способ получения средства, обладающего противолямблиозным и противоописторхозным действием

Формула изобретения

Способ получения средства, обладающего противолямблиозным и противоописторхозным действием, путем непрерывной экстракции методом реперколяции измельченного сырья надземной части соссюреи иволистной (Saussurea salicifolia (L.) DC. сем. Asteraceae) 70%-ным этанолом с интервалом слива 24 ч, отличающийся тем, что непрерывной экстракции в батарее из пяти перколяторов подвергают цветоносные олиственные верхушки стебля до 30 см длиной, измельченные и просеянные через сито с диаметром отверстий 5-7 мм.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и касается способов получения из растительного сырья лекарственного средства, обладающего противолямблиозным и противоописторхозным действием.

Известен способ получения жидкого экстракта соссюреи иволистной, обладающего противолямблизным действием, путем обработки сырья 70% этанолом методом реперколяции по А.И.Босину с интервалом слива через 24 часа. Сущность способа заключается в получении жидкого экстракта 1:1 с использованием всей надземной части растения в батарее из 4-х перколяторов и получением готового продукта на пятый день из 4-го перколятора в объеме, равном всей массе экстрагируемого материала [1].

Недостатком известного способа является низкий выход действующих веществ и сухого остатка, что влияет на качество получаемого средства.

Задачей изобретения является - повышение фармакологической активности экстракта за счет увеличения выхода действующих веществ, расширение арсенала способов получения лекарственных средств, обладающих противолямблиозным и противоописторхозным действием.

Поставленную задачу достигают новым способом получения лекарственного средства, обладающего противолямблиозным и противоописторхозным действием, путем непрерывной экстракции надземной части соссюреи иволистной (Saussurea salicifolia (L.) ДС. сем. Asteraceae) 70% этанолом, при соотношении сырье - готовый продукт 1:1 с интервалом слива через 24 часа, причем непрерывной экстракции методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов подвергают цветоносные олиственные верхушки стебля, собранные в фазу цветения, до 30 см длиной, измельченные и просеянные через сито с диаметром отверстий не более 5-7 мм.

Новым в предлагаемом способе является то, что непрерывной экстракции методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов подвергают цветоносные олиственные верхушки стебля, собранные в фазу цветения, до 30 см длиной, измельченные и просеянные через сито с диаметром отверстий не более 5-7 мм.

Способ осуществляют следующим образом

Измельченные воздушно-сухие цветоносные, олиственные стебли соссюреи иволистной (Saussurea salicifolia (L.) ДС.), собранные в фазу цветения, длиной не более 30 см, просеянные через сито с диаметром отверстий 5-7 мм, заливают 70% этанолом, настаивают 24 часа и проводят последующую передвижку извлечения в очередной перколятор, заполненный свежей порцией сырья. Стадия экстракции в батарее из пяти перколяторов состоит из двух периодов: пускового и рабочего.

Пусковой период. В перколятор №1 загружают 100 г измельченного сырья и подают 450 мл 70% этанола до достижения уровня 3-4 см над сырьем (до «зеркала») и оставляют на сутки.

Второй день. В перколятор №2 загружают 100 г измельченного сырья соссюреи иволистной и на сырье подают 450 мл извлечения из перколятора №1, а в перколятор №1 подают до «зеркала» 450 мл 70% этанола. Аналогичным способом загружают перколяторы №3, 4 на третьи и четвертые сутки. На пятые сутки в перколятор №5 загружают 100 г измельченного сырья и заливают извлечением из перколятора №4, делая передвижки извлечений из перколятора №4 в перколятор №5, из перколятора №3 в перколятор №4, из перколятора №2 в перколятор №3, из перколятора №1 в перколятор №2. Перколятор №1 заполняют свежим 70% этанолом. Все перколяторы с №1 по №5 заполнены до «зеркала» и настаивают 24 часа.

