производное альфа-аминогидроксамовой кислоты, способ его получения и фармацевтическая композиция

Формула изобретения

1. Производное -аминогидроксамовой кислоты формулы I

где R₁ означает водород, (низш.)алкил или фенил(низш.)алкил;

R₂ означает водород или (низш.)алкил;

R₃ означает (низш.)алкил или фенил, который незамещен или замещен одним заместителем, выбранным из галогена, (низш.)алкокси, триазолила, имидазолила и морфолинила;

А означает C ₁-С₃алкилен;

q равно 1-5;

R означает С₂-C₇алкил, моно-, ди- или тризамещенный галогеном, незамещенный С₃-С₇алкенил или незамещенный С₃-С₇алкинил;

и его фармацевтически приемлемые соли, причем органические радикалы, обозначенные как «низшие», содержат не более 7 атомов углерода; и при условии, что соединение формулы I не означает гидрохлорид 2-[(4-бут-2-инилоксибензолсульфонил)пиридин-3-илметиламино]-N-гидроксиацетамида, гидрохлорид 2-[(4-бут-2-инилоксибензолсульфонил)пиридин-3-илметиламино]-N-гидроксипропионамида, гидрохлорид 2-[(4-бут-2-инилоксибензолсульфонил)-(3-фенилпропил)амино]-N-гидроксиацетамида, 2-[(4-бут-2-инилоксибензолсульфонил)пиридин-3-илметиламино]-N-гидрокси-3-метилбутирамид, 1-[{[4-(2-бутинилокси)фенил]сульфонил}(3-пиридинилметил)амино]-N-гидроксициклогексанкарбоксамид или гидрохлорид 2-[(4-бут-2-инилоксибензолсульфонил)метиламино]-2-циклогексил-N-гидроксиацетамида.

2. Соединение формулы I по п.1, где R₁ означает водород, (низш.)алкил или фенил(низш.)алкил; R₂ означает водород; R₃ означает фенил, монозамещенный (низш.)алкокси или галогеном; или (низш.)алкил; А означает C₁-С ₃алкилен; q равно 1; R означает С₂-C₇ алкил, моно- или тризамещенный галогеном; незамещенный С ₃-С₇алкенил или незамещенный С₃-С ₇алкинил, и его фармацевтически приемлемые соли.

3. Соединение формулы I по п.1, где R₁ означает водород; R₂ означает водород; R₃ означает фенил, монозамещенный (низш.)алкокси или галогеном; А означает C₁-С₃алкилен; q равно 1; R означает незамещенный С₃-С₅алкенил, у которого двойная связь локализована в конце цепи, или незамещенный С₃-С ₅алкинил, у которого тройная связь локализована в конце цепи, и его фармацевтически приемлемые соли.

4. Соединение формулы I по п.1, где R₁ означает водород; R₂ означает водород; R₃ означает фенил, монозамещенный (низш.)алкокси или галогеном; А означает метилен или этилен; q равно 1 и R означает неразветвленный С₃-С₅ алкил, который в конце цепи монозамещен галогеном, и его фармацевтически приемлемые соли.

5. Соединение формулы I по п.1, где R ₁ означает водород, (низш.)алкил или фенил(низш.)алкил; R₂ означает водород; R₃ означает фенил, незамещенный или монозамещенный (низш.)алкокси, галогеном, триазолилом, имидазолилом, морфолинилом; А означает метилен или этилен; q равно 1; R означает С₂-С₇алкил, моно-, ди- или тризамещенный галогеном; С₃-С₇алкенил или С₃-С₇алкинил, и его фармацевтически приемлемые соли.

6. Соединение формулы I по п.1, где R ₁ означает водород, (низш.)алкил или фенил(низш.)алкил; R₂ означает водород; R₃ означает фенил, незамещенный или монозамещенный (низш.)алкокси, галогеном, триазолилом, имидазолилом, морфолинилом; А означет метилен; q равно 1; R означает незамещенный С₃-С₅алкенил, в котором двойная связь локализована в конце цепи; незамещенный С₃-С ₅алкинил, в котором тройная связь локализована в конце цепи; или неразветвленный С₃-С₅алкил, монозамещенный или тризамещенный в конце цепи галогеном, и его фармацевтически приемлемые соли.

7. Соединение формулы I по п.1, выбранное из группы, включающей

(R)-2-[(4-хлорбензил)(4-пропоксибензолсульфонил)амино]-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-фторбензил)амино}-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-{(4-хлорбензил)[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-{(4-фторбензил)[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-{(4-фторбензил)[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-{(4-хлорбензил)[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-{(4-фторбензил)[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-хлорбензил)амино]-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-фторбензил)амино]-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(3-метоксибензил)амино]-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-метоксибензил)амино]-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-{(4-хлорбензил)[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-{(4-фторбензил)[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-{[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-{(4-фторбензил)[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-хлорбензил)амино]-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(3-метоксибензил)амино]-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-метоксибензил)амино]-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-{(4-хлорбензил)[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-фторбензил)амино}-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{(4-хлорбензил)[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{(4-фторбензил)[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{(4-хлорбензил)[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{(4-фторбензил)[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил]амино)-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-З-фенилпропионамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-хлорбензил)амино]-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-фторбензил)амино]-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(3-метоксибензил)амино]-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-метоксибензил)амино]-N-гидрокси-3-фенилпропионамид,

(R)-2-{(4-хлорбензил)[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-фторбензил)амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-{(4-хлорбензил)[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-{(4-фторбензил)[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-{[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид

(R)-2-{[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид

(R)-2-{(4-хлорбензил)[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-{(4-фторбензил)[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-хлорбензил)амино]-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-фторбензил)амино]-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(3-метоксибензил)амино]-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-метоксибензил)амино]-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-фторбензил)амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{(4-хлорбензил)[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{(4-фторбензил)[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{(4-хлорбензил)[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{(4-фторбензил)[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{(4-хлорбензил)[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид,

2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-хлорбензил)амино]-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-(4-хлорбутокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамид,

{(4-метоксибензил)[4-(4,4,4-трифторбутокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид,

{[4-(4-фторпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамид,

[(4-бут-3-ен-1-илоксибензолсульфонил](4-метоксибензил)амино]-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил]пиридин-3-илметиламино}-N-гидроксиацетамид,

[(4-метоксибензил)[4-проп-2-инилоксибензолсульфонил]амино]-N-гидроксиацетамид,

[(4-метоксибензил)[4-бут-2-инилоксибензолсульфонил]амино]-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](2,2-диметилпропил)амино}-N-гидроксиацетамид,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-имидазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-морфолин-4-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(2-циклопропилэтоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(2-циклопропилметоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(3-фурилметоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[2-(3-фурил)этоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

2-{[4-бут-3-енилоксибензолсульфонил](6-фторпиридин-2-ил)метиламино}-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-бут-3-енилоксибензолсульфонил](2-фторпиридин-4-ил)метиламино}-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-бут-3-енилоксибензолсульфонил](6-фторпиридин-3-ил)метиламино}-N-гидроксиацетамид,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(пиперидин-4-илметил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(пиперидин-1-илметил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(морфолин-4-илметил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(пирролидин-1-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(пиперидин-1-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(1,2,3-триазол-2-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолс;ульфонил)(4-(тетразол-1-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(1,3,4-триазол-1-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(1,2,3-триазол-1-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(пиррол-1-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамид,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-диметиламинобензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(3-фурил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамид,

2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(тиен-5-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамид,

гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-морфолин-4-илметилбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-(морфолин-4-илметил)бензил)амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](хинолин-4-илметил)амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](имидазол-4-илметил)амино}-N-гидроксиацетамид,

2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](1,2,4-триазол-3-илметил)амино}-N-гидроксиацетамид,

и их фармацевтически приемлемые соли.

8. Фармацевтическая композиция, обладающая ингибирующей активностью в отношении матриксной металлопротеазы (ММП), предназначенная для лечения состояний или заболеваний, связанных с ММП, у человека или животного, включающая соединение формулы I по любому из пп.1-7 или фармацевтически приемлемую соль такого соединения в смеси с фармацевтическим носителем.

9. Соединение формулы I по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемая соль для приготовления лекарственного средства для лечения состояний или заболеваний, связанных с ММР2.

10. Соединение формулы I по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемая соль предназначенное для лечения гиперпролиферативных заболеваний, связанных с ММР2.

11. Соединение формулы I по любому из пп.1-7 или фармацевтически приемлемая соль такого соединения для приготовления лекарственного средства для лечения состояний или заболеваний, связанных с ММР.

12. Соединение формулы I по любому из пп.1-7 или фармацевтически приемлемая соль такого соединения для приготовления фармацевтической композиции для использования в химиотерапии опухолей.

13. Соединение формулы I по любому из пп.1-7 или фармацевтически приемлемая соль такого соединения для приготовления лекарственного средства для использования в химиотерапии опухолей.

14. Соединение формулы I по любому из пп.1-7 или фармацевтически приемлемая соль такого соединения для приготовления лекарственного средства для использования в химиотерапии хронического обструктивного заболевания легких (ХОЗЛ) или астмы.

15. Способ получения производного -аминогидроксамовой кислоты формулы I

где R₁, R₂ R₃, A, q и R имеют значения, указанные выше для соединения формулы I в п.1,

или его соли, который включает взаимодействие соединения формулы II

где R, q, R₁ и R₂ имеют значения, указанные выше для соединения формулы I, черный диск означает, что соединение присоединено к полимерной смоле, а присутствующие в соединении свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко удаляемыми защитными группами, в пригодном растворителе с трифенилфосфином, спиртом структуры III

где А и R₃ имеют значения, указанные выше для соединения формулы I,

и диэтиловым эфиром азодикарбоновой кислоты, причем присутствующие в соединении свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко удаляемыми защитными группами или в соответствии с принципом скрытой функции находятся в форме, которая может быть превращена в функциональные группы, с последующим отщеплением продукта реакции от полимерной смолы и, если необходимо получить соль, превращение полученного свободного соединения формулы I в соль, или, если необходимо получить свободное соединение, превращение полученной соли соединения формулы I в свободное соединение.

16. Соединение формулы II

где R, q, R₁ и R₂ имеют значения, указанные выше для соединения формулы I, черный диск означает, что соединение присоединено к полимерной смоле, а присутствующие в соединении свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко удаляемыми защитными группами,

или его соль.

17. Соединение формулы IV

где R, q, A, R₁, R₂ и R₃ имеют значения, указанные выше для соединения формулы I,

а присутствующие в соединении свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко удаляемыми защитными группами,

или его соль.

18. Соединение формулы V

где R, q, A, R₁, R₂ и R₃ имеют значения, указанные выше для соединения формулы I, а присутствующие в соединении свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко удаляемыми защитными группами,

или его соль.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к производным арилсульфонамидо-замещенной гидроксамовой кислоты, к способам и новым промежуточным соединениям для их получения, фармацевтическим композициям, включающим вышеуказанные производные, фармацевтическим композициям, включающим селективные ингибиторы ММП2, к применению производных гидроксамовой кислоты в качестве лекарственных средств, способу лечения ММП-, прежде всего ММП2-зависимых заболеваний, прежде всего гиперпролиферативных заболеваний или состояний млекопитающих, связанных с ММП, прежде всего ММП2, к ингибированию с использованием селективных инигибиторов ММП2, прежде всего производных гидроксамовой кислоты формулы I, или фармацевтических композиций, включающих селективные ингибиторы ММП2, прежде всего производные гидроксамовой кислоты формулы I.

Прежде всего, изобретение относится к производным -аминогидроксамовой кислоты формулы I,

где

R₁ означает водород, замещенный или незамещенный арил, (низш.)алкил, замещенный или незамещенный карбоциклический арил(низш.)алкил, замещенный или незамещенный гетероциклический (низш.)алкил, замещенный или незамещенный С ₃-С₇циклоалкил, замещенный или незамещенный С₃-С₇циклоалкил(низш.)алкил, гидрокси(низш.)алкил, (низш.)алкокси(низш.)алкил, (низш.)алкил(тио, сульфинил или сульфонил)(низш.)алкил, амино(низш.)алкил или моно- или ди(низш.)алкиламино(низш.)алкил;

R₂ означает водород или (низш.)алкил,

R₃ означает замещенный или незамещенный С₃ -С₇циклоалкил, замещенный или незамещенный карбоциклический арил, замещенный или незамещенный гетероциклический арил, замещенный или незамещенный гетероциклил или (низш.)алкил,

А означает C₁-С₃алкилен, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом,

q равно 1-5;

R означает С₂ -С₇алкил, моно-, ди- или тризамещенный галогеном, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси, циано, С₃-С ₅циклоалкилом или незамещенным или замещенным С ₃-С₆гетероарилом, включающим один или два гетероатома, выбранных из группы О, S и N, или С₃-С₇ алкенил, или С₃-С₇алкинил, который в каждом случае является незамещенным или моно-, ди- или тризамещенным галогеном, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси, циано, С ₃-С₅циклоалкилом или незамещенным или замещенным С₃-С₆гетероарилом, включающим один или два гетероатома, выбранных из группы О, S и N,

и к их фармацевтически приемлемым пролекарствам и их фармацевтически приемлемым солям.

Соединения формулы I являются ингибиторами матрикс-деградирующих металлопротеиназ (ММП) и применяются для терапии состояний, связанных с этими ферментами.

q предпочтительно равен 1-3, как правило, равен 1 или 2, предпочтительно 1. Только если это возможно стереохимически, q может быть равен 4 или 5. Если q равно 1, OR находится, например, в положении 3 или предпочтительно в положении 4.

В предпочтительном варианте осуществления изобретения R₁ или R₂ означают водород. В другом предпочтительном варианте осуществления изобретения R₁ и R₂ каждый означает водород.

Если не указано иное, термины, используемые в данном тексте, имеют указанные значения в объеме настоящего изобретения.

Например, галоген означает фтор, хлор, бром или иод, предпочтительно фтор или хлор.

Если не указано иное, органические радикалы, обозначаемые в данном тексте как "низший" (низш.), содержат не более 7, предпочтительно не более 4 углеродных атомов.

Арил означает карбоциклический или гетероциклический арил.

(Низш.)алкил может быть разветвленным или неразветвленным, может включать от 1 до 7 атомов углерода, предпочтительно 1-4 атома углерода, например может означать метил, этил, пропил, бутил, изопропил и изобутил.

Карбоциклический арил означает моноциклический или бициклический арил, предпочтительно незамещенный фенил,

или фенил, моно-, ди- или тризамещенный одним, двумя или тремя радикалами, выбранными из группы (низш.)алкил, (низш.)алкокси, гидрокси, галоген, циано, трифторметил, (низш.)алкиламино, ди(низш.)алкиламино, фенокси или фенил, необязательно замещенный группой (низш.)алкокси, (низш.)алкил, галоген, циано, нитро или трифторметил,

или фенил, дизамещенный по соседним атомам углерода группой (низш.)алкилен-диокси, такой, как метилендиокси,

или фенил, замещенный гетероциклическими радикалами, как описано ниже, прежде всего пирролил, имидазолил, триазолил, тетразолил, фурил, тиенил, морфолинил, пирролидинил, пиперидинил, или (низш.)алкил, замещенный гетероциклическими радикалами, как описано ниже, прежде всего имидазолил, триазолил, хинолинил или морфолинил,

или 1- или 2-нафтил.

Предпочтительны незамещенный фенил или фенил, монозамещенный группой (низш.)алкокси, фенокси, фенил, галоген или трифторметил. Более предпочтительны фенил или фенил, монозамещенный группой (низш.)алкокси, галоген или трифторметил.

Карбоциклический арил(низш.)алкил предпочтительно означает арилС₁-С₄алкил с прямой или разветвленной цепью, в котором карбоциклический арил имеет значения, указанные выше, например бензил или фенил(этил, пропил или бутил), каждый из которых является незамещенным или замещенным в фенильном цикле, как указано выше для группы карбоциклический арил, предпочтительно необязательно замещенный бензил.

Гетероциклические радикалы представляют собой, прежде всего, моно- или бициклические аза-, тиа-, окса-, тиаза-, оксаза- или диазарадикалы ароматического характера и отчасти или прежде всего означают полностью насыщенные гетероциклические радикалы этого типа, возможно замещенные одной, двумя или тремя функциональными группами. Эти радикалы связаны с остатком молекулы С-С связью и, прежде всего, означают моноциклические или бициклические радикалы, включающие один атом азота, кислорода или серы, и, прежде всего, ароматические радикалы этого типа, например 2-пиррил или 3-пиррил, пиридил, например, 2-, 3- или 4-пиридил, а также тиенил, например 2- или 3-тиенил, или фурил, например 2-фурил; аналогичные бициклические радикалы с одним атомом азота, кислорода или серы, означают, например, индолил, такой как 2- или 3-индолил, хинолил, такой как 2- или 4-хинолил, изохинолил, такой как 3- или 5-изохинолил, бензофуранил, такой как 2-бензофуранил, хроменил, такой как 3-хроменил, или бензотиенил, такой как 2- или 3-бензотиенил. Приемлемые моноциклические и бициклические радикалы, содержащие более одного гетероатома, включают, например, имидазолил, такой как 2-имидазолил, пиримидинил, такой как 2-или 4-пиримидинил, оксазолил, такой как 2-оксазолил, изоксазолил, такой как 3-изоксазолил, или тиазолил, такой как 2-тиазолил, или бензимидазолил, такой как 2-бензимидазолил, бензоксазолил, такой как 2-бензоксазолил, или хиназолил, такой как 2-хиназолинил. Кроме того, приемлемы частично или, прежде всего, полностью насыщенные аналогичные радикалы, такие как 2-тетрагидрофурил, 4-тетрагидрофурил, 2- или 3-пирролидил, 2-, 3- или 4-пиперидил, и, кроме того, 2- или 3-морфолинил, 2- или 3-тиоморфолинил, 2-пиперазинил и N,N'-бис(низш.)алкил-2-пиперазинил.

Гетероциклический радикал может быть замещен одним, двумя или тремя идентичными или различными заместителями (функциональными группами), наиболее пригодны следующие заместители: свободные гидроксигруппы, их простые и сложные эфиры, меркапто и (низш.)алкилтиогруппы и замещенные и незамещенные фенилтиогруппы, атомы галогена, оксогруппы, которые могут быть в форме формил (например, альдегидо) и кетогрупп, и, кроме того, соответствующие ацетали или кетали, азидо и нитрогруппы, первичные, вторичные и, предпочтительно, третичные аминогруппы, первичные и вторичные аминогруппы, ациламиногруппы и диациламиногруппы, защищенные обычными защитными группами, и немодифицированные или функционально модифицированные сульфогруппы, такие как сульфамоилгруппы или сульфогруппы, присутствующие в солевой форме. Все указанные функциональные группы не связаны с атомом углерода со свободной валентностью и предпочтительно отделены от него двумя или более углеродными атомами. Кроме того, гетероциклический радикал может иметь свободные и функционально модифицированные карбоксильные группы, такие как карбоксильные группы в солевой форме или в форме сложноэфирной, карбамоил, уреидо или гуанидиногрупп, которые могут содержать или могут не содержать один или два углеводородных радикала, и цианогрупп.

Замещенный карбоциклический арил R₃ предпочтительно означает фенил, замещенный галогеном, (низш.)алкокси, (низш.)алкил, ди(низш.)алкиламино, триазолил, прежде всего, 1,2,4-триазолил, 1,3,4-триазолил или 1,2,3-триазолил, имидазолил, например 1-имидазолил, морфолинил, пирролидинил, пиперидинил, тетразолил, пирролил, фурил, предпочтительно 3-фурил, тиенил, морфолинил(низш.)алкил, хинолинил(низш.)алкил, имидазолил(низш.)алкил и триазолил(низш.)алкил.

В наиболее предпочтительном варианте осуществления изобретения R₃ означает замещенный карбоциклический арил, причем в указанном варианте замещенный карбоциклический арил означает фенил, который предпочтительно замещен в 4 положении, предпочтительно триазолилом, прежде всего 1,2,4-триазол-1-илом.

Гетероциклический арил R₃ означает моноциклический или бициклический гетероарил, например пиридил, хинолил, изохинолил, бензотиенил, бензофуранил, бензопиранил, бензотиопиранил, фуранил, пирролил, тиазолил, оксазолил, изоксазолил, триазолил, тетразолил, пирразолил, имидазолил, тиенил или любой вышеуказанный радикал, замещенный (низш.)алкилом или галогеном. Пиридил означает 2-, 3- или 4-пиридил. Тиенил означает 2- или 3-тиенил, преимущественно 2-тиенил. Хинолил предпочтительно означает 2-, 3-или 4-хинолил, преимущественно 2-хинолил. Изохинолил предпочтительно означает 1-, 3- или 4-изохинолил. Бензопиранил, бензотиопиранил предпочтительно означают 3-бензопиранил или 3-бензотиопиранил, соответственно. Тиазолил предпочтительно означает 2- или 4-тиазолил, преимущественно 4-тиазолил. Триазолил предпочительно означает 2- или 5-(1,2,4-триазолил). Тетразолил предпочительно означает 5-тетразолил. Имидазолил предпочительно означает 4-имидазолил. Гетероциклический арил предпочительно означает пиридил. Он может быть замещен одним, двумя или более идентичными или различными заместителями, указанными выше для гетероциклических радикалов.

