замещенные кислотными группами дифенилазетидиноны, способ их получения, содержащие эти соединения лекарственные средства и их применение

Формула изобретения

1. Замещенные кислотными группами дифенилазетидиноны формулы (I)

где один из R1 и R2 означает Н, а другой означает F, Cl, Br, I, -О-(C₁-C₆)-алкил, (С ₀-С₃₀)-алкилен-LAG, причем один или несколько атомов углерода алкиленового остатка могут быть заменены на -О-, -NH-, -(С=O)-, -N(С₁-С₆)-алкил-, и LAG означает -(CH₂)_1-10-SO₃Н, -(СН ₂)_0-10-СООН;

один из R3 и R4 означает Н, а другой означает F, Cl, Br, I, (С₀-С₃₀ )-алкилен-(LAG)_n, причем один или несколько атомов углерода алкиленового остатка могут быть заменены на -О-, -NH-, -(С=O)-, -N(C₁-C₆)-алкил-, и LAG означает -(СН₂)_1-10-SO₃Н, -(СН₂ )_0-10-Р(O)(ОН)₂, -(СН₂) _0-10-O-Р(O)(ОН)₂, -(СН₂)_0-10 -СООН и n равно 1, 2;

один из R5 и R6 означает Н, а другой означает F, Cl, Br, I, а также их фармацевтически приемлемые соли;

причем исключаются соединение 2-{[4-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)-бутил] метиламино}этансульфокислота, а также такие соединения, в которых остатки R1-R4 означают -О-(СН₂)_1-10-COOH, (C₁-C₆)-алкилен-СООН или -СООН.

2. Соединения формулы (I) по п.1, отличающиеся тем, что

R1 означает F, Cl, Br, I, -О-(C₁-C₆)-алкил, (С₀-С₃₀)-алкилен-LAG, причем один или несколько атомов углерода алкиленового остатка могут быть заменены на -О-, -NH-, -(С=O)-, -N(СН₃)-, и LAG означает -(СН₂ )_1-10-SO₃Н, -(СН₂)_0-10 -СООН, R2 означает Н; или

R1 означает Н, R2 означает F, Cl, Br, I, -О-(C₁-С₆)-алкил;

R3 означает F, Cl, Br, I, (C₀-С₃₀)-алкилен-LAG, причем один или несколько атомов углерода алкиленового остатка могут быть заменены на -О-, -NH-, -(С=O)-, -N(CH₃)-, и LAG означает -(СН₂)_1-10-SO₃Н, -(СН ₂)_0-10-Р(О)(ОН)₂, -(СН₂ )_0-10-O-Р(O)(ОН)₂, -(СН₂) _0-10-СООН, R4 означает Н; или

R3 означает Н, R4 означает F, Cl, Br, I;

один из R5 и R6 означает Н, а другой означает F, Cl, Br, I;

а также их фармацевтически приемлемые соли;

причем исключаются соединение 2-{[4-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)-бутил] метиламино}этансульфокислота, а также такие соединения, в которых остатки R1-R4 означают -О-(СН₂)_1-10-СООН, (C₁-С₆)-алкилен-СООН или -СООН.

3. Соединения формулы (I) по п.1, отличающиеся тем, что R1 означает F, Cl, Br, I, -О-(C₁-C₆)-алкил, -(СН ₂)_0-1-Y-W-(С₀-С₂₅)-алкилен-Y -W -LAG, причем один или несколько атомов углерода алкиленового остатка могут быть заменены на -О-; Y, W, Y , W , независимо друг от друга, означают -NH-, -N(СН₃ )-, -(С=O)-, -О-; LAG означает -(СН₂)_1-10 -SO₃Н, -(СН₂)_0-10-СООН, R2 означает Н; или

R1 означает H, R2 означает F, Cl, Br, I, -О-(C ₁-C₆)-алкил;

R3 означает F, Cl, Br, I, -(СН₂)_0-1-Y-W-(C₀-C₂₅ )-алкилен-Y -W -LAG, причем один или несколько атомов углерода алкиленового остатка могут быть заменены на -О-; Y, W, Y , W , независимо друг от друга, означают -NH-, -N(СН₃ )-, -(С=O)-, -О-; LAG означает -(СН₂)_1-10 -SO₃Н, -(СН₂)_0-10-Р(О)(ОН) ₂, -(СН₂)_0-10-O-Р(O)(ОН)₂ , -(СН₂)_0-10-СООН; R4 означает Н; или

R3 означает Н, R4 означает F, Cl, Br, I;

один из R5 и R6 означает Н, а другой означает F, Cl, Br, I;

а также их фармацевтически приемлемые соли;

причем исключаются соединение 2-{[4-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)-бутил] метиламино}этансульфокислота, а также такие соединения, в которых остатки R1-R4 означают -О-(СН₂)_1-10-COOH, (C₁-C₆)-алкилен-COOH или -СООН.