Рабочий период. На шестые сутки из перколятора №5 («головного») сливают 100 мл жидкого экстракта соссюреи. В перколятор №1 после рекуперации этанола и выгрузки отработанного шрота загружают 100 г свежего сырья и заливают извлечение из перколятора №5 в количестве 100 мл. Перколятор №1 становится «головным», а перколятор №2 - «хвостовым». Делают передвижку извлечений из перколятора №2 в перколятор №3, из перколятора №3 в перколятор №4, из перколятора №4 в перколятор №5. В перколятор №1 заливают извлечение из перколятора №5, делая вторичную передвижку извлечений из перколятора №2 в №3, из №3 в №4, из №4 в №5. Все перколяторы, заполненные «до зеркала», настаивают в течение суток. Затем из перколятора №1 сливают 100 мл готового жидкого экстракта соссюреи. Перколятор №2 отключают от батареи на рекуперацию этанола и выгрузку отработанного шрота. Аналогично загрузке перколятора №1, загружают перколяторы №2, №3, №4, №5.

Во время рабочего периода свежий экстрагент (70% этанол) поступает в «хвостовой» перколятор с максимально истощенным сырьем. Выход жидкого экстракта соссюреи составляет 100 мл из «головного» перколятора после 24 часового настаивания в нем. Процесс получения жидкого экстракта должен длиться непрерывно.

По окончании технологического процесса производства жидкого экстракта соссюреи «хвостовые» перколяторы выключают. С каждого перколятора сливают менее концентрированные извлечения, которые собирают отдельно и используют при последующих загрузках в производстве жидкого экстракта соссюреи. В освободившихся перколяторах проводят рекуперацию этанола из отработанного сырья.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 25 технологических стадий смешивают в сборнике. Жидкий экстракт соссюреи стандартизируют по содержанию сухого остатка и действующих веществ (сесквитерпеновых лактонов).

Сухой остаток в полученном экстракте должен составлять не менее 10,5%, а содержание сесквитерпеновых лактонов не менее 1,5%.

Для проведения фармакологических испытаний из жидкого экстракта удаляют экстрагент под вакуумом.

Противоописторхозная активность сухого экстракта соссюреи иволистной исследована in vitro по методу А.И.Кротова [3] и in vivo на модели хронического описторхоза [4].

В качестве критерия эффективности противоописторхозного действия сухого экстракта in vitro использовано проникновение вещества через кутикулу в тело описторха с полным нарушением структуры гельминта и гибель марит в испытуемых растворах.

Для определения противоописторхозной активности in vivo опыты проводили на золотистых хомячках, искусственно зараженных метацеркариями описторхов [5]. В качестве препаратов сравнения использовали синтетические противоописторхозные средства хлоксил и азинокс.

Интэнс-эффективность (ИЭ) рассчитывали по формуле:

где К - количество описторхов у животных контрольной группы;

О - количество описторхов у пролеченных животных.

ИЭ сухого экстракта соссюреи иволистной в дозе 0,04 г/кг составил 65%.

Для экспериментальной модели лямблиоза использованы беспородные и линейные белые мыши, выращенные на стандартном рационе вивария и содержащиеся при комнатной температуре, линии С₃Н, DBA, C57B1/6, CC/57W массой 22,5±2,5 г, полученные из коллекционного фонда лаборатории биомоделирования Томского научного центра СО РАМН (при спонтанном заражении экспериментальных животных цисты лямблий были выявлены в фекалиях у вышеуказанных мышей).

Сухой экстракт соссюреи иволистной вводили животным per os в дозах 0,04 г/кг массы один раз в день в течение трех дней.

Паразитологический контроль проводили через 10 дней после лечения, при этом эффективность составила 100% (табл.1).

Ниже приведены примеры конкретного выполнения способа

Сырье собрано в фазу цветения в Алтайском крае в окрестностях пос. Кош-Агач и использовано во всех примерах.