Гетероциклический R₃ означает насыщенные или частично ненасыщенные, моноциклические или бициклические гетероциклические радикалы, включающие от 3 до 10 атомов углерода и один или два гетероатома, выбранные из группы, включающей О, S и N. Предпочтительно гетероциклический R₃ выбирают из группы, включающей пиперидинил, морфолинил, пирролидинил, пирролинил, пиперазинил и тетрагидропиранил. Он может быть замещен одним, двумя или более идентичными или различными заместителями, указанными выше для гетероциклических радикалов. Предпочтительно R₃ означает незамещенный или замещенный (низш.)алкил.

Гетероциклический (низш.)алкил предпочтительно означает прямой или разветвленный гетероциклический С₁ -С₄алкил, в котором гетероциклический имеет значения, указанные выше, например 2-, 3- или 4-пиперидилметил или (2- или 3-морфолинил)(этил, пропил или бутил).

С₃ -С₇Циклокалкил означает насыщенный циклический углеводород, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом, и содержащий от 3 до 7 атомов углерода в цикле, преимущественно циклопентил или циклогексил, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом.

Циклоалкил(низш.)алкил предпочтительно означает (циклопентил- или циклогексил)(метил или этил).

(Низш.)алкокси(или алкилокси)группа предпочтительно содержит 1-4 углеродных атома, предпочтительно 1-3 углеродных атома, и означает, например, этокси, пропокси, изопропокси или, наиболее предпочтительно, метокси.

(Низш.)алкилтиогруппа предпочтительно содержит 1-4 углеродных атома, предпочтительно 1-3 углеродных атома, и означает, например, этилтио, пропилтио, изопропилтио или, наиболее предпочтительно, метилтио.

(Низш.)алкилсульфинилгруппа предпочтительно содержит 1-4 углеродных атома, предпочтительно 1-3 углеродных атома, и означает, например, этилсульфинил, пропилсульфинил, изопропилсульфинил или, наиболее предпочтительно, метилсульфинил.

(Низш.)алкилсульфонилгруппа предпочтительно содержит 1-4 углеродных атома, предпочтительно 1-3 углеродных атома, и означает, например, этилсульфонил, пропилсульфонил, изопропилсульфонил или, наиболее предпочтительно, метилсульфонил.

(Низш.)ацилоксигруппа предпочтительно содержит 1-4 углеродных атома и означает, например, ацетокси, пропаноилокси или бутаноилокси.

Ацилпроизводные пролекарства предпочтительно означают такие пролекарства, которые получены из органической угольной кислоты, органической карбоновой кислоты или карбаминовой кислоты.

Ацилпроизводным, полученным из органической карбоновой кислоты, является, например, (низш.)алканоил, фенил(низш.)алканоил или незамещенный или замещенный ароил, такой, как бензоил.

Ацилпроизводным, полученным из органической угольной кислоты, является, например, алкоксикарбонил, незамещенный или замещенный ароматическим радикалом, или циклоалкоксикарбонил, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом.

Ацилпроизводным, полученным из карбаминовой кислоты, является, например, аминокарбонил, замещенный (низш.)алкилом, арил(низш.)алкилом, арилом, (низш.)алкиленом или (низш.)алкиленом, прерванным О или S.

Ациламино предпочтительно означает (низш.)алканоиламино или (низш.)алкоксикарбониламино.

C₁-С₃алкилен может означать, например, метилен, этилен, 1,2-диметилэтилен, 1,1-диметилэтилен, пропилен, 1,2-диметилпропилен, 2,2-диэтилпропилен или 1-метил-2-этилпропилен. C₁-С₃алкилен предпочтительно незамещен, наиболее предпочтительно означает метилен или этилен.

Радикал R, С₂-С₇алкил, имеет разветвленную или неразветвленную цепь, содержит от 2 до 7 атомов углерода и предпочтительно моно- или дизамещен галогеном, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси, циано, С₃-С₅циклоалкил или С₃ -С₆гетероарилгруппой, включающей один или два гетероатома, выбранные из группы О, S и N, и незамещенной или замещенной (низш.)алкилом. Более предпочтителен С₃-С₆гетероарил, монозамещенный галогеном, наиболее предпочтительно хлором или фтором, С ₃-С₅циклоалкил, наиболее предпочтительно циклопропил, или незамещенный С₃-С₆гетероарил, включающий один или два гетероатома, предпочтительно один гетероатом, выбранный из группы О, S и N, например фурил, тиенил, пирролил, имидазолил, оксазолил, тиазолил или пиридинил. Радикал R, С₂-С ₇алкил, означает, например, 7-фторгептил, 7-хлоргептил, 6-фторгексил, 6-хлоргексил, 5-хлорпентил, 5-нитропентил,5-цианопентил, 5-фторпентил, 4-фторпентил, 5,5,5-трифторпентил, 5-ацетоксипентил, 4-хлорбутил, 4-фторбутил, 3-фторбутил, 4,4,4-трифторбутил, 3,4-дихлорбутил, 4,4-дифторбутил, 4-ацетоксибутил, 4-пропионилоксибутил, 4-нитробутил, 4-цианобутил, 4-трифторметоксибутил, 3,4-дицианобутил, 4,4-дицианобутил, 4-ацетилокси-2,2-диметилбутил, 4-фтор-1-метилбутил, 1-этил-4-фторбутил, 3-хлорпропил, 3-фторпропил, 2-фторпропил, 3-цианопропил, 3-трифторметоксипропил, 2,3-дихлорпропил, 3-хлор-1,2-диметилпропил, 2-хлор-3-фторпропил, 3-циано-1,2-диметилпропил, 2-циано-3-фторпропил, 2-нитро-3-фторпропил, 2-циано-3-хлорпропил, 3,3,3-трифторпропил, 2-хлорэтил, 2-фторэтил, 2-цианоэтил, 2-циклопропилэтил, 3-циклопропилбутил, 2-циклобутилэтил, циклопропилметил, циклобутилметил, 3-фурилметил или 2-(3-фурил)этил. Предпочтительно радикал R, С₂-С₇алкил, содержит 3-5 атомов углерода и является неразветвленным. Предпочтительно заместители локализованы в конце цепи. Наиболее предпочтительно радикал R, С₃-С₇алкил, означает 4-хлорбутил, 4-фторбутил, 3-хлорпропил или 3-фторпропил.

Радикал R, С₃-С₇алкенил, может быть разветвленным или неразветвленным и содержит от 3 до 7 атомов углерода. Например, радикал R, С₃-С₇алкенил, означает 2-пропенил, 2-хлорметил-2-пропенил, 3-бутенил, 2-бутенил, 4-хлор-2-бутенил, 4-фтор-2-бутенил, 4-ацетокси-2-бутенил, 2-изобутенил, 2-пентенил, 3-пентенил, 5-хлор-2-пентенил, 5-фтор-3-пентенил, 5-нитро-З-пентенил, 4-пентенил, 5-гексенил, 3-хлор-5-гексенил, 4-гексенил или 6-гептенил. Предпочтительно радикал R, С₃-С₇алкенил, содержит 3-5 атомов углерода и является незамещенным. Двойная связь предпочтительно локализована в конце цепи. Предпочтительно радикал R, С₃-С₇алкенил, означает 4-пентенил, 3-бутенил или 2-пропенил, наиболее предпочтителььно 3-бутенил.

Радикал R, С₃-С₇алкинил, может быть разветвленным или неразветвленным и содержит от 3 до 7 атомов углерода. Предпочтительно радикал R, С₃-С₇ алкинил, содержит 3-5 атомов углерода и является незамещенным. Например, радикал R, С₃-С₇алкинил, означает 2-пропинил, 2-бутинил, 4-циано-2-бутинил, 4-нитро-2-бутинил, 3-бутинил, 5-хлор-2-пентинил, 2-пентинил, 5-фтор-3-пентинил, 5-хлор-3-пентинил, 3-пентинил, 4-гексинил или 4-гептинил, предпочтительны 2-пропинил, 2-бутинил, 2-пентинил или 3-пентинил. Предпочтительно тройная связь локализована в конце цепи. Прежде всего, удовлетворительные результаты получены с соединениями, у которых R означает 2-пропинил.

Фармацевтически приемлемыми солями кислотных соединений по изобретению являются соли, образованные с основаниями, а именно катионные соли, такие как соли щелочных и щелочно-земельных металлов, таких как натрий, литий, калий, кальций, магний, а также аммониевые соли, такие как соли аммония, триметиламмония, диэтиламмония и трис(гидроксиметил)метиламмония.

Кроме того, аналогичным образом входящая в структуру основная группа, такая как пиридил, может образовывать кислотно-аддитивные соли с неорганическими кислотами, органическими карбоновыми кислотами и органическими сульфокислотами, например с хлористоводородной кислотой, метансульфокислотой, малеиновой кислотой.

Соединения формулы I обладают ценными фармакологическими свойствами. В частности, они обладают ингибирующими активностями, которые представляют интерес с фармакологической точки зрения.

Представители семейства разлагающих матрикс металлопротеиназ (ММР), такие как желатиназа, стромелизин и коллагеназа, принимают участие в различных биологических процессах, например в разложении матрикса ткани (например, коллагеновый коллапс) и во многих патологических состояниях, включающих аномальный метаболизм матрикса соединительной ткани и базальной мембраны, таких как артрит (например, остеоартрит и ревматоидный артрит), изъязвление ткани (например, изъязвление роговицы, эпидермальной ткани и желудка), аномальное заживление ран, болезнь периодонта, болезнь кости (например, болезнь Педжета и остеопороз), метастазы или инвазия опухоли, псориаз, а также ВИЧ-инфекция (J.Leuk. Biol., 52 (2): 244-248, 1992), атеросклероз, дилатация желудочка и рестеноз при ангиопластике.

Металлоэластаза макрофага является еще одним представителем разлагающих матрикс металлопротеиназ, и она принимает участие в разложении эластина и участвует в таких патологических состояниях, как, например, заболевания легкого, такие как эмфизема и ХОЛЗ (хроническое обструктивное заболевание легких).

Избирательность действия обычно является важным преимуществом фармакологически активных веществ, поскольку побочные действия лекарственных средств, включающих соединения избирательного действия, ниже по сравнению с лекарственными средствами, которые включают соединения с меньшей избирательностью. Поскольку семейство ММР состоит из нескольких различных ферментов, которые принимают участие в различных биологических процессах, то существует потребность в избирательных ингибиторах индивидуальных ММР или подгрупп семейства ферментов ММР.

Соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые соли ингибируют разлагающую матрикс металлопротеиназу, такую как желатиназа, стромелизин и металлоэластаза макрофага, а также матриксные металлопротеиназы мембранного типа, такие как МТ1-ММР и МТ2-ММР. Оно особенно пригодны в качестве ингибиторов МТ1-ММР и ММР2 (желатиназа А).

Известны многочисленные пептиды, которые оказывают воздействие на биологические субстанции типа ферментов, клеток или рецепторов, участвующих в патологических процессах или болезнях. Недостатком пептидов является то, что они легко поддаются гидролизу в физиологических условиях, особенно в физиологических условиях, характерных для крови или желудка теплокровных животных. Соединения формулы I обладают преимуществом, поскольку они не являются пептидами. Соединения формулы I представляют собой не относящиеся к пептидам ингибиторы ММР2.

Эффективность соединений оценивают с использованием обычных хорошо известных в данной области фармакологических тестов, которые проиллюстрированы в настоящем описании.

Вышеуказанные свойства можно продемонстрировать в опытах in vitro и in vivo преимущественно при использовании млекопитающих, например крыс, морских свинок, собак, кроликов, или выделенных органов и тканей, а также препаратов ферментов млекопитающих. Указанные соединения можно применять in vitro в форме растворов, например, предпочтительно водных растворов, и in vivo либо энтерально, либо парентерально, предпочтительно перорально, например, в виде суспензии или водного раствора. Дозы, применяемые in vitro, могут находиться в диапазоне приблизительно от 10^-5 до 10^-10 молей. Дозы, применяемые in vivo, в зависимости от пути введения могут составлять от 0,1 до 100 мг/кг.

Противовоспалительную активность можно определять с использованием хорошо известных в данной области стандартных моделей воспаления и артрита у животных, например на модели вызванного адъювантом артрита у крыс и на модели вызванного коллагеном II артрита у мышей (Mediators of Inflam. 1, 273-279 (1992)).

Один из опытов, позволяющих определить ингибирование активности стромелизина, основан на гидролизе вещества Р с использованием модифицированного метода Харрисона и др. (Harrison R.A., Teahan J. и Stein R. A semicontinuous high performance chromatography based assay for stromelysin, Anal. Biochem. 180, 110-113 (1989)). В этом опыте вещество Р гидролизуют с помощью рекомбинантного человеческого стромелизина, получая фрагмент, а именно вещество Р 7-11, который можно количественно оценивать с помощью ЖХВР. В типичном опыте 10 мМ маточный раствор соединения, подлежащего тестированию, разбавляют в буфере для анализа до 50 мкМ, смешивая в соотношении 1:1 с 8 мкг рекомбинантного человеческого стромелизина (молекулярная масса 45-47 кДа, 2 единицы; где 1 единица продуцирует за 30 мин 20 ммолей вещества Р 7-11), и инкубируют вместе с 0,5 мМ веществом Р в конечном объеме 0,125 мл в течение 30 мин при 37°С. Реакцию прекращают, добавляя 10 мМ ЭДТК, и вещество Р 7-11 количественно определяют с помощью ОФ-8-ЖХВР. Значение IC₅₀ в качестве показателя ингибирующей активности в отношении стромелизина и значение K_i оценивают, используя в качестве контроля реакцию без ингибитора.

Эффективность соединений по изобретению в опытах in vivo можно определять на кроликах. Обычно четырем кроликам вводят перорально соединение за 4 ч до внутрисуставной инъекции в оба коленных сустава (N=8) 40 ед. рекомбинантного человеческого стромелизина, растворенного в 20 мМ Трис, 10 мМ CaCl₂ и 0,15М NaCl, pH 7,5. Через 2 ч кроликов умерщвляют, собирают синовиальную жидкость и количественно оценивают фрагменты кератансульфата (КС) и сульфированного гликозаминогликана (S-ГАГ), которые высвобождаются в сустав. Содержание кератансульфата измеряют по ингибированию с помощью ELISA в соответствии с методом Тонара (Thonar E.J.-M.A., Lenz M.E., Klinsworth G.K., Caterson В., Pachman L.M., Glickman P., Katz R., Huff J., Keuttner K.E., Arthr. Rheum. 28, 1367-1376 (1985)). Содержание сульфированных гликозаминогликанов сначала оценивают по разложению синовиального лаважа гиалуронидазой из бактерий Streptomices, а затем измеряют связывание с красителем DMB по методу Гольдберга (Goldberg R.L. и Kolibas L., Connect. Tiss. Res., 24, 265-275 (1990)). Для внутривенного введения соединения растворяют в 1 мл ПЭГ-400, а при применении перорально соединение вводят в 5 мл обогащенного кукурузного крахмала на килограмм веса тела.

Ингибирующую активность в отношении металлоэластазы макрофага (ММЕ) можно определять путем измерения ингибирования разложения [³Н]-эластина с помощью укороченной рекомбинантной мышиной металлоэластазы макрофага следующим образом.

Приблизительно 2 нг укороченной рекомбинантной мышиной металлоэластазы макрофага (FASEB Journal, том 8, А151, 1994), очищенной с помощью хроматографии на колонке, заполненной Q-сефарозой, инкубируют при 37°С в течение ночи с тестируемыми соединениями в требуемой концентрации в присутствии 5нМ CaCl₂, 400 нМ NaCl, [³Н]-эластина (60000 импульсов в мин/пробирку) и 20 мМ Трис, рН 8,0. Образцы вращают на микроцентрифуге при 12000 об/мин в течение 15 мин. Для количественной оценки разложения [³Н]-эластина с помощью сцинтилляционного счетчика измеряют радиоактивность в аликвотных количествах супернатанта. Значение IC₅₀ определяют с использованием различных концентраций тестируемых соединений и вычисляют процент ингибирования активности фермента.

Ингибирующие активности соединений формулы I в отношении МТ1-ММР, ММР1 (коллагеназа 1) и ММР2" (желатиназа А) можно определить следующим образом.

Маточные растворы субстрата (MCA-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH₂ , Knight C.G,, Willenbrick F., Murphy G., A novel coumarin-labelled peptide for sensitive continous assay of matrix metalloproteinases, FABS lett. 296, 263-266 (1992)) готовят в 100%-ном ДМСО в концентрации 1,0 мМ. Маточные растворы ингибиторов готовят в 100%-ном ДМСО. Для проведения анализов ингибитор разбавляют из раствора в 100%-ном ДМСО, а для получения контрольных образцов заменяют ингибитор равным объемом ДМСО так, чтобы конечная концентрация ДМСО в разбавлениях ингибитора и субстрата во всех анализах составляла 6,0%. Анализы проводят в буфере для анализа (150 мМ NaCl, 10 мМ CaCl₂ , 50 мМ Трис-Cl, рН 7,5, 0,05% Brij-35), содержащем 6,0% ДМСО, причем в нем растворяют и субстрат, и ингибитор. Используемая в анализах концентрация субстрата составляет 10 мкМ. Опыт осуществляют при 37°С. Оценивают изменение флуоресценции при использовании длины волны возбуждения 320 нм и длины волны испускания 340 нм. Реакционную смесь добавляют с дублированием в соответствующие лунки 96-луночного микропланшета для измерения флуоресценции. Реакционную смесь предварительно инкубируют с ингибитором в течение 30 мин, реакцию инициируют, добавляя фермент ММР, и интенсивность флуоресценции измеряют в течение 10 мин. Для определения активности выбирают момент времени, соответствующий линейной части кривой. Результаты опытов по ингибированию выражают в виде концентраций ингибиторов, при которых наблюдается 50%-ное ингибирование (IC ₅₀) активности относительно контрольной реакции (без ингибиторов). В этом опыте для соединений формулы I и их фармакологически приемлемых солей значение IC₅₀ [мкмоль/л] в отношении ингибирования ММР2 составляет 0,0001 и 0,030, как привило, 0,002-0,010, а значение IC₅₀ [мкмоль/л] в отношении ингибирования МТ1-ММР составляет 0,0005 и 0,125, как привило, 0,001-0,050. Для соединений формулы I значение IC₅₀ в отношении ингибирования ММР1 (коллагеназа 1) превышают значения IC ₅₀ в отношении ингибирования МТ1-ММР вплоть до 1000 раз, как правило, превышают примерно в 40-200 раз. Для соединений формулы I значение IC₅₀ в отношении ингибирования ММР1 превышают значения IC₅₀ в отношении ингибирования ММР2 вплоть до 5000 раз, для большинства соединений формулы I превышают примерно в 100-2000 раз.

Применяемые в вышеописанных опытах ферменты получают следующим образом.

МТ1-ММР

Плазмида: Каталитический домен фрагмента кДНК, кодирующего полноразмерный человеческий ген (МТ1-ММР) [получен от проф. Motoharu Seiki, Institute of Medical Science, The University of Tokyo; Sato H., Takino Т., Okada Y., Cao J., Shinagawa A., Yamamoto E. и Sieki M, Nature (London), 370: 61-65 (1994)], апмплифицируют с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). Применяют следующие праймеры: CTCCATATGTACGCCATCCAGGGTCTCAA в качестве смыслового праймера, включающего сайт NdeI на 5'-конце для стартового кодона ATG, и CTCGGATCCTCACCCATAAAGTTGCTGGAT-GCC в качестве смыслового праймера, включающего сайт BamHI с одним стоп-кодоном TGA (1). Полученный в результате ПЦР-продукт, представляющий собой фрагмент длиной 519 т.п.н., субклонируют между уникальными сайтами NdeI и BamHI плазмиды pET11a (фирма Stratagene). Последовательность каталитического домена МТ1-ММР (CD-MT1-MMP) подтверждают с помощью набора для секвенирования с использованием термоячейки с красителем типа ABI PRISMTM с использованием ДНК-секвенатора типа ABI PRISMTM 377 (фирма Perkin Elmer).

