способ выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов

Формула изобретения

Способ выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов путем получения микроскопических препаратов, отличающийся тем, что смешивают пробы крови с антикоагулянтом К₃-ЭДТА и добавляют концентрированный раствор глюкозы не более 10% от объема пробы крови для создания в пробе крови концентрации глюкозы 200-400 ммоль/л, затем инкубируют пробы крови в термостате при 37-60°С в течение 15-30 мин, из верхнего слоя надосадочной жидкости отбирают 10-15 мкл, смешивают с 1%-ным раствором Люголя, готовят мазки и проводят микроскопирование.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для выделения из крови больных, например больных сахарным диабетом I и II типов, гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов. Предложенный способ является новым, ранее в научной и медицинской литературе не описан.

Целью изобретения является разработка способа выделения из крови больных сахарным диабетом гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.

Поставленная цель достигается способом получения препарата крови на предметном стекле путем предварительного забора крови у больного с антикоагулянтом К₃-ЭДТА (калиевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты); добавлением концентрированного раствора глюкозы (не более 10% от объема пробы крови) для создания в пробе крови концентрации глюкозы 200-400 ммоль/л; инкубированием пробы крови в термостате при 37-60°С в течение 15-30 минут; забором из верхнего слоя надосадочной жидкости 10-15 мкл жидкости и перенесением ее на предметное стекло; далее добавлением на предметное стекло 10-15 мкл 1% раствора Люголя; смешиванием растворов на предметном стекле и приготовлением тонкого мазка; высушиванием мазка при 37°С в течение 15-20 минут и микроскопии полученного препарата с объективами 10 и 40, что позволяет обнаружить в крови больных сахарным диабетом I и II типов гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.

Новым в предложенном способе является то, что в результате последовательного применения описанных этапов удалось выявить в 100% случаев в крови больных сахарным диабетом I и II типов имевшихся там гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.

Новый способ обнаружения гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов в крови больных сахарным диабетом необходим для улучшения диагностики и лечения этих больных.

Отрабатывая отдельные этапы способа, проверены и обоснованы параметрические значения концентраций, времени, температуры и так далее, что отражено в приведенных примерах.

Пример 1.

1. У больного сахарным диабетом берется 0.5 мл венозной крови с антикоагулянтом К₃-ЭДТА.

2. К ней добавляется 50 мкл раствора глюкозы (раствор глюкозы готовится на физиологическом растворе с концентрацией глюкозы 2200 ммоль/л) и проба перемешивается.

3. Проба инкубируется при 60°С в течение 15 минут.

4. С поверхности надосадочной жидкости берут 15 мкл и переносят на предметное стекло в виде капли.

5. Рядом на предметное стекло помещается 15 мкл 1% раствора Люголя, растворы на предметном стекле смешиваются и делается тонкий мазок.

6. Мазок высушивается при 37°С в течение 15 минут.

7. Микроскопия препарата с объективами 10 и 40 позволила обнаружить в крови паразитов.

Пример 2.

1. У больного сахарным диабетом взято 100 мкл капиллярной крови.

2. К ней добавлено 10 мкл раствора глюкозы с концентрацией 2200 ммоль/л.

3. Проба инкубируется при 60°С в течение 15 минут.

4. С поверхности надосадочной жидкости берут 15 мкл и переносятся на предметное стекло в виде капли.

5. Рядом на предметное стекло помещается 15 мкл 1% раствора Люголя. Растворы на предметном стекле смешиваются и делается тонкий мазок.

6. Мазок высушивается при 37°С в течение 15 минут.

7. Микроскопия препарата с объективами 10 и 40 позволила обнаружить в крови паразитов.

Всего венозная и капиллярная кровь была исследована более чем у 60 больных сахарным диабетом и в во всех препаратах, приготовленных по данной методике, были обнаружены гельминты, личинки гельминтов и другие паразиты.

Предлагаемый способ позволяет в обычных лабораторных условиях с помощью недорогих реактивов получать препараты крови больных сахарным диабетом и визуально определять в них гельминтов, личинок гельминтов и других паразитов.