производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона
Классы МПК: | C07D417/06 связанные углеродной цепью, содержащей только алифатические атомы углерода C07D275/04 конденсированные с карбоциклическими кольцами или циклическими системами A61K31/428 конденсированные с карбоциклическими кольцами A61P7/02 антитромботические средства; антикоагулянты; ингибиторы аггрегации тромбоцитов |
Автор(ы): | Кучеров Ф.А., Онуфриев М.В., Хропов Ю.В., Пятакова Н.В., Туницкая В.Л., Постников А.Б., Гуляева Н.В., Козлов А.М., Северина И.С., Злотин С.Г. |
Патентообладатель(и): | Институт органической химии им. Н.Д. Зелинского РАН |
Приоритеты: |
подача заявки:
2002-06-27 публикация патента:
10.10.2003 |
Изобретение относится к новым химическим соединениям - производным антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона общей формулы I, где А - низший алкилен, R1 и R2 (независимо) - низший алкил или R1 и R2 вместе с атомом азота образуют шестичленный насыщенный гетероцикл, который дополнительно может содержать гетероатом, такой как атом кислорода, и их фармакологически приемлемым солям. Предпочтительно указанные соединения ингибируют агрегацию тромбоцитов, а также снижают активность ряда тиолзависимых ферментов, в частности, таких как обратная транскриптаза вируса иммунодефицита человека (ОТ ВИЧ) и каспаза-3. Данное изобретение может быть использовано в биохимии, физиологии и медицине. 3 з.п.ф-лы, 1 табл.
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4
Формула изобретения
1. Производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона общей формулы I![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-21t.gif)
отличающиеся тем, что А - низший алкилен; R1 и R2 (независимо) - низший алкил или R1 и R2 вместе с атомом азота образуют шестичленный насыщенный гетероцикл, который может содержать дополнительно гетероатом, такой, как атом кислорода, и их фармакологически приемлемые соли. 2. Производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона по п.1, ингибирующие агрегацию тромбоцитов. 3. Производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона по п.1 как ингибиторы тиол-зависимых ферментов. 4. Производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона по п.1 как ингибиторы обратной транскриптазы ВИЧ и каспазы-3.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к новым химическим соединениям - производным антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона общей формулы I![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-2t.gif)
где А - низший алкилен, R1 и R2 (независимо) - низший алкил или R1 и R2 вместе с атомом азота образуют шестичленный насыщенный гетероцикл, который дополнительно может содержать гетероатом, такой как атом кислорода, и их фармакологически приемлемым солям. Предпочтительно, указанные соединения ингибируют агрегацию тромбоцитов, а также снижают активность ряда тиолзависимых ферментов, в частности таких как обратная транскриптаза вируса иммунодефицита человека (ОТ ВИЧ) и каспаза-3. Данное изобретение может быть использовано в биохимии, физиологии и медицине. Результаты многочисленных исследований свидетельствуют о том, что повышенная агрегация тромбоцитов играет ключевую роль в патогенезе многих сердечно-сосудистых заболеваний (например, таких как артериальные тромбозы, инфаркт миокарда, нестабильная стенокардия). Соединения, способные предотвращать активацию тромбоцитов, которая может быть вызвана эндогенными индукторами, например аденозин-5"-дифосфатом (АДФ), в настоящее время находят широкое применение для эффективного воздействия на патологические изменения системы гемостаза (М.Д. Машковский. Лекарственные средства, т.1, Торсинг, Харьков, 1998 г. , стр. 462-475 [1]; Б.А. Сидоренко, Д.В. Преображенский. Клиническое применение антитромботических препаратов, М., 1998 г. [2]). Известно, что некоторые бициклические соединения, содержащие атомы азота и серы и используемые в качестве субстанций при получении лекарственных средств, обладают способностью ингибировать агрегацию тромбоцитов. Так, известен 5-[(2-хлорфенил)метил]-4,5,6,7-тетрагидротиено[3,2-с]пиридин (тиклопидин) формулы II