Экспрессия и очистка: Субклонированный домен CD-MT1-MMP применяют для трансфекции штамма Е. coli BL21[DE3] (Hanahan D., J. Mol. Biol., 166(4); 557-580 (1983) и экспрессируют в виде нерастворимых внутриклеточных телец. Трансфектатнты выращивают при 37°С в 50 мл среды Лурия-Бертани (LB) в присутствии 50 г/мл ампициллина до достижения плотности клеток ОП₆₀₀ , составляющей 0,6-1,0, и производство CD-MT1-MMP индуцируют с помощью 1 мМ изопропил-1D-галактопиранозида (IPTG). После обработки 5 мг/мл лизоцима и 10 мкг/мл ДНКазы I из собранных клеток выделяют внутриклеточные тельца с помощью детергентного буфера, содержащего 0,2М NaCl, 1% (мас./об.) дезоксихолевой кислоты и 1 об.% Nonodet P-40. Осуществляют солюбилизацию путем ресуспендирования внутриклеточных телец в буфере для солюбилизации, включающем 6М мочевину, 100 мМ 2-меркаптоэтанол и 20мМ Трис-Cl, рН 8,5. Фермент очищают и ренатурируют с помощью 10-миллилитровой заполненной Q-сефарозой (фирма Amersham Pharmacia Biotech.) колонки, уравновешенной 5мМ CaCl₂, 0,02 об.% NaNs в 20мМ Трис-Cl, рН 7,5. После промывки тремя объемами этого же буфера связанные протеины элюируют двумя объемами раствора с линейным градиентом 0,5-1,0М NaCl. Собранные фракции (по 1 мл каждой) подвергают диализу в противотоке уравновешивающего буфера в течение 6 ч. Superdex 0200-колонку (1×15 см) (фирма Amersham Pharmacia) уравновешивают в 20мМ Трис-Cl, рН 7,5, 5мМ CaCl₂, 0,02% NaN₃. Обессоленный образец вносят в Superdex С200-колонку и хроматографируют при скорости потока 0,5 мл/мин. Собирают фракции объемом по 1 мл и аликвоты по 30 мл анализируют с помощью иммуноблоттинга. Объединяют наиболее чистые фракции, концентрируют с помощью мешалки типа Amicon, снабженной мембраной типа YM2, и хранят при -80°С. Элюированный протеин дважды подвергают диализу в противотоке 5 л буфера, включающего 5 мМ CaCl₂, 0,5 мМ ZnSO ₄, 20 мМ Трис-Cl, рН 7,5, затем концентрируют с помощью мешалки типа Amicon, снабженной мембраной типа YM2. В этих условиях рекомбинантные протеины сохраняют растворимость и имеют правильную укладку.

ММР1 (коллагеназа 1)

Плазмида: кДНК человеческой коллагеназы получают с помощью ПЦР с использованием кДНК, полученной из РНК, выделенной из человеческих клеток линии U937 (АТСС No. CRL-2367). Праймеры, которые применяют для получения этой кДНК, представляют собой AAAGAAGCTTAAGGCCAGTATGCACAGCTTTCCT и AAGGCGGCCGCACACCTTCTTTGGACTCACACCA, соответствующие нуклеотидам 58-1526 описанной последовательности кДНК, GenBank, регистрационный номер Х05231. Полученный в результате фрагмент кДНК субклонируют в сайте NotI экспрессионного вектора млекопитающих pBPV-ММТ (Matthias Р. и др. J. Mol. Biol., 187(4): 557-568 (1986)).

Клетки линии С127 (АТСС-линия клеток опухоли молочной железы) выращивают в модифицированной по методу Дульбекко среде Игла, дополненной 10% подвергнутой температурной инактивации фетальной бычьей сыворотки и 1-кратным (IX) раствором антибиотика-противогрибкового агента при 37°С в увлажняющем СО₂-инкубаторе. Клетки, высеянные с плотностью 8×10⁵ в 10-миллиметровые чашки, трансфектируют с использованием метода осаждения фосфатом кальция. За 5 ч до трансфекции среду заменяют свежей средой. Каждую чашку трансфектируют 15 мкг экспрессионного вектора. Клетки промывают дважды с помощью ЗФР через 16-18 ч после трансфекции и инкубируют в среде для выращивания в течение еще 48 ч. Затем клоны отбирают путем инкубации с родственным неомицину антибиотиком G48 в концентрации 400 мкг/мл. Среды отобранных клонов анализируют в отношении экспрессии коллагеназы путем ферментного анализа.

Экспрессия и очистка: 16 л культуральной среды концентрируют до 1,6 л и фермент выделяют с помощью метода, описанного у Wilhelm с соавторами (Proc. Acad. Sci. (USA), 84: 6725-6729 (1987)). Конечный продукт дополнительно очищают на заполненной Superose G-75 (фирма Pharmacia/LKB, Пискатавей, штат Нью-Джерси) колонке для гель-фильтрации, уравновешенной буфером для анализа, который содержит 0,15М NaCl. Объединяют фракции фермента и хранят в виде аликвот при -70°С. Рекомбинантную проколлагеназу (43-45 кДа) активируют с помощью 1 мМ АФРА (ацетат аминонофенил ртути, фирма ICN Pharmaceuticals) в течение 2 ч при 37°С и АФРА удаляют путем интенсивного диализа в противотоке буфера для анализа, содержащего 0,15М NaCl. Активированный фермент (˜36 кДа) хранят в замороженном виде при -70°С до применения.

ММР2 (желатиназа А)

Плазмида: кДНК человеческой proMMP получена от проф. Motoharu Seiki, Institute of Medical Science, The University of Tokyo. кДНК, кодирующую полноразмерную человеческую проММР2, получают с помощью ПЦР из кДНК, полученной из РНК, выделенной из человеческой линии клеток НТ1080 (АТСС No. CCL121). Праймеры, которые применяют для получения этой кДНК, представляют собой GAATTCGATGGAGGCGCTAATGGCCCGG и CTCGAGTCAGCAGCCTAGCCAGTCGGATTTGAT, соответствующие полноразмерной человеческой proMMP указанной последовательности кДНК, GenBank, регистрационный номер J03210. Полученный в результате ПЦР-фрагмент длиной 2,0 т.п.н. клонируют в сайте EcoRI/XhoI вектора pFAST ВАС 1 (рВАС-ММР2) (Collier I.E., Wolhelm S.M., Eisen A.Z., Marmer B.L., Grant G.A., Seltzer J.L., Kronberger A., He C., Bauer E.A. и Goldberg G.I,, J. Biol. Chem., 263: 6579-6587, 1988).

Экспрессия и очистка: Для экспрессии в бакуловирусе r-proMMP2 с помощью рВАС-ММР2 трансформируют компетентные клетки линии DH10BAC, получая бакмидную ДНК r-proMMP2. Рекомбинантной бакмидной ДНК трансфектируют культивируемые клетки насекомых (Tn-клетки) с помощью реагента целлфектина (Cellfectin, фирма Gibco BRL). Рекомбинантный бакуловирус очищают до гомогенных бляшек и применяют для получения маточных растворов с высоким титром рекомбинантного бакуловируса. Экспрессию r-proMMP2 подтверждают с помощью зимографии с использованием желатина.

Культуральные жидкости Tn-клеток, зараженных бакуловирусом, центрифугируют и фильтруют через фильтр с размером пор 0,22 мм, удаляя клеточный дебрис. Рекомбинантная proMMP абсорбирутся желатин-сефарозой 4В (фирма Pharmacia Biotech) в уравновешивающем буфере, который включает 25 мМ Трис-HCl (рН 7,5), 1М NaCl, 10 мМ CaCl₂ , 0,05% Brij 35 при 4°С. После промывки гранул уравновешивающем буфером проММР элюируют с помощью уравновешивающего буфера, который содержит 10% ДМСО. Фермент хранят при 4°С до активации. Для анализа очищенную проММР активируют с помощью 1 мМ АФРА в течение 1 ч при 37°С.

ММР9

ММР9 получают из культуральной среды человеческих моноцитных клеток лейкемии линии ТНР1, обработанных ТРА (12-O-тетрадеканоилфорбол-13-ацетат). Клетки линии ТНР1 поддерживают в культуральной среде DMEM/F-12, дополненной 10% ФТС, и стимулируют к производству про-ММР9 с помощью ТРА (1 нМ) в бессывороточной среде в течение 48 ч. Все процессы очистки осуществляют при 4°С. Один литр культуральной среды концентрируют до 100 мо с помощью устройства типа Centricon (фирма Amicon) и вносят в колонку (1×8 см), заполненную желатином-сефарозой, которая уравновешена 50 мМ Трис-Cl (рН 8,0), 300 мМ NaCl. Фракцию, содержащую про-ММР9, элюируют с помощью 10% ДМСО в 50 мМ Трис-Cl (рН 8,0), 300 мМ NaCl, а затем подвергают диализу в противотоке 50 мМ Трис-Cl (рН 7,5), 150 мМ NaCl. Фракцию концентрируют с помощью устройства типа Centricon и хроматографируют на колонке, заполненной Sephadex G200 (2×20 см), уравновешенной 50 мМ Трис-Cl (рН 7,5), который содержит 150 мМ NaCl. Очищенную про-ММР9 хранят при -80°С в виде маточного раствора, и необходимое количество профермента используют для активации. Про-ММР9 активируют с помощью 1 мМ АФРА (ацетат аминофенилртути, фирма ICN Pharmaceuticals) в 50 мМ Трис-Cl (рН 7,5), который содержит 150 мМ NaCl, 10 мМ CaCl₂, 0,05% Brij 35 (буфер для анализа ММР) в течение 18 ч при 37°С, и АФРА удаляют путем интенсивного диализа в противотоке буфера для анализа ММР. Активированную ММР9 хранят при -80°С до использования.

Анализ ММР9

Затем активированную ММР-9 (82 кДа) применяют для скрининга соединений. В этом опыте флуорогенный пептид 2-N-метиламинобензойная кислота (Nma)-Gly-Pro-Gln-Gly-Leu-Ala-Gly-Gln-Lys-N -(2,4-динитрофенил) (Dnp)-NH₂ (Peptide Institute, Осака, Япония) в концентрации 25 мкМ применяют в качестве единственного субстрата во всех анализах ММР. Маточные растворы субстрата готовят в 100% ДМСО в концентрации 1,0 мМ. Анализы осуществляют в буфере для анализа ММР. Реакционную смесь добавляют с дублированием в соответствующие лунки 96-луночного титрационного микропланшета для измерения флуоресценции и предварительно инкубируют при 37°С в течение 30 мин. Реакцию инициируют, добавляя 0,5 нМ активированную ММР9. Маточные растворы каждого ингибитора готовят путем растворения в 100% ДМСО. Ингибиторы добавляют в смесь для анализа из разбавленных с помощью 100% ДМСО растворов, приготовленных из маточных растворов. В контрольные образцы добавляют такой же объем ДМСО. Конечная концентрация ДМСО в растворах ингибитора и субстрата составляет 5%. Повышение флуоресценции оценивают при 450 нм, используя длину волны возбуждения 355 нм. Для определения активности выбирают момент времени, соответствующий линейной части кривой. Результаты опытов по ингибированию выражают в виде концентрации ингибитора, при который наблюдается 50%-ное ингибирование (IC₅₀ ) активности относительно ингибирования в контрольной реакции.

Противоопухолевую активность соединений формулы I можно продемонстрировать, например, на моделях метастазирующих опухолей, используя трансфектированные зеленым флуоресцентным протеином (EGFP) клетки линии НТ1080, путем оценки интенсивности флуоресценции опухолевых клеток, метастазирующих в легкое бестимусных мышей, которым внутривенно вводят опухолевые клетки, или с помощью клеток меланомы B16-F10, оценивая узлы опухоли легкого после внутривенной инъекции опухолевых клеток в мышей линии BDF1.

Трансфектированные EGFP клетки линии НТ1080: Бестимусным мышам инъецируют в хвостовую вену суспензию опухолевых клеток [2×10⁶ клеток/0,1 мл ЗФР (забуференный фосфатом физиологический раствор)]. Животным вводят перорально соединения за 1 ч и через 5 ч после инъекции клеток в первый день эксперимента (день 0). После этого животных обрабатывают дважды в день, первый раз в 9-10,5 ч утра, а второй раз в 17,5-19 ч. Соединения вводят в виде суспензии в 1% карбоксиметилцеллюлозе (фирма Wako, Япония) в дозе 60 мг/кг дважды в день. Контрольной группе вводят только носитель. В 17-ый день эксперимента после умерщвления животных у них удаляют легкие. Выделенные ткани легкого разрезают на кусочки диаметром примерно 2-3 мм и затем примерно 100 мг тканей суспендируют в 0,2 мл ЗФР в микроцентрифужных пробирках с последующей острожной гомогенизаций и центрифугированием. Клетки промывают трижды при комнатной температуре 1 мл лизирующего реагента (150 мМ NH₄Cl, 0,1 мМ ЭДТК-4-Na, 10 мМ КНСО₃ , рН 7,4), предназначенного для лизиса эритроцитов, и дважды 1 мл ЗФР. После последней промывки клетки лизируют с помощью 0,5 мл 1%-ного Тритона в ЗФР. После центрифугирования при 15000 об/мин в течение 5 мин 0,23 мл каждого супернатанта переносят в лунку 96-луночного планшета. Интенсивность флуоресценции определяют с помощью планшет-ридера для оценки флуоресценции (типа Cytoflour II) при длинах волн возбуждения и испускания 485 и 530 нм соответственно. Полученные значения флуоресценции стандартизуют по отношению к массе сырой ткани легкого. В этом опыте для соединения из примера 68 обнаружено снижение флуоресценции на 74% по сравнению с контролем, в котором используют только носитель.

Опыты с использованием в качестве модели метастазирующей меланомы B16-F10 осуществляют согласно методу Фидлера. Клетки собирают путем трипсинизации и однократно промывают содержащей сыворотку средой и трижды холодным ЗФР и затем держат на льду. Мышам инъецируют в хвостовую вену суспензию опухолевых клеток (2×10⁶ клеток/0,1 мл ЗФР). Животным вводят перорально соединения за 1 ч и через 5, 23 и 29 ч после инъекции клеток в первые два дня эксперимента (дни 0 и 1). После этого животных обрабатывают один раз в день по утрам. Соединения вводят в виде суспензии в 1% карбоксиметилцеллюлозе (фирма Wako, Япония) в дозе 120 мг/кг дважды в день. Контрольной группе вводят только носитель. В 14-ый день эксперимента после умерщвления животных у них удаляют легкие и вручную подсчитывают количество узелков опухоли после фиксации с растворе Боуина (2%-ная пикриновая кислота в дистиллированной воде:10%-ный нейтральный формальдегидный буферный раствор:уксусная кислота в соотношении 15:5:1). В этом опыте установлено, что после обработки соединением из примера 68 количество узелков опухоли составляет 47% по сравнению с контрольной группой, обработанной только носителем.

Противоопухолевую эффективность соединений по изобретению можно определять, например, путем измерения роста опухолей человека, имплантированных подкожно бестимусным мышам линии Balb/с, обработанным согласно хорошо известному в данной области методу, в сравнении с мышами, обработанными плацебо. Примерами опухолей являются, например, зависящие от эстрогена человеческие карциномы молочной железы линии ВТ20 и MCF7, человеческая карцинома мочевого пузыря линии Т24, человеческая карцинома ободочной кишки линии Colo 205, человеческая аденокарцинома легкого линии А549 и человеческая карцинома яичника линии NIH-OVCAR3.

Воздействие на ангиогенез опухоли можно определять, например, на крысах, которым для стимуляции ангиогенеза сосудов конечностей имплантируют в виде гранул карциному линии Walker 256 согласно методу, описанному у Galardy и др., Cancer Res. 54, 4715 (1994).

Соединения формулы I ингибируют разложение матрикса, и вследствие этого их можно применять для лечения болезней, которые чувствительны к ингибированию активности таких ферментов, как МТ1-ММР и ММР2. В частности, следует упомянуть остеопороз и другие заболевания, в развитии которых играет роль резорбция кости остекластами, например индуцированную опухолью гиперкальцемию, болезнь Педжета, или лечение метастазов в кость, а также воспалительные процессы в суставах и костях и дегенеративные процессы в хрящевой ткани. В частности, соединения формулы I можно применять для лечения доброкачественных или зокачественных опухолей, которые чувствительны к ингибированию ферментов МТ1-ММР и ММР2, например рака молочной железы, легкого, мочевого пузыря, ободочной кишки, яичника, головного мозга и кожи, путем ингибирования роста опухоли, метастазов опухоли, развития опухоли или инвазии, или ангиогенеза опухоли. Они также могут вызвать регресс опухоли и предупреждать развитие микрометастазов.

Другие состояния, которые можно лечить с помощью соединений по изобретению, включают ревматоидный артрит, остеоартрит, заболевания бронхов (такие как астма, путем ингибирования разложения эластина), атеросклеротические состояния (путем, например, ингибирования перфорации атеросклеротических бляшек), а также острый коронарный синдром, сердечные приступы (сердечная ишемия), удары (церебральные ишемии) и рестеноз после пластической операции на сосудах, а также изъязвления сосудов, эктазию и аневризмы. Кроме того, состояния, подлежащие лечению с помощью соединений по изобретению, включают воспалительные расстройства, связанные с демиелинизацией нервной системы, которые включают разрушение или потерю миелина (такие как рассеянный склероз), ретробульбарный неврит, нейромиелит зрительного нерва (болезнь Девика), диффузный и переходный склероз (болезнь Шилдера) и острый рассеянный энцефаломиелит, а также связанные с демиелинизацией периферические невропатии, такие как синдром Ландри-Гийена-Барре-Штроля, связанный с дефектами моторной системы; а также изъязвление ткани (например, образование язв в эпидермисе и желудке), аномальное заживление ран и болезнь периодонта. С помощью соединений формулы I также можно лечить эндометриоз, септический шок, воспаление пищеварительного тракта, болезнь Крона и т.п.

Применения соединений по изобретению для лечения глазных болезней включают лечение воспаления глаза, изъязвления роговицы, птеригия, кератита, кератоконуса, открытоугольной глаукомы, ретинопатии, а также их применение в связи с глазной хирургией (лазерной или связанной с рассечением) с целью минимизации побочных действий.

Было установлено, что некоторые ингибиторы металлопротеиназ также ингибируют производство и высвобождение фактора некроза опухоли (TNF), например TNF-, который является важным медиатором воспаления. Таким образом, соединения по изобретению являются потенциальными противовоспалительными агентами для млекопитающих.

Эффективность соединений по изобретению в отношении атеросклеротических состояний можно определять с использованием атеросклеротических бляшек, полученных у кроликов, находящихся на диете с высоким содержанием холестерина, которые содержат активированные матричные металлопротеиназы, согласно методу, описанному у Sukhova и др., Circulation 90, I 404 (1994). Ингибирующее воздействие в отношении ферментативной активности матричной металлопротеиназы на атеросклеротических бляшках кролика можно определять с помощью зимографии in situ, согласно методу, описанному у Gallis и др., J. Clin. Invest. 94, 2493 (1994), и его показателем является перфорация бляшки.

Воздействие на аневризмы сосудов, например ингибирование образования аневризмы, можно определять на экспериментальных моделях, таких как Аро-Е-трансгенные мыши и/или мыши, лишенные LDL-рецептора. Абдоминальная аневризма аорты представляет собой хроническое дегенеративное состояние, связанное с опасным для жизни риском разрыва. Развитие аневризмы можно подавлять с помощью соединений формулы I.

Воздействие на рестеноз и на сосудистую реконструкцию можно оценивать на модели с использованием сонной артерии крысы, поврежденной с помощью баллонного катетера.

Эффективность в отношении обусловленных демиелинизацией расстройств нервной системы, таких как рассеянный склероз, можно оценивать при измерении реверсии вызванного экспериментальным путем аутоиммунного энцефаломиелита у мышей, например, согласно методу, описанному у Gijbels и др., J, Clin. Invest. 94, 2177 (1994).