4. Соединения формулы (I) по п.1, отличающиеся тем, что LAG означает -(СН₂)_1-10-SO₃Н или -(СН ₂)_0-10-СООН, а также их фармацевтически приемлемые соли.

5. Лекарственное средство, обладающее действием, снижающим уровень холестерина, и содержащее одно или несколько соединений по любому из пп.1-4.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к замещенным кислотными группами дифенилазетидинонам, их физиологически приемлемым солям, а также физиологически функциональным производным.

Уже описаны дифенилазетидиноны (как, например, эзетимиб), а также их применение для лечения гиперлипидемии, как и артериосклероза и гиперхолестеринемии [см. Drugs of the Future, 25 (7), 679-685 (2000), и патент США 5756470].

Задачей изобретения является получение других соединений, которые проявляют терапевтически применимое гиполипидемическое действие. Задача в особенности состоит в получении новых соединений, которые, по сравнению с описанными в уровне техники соединениями, являются очень незначительно резорбирующимися. Под выражением "очень незначительно резорбирующийся" понимают кишечную резорбцию менее 10%, предпочтительно менее или равную 5%.

Новые соединения должны обладать в особенности меньшей резорбцией, чем эзетимиб.

При более незначительной резорбции фармацевтические биологически активные вещества проявляют, как правило, отчетливо меньшие побочные действия.

Изобретение относится поэтому к соединениям формулы (I):

где

R1, R2, R3, R4, R5, R6, независимо друг от друга, означают (С₀-С₃₀)-алкилен-(LAG) _n, причем n может означать 1-5 и причем один или несколько атомов углерода алкиленового остатка могут быть заменены на -S(O) _n-, где n=0-2, -О-, -(С=О)-, -(C=S)-, -CH=CH-, -C C-, -N((C₁-C₆)-алкил)-, -N-(фенил)-, -N((C₁-C₆)-алкилфенил)-, -N(CO-(CH ₂)_1-10-COOH)- или -NH-;

Н, F, Cl, Br, I, CF₃, NO₂, N₃, CN, COOH, COO(C ₁-C₆)-алкил, CONH₂, CONH(C₁ -C₆)-алкил, CON[(C₁-C₆)-алкил] ₂, (С₁-С₆)-алкил, (С₂-С ₆)-алкенил, (С₂-С₆)-алкинил, О-(С ₁-С₆)-алкил, причем в алкильных остатках один, несколько или все атомы водорода могут быть заменены атомами фтора;

С(=NH)(NH₂), PO₃H₂ , SO₃H, SO₂-NH₂, SO₂ NH(C₁-C₆)-алкил, SO₂N[(C ₁-C₆)-алкил]₂, S-(С₁-С ₆)-алкил, S-(CH₂)_n-фенил, SO-(C ₁-C₆)-алкил, SO-(CH₂)_n -фенил, SO₂-(C₁-C₆)-алкил, SO ₂-(CH₂)_n-фенил, причем n может означать 0-6 и фенильный остаток может быть вплоть до двукратно замещен с помощью F, Cl, Br, OH, CF₃, NO₂, CN, OCF₃, O-(C₁-C₆)-алкила, (С ₁-С₆)-алкила, NH₂;

NH₂ , NH-(C₁-C₆)-алкил, N-((C₁-C ₆)-алкил)₂, NH-(C₁-C₇)-ацил, фенил, О-(СН₂)_n-фенил, причем n может означать 0-6 и причем фенильное кольцо может быть вплоть до трехкратно замещено с помощью F, Cl, Br, I, OH, CF₃, NO₂ , CN, OCF₃, O-(C₁-C₆)-алкила, (С₁-С₆)-алкила, NH₂, NH-(С ₁-С₆)-алкила, N-((С₁-С₆ )-алкил)₂, SO₂-CH₃, COOH, COO-(C ₁-C₆)-алкила, CONH₂;