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-3t.gif)
в качестве блокатора P2Y(12) рецепторов АДФ тромбоцитов (F. Storey. "The P2Y12 receptor as a therapeutic target in cardiovascular disease". Platelets 2001, v. 12, 4, p. 197-209 [3]; патент США 4963559, 514-301, оп.1990 г. [4]; [1] с.474). Показано, что блокатор кальциевых каналов - D-цис-3-ацетокси-2,3-дигидро-5-[2-(диметиламино)этил] -2-(2-метоксифенил)- 1,5-бензотиазепин-4(5Н)-она гидрохлорид (дилтиазем) формулы III
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-4t.gif)
обладает антитромботическим действием (A.R. Dehpour, T. Samadian et al. "Effects of diltiazem and verapamil on ADP-induced rabbit platelet shape change and aggregation" Gen. Pharmacol., 1995, v.26, 6, p.1295-1299 [5]). Вышеуказанные соединения в условиях in vitro ингибируют агрегацию тромбоцитов, вызванную АДФ, при концентрации >300 мкМ. В биохимических исследованиях нашли широкое применение низкомолекулярные ингибиторы тиолзависимых ферментов - так называемые "SH-метки". К ним относятся такие соединения, как N-этилмалеимид, 4-нитро-7-хлорбенз-2,1,3-оксадиазол, 5,5"-дитиобис(2-нитробензойная кислота) и др. (например, E. Scoffone, A. Fontana "Identification of specific amino acid residues". Mol. Biol. Biochem. Biophys. , 1970, v.8, p. 185-210 [6]; K.K. Han, A. Delacourte, B. Hemon "Chemical modification of thiol group(s) in protein: application to the study of anti-microtubular drugs binding," Соmр. Biochem. Physiol. В 1987, v.88, 4, p.1057-1065 [7]; A.F. Carne. "Chemical modification of proteins. " Methods Mol. Biol., 1994, v.32, p.311-320 [8]). Как правило, данные соединения отличаются достаточно высокой реакционной способностью по отношению к тиольным группам белков и низкомолекулярных тиолов и обладают низкой специфичностью действия на ферменты. Остается актуальным поиск новых эффективных ингибиторов тиолзависимых ферментов. Известны различные 1,2-гетаннелированные производные 9,10-антрахинона, обладающие противоопухолевым действием (например, A.L. Jones, I.E. Smith. "Navelbine and the anthrapyrazoles." Hematol. Oncol. Clin. North Am., 1994, v. 8, 1, p.141-152 [9]; H. Gogas, J.L. Mansi. "New drugs. The anthrapyrazoles. " Cancer Treat. Rev., 1996, v.21, 6, p.541-552 [10]; P. Chang, C.-F. Chen. "Antineoplastic anthraquinones. II. Design and synthesis of 1,2-heteroannelated anthraquinones". J. Heterocycl. Chem., 1996, v.33. p.367-371 [11]). Способность данных соединений ингибировать агрегацию тромбоцитов, а также их влияние на активность ОТ ВИЧ и каспазы-3 не изучены. Известны производные антрахинона - митоксантрон формулы IV и бисантрен формулы V
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-5t.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-6t.gif)
ингибирующие агрегацию тромбоцитов под действием АДФ (данные не приведены) и коллагена (IC50~40-140 и 14-23 мкМ соответственно в зависимости от концентрации индуктора агрегации) (P. Frank, R.F. Novak. "Mitoxantrone and bisantrene inhibition of platelet aggregation and prostaglandin E2 production in vitro. " Biochem. Pharmacol, 1985, v.34, 19, p.3609-3614 [12]). Влияние данных соединений на активность ОТ ВИЧ и каспазы-3 не исследовано. Показано, что 1,2-бензизотиазол-3-он и его 2-аминопроизводное общей формулы VI
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-7t.gif)
где R=Н или NH2,
обладают способностью ингибировать агрегацию тромбоцитов в условиях in vitro, вызванную АДФ (IC50>200 мкМ) (K.H. Baggaley, P.D. English et al. "Inhibitors of blood platelet aggregation. Effects of some 1,2-benzisothiazol-3-ones on platelet responsiveness to adenosine diphosphate and collagen." J. Med. Chem., 1985, v.28, 11, p.1661-1667 [13]; P. Vicini, C. Manotti et al. "Synthesis and antiplatelet effects of 2-amino-1,2-benzisothiazolin-3-one." Arzneim.-Forsch./Drug Res., 1997, v.47, 11, p. 1218-1221 [14]). Влияние бензизотиазолонов общей формулы VI на активность ОТ ВИЧ и каспазы-3 не исследовано. Известны производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона общей формулы VII