Прежде всего изобретение относится к соединениям формулы I, где R₁ означает водород, (низш.)алкил, моноциклический или бициклический карбоциклический арил, незамещенный или моно-, ди- и тризамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, гидрокси, галоген, циано, трифторметил, фенокси или фенил, незамещенный или замещенный группой (низш.)алкокси, (низш.)алкил, галоген, циано, нитро, трифторметил или (низш.)алкилендиокси; моно- или бициклический гетероциклический арил, незамещенный или замещенный одним, двумя или более идентичными или различными заместителями, выбранными из группы, включающей свободные гидроксигруппы, их простые и сложные эфиры; меркапто, (низш.)алкилтио, замещенные и незамещенные фенилтиогруппы, галоген, оксогруппы в форме формил- и кетогрупп и соответствующих ацеталей или кеталей, азидо, нитро, первичную, вторичные и третичные аминогруппы, ациламино и диациламиногруппы, и немодифицированные или функционально модифицированные сульфогруппы, свободные и функционально модифицированные карбоксильные группы, карбамоил, уреидо, гуанидино и циано;

карбоциклический арил(низш.)алкил, незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, гидрокси, галоген, циано, трифторметил, фенокси или фенил, незамещеный или замещений в карбоциклическом фрагменте группой (низш.)алкокси, (низш.)алкил, галоген, циано, нитро, трифторметил или (низш.)алкилендиокси; замещенный или незамещенный гетероциклический (низш.)алкил, незамещенный или замещенный в гетероциклическом фрагменте одним, двумя или более идентичными или различными заместителями, выбранными из группы, включающей свободные гидроксигруппы, их простые и сложные эфиры; меркапто, (низш.)алкилтио, замещенные и незамещенные фенилтиогруппы, галоген, оксогруппы в форме формил- и кетогрупп и соответствующих ацеталей или кеталей, азидо, нитро, первичную, вторичные и третичные аминогруппы, ациламино и диациламиногруппы, и немодифицированные или функционально модифицированные сульфогруппы; свободные и функционально модифицированные карбоксильные группы, карбамоил, уреидо, гуанидино и циано; С₃-С₇циклоалкил, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом; С₃-С ₇циклоалкил(низш.)алкил, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом; гидрокси(низш.)алкил, (низш.)алкокси(низш.)алкил, (низш.)алкил(тио, сульфинил или сульфонил)(низш.)алкил, амино(низш.)алкил или моно- или ди-(низш.)алкил-амино(низш.)алкил;

R₂ означает водород или (низш.)алкил,

R₃ означает С ₃-С₇циклоалкил, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом; карбоциклический арил, незамещенный или моно-, ди-или тризамещенный группой: (низш.)алкил, (низш.)алкокси, гидрокси, галоген, циано, трифторметил, фенокси или фенил, незамещенный или замещенный группой (низш.)алкокси, (низш.)алкил, галоген, циано, нитро, трифторметил или (низш.)алкилендиокси;

гетероциклический арил, незамещенный или замещенный одним, двумя или более идентичными или различными заместителями, выбранными из группы, включающей свободные гидроксигруппы, их простые и сложные эфиры; меркапто, (низш.)алкилтио, замещенные и незамещенные фенилтиогруппы, галоген, оксогруппы в форме формил- и кетогрупп и соответствующих ацеталей или кеталей, азидо, нитро, первичную, вторичные и третичные аминогруппы, ациламино и диациламиногруппы, и немодифицированные или функционально модифицированные сульфогруппы; свободные и функционально модифицированные карбоксильные группы, карбамоил, уреидо, гуанидино и циано;

гетероциклил, незамещенный или замещенный одним, двумя или более идентичными или различными заместителями, выбранными из группы, включающей свободные гидроксигруппы, их простые и сложные эфиры; меркапто, (низш.)алкилтио, замещенные и незамещенные фенилтиогруппы, галоген, оксогруппы в форме формил- и кетогрупп и соответствующих ацеталей или кеталей, азидо, нитро, первичную, вторичные и третичные аминогруппы, ациламино и диациламиногруппы, и немодифицированные или функционально модифицированные сульфогруппы, свободные и функционально модифицированные карбоксильные группы, карбамоил, уреидо, гуанидино и циано;

или (низш.)алкил;

А означает C₁-С₃алкилен, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом;

q равно 1-5, и

R означает С₂ -С₇алкил, моно-, ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси, циано, С ₃-С₅циклоалкил или С₃-С₆ гетероарил, включающий один или два гетероатома, выбранных из группы О, S и N, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом, или

С₃-С₇алкенил или С₃ -С₇алкинил, в каждом случае незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси, циано, С₃-С₅циклоалкил или С₃-С₆гетероарил, включающий один или два гетероатома, выбранных из группы О, S и N, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом;

и к их фармацевтически приемлемым пролекарствам и фармацевтически приемлемым солям.

Предпочтительны соединения формулы I, где

R₁ означает водород, замещенный или незамещенный арил, (низш.)алкил, замещенный или незамещенный карбоциклический арил(низш.)алкил, замещенный или незамещенный гетероциклический (низш.)алкил, замещенный или незамещенный С₃-С₇циклоалкил, замещенный или незамещенный С₃-С₇циклоалкил(низш.)алкил, гидрокси(низш.)алкил, (низш.)алкокси(низш.)алкил, (низш.)алкил(тио, сульфинил или сульфонил)(низш.)алкил, амино(низш.)алкил или моно- или ди-(низш.)алкиламино-(низш.)алкил;

R₂ означает водород или (низш.)алкил;

R₃ означает замещенный или незамещенный С₃ -С₇циклоалкил, замещенный или незамещенный карбоциклический арил, замещенный или незамещенный гетероциклический арил или (низш.)алкил;

А означает C₁-С₃алкилен, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом;

q равно 1-5,

R означает С₂-С₇алкил, моно-, ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси или циано; С₃-С₇алкенил или С₃ -С₇алкинил, в каждом случае незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси или циано;

и их фармацевтически приемлемые пролекарства и фармацевтически приемлемые соли.

Кроме того, предпочтительны соединения формулы I, где

R₁ означает водород, (низш.)алкил, или карбоциклический арил(низш.)алкил, незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, гидрокси, галоген, циано, трифторметил, фенокси или фенил, незамещенный или замещенный в карбоциклическом фрагменте группой (низш.)алкокси, (низш.)алкил, галоген, циано, нитро, трифторметил или (низш.)алкилендиокси;

R₂ означает водород или (низш.)алкил;

R₃ означает С ₃-С₇циклоалкил, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом, карбоциклическим арилом, незамещенным или моно-, ди-или тризамещенным группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, гидрокси, ди(низш.)алкиламино, галоген, циано, трифторметил, фенокситриазолил, имидазолил, морфолинил, пирролидинил, пиперидинил, тетразолил, пирролил, фурил, тиенил, морфолинил(низш.)алкил, хинолинил(низш.)алкил, имидазолил(низш.)алкил и триазолил(низш.)алкил или фенил, незамещенный или замещенный группой (низш.)алкокси, (низш.)алкил, галоген, циано, нитро, трифторметил или (низш.)алкилендиокси; гетероциклический арил, незамещенный или замещенный одним, двумя или более идентичными или различными заместителями, выбранными из группы, включающей свободные гидроксигруппы, их простые и сложные эфиры; меркапто, (низш.)алкилтио, замещенные и незамещенные фенилтиогруппы, галоген, оксогруппы в форме формил- и кетогрупп и соответствующих ацеталей или кеталей, азидо, нитро, первичную, вторичные и третичные аминогруппы, ациламино и диациламиногруппы, и немодифицированные или функционально модифицированные сульфогруппы; свободные и функционально модифицированные карбоксильные группы, карбамоил, уреидо, гуанидино и циано;

гетероциклил, незамещенный или замещенный одним, двумя или более идентичными или различными заместителями, выбранными из группы, включающей свободные гидроксигруппы, их простые и сложные эфиры; меркапто, (низш.)алкилтио, замещенные и незамещенные фенилтиогруппы, галоген, оксогруппы в форме формил- и кетогрупп и соответствующих ацеталей или кеталей, азидо, нитро, первичную, вторичные и третичные аминогруппы, ациламино и диациламиногруппы, и немодифицированные или функционально модифицированные сульфогруппы; свободные и функционально модифицированные карбоксильные группы, карбамоил, уреидо, гуанидино и циано; или (низш.)алкил, А означает C ₁-С₃алкилен, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом;

q равно 1 или 2,

R означает С₂-С ₇алкил, моно-, ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси, циано, С₃-С₅ циклоалкил или С₃-С₆гетероарил, включающий один или два гетероатома, выбранных из группы О, S и N, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом;

или С₃-С ₇алкенил или С₃-С₇алкинил, в каждом случае незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси, циано,

С₃-С₅циклоалкил или С₃-С ₆гетероарил, включающий один или два гетероатома, выбранные из группы О, S и N, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом; и и их фармацевтически приемлемые пролекарства и фармацевтически приемлемые соли.

Прежде всего, изобретение относится к соединениям формулы I, где

R₁ означает водород, (низш.)алкил или замещенный или незамещенный карбоциклический арил(низш.)алкил;

R₂ означает водород или (низш.)алкил;

R₃ означает замещенный или незамещенный С ₃-С₇циклоалкил, замещенный или незамещенный карбоциклический арил, замещенный или незамещенный гетероциклический арил или (низш.)алкил;

А означает C₁-С₃ алкилен, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом;

q равно 1 или 2; и

R означает С₂-С₇ алкил, моно-, ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси или циано; С₃-С₇алкенил или С₃-С₇алкинил, в каждом случае незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси или циано.

Предпочтительны соединения формулы I, где

R₁ означает водород, (низш.)алкил или замещенный или незамещенный карбоциклический арил(низш.)алкил;

R₂ означает водород или (низш.)алкил;

R₃ означает замещенный или незамещенный С₃ -С₇циклоалкил; фенил, незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, гидрокси, нитро, амино, (низш.)алкиламино, карбамоил, трифторметил, трифторметокси, (низш.)алкилтио, (низш.)ацилокси или галоген;

пиридил, пиримидил, пиррил, имидазолил, индолил, тиенил, бензотиенил, фурил, бензофуранил, оксазолил, тиазолил; или (низш.)алкил;

А означает C₁-С₃алкилен, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом;

q равно 1 или 2;

R означает С₂-С₇алкил, моно-, ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси или циано; С₃-С₇алкенил или С₃-С₇ алкинил, в каждом случае незамещенный или моно-, ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси или циано;

и их фармацевтически приемлемые пролекарства и фармацевтически приемлемые соли.

Прежде всего, изобретение относится к соединениям формулы I, где

R₁ означает водород, (низш.)алкил или фенил(низш.)алкил;

R₂ означает водород или (низш.)алкил;

R₃ означает фенил, незамещенный или монозамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, гидрокси, нитро, амино, (низш.)алкиламино, карбамоил, трифторметил, (низш.)алкилтио или галоген; пиридил или (низш.)алкил;

А означает C₁-С₃алкилен, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом;

q равно1 или 2;

R означает С₂-С₇алкил, моно-, ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси или циано; незамещенный С₃-С₇алкенил или незамещенный С₃-С₇алкинил;

и к их фармацевтически приемлемым пролекарствам и фармацевтически приемлемым солям.

Прежде всего, предпочтительны соединения формулы I, где

R₁ означает водород, (низш.)алкил или фенил(низш.)алкил;

R₂ означает водород;

R₃ означает фенил, монозамещенный (низш.)алкокси или галогеном; или (низш.)алкил:

А означает C₁-С₃алкилен;

q равно 1;

R означает С₂-С₇алкил, моно- или тризамещенный галогеном; незамещенный С₃-С ₇алкенил или незамещенный С₃-С₇алкинил;

и их фармацевтически приемлемые пролекарства и фармацевтически приемлемые соли.

Один из предпочтительных вариантов осуществления изобретения относится к соединениям формулы I, где

R ₁ означает водород,

R₂ означает водород,

R₃ означает фенил, монозамещенный (низш.)алкокси или галогеном;

А означает C₁-С₃алкилен,

q равно 1,

R означает незамещенный С₃ -С₅алкенил, у которого двойная связь локализована в конце цепи, или незамещенный С₃-С₅алкинил, у которого тройная связь локализована в конце цепи,

и к их фармацевтически приемлемым пролекарствам и фармацевтически приемлемым солям.

Другой предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к соединениям формулы I, где

R ₁ означает водород,

R₂ означает водород,

R₃ означает фенил, монозамещенный (низш.)алкокси или галогеном;

А означает метилен или этилен,

q равно 1,

R означает неразветвленный С₃-С₅ алкил, который в конце цепи монозамещен галогеном;

и к их фармацевтически приемлемым пролекарствам и фармацевтически приемлемым солям.

Наиболее предпочтительны соединения формулы I, где

R₁ означает водород, (низш.)алкил или фенил(низш.)алкил;

R₂ означает водород,

R₃ означает С₃-С₇циклоалкил, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом;

фенил, незамещенный или моно- или дизамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, гидрокси, нитро, амино, (низш.)алкиламино, ди(низш.)алкиламино, карбамоил, трифторметил, трифторметокси, (низш.)алкилтио, (низш.)ацилокси, галоген, триазолил, имидазолил, морфолинил, пирролидинил, пиперидинил, тетразолил, пирролил, фурил, тиенил, морфолинил(низш.)алкил, хинолинил(низш.)алкил, имидазолил(низш.)алкил, триазолил(низш.)алкил;

пиридил, пиримидил, пиррил, имидазолил, индолил, тиенил, бензотиенил, фурил, бензофуранил, оксазолил, тиазолил, в каждом случае незамещенные или замещенные (низш.)алкилом или галогеном;

гетероциклил, незамещенный или замещений (низш.)алкилом и выбранный из группы, включающей пиперидинил, морфолинил, пирролидинил, пирролил, пирролинил, пиперазинил и тетрагидропиранил;

А означает метилен или этилен;

q равно 1,

R означает С₂-С₇алкил, моно- ди- или тризамещенный группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси, циано, С₃-С₅циклоалкил или С₃-С ₆гетероарил, включающий один или два гетероатома, выбранных из группы О, S и N, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом; С₃-С₇алкенил или С₃-С₇ алкинил, который в каждом случае является незамещенным или моно-, ди- или тризамещенным группой галоген, нитро, (низш.)ацилокси, трифторметокси, циано; С₃-С₅циклоалкил или С₃-С₆гетероарил, включающий один или два гетероатома, выбранных из группы О, S и N, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом;

и их фармацевтически приемлемые пролекарства и фармацевтически приемлемые соли.

Более предпочтительный вариант осуществления изобретения относится к соединениям формулы I, где

R₁ означает водород, (низш.)алкил или фенил(низш.)алкил;

R₂ означает водород;

R₃ означает фенил, незамещенный или моно- или дизамещенный группой (низш.)алкил, (низш.)алкокси, ди(низш.)алкиламино, галоген, триазолил, имидазолил, морфолинил, пирролидинил, пиперидинил, тетразолил, пирролил, фурил, тиенил, морфолинил(низш.)алкил, хинолинил(низш.)алкил, имидазолил(низш.)алкил, триазолил(низш.)алкил;

пиридил, незамещенный или замещенный галогеном;

незамещенный гетероциклил, который выбирают из группы, включающей пиперидинил, морфолинил, пирролидинил, пирролинил, пиперазинил и тетра-гидропиранил;

А означает метилен,

q равно 1,

R означает незамещенный С₃-С₅алкенил, в котором двойная связь локализована в конце цепи, незамещенный С₃-С₅алкинил, в котором тройная связь локализована в конце цепи, или неразветвленный С₃-С₅ алкил, монозамещенный или тризамещенный в конце цепи галогеном, или монозамещенный в конце цепи фурилом или циклопропилом;

и к их фармацевтически приемлемым пролекарствам и фармацевтически приемлемым солям.

Соединения формулы I и их фармацевтически приемлемые пролекарства и фармацевтически приемлемые соли получают известными способами, например,

а) взаимодействием соединения формулы II

где R, q, R₁ и R₂ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, черный диск означает, что соединение связано с полимерной смолой, а присутствующие в соединении свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко удаляемыми защитными группами, в приемлемом растворителе, например в тетрагидрофуране, сначала с трифенилфосфином, спиртом формулы III,

где А и R₃ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, и диэтиловым эфиром азодикарбоновой кислоты, причем присутствующие в этом соединении свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко удаляемыми защитными группами или, в соответствии с принципом скрытой функции присутствуют в форме, которая легко превращается в функциональные группы, а затем отщеплением продукта реакции от полимера обработкой трифторуксусной кислотой в соответствующем растворителе, например в дихлорметане, или

б) взаимодействием соединения формулы IV

где R, q, A, R₁, R₂ и R₃ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, а присутствующие в соединении свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко удаляемыми защитными группами, в соответствующем растворителе, например в дихлорметане, сначала с оксалилхлоридом в диметилформамиде, а затем с гидроксиламином в смеси вода-тетрагидрофуран, или

в) взаимодействием соединения формулы V

где R, q, A, R₁, R₂ и R₃ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, а присутствующие в соединении свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко удаляемыми защитными группами, в соответствующем растворителе, например в этилацетате, с водным раствором хлористого водорода, и после проведения реакций а), б) или в), удалением защитных групп и, если необходимо, превращением функциональных групп в окончательную форму, например, согласно формуле I, и, если необходимо получение соли, превращением свободного соединения формулы I в соль, или, если необходимо получение свободного соединения, превращением полученной соли соединения формулы I в свободное соединение. Способы б) и в) предпочтительны для соединений формулы I, в которых R₁ и R₂ каждый одновременно означает водород.

Более подробное описание вышеуказанных способов приводится ниже.

Конечные соединения формулы I могут иметь заместители, которые, кроме того, могут использоваться в качестве защитных групп в исходных соединениях при получении других конечных соединений формулы I. Если из контекста не очевидно иное, термин "защитные группы" в тексте заявки означает только те легко удаляемые группы, которые не входят в состав конкретного желаемого конечного соединения формулы I.

Защитные группы, их введение и удаление описаны, например, в книгах "Protective Groups in Organic Chemistry", Plenum Press, London, New York, 1973, "Methoden der organischen Chemie" [Methods of Organic Chemistry], Houben-Weyl, 4th Edition, Volume 15/1, Georg-Thieme-Verlag, Stuttgart, 1974 и Т. W. Greene, "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley & Sons, New York, 1981. Характерное свойство защитных групп состоит в том, что их можно легко удалить, т.е. при отсутствии нежелательных побочных реакций, например, сольволизом, восстановлением, фотолизом и, кроме того, в физиологических условиях.

В защите свободных функциональных групп в исходном материале формулы II, как правило, нет необходимости. Если необходимо, карбокси- или аминогруппы в радикалах R, R₁, R₂ или R₃ соединения формулы II, III, IV или V могут присутствовать в защищенной форме. Функциональные группы, такие как уходящие группы, например галоген или толуолсульфонат, однако, могут присутствовать, в соответствии с принципом скрытой функции, в форме, которая может быть превращена в одну из функциональных групп согласно формуле I. Таким образом, защищенная аминогруппа, например, включенная в радикал R, может быть сначала освобождена удалением аминозащитной группы, а затем свободная аминогруппа может быть заменена на галоген известным способом через промежуточный азид.

Например, защищенная аминогруппа может присутствовать в форме легко отщепляемой ациламино-, арилметиламино-, этерифицированной меркаптоамино- или 2-ацил(низш.)алк-1-ениламиногруппы.

В соответствующей ациламиногруппе ацил, например, означает ацильный радикал органической карбоновой кислоты, содержащей, например, не более 18 атомов углерода, прежде всего, алканкарбоновой кислоты, незамещенной или замещенной, например, галогеном или арилом, или бензойной кислоты, незамещенной или замещенной, например, галогеном, (низш.)алкокси или нитро, или полуэфира карбоновой кислоты. Такими ацильными группами являются, например, (низш.)алканоил, такой как формил, ацетил или пропионил, галоген(низш.)алканоил, такой как 2-галогенацетил, прежде всего 2-хлор-, 2-бром-, 2-иод-, 2,2,2-трифтор- или 2,2,2-трихлорацетил, бензоил, незамещенный или замещенный, например, галогеном, (низш.)алкокси или нитро, например бензоил, 4-хлорбензоил, 4-метоксибензоил или 4-нитробензоил, или (низш.)алкоксикарбонил, разветвленный в положении 1 радикала (низш.)алкил или соответствующим образом замещенный в положении 1 или 2, прежде всего, трет-(низш.)алкоксикарбонил, например трет-бутилоксикарбонил, арилметоксикарбонил с одним или двумя арильными радикалами, предпочтительно фенилом, незамещенным или моно- или полизамещенным, например, (низш.)алкилом, прежде всего, трет-(низш.)алкил, такой как трет-бутил, (низш.)алкокси, такой как метокси, гидроксил, галоген, например хлор, и/или нитро, такой как незамещенный или замещенный бензилоксикарбонил, например 4-нитробензилоксикарбонил, или незамещенный или замещенный дифенилметоксикарбонил, например бензгидрилоксикарбонил или ди(4-метоксифенил)метоксикарбонил, ароилметоксикарбонил, в котором группа ароил предпочтительно означает бензоил, незамещенный или замещенный, например, галогеном, таким как бром, например фенацилоксикарбонил, 2-галоген(низш.)алкоксикарбонил, например 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, 2-бромэтоксикарбонил или 2-иодэтоксикарбонил, или 2-(тризамещенный силил)этоксикарбонил, в котором заместители каждый независимо друг от друга означают алифатический, аралифатический, циклоалифатический и ароматический углеводородный радикал, имеющий не более 15 атомов углерода, незамещенный или замещенный, например замещенный следующими группами: (низш.)алкил, (низш.)алкокси, арил, галоген или нитро, такой как соответствующий незамещенный или замещенный (низш.)алкил, фенил(низш.)алкил, циклоалкил или фенил, например, 2-три(низш.)алкилсилилэтоксикарбонил, такой как 2-триметилсилилэтоксикарбонил или 2-(ди-н-бутилметилсилил)этоксикарбонил, или 2-триарилсилилэтоксикарбонил, такой как 2-трифенилсилилэтоксикарбонил.

В случае арилметиламиногруппы, моно-, ди- или, прежде всего, триа-рилметиламиногруппы арильные радикалы означают, прежде всего, замещенные или незамещенные фенильные радикалы. Такими группами являются, например, бензил-, дифенилметил- и, прежде всего, тритиламиногруппа.