Пример 1. Получение жидкого экстракта соссюреи иволистной в соотношении 1:1 (из одной части сырья соссюреи иволистной получают один объем готового экстракта) на 70% этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией с использованием измельченного сырья, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной, длиной не более 30 см, просеянного через сито с диаметром отверстий 7 мм, настаиванием в одном перколяторе 24 часа.

Стадия экстракции состоит из двух периодов: пускового и рабочего.

Пусковой период. В перколятор №1 загружают 100 г измельченного сырья и подают 450 мл 70% этанола до «зеркала». Оставляют на 24 часа.

Второй день. В перколятор №2 загружают 100 г измельченного сырья соссюреи иволистной и на сырье подают 450 мл извлечения из перколятора №1, а в перколятор №1 подают до «зеркала» 450 мл 70% этанола. Аналогичным способом загружают перколяторы №3, 4 на третьи и четвертые сутки. На пятые сутки в перколятор №5 загружают 100 г измельченного сырья и заливают извлечением из перколятора №4, делая передвижки извлечений из перколятора №4 в перколятор №5, из перколятора №3 в перколятор №4, из перколятора №2 в перколятор №3, из перколятора №1 в перколятор №2. Перколятор №1 заливают свежим 70% этанолом. Все перколяторы с №1 по №5 заполняют до «зеркала» и настаивают 24 часа.

Рабочий период. На шестые сутки с перколятора №5 («головного») сливают 100 мл жидкого экстракта соссюреи. Перколятор №1 после рекуперации этанола и выгрузки отработанного шрота загружают 100 г сырья и заливают извлечением из перколятора №5 в количестве 100 мл. Перколятор №1 становится «головным». Делают передвижку извлечений из перколятора №4 в перколятор №5, из перколятора №3 в перколятор №4, из перколятора №2 в перколятор №3. Перколятор №1 дозаливают извлечением из перколятора №5, делая передвижку вторично из перколятора №5 в №1, из №4 в №5, из №3 в №4, с учетом впитываемости извлечений при заливе на свежее сырье. Перколятор №2 заливают недостающим количеством свежего экстрагента, передвигают извлечение в перколятор №3 и настаивают 24 часа. Затем из перколятора №1 сливают 100 мл готового жидкого экстракта соссюреи. Перколятор №2 отключают от батареи на рекуперацию этанола и выгрузку отработанного шрота. Аналогично загружают перколяторы №2, №3, №4, №5.

Во время рабочего периода свежий экстрагент поступает в «хвостовой» перколятор с максимально истощенным сырьем. Выход жидкого экстракта соссюреи с «головного» перколятора составляет 100 мл.

По окончании технологического процесса производства жидкого экстракта соссюреи «хвостовые» перколяторы выключают, но новых перколяторов со свежим сырьем не включают. С каждого перколятора сливают менее концентрированные извлечения, которые собирают отдельно и используют при последующих загрузках в производстве жидкого экстракта соссюреи. В освободившихся перколяторах проводят рекуперацию этанола из отработанного сырья.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 25 технологических стадий смешивают в сборнике.

Сухой остаток в полученном экстракте составил 10,5%; содержание сесквитерпеновых лактонов 1,70%; ИЭ: 65% противоописторхозная и 100% противолямблиозная активность.

Пример 2 (прототип). Получение жидкого экстракта соссюреи на 70% этаноле методом реперколяции по А.И.Босину в батарее из четырех перколяторов.

Первый день. В перколятор №1 загружают 100 г измельченных надземных частей соссюреи иволистной, просеянных через сито с диаметром отверстий 7 мм, предварительно замоченных в 100 мл 70% этанола в течение 4-х часов, заливают 70%-ным этанолом «до зеркала» и оставляют на сутки.

Второй день. Из перколятора №1 сливают 100 мл извлечения и замачивают им 100 г сырья для перколятора №2. Сырье в перколяторе №1 перколируют 200 мл свежим 70% этанолом. Полученные извлечения из перколятора №1 переводят в перколятор №2. Оставляют оба перколятора залитыми «до зеркала» на сутки.

