способ диагностики атеротромботического подтипа ишемического инсульта
Классы МПК: | G01N33/92 с использованием жиров, например холестерина |
Автор(ы): | Шутов А.А. (RU), Мишланов В.Ю. (RU), Байдина Т.В. (RU), Агафонов А.В. (RU), Сюткина О.В. (RU) |
Патентообладатель(и): | Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия Министерства Здравоохранения Российской Федерации" (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2004-06-01 публикация патента:
20.12.2005 |
Изобретение относится к области медицины, а именно к неврологии и может быть использовано для ретроспективной диагностики атеротромботического подтипа свершившегося инсульта. Сущность способа заключается в том, что из венозной крови больного, перенесшего ишемический инсульт, выделяют клеточную суспензию, обогащенную лейкоцитами в концентрации 50 000 в 1 мкл, проводят ее культивирование в стерильных флаконах в течение 62 часов, собирают надосадочную жидкость, определяют в ней уровень общего холестерина, и при его величине, превышающей 0,150 ммоль/л, диагностируют атеротромботический подтип ишемического инсульта. Использование нового критерия - уровня общего холестерина, высвобождаемого лейкоцитами, повышает доступность и точность диагностики атеротромботического подтипа ишемического инсульта. Данный показатель имеет четкие количественные критерии, отражает участие определенных патогенетических факторов, что имеет преимущество для определения тактики ведения больного в восстановительном периоде для профилактики повторного инсульта.
Формула изобретения
Способ диагностики атеротромботического подтипа ишемического инсульта, отличающийся тем, что из венозной крови больного, перенесшего ишемический инсульт, выделяют клеточную суспензию, обогащенную лейкоцитами в концентрации 50 000 в 1 мкл, проводят ее культивирование в стерильных флаконах в течение 62 ч, собирают надосадочную жидкость, определяют в ней уровень общего холестерина и при его величине, превышающей 0,150 ммоль/л, диагносцируют атеротромботический подтип ишемического инсульта.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области медицины, а именно неврологии, и может быть использовано для ретроспективной диагностики атеротромботического подтипа свершившегося инсульта, необходимой для патогенетически обоснованной профилактики повторного нарушения мозгового кровообращения.
Известен способ диагностики атеротромботического подтипа инсульта по совокупности клинических данных и результатов ультразвукового исследования (дуплексное сканирование) сонных, позвоночных и внутричерепных артерий (Инсульт. Принципы диагностики, лечения и профилактики / Под ред. Н.В.Верещагина, М.А.Пирадова, З.А.Суслиной. - М.: Интермедика. - 2002. - С.113). Основным показателем в этом случае является наличие атеросклеротического поражения экстра- и/или интракраниальных артерий в виде выраженного стенозирующего, окклюзирующего процесса, атеросклеротической бляшки с неровной поверхностью, с прилежащим тромбом на стороне, соответствующей очаговому поражению головного мозга (там же, с.63).
Недостатки прототипа: дуплексное сканирование требует дорогостоящей аппаратуры, что ограничивает его применение. Кроме того, оно не дает точного представления о состоянии интракраниальных и позвоночных артерий, что снижает точность метода в целом.
Изобретение направлено на решение задачи: повышение доступности и точности способа.
Решение указанной задачи достигается путем исследования венозной крови больного в раннем восстановительном периоде ишемического инсульта. После культивирования клеточной суспензии, обогащенной лейкоцитами, в течение 62 часов при 37 градусов С в стерильных условиях определяют концентрацию общего холестерина в надосадочной жидкости. При значении данного показателя свыше 0,150 ммоль/л диагностируют атеротромботический подтип ишемического инсульта.
Способ осуществляют следующим образом.
У больного ишемическим инсультом для исследования берут кровь из локтевой вены в количестве 10 мл в стерильную пробирку, содержащую раствор гепарина (500 ЕД). Выделяют клеточную суспензию, содержащую лейкоциты, методом отстаивания в растворе полиглюкина. Соотношение цельной венозной крови и раствора полиглюкина 5:3. Клеточную суспензию дважды отмывают (однократно в физиологическом растворе натрия хлорида и однократно в среде Игла), ресуспендируют в культуральной среде, подсчитывают количество лейкоцитов и эритроцитов в камере Горяева, доводят концентрацию лейкоцитов до 50 000 в 1 мкл (эритроцитов не более 0.6-0.8 млн в 1 мкл) и помещают в стерильные флаконы по 0.2 мл.