Этерифицированная меркаптогруппа в защищенной такими радикалами аминогруппе означает, прежде всего, арилтио или арил(низш.)алкилтио, где арил означает, прежде всего, фенил, незамещенный или замещенный, например, (низш.)алкилом, таким как метил или трет-бутил, (низш.)алкокси, таким как метокси, галогеном, таким как хлор, и/или нитро. Соответствующей аминозащитной группой является, например, 4-нитрофенилтио.

В случае радикала 2-ацил(низш.)алк-1-ен-1-ил, который может использоваться в качестве аминозащитной группы, ацил означает, например, соответствующий радикал (низш.)алканкарбоновой кислоты, бензойной кислоты, незамещенной или замещенной, например, (низш.)алкилом, таким как метил или трет-бутил, (низш.)алкокси, таким как метокси, галогеном, таким как хлор, и/или нитро, или, прежде всего, полуэфира карбоновой кислоты, такой как (низш.)алкилполуэфир карбоновой кислоты. Соответствующей защитной группой является, прежде всего, 1-(низш.)алканоилпроп-1-ен-2-ил, например 1-ацетилпроп-1-ен-2-ил, или 1-(низш.)алкоксикарбонилпроп-1-ен-2-ил, например 1 -этоксикарбонилпроп-1-ен-2-ил.

Предпочтительными аминозащитными группами являются ацильные радикалы полуэфиров карбоновых кислот, прежде всего, трет-бутилоксикарбонил, бензилоксикарбонил, незамещенный или замещенный, например, как определено выше, например, 4-нитробензилоксикарбонил, или дифенилметоксикарбонил, или 2-галоген(низш.)алкоксикарбонил, такой как 2,2,2-трихлорэтоксикарбонил, и, кроме того, тритил или формил.

Предпочтительными карбоксилзащитными группами являются, например, трет-бутоксикарбонил, бензилоксикарбонил или дифенилметоксикарбонил, незамещенные или замещенные, или 2-триметилсилилэтоксикарбонил.

Реакция между производным формулы II и спиртом формулы III может проводиться в приемлемых инертных расторителях. Однако, при необходимости, с учетом физических свойств спирта формулы III, реакция может проводиться также в отсутствии растворителя при большом избытке спирта формулы III, например, в количестве, в сотни раз превышающем эквивалентное количество, который выполняет функцию реагента и растворителя. Реакцию проводят при встряхивании или перемешивании, в атмосфере аргона или азота. В зависимости от природы специфических реагентов реакцию проводят при температуре от 0°С до 90°С, предпочтительно от +20°С до +60°С, например при комнатной температуре или 50°С. Необязательно реакцию проводят в ампуле при высоком давлении. После, например, периода от 12 до 24 ч могут быть добавлены дополнительные порции трифенилфосфина, диэтилового эфира азодикарбоновой кислоты, а также спирта формулы III. Продукт первой стадии реакции отделяют фильтрованием и промывают тетрагидрофураном, спиртом, например 2-пропанолом, и дихлорметаном. Отщепление продукта реакции от полимерной смолы проводят обработкой продукта реакции трифторуксусной кислотой в дихлометане в течение 15-30 мин при температуре от 20°С до 50°С, например при комнатной температуре или при 30°С.

Реакцию расщепления соединения формулы V можно проводить в пригодных инертных растворителях, таких как этилацетат или тетрагидрофуран. Кроме того, в качестве растворителя можно использовать очищенную воды или смесь воды с другим растворителем в зависимости от растворимости соединения формулы V, в том случае, когда вода выполняет функцию реагента. Обычно реакцию проводят при комнатной температуре, но ее можно также проводить при температурах от 0°С до 100°С в зависимости от реакционной способности соединения формулы V. Обычно реакцию расщепления проводят в водном растворе хлористого водорода, но вместо него могут также использоваться кислоты Бренстеда и Льюиса, например, такие как бромистый водород, разбавленная серная кислота, пара-толуолсульфокислота, трифторид бора или катионы металлов.

Защитные группы, которые не входят в состав целевого продукта формулы I, отщепляются по известному способу, например, сольволизом, прежде всего гидролизом, алкоголизом или ацидолизом, или восстановлением, прежде всего гидрогенолизом или химическим восстановлением, если необходимо, в несколько стадий или одновременно. Отщепление защитных групп можно проводить до, после или одновременно с отщеплением продукта от полимерной смолы.

Защищенная аминогруппа высвобождается известными способами, которые варьируют в зависимости от природы защитных групп, предпочтительно сольволизом или восстановлением. 2-Галоген(низш.)алкоксикарбониламино (если необходимо, после превращения 2-бром(низш.)алкоксикарбониламиногруппы в 2-иод(низш.)алкоксикарбониламингруппу), ароилметоксикарбониламино или 4-нитробензилоксикарбониламиногруппы могут быть расщеплены, например, обработкой соответствующим восстановливающим агентом, таким как цинк в присутствии пригодной карбоновой кислоты, такой как водная уксусная кислота. Ароилметоксикарбониламиногруппа также может быть расщеплена обработкой нуклеофильным, предпочтительно солеобразующим реагентом, таким как тиофенолят натрия, а 4-нитробензилоксикарбониламиногруппа также может быть расщеплена обработкой дитионитом щелочного металла, например дитионитом натрия. Замещенная или незамещенная дифенилметоксикарбониламино, трет(низш.)алоксикарбониламино или 2-тризамещенная силилэтоксикарбониламиногруппа могут быть расщеплены обработкой соответствующей кислотой, например муравьиной или трифторуксусной кислотой. Замещенная или незамещенная бензилоксикарбониламиногруппа может быть расщеплена, например, гидрогенолизом, например водородом в присутствии катализатора гидрогенолиза, такого как палладиевый катализатор, а триарилметиламино или формиламиногруппа могут быть расщеплены, например, обработкой кислотой, такой как неорганическая кислота, например хлористоводородная кислота, или органической кислотой, например муравьиной, уксусной или трифторуксусной кислотой, если необходимо, в присутствии воды, а аминогруппу, защищенную органической силильной группой, деблокируют, например, гидролизом или алкоголизом. Аминогруппу, защищенную 2-галогенацетилом, например 2-хлорацетильной группой, можно деблокировать обработкой тиомочевиной в присутствии основания или соли тиолята, такой как тиолят щелочного металла, обработкой мочевиной и последующим сольволизом, таким как алкоголиз или гидролиз, образующегося продукта конценсации. Аминогруппу, защищенную 2-замещенным силилэтоксикарбонилом, можно превратить в свободную аминогруппу обработкой солью фтористоводородной кислоты, которая служит источником аниона фтора.

Исходные материалы формулы II получают, как описано ниже.

На первой стадии соединение формулы IV

где R₁ и R₂ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, сначала вводят в реакцию с конденсирующим агентом, такими как тетрафторборат О-(1,2-дигидро-2-оксо-1-пиридил)-N,N,N',N'-тетраметилмочевины (ТФТМ), тетрафторборат O-(3,4-дигидро-4-оксо-1,2,3-бензотриазин-3-ил)-N,N,N',N'-тетраметилмочевины (ТФТБМ) или гексафторфосфат О-(1,2-дигидро-2-оксо-1-пиридил)-N,N,N',N'-бис-(тетраметилен)мочевины, в присутствии диметилацетамида и соответствующего амина, например N-этилдиизопропиламина, в приемлемом растворителе, таком как дихлорметан, а затем при комнатной температуре с аминоокси-2-хлортритилполистирольной смолой. Смолу отделяют и дважды или трижды в течение от 15 до 60 мин, например 30 мин, встряхивают со свежеприготовленным раствором дихлорметан/пиперидин, при этом получают соединение формулы VII

где черный диск означает, что соединение присоединено к полимерной смоле, и где R₁ и R₂ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I.

Если R₁ и R₂ оба означают водород, первую стадию предпочтительно проводят

следующим образом: аминоокси-2-хлортритилполистирольную смолу смешивают в пригодном растворителе, таком как дихлометан, с соединением формулы VI, в котором R₁ и R₂ оба означают водород, в присутствии гидрата 1-гидроксибензотри-азола и 1,3-диизопропилкарбодиимида, а затем полученную смесь обрабатывают N-этилдиизопропиламином при комнатной температуре. Полученную смолу отделяют и дважды встряхивают в течение от 15 до 45 мин, например 20 мин, со свежеприготовленным раствором дихлорметан/пиперидин, при этом получают соединение формулы VII, где черный диск означает, что соединение присоединено к полимерной смоле и где R₁ и R₂ оба означают водород.

На второй стадии соединение формулы VII вводят в реакцию с соединением формулы VIII

где R и q имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, Y означает

пригодную уходящую группу, предпочтительно галоген, такой как хлор, бром или иод, необязательно в присутствии 4-диметиламинопиридина и пригодного амина, например N-этилдиизопропиламина, в пригодном растворителе, например дихлорметане.

Исходный материал формулы V получают следующим образом.

На первой стадии соединение формулы IX

где R₃ имеет значения, указанные выше для соединений формулы I, R₄ означает водород или (низш.)алкил, a D означает С₁-С₂алкилен, незамещенный или замещенный (низш.)алкилом, вводят в реакцию в пригодном растворителе, например в хлористом метилене, при температуре от -10°С до +15°С, предпочтительно от 0°С до +5°С, с соединением формулы Х

где R₁ и R₂ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, a R₅ означает метил или этил, в присутствии триэтиламина или другого пригодного амина и MgSO₄, при этом получают соединение формулы XI

где R₁, R₂ и R₃ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, R₄ означает водород или (низш.)алкил, R₅ означает метил или этил, a D означает C₁-С₂алкилен.

На второй стадии соединение формулы XI вводят в реакцию с боргидридом натрия в пригодном растворителе, например в смеси тетрагидрофурана и метанола, при температуре от -15°С до 5°С, предпочтительно от -10°С до 0°С, или с другим агентом, являющимся донором водорода, при этом получают соединение формулы XII

где A, R₁, R₂ и R₃ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, a R₅ означает метил или этил.

На третьей стадии соединение формулы XII вводят в реакцию с соединением формулы VIII'

где R' означает водород, q имеет значения, указанные выше для соединений формулы I, a Y означает пригодную уходящую группу, предпочтительно галоген, такой как хлор, бром или иод, в пригодном растворителе, например дихлорметане, в присутствии пригодного амина, например, триэтиламина, при этом получают соединение формулы XIII

где R' означает водород, q, A, R₁, R ₂ и R₃ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, a R₅ означает метил или этил. Соединение формулы VIII', где R' означает водород, может быть получено взаимодействием натриевой соли гидроксибензолсульфокислоты с тионилхлоридом в диметил-формамиде или другом пригодном растворителе при температуре от 60°С до 70°С, предпочтительно 65°С.

На четвертой стадии соединение формулы XIII вводят в реакцию с соединением формулы XIV

где R имеет значения, указанные выше для соединений формулы I, a Y означает пригодную уходящую группу, предпочтительно галоген, такой как хлор, бром или иод, в присутствии К₂СО ₃ при комнатной температуре в пригодном растворителе, например диметилформамиде, при этом получают соединение формулы XV

где R, q, A, R₁, R₂ и R₃ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, a R ₅ означает метил или этил.

На пятой стадии соединение формулы XV затем вводят в реакцию с гидроксидом щелочного металла, например LiOH, в пригодном растворителе или смеси растворителей, например в смеси тетрагидрофурана, спирта и воды, при этом получают соединение формулы IV, где R, q, A, R₁, R₂ и R₃ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I.

На шестой стадии соединение формулы IV вводят в реакцию с соединением формулы XVI

и карбодиимидом, таким как 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид, в присутствии 1-гидроксибензотриазола, в пригодном растворителе, таком как диметилформамид, при температуре от -5°С до +10°С, предпочтительно от 0°С до 5°С, при этом получают соединение формулы V, где R, q, A, R₁, R₂ и R ₃ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I.

Кроме того, соединение формулы VIII' перед реакцией с соединением формулы XII, как описано выше, может быть введено в реакцию с соединением формулы XIV.

Общие условия реализации способа

Свободные соединения формулы I, полученные способом по изобретению и обладающие солеобразующими свойствами, могут быть превращены в их соли по известному способу, например, обработкой кислотами или их пригодными производными, например добавлением вышеупомянутой кислоты к соединению формулы I, растворенному в пригодном растворителе, например в простом эфире, таком как циклический эфир, конкретно диоксан, и прежде всего тетрагидрофуран. Соединения формулы I, содержащие кислотные группы, например карбоксильные группы, для получения соли обрабатывают, например, пригодным основанием, например гидроксидом, карбонатом или бикарбонатом.

Смеси изомеров, полученные по изобретению, могут быть разделены на индивидуальные изомеры известными способами, например рацематы разделяют получением солей с оптически чистыми солеобразующими реагентами и разделением полученной таким образом смеси диастереомеров, например фракционной кристаллизацией. Вышеописанные реакции проводят в известных условиях, в отсутствие или обычно в присутствии растворителей или разбавителей, предпочтительно таких, которые инертны к применяющимся реагентам и способны их растворять, в отсутствие или в присутствии катализаторов, конденсирующих агентов (например, пятиокиси фосфора) или нейтрализующих агентов, например оснований, конкретно азотистых оснований, таких как гидрохлорид триэтиламина, в зависимости от природы реакции и/или компонентов реакции, при пониженной, нормальной или повышенной температуре, например при температуре в диапазоне от приблизительно -80°С до приблизительно 200°С, предпочтительно от приблизительно -20°С до приблизительно 150°С, например, при температуре кипения используемого растворителя или при комнатной температуре, при атмосферном давлении или в закрытом сосуде, если необходимо, под давлением, и/или в инертной атмосфере, например в атмосфере азота.

Предпочтительными являются условия реакции, описанные в каждом конкретном случае.

В качестве растворителей и разбавителей используют, например, воду, спирты, например (низш.)алкилгидроксиды, такие как метанол, этанол, пропанол или, прежде всего, бутанол, диолы, такие как этиленгликоль, триолы, такие как глицерин, или ариловые спирты, такие как фенол, амиды кислот, например амиды карбоновых кислот, такие как диметилформамид, диметилацетамид или 1,3-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2(1Н)-пиримидинон (ДМП), карбоновые кислоты, прежде всего муравьиная кислота или уксусная кислота, амиды неорганических кислот, такие как триамид гексаметилфосфорной кислоты, простые эфиры, например циклические эфиры, такие как тетрагидрофуран или диоксан, или ациклические простые эфиры, такие как диэтиловый эфир или диметиловый эфир этиленгликоля, галогенированные углеводороды, такие как галоген(низш.)алканы, например хлористый метилен или хлороформ, кетоны, такие как ацетон, нитрилы, такие как ацетонитрил, ангидриды кислот, такие как уксусный ангидрид, сложные эфиры, такие как этилацетат, бисалкансульфины, такие как диметилсульфоксид, азотсодержащие гетероциклические соединения, такие как пиридин, углеводороды, например (низш.)алканы, такие как гептан, или ароматические соединения, такие как бензол, толуол или ксилол(ы), или смеси указанных растворителей, причем, возможно, что для вышеописанных реакций в каждом случае подбирают соответствующий растворитель.

При обработке соединений формулы I или их солей используют известные способы, например сольволиз избытком реагентов, перекристаллизацию, хроматографию, например распределительную, ионную или гель-хроматографию, прежде всего препаративную жидкостную хроматографию при высоком давлении; распределение между фазами неорганического и органического растворителя; однократную или многократную экстракцию, прежде всего после подкисления или подщелачивания или ввиду присутствия соли; высушивание высокогигроскопичных солей; расщепление; фильтрацию, промывку, растворение, упаривание (если необходимо, в вакууме или в высоком вакууме), перегонку, кристаллизацию, например, соединений, образующихся в виде масла или выделяемых из маточного раствора, кроме того, возможно добавление затравки в виде кристаллов конечного продукта; или сочетание двух или более вышеописанных стадий переработки, которые также могут быть использованы повторно.

Исходные материалы и промежуточные соединения могут быть использованы в очищенном виде, например, после вышеописанной переработки, в частично очищеном виде или же, например, непосредственно в виде неочищенного продукта.

Следует понимать, что благодаря близким свойствам соединений формулы I в свободной форме и в форме солей свободные соединения и их соли выше и далее по тексту в случаях, если это возможно или целесообразно, означают соответствующие соли и свободные соединения при условии, соответственно, если соединения содержат солеобразующие группы.

Кроме того, соединения, включая их соли, могут быть получены в форме гидратов или их кристаллы могут включать, например, растворитель, используемый для кристаллизации.

В способе по настоящему изобретению предпочтительно используют такие исходные материалы, которые приводят к получению новых соединений формулы I, описанных выше и обладающих ценными свойствами.

Изобретение также относится к тем вариантам способа, в которых соединение, полученное в качестве промежуточного на любой стадии способа, используют в качестве исходного соединения, что обеспечивает сокращение стадий процесса, или в которых исходное соединение образуется в ходе реакции или его используют в форме производного, например, его соли.

Изобретение также относится к соединениям формулы II

где R, q, R₁ и R₂ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I,

черный диск означает, что соединения присоединены к полимерной смоле, а свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко отщепляемыми защитными группами, причем соединения могут быть использованы в качестве исходного материала для получения соединений формулы I.

Изобретение также относится к соединениям формулы IV

где R, q, A, R₁, R₂ и R₃ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, присутствующие в соединениях свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко отщепляемыми защитными группами, причем соединения могут быть использованы в качестве исходного материала для получения соединений формулы I.

Изобретение также относится к соединениям формулы V

где R, q, A, R₁, R₂ и R₃ имеют значения, указанные выше для соединений формулы I, присутствующие в соединениях свободные функциональные 10 группы защищены, если необходимо, легко отщепляемыми защитными группами, причем соединения могут быть использованы в качестве исходного материала для получения соединений формулы I.

Изобретение также относится к соединениям формулы VIII

где R имеет значения, указанные выше для соединений формулы I, или означает водород, q имеет значения, указанные выше для соединений формулы I, a Y означает галоген, присутствующие в соединениях свободные функциональные группы защищены, если необходимо, легко отщепляемыми защитными группами, причем соединения могут быть использованы в качестве исходного материала для получения соединений формулы I.

Настоящее изобретение также относится к способам применения соединений по изобретению и их фармацевтически приемлемых солей или фармацевтических композиций на их основе для ингибирования разлагающих матрикс металлопротеиназ, например стромелизина, желатиназы, коллагеназы и металлоэластазы макрофага, для ингибирования разложения ткани матрикса у млекопитающих и для лечения связанных с разлагающими матрикс металлопротеиназами состояний, указанных в настоящем описании, например воспаления, ревматоидного артрита, остеоартрита, а также опухолей (рост, метастазирование, прогрессивное развитие или инвазия опухоли), легочных заболеваний (например, эмфизема) и т.п., как описано в настоящем изобретении. Опухоли (карциномы) включают такие опухоли млекопитающих, как рак молочной железы, легкого, мочевого пузыря, ободочной кишки, предстательной железы и яичника и рак кожи, включая меланому и саркому Капоши.

Кроме того, изобретение относится к способу лечения состояний или болезней, прежде всего указанных в настоящем описании, которые связаны с ММР2, предусматривающему введение теплокровным животным, включая людей, которые нуждаются в таком лечении, терапевтически эффективного количества избирательного ингибитора ММР2 или фармацевтически приемлемой соли или производного в виде фармацевтически приемлемого пролекарства такого избирательного ингибитора ММР2.

В частности, изобретение относится к способу лечения гиперпролиферативных болезней, прежде всего указанных в настоящем описании, и, в частности, связанного с опухолью заболевания, которое связано с ММР2, предусматривающему введение теплокровным животным, включая людей, которые нуждаются в таком лечении, эффективного в качестве антипролиферативного средства количества изибрательного ингибитора ММР2 или фармацевтически приемлемой соли или производного в виде фармацевтически приемлемого пролекарства такого избирательного ингибитора ММР2.

Понятие "избирательный ингибитор ММР2" в контексте настоящего описания относится к соединению, для которого величина концентрации IC₅₀ в отношении ингибирования фермента ММР1 по меньшей мере в 100 раз выше, чем величина концентрации IC₅₀ в отношении ингибирования фермента ММР2, что установлено с помощью приведенных в настоящем описании методов. Предпочтительно величина концентрации IC ₅₀ в отношении ингибирования фермента ММР1 избирательного ингибитора ММР2 по меньшей мере в 1000 раз выше, чем величина концентрации IC₅₀ в отношении фермента ММР2. Более предпочтительно величина концентрации IC₅₀ в отношении ингибирования фермента ММР1 избирательного ингибитора ММР2 по меньшей мере в 2000 раз выше, чем величина концентрации IC ₅₀ в отношении фермента ММР2.

Понятие "непептид" в контексте настоящего описания относится к соединению, которое не имеет субструктуры, включающей химическую связь между алифатическим амином и карбоновой кислотой.

Кроме того, изобретение относится к способу лечения состояний или болезней, прежде всего указанных в настоящем описании, которые связаны с ММР, предусматривающему введение теплокровным животным, включая людей, которые нуждаются в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы I, или фармацевтически приемлемой соли, или производного в виде фармацевтически приемлемого пролекарства такого соединения.

