способ лечения церебральной ишемии

Формула изобретения

Способ лечения церебральной ишемии на ее модели у млекопитающего, отличающийся тем, что ему вводят эффективные количества янтарнокислого бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиния].

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу лечения церебральной ишемии.

Инсульт является второй ведущей причиной смертности в мире. В России инсульт головного мозга стоит на втором месте среди причин смертности после инфаркта миокарда. Среди всех видов инсультов 80% составляют ишемические инсульты. Ишемический инсульт происходит в момент окклюзии церебральных сосудов, что препятствует току крови к частям головного мозга и возникновению церебральной ишемии.

Известным подходом к лечению инсульта является создание нейропротекторов, которые позволили бы защитить нервную ткань от поражения в условиях ишемии. В качестве нейропротекторов были предложены агенты, блокирующие отдельные реакции патологических каскадов, ведущих к гибели нейронов при ишемии. К таким агентам относятся антагонисты N-метил-D-аспартат (NMDA) рецептора (selfotel, dextrorphan), агонисты опиатов (nalmefen), блокаторы натриевых каналов (lubeluzole), агонисты гамма-аминомасляной кислоты (clomethiazole), блокаторы кальциевых каналов, антирадикальные агенты и антиоксиданты, моноклональные антитела, стабилизаторы мембран, факторы роста (основный фактор роста фибробластов). Все эти агенты не проявили положительного эффекта в клинических испытаниях. Cheng YD et al., NeuroRx 1: 36-45, 2004.

Таким образом, существует необходимость в безопасных и эффективных способах защиты нервной ткани от поражения в условиях церебральной ишемии.

Задачей изобретения является создание эффективного способа лечения церебральной ишемии без побочных эффектов и осложнений.

Патент РФ 2228174 раскрывает применение янтарнокислого бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиния] для лечения инсулиновой резистентности, сахарного диабета, гиперлипидемии и дислипидемии. Однако способность бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиния] защищать нейроны мозга от поражения в условиях церебральной ишемии не известна из уровня техники.

Нами обнаружено, что введение янтарнокислого бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиния] млекопитающим позволяет защищать нейроны мозга от поражения в условиях церебральной ишемии.

Сущность изобретения состоит в том, что в способе лечения церебральной ишемии на ее модели у млекопитающего млекопитающему вводят эффективные количества янтарнокислого бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиния].

Предпочтительно янтарнокислый бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиний] вводится в количестве 1-50 мг/кг веса тела млекопитающего. Предпочтительно млекопитающий, нуждающийся в лечении церебральной ишемии, - это человек.

В способе лечения церебральной ишемии янтарнокислый бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиний] может быть введен млекопитающему в различных дозированных формах, включая таблетки, капсулы, леденцы, порошки, распыляемые растворы, аэрозоли, водные растворы, эликсиры, сиропы и инъекции. Предпочтительно, в способе лечения церебральной ишемии янтарнокислый бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиний] вводят в виде инъекций.

Используя настоящее изобретение, через защиту нейронов мозга в условиях ишемии становится возможным предотвращать развитие неблагоприятных последствий церебральной ишемии и/или инсульта.

Следующий пример демонстрирует изобретение.

Пример 1.

Введение янтарнокислого бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиния] предупреждает гибель нейронов мозга у крыс с хронической ишемией мозга, вызванной перевязкой сонных артерий.

Эффект снижения гибели нейронов мозга при введении янтарнокислого бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиния] оценивали на модели крыс с хронической ишемией мозга, вызванной перевязкой сонных артерий. Характер и механизм повреждения нейронов мозга в этой модели соответствует наблюдаемой при ишемическом инсульте. Гибель нейронов мозга оценивали количественно методом ЯМР ¹Н in vivo по снижению уровня нейронального маркера N-ацетиласпартата (NAA) в мозге. NAA является хорошо известным неинвазивным маркером целостности нейронов. NAA обнаруживается исключительно в нейронах. Снижение NAA или отношения NAA к креатину (относительный уровень NAA) строго коррелирует с потерей нейронов при их повреждении или дегенерации. Demougeot С et al. J Neurochem. 2004 90 (4): 776-83. Roitberg В et al. Neurol Res. 2003 25 (1): 68-78. Schuhmann MU et al. J Neurotrauma. 2003 20(8):725-43.

