, 1-50 мас. ч. магниевой соли моноалкилового эфира фумаровой кислоты и 1-50 мас. ч. цинковой соли моноалкилового эфира фумаровой кислоты, причем общая масса биологически активных веществ составляет 30-300 мг.

10. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-9, отличающаяся тем, что содержит сочетание с одним или несколькими препаратами трансплантационной медицины.

11. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 5-10, отличающаяся тем, что размер или средний диаметр пилюль или микротаблеток находится в пределах 300-2000 мкм, в особенности в пределах 500-1500 мкм или 1000 мкм.

12. Фармацевтическая композиция по п. 5, отличающаяся тем, что лекарственное средство выполнено в форме мягких или твердых желатиновых капсул.

13. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-12, отличающаяся тем, что разовые дозы лекарственного средства снабжены покрытием, устойчивым к действию желудочного сока.

14. Фармацевтическая композиция по любому из пп. 1-13, отличающаяся тем, что получена в форме препаратов для кожного и чрескожного введения, препаратов для парентерального и для ректального введения.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к применению определенных моноалкиловых эфиров фумаровой кислоты либо в форме их солей, либо в виде свободной кислоты, индивидуально или в сочетании с диалкилфумаратом, для получения фармацевтических композиций в целях использования в трансплантационной медицине. В особенности изобретение относится к применению фармацевтических композиций, содержащих эти алкиловые эфиры фумаровой кислоты, для терапии, ослабления или подавления реакций отторжения реципиентом трансплантата, то есть реакций "трансплантат против хозяина".

Трансплантации представляют собой пересадки тканей или органов, то есть переносы тканей, как роговица, кожа, кости (костные трансплантаты), сосуды или фасции; органов, как почка, сердце, печень, легкое, поджелудочная железа или кишка; или также отдельных клеток, как клетки островкового аппарата поджелудочной железы, альфа-клетки и клетки печени, среди которых самое важное значение придается почке как трансплантируемому органу.

В зависимости от степени родства донора и реципиента различают аутотрансплантацию (перенос в другую часть тела одного и того же индивида), изотрансплантацию (перенос другому, генетически одинаковому индивиду) и аллогенную трансплантацию (перенос другому индивиду такого же рода). В зависимости от места происхождения и вида трансплантации различают, далее, гомотопную трансплантацию (перенос в то же самое место) и гетеротопную трансплантацию (перенос в другое место). В современной медицине указанным трансплантациям отводится значительная роль.

Проблемами в трансплантационной медицине является прежде всего отторжение трансплантата (по-английски: graft-rejection) после трансплантации ткани, органа или клеток за счет иммунных защитных реакций реципиента. Отторжение трансплантата также называют реакцией "трансплантат против хозяина". Иммунологическая защитная реакция организма против чужеродного протеина часто приводит к отторжению или лизису трансплантатов. Благодаря использованию современных иммуносупрессоров, из которых в качестве важнейших представителей нужно назвать циклоспорины, в особенности циклоспорин А, в последние годы стало возможным значительно улучшать результаты трансплантации. В настоящее время процент выживаемости за 1 год в случае трансплантаций печени составляет примерно 60%, в случае трансплантаций сердца примерно 80% и в случае трансплантаций почек свыше 90%.

В случае реакций "трансплантат против хозяина" можно распознавать различные стадии, а именно, в зависимости от степени различия между реципиентом и донором реакция протекает с различной скоростью, так что говорят об острой, подострой или хронической реакции. Остропротекающая реакция отторжения происходит с необратимой, не поддающейся влиянию лекарственных средств потерей (омертвение) трансплантата вследствие артериита, или соответственно, артериолита, в течение 48 часов. Подострая реакция отторжения проявляется в виде криза отторжения, начиная с 12-го дня вплоть до 4-го месяца с обратимыми нарушениями функции вследствие вазопатии трансплантата. Наконец, в качестве хронической реакции отторжения называют длящуюся от нескольких недель до нескольких лет, едва поддающуюся влиянию лекарственных средств потерю функции трансплантата вследствие сосудистых изменений, или соответственно, облитерирующей артериопатии.

С целью избежания этих реакций отторжения, то есть реакции "трансплантат против хозяина", в трансплантационной медицине используют в основном иммуносупрессию, следовательно, ослабление нормального иммунного ответа. Для этого часто применяют антилимфоцитарные сыворотки в сочетании с кортикостероидами и так называемыми антиметаболитами, или соответственно, пуриновыми аналогами, как 6-меркаптопурин и тиогуанин, которые нарушают синтез нуклеиновых кислот и протеинов и тем самым предотвращают деление клеток и пролиферацию. Это приводит к подавлению продуцирования антител и клеточного иммунного ответа. В случае используемых для терапии иммуносупрессоров речь идет о веществах, которые либо специфически, либо неспецифически подавляют, или ослабляют, иммунную реакцию в организме. Неспецифическими иммуносупрессорами являются цитостатики, как, например, алкилантиен, или антиметаболиты. Известны также вещества, которые по крайней мере частично вызывают специфическую иммуносупрессию, как кортикостероиды, антисыворотки, антитела FK-506, такролимус, микофенолятмофетил и главным образом циклоспорины, как циклоспорин А.