В частности, изобретение относится к способу лечению теплокровных животных, включая людей, которые страдают гиперпролиферативным заболеванием, прежде всего связанным с опухолью заболеванием, и в частности гиперпролиферативным заболеванием, которое чувствительно к ингибированию ММР2 или МТ1-ММР, предусматривающему введение эффективного в качестве антипролиферативного средства количества соединения формулы I, или его фармацевтически приемлемой соли, или его производного в виде фармацевтически приемлемого пролекарства, или к применению соединения формулы I для такого лечения.

Изобретение также относится к применению соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для ингибирования у теплокровных животных, включая людей, ММР2 или МТ1-ММР или обоих этих ферментов или для приготовления фармацевтических композиций, предназначенных для терапевтического лечения человека или животного, в частности для химиотерапии опухоли.

В зависимости от вида, возраста, индивидуального состояния, пути введения и конкретной клинической картины эффективные дозы, например суточные дозы, для теплокровного животного весом примерно 70 кг составляют от примерно 0,1 до примерно 5 г, предпочтительно от примерно 0,5 до примерно 2 г соединения по настоящему изобретению.

Изобретение также относится к фармацевтическим композициям, включающим эффективное количество действующего вещества, прежде всего количество, эффективное для лечения одного из перечисленных заболеваний, в сочетании с фармацевтически приемлемыми носителями, которые можно применять для местного, энтерального, например перорального или ректального, или парентерального введения, и которые могут быть неорганическими или органическим, твердыми или жидкими. Формы для перорального введения прежде всего представляют собой таблетки и желатиновые капсулы, которые содержат действующее вещество в сочетании с разбавителями, например, лактозой, декстрозой, сахарозой, маннитом, сорбитом, целлюлозой и/или глицерином; и/или замасливателями, например, двуокисью кремния, тальком, стеариновой кислотой или ее солями, такими как стеарат магния или кальция, и/или полиэтиленгликолем. Таблетки также могут включать связующие вещества, например алюмосиликат магния, крахмалы, такие как кукурузный, пшеничный или рисовый крахмал, желатин, метилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу натрия и/или поливинилпирролидон, и при необходимости разрыхлители, например крахмалы, агар, альгиновую кислоту или ее соль, такую как альгинат натрия, и/или шипучие смеси, или адсорбенты, красители, корригенты и подслащивающие вещества. Фармакологически активные вещества по изобретению также можно применять в форме композиций для парентерального введения или форме растворов для инфузий. Такие растворы предпочтительно представляют собой водные изотонические растворы или суспензии, которые, например, в случае лиофилизированных композиций, включающих действующее вещество индивидуально или в сочетании с носителем, например маннитом, можно приготавливать перед применением. Фармацевтические композиции могут быть стерильными и/или содержать эксципиенты, например консерванты, стабилизаторы, смачивающие агенты и/или эмульгаторы, вещества, способствующие растворению, соли для регулирования осмотического давления и/или буферы. Фармацевтические композиции по изобретению, которые при необходимости могут содержать другие фармакологические действующие вещества, такие как антибиотики, приготавливают хорошо известным методом, например, с помощью общепринятых процессов смешения, размалывания, конфекции, растворения или лиофилизации, и они содержат примерно от 1 до 95%, предпочтительно от примерно 1 до примерно 20% действующих(его) веществ(а).

Приведенные ниже примеры служат для иллюстрации изобретения и не направлены на ограничение его объема. Температуры даны в градусах Цельсия. Если не указано иное, все процедуры выпаривания проводят при пониженном давлении, предпочтительно при давлении приблизительно 15-100 мм рт. столба (что соответствует 20-133 мбар). Строение конечных продуктов, промежуточных и исходных продуктов подтверждают стандартными аналитическими методами, например получают характеристики с помощью микроанализа или спектроскопии (например, МС, ИК, ЯМР). Примененные сокращения являются общепринятыми в данной области.

В тексте заявки используются следующие сокращения:

AcOEt	этиловый эфир уксусной кислоты
ДМА	N,N-диметилацетамид
ДМФ	диметилформамид
ДМСО	диметилсульфоксид
ES	электроспрей
ч	часы
ГОБТ	1-гидроксибензотриазол
ЖХВР	жидкостная хроматография высокого разрешения
Me	метил
мин	минуты
МС	масс-спектрометрия
ЯМР	ядерный магнитный резонанс
КТ	комнатная температура
ТФУК	трифторуксусная кислота
ТГФ	тетрагидрофуран
ТФТУ	тетрафторборат O-(1,2-дигидро-2-оксо-1-пиридил)-
	N,N,N',N'-тетраметилурония (мочевины)
WSCD	1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид

Сокращения, использованные при описании ЯМР-спектров

b	ушир.
d	дуплет
J	константа взаимодействия
m	мультиплет
q	квартет
s	синглет
t	триплет
ррт	част./млн
ТСМ	тетраметилсилан

Контрольный пример 1

К смоле, полученной на стадии 1.2 (90 мг, ˜0,06 ммоля), последовательно добавляли в атмосфере аргона трифенилфосфин (238 мг, 0,91 ммоля) в сухом ТГФ (0,5 мл) и 4-хлорбензиловый спирт (129 мг, 0,91 ммоля). Затем медленно добавляли неразбавленный диэтилазодикарбоксилат (0,141 мл, 0,91 ммоля). После встряхивания при 50°С в течение 15 мин суспензию фильтровали и смолу промывали ТГФ (2х). Реакцию повторяли дважды, добавляя свежие реагенты. Взвесь фильтровали и смолу промывали ТГФ (2х), поочередно 2-пропанолом и ТГФ (3х) и дихлорметаном (3х). Продукт отщепляли от носителя, обрабатывая смолу раствором ТФУК (95%)/дихлорметан, 5:95 (об./об.) при 30°С в течение 20 мин. После фильтрования проводили аналогичное второе отщепление. Остаток после фильтрования и удаления растворителя очищали препаративной ЖХВР, при этом получали (R)-2-[(4-хлорбензил)(4-пропоксибензолсульфонил)амино]-N-гидрокси-3-фенилпропионамид, МС (ES+): 503 (М+Н)⁺.

Стадия 1.1 Связанный с полимером (R)-2-амино-N-гидрокси-3-фенилпропионамид

К раствору N-(9-флуоренилметоксикарбонил)-D-фенилаланина (2,09 г, 5,4 ммоля) в сухом дихлорметане/ДМА 1:1 (20 мл) добавляли ТФТУ (1,76 г, 5,94 ммоля) и N-этилдиизопропиламин (1,02 мл, 5,94 ммоля). После перемешивания в течение 5 мин смесь добавляли к аминоокси-2-хлортритилполистирольной смоле (2,8 г, 2,7 ммоля; Tetrahedron Lett. 1997, 38, 3311-3314) и полученную суспензию встряхивали при КТ в течение 16 ч. Смесь фильтровали и смолу промывали поочередно ДМА и дихлорметаном (3х). Описанную операцию конденсации повторяли с повторным добавлением свежеприготовленной смеси N-(9-флуоренилметоксикарбонил)-O-фенилаланина (2,09 г, 5,4 ммоля), ТФТУ (1,76 г, 5,94 ммоля) и N-этилдиизопропиламина (1,02 мл, 5,94 ммоля) в дихлорметане/ДМА 1:1 (20 мл). Через 16 ч суспензию фильтровали и смолу промывали ДМА (2х), поочередно водой и ДМА (2х), поочередно 2-пропанолом и ТГФ (3х), ТГФ (2х) и дихлорметаном (3х). Полученную смолу встряхивали в течение 30 мин со свежеприготовленным раствором дихлорметана/пиперидина 8:2 (25 мл). После фильтрования процесс повторяли дважды со свежеприготовленным раствором дихлорметана/пиперидина. Суспензию фильтровали, смолу промывали дихлорметаном (2х), поочередно 2-пропанолом и дихлорметаном (2х), дихлорметаном (3х) и сушили в вакууме, при этом получали связанный с полимером (R)-2-амино-N-гидрокси-3-фенилпропионамид.

Стадия 1.2

Связанный с полимером (R)-N-гидрокси-3-фенил-2-(4-пропоксибензолсульфонил-амино)пропионамид

К 400 г (˜0,33 ммоля) смолы, полученной на стадии 1.1, последовательно добавляли сухой дихлорметан (2 мл), 4-диметиламинопиридин (4 мг, 0,033 ммоля), 4-пропоксибензолсульфонилхлорид (309,8 мг, 1,32 ммоля), растворенный в сухом дихлорметане (1 мл), и N-этилдиизопропиламин (0,28 мл, 1,64 ммоля). После встряхивания в течение 15 ч при КТ суспензию фильтровали и смолу промывали дихлорметаном (3х), поочередно ДМА и водой (2х), 0,2 М водным раствором лимонной кислоты, поочередно ДМА и водой (2х), поочередно 2-пропанолом и ТГФ (3х) и дихлорметаном (4х). Смолу сушили при пониженном давлении, при этом получали связанный с полимером (R)-N-гидрокси-3-фенил-2-(4-пропоксибензолсульфонил-амино)пропионамид.

Примеры 2-57

Приведенные в таблице гидроксамовые кислоты (примеры 2-57) получали аналогично тому, как описано в примере 1.

Пример 58

Смолу, полученную на стадии 58,2 (70 мг, ˜0,045 ммоля), обрабатывали в атмосфере аргона сухим дихлорметаном (0,8 мл), трифенилфосфином (150 мг, 0,57 ммоля) и 3-метоксибензиловым спиртом (0,07 мл, 0,56 ммоля). Затем при КТ добавляли неразбавленный диэтилазодикарбоксилат (0,088 мл, 0,56 ммоля). После перемешивания при КТ в течение 15 ч взвесь фильтровали и смолу промывали дихлорметаном (3х) или 2-пропанолом и дихлорметаном (3х) и дихлорметаном (3х). Продукт отщепляли от носителя, обрабатывая смолу раствором ТФУК (95%)/дихлорметана 5:95 (об./об.). Остаток, полученный после фильтрования и удаления растворителя, очищали препаративной ЖХВР, при этом получали 2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)-амино}-N-гидроксиацетамид; МС (ES+): 441 (М+Н)⁺.

Стадия 58.1

Связанный с полимером 2-амино-N-гидроксиацетамид

К суспензии аминоокси-2-хлортритилполистирольной смолы (3,0 г, 3,15 ммоля) в сухом дихлорметане (30 мл) добавляли смесь N-(9-флуоренилметокси-карбонил)глицина (3,40 г, 11,4 ммоля), гидрата 1-гидроксибензотриазола (1,27 г, ˜8,33 ммоля) и 1,3-диизопропилкарбодиимида (1,3 мл, 8,34 ммоля) в сухом дихлорметане (20 мл). Полученную смесь обрабатывали N-этилдиизопропиламином (1,41 мл, 8,24 ммоля) и перемешивали при КТ в течение 15 ч. После фильтрования смолу промывали ДМФ (2х), поочередно водой и ДМФ (3х), поочередно ТГФ и 2-пропанолом (3х), ТГФ (2х) и дихлорметаном (3х). Процедуру конденсации повторяли со свежеприготовленной смесью ]М-(9-флуоренилметоксикарбонил)глицина (3,03 г, 10,2 ммоля), 1-гидроксибензотриазола (1,26 г, ˜8,23 ммоля), 1,3-диизопропилкарбодиимида (1,4 мл, 8,98 ммоля) и N-этилдиизопропиламина (1,41 мл, 8,24 ммоля) в сухом дихлорметане (30 мл). После перемешивания в течение 16 ч суспензию фильтровали и полимер промывали, как описано выше. Полученную смолу обрабатывали свежеприготовленным раствором дихлорметана/пиперидина 8:2 (100 мл), перемешивали при КТ в течение 20 мин и смолу отделяли фильтрованием. Этот процесс повторяли дважды со свежеприготовленным раствором дихлорметана/пиперидина. Смолу промывали дихлорметаном (2х), поочередно 2-пропанолом и дихлорметаном (2х), дихлорметаном (2х), 2-пропанолом (2х) и сушили в вакууме, при этом получали связанный с полимером 2-амино-N-гидроксиацетамид.

Стадия 58.2

Связанный с полимером 2-[4-(4-фторбутокси)бензолсульфониламино]-N-гидроксиацетамид

К смоле, полученной на стадии 58.1 (350 мг, ˜0,3 ммоля), последовательно добавляли 4-(4-фторбутокси)бензолсульфонилхлорид (306 мг, 1,15 ммоля) в сухом дихлорметане (4 мл) и N-этилдиизопропиламин (0,24 мл, 1,40 ммоля) в сухом дихлорметане (4 мл). После перемешивания в течение 15 ч при КТ суспензию фильтровали и смолу промывали дихлорметаном (2х), ДМФ (2х), поочередно водой и ДМФ (3х), поочередно ТГФ и 2-пропанолом (3х), дихлорметаном (3х). Смолу сушили при пониженном давлении, при этом получали связанный с полимером 2-[4-(4-фторбутокси)бензол-сульфониламино]-N-гидроксиацетамид.

Приведенные в таблице гидроксамовые кислоты (примеры 59-67) получали аналогично тому, как описано в примере 58.

Пример	Соединение	МС (ES+)(M+H)+
59	2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-фторбензил)амино}-N-гидроксиацетамид	431
60	2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамид	443
61	2-{(4-хлорбензил)[4-(3-хлорпропокси)-бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид	447
62	2-{(4-фторбензил)[4-(3-фторпропокси)-бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид	415
63	2-{[4-(3-фторпропокси)бензолсульфонил](3-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамид	427
64	2-{(4-хлорбензил)[4-(3-фторпропокси)-бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид	431
65	2-{(4-фторбензил)[4-(4-фторбутокси)-бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид	429
66	2-{(4-хлорбензил)[4-(4-фторбутокси)-бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид	445
67	2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-хлорбензил)амино]-N-гидроксиацетамид	425

Пример 68

К раствору 4,81 г (0,114 моля) {[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}уксусной кислоты в 500 мл CH₂Cl₂ по каплям добавляли 19,56 мл (0,228 моля) оксалилхлорида и 0,88 мл (0,011 моля) ДМФ при 0-5°С в атмосфере азота. Смесь перемешивали при 0-5 С в течение 1 ч и при КТ в течение 1 ч. К раствору 226 мл (3,42 моля) 50%-го гидроксиламина в воде (фирма Aldrich) в 1200 мл ТГФ добавляли свежеприготовленный раствор вышеупомянутого оксалилхлорида в СН₂Cl₂ в течение 45 мин при температуре от -10 до -5°С через тефлоновую трубку под давлением газообразного азота. Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин при температуре от -5 до 0°С и фильтровали через бумажный фильтр для удаления нерастворимого осадка. Фильтрат разбавляли водой и экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлением. Продукт собирали фильтрованием и промывали эфиром, при этом получали 43,03 г 2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамида; ЯМР (CDCl₃): 2,2-2,35 (m, 2Н), 3,69 (s, 2H), 3,76 (t, 2H, J=6 Гц), 3,79 (s, 3H), 4,21 (t, 2H, J=6 Гц), 4,26 (s, 2H), 6,77 (ушир.s, 1H), 6,85 (d, 2H, J=9.04 Гц), 7,03 (d, 2H, J=9,04 Гц), 7,15 (d, 2H, J=9,04 Гц), 7,78 (d, 2H, 1=8,56 Гц), 8,82 (ушир.s, 1H).

Стадия 68.1

К раствору 77,46 г (0,617 моля) гидрохлорида метилового эфира глицина в СН₂ Cl₂ последовательно добавляли 92 мл (0,66 моля) триэтиламина, раствор 60 г (0,44 моля) пара-анисового альдегида в 50 мл CH₂Cl₂ и 40 г MgSO₄ при 0-5°С в атмосфере азота. После перемешивания при КТ в течение 18 ч реакционную смесь фильтровали через целит и промывали СН₂Cl₂. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и затем неочищенную смесь разбавляли AcOEt. Раствор в AcOEt снова фильтровали для удаления гидрохлорида триэтиламина, фильтрат разбавляли толуолом, а затем концентрировали при пониженном давлении (для удаления азеотропа воды), при этом получали 91,3 г метилового эфира [(4-метоксибензилиден)амино]уксусной кислоты в виде кристаллов светло-желтого цвета; ЯМР (С₆D ₆): 3,18 (s, 3H), 3,34 (s, 3H), 4,13 (s, 3H), 6,69 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,70 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,79 (s, 1H).

Стадия 68.2

К раствору 91,3 г (0,441 моля) метилового эфира [(4-метокси-бензилиден)амино]уксусной кислоты в 500 мл ТГФ и 1000 мл МеОН добавляли порциями при температуре от -10 до 0°С 20 г (0,529 моля) боргидрида натиря. Реакционную смесь перемешивали при температуре от -10 до 0°С в течение 30 мин и реакцию останавливали добавлением насыщенного раствора NH₄ Cl. После добавления ледяной воды смесь концентрировали до 1/4 суммарного объема и экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали метиловый эфир (4-метоксибензиламино)уксусной кислоты, ЯМР (CDCl ₃): 1,87 (ушир.s, 1Н), 3,41 (s, 2Н), 3,73 (s, 3Н), 3,74 (s, 2Н), 3,8 (s, 3H), 6,86 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,24 (d, 2Н, J=8,56 Гц).

Стадия 68.3

К раствору 30,97 г (0,148 моля) метилового эфира (4-метоксибензиламино)уксусной кислоты в 200 мл диоксана и 200 мл воды добавляли при 0-5°С 25 мл (0,178 моля) триэтиламина, раствор 43,9 г (0,163 моля) 4-(3-хлор-пропокси)бензолсульфонилхлорида в 100 мл диоксана. Смесь нагревали до КТ и перемешивали в течение 3 ч. Реакционную смесь нейтрализовали 1 н. HCl и экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали метиловый эфир {[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}уксусной кислоты; ЯМР (CDCl₃): 2,25-2,35 (m, 2Н), 3,56 (s, 3Н), 3,75 (t, 2Н, J=6,04 Гц), 3,79 (s, 3Н), 3,9 (s, 2Н), 4,2 (t, 2Н, J=6,04 Гц), 4,39 (s, 2Н), 6,84 (d, 2Н, J=8,56 Гц), 6,99 (d, 2Н, 1=9,08 Гц), 7,16 (d, 2Н, J=9,08 Гц), 7,83 (d, 2Н, J=8,56 Гц).

Стадия 68.4

К раствору 59,7 г (0,135 моля) метилового эфира {[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}уксусной кислоты в 500 мл МеОН, 500 мл ТГФ и 200 мл воды добавляли при 0-5°С 11,3 г и LiOH:Н₂О (0,27 моля). Смесь нагревали до КТ и перемешивали в течение 4 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и разбавляли водой и AcOEt. После подкисления 2н. HCl при 0-5°С смесь экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали солевым раствором и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали {[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}уксусную кислоту; ЯМР (CDCl₃): 2,25-2,29 (m, 2Н), 3,75 (t, 2Н, 3=6 Гц), 3,79 (s, 3Н), 3,91 (s, 2Н), 4,19 (t, 2Н, J=6 Гц), 4,38 (s, 2Н), 6,84 (d, 2Н, J=8,56 Гц), 6,99 (d, 2Н, J=8,56 Гц), 7,13 (d, 2Н, J=9,04 Гц), 7,82 (d, 2Н, J=9,04 Гц).

Пример 69

Раствор 0,22 г 2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)-амино}-N-[-(1-этокси-1-метилэтокси)ацетамида в 30 мл AcOEt обрабатывали 7 мл 5н. водной HCl в течение 10 мин при КТ и смесь экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали насыщенным раствором NaHCO₃ и солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, полученное твердое вещество промывали эфиром, при этом получали 2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамид; ЯМР (CDCl₃): 1,83-2,05 (m, 4H), 3,69 (s, 2H), 3,78 (s, 3Н), 4,09 (t, 2H, J=5,56 Гц), 4,25 (s, 2H), 4,48 (t, 1H, 1=5,52 Гц), 4,55-4,65 (m, 1H), 6,84 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,00 (d, 2H, J=9,04 Гц), 7,02 (ушир.s, 1H), 7,15 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,77 (d, 2H, J=8,56 Гц), 8,85 (ушир.s, 1H).

Стадия 69.1

Раствор 31,4 мл (430 ммолей) тионилхлорида и 0,2 мл (2,58 ммоля) ДМФ быстро добавляли к 10 г (43 ммоля) натриевой соли 4-гидроксибензолсульфоновой кислоты в атмосфере азота. Полученную смесь перемешивали при 65°С в течение 6 ч. Затем невязкую, практически гомогенную реакционную смесь выливали в лед при интенсивном перемешивании. При этом образовывался маслообразный нижний слой, который растворяли в 100 мл CH₂Cl₂. Водный слой экстрагировали СН₂Cl₂ и объединенный органический раствор сушили над MgSO₄, концентрировали при пониженном давлении, при этом получали 8,19 г 4-гидроксибензолсульфонилхлорида; ЯМР (CDCl₃): 5,3 (ушир.s, 1 H), 7,01 (d, 2H, J=9,08 Гц), 7,94 (d, 2H, J=9,08 Гц).

