очищенная термостабильная днк-полимераза из thermococcus gorgonarius, ее получение и применение
Классы МПК: | C12N15/54 трансферазы (2) C12N9/12 переносящие фосфорсодержащие группы, например киназы (27) C12N1/21 модифицированные введением чужеродного генетического материала C12Q1/68 использующие нуклеиновые кислоты |
Автор(ы): | АНКЕНБАУЕР Вальтрауд (DE), СВЕТЛИЧНЫЙ Виталий (DE), БОНЧ-ОСМОЛОВСКАЯ Елизавета, ЭБЕНБИХЛЕР Кристине (DE), АНГЕРЕР Бернхард (DE), ШМИТЦ-АГХЕГУИАН Гудрун (DE), ЛАУЭ Франк (DE) |
Патентообладатель(и): | РОШЕ ДИАГНОСТИКС ГМБХ (DE) |
Приоритеты: |
подача заявки:
1997-10-01 публикация патента:
20.01.2004 |
Изобретение относится к области энзимологии и генной инженерии и обеспечивает получение нативной или рекомбинантной формы термостабильной ДНК-полимеразы, применяемой в диагностических и других исследованиях, основанных на ПЦР-амплификации нуклеиновых кислот. Из архебактерии Thermococcus gorgonarius выделена и очищена термостабильная ДНК-полимераза, характеризующаяся способностью практически полностью сохранять активность в течение 2 ч инкубации при t=95oС в присутствии стабилизатора и отличающаяся высокой точностью репликации. Выделена и охарактеризована последовательность ДНК, кодирующая новую ДНК-полимеразу. В результате экспрессии этой нуклеотидной последовательности в Е.coli получена рекомбинантная форма фермента. Показана возможность использования новой ДНК-полимеразы из Thermococcus gorgonarius в методах амплификации и/или секвенирования ДНК, при котором обеспечивается точность копирования, более чем вдвое превышающая этот показатель для любой из известных ДНК-полимераз. 8 с. и 3 з.п.ф-лы, 10 ил., 1 табл.
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5, Рисунок 6, Рисунок 7, Рисунок 8, Рисунок 9, Рисунок 10, Рисунок 11, Рисунок 12, Рисунок 13, Рисунок 14, Рисунок 15, Рисунок 16, Рисунок 17, Рисунок 18, Рисунок 19, Рисунок 20, Рисунок 21, Рисунок 22, Рисунок 23, Рисунок 24, Рисунок 25, Рисунок 26, Рисунок 27, Рисунок 28, Рисунок 29, Рисунок 30, Рисунок 31, Рисунок 32, Рисунок 33, Рисунок 34, Рисунок 35, Рисунок 36, Рисунок 37, Рисунок 38, Рисунок 39, Рисунок 40, Рисунок 41, Рисунок 42, Рисунок 43, Рисунок 44, Рисунок 45, Рисунок 46, Рисунок 47, Рисунок 48, Рисунок 49, Рисунок 50, Рисунок 51, Рисунок 52, Рисунок 53, Рисунок 54, Рисунок 55, Рисунок 56, Рисунок 57, Рисунок 58, Рисунок 59, Рисунок 60, Рисунок 61, Рисунок 62, Рисунок 63
Формула изобретения
1. Очищенная термостабильная ДНК-полимераза, получаемая из Тhermococcus gorgonarius, которая катализирует матрично-направленную полимеризацию ДНК, обладает 3’-5’-экзонуклеазной (корректорной) активностью, сохраняет около 90% своей активности после инкубации в течение двух часов при температуре около 95![очищенная термостабильная днк-полимераза из thermococcus gorgonarius, ее получение и применение, патент № 2221867](/images/patents/247/2221004/176.gif)
Описание изобретения к патенту
Текст описания в факсимильном виде (см. графический материал)Класс C12N15/54 трансферазы (2)
Класс C12N9/12 переносящие фосфорсодержащие группы, например киназы (27)
Класс C12N1/21 модифицированные введением чужеродного генетического материала
Класс C12Q1/68 использующие нуклеиновые кислоты