Третий день. Первой порцией извлечения (100 мл) из перколятора №2 замачивают 100 г сырья для перколятора №3, а последующие порции используют на настаивание и перколирование.

Четвертый день. Первой порцией извлечения 100 мл из перколятора №3 замачивают 100 г сырья для перколятора №4, а последующие порции используют на настаивание и перколирование.

Пятый день. Из перколятора №4 собирают 400 мл жидкого экстракта.

Полученный жидкий экстракт по А.И.Босину содержит сухого остатка 7,0%; сесквитерпеновых лактонов - 0,80%.

Пример 3. Получение жидкого экстракта соссюреи на 70%-ном этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией с использованием измельченного и просеянного через сито с диаметром отверстий 7 мм сырья, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной длиной не более 30 см и настаиванием в одном перколяторе 24 часа.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 20 технологических стадий смешивают в сборнике.

Сухой остаток в полученном экстракте составил 10,70%, содержание сесквитерпеновых лактонов 1,75%.

Пример 4. Получение жидкого экстракта соссюреи, в соотношении 1:1, на 70%-ном этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией, с использованием измельченного и просеянного через сито с диаметром 7 мм сырья, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной длиной не более 30 см, настаиванием в одном перколяторе 24 часа.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 10 технологических стадий смешивают в сборнике. Сухой остаток в полученном экстракте составил 10,50%, содержание сесквитерпеновых лактонов 1,65%.

Пример 5. Получение жидкого экстракта соссюреи, в соотношении 1:1, на 70% этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией, с использованием измельченного и просеянного через сито с диаметром отверстий 7 мм сырья, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной длиной не более 30 см, настаиванием в одном перколяторе 30 часов

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 25 технологических стадий смешивают в сборнике. Сухой остаток в полученном экстракте составил 10,8%, содержание сесквитерпеновых лактонов 1,75%.

Пример 6. Получение жидкого экстракта соссюреи, в соотношении 1:1, на 70% этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией, с использованием измельченного и просеянного через сито с диаметром 7 мм сырья, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной длиной не более 30 см, настаиванием в одном перколяторе 18 часов.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 25 технологических стадий смешивают в сборнике. Сухой остаток в полученном экстракте составил 9,5%, содержание сесквитерпеновых лактонов 1,3%.

Пример 7. Получение жидкого экстракта соссюреи, в соотношении 1:1, на 70% этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией, с использованием измельченного и просеянного через сито с диаметром отверстий 7 мм сырья, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной длиной не более 30 см, настаиванием в одном перколяторе 12 часов.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 25 технологических стадий смешивают в сборнике. Сухой остаток в полученном экстракте составил 8,5%, содержание сесквитерпеновых лактонов 1,1%.

Пример 8. Получение жидкого экстракта соссюреи, в соотношении 1:1 на 70%-ном этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией, с использованием сырья, состоящего из надземной части соссюреи иволистной, измельченного и просеянного через сито с диаметром отверстий 7 мм, настаиванием в одном перколяторе 24 часа.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 25 технологических стадий смешивают в сборнике. Сухой остаток в полученном экстракте составил 8,5%, содержание сесквитерпеновых лактонов 1,35%.

Пример 9. Получение жидкого экстракта соссюреи, в соотношении 1:1 на 70%-ном этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией, с использованием измельченного сырья и просеянного через сито с диаметром отверстий 9 мм, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной длиной не более 30 см, настаиванием в одном перколяторе 24 часа.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 25 технологических стадий смешивают в сборнике. Сухой остаток в полученном экстракте составил 9,5%, содержание сесквитерпеновых лактонов 1,45%.

Пример 10. Получение жидкого экстракта соссюреи, в соотношении 1:1 на 70%-ном этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией, с использованием измельченного сырья и просеянного через сито с диаметром отверстий 5 мм, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной длиной не более 30 см, настаиванием в одном перколяторе 24 часа.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 25 технологических стадий смешивают в сборнике. Сухой остаток в полученном экстракте составил 10,5%, содержание сесквитерпеновых лактонов 1,75%.