Стадия 69.2

К раствору 8,7 г (45,2 ммоля) 4-гидроксибензолсульфонилхлорида в 80 мл СН ₂Cl₂ по каплям при 0°С добавляли раствор 6,75 г (32,3 ммоля) метилового эфира (4-метоксибензиламино)уксусной кислоты в 20 мл СН₂Cl₂ и 12 мл (79,2 ммоля) триэтиламина. Полученную смесь перемешивали при КТ в течение 4 ч, нейтрализовали холодной, 1н. водной HCl и экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенные экстракты промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент AcOEt/CH₂Cl₂, 50:1˜5:1), при этом получали метиловый эфир [(4-гидроксибензолсульфонил)(4-метоксибензил)амино]уксусной кислоты; ЯМР (CDCl₃): 3,57 (s, 3Н), 3,79 (s, 3Н), 3,90 (s, 2H), 4,40 (s, 2H), 5,59 (s, 1H), 6,84 (d, 2H, J=8,6 Гц), 6,93 (d, 2H, J=10,64 Гц), 7,15 (d, 2H, J=8,6 Гц), 7,82 (d, 2H, J=10,64 Гц).

Стадия 69.3

К суспензии 1 г (2,74 ммоля) метилового эфира [(4-гидроксибензол-сульфонил)(4-метоксибензил)амино]уксусной кислоты и 1,14 г (8,22 ммоля) К₂СО₃ в 8 мл ДМФ по каплям при КТ добавляли 0,59 мл (5,47 ммоля) 1-бром-4-фторбутана. После перемешивания при КТ в течение 18 ч реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюент AcOEt/н-гексан, 3:1), при этом получали метиловый эфир {[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}уксусной кислоты; ЯМР (CDCl₃): 1,86-1,96 (m, 4H), 3,57 (s, 3Н), 3,79 (s, 3Н), 3,90 (s, 2H), 4,08 (t, 2H, J=6,04 Гц), 4,39 (s, 2H), 4,46 (t, 1H, J=6,04 Гц), 4,55-4,65 (m, 1H), 6,83 (d, 2H, J=8,56 Гц), 6,97 (d, 2H, J=9,08 Гц), 7,15 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,82 (d, 2H, J=9,08 Гц).

Стадия 69.4

К раствору 1,04 г (2,37 ммоля) метилового эфира {[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}уксусной кислоты в 15 мл ТГФ, 15 мл МеОН и 7 мл воды порциями добавляли 0,24 г (5,7 ммоля) моногидрата LiOH и реакционную смесь перемешивали при 0-5°С в течение 30 мин. После перемешивания в течение дополнительных 3,5 ч реакционную смесь подкисляли 1н. водной HCl и экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали {[4-(4-фторбутокси)-бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}уксусную кислоту; ЯМР (CDCl₃): 1,86-1,96 (m, 4H), 3,79 (s, 3Н), 3,90 (s, 2H), 4,08 (t, 2H, J=5,52 Гц), 4,38 (s, 2H), 4,48 (t, 1H, J=6,04 Гц), 4,55-4,65 (m, 1H), 6,84 (d, 2H, J=8,56 Гц), 6,98 (d, 2H, J=9,08 Гц), 7,14 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,81 (d, 2H, J=9,08 Гц).

Стадия 69.5

К раствору 20 г (123 ммоля) N-гидроксифталимида в 360 мл CH₃CN при КТ порциями добавляли 26,42 мл (276 ммолей) 2-метоксипропена и 42,36 мг (0,246 ммоля) безводной пара-толуолсульфоновой кислоты. После перемешивания в течение 1 ч смесь разбавляли 25 мл насыщенного раствора NaHCO ₃ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток экстрагировали AcOEt и органический слой промывали водой и солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали 21,84 г 2-(1-метокси-1-метилэтокси)изоиндол-1,3-диона в виде твердого вещества белого цвета; ЯМР (CDCl₃): 1,57 (s, 6Н), 3,61 (s, 3H), 7,75 (dd, 2H, J=5,56 Гц, J=3,0 Гц), 7,83 (dd, 2H, J=5,56 Гц, J=3,0 Гц).

Стадия 69.6

К раствору 21,8 г (92,8 ммоля) 2-(1-метокси-1-метилэтокси)изоиндол-1,3-диона в 200 мл CH₂Cl₂ и 70 мл МеОН по каплям в течение 40 мин при 0-5°С добавляли 191,2 мл (191,2 ммоля) 1 М гидразина в ТГФ. После перемешивания при КТ в течение 2 ч смесь фильтровали для удаления нерастворимого осадка. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и экстрагировали эфиром. Объединенные экстракты промывали 10%-ным раствором NaOH, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали O-(1-метокси-1-метилэтил)гидроксиламин; ЯМР (CDCl₃): 1,36 (s, 6Н), 3,25 (s, 3H), 4,95 (ушир-s, 2H).

Стадия 69.7

К раствору 0,425 г (1 ммоль) требуемой {[4-(4-фторбутокси)бензол-сульфонил](4-метоксибензил)амино}уксусной кислоты и 0,27 г (2 ммоля) ГОБТ в 4 мл ДМФ последовательно добавляли при 0-5 С раствор 0,116 г 0-(1-метокси-1-метилэтил)гидроксил-амина в 1 мл ДМФ и 0,23 г WSCD и смесь перемешивали в течение 1 ч. После перемешивания при КТ в течение дополнительных 2 ч смесь разбавляли водой и экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент:AcOEt/н-гексан, 1:1), при этом получали 2-{[4-(4-фторбутокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-(1-этокси-1-метилэтокси)ацетамид; ЯМР (CDCl₃): 1,35 (s, 6Н), 1,83-2,0 (m, 4H), 3,29 (s, 3Н), 3,70 (s, 2H), 3,78 (s, 3Н), 4,08-4,11 (m, 2H), 4,32 (s, 2H), 4,47-4,49 (m, 1H), 4,60 (ушир.s, 1H), 6,80-6,90 (m, 2H), 6,95-7,05 (m, 2H), 7,10-7,25 (m, 2H), 7,79 (d, 2H, J=9,06 Гц), 8,46 (ушир.s, 1H).

Гидроксамовые кислоты, описанные в примерах 70-76, получали аналогично тому, как описано в примере 69.

Пример 70

2-{[4-(4-хлорбутокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-N-гидроксиацетамид;

ЯМР (CDCl₃): 1,95-2,05 (m, 4H), 3,55-3,65 (m, 2H), 3,68 (s, 2H), 3,77 (s, 3Н), 4,07 (ушир.s, 2H), 4.25 (s, 2H), 6,84 (d, 2H, J=8,56 Гц), 6,99 (d, 2H, J=9,04 Гц), 7,00 (ушир.s, 1H), 7,15 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,77 (d, 2H, J=9,04 Гц), 8,84 (ушир.s, 1Н).

Пример 71

{(4-метоксибензил)[4-(4,4,4-трифторбутокси)бензолсульфонил]амино}-N-гидроксиацетамид;

ЯМР (CDCl₃): 2,01-2,15 (m, 2H), 2,25-2,40 (m, 2H), 3,70 (s, 2H), 3,79 (s, 3Н), 4,10 (t, 2H, J=6,04 Гц), 4,26 (s, 2H), 6,73 (ушир.s, 1H), 6,85 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,01 (d, 2H, J=9,08 Гц), 7,15 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,78 (d, 2H, J=9,08 Гц), 8,83 (ушир.s, 1H).

Пример 72

{[4-(4-фторпропокси)бензолсульфонил](4-метоксибензил)амино}-]-N-гидроксиацетамид; ЯМР (CDCl₃): 2,15-2,30 (m, 2H), 3,70 (s, 2H), 3,79 (s, 3Н), 4.18-4,20 (t, 2H, J=6,04 Гц), 4,26 (s, 2H), 4,61 (t, 1H, J=5,56 Гц), 4,73 (t, 1H, J=5,52 Гц), 6,53 (ушир.s, 1H), 6,85 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,03 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,15 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,78 (d, 2H, J=8,56 Гц), 8,82 (ушир.s, 1H).

Пример 73

[(4-бут-3-ен-1-илоксибензолсульфонил](4-метоксибензил)амино]-N-гидроксиацетамид; ЯМР (CDCl₃): 2,50-2,65 (m, 2H), 3,70 (s, 2H), 3,79 (s, 3Н), 4,09 (t, 2H, J=7,04 Гц), 4,26 (s, 2H), 5,13-5,22 (m, 2H), 5,75-5,95 (m, 1H), 6,56 (ушир.s, 1Н), 6,84 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,01 (d, 2H, J=9,04 Гц), 7,15 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,76 (d, 2H, J=9,04 Гц), 8,83 (ушир.s, 1H).

Пример 74

2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил]пиридин-3-илметиламино}-N-гидроксиацетамид;

ЯМР (ДМСО-d6): 2,20-2,22 (m, 2Н), 3,78 (s, 2H), 3,71-3,90 (m, 4H), 4,22 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 7,17 (d, 2H, J=8,08 Гц), 7,84 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,95 (ушир.s, 1Н), 8,47 (d, 2H, J=7,08 Гц), 8,80 (ушир.s, 1Н), 8,87 (s, 1H), 10,97 (ушир.s, 1Н).

Пример 75

[(4-метоксибензил)[4-проп-2-инилоксибензолсульфонил]амино]-N-гидроксиацетамид; ЯМР (CDCl₃): 3,61 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 4,31 (s, 2H), 4,90 (d, 2H, J=2,0 Гц), 6,90 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,10-7,20 (m, 4H), 7,85 (d, 2H, J=8,56 Гц), 8,89 (ушир.s, 1Н), 10,51 (ушир.s, 1Н).

Пример 76

[(4-метоксибензил)[4-бут-2-инилоксибензолсульфонил]амино]-N-гидроксиацетамид; ЯМР (CDCl₃): 1,85 (s, 3H), 3,59 (s, 2H), 3,74 (s, 3H), 4,29 (s, 2H), 6,88 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,11-7,20 (m, 4H), 7,82 (d, 2H, J=9,04 Гц), 8,87 (ушир.s, 1Н), 10,48 (ушир.s, 1H).

Пример 77

К раствору 0,697 г (0,719 ммоля) этилового эфира [4-(3-хлорпропокси)бензол-сульфонил](2,2-диметилпропил)уксусной кислоты и 0,248 г (3,57 ммоля) гидрохлорида гидроксиламина в 6 мл МеОН при 0°С добавляли NaOMe, свежеприготовленный из 0,25 г (6,247 ммоля) NaH в МеОН. После перемешивания при КТ в течение 18 ч смесь выливали в ледяную воду и экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (AcOEt/н-гексан, 3:1), при этом получали 2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил}(2,2-диметилпропил)амино-N-гидроксиацетамид; ЯМР (CDCl₃): 0,98 (s, 9H), 2,20-2,35 (m, 2H), 2,95 (s, 2H), 3,69 (s, 2H), 3.75 (t, 2H, J=6,12 Гц), 4,20 (t, 2H, J=5,76 Гц), 7,03 (d, 2H, J=8,92 Гц), 7,06 (ушир.s, 1H), 7,76 (d, 2H, J=8,92 Гц), 9,54 (ушир.s, 1H).

Стадия 77.1

К раствору 3,5 г (13 ммоля) 4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонилхлорида в 100 мл СН₂Cl₂ по каплям при 0-5°С добавляли раствор 1,62 г (18,56 ммоля) неопентиламина в 15 мл CH₂Cl₂ и 2,59 мл (18,56 ммоля) триэтиламина. После перемешивания при КТ в течение 2,5 ч реакционную смесь нейтрализовали 1н. водной HCl и экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали 4-(3-хлорпропокси)-N-(2,2-диметилпропил)бензолсульфонамид; ЯМР (CDCl₃): 0,879 (s, 9H), 2,20-2,35 (m, 2H), 2,66 (d, 2H, J=6,88 Гц), 3,76 (t, 2H, J=6,28 Гц), 4,20 (t, 2H, J=5,84 Гц), 4,35-4,465 (m, 1Н), 6,98 (d, 2H, J=8,88 Гц), 7,77 (d, 2H, J=8,88 Гц).

Стадия 77.2

К суспензии 0,197 г (4,93 ммоля) NaH в 10 мл ТГФ порциями при 0°С добавляли раствор 1 г (3,13 ммоля) 4-(3-хлорпропокси)-N-(2,2-диметилпропил)бензолсульфонамида в 10 мл ТГФ и полученную смесь перемешивали при КТ в течение 30 мин. К раствору добавляли 0,55 мл (4,93 ммоля) бромэтилацетата и реакционную смесь перемешивали при КТ в течение 40 мин, нейтрализовали 1н. водной HCl и экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (AcOEt/н-гексан, 1:6), при этом получали этиловый эфир [4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](2,2-диметилпропил)аминоуксусной кислоты; ЯМР (CDCl₃): 0,96 (s, 9H), 1,20 (t, 3H, J=7,0 Гц), 2,20-2,30 (m, 2H), 3,08 (s, 2H), 3,75 (t, 2H, J=6,24 Гц), 4,02 (s, 2H), 4,08 (q, 2H, J=7,0 Гц), 4,17 (t, 2H, J=5,82 Гц), 6,96 (d, 2H, J=8,92 Гц), 7,76 (d, 2H, J=8,92 Гц).

Пример 78

Прочие промежуточные соединения

Соединения, описанные в данном примере, были использованы в качестве промежуточных на различных стадиях получения соединений формулы I.

78.1 Соединения формулы VII

Связанные с полимером соединения (R)-2-амино-N-гидрокси-3-метил-бутирамид, (R)-2-амино-N-гидроксипропионамид и (R)-2-амино-N-гидрокси-4-метилвалерамид синтезировали из N-(9-флуорениметоксикарбонил)-D-валина, N-(9-флуоренилметоксикарбонил)-D-аланина и N-(9-флуоренилметоксикарбонил)-D-лейцина с использованием аминоокси-2-хлортритилполистирольной смолы аналогично тому, как описано в примере 1, стадия 1.1.

78.2 Соединения формулы II

Связанные с полимером соединения

(R)-2-[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфониламино]-N-гидрокси-3-фенилпропионамид, (R)-2-[4-(3-фторпропокси)бензолсульфониламино]-N-гидрокси-3-фенилпропионамид, (R)-2-[4-(4-фторбутокси)бензолсульфониламино]-N-гидрокси-3-фенилпропионамид, (R)-2-(4-бут-3-ен-1-илоксибензолсульфониламино)-N-гидрокси-3-фенилпропионамид, (R)-2-[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфониламино]-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-[4-(3-фторпропокси)бензолсульфониламино]-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-[4-(4-фторбутокси)бензолсульфониламино]-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-(4-бут-3-ен-1-илоксибензолсульфониламино)-N-гидрокси-3-метилбутирамид,

(R)-2-[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфониламино]-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-[4-(3-фторпропокси)бензолсульфониламино]-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-[4-(4-фторбутокси)бензолсульфониламино]-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-(4-бут-3-ен-1-илоксибензолсульфониламино)-N-гидроксипропионамид,

(R)-2-[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфониламино]-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-[4-(3-фторпропокси)бензолсульфониламино]-N-гидрокси-4-метилвалерамид,

(R)-2-[4-(4-фторбутокси)бензолсульфониламино]-N-гидрокси-4-метилвалерамид и

(R)-2-(4-бут-3-ен-1-илоксибензолсульфониламино)-N-гидрокси-4-метилвалерамид получали аналогично тому, как описано в примере 1, стадия 1.2.

Связанные с полимером соединения

2-[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфониламино]-N-гидроксиацетамид,

2-[4-(3-фторпропокси)бензолсульфониламино]-N-гидроксиацетамид и

2-[4-(бут-3-ен-1-илокси)бензолсульфониламино]-N-гидроксиацетамид получали аналогично тому, как описано в примере 58, стадия 58.2.

Соединения формулы VIII

78.3.1. 4-(3-Хлорпропокси)бензолсульфонилхлорид

К раствору 52,75 г (0,265 моля) (3-хлорпропокси)бензола в 100 мл CH₂Cl₂ по каплям при 0-5°С в атмосфере азота добавляли раствор 19,4 мл (0,292 моля) хлорсульфоновой кислоты в 100 мл CH₂Cl₂. Смесь нагревали до температуры окружающей среды и перемешивали в течение 2 ч. К смеси по каплям при КТ добавляли 29,6 мл (0,345 моля) оксалилхлорида и 4 мл (0,052 моля) ДМФ, затем смесь перемешивали при КТ в течение 18 ч. Реакционную смесь выливали в ледяную воду и экстрагировали CH₂Cl₂. Объединенные экстракты сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали 58,5 г 4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонилхлорида; ЯМР (CDCl₃): 2,26-2,36 (m, 2Н), 3,76 (t, 2H, J=6,04 Гц), 4,24 (t, 2H, J=6,04 Гц), 7,06 (d, 2H, J=9,08 Гц), 7,98 (d, 2H, J=9,08 Гц).

Стадия 78.3.1.1. (3-Хлорпропокси)бензол

К суспензии 44 г (0,318 моля ) К₂СО₃ в 300 мл ацетона последовательно при КТ в атмосфере азота добавляли 15 г (0,159 моля) фенола и 18,9 мл (0,191 моля) 1-бром-3-хлорпропана. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 ч и концентрировали при пониженном давлении. Неочищенную смесь разбавляли холодным 1н. водным NaOH и экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали водой, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали 26,25 г (3-хлорпропокси)бензола (выход 83%); ЯМР (CDCl₃): 2,20-2,27 (m, 2H), 3,75 (t, 2H, J=6,04 Гц), 4,11 (t, 2H, J=6,04 Гц), 6,9-6,97 (m, 3Н), 7,25-7,31 (m, 2H).

78.3.2. 4-(3-Фторпропокси)бензолсульфонилхлорид

Перемешиваемую смесь дигидрата натриевой соли 4-гидроксибензолсульфоновой кислоты (3,49 г, 15 ммолей) в этаноле (15 мл) последовательно обрабатывали при КТ 2 н. раствором NaOH (7,5 мл, 15 ммолей) и 1-бром-3-фторпропаном (1,37 мл, 15 ммолей), затем кипятили с обратным холодильником в течение 15 ч. Полученный после удаления растворителя кристаллический остаток растирали с этанолом/водой (2:1) и охлаждали до 0°С. Продукт отфильтровывали, промывали холодным этанолом/водой (2:1) и сушили в вакууме, при этом получали натриевую соль 4-(3-фторпропокси)бензолсульфоновой кислоты. Смесь указанной соли (2,89 г, 11,3 ммоля) и дихлорметана (5 мл) при КТ обрабатывали SOCl₂ (5 мл, 68,9 ммоля) и ДМФ (0,2 мл). После перемешивания при КТ в течение 72 ч остаток обрабатывали ледяной водой и водную фазу дважды экстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные органические слои сушили над Na₂ SO₄, выпаривали и остаток сушили в вакууме, при этом получали соединений, указанное в заголовке; ЯМР (CDCl₃ ) d: 7,98 и 7,04 (AA'BB', 4H), 4,77 (t, 1H), 4,53 (t, 1H), 4,20 (t, 2H), 2,08-2,25 (m, 2H).

78.3.3. 4-(3-Фторбутокси)бензолсульфонилхлорид

Соединение, указанное в заголовке, получали аналогично тому, как описано в примере 78.3.2 при синтезе 4-(3-фторпропокси)бензолсульфонилхлорида; ЯМР (CDCl₃) d: 7,96 и 7,02 (AA'BB', 4Н), 4,64 (t, 1H), 4,40 (t, 1H), 4,11 (t, 2H), 1,73-2,06 (m, 4H).

78.3.4. 4-(Бут-3-енилокси)бензилсульфонилхлорид

Перемешиваемую смесь дигидрата натриевой соли 4-гидроксибензолсульфоновой кислоты (4,65 г, 20 ммолей) в этаноле (20 мл) последовательно обрабатывали при КТ 2 н. раствором NaOH (10 мл, 20 ммолей) и 4-бром-1-бутеном (2,03 мл, 20 ммолей), а затем кипятили с обратным холодильником в течение 15 ч. Растворитель частично отгоняли и остаток охлаждали до 0°С. Кристаллический продукт отфильтровывали и промывали холодной водой. Фильтрат концентрировали в вакууме до появления осадка. После добавления воды суспензию охлаждали до 0°С и фильтровали. Остаток промывали холодной водой, объединяли с первой порцией кристаллов и сушили в вакууме, при этом получали натриевую соль 4-(бут-3-енилокси)бензолсульфоновой кислоты. Смесь указанной соли (2,67 г, 10,7 ммоля) и дихлорметана (5 мл) при КТ обрабатывали SOCl₃ (5 мл, 68,9 ммоля) и ДМФ (0,2 мл). После перемешивания при КТ в течение 15 ч остаток обрабатывали ледяной водой и водную фазу дважды экстрагировали диэтиловым эфиром. Объединенные органические слои сушили над Na₂ SO₄, выпаривали и остаток сушили в вакууме, при этом получали соединение, указанное в заголовке; ЯМР (CDCl₃ ) d: 7,96 и 7,02 (AA'BB', 4H), 5,77-5,99 (m, 1H), 5,09-5,26 (m, 2H), 4,11 (t, 2H), 2,51-2,66 (m, 2H).