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-8t.gif)
где R - Н, метил, бензил, фенил или замещенный фенил,
в качестве продуктов химического синтеза (F. A. Kucherov, S. G. Zlotin. "Synthesis of linear and angular anthraquinonoisothiazole-3-ones, their S-oxides and S, S-dioxides. " Russ. Chem. Bull., 2001, v.50, 9, р. 1657-1662 [15] ). Фармакологические и биохимические свойства данных соединений не изучены. Известно, что ряд производных изотиазол-3-она оказывают ингибирующее действие на активность некоторых тиолзависимых ферментов, в частности p56 (lck) тирозиновой протеинкиназы (J. M. Trevillyan, X. G. Chiou et al. "Inhibition of p56 (lck) tyrosine kinase by isothiazolones." Arch. Biochem. Biophys. , 1999, v.364, 1, p.19-29 [16]), теломеразы (N. Hayakawa, K. Nozawa et al. "Isothiazolone derivatives selectively inhibit telomerase from human and rat cancer cells in vitro." Biochemistry, 1999, v.38, 35, p.11501-11507 [17]), а также предотвращают образование стромелизина из простромелизина (E. C. Amer, M. A. Pratta et al. "Isothiazolones interfere with normal matrix metalloproteinase activation and inhibit cartilage proteoglycan degradation. " Biochem J. , 1996, v.318, pt.2, p.417-424 [18]). Установлено, что данный эффект может быть обусловлен взаимодействием таких соединений с функционально важной меркаптогруппой цистеина, приводящим к раскрытию изотиазольного цикла с образованием тиолдисульфидной связи с белком [16, 17, 18]. Наиболее близким к соединениям настоящего изобретения по структуре и свойствам является 2-[3-(пиперидино-1)пропил]-1,2-бензизотиазол-3-он VIII
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-9t.gif)
который ингибирует агрегацию тромбоцитов под действием коллагена или аденозин-5"-дифосфата (АДФ) ([13] - прототип). Данное соединение, согласно опубликованным данным, обладает недостаточно выраженными фармакологическими свойствами (IC50=57 мкМ в условиях in vitro). Его влияние на активность тиолзависимых ферментов не изучено. Целью изобретения является создание новых гетероциклических соединений в ряду аннелированных производных изотиазолона, обладающих улучшенными фармакологическими свойствами. Указанная цель достигается новыми производными антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона вышеуказанной общей формулы I, где А - низший алкилен, R1 и R2 (независимо) - низший алкил или R1 и R2 вместе с атомом азота образуют шестичленный насыщенный гетероцикл, который дополнительно может содержать гетероатом, такой как атом кислорода, и их фармакологически приемлемыми солями. Предпочтительно данные соединения ингибируют агрегацию тромбоцитов, а также снижают активность ряда тиолзависимых ферментов. В частности, соединения настоящего изобретения ингибируют ОТ ВИЧ и каспазу-3 - ферменты, содержащие функционально важные остатки цистеина и представляющие фармакологический интерес. ОТ ВИЧ (РНК-зависимая ДНК-полимераза) катализирует образование провирусной ДНК на матрице вирусной РНК, способствуя репликации ВИЧ, и является в настоящее время одной из ключевых мишеней в химиотерапии СПИД (например, H. Jonckheere, J. Anne, E. De Clercq. "The HIV-1 reverse transcription (RT) process as target for RT inhibitors." Med. Res. Rev., 2000, v.20, 2, p. 129-154 [19]). Каспаза-3 (эффекторная цистеиновая протеаза, активирующаяся при апоптозе) катализирует расщепление белков после остатков аспарагиновой кислоты (G.M. Cohen "Caspases: the executioners of apoptosis." Biochem. J., 1997, v.326, pt.1, p.1-16 [20]). Соединения, ингибирующие данный фермент, обладают цитопротекторным действием и рассматриваются как потенциальные фармакологические средства для лечения инфаркта миокарда, церебральной ишемии, болезни Альцгеймера, остеоартрита, цирроза печени и других заболеваний (например, T. Rudel. "Caspase inhibitors in prevention of apoptosis." Herz, 1999, v.24, 3, p.236-241 [21]; N. Guttenplan, C. Lee, W. H. Frishman. "Inhibition of myocardial apoptosis as a therapeutic target in cardiovascular disease prevention: focus on caspase inhibition." Heart Dis., 2001, v.3, 5, p.313-318 [22]; H.J. Rideout, L. Stefanis. "Caspase inhibition: a potential therapeutic strategy in neurological diseases." Histol. Histopathol., 2001, v.l6, 3, p.895-908 [23]). Производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона общей формулы I, где А - низший алкилен, причем А