Пример 11. Получение жидкого экстракта соссюреи, в соотношении 1:1 на 70%-ном этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией, с использованием измельченного сырья и просеянного через сито с диаметром отверстий 3 мм, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной длиной не более 30 см, настаиванием в одном перколяторе 24 часа.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 25 технологических стадий смешивают в сборнике. Сухой остаток в полученном экстракте составил 10,5%, содержание сесквитерпеновых лактонов 1,65%.

Пример 12. Получение жидкого экстракта соссюреи, в соотношении 1:1 на 70%-ном этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией, с использованием измельченного сырья и просеянного через сито с диаметром отверстий 2 мм, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной длиной не более 30 см, настаиванием в одном перколяторе 24 часа.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 25 технологических стадий смешивают в сборнике. Сухой остаток в полученном экстракте составил 10,0%, содержание сесквитерпеновых лактонов 1,65%.

Пример 13. Получение жидкого экстракта соссюреи, в соотношении 1:1 на 70%-ном этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией, с использованием измельченного сырья и просеянного через сито с диаметром отверстий 1 мм, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной длиной не более 30 см, настаиванием в одном перколяторе 24 часа.

Полученный и профильтрованный экстракт соссюреи жидкий от 25 технологических стадий смешивают в сборнике. Сухой остаток в полученном экстракте составил 8,5%, содержание сесквитерпеновых лактонов 1,35%.

В процессе поиска оптимальных условий получения экстракта из соссюреи иволистной было изучено влияние следующих факторов: использование определенных частей растения, определенные технические характеристики, касающиеся величины частиц используемого сырья - измельченность сырья, время настаивания сырья в одном перколяторе и количество технологических стадий на выход целевого продукта.

При этом установлено, что экстракцию следует вести методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов, так как при применении модификации А.И.Босина занижен выход действующих веществ (по содержанию сесквитерпеновых лактонов), что приводит к снижению фармакологической активности экстракта (табл.1-2).

Оптимальным для получения экстракта является сырье соссюреи иволистной, собранное в фазу цветения, состоящее из цветоносных олиственных верхушек стебля длиной не более 30 см, измельченное и просеянное через сито с диаметром отверстий 5-7 мм. Сырье, состоящее из всей надземной части растения, содержит одеревеневшие стебли, в которых содержание сесквитерпеновых лактонов незначительно, поэтому использование всей надземной части растения приводит к снижению выхода действующих веществ, и в соответствии с этим резко снижается фармакологическая активность экстракта (табл.3-4).

Получение экстракта необходимо вести методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов непрерывной экстракцией, с настаиванием 24 часа в одном перколяторе (табл.5).

Количество технологических стадий не влияет на выход действующих веществ и количество промежуточного продукта (табл.6). Но с увеличением количества технологических стадий экономичнее расход растворителя.

Таким образом, предлагаемый авторами способ позволяет повысить выход действующих веществ и фармакологической активности в 1,5 раза за счет получения жидкого экстракта соссюреи на 70% этаноле методом реперколяции в батарее из пяти перколяторов путем непрерывной экстракции, с использованием сырья, состоящего из цветоносных олиственных верхушек стебля соссюреи иволистной длиной не более 30 см, собранного в фазу цветения, измельченного и просеянного через сито с диаметром отверстий 5-7 мм.

Способ отличается значительной экономичностью за счет использования непрерывной экстракции.

