рекомбинантная плазмидная днк рвмс-qp120(a)m-1 для иммунизации против вируса иммунодефицита человека
Классы МПК: | C12N15/63 введение чужеродного генетического материала с использованием векторов; векторы; использование их хозяев; регулирование экспрессии C12N15/48 Retroviridae, например вирусы бычьей лейкемии, кошачьей лейкемии |
Автор(ы): | Козлов А.П., Климов Н.А., Машарский А.Э., Полякова М.С., Романович А.Э., Галачьянц Ю.П., Мурашев Б.В. |
Патентообладатель(и): | Автономная некоммерческая организация "Биомедицинский центр" |
Приоритеты: |
подача заявки:
2003-05-22 публикация патента:
20.04.2004 |
Изобретение относится к области биотехнологии и медицины, в частности, к генетической инженерии и иммунологии и может быть использовано для иммунизации против вируса иммунодефицита человека 1 типа (ВИЧ-1) субтипа А. В рекомбинантной плазмидной ДНК, содержащей ген gp 120 вируса иммунодефицита человека типа 1 субтипа А в последовательности нуклеотидов в кодонах с преобладанием аденина и/или тимина аденин и/или тимин частично заменены на гуанин и/или цитозин. Полученная рекомбинантная плазмидная ДНК обеспечивает экспрессию белка оболочки вируса иммунодефицита человека (ВИЧ) типа 1 субтипа А в клетках высших эукариот. Изобретение позволяет проводить непосредственно иммунизацию организма человека. 1 табл., 3 ил.
Рисунок 1, Рисунок 2, Рисунок 3, Рисунок 4, Рисунок 5
Формула изобретения
Рекомбинантная плазмидная ДНК рВМС-gр120(А)m-1 для экспрессии белка вируса иммунодефицита человека gp120 в эукариотических клетках, характеризующаяся тем, что она содержит ген gp 120 вируса иммунодефицита человека типа 1 субтипа А, представленный на фиг.2.Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области биотехнологии и медицины, в частности, к генетической инженерии и иммунологии, и может быть использовано для экспрессии белка gp120 вируса иммунодефицита человека 1 типа в эукариотических клетках.Известна рекомбинантная плазмидная ДНК, обеспечивающая высокий уровень продукции гибридного белка, обладающего антигенными свойствами поверхностного гликопротеида (gp) оболочки вируса Т-клеточного лейкоза человека 1 типа (HTLV-I), способная наследоваться в штаммах бактерий Е. coli. Рекомбинантная плазмидная ДНК pESG размером 5, 6 т.п.н. состоит из SalGl – BamH1 фрагмента (426 п.н.) последовательности области env HTLV-I и SalGl фрагмента плазмиды pUR291 размером 5,2 т.п.н. с геном бета-галактозидазы, областью ori и генетическим маркером в виде blа-гена (устойчивость к ампициллину), имеет уникальные сайты рестрикции ВаmHI, Pstl, HindIII, Stul, Clal, Tthlll-II; с помощью фермента рестрикции SalGl из промежуточной плазмиды pBEl вырезан фрагмент величиной 426 п.н. Этот фрагмент лигируют с линеанизированной гидролизом SalGl формой ДНК плазмидного вектора pUR291. После соответствующей инкубации трансформируют полученным препаратом компетентные (обработанные СаС1з) клетки Е.соli с последующим отбором трансформантом их способности расти на среде, содержащей ампициллин, RU 2081172 Al.Данное техническое решение позволяет осуществить продукцию белка оболочки вируса HTLV-1 в бактериальных клетках. Однако экспрессия белка оболочки вируса иммунодефицита человека в клетках высших эукариот не осуществляется.Известна рекомбинантная плазмидная ДНК pUE 41, кодирующая фрагменты белков оболочки gp120 и gp41 вируса иммунодефицита человека типа 1 размером 5700 н.п. и мол. м. 3, 7, содержащая Bam HI - Hind III - фрагмент плазмидной ДНК pUR292 размером 5180 н.п.; уникальный сайт рестрикции Hind III; гены и генетические маркеры; ген bla - обеспечивающий синтез


Класс C12N15/63 введение чужеродного генетического материала с использованием векторов; векторы; использование их хозяев; регулирование экспрессии
Класс C12N15/48 Retroviridae, например вирусы бычьей лейкемии, кошачьей лейкемии