Перевязка сонных артерий была выполнена у крыс самцов Вистар за 3 часа до первой инъекции. Далее крысам в течение семи дней вводили и.п. инъекции физ. р-ра (контроль), 1 мг/кг или 50 мг/кг янтарнокислого бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиния]. На 15 день с момента перевязки, измеряли уровень NAA в мозге методом ЯМР ¹Н in vivo. Данные представлены в таблице 1 в % как среднее ± стандартное отклонение (n=5) относительного уровня NAA в мозге. Уровень NAA в ложно-оперированных крысах без ишемии принят за 100% (100,0±13,7). Статистически значимые отличия результатов оценивали с помощью t-критерия Стьюдента.

Таблица 1

Лечение	Уровень NAA в мозге, %
Физ. раствор (контроль)	81,6±6,7
Янтарнокислый бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиний], 1 мг/кг	103,1±6,9*
Янтарнокислый бис[(2-	99,7±7,1*
гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиний], 50 мг/кг
*Достоверно отличается от контроля (р<0.05)

Таким образом, введение янтарнокислого бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиния] в крыс с хронической церебральной ишемией достоверно предупреждает гибель нейронов мозга по сравнению с контролем и сохраняет количество нейронов на уровне здоровых крыс без ишемии.

С гибелью нейронов мозга при церебральной ишемии была связана потеря памяти и способности крыс к обучению, как это было показано далее в тесте пассивного избегания. Время задержки входа в шоковый отсек до шока и после шока (через 24 часа) характеризует обучаемость и память. Данные представлены в таблице 2 в сек как среднее ± стандартное отклонение (n=8) времени задержки. Уровень задержки в ложно-оперированных крысах без ишемии был 9,3±2,5 сек до шока и 104,2±22,9 сек 24 часа после шока. Статистически значимые отличия результатов оценивали с помощью t-критерия Стьюдента.

Таблица 2
Лечение	Время задержки, сек
	До шока	24 часа после шока
Физ. раствор (контроль)	29,0±10,9	30,7±13,1
Янтарнокислый бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиний], 1 мг/кг	13,5±4,3*	99,3±24,5*
Янтарнокислый бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиний], 50 мг/кг	27,7±13,1	53,3±16,3*
*Достоверно отличается от контроля (р<0.05)

Пример 2.

Предварительное введение янтарнокислого бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиния] уменьшает скорость патологического снижения энергетического метаболизма при острой тотальной церебральной ишемии, вызванной остановкой сердца.

Крысам вводили интаперитонеально в течение 7 дней янтарнокислый бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиний] (ЯТМА) в количестве 10 мг/кг или физ. раствор (контроль). Эффект прекондиционирования ЯТМА оценивали на 8-й день методом ЯМР ¹Н in vivo по снижению скорости падения концентрации АТФ в головном мозге крыс в течение первых минут после остановки сердца. Данные представлены в таблице 3 как среднее значение уровня АТФ в % к исходному значению до остановки сердца в головном мозге крысы от времени.

Таблица 3.
Время, мин	АТФ, % (n=8)
	Контроль	ЯТМА
3	74±26	76±20
4	44±27	65±16*
5	35±22	63±21*
6	30±15	54±23*
*Достоверно отличается от контроля (р<0.05).

Таким образом, введение янтарнокислого бис[(2-гидроксиэтил)-N,N,N-триметиламиния] достоверно уменьшает скорость патологического снижения энергетического метаболизма при острой тотальной церебральной ишемии.