Инкубируют 62 часа при 37°С. Определяют количество общего холестерина в надосадочной жидкости холестериноксидазным методом. Для этого, с целью повышения чувствительности метода при определении малых концентраций общего холестерина, изменяют соотношение исследуемой биологической жидкости (сыворотки, надосадочной жидкости) и рабочего раствора реактивов, указанное в описании метода фирмой-производителем (LACHEMA) 1:101, до соотношения 1:10, и выполняют расчет содержания общего холестерина как соотношения величин оптической плотности опытной пробы и стандартного образца, умноженное на коэффициент 0.517.
Диагностирование атеротромботического подтипа инсульта осуществляют при наличии соответствующих клинических проявлений и повышении уровня общего холестерина, высвобождаемого лейкоцитами, свыше 0,150 ммоль/л. При других подтипах ишемического инсульта существенного повышения этого показателя относительно соответствующей возрастной контрольной группы не происходит.
Примеры конкретного выполнения.
Пример 1.
Больной Ч., 53 лет, поступил в клинику для восстановительного лечения 19.11.03 с жалобами на слабость в правых конечностях, которая развилась при пробуждении утром 22.10.03. Через 5 дней сила в руке и ноге начала восстанавливаться. При поступлении - легкий правосторонний гемипарез и гемигипестезия справа. Артериальное давление до заболевания не измерял. В процессе динамического наблюдения - артериальная гипертония 3 ст. с изменениями на глазном дне, ЭКГ. При дуплексном сканировании магистральных артерий головы патологии не выявлено. На компьютерной томограмме головного мозга - лакунарный инфаркт в подкорковых отделах левого полушария.
При исследовании общего холестерина, высвобождаемого лейкоцитами, 17.12.2000 результат составил 0,137 ммоль/л.
Диагноз: гипертоническая болезнь 3 ст., лакунарный (неатеротромботический) инсульт в левом полушарии, ранний восстановительный период.
Пример 2.
Больной Д., 50 лет, поступил в клинику 13.01.2004 с жалобами на слабость в правых конечностях, затруднение речи. Симптомы развились в течение нескольких часов 6.12.03. При поступлении - легкий правосторонний гемипарез, гемигипестезия, моторная афазия. Артериальное давление 120/80 мм рт.ст. На компьютерной томограмме головного мозга - слева на границе лобной и височной долей определяется участок ишемии. Дуплексное сканирование магистральных артерий головы выявило диффузное атеросклеротическое поражение общей сонной артерии слева, стеноз общей сонной артерии слева, окклюзию внутренней сонной артерии слева.
При исследовании общего холестерина, высвобождаемого лейкоцитами, 8.02.04 уровень составил 0,258 ммоль/л.
Диагноз: атеросклероз магистральных артерий головы, окклюзия левой внутренней сонной артерии, атеротромботический инсульт в бассейне левой средней мозговой артерии, ранний восстановительный период.
Пример 3.
Больной У., 55 лет, поступил в клинику 6.01.04 с жалобами на легкую слабость в правых конечностях, которая развилась 11.12.03 в течение нескольких минут. Она достигла степени плегии, сопровождалась расстройством речи и снижением остроты зрения на левый глаз. Артериальной гипертензией не страдал, в момент развития инсульта - артериальное давление 190/100 мм рт.ст. Объективно при поступлении - легкий оптико-пирамидный синдром. Дуплексное сканирование брахиоцефальных сосудов выявило некрупные бляшки с признаками нестабильности в бифуркациях обеих общих сонных артерий без их стенозирования.
При исследовании уровня холестерина, высвобождаемого лейкоцитами, 5.02.04 уровень составил 0,201 ммоль/л.
Диагноз: атеросклероз брахиоцефальных сосудов с признаками нестабильности процесса. Атеротромботический инсульт в бассейне правой внутренней сонной артерии. Ранний восстановительный период.
Положительный эффект предлагаемого способа состоит в использовании дополнительного нового критерия диагностики атеротромботического подтипа ишемического инсульта - уровня общего холестерина, высвободаемого лейкоцитами, повышающего доступность и точность диагностики. Данный показатель имеет четкие количественные критерии, отражает участие определенных патогенетических факторов, что имеет преимущество для определения тактики ведения больного в восстановительном периоде для профилактики повторного инсульта.
Класс G01N33/92 с использованием жиров, например холестерина