Из патента RU 2094436 С1 известна фармацевтическая композиция, используемая для подавления отторжения трансплантата при трансплантациях органов и клеток, включающая иммуносупрессоры. При использовании иммуносупрессоров существует опасность в ослаблении присущей организму защиты против инфекционных заболеваний и повышенном риске злокачественных заболеваний.

Задача изобретения поэтому состоит в получении фармацевтической композиции для применения в трансплантационной медицине, которую можно использовать для терапии, в особенности для подавления, ослабления и/или смягчения реакций "трансплантат против хозяина", однако, не обладающей вышеуказанным недостатком.

Решение поставленной задачи достигается применением определенных моноалкиловых эфиров фумаровой кислоты в виде солей с одно- или двухвалентными катионами или в виде свободной кислоты, индивидуально или в сочетании с диалкилфумаратом для получения фармацевтических композиций для применения в трансплантационной медицине. Предлагаемые согласно изобретению композиции по существу не содержат свободной фумаровой кислоты (свободны от фумаровой кислоты).

Известно, что фармацевтические композиции, которые после введения при их биологическом распаде входят в цикл лимонной кислоты или относятся к нему, преимущественно в высокой дозировке получают все большее терапевтическое значение, так как с их помощью можно облегчать или лечить криптогенетически обусловленные заболевания.

Так, фумаровая кислота препятствует росту асцитной опухоли Эрлиха у мышей, уменьшает токсические эффекты митоицина С и афлатоксина (К. Kuroda, M. Akao, Biochem. Pharmacol., 29, 2839-2844 [1980]/Gann., 72, 777-782 [1981], Cancer Res. , 36, 1900-1903 [1976]) и обладает антипсориатическим, а также антимикробным действием (C.N. Huhtsnen, J. Food Sci., 48, 1574 [1983]/M.N. Islam, патент США 4346118 от 24 августа 1982 г. /С.А. 97, 161317b [1982]).

Высокие вводимые дозы фумаровой кислоты или ее известных производных, как дигидроксифумаровая кислота, фумарамид и фумаронитрил, при парентеральном, кожном, в особенности, при пероральном введении обладают недопустимыми побочными действиями и высокой токсичностью (Р. Holland, R.G. White, Brit. Dernatol., 85, 259-263 [1971]/M. Hagecorn, K.W. Kalkoff, G. Kiefer, D. Baron, J. Hug, J. Petres, Arch. Der. Res., 254, 67-73 [1975]), что до сих пор в большинстве случаев вынуждены были отказываться от такой терапии.

В заявке на Европейский патент 188749 уже описаны производные фумаровой кислоты и содержащие их фармацевтические композиции для лечения псориаза. Из заявки ДЕ-А-2530372 известны фармацевтические композиции для лечения псориаза, которые содержат смесь фумаровой кислоты и других производных фумаровой кислоты. Доля свободной фумаровой кислоты в этих лекарственных средствах является обязательной.

В заявке ДЕ-А-2621214 описываются лекарственные средства для лечения псориаза, которые в качестве биологически активного вещества содержат моноэтиловый эфир фумаровой кислоты и его неорганические соли. Из публикации "Hautarzt (1987) 279-285" известно применение солей моноэтилового эфира фумаровой кислоты. Из Европейского патента 0312697-В1 известны фармацевтические композиции для лечения псориаза, псориатического артрита, нейродермита и регионального энтерита (болезни Крона), которые содержат смесь солей моноалкилового эфира фумаровой кислоты и диэфира фумаровой кислоты.

В настоящее время неожиданно показано, что моно-(C₁-С₅)-алкиловые эфиры фумаровой кислоты в виде их солей с одно- или двухвалентными катионами, предпочтительно в виде солей кальция, магния, цинка или железа, солей лития, натрия или калия, или в виде свободной кислоты, индивидуально или в сочетании с ди-[(C₁-С₅)-алкил] фумаратом, можно предпочтительно использовать для получения фармацевтической композиции для применения в трансплантационной медицине. Композиции, содержащие эти моно-(C₁-C₅)-алкиловые эфиры фумаровой кислоты, неожиданно способствуют положительной модуляции иммунной системы в реакции "трансплантат против хозяина".

Предпочтительно применяют предлагаемые согласно изобретению композиции, которые содержат одно или несколько соединений из группы солей кальция, магния, цинка и железа, или солей лития, натрия или калия моноалкиловых эфиров фумаровой кислоты общей формулы:



в случае необходимости, в смеси с диалкилфумаратом формулы:



в случае необходимости, наряду с обычными фармацевтическими вспомогательными веществами и носителями,

причем А означает двухвалентный катион из ряда Са, Mg, Zn или Fe, или одновалентный катион из разряда Li, Na или К, и n означает 1 или 2 в зависимости от рода катиона.

Точно также можно использовать фармацевтические композиции, которые содержат один или несколько алкилгидрофумаратов общей формулы:



В случае необходимости, в смеси с диалкилфумаратом формулы:



в случае необходимости, наряду с обычными фармацевтическими вспомогательными веществами и носителями.

Предпочтительным является применение, в случае которого биологически активные вещества вводят перорально в форме таблеток, микротаблеток, пилюль (шариков) или гранулятов в капсулах или (мягких или твердых желатиновых) капсул.

Предпочтительные композиции согласно изобретению содержат кальциевую соль монометилового или моноэтилового эфира фумаровой кислоты или кальциевую соль монометилового, соответственно, моноэтилового эфира фумаровой кислоты в смеси с диметилфумаратом.