Пример 79

К раствору 4,2 г (7,93 ммоля) 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триа-зол-1-илбензил)амино]-N-(1-метокси-1-метилэтокси)ацетамида (стадия 79.6) в 100 ml AcOEt при КТ добавляли 28 мл 5н. HCl. После перемешивания в течение 5 мин осадок отфильтровывали и сушили в вакууме, при этом получали гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида в виде бесцветного порошка. ¹H-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): 2,45-2,55 (m, 2H), 3,67 (s, 2H), 4,13 (t, 2H, J=6,56 Гц), 4,41 (s, 2H), 5,09-5,22 (m, 2H), 5,90 (m, 1H), 7,10 (d, 2H, J=9,04 Гц), 7,45 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,75-7,85 (m, 4H), 8,25 (s, 1H), 9,32 (s, 1H), 10,55 (ушир.s, 1H).

Стадия 79.1. Натриевая соль 4-бут-3-енилоксибензолсульфоновой кислоты

К суспезии 25 г (108 ммолей) дигидрата натриевой соли пара-фенолсульфоной кислоты в 100 мл этанола при КТ последовательно добавляли 54 мл 2н. водного раствора гидроксида натрия (160 ммолей) и 11 мл (108 ммолей) 4-бром-1-бутена. После кипячения с обратным холодильником при 90°С в течение 15 ч смесь охлаждали до 0°С, получая осадок, который отфильтровывали, дважды промывали холодной водой и сушили в вакууме, при этом получали натриевую соль 4-бут-3-енилоксибензолсульфоновой кислоты, ¹H-ЯМР (400 МГц, DMSO-d6): 2,30-2,40 (m, 2H), 3,89 (t, 2H, J=6,6 Гц), 4,92-5,07 (m, 2H), 5,70-5,80 (m, 1H), 6,72 (d, J=11,4 Гц, 2H), 7,96 (d, J=11,4 Гц, 2H).

Стадия 79.2. 4-Бут-3-енилоксибензолсульфонилхлорид

К суспензии 13 г (62 ммоля) натриевой соли 4-бут-3-енилоксибензолсульфоновой кислоты в 25 мл СН₂Cl₂ последовательно при КТ добавляли 24,1 мл (333 ммоля) тионилхлорида и 0,9 мл ДМФ. После перемешивания при КТ в течение 15 ч реакционную смесь выливали в ледяную воду, экстрагировали эфиром, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали 4-бут-3-енилоксибензолсуль-фонилхлорид. ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₂): 2,55-2,65 (m, 2H), 4,14 (t, 2 H, J=6,6 Гц), 5,10-5,25 (m, 2H), 5,72-5,95 (m, 1H), 7,04 (d, 2H, J=9,04 Гц), 7,96 (d, 2H, J=9,04 Гц).

Стадия 79.3. 4-[1,2,4]Триазол-1-илбензальдегид

К раствору 6,44 мл (60 ммолей) п-фторбензальдегида в 40 мл пиридина при КТ последовательно добавляли 4,14 г (60 ммолей) 1,2,4-триазола, 0,286 г (2 ммоля) оксида меди (I) и 9,12 г (66 ммолей) карбоната калия. После перемешивания при 125°С в течение 18 ч реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли CHCl₃ и фильтровали через целит. Фильтрат концентрировали и очищали экспресс-хроматографией на силикагеле (элюент:н-гексан/AcOEt, 4:1, ˜AcOEt˜AcOEt: MeOH, 20:1), при этом в качестве основного продукта получали 4-[1,2,4]триазол-1-илбензальдегид и в качестве минорного продукта 4-[1,3,4]триазол-1-илбензальдегид. ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 7,61 (d, 2H, J=8,56 Гц), 8,09 (d, 2H, J=8,56 Гц), 8,59 (s, 1H), 10,10 (s, 1H) (минорный продукт).; 7,91 (d, 2H, J=7,07 Гц), 8,05 (d, 2H, J=7,07 Гц), 8,16 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 10,07 (s, 1H) (основной продукт).

Стадия 79.4. Этиловый эфир (4-[1,2,4]триазол-1-илбензиламино)уксусной кислоты

К раствору 3,5 г (20 ммолей) 4-[1,2,4]триазол-1-илбензальдегида и 4,19 г (30 ммолей) гидрохлорида этилового эфира глицина в 100 мл CH₂Cl₂ при КТ последовательно добавляли 4,18 мл (30 ммолей) триэтиламина и избыток MgSO₄ (14 г). После перемешивания при КТ в течение 18 ч реакционную смесь фильтровали через целит и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли AcOEt и снова фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая неочищенный имин. К раствору неочищенного имина в 12 мл MeOH при -10°С добавляли 0,756 мг (20 ммолей) NaBH₄. После перемешивания в течение 1 ч реакцию останавливали насыщенным раствором NH₄ Cl и реакционную смесь экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент:н-гексан/AcOEt, 1:10), при этом получали соединение, указанное в заголовке. ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 1,29 (t, 3Н, J=7,04 Гц), 1,90 (ушир.s, 1H), 3,43 (s, 2H), 3,88 (s, 2H), 4,21 (q, 2H, J=7,04 Гц), 7,49 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,64 (d, 2H, J=8,56 Гц), 8,10 (s, 1H), 8,55 (s, 1H).

Стадия 79.5. Этиловый эфир [(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]уксусной кислоты

К раствору 2 г (7,683 ммоля) этилового эфира (4-[1,2,4]триазол-1-илбензиламино)уксусной кислоты в 15 мл диоксана и 15 мл воды при температуре от 0 до -5°С последовательно добавляли 2,3 г (9,22 ммоля) 4-бут-3-енилоксибензолсульфонилхлорида и 1,3 мл (9,22 ммоля) триэтиламина. После перемешивания при КТ в течение 18 ч реакционную смесь разбавляли водой и экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем, при этом получали соединение, указанное в заголовке. ¹ Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 1,17 (t, 3Н, J=7,04 Гц), 2,55-2,65 (m, 2H), 3,95 (s, 2H), 4,07 (t, 2H, J=7,04 Гц), 4,09 (t, 2H, J=6,56 Гц), 4,53 (s, 2H), 5,10-5,25 (m, 2H), 5,85-5,95 (m, 1H), 6,99 (d, 2H, J=8,04 Гц), 7,44 (d, 2H, J=7,56 Гц), 7,64 (d, 2H, J=8,04 Гц), 7,82 (d, 2H, J=7,56 Гц), 8,11 (s, 1H), 8,55 (s, 1H).

Стадия 79.6. 2-[(4-Бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-(1-метокси-1-метилэтокси)ацетамид

К раствору 3,61 г (7,67 ммоля) этилового эфира [(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]уксусной кислоты в 38 мл ТГФ и 38 мл МеОН при температуре 0-5°С добавляли 0,966 г (23 ммоля) моногидрата гидроксида лития и 4 мл воды. После перемешивания в течение 3,5 ч реакционную смесь подкисляли 2н. водной HCl при 0-5°С и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали [(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]уксусную кислоту в виде бесцветного порошка. К раствору 3,76 г полученной выше кислоты и 1,87 г (13,81 ммоля) 1-гидроксибензотриазола (ГОБТ) в 35 мл ДМФ при 0°С последовательно добавляли 1,61 г (15,34 ммоля) O-(1-метокси-1-метилэтил)гидроксиламина и 1,91 г (12,275 ммоля) 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида. После перемешивания при КТ в течение 3,5 ч реакционную смесь выливали в ледяную воду и смесь экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент:н-гексан/AcOEt, 1:3˜1:4), при этом получали соединение, указанное в заголовке. ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 1,4 (s, 6Н), 2,55-2,65 (m, 2H), 3,29 (s, 3Н), 3,73 (s, 2H), 4,09 (t, J=6,60 Гц, 2H), 4,44 (s, 2H), 5,10-5,25 (m, 2H), 5,85-5,95 (m, 1H), 7,01 (d, 2H, J=8,52 Гц), 7,44 (d, 2H, J=8,0 Гц), 7,64 (d, 2H, J=8,52 Гц), 7,81 (d, 2H, J=8,0 Гц), 8,10 (s, 1H), 8,54 (s, 1H), 8,62 (ушир.s, 1H).

Пример 80. Гидрохлорид 2-[(4-Бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-имидазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида

К раствору 0,39 г (0,74 ммоля) 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-имидазол-1-илбензил)амино]-N-(1-метокси-1-метилэтокси)ацетамида (стадия 80.4) при КТ добавляли 2,46 мл 6н. водной HCl. После перемешивания в течение 15 мин реакционную смесь нейтрализовали насыщенным раствором NaHCO₃ и экстрагировали AcOEt. Объединенные экстракты промывали солевым раствором, сушили над MgSO₄ и концентрировали при пониженном давлении, при этом получали 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-имидазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксицетамид в виде бесцветного порошка. К раствору 0,17 г (0,37 ммоля) полученного выше гидроксиацетамида в 3 мл диоксана добавляли 0,447 мл 1н. водной HCl и перемешивали в течение 10 мин. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и сушили в вакууме, при этом получали соединение, указанное в заголовке. ¹ Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): 2,40-2,50 (m, 2H), 3,61 (s, 2H), 4,07 (t, 2H, J=6,52 Гц), 4,37 (s, 2H), 5,00-5,15 (m, 2H), 5,75-5,90 (m, 1H), 7,04 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,48 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,65-7,75 (m, 5H), 7,81 (s, 1H), 8,19 (s, 1H), 9,57 (s, 1H), 10,54 (ушир.s. 1H).

Стадия 80.1. 4-Имидазол-1-илбензальдегид

К раствору 20 г (161,1 ммоля) пара-фторбензальдегида в 300 мл ДМФ при КТ последовательно добавляли 19,8 г (290,8 ммоля) имидазола и 44,5 г (322,24 ммоля) карбоната калия. После перемешивания при 100°С в течение 5,5 ч реакционную смесь охлаждали до КТ, разбавляли ледяной водой и затем смесь экстрагировали AcOEt и СН₂ Cl₂. Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении, при этом получали 4-имидазол-1-илбензальдегид в виде порошка светло-желтого цвета. ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl ₃): 7,26 (s, 1Н), 7,38 (2, 1H), 7,59 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,98 (s, 1H), 8,02 (d, 2H, J=8,56 Гц), 10,05 (s, 1H).

Стадия 80.2. Метиловый эфир (4-имидазол-1-илбензиламино)уксусной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали аналогично тому, как описано на стадии 79.4 при получении этилового эфира (4-[1,2,4]триазол-1-илбензиламино)уксусной кислоты. ¹ Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 1,92 (ушир.s, 1H), 3,45 (s, 2H), 3,75 (s, 3Н), 3,86 (s, 2H), 7,20 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,35 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,45 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,84 (s, 1H).

Стадия 80.3. Метиловый эфир [(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-имидазол-1-илбензил)амино]уксусной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали аналогично тому, как описано на стадии 79.5 при получении этилового эфира [(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)-амино]уксусной кислоты. ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 2,55- 2,65 (m, 2H), 3,59 (s, 3Н), 3,95 (s, 3Н), 4,05-4,10 (m, 2H), 4,51 (s, 2H), 5,10-5,25 (m, 2H), 5,85-6,00 (m, 1H), 6,99 (d, 2H, J=7,04 Гц), 7,20 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,35 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,40 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,83 (d, 2H, J=7,04 Гц), 7,84 (s, 1H).

Стадия 80.4. 2-[(4-Бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-имидазол-1-илбензил)амино]-N-(1-метокси-1-метилэтокси)ацетамид

Указанное в заголовке соединение получали аналогично тому, как описано на стадии 79.6 при получении 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)-амино]-N-(1-метокси-1-метилэтокси)ацетамида. ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 1,35 (s, 6H), 2,55-2,65 (m, 2H), 3,28 (s, 3Н), 3,73 (s, 2H), 4,05-4,15 (m, 2H), 4,42 (s, 2H), 5,10-5,25 (m, 2H), 5,82-5,95 (m, 1H), 7,01 (d, 2H, J=8,52 Гц), 7,20 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,34 (d, 2H, 1=8,56 Гц), 7,44 (d, 2H, J=8,52 Гц), 7,81 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,83 (s, 1H), 8,72 (ушир.s, 1H).

Пример 81. Гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-морфолин-4-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида

Указанное в заголовке соединение получали аналогично тому, как описано при получении соединения, указанное в заголовке примера 80. ¹Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-d6): 2,40-2,55 (m, 2H), 3,00-3,10 (m, 4H), 3,65-3,75 (m, 4H), 4,05 (t, 2H, J=6,52 Гц), 4,20 (s, 2H), 5,00-5,18 (m, 2H), 5,75-5,90 (m, 1H), 6,89 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,00-7,10 (m, 4H), 7,70 (d, 2H, J=8,56 Гц), 10,41 (ушир.s, 1H).

Стадия 81.1. 4-Морфолин-4-илбензальдегид

К раствору 15 г (120,86 ммоля) п-фторбензальдегида в 200 мл ДМФ при КТ последовательно добавляли 16,8 г (193,4 ммоля) морфолина и 33,36 г (241,7 ммоля) карбоната калия. После перемешивания при 100°С в течение 8 ч реакционную смесь охлаждали до КТ, разбавляли ледяной водой и затем смесь экстрагировали AcOEt и СН₂Cl₂. Объединенные экстракты концентрировали при пониженном давлении и очищали хроматографией на колонке с силикагелем (элюент:н-гексан/AcOEt, 5:1˜3:1), при этом получали 4-морфолин-4-илбензальдегид. ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl ₃): 3,35-3,40 (m, 4H), 3,85-3,90 (m, 4H), 6,92 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,77 (d, 2H, J=8,56 Гц), 9,80 (s, 1H).

Стадия 81.2. Метиловый эфир (4-морфолин-4-илбензиламино)уксусной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали аналогично тому, как описано на стадии 80.2 при получении этилового эфира (4-[1,2,4]триазол-1-илбензиламино)уксусной кислоты. ¹ Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 1,82 (ушир.s, 1H), 3,10-3,18 (m, 4H), 3,41 (s, 2H), 3,85-3,90 (m, 4H), 6,87 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,23 (d, 2H, J=8,56 Гц).

Стадия 81.3. Метиловый эфир [(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)-N-морфолин-4-илбензил)амино]уксусной кислоты

Указанное в заголовке соединение получали аналогично тому, как описано на стадии 80.3 при получении этилового эфира [(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]уксусной кислоты. ¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 2,50-2,62 (m, 2H), 3,10-3,20 (m, 4H), 3,56 (s, 3Н), 3,82-3,88 (m, 4H), 3,89 (s, 2H), 4,05-4,10 (m, 2H), 4,38 (s, 2H), 5,10-5,25 (m, 2H), 5,80-6,00 (m, 1H), 6,83 (d, 2H, J=8,56 Гц), 6,97 (d, 2H, J=9,04 Гц), 7,13 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,81 (d, 2H, J=9,04 Гц).

Стадия 81.4. 2-[(4-Бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-морфолин-4-илбензил)амино]-N-(1-метокси-1-метилэтокси)ацетамид

Указанное в заголовке соединение получали аналогично тому, как описано на стадии 80.3 при получении 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-(1-метокси-1-метилэтокси)ацетамида. ¹Н-ЯМР (400 МГц, CDCl₃): 1,35 (s, 6Н), 2,55-2,62 (m, 2H), 3,10-3,20 (m, 4H), 3,29 (s, 3H), 3,66 (s, 2H), 3,80-3,88 (m, 4H), 4,05-4,15 (m, 2H), 4,26 (s, 2H), 5,10-5,22 (m, 2H), 5,83-5,95 (m, 1H), 6,83 (d, 2H, J=9,04 Гц), 7,00 (d, 2H, J=8,56 Гц), 7,15 (d, 2H, J=9,04 Гц), 7,79 (d, 2H, J=8,56 Гц), 8,47 (ушир.s, 1H).

Пример 82

Следующие соединения получали аналогично тому, как описано в примере 79:

а) гидрохлорид 2-[(2-циклопропилэтоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

б) гидрохлорид 2-[(2-циклопропилметоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

в) гидрохлорид 2-[(3-фурилметоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

г) гидрохлорид 2-[(2-(3-фурил)этоксибензолсульфонил)(4-[1,2,4]триазол-1-илбензил)амино]-N-гидроксиацетамида.

Пример 83

Следующие соединения получали аналогично тому, как описано в примере 69:

а) 2-{[4-бут-3-енилоксибензолсульфонил](6-фторпиридин-2-ил)метиламино}-N-гидроксиацетамид,

б) 2-{[4-бут-3-енилоксибензолсульфонил](2-фторпиридин-4-ил)метиламино}-N-гидроксиацетамид,

в) 2-{[4-бут-3-енилоксибензолсульфонил](6-фторпиридин-3-ил)метиламино}-N-гидроксиацетамид,

г) гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(пиперидин-4-илметил)амино]-N-гидроксиацетамида,

д) гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(пиперидин-1-илметил)амино]-N-гидроксиацетамида,

е) гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(морфолин-4-илметил)амино]-N-гидроксиацетамида.

Пример 84

Следующие соединения получали аналогично тому, как описано в примере 80:

а) гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(пирролидин-1-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

б) гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(пиперидин-1-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

в) гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(1,2,3-триазол-2-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

г) гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(тетразол-1-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

д) гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(1,3,4-триазол-1-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

е) гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(1,2,3-триазол-1-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

ж) 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(пиррол-1-ил)-бензил)амино]-N-гидроксиацетамид,

з)гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-диметиламино-бензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

и) 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(3-фурил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамид,

к) 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-(тиен-5-ил)бензил)амино]-N-гидроксиацетамид,

л) гидрохлорид 2-[(4-бут-3-енилоксибензолсульфонил)(4-морфолин-4-илметилбензил)амино]-N-гидроксиацетамида,

Пример 85

Следующие соединения получали аналогично тому, как описано в примере 68:

а) 2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](4-(морфолин-4-илметил)бензил)амино}-N-гидроксиацетамид,

б) 2-{[4-(3-хлорпропокси)бензосульфонил](хинолин-4-илметил)амино}-N-гидроксиацетамид,

в) 2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](имидазол-4-илметил)амино}-N-гидроксиацетамид,

г) 2-{[4-(3-хлорпропокси)бензолсульфонил](1,2,4-триазол-3-илметил)амино}-N-гидроксиацетамид.

Пример 86: Безводные капсулы

3000 капсул, каждая из которых содержит в качестве действующего вещества по 0,25 г одного из соединений формулы I, описанных в предыдущих примерах, получают следующим образом:

действующее вещество	75,00 г
Лактоза	750,00 г
Avicel PH 102 (микрокристаллическая целлюлоза)	300,00 г
Polyplasdone XL (поливинилпирролидон)	30,00 г
стеарат магния	9,00 г

Процесс приготовления: Действующее вещество просеивают через ручное сито №30. Действующее вещество, лактозу, Avicel PH 102 и Polyplasdone XL смешивают в течение 15 мин в смесителе. Смесь гранулируют с достаточным количеством воды (примерно 500 мл), сушат в термостате при 35°С в течение ночи и просеивают через сито №20.

Стеарат магния просеивают через сито №20, добавляют к гранулированной смеси и смесь смешивают в течение 5 мин в смесителе. Смесь капсулируют в твердые желатиновые капсулы №0, каждая из которых содержит количество смеси, эквивалентное 25 мг действующего вещества.

Пример 87: Активность in vitro МТ1-ММР, ММР1, MMP2 и ММР9

Ингибирующие активности соединений формулы I в отношении МТ1-ММР, ММР1, MMP2 и ММР9, которые определяли в опытах in vitro, представленных в настоящем описании, приведены в таблице 1.

Таблица 1
Пример	МТ1-ММР IC50 [мкМ/л]	ММР1 IC50 [мкМ/л]	ММР2 IC50 [мкМ/л]	ММР9 IC50 [мкМ/л]
13	0,0055
15	0,0037
30	0,0127
53	0,0092
68	0,0052	0,622	0,0007	0,0012
75	0,0014	0,069	0,0010
79	0,0007	5,850	0,0002	0,0002
80	0,0012	2,610	0,0080	0,0037
81	0,0046	4,290	0,0104	0,0063
82а	0,0018	4,215	0,0402	0,0170
82б	0,0006	0,965	0,0104	0,0106
82в	0,0107	5,103	0,0053	0,0074
83а	0,0003	3,694	0,0021	0,0056
84а	0,0204	5,528	0,0147	0,0198