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213191/8800.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213191/8800.gif)
Н2N-А-NR1R2 (IX),
где A, R1 и R2 имеют вышеуказанные значения,
ацилируют хлорангидридом 1-нитро-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2-карбоновой кислоты в смеси бензол/вода, полученный соответствующий N-замещенный 1-нитро-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2-карбоксамид обрабатывают последовательно карбонатом калия и тиоэтилатом натрия в среде диметилформамида (ДМФА), полученный соответствующий N-замещенный 1-этилтио-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2-карбоксамид вводят во взаимодействие с сульфурилхлоридом в среде безводного хлористого метилена с последующим выделением целевого продукта в виде свободного основания или фармакологически приемлемой соли (например, гидрохлорида, фумарата или цитрата) (способ А, схема 1, см. в конце описания). Производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона общей формулы I, где А - низший алкилен, причем А
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213191/8800.gif)
H2N-A-Hal (X),
где А имеет вышеуказанные значения и Hal - атом хлора или брома,
взятый в виде соли, ацилируют хлорангидридом 1-нитро-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2-карбоновой кислоты в смеси бензол/вода в присутствии карбоната калия, полученный соответствующий N-замещенный 1-нитро-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2-карбоксамид обрабатывают карбонатом калия и тиометилатом натрия в среде ДМФА, полученный соответствующий N-замещенный 1-метилтио-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2-карбоксамид вводят во взаимодействие с сульфурилхлоридом в среде безводного хлористого метилена, после чего полученный промежуточный 2-(галоидалкил)антра[2,1-d] изотиазол-3,6,11(2Н)-трион подвергают реакции с амином общей формулы XI
HNR1R2 (XI),
где R1 и R2 имеют вышеуказанные значения,
в среде ДМФА в присутствии карбоната калия и при необходимости иодида щелочного металла, такого как иодид калия, при температуре 50-55oС с последующим выделением целевого продукта в виде свободного основания или фармакологически приемлемой соли (способ Б, схема 2, смотри в конце описания). Исходный хлорангидрид 1-нитро-9,10-диоксо-9,10-дигидро-антрацен-2-карбоновой кислоты был получен известным способом - обработкой соответствующей кислоты хлористым тионилом в среде абсолютного бензола при температуре кипения реакционной смеси [15]. Производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона общей формулы I, где А= СН2, а R1 и R2 имеют вышеуказанные значения, были получены известным способом по реакции Манниха конденсацией производного изотиазол-3-она с вторичными аминами в присутствии формальдегида (E.D. Weiler, G.A. Miller "Isothiazoles VII: N-Hydroxyalkylation and Mannich Reaction of 4-Isothiazolin-3-ones." J. Heterocycl. Chem., 1976, v.l3, 5, p.1097-1098 [28]). В частности, исходный антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11(2Н)-трион вводили во взаимодействие со вторичным амином вышеуказанной общей формулы XI, где R1 и R2 имеют вышеприведенные значения, в присутствии водного раствора формальдегида при 45-50oС с последующим выделением целевого продукта в виде свободного основания или фармакологически приемлемой соли (способ В, схема 3, смотри в конце описания). Исходный антра[2,1-d] изотиазол-3,6,11(2Н)-трион был получен известным способом - обработкой 1-метилтио-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2-карбоксамида сульфурилхлоридом в среде безводного хлористого метилена [15]. Изобретение иллюстрируется следующими примерами. Пример 1. 2-[2-(Диметиламино)этил] антра[2,1-d] изотиазол-3,6,11(2Н)-триона гидрохлорид (4) (способ А). a) N-[2-(Диметиламино)этил] -нитро-9,10-диоксо-9,10-дигидроантрацен-2-карбоксамида гидрохлорид (2).