Для введения особенно пригодны композиции, содержащие кальциевую соль моноалкилового эфира фумаровой кислоты, соответственно, моноалкиловый эфир фумаровой кислоты в форме свободной кислоты, в количестве 10-300 мг, причем общая масса биологически активных веществ составляет 10-300 мг.

Другие предпочтительные пероральные формы введения содержат 10-290 мас. ч. кальциевой соли моноалкилового эфира фумаровой кислоты и 290-10 мас.ч. диметилфумарата, а также 1-50 мас. ч. цинковой соли моноалкилового эфира фумаровой кислоты или 1-250 мас.ч. диметилфумарата, 1-50 мас.ч. магниевой соли моноалкилового или, соответственно, монометилового, эфира фумаровой кислоты, причем в каждом случае общая масса биологически активных веществ составляет 30-300 мг.

Предпочтительные композиции согласно изобретению также содержат метилгидрофумарат в количестве 10-300 мг.

Кроме того, возможно применение, при котором лекарственные средства используют в форме препаратов для кожного и чрескожного введения, препаратов для парентерального введения и препаратов для ректального введения.

Производные фумаровой кислоты, содержащиеся в предлагаемых согласно изобретению композициях, получают, например, тем, что соединение следующей формулы:



а) известным образом конденсируют с двумя молями алканола (ROH) с получением сложного диэфира и затем, контролируя, гидролизуют до образования сложного моноэфира; или

б) обычным образом конденсируют с 1 молем соответствующего алканола и полученный монохлорангидрид кислоты гидролизуют до образования кислоты; или

в) фумаровую кислоту известным образом непосредственно конденсируют с двумя молями алканола (ROH) с получением соответствующего сложного диэфира и затем, контролируя, гидролизуют до образования сложного моноэфира; или

г) малеиновую кислоту или малеиновый ангидрид известным образом непосредственно конденсируют с 1-2 молями соответствующего алканола (ROH) с получением сложного моно- или диэфира и затем каталитически изомеризуют до соответствующего производного фумаровой кислоты.

Соли моноалкиловых эфиров фумаровой кислоты можно получать тем, что соединение общей формулы:



в которой R означает (C₁-С₅)-алкил, вводят во взаимодействие с эквивалентным молярным количеством гидроксида или оксида натрия, калия, железа, кальция, магния или цинка в толуоле и удаляют выделяющуюся во время реакции воду.

Особенно предпочтительно используют лекарственные средства со следующими биологически активными веществами в указанных дозировках и количественных соотношениях:

1) фармацевтическая композиция для перорального введения в форме таблеток, микротаблеток или пилюль в капсулах или капсул (с лекарством), отличающаяся тем, что она содержит кальциевую соль монометилового эфира фумаровой кислоты в количестве 10-300 мг, причем общая масса биологически активных веществ составляет 10-300 мг; или в виде

2) фармацевтической композиции для перорального введения в форме таблеток, микротаблеток или пилюль в капсулах или капсул, отличающейся тем, что она содержит 10-290 мас.ч. кальциевой соли монометилового эфира фумаровой кислоты и 290-10 мас. ч. диметилфумарата, причем общая масса биологически активных веществ составляет 20-300 мг;

3) фармацевтическая композиция для перорального введения в форме таблеток, микротаблеток или пилюль в капсулах или капсул, отличающаяся тем, что она содержит, соответственно, 10-250 мас.ч. кальциевой соли монометилового эфира фумаровой кислоты, 1-50 мас.ч. диметилфумарата и 1-50 мас.ч. цинковой соли монометилового эфира фумаровой кислоты, причем общая масса биологически активных веществ составляет 20-300 мг; или

4) фармацевтическая композиция для перорального введения в форме таблеток или капсул, отличающаяся тем, что она содержит 10-250 мас.ч. кальциевой соли монометилового эфира фумаровой кислоты, 250-10 мас.ч. диметилфумарата, 1-50 мас. ч. магниевой соли монометилового эфира фумаровой кислоты и 1-50 мас. ч. цинковой соли монометилового эфира фумаровой кислоты, причем общая масса биологически активных веществ составляет 30-300 мг.

Далее, предпочтительны следующие лекарственные формы, дозировки и количественные соотношения:

5) фармацевтическая композиция для перорального введения, отличающаяся тем, что она содержит одно или несколько соединений из группы свободных кислот моноалкиловых эфиров фумаровой кислоты общей формулы:



в случае необходимости, в смеси с диалкилфумаратом формулы:



и носителями, причем эти композиции свободны от фумаровой кислоты в свободной форме;

6) фармацевтическая композиция для перорального введения в форме таблеток, микротаблеток или пилюль в капсулах или капсул (с лекарством), отличающаяся тем, что она содержит алкилгидрофумарат, предпочтительно метилгидрофумарат, в количестве 10-300 мг, причем общая масса биологически активных веществ составляет 10-300 мг; или

7) фармацевтическая композиция для перорального введения в форме таблеток, микротаблеток или пилюль в капсулах или капсул (с лекарством), отличающаяся тем, что она содержит 10-290 мас.ч. алкилгидрофумарата, предпочтительно метилгидрофумарата, и 290-10 мас.ч. диалкилфумарата, причем общая масса биологически активных веществ составляет 20-300 мг.