(LAG) _n означает -(СН₂)_1-10-SO₃ H, -(CH₂)_0-10-P(O)(OH)₂, (CH ₂)_0-10-O-P(O)(OH)₂, -(CH₂ )_0-10-COOH и n может означать 1-5;

причем всегда по меньшей мере один из остатков R1-R6 должен означать (С ₀-С₃₀)-алкилен-(LAG)_n, причем n=1-5 и один или несколько атомов углерода алкиленового остатка могут быть заменены на -S(O)_n, где n=0-2, -O-, -(C=O)-, -(C=S)-, -CH=CH-, -C C-, N((C₁-C₆)-алкил)-, -N(фенил)-, -N((C₁-C₆)-алкилфенил)-, -N(СО-(СН ₂)_1-10-СООН)- или -NH-;

а также к их фармацевтически приемлемым солям;

при этом исключаются соединение 2-{[4-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)-бутил]метиламино}этансульфокислота, а также такие соединения, в которых остатки R1-R6 означают -О-(СН ₂)_1-10-СООН, (С₁-С₆)-алкилен-СООН или -СООН.

Предпочтительны соединения формулы (I), где по меньшей мере один из остатков R1-R6 означает (С₀ -С₃₀)-алкилен-(LAG), причем один или несколько атомов углерода алкиленового остатка могут быть заменены на -О-, -(С=О)-, -N((C₁-C₆)-алкил)-, -N(CO-(CH₂ )_1-10-COOH или -NH-.

Особенно предпочтительны соединения формулы (I), где один из остатков R1 или R3 означает (С₀-С₃₀)-алкилен-(LAG), причем один или несколько атомов углерода алкиленового остатка могут быть заменены на -О-, -(С=О)-, -N(CH₃)- или -NH-.

В высшей степени предпочтительны соединения формулы (I), где один из остатков R1 или R3 означает -(СН₂)_0-1-Y-W-(C ₀-C₂₅)-алкилен-Y'-W'-(LAG), где один или несколько атомов углерода алкиленового остатка могут быть заменены на атомы кислорода и причем Y и W, независимо друг от друга, могут означать NH, NCH₃, C=O, O, связь или S(O)_n, где n=0-2, и Y' и W', независимо друг от друга, могут означать NH, NCH₃, C=O, O, связь или S(O)_n, где n=0-2, или Y-W или Y'-W', в каждом случае взятые вместе, могут означать связь.

Далее, предпочтительны соединения формулы (I), где группа LAG означает остаток карбоновой кислоты или остаток сульфокислоты.

Фармацевтически приемлемые соли из-за их более высокой растворимости в воде по сравнению с исходными или базовыми соединениями особенно пригодны для применений в медицине. Эти соли должны иметь фармацевтически приемлемый анион или катион. Пригодными фармацевтически приемлемыми аддитивными солями кислот предлагаемых согласно изобретению соединений являются соли неорганических кислот таких, как соляная кислота, бромоводородная, фосфорная кислота, метафосфорная кислота, азотная кислота, сульфокислота и серная кислота, а также органических кислот таких, как, например, уксусная кислота, бензолсульфокислота, бензойная кислота, лимонная кислота, этансульфокислота, фумаровая кислота, глюконовая кислота, гликолевая кислота, изотионовая кислота, молочная кислота, лактобионовая кислота, малеиновая кислота, яблочная кислота, метансульфокислота, янтарная кислота, п-толуолсульфокислота, винная кислота и трифторуксусная кислота. Для медицинских целей особенно предпочтительно используют хлорид. Пригодными фармацевтически приемлемыми основными солями являются аммониевые соли, соли щелочных металлов (как натриевые и калиевые соли) и соли щелочноземельных металлов (как магниевые и кальциевые соли).

Соли с фармацевтически неприемлемым анионом также входят в рамки изобретения в качестве полезных промежуточных продуктов для получения или очистки фармацевтически приемлемых солей и/или для использования в случае нетерапевтических, например in vitro, применений.

Используемое в данном контексте понятие "физиологически функциональное производное" означает любое физиологически приемлемое производное предлагаемого согласно изобретению соединения, например сложный эфир, которое при введении млекопитающему, как, например, человеку, способно (непосредственно или опосредованно) образовывать такое соединение или его активный метаболит.