Таблица 1 Сравнительное исследование противопаразитарной активности экстрактов соссюреи и противопаразитарных средств, ИЭ%
Наименование препарата	Кол-во животных	Доза, г/кг	Схема лечения	ИЭ, % Противолямблиозная активность	ИЭ, % Противоописторхозная активность
Экстракт на 70% этаноле по методу А.И.Босина	10	0,04	1 раз в день - 3 дня	70	50
Экстракт на 70% этаноле по заявляемому способу	10	0,04	1 раз в день - 3 дня	100	65
Азинокс	10	0,01	1 раз в день - 3 дня	-	91
Хлоксил	10	0,015	1 раз в день - 3 дня	-	75

Таблица 2 Стандартизация жидкого экстракта соссюреи иволистной, полученного разными методами реперколяции
Жидкий экстракт, полученный методом реперколяции	Сухой остаток, %	Содержание сесквитерпеновых лактонов, %
По А.И.Босину	7,0±0,4	0,80±0,05
По заявляемому способу	10,6±0,1	1,70±0,15

Таблица 3 Стандартизация жидкого экстракта соссюреи иволистной по содержанию сесквитерпеновых лактонов в зависимости от органов растений и фазы вегетации
Органы растения	Содержание сесквитерпеновых лактонов, %
	Вегетация	Бутонизация	Цветение
Надземная часть	0,5±0,1	0,7±0,2	1,0±0,1
Цветоносные, олиственные стебли длиной не более 30 см	0,3±0,1	1,2±0,1	1,7±0,15

Таблица 4 Стандартизация жидкого экстракта соссюреи иволистной по содержанию сесквитерпеновых лактонов в зависимости от степени измельченности сырья
Измельченность сырья, мм	Сухой остаток, %	Содержание сесквитерпеновых лактонов, %
9	9,5±0,1	1,45±0,05
7	10,5±0,5	1,75±0,05
5	10,5±0,4	1,75±0,06
3	10,5±0,3	1,65±0,04
2	10,0±0,1	1,65±0,02
1	8,5±0,1	1,35±0,1

Таблица 5 Стандартизация жидкого экстракта соссюреи иволистной в зависимости от времени настаивания сырья в одном перколяторе по заявляемому способу
Время настаивания сырья в одном перколяторе, час	Сухой остаток, %	Содержание сесквитерпеновых лактонов, %
12	8,5±0,05	1,10±0,1
18	9,5±0,05	1,30±0,1
24	10,7±0,1	1,75±0,05
30	10,8±0,1	1,75±0,05

Таблица 6 Стандартизация жидкого экстракта соссюреи иволистной в зависимости от технологических стадий по заявляемому способу
Количество технологических стадий	Сухой остаток, %	Содержание сесквитерпеновых лактонов, %
10	10,5±0,1	1,65±0,04
20	10,5±0,3	1,70±0,06
25	10,7±0,4	1,70±0,05

Источники информации

1. Саратиков А.С., Федотова В.Е. Экстракт голубушки как противолямблиозное средство // Аптечное дело. 1962. №3. - С.26-28.

2. Адекенов С.М., Кагарлицкий А.Д., Куприянов А.Н. Сесквитерпеновые лактоны растений Центрального Казахстана. Алма-Ата, 1987. - 238 с.

3. Кротов А.И. Методы изыскания и изучения механизма действия антигельминтов в условиях in vitro // Основы экспериментальной терапии гельминтозов. - M.: Медицина, 1973. - С.190-200.

4. Кандинский Г.В. Методы работы с живыми маритами половозрелых описторхов // Методы исследования при описторхозе. Сб. научн. трудов. - Омск, 1986. - С.119.

5. Бычкова Н.К., Краснов Е.А., Нурмухаметова К.А. и др. Фармакологические исследования соссюреи иволистной // Разработка и внедрение новых лек. средств и организационных форм. фарм. деятельности: Тезисы докл. междунар. конф. - Томск, 2000. - С.132-133.

6. Завойкин В.Д., Зеля О.П., Сокерина О.А. Современное состояние проблемы описторхоза в Западной Сибири // Материалы I Междунар. конференции «Актуальные проблемы инфектологии и паразитологии». Томск. 2001. С.99.

7. Растительные ресурсы СССР. Цветковые растения, их химический состав, использование. Санкт-Петербург: Наука, 1993. С.165-180.