Пероральные композиции могут быть снабжены устойчивым к действию желудочного сока покрытием. Композиции могут находиться в виде микротаблеток, пилюль или гранулятов, которые, в случае необходимости, содержатся в капсулах. Капсулы могут представлять собой мягкие или твердые желатиновые капсулы.

Согласно предпочтительной форме, величина или средний диаметр пилюль или микротаблеток находится в пределах от 300 до 2000 мкм, в особенности в области от 500 мкм до 1000 мкм.

Согласно изобретению, лечение с помощью моноалкиловых эфиров фумаровой кислоты или их солей можно проводить также в сочетании с одним или несколькими препаратами обычно применяемой при трансплантации органов тройной лекарственной терапии или также с циклоспорином А для терапии, облегчения и подавления реакций "трансплантат против хозяина".

Для этого вводимые препараты могут содержать сочетание биологически активных веществ в известных дозировках, соответственно, количествах. Точно также комбинированное лечение может состоять в параллельном введении отдельных препаратов таким же или другим путем применения. В случае необходимости, дозу биологически активного вещества, содержащегося наряду с вводимой согласно изобретению дозой производного фумаровой кислоты, выгодным образом можно снижать.

Другая форма предлагаемого согласно изобретению применения состоит в том, что лекарственную терапию с помощью иммуносупрессоров, как циклоспорин, последовательно чередуют с применением вышеуказанных производных фумаровой кислоты. Это означает, что после лечения циклоспорином в течение от одной до нескольких недель можно осуществлять введение в течение от одной до нескольких недель производных фумаровой кислоты согласно вышеуказанному. Благодаря этому можно снижать дозировку циклоспорина А, вследствие чего можно в значительной степени снизить частоту побочных явлений при длительном лечении.

Для пояснения применения согласно изобретению ниже приводятся различные примеры получения предпочтительных лекарственных средств.

Примеры получения

Пример 1

Получение таблеток с устойчивым к действию желудочного сока покрытием, содержащих 100,0 мг моноэтилфумарата кальция, что соответствует 71 мг фумаровой кислоты.

10,000 кг Моноэтилфумарата кальция размельчают, интенсивно перемешивают и при соответствующих мерах предосторожности (дыхательная маска, перчатки, защитная одежда и т. д.) гомогенизируют с помощью сита 800. Затем готовят смесь вспомогательных веществ следующего состава: 21,000 кг производного крахмала (STA-RX 1500), 2,000 кг микрокристаллической целлюлозы (Avicel PH 101), 0,600 кг поливинилпирролидона (PVP, Kollidon 25), 4,000 кг Primogel, 0,300 кг коллоидальной кремневой кислоты (Aerosil).

Всю порошкообразную смесь смешивают с биологически активным веществом, перемешивают, гомогенизируют с помощью сита 200 и при использовании 2%-ного водного раствора поливинилпирролидона (PVP, Kollidon 25) обычным образом перерабатывают в гранулят связующего и в высушенном состоянии смешивают с внешней фазой. Она состоит из 2,000 кг так называемого FST-комплекса, содержащего 80% талька, 10% кремневой кислоты и 10% стеарата магния.

Затем обычным образом прессуют с получением выпуклых таблеток массой 400 мг и диаметром 10,0 мм. Вместо этих классических способов таблетирования также можно использовать другие способы получения таблеток, как прямое таблетирование, а также получение твердых дисперсий по способу плавления и способу распылительной сушки.

Устойчивость к действию желудочного сока

Раствор 2,250 кг гидроксипропилметилфталатцеллюлозы (FPMCP, Pharmacoat HP 50) в смеси растворителей из 2,50 л деминерализованной воды, 13,00 л ацетона (Ph. Helv. VII) и 13,00 л этанола (94 мас.%-ного) смешивают с раствором 0,240 кг касторового масла (Ph. Eur. II). Раствор в дражировочном котле обычным образом порциями наносят на ядра таблеток путем напыления или использования вакуума или наносят в соответствующем аппарате с псевдоожиженным слоем.

После соответствующего высушивания затем наносят пленочное покрытие. Оно состоит из 4,800 кг 12,5%-ного раствора Eudragit E, 0,340 кг талька (Ph. Eur. II), 0,520 кг диоксида титана Cronus RN 56, 0,210 кг фарблака ZLT-2 синего и 0,120 кг полиэтиленгликоля 6000 (Ph. Helv. VII) в смеси растворителей из 8,200 кг пропан-2-ола (Ph. Heiv. VII), 0,060 кг глицеринтриацетата (Triacetin) и 0,200 кг деминерализованной воды. После гомогенного распределения в дражировочном котле или псевдоожиженном слое высушивают и обычным образом полируют.

Пример 2

Получение устойчивых к действию желудочного сока капсул, содержащих 86,5 мг моноэтилфумарата кальция и 110,0 мг диметилфумарата, что соответствует в целом 150 мг фумаровой кислоты.

8,650 кг Моноэтилфумарата кальция и 11,000 кг диметилфумарата интенсивно перемешивают со смесью, состоящей из 15,000 кг крахмала, 6,000 кг лактозы (Ph. Helv. VII), 2,000 кг микрокристаллической целлюлозы (Avicel), 1,000 кг поливинилпирролидона (Kollidon 25) и 4,000 кг Primogel, и при соответствующих мерах предосторожности (дыхательная маска, перчатки, защитная одежда и т.д.) гомогенизируют с помощью сита 800.

Всю порошкообразную смесь при использовании 2%-ного водного раствора поливинилпирролидона (Kollidon) обычным образом перерабатывают в гранулят связующего и в высушенном состоянии и смешивают с внешней фазой. Она состоит из 0,350 кг коллоидальной кремневой кислоты (Aerosil), 0,500 кг стеарата магния и 1,500 кг талька (Ph. Helv. VII). Затем гомогенной смесью порциями по 500,0 мг заполняют соответствующие капсулы, которые затем обычным образом снабжают устойчивым к действию желудочного сока покрытием, состоящим из гидроксипропилэтилфталатцеллюлозы и касторового масла в качестве пластификатора. Вместо твердых желатиновых капсул можно заполнять также устойчивые к действию желудочного сока капсулы, состоящие из смеси ацетатфталатцеллюлозы (CAP) и гидроксипропилэтилфталатцеллюлозы (НРМСР).

Пример 3

Получение устойчивых к действию желудочного сока капсул, содержащих 203,0 мг моноэтилфумарата кальция, 5,0 мг моноэтилфумарата магния и 3,0 мг моноэтилфумарата цинка, что соответствует в целом 150 мг фумаровой кислоты.

20,300 кг Моноэтилфумарата кальция, а также 0,500 кг моноэтилфумарата магния и 0,300 кг моноэтилфумарата цинка размельчают, интенсивно перемешивают и при соответствующих мерах предосторожности (дыхательная маска, перчатки, защитная одежда и т.д.) гомогенизируют с помощью сита 800. К этой смеси биологически активных веществ примешивают гомогенную порошкообразную смесь следующего состава: 12,900 кг высушенной путем распылительной сушки лактозы, 1,000 кг коллоидальной кремневой кислоты, 2,000 кг микрокристаллической целлюлозы (Avicel), 1,000 кг стеарата магния (Ph. Helv. VII) и 2,000 кг талька (Ph. Helv. VII). Всю порошкообразную смесь еще раз гомогенизируют с помощью сита 200 и затем вносят в твердые желатиновые капсулы в количестве до 400 мг массы нетто и закрывают. Нанесение устойчивого к действию желудочного сока покрытия осуществляют как в примере 2.

Пример 4

Получение устойчивых к действию желудочного сока микротаблеток в капсулах, содержащих 87,0 мг моноэтилфумарата кальция, 120 мг диметилфумарата, 5,0 мг моноэтилфумарата магния и 3,0 мг моноэтилфумарата цинка, что соответствует в целом 164 мг фумаровой кислоты ("forte"-таблетки).

8,700 кг Моноэтилфумарата кальция, 12,000 кг диметилфумарата, 0,500 кг моноэтилфумарата магния, 0,30 кг моноэтилфумарата цинка размельчают, интенсивно перемешивают и при соответствующих мерах предосторожности (дыхательная маска, перчатки, защитная одежда и т.д.) гомогенизируют с помощью сита 800. Готовят смесь вспомогательных веществ следующего состава: 18,00 кг производного крахмала (STA-RX 1500), 0,30 кг микрокристаллической целлюлозы (Avicel PH 101), 0,75 кг поливинилнирролидона (Kollidon 120), 4,000 кг Primogel, 0,25 кг коллоидальной кремневой кислоты (Aerosil). Всю порошкообразную смесь смешивают со смесью биологически активных веществ и гомогенизируют с помощью сита 200 и при использовании 2%-ного водного раствора поливинилпирролидона (Kollidon K25) обычным образом перерабатывают в гранулят связующего и в высушенном состоянии смешивают с внешней фазой. Она состоит из 0,50 кг стеарата магния и 1,50 кг талька. Порошкообразную смесь затем обычным образом прессуют с получением выпуклых микротаблеток брутто-массой 10,0 мг и диаметром 2,0 мм. Вместо этих классических способов таблетирования также можно использовать другие способы получения таблеток, как прямое таблетирование, а также получение твердых дисперсий по способу плавления и способу распылительной сушки.

Устойчивое к действию желудочного сока покрытие можно наносить в классическом дражировочном котле путем напыления или при использовании вакуума, а также в аппаратуре с псевдоожиженным слоем. Для достижения устойчивости к действию желудочного сока порциями растворяют 2,250 кг гидроксипропилметилфталатцеллюлозы (НРМСР, Pharmacoat HP 50) в смеси следующих растворителей: 13,00 л ацетона, 13,50 л этанола (94 мас.%-ного), денатурированного с помощью 2% кетона, и 2,50 л деминерализованной воды. К готовому раствору в качестве пластификатора добавляют 0,240 кг касторового масла и обычным образом порциями наносят на ядра таблеток.

Пленочное покрытие:

По окончании высушивания затем в той же самой аппаратуре в качестве пленочного покрытия наносят суспензию следующего состава: 0,340 кг талька, 0,400 кг оксида титана (VI) Cronus RN 56, 0,324 кг красного лака Farblack L 868370, 4,800 кг 12,5%-ного (раствора) Eudragit E и 0,120 кг полиэтиленгликоля 6000 (Ph. 11 XI) в смеси растворителей следующего состава: 8,170 кг пропан-2-ола, 0,200 кг деминерализованной воды и 0,600 кг глицеринтриацетата (триацетин).