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-10t.gif)
К суспензии хлорангидрида 1-нитро-9,10-диоксо-9,10-дигидро-антрацен-2-карбоновой кислоты [15] (0,30 г, 0,95 ммоль) в гетерофазной системе бензол/вода (1: 1, об.) при интенсивном перемешивании добавляют 0,11 мл (0,088 г, 1,00 ммоль) 2-(диметиламино)этиламина. Смесь перемешивают 2 ч при 25oС, осадок отфильтровывают, промывают последовательно водой (2 x 10 мл), 10% НСl (2 x 10 мл) и этиловым спиртом (2 x 10 мл) и сушат на воздухе. Получают 0,31 г соединения 2, (выход 82%). Т. пл. 282-285oС. Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-(d6,
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-11t.gif)
К суспензии амида 2 (0,74 г, 1,83 ммоль) в ДМФА (10 мл) прибавляют карбонат калия (0,27 г, 1,9 ммоль) и перемешивают 30 мин при 25oС, после чего прибавляют тиоэтилат натрия (0,2 г, 2,38 ммоль) и перемешивают еще 12 ч при 25oС. Реакционную массу выливают в 10% раствор соляной кислоты (50 мл) и перемешивают 30 мин. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой (3 x 15 мл), перекристаллизовывают из смеси тетрагидрофуран (ТГФ)/этанол (1:2) и высушивают. Получают 0,57 г соединения 3 (выход 81%). Т. пл. 161 - 162oС. Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-d6,
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-12t.gif)
К суспензии амида 3 (0,57 г, 1,49 ммоль) в абсолютном СН2Сl2 (8 мл) при интенсивном перемешивании прибавляют сульфурилхлорид (0,15 мл, 1,84 ммоль). После быстрого растворения осадка через 5-8 сек из красного раствора начинается выпадение продукта реакции. Реакционную массу перемешивают 1,5 ч при 20oС, разбавляют петролейным эфиром (50 мл), осадок отфильтровывают, промывают петролейным эфиром (3 x 15 мл), перекристаллизовывают из диметилсульфоксида (ДМСО) и высушивают. Получают 0,23 г соединения 4 (выход 39%). Т. пл. 317-319oС. Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-d6,
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-13t.gif)
Гидрохлорид 4 (0,5 г, 1,29 ммоль) суспендируют в 10 мл воды и при перемешивании прибавляют ацетат натрия (0,12 г, 1,36 ммоль), после чего весь осадок переходит в раствор. Продукт экстрагируют из воды этилацетатом (5 x 5 мл), органические фракции объединяют, сушат безводным сульфатом магния, отгоняют растворитель в вакууме, остаток высушивают и получают 0,24 г соединения 5 (выход 53%). Т. пл. 168-170oС. Спектр ЯМР 1Н (CDCl3,
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-14t.gif)
К суспензии триона 5 (0,1 г, 0,28 ммоль) в 5 мл абсолютного метанола прибавляют 2,1 мл 2% раствора фумаровой кислоты (0,033 г, 0,28 ммоль) в абсолютном метаноле. Смесь перемешивают при 35oС 1 ч, отгоняют растворитель в вакууме, остаток высушивают. Получают 0,13 г соединения 6 (выход 98%). Т. разл. >270oС. Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-d6,
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-15t.gif)
К суспензии триона 5 (0,1 г, 0,28 ммоль) в 5 мл абсолютного метанола прибавляют 3,7 мл 2% раствора лимонной кислоты (0,058 г, 0,28 ммоль) в абсолютном метаноле. Смесь перемешивают при 35oС 1 ч, отгоняют растворитель в вакууме, остаток высушивают. Получают 0,15 г соединения 7 (выход 98%). Т. разл. >270oС. Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-d6,