Следующим объектом настоящего изобретения являются пролекарственные формы предлагаемых согласно изобретению соединений. Такие пролекарства in vivo могут метаболизироваться до предлагаемого согласно изобретению соединения. Эти пролекарства могут быть сами активными или неактивными.

Предлагаемые согласно изобретению соединения могут также находиться в различных полиморфных формах, например, в виде аморфной и кристаллической полиморфных формах. Все полиморфные формы предлагаемых согласно изобретению соединений относятся к изобретению и представляют объект изобретения.

В нижеследующем тексте все ссылки на "соединение (соединения) формулы (I)" относятся к соединению (соединениям) формулы (I), описанным выше, а также к их солям, сольватам и физиологически функциональным производным, описываемым в данном изобретении.

Соединения формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли и физиологически функциональные производные представляют собой идеальные лекарственные средства для лечения нарушений липидного обмена, в особенности гиперлипидемии. Соединения формулы (I) могут влиять на уровень холестерина в сыворотке и пригодны для предупреждения и лечения артериосклеротических явлений.

Соединение (соединения) формулы (I) можно вводить также в комбинации с другими биологически активными веществами.

Количество соединения формулы (I), которое необходимо для достижения желательного биологического эффекта, зависит от ряда факторов, например, от выбранного конкретного соединения, предусматриваемого применения, способа введения и клинического состояния пациента. В общем, суточная доза находится в пределах от 0,1 мг до 100 мг (обычно от 0,1 мг до 50 мг) в сутки на килограмм массы тела, например, 0,1-10 мг/кг/сутки. Таблетки или капсулы могут содержать, например, 0,01-100 мг, обычно 0,02-50 мг. В случае фармацевтически приемлемых солей вышеуказанные данные по массе относятся к массе образующего из соли иона дифенилазетидинона. Для профилактики или лечения вышеуказанных состояний соединения формулы (I) можно применять индивидуально в виде соединения, однако предпочтительно они находятся вместе с приемлемым носителем в форме фармацевтической композиции. Носитель, естественно, должен быть приемлемым, т.е. он должен быть совместимым с другими компонентами композиции и не быть вредным для здоровья пациента. Носитель может представлять собой твердое вещество, или жидкость, или то и другое и предпочтительно его используют вместе с соединением для получения лекарственного средства в виде разовой дозы, например в виде таблетки, которая может содержать от 0,05 мас.% до 95 мас.% биологически активного вещества. Также могут иметься другие фармацевтически активные вещества, включая другие соединения формулы (I). Предлагаемые согласно изобретению фармацевтические композиции можно приготовлять одним из известных фармацевтических способов, которые по существу состоят в том, что компоненты смешиваются с фармакологически приемлемыми носителями и/или вспомогательными веществами.

Предлагаемые согласно изобретению фармацевтические композиции представляют собой композиции, пригодные для орального или перорального (например, подъязычного) введения, хотя самый пригодный способ введения в каждом отдельном случае зависит от рода и тяжести излечиваемого состояния и от рода используемого в каждом случае соединения формулы (I). Дражированные лекарственные формы и дражированные лекарственные формы пролонгированного действия также охватываются данным изобретением. Предпочтительны резистентные к кислоте и желудочному соку лекарственные формы. Пригодные, резистентные к желудочному соку покрытия включают ацетатфталат целлюлозы, поливинилацетатфталат, гидроксипропилметилцеллюлозофталат и анионные полимеры метакриловой кислоты и метилового эфира метакриловой кислоты.

Пригодные фармацевтические соединения для орального введения могут находиться в виде отдельных единиц готовых лекарственных форм таких, как, например, капсулы, облатки, таблетки для сосания или таблетки, которые, соответственно, содержат определенное количество соединения формулы (I); в виде порошков или гранулятов; в виде раствора или суспензии в водной или неводной жидкости; или в виде эмульсии масло-в-воде или вода-в-масле. Эти композиции, как уже упоминалось, можно приготовлять любым пригодным фармацевтическим способом, который включает стадию, на которой биологически активное вещество вводят в контакт с носителем (который может состоять из одного или нескольких дополнительных компонентов). В общем, композиции получают путем равномерного и гомогенного смешения биологически активного вещества с жидким и/или твердым тонкодисперсным носителем, после чего продукт, если необходимо, формуют. Так, например, таблетки получают тем, что порошок или гранулят соединения прессуют или формуют, в случае необходимости, вместе с одним или несколькими дополнительными компонентами. Прессованные таблетки можно получать путем таблетирования в пригодной машине соединения в свободно текучей форме, как, например, порошок или гранулят, в случае необходимости, смешанного со связующим, придающим скользкость таблеткам веществом, инертным разбавителем и/или одним (несколькими) поверхностно-активным веществом и/или диспергатором. Формованные таблетки можно получать путем формования в пригодной машине порошкообразного, смоченного инертным жидким разбавителем соединения.

Фармацевтические композиции, которые пригодны для перорального (подъязычного) введения, включают таблетки для сосания, которые содержат соединение формулы (I) вместе с вкусовым веществом, обычно сахарозой и гуммиарабиком или трагантом, и пастилки, содержащие соединение в инертной основе такой, как желатина и глицерин или сахароза и гуммиарабик.

В качестве других биологически активных веществ для комбинированных препаратов пригодны все антидиабетические средства, которые указаны в Красном списке 2001, глава 12. Их можно комбинировать с предлагаемыми согласно изобретению соединениями формулы (I) в особенности для синергического повышения действия. Введение комбинации биологически активных веществ можно осуществлять либо путем раздельного введения биологически активных веществ пациенту, либо в форме комбинированных препаратов, в которых в фармацевтической композиции находятся несколько биологически активных веществ.

Антидиабетические средства включают инсулин и производные инсулина, как, например, Lantus^® или HMR 1964, производные GLP-1, как, например, такие, которые раскрыты в Международной заявке WO-98/088871 фирмы Novo Nordisk A/S, а также орально эффективные гипогликемические биологически активные вещества. Орально эффективные гипогликемические биологически активные вещества предпочтительно включают сульфонилмочевины, бигуадины, меглитиниды, оксадиазолидиндионы, тиазолидиндионы, ингибиторы глюкозидазы, антагонисты глюкагона, агонисты GLP-1, открыватели калиевых каналов, как, например, такие, которые раскрыты в Международных заявках WO-97/26265 и WO-99/03861 фирмы Novo Nordisk A/S, активаторы инсулина, ингибиторы ферментов печени, которые принимают участие в стимуляции глюконеогенеза и/или гликогенолиза, модуляторы поглощения глюкозы, изменяющие жировой обмен соединения такие, как антигиперлипидемические биологически активные вещества и антилипидемические биологически активные вещества, соединения, способствующие уменьшению потребления пищи, агонисты PPAR и PXR и биологически активные вещества, воздействующие на АТФ-зависимый калиевый канал бета-клеток.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором HMGCoA-редуктазы, как симвастатин, флувастатин, правастатин, ловастатин, аторвастатин, церивастатин, росувастатин.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором резорбции холестерина, как, например, эзетимиб, тиквесид, памаквесид.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с агонистом PPAR-гамма, как, например, росиглитазон, пиоглитазон, JTT-501, GI 262570.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с агонистом PPAR-альфа, как, например, GW 9578, GW 7647.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с агонистом смешанных PPAR-альфа/PPAR-гамма, как, например, GW 1536, AVE 8042, AVE 8134, AVE 0847.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с фибратом, как, например, фенофибрат, клофибрат, безафибрат.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором МТР, как, например, Вау 13-9952, BMS-201038, R-103757.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором резорбции желчной кислоты, как, например, HMR 1453.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором СЕТР, как, например, Вау 194789.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с полимерным адсорбером желчной кислоты, как, например, холестирамин, колесольвам.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с активатором рецептора LDL, как, например, HMR 1171, HMR 1586.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором АСАТ, как, например, авасимиб.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с антиоксидантом, как, например, ОРС-14117.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором липопротеинлипазы, как, например, NO-1886.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором АТФ-цитрат-лиазы, как, например, SB-204990.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором скваленсинтетазы, как, например, BMS-188494.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с антагонистом липопротеина(а), как, например, CI-1027 или никотиновая кислота.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором липазы, как, например, орлистат.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с инсулином.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с сульфонилмочевиной, как, например, толбутамид, глибенкламид, глипицид или гликлацид.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с бигуанидом, как, например, метформин.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с меглитинидом, как, например, репаглинид.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с тиазолидиндионом, как, например, троглитазон, циглитазон, пиоглитазон, росиглитазон или раскрытые в Международной заявке WO-97/41097 Dr. Reddy's Research Foundation соединения, в особенности 5-[[4-[(3,4-дигидро-3-метил-4-оксо-2-хиназолинилметокси]фенил]метил]-2,4-тиазолидиндион.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с ингибитором -глюкозидазы, как, например, миглитол или акарбоза.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с биологически активным веществом, которое воздействует на АТФ-зависимый калиевый канал бета-клеток, как, например, толбутамид, глибенкламид, глипицид, глиацид или репаглинид.

Согласно варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с более, чем одним из вышеуказанных соединений, например, в комбинации с сульфонилмочевиной и метформином, сульфонилмочевиной и акарбозой, репаглинидом и метформином, инсулином и сульфонилмочевиной, инсулином и метформином, инсулином и троглитазоном, инсулином и ловастатином, и т.д.

Согласно другому варианту осуществления изобретения соединения формулы (I) вводят в комбинации с агонистами CART, агонистами NPY, агонистами МС-3 или МС-4, агонистами орексина, агонистами Н3, агонистами TNF, агонистами CRF, антагонистами CRF BP, агонистами урокортина, агонистами 3, антагонистами МСН (меланинконцентрирующий гормон), агонистами ССК, ингибиторами повторного поглощения серотонина, смешанными серотонин- и норадренергическими соединениями, агонистами 5НТ, агонистами бомбезина, антагонистами галанина, гормоном роста, высвобождающими гормон роста соединениями, агонистами TRH, 2- или 3- модуляторами разрыва протеиновой связи, агонистами лептина, агонистами DA (бромокриптин, допрексин), ингибиторами липазы/амилазы, модуляторами PPAR, модуляторами RXR или агонистами TR- .

Согласно варианту осуществления изобретения другим биологически активным веществом является лептин.

Согласно варианту осуществления изобретения другим биологически активным веществом является дексамфатамин или амфетамин.

Согласно варианту осуществления изобретения другим биологически активным веществом является фенфлурамин или дексфенфлурамин.

Согласно еще одному варианту осуществления другим биологически активным веществом является сибутрамин.

Согласно варианту осуществления другим биологически активным веществом является орлистат.

Согласно варианту осуществления другим биологически активным веществом является мазиндол или фентермин.

Согласно варианту осуществления соединения формулы (I) вводят в комбинации с балластными веществами, предпочтительно с нерастворимыми балластными веществами, как, например, Caromax^®. Комбинация с Caromax ^® может находиться в виде композиции или может быть введена путем раздельного введения соединений формулы (I) и Caromax ^®. Caromax^® при этом также можно вводить в виде пищевых продуктов, как, например, в хлебобулочных изделиях или батончиках мюсли. Комбинация соединений формулы (I) с Caromax ^®, наряду с повышением активности, в особенности в отношении снижения LDL-холестерина, по сравнению с индивидуальными биологически активными веществами также отличается своей улучшенной переносимостью.

Понятно, что каждая пригодная комбинация предлагаемых согласно изобретению соединений с одним или несколькими из вышеуказанных соединений и, на выбор, с одним или несколькими другими фармакологически активными веществами рассматривается как подпадающая под объем охраны настоящего изобретения.

Объектом изобретения, далее, являются как смеси стереоизомеров формулы (I), так и чистые стереоизомеры формулы (I), как смеси диастереомеров формулы (I), так и чистые диастереомеры. Разделение смесей осуществляют хроматографическим способом.

Предпочтительны рацемические, а также энантиомерно чистые соединения формулы (I) следующей структуры:

В качестве аминозащитных групп предпочтительно используют отщепляющийся за счет каталитического гидрирования бензилоксикарбонильный (Z) остаток, отщепляющийся с помощью слабых кислот 2-(3,5-диметоксифенил)пропил(2)оксикарбонильный (Ddz) или тритильный (Trt) остаток, отщепляющийся с помощью кислот, как 3 М соляная кислота, трет-бутилкарбаматный (ВОС) остаток и отщепляющийся с помощью вторичных аминов 9-флуоренилметилоксикарбонильный (Fmoc) остаток.

Изобретение относится, далее, к способу получения производных дифенилазетидинона формулы (I):

где

Y может означать S, O, (C=O), (C=S), CH=CH, C C, N((C₁-C₆)-алкил), N(фенил), N((C ₁-C₆)-алкилфенил), N(CO-(CH₂) _1-10-COOH) или NH;

R11 может означать Н или в случае, когда Y = (C=O) или (C=S), ОН;

W, Y' и W', независимо друг от друга и от Y, могут означать -S(O)_n-, где n=0-2, -О-, -(C=O)-, -(C=S)-, -CH=CH-, -C C-, -N((C₁-C₆)-алкил)-, -N(фенил)-, -N((C₁-C₆)-алкилфенил)-, -N-(CO-(CH ₂)_1-10-COOH)- или -NH- или связь;

х, y и z, независимо друг от друга, могут означать 0-10.

Связывание остатка -(СН₂)_х-Y-R11 в соединении формулы (II) альтернативно также может быть по одному из двух других фенильных циклов.

Способ получения соединений формулы (I) отличается тем, что, например, амин или гидроксильное соединение формулы (II) вводят во взаимодействие с алкилирующим или ацилирующим реагентом, который предпочтительно в омега-положении содержит другую функциональную группу, возможно в защищенной форме. Ее используют (после удаления защитной группы) для присоединения (LAG), например, с образованием простой эфирной, аминной или амидной связей.

Нижеследующие примеры служат для более подробного пояснения изобретения без ограничения его объема описанными в примерах продуктами и вариантами осуществления.

Пример I

4-{4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензиламино}бутан-1-сульфокислота (6)

а) 3-[5-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-он (1)

27 г 3-[5-(4-Фторфенил)-5-гидроксипентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-она вместе с 13,6 г трет-бутилдиметилсилилхлорида и 10,2 г имидазола растворяют в 36 мл диметилформамида и перемешивают в течение 90 минут при температуре 60°С. После окончания реакции смесь растворяют в этилацетате и дважды встряхивают с водой. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, фильтруют и концентрируют в вакууме. Получают 3-[5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил]-4-фенилоксазоли-дин-2-он (1) с молекулярной массой 471,65 (С₂₆Н₃₄ FNO₄Si); МС (ESI) (масс-спектрометрия с ионизацией электронным распылением): 340,28 (МН⁺ - HOSi(CH ₃)₂C(CH₃)₃).

b) 4-[5-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)-1-(4-метоксифенил)-2-(2-оксо-4-фенилоксазолидин-3-карбонил)пентиламино]бензонитрил (2)

16,2 г 3-[5-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)пентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-она растворяют в 350 мл дихлорметана. Раствор смешивают с 19,8 мл основания Хенига и 10,14 г 4-[(4-метоксифенилимино)метил]бензонитрила и охлаждают до температуры -10°С. К охлажденному раствору добавляют 8,52 мл триметилсилилтрифлата и перемешивают в течение 30 минут при температуре -10°С. Раствор охлаждают теперь до температуры -30°С и добавляют 44 мл раствора тетрахлорида титана. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов при температуре от -30°С до -40°С. Затем раствор оставляют нагреваться до комнатной температуры, реакционный раствор промывают последовательно с помощью 200 мл 2н серной кислоты, 300 мл 20%-ного раствора гидросульфита натрия и насыщенным раствором хлорида натрия. Органическую фазу сушат над сульфатом магния, концентрируют в вакууме и остаток очищают на силикагеле с помощью смеси н-гептана и этилацетата в соотношении 3:1. Получают 4-[5-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)-1-(4-метоксифенил)-2-(2-оксо-4-фенилоксазолидин-3-карбонил)пентиламино]бензонитрил (2) с молекулярной массой 707,93 (С₄₁Н₄₆ FN₃O₅Si); МС(ESI): 590,51 (MH⁺ - C₇H₅N₂).

с) 4-[3-[3-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)-пропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензонитрил (3)

13,2 г 4-[5-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-5-(4-фторфенил)-1-(4-метоксифенил)-2-(2-оксо-4-фенилоксазолидин-3-карбонил)пентиламино]бензонитрила растворяют в 380 мл метил-трет-бутилового эфира, смешивают с 18,6 мл N,O-бис(триметилсилил)ацетамида и 1,86 мл 1 М раствора тетрабутиламмонийфторида в тетрагидрофуране и перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре. После окончания реакции добавляют 10 мл уксусной кислоты, реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают на силикагеле с помощью смеси толуола и этилацетата в соотношении 50:1. Получают 4-[3-[3-(трет-бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензонитрил (3) с молекулярной массой 544,75 (С₃₂Н₃₇ FN₂O₃Si); MC (ESI): 545,56 (M+H⁺ ).

d) 4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензонитрил (4)

3,5 г 4-[3-[3-(трет-Бутилдиметилсиланилокси)-3-(4-фторфенил)пропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензонитрила растворяют в 65 мл тетрагидрофурана, смешивают с 0,74 мл уксусной кислоты и 8,03 мл 1 М раствора тетрабутиламмонийфторида в тетрагидрофуране и перемешивают в течение 2 часов при комнатной температуре. Затем добавляют дополнительно 4,82 мл раствора тетрабутиламмонийфторида и перемешивают следующие 3 часа при температуре кипения с обратным холодильником. Охлажденную реакционную смесь концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографически на силикагеле с помощью смеси н-гептана и этилацетата в соотношении 2:1. Получают 4-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензонитрил (4) с молекулярной массой 430,48 (С₂₆Н₂₃ FN₂O₃); MC (ESI): 431,24 (M+H⁺ ).

е) 1-(4-Аминометилфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-он (5)

1,22 г 4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензонитрила растворяют в 90 мл этанола, смешивают с 10 мл концентрированного раствора аммиака и избытком никеля Ренея и перемешивают в течение 8 часов при температуре 60°С и давлении водорода 10 бар. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры в течение ночи; на следующий день отделяют от катализатора, фильтрат концентрируют в вакууме и остаток очищают хроматографически на силикагеле с помощью смеси дихлорметана, метанола и раствора аммиака в соотношении 10:10:1. Получают 1-(4-аминометилфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-он (5) с молекулярной массой 434,51 (С₂₆Н₂₇ FN₂O₃); MC (ESI): 418,2 (MH⁺ - NH₃).

f) 4-{4-[3-[3(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензиламино}бутан-1-сульфокислота (6)

87 мг вышеполученного бензиламина при комнатной температуре растворяют в 3 мл безводного ацетонитрила, смешивают с 40 мкл 1,4-бутансультона и в течение 12 часов кипятят с обратным холодильником. Охлажденный реакционный раствор концентрируют в вакууме и очищают хроматографически (силикагель; смесь дихлорметана и метанола в соотношении 85:15 + 10% воды). Получают 4-{4-[3-[3(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензиламино}бутан-1-сульфокислоту (6) с молекулярной массой 570,69 (С₃₀Н₃₅ FN₂O₆S); MC (ESI): 553,28 (MH⁺ - H₂O).

Пример II

2-[(4-{4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]фенокси}бутил)метиламино]этилсульфокислота (8)

130 мг 3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-1-[4-(4-фторбутокси)фенил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она (7) растворяют в 6 мл абсолютного метанола. Затем добавляют 120 мг N-метилтаурина в 2 мл воды и 60 мг карбоната калия. При температуре 50°С перемешивают в течение 24 часов. Реакционную смесь концентрируют в ротационном испарителе и остаток очищают препаративной хроматографией. После сушки вымораживанием получают продукт (50 мг) в виде масла. С₃₂Н₃₉FN₂O ₇S; MC (ESI) m/z: 614 (M⁺).

Пример III

[2-(4-{4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]фенокси}бутиламино)этил]фосфоновая кислота (9)

200 мг 3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-1-[4-(4-фторбутокси)фенил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она (7) растворяют в 6 мл абсолютного метанола. Затем добавляют 165 мг 1-аминоэтилфосфата и 247 мг карбоната калия в виде раствора в 3 мл воды. При температуре 90°С перемешивают в течение 8 часов. Реакционную смесь концентрируют в ротационном испарителе и остаток очищают препаративной хроматографией. После сушки вымораживанием получают продукт (47 мг) в виде масла. С₃₁Н₃₈ FN₂O₇P; MC (ESI) m/z: 600 (M⁺ ).

Пример IV