Устойчивые к действию желудочного сока микротаблетки затем вносят в разъемные твердые желатиновые капсулы в количестве до 500,0 мг массы нетто и закрывают.

Пример 5

Получение таблеток с устойчивым к действию желудочного сока покрытием, содержащих 67,0 мг монометилфумарата кальция, 30,0 мг диметилфумарата, 5,0 мг моноэтилфумарата магния и 3,0 мг моноэтилфумарата цинка, что соответствует 75 мг фумаровой кислоты ("mite"-Таблетки).

3,000 кг Диметилфумарата, 6,700 кг моноэтилфумарата кальция, 0,500 кг моноэтилфумарата магния и 0,300 кг моноэтилфумарата цинка размельчают, интенсивно перемешивают и при соответствующих мерах предосторожности (дыхательная маска, перчатки, защитная одежда и т.д.) гомогенизируют с помощью сита 800. Аналогично примеру 4, готовят смесь вспомогательных веществ следующего состава, а именно из 30,000 кг производного крахмала (STA-RX 1500), 3,000 кг микрокристаллической целлюлозы (Avicel PH 101), 0,750 кг поливинилпирролидона (PVP, Kollidon 120), 4,000 кг Primogel, 0,250 кг коллоидальной кремневой кислоты (Aerosil). Вспомогательные вещества интенсивно перемешивают со смесью биологически активных веществ и гомогенизируют с помощью сита 200. Всю смесь при использовании 2%-ного водного раствора поливинилпирролидона (PVP, Kollidon 25) обычным образом перерабатывают в гранулят связующего. К высушенному грануляту добавляют в качестве внешней фазы порошкообразную смесь из следующих вспомогательных веществ: 0,500 кг стеарата магния (Ph. Eur.) и 0,800 кг талька (Ph. Eur. II).

Гомогенную смесь гранулированного материала обычным образом прессуют с получением выпуклых ядер таблеток массой 500,0 мг и диаметром 11,5 мм. Наряду с использованием связующих также могут найти применение другие способы таблетирования, согласно примерам 1 и 4. Нанесение на ядра таблеток устойчивого к действию желудочного сока покрытия, а также пленочного покрытия осуществляют согласно примерам 1 и 4.

Предлагаемые согласно изобретению композиции предпочтительно вводят перорально в форме таблеток или капсул, причем эти твердые разовые лекарственные формы предпочтительно снабжают устойчивым к действию желудочного сока покрытием, которое после прохождения желудка в течение нескольких минут растворяется в соке тонкой кишки и высвобождает действующее начало из лекарственной формы. Для систематического введения или, соответственно, выведения необходима низкая дозировка (mite), для лечебной дозировки после стадии введения требуется более высокая дозировка (forte).

Пример 6

Получение таблеток с устойчивым к действию желудочного сока покрытием, содержащих 100,00 мг монометилфумарата кальция, что соответствует 78 мг фумаровой кислоты.

10,000 кг Монометилфумарата кальция размельчают, перемешивают и при соответствующих мерах предосторожности (дыхательная маска, перчатки, защитная одежда и т.д.) гомогенизируют с помощью сита 800. Затем готовят смесь вспомогательных веществ следующего состава: 21,000 кг производного крахмала (STA-RX 1500), 2,000 кг микрокристаллической целлюлозы (Avicel PH 101), 0,600 кг поливинилпирролидона (PVP, Kollidon 25), 4,000 кг Primogel, 0,300 кг коллоидальной кремневой кислоты (Aerosil). Всю порошкообразную смесь смешивают с биологически активным веществом, перемешивают, гомогенизируют с помощью сита 200 и при использовании 2%-ного водного раствора поливинилпирролидона (Kollidon K30) обычным образом перерабатывают в гранулят связующего и в высушенном состоянии смешивают с внешней фазой. Она состоит из 2,000 кг так называемого FST-комплекса, содержащего 80% талька, 10% кремневой кислоты и 10% стеарата магния. Затем обычным образом прессуют с получением выпуклых таблеток массой 400 мг и диаметром 10 мм. Вместо этих классических способов таблетирования также можно использовать другие способы получения таблеток, как прямое таблетирование, а также получение твердых дисперсий по способу плавления и способу распылительной сушки. Нанесение на ядра таблеток устойчивого к действию желудочного сока покрытия, а также пленочного покрытия, осуществляют как описано в примерах 1 и 4.

Пример 7

Получение таблеток с устойчивым к действию желудочного сока покрытием, содержащих 50,0 мг монометилфумарата кальция, 50,0 мг диметилфумарата, 5,0 мг монометилфумарата магния и 3,0 мг монометилфумарата цинка, что соответствует 85 мг фумаровой кислоты.

5,000 кг Диметилфумарата, 5,000 кг монометилфумарата кальция, 0,500 кг монометилфумарата магния и 0,300 кг монометилфумарата цинка размельчают, интенсивно перемешивают и при соответствующих мерах предосторожности (дыхательная маска, перчатки, защитная одежда и т.д.) гомогенизируют с помощью сита 800. Аналогично примеру 4, готовят смесь вспомогательных веществ следующего состава, а именно из 19,000 кг производного крахмала (STA-RX 1500), 3,000 кг микрокристаллической целлюлозы (Avicel PH 101), 0,750 кг поливинилпирролидона (PVP, Kollidon 120), 4,000 кг Primogel, 0,250 кг коллоидальной кремневой кислоты (Aerosil).

Вспомогательные вещества интенсивно перемешивают со смесью биологически активных веществ и гомогенизируют с помощью сита 200. Всю смесь при использовании 2%-ного водного раствора поливинилпирролидона (PVP, Kollidon 25) обычным образом перерабатывают в гранулят связующего и в высушенном состоянии смешивают с внешней фазой. Она состоит из 0,500 кг стеарата мания (Ph. Eur.) и 1,500 кг талька (Ph. Eur. II).

Весь гранулят затем обычным образом прессуют с получением выпуклых таблеток массой 400 мг и диаметром 10 мм. Вместо этих классических способов таблетирования также можно использовать другие способы получения таблеток, как прямое таблетирование, а также получение твердых дисперсий по способу плавления и способу распылительной сушки.

Нанесение на ядра таблеток устойчивого к действию желудочного сока покрытия, а также пленочного покрытия, осуществляют как описано в примерах 1 и 4.

Пример 8

Получение таблеток с устойчивым к действию желудочного сока покрытием, содержащих 50,0 мг моно-н-пропилфумарата кальция, что соответствует 32,8 мг фумаровой кислоты.

5,000 кг Монопропилфумарата кальция размельчают, перемешивают и при соответствующих мерах предосторожности (дыхательная маска, перчатки, защитная одежда и т.д.) гомогенизируют с помощью сита 800. Затем готовят смесь вспомогательных веществ следующего состава: 25,000 кг производного крахмала (STA-RX 1500), 3,000 кг микрокристаллической целлюлозы (Avicel PH 101), 0,600 кг поливинилпирролидона (PVP, Kollidon 25), 4,000 кг Primogel, 0,300 кг коллоидальной кремневой кислоты (Aerosil). Всю порошкообразную смесь смешивают с биологически активным веществом, перемешивают, гомогенизируют с помощью сита 200 и при использовании 2%-ного водного раствора поливинилпирролидона (Kollidon K30) обычным образом перерабатывают в гранулят связующего и в высушенном состоянии смешивают с внешней фазой. Она состоит из 2,000 кг так называемого FST-комплекса, содержащего 80% талька, 10% кремневой кислоты и 10% стеарата магния. Затем обычным образом прессуют с получением выпуклых таблеток массой 400 мг и диаметром 10 мм. Вместо этих классических способов таблетирования также можно использовать другие способы получения таблеток, как прямое таблетирование, а также получение твердых дисперсий по способу плавления и способу распылительной сушки. Нанесение на ядра таблеток устойчивого к действию желудочного сока покрытия, а также пленочного покрытия, осуществляют как описано в примерах 1 и 4.

Пример 9

Получение устойчивых к действию желудочного сока пилюль в капсулах, содержащих 50,0 мг монометилфумарата кальция, 5,0 мг монометилфумарата магния и 3,0 мг монометилфумарата цинка, что соответствует 45 мг фумаровой кислоты.

5,000 кг Монометилфумарата кальция, 0,500 кг монометилфумарата магния и 0,300 кг монометилфумарата цинка размельчают, интенсивно перемешивают и при соответствующих мерах предосторожности (дыхательная маска, перчатки, защитная одежда и т.д.) гомогенизируют с помощью сита 400. Наряду с этим готовят 2 л 20%-ного (масса/объем) раствора поливинилпирролидона (Kollidon K30) в этаноле. 7,250 кг Пилюль неодинаковой величины помещают в дражировочный котел и с помощью части раствора поливинилпирролидона (Kollidon K30) опрыскивают до тех пор, пока они не станут слегка увлажненными. Затем порциями добавляют смесь биологически активных веществ вплоть до высыхания пилюль. Этот способ действий увлажнение/высыхание осуществляют вплоть до окончания добавления смеси биологически активных веществ. Остаток раствора поливинилпирролидона смешивают с 0,720 кг 12,5%-ного раствора Eudragit E и смесь наносят путем опрыскивания на пилюли. Наконец пилюли слегка перемешивают и оставляют до полного высыхания. Вместо этого способа можно также использовать другие способы приготовления пилюль, как нанесение покрытия в псевдоожиженном слое, метод экструзии/сферонизации. Далее, пилюли также можно получать с отдельными биологически активными веществами и после нанесения пленки (см. ниже) смешивать в соответствующих соотношениях.

Пилюли опрыскивают 12,5%-ным раствором Eudragit S и высушивают с помощью талька. После каждого цикла опрыскивание/высушивание определяют высвобождение биологически активного вещества и добавляют 12,5%-ный раствор Eudragit S и тальк вплоть до достижения высвобождения согласно спецификации.

Устойчивыми к действию желудочного сока пилюлями затем заполняют капсулы (146 мг пилюль на капсулу).

Пример 10

Получение устойчивых к действию желудочного сока капсул, содержащих 50,0 мг моноизопропилфумарата кальция, 50,0 мг диизопропилфумарата, 5,0 мг моноизопропилфумарата магния и 3,0 мг моноизопропилфумарата цинка, что соответствует 67 мг фумаровой кислоты

5,000 кг Моноизопропилфумарата кальция, 5,000 кг диизопропилфумарата, 0,500 кг моноизопропилфумарата магния и 0,300 кг моноизопропилфумарата цинка размельчают, интенсивно перемешивают и при соответствующих мерах предосторожности (дыхательная маска, перчатки, защитная одежда и т.д.) гомогенизируют с помощью сита 800. К этой смеси биологически активных веществ подмешивают гомогенную порошкообразную смесь следующего состава: 32,200 кг высушенной путем распылительной сушки лактозы, 2,000 кг микрокристаллической целлюлозы (Avicel) и 1,00 кг коллоидальной кремневой кислоты (Aerosil), 1,000 кг стеарата магния и 2,000 кг талька. Всю порошкообразную смесь еще раз гомогенизируют с помощью сита 200 и затем вносят в твердые желатиновые разъемные капсулы в количестве до 500 мг массы нетто и закрывают.

Эти капсулы затем можно снабжать устойчивым к действию желудочного сока покрытием, состоящим из гидроксипропилметилфталатцеллюлозы (НРМСР) и касторового масла в качестве пластификатора. Также вместо твердых желатиновых капсул можно заполнять устойчивые к действию желудочного сока капсулы, состоящие из смеси ацетатфталата целлюлозы (СРА) и гидроксипропилметилфталатцеллюлозы (НРМСР).

Пример 11

Получение микропилюль в капсулах, содержащих 50,0 мг метилгидрофумарата, что соответствует в целом 44,6 мг фумаровой кислоты

5,000 кг Метилгидрофумарата размельчают и при соответствующих мерах предосторожности (дыхательная маска, перчатки, защитная одежда и т.д.) гомогенизируют с помощью сита 400. Наряду с этим готовят 2 л 20%-ного (масса/объем) раствора поливинилпирролидона (Kollidon K10) в этаноле. 7,250 кг Пилюль неравномерного размера помещают в дражировочный котел и с помощью одной части раствора коллидона К30 опрыскивают до тех пор, пока они не станут слегка увлажненными. Затем порциями добавляют биологически активное вещество вплоть до высыхания пилюль. Этот способ действий увлажнение/высыхание осуществляют далее вплоть до окончания добавления биологически активного вещества. Наконец, пилюли, слегка при перемешивании, оставляют до полного высыхания. Вместо этого способа можно также использовать другие способы приготовления гранул, как нанесение покрытия в псевдоожиженном слое, метод экструзии/сферонизации. Далее, пилюли также можно смешивать в соответствующих соотношениях.

Затем пилюлями заполняют капсулы (126,5 мг пилюль на капсулу).

Примеры применения ( 12)

На модели трансплантации почек у крыс исследовали действие метилфумарата кальция в отношении ослабления реакции "трансплантат против хозяина" как в случае модели острого, так и модели хронического отторжения.

Модель острого отторжения

Для исследования влияния метилфумарата кальция на острое отторжение трансплантата проводили опыты на животных (крыса). Для этого две группы крыс в течение промежутка времени в целом 56 дней (28 дней до трансплантации почек (-28) вплоть до 28 дней после трансплантации (+28)) обрабатывали с помощью метилфумарата кальция (CaMF, доза: 33,3 мг/день) или плацебо. Число подопытных животных в плацебо-группе составляло 9 (n=9), в Verum-группе было 12 животных (n= 12). Затем оценивали время выживания животных в днях после трансплантации. Результаты опытов представлены в табл. 1.

Из значительного увеличения среднего времени выживания в днях в случае введения метилфумарата кальция явствует, что метилфумарат кальция может подавлять отторжение, следовательно, влияет в положительном для трансплантационной медицины смысле на реакцию "трансплантат против хозяина".

Модель хронического отторжения

Для исследования действия метилфумарата кальция на хроническое отторжение в опыте на животном осуществляли трансплантацию в случае трех групп крыс (почка).

При этом группам 1 и 2, в каждом случае со дня 28 до трансплантации до дня 28 после трансплантации, вводили плацебо (группа 1) или, соответственно, метилфумарат кальция (CaMF) в качестве биологически активного вещества (группа 2). Третьей группе вводили CaMF в дни от 30 до 60 после трансплантации почек. Все животные получали циклоспорин в дни от 0 до 9 после трансплантации. Вводимые дозы составляли 1,5 мг/кг/день циклоспорина (подкожно) и 33,3 мг/кг/день CaMF (перорально).

Контроль в отношении обработки осуществляли путем определения содержаний креатинина в сыворотке сначала в дни 0, 1, 3, 5 и 10, затем раз в неделю, а также проводили контроль в отношении содержаний протеина в моче, которые определяли раз в неделю. В группах 1 и 2 было по 10 подопытных животных (n= 10), а в группе 3 число подопытных животных составляло 9 (n=9). Результаты обработки на десятой неделе после трансплантации представлены в табл. 2.

По истечении 10 недель обработанные плацебо животные показывают в значительной степени повышенное содержание креатинина в сыворотке и повышенную протеинурию по сравнению с обеими Verum-группами, причем предварительно обработанная группа 2 показывает еще лучшие значения, чем позднее обработанная группа 3. Данные результаты свидетельствуют о значительном ингибировании повреждения почек благодаря метилфумарату кальция.