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-16t.gif)
К суспензии хлорангидрида 1-нитро-9,10-диоксо-9,10-дигидро-антрацен-2-карбоновой кислоты [15] (0,30 г, 0,95 ммоль) в гетерофазной системе бензол/вода (1:1, об.) при интенсивном перемешивании последовательно добавляют 2-хлорэтиламина гидрохлорид (0,12 г, 1,03 ммоль) и карбонат калия (0,3 г, 2,17 ммоль). Смесь перемешивают 2 ч при 25oС, отфильтровывают, промывают последовательно водой (2 x 10 мл), 10% НСl (2 x 10 мл) и этиловьм спиртом (2 x 10 мл). Осадок сушат на фильтре и получают 0,28 г соединения 8 (выход 84%). Т. пл. 259-262oС. Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-d6,
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-17t.gif)
К суспензии амида 8 (0,5 г, 1,39 ммоль) в ДМФА (8 мл) прибавляют тиометилат натрия (0,12 г, 1,71 ммоль) и перемешивают 10 ч при 20oС. Реакционную массу выливают в 10% НС1 (30 мл) и перемешивают 30 мин. Выпавший осадок отфильтровывают, промывают водой (3 x 15 мл), перекристаллизовывают из смеси ТГФ/этанол (1: 2) и высушивают. Получают 0,37 г соединения 9 (выход 75%). Т. пл. 193-195oС. Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-d6,
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-18t.gif)
К суспензии амида 9 (0,5 г, 1,39 ммоль) в абсолютном СН2Сl2 (8 мл) при интенсивном перемешивании прибавляют SO2Cl2 (0,15 мл, 1,84 ммоль). Осадок практически сразу растворяется и через 5-8 сек из красного раствора начинается выпадение продукта реакции. Реакционную массу перемешивают 2 ч при 20oС, разбавляют петролейным эфиром (30 мл), осадок отфильтровывают, промывают петролейным эфиром (3 x 10 мл), перекристаллизовывают из ДМСО и высушивают. Получают 0,33 г соединения 10 (выход 69%). Т. пл. 261-264oС. Спектр ЯМР 1Н (ДМСО-d6,
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-19t.gif)
К суспензии изотиазолона 10 (0,30 г, 0,87 ммоль) в ДМФА (5 мл) прибавляют морфолин (0,12 мл, 0,12 г, 1,35 ммоль), карбонат калия (0,13 г, 0,94 ммоль) и каталитическое количество иодида калия (5-10 мг). Реакционную смесь перемешивают при 50-55oС в течение 48 ч, выливают в воду, перемешивают 30 мин при 20oС, выпавший осадок отфильтровывают и хроматографируют на колонке с силикагелем (L 40/100; элюент - смесь толуол/этилацетат 2:1, затем - этилацетат). Фракции, содержащие целевой продукт, упаривают при пониженном давлении, остаток сушат на воздухе. Получают 0,10 г изотиазолона 11 (выход 31%). Т. пл. 208-212oС. Спектр ЯМР 1H(CDCl3,
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213744/2213744-20t.gif)
а) 2-[(Диэтиламино)метил]антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-трион (13). Изотиазолон 12 (0,3 г, 1,06 ммоль) [15] перемешивают в ДМСО при 45-50oС до полного растворения, после чего к раствору последовательно прибавляют диэтиламин (0,15 мл, 0,11 г, 1,5 ммоль) и 38% водный раствор формальдегида (0,3 мл, 4,1 ммоль). Реакционную массу перемешивают при 45-50oС в течение 6 ч, раствор охлаждают до 20oС и оставляют на 3 ч. Выпавший мелкокристаллический осадок отфильтровывают, промывают этанолом (3 x 10 мл), сушат на воздухе. Получают 0,14 г продукта 13 (выход 35%). Т. пл. 158-160oС. Спектр ЯМР 1Н (СОСl3,
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213018/948.gif)
![производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона, патент № 2213744](/images/patents/255/2213011/946.gif)
Изучение взаимодействия производных антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона с низкомолекулярными тиолами (дитиотреитолом и глутатионом) проводили с помощью спектрометрии в УФ и видимой областях спектра с использованием соединения 5. Реакционная смесь (3 мл) содержала 85 мкМ соединение 5, 100 мкМ глутатион или дитиотреитол, 25 мМ Трис-НСl (рН 7,6) или 100 мМ КОН (рН 13) и 5% этанол. В ходе проведенных экспериментов не наблюдались изменения оптической плотности реакционной смеси в описанных условиях при рН 7,6 в присутствии дитиотреитола или глутатиона, а также при рН 13 в присутствии глутатиона при указанных значениях длин волн. При рН 13 в присутствии дитиотреитола наблюдались значительные изменения оптической плотности реакционной смеси при длинах волн, соответствующих максимумам поглощения соединения 5 в УФ-спектре (см. таблицу). Данные изменения оптической плотности развивались в течение 20 мин и свидетельствуют о протекании химической реакции между соединением 5 и дитиотреитолом в щелочной среде. Полученные результаты показывают, что в описанных условиях при физиологических значениях рН производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона не вступают в химическую реакцию с низкомолекулярными тиолами. Пример 10. Острая токсичность производных антра[2,1-d] изотиазол-3,6,11-триона. Острую токсичность соединений настоящего изобретения определяли известным способом по ЛД50 с использованием беспородных мышей обоего пола средней массой 20 г при комнатной температуре; стандартное питание и воду давали ad libitum в течение всего эксперимента; подвижность животных не ограничивали. Растворы соединений в ДМСО вводили с помощью стерильного шприца внутрибрюшинно. После инъекции за животными вели наблюдение в течение 48 ч, по истечении этого времени за мышами наблюдали дополнительно в течение 72 ч (ни одно из животных не погибло в течение дополнительного промежутка времени). Полученные результаты свидетельствуют о том, что значения ЛД50 для исследуемых соединений составляют не менее 30-50 мг/кг. Для известного аналога определение острой токсичности не проводилось. Производные антра[2,1-d] изотиазол-3,6,11-триона ингибируют агрегацию тромбоцитов в условиях in vitro в концентрациях, более низких по сравнению с соответствующими концентрациями известного аналога. Кроме того, соединения настоящего изобретения могут быть использованы в биохимических исследованиях для изучения строения и механизма действия тиолзависимых ферментов (например, обратной транскриптазы ВИЧ и каспазы-3). Таким образом, производные антра[2,1-d]изотиазол-3,6,11-триона общей формулы (I) расширяют ассортимент эффективных ингибиторов агрегации тромбоцитов и ингибиторов тиолзависимых ферментов.
Класс C07D417/06 связанные углеродной цепью, содержащей только алифатические атомы углерода
Класс C07D275/04 конденсированные с карбоциклическими кольцами или циклическими системами
Класс A61K31/428 конденсированные с карбоциклическими кольцами
Класс A61P7/02 антитромботические средства; антикоагулянты; ингибиторы аггрегации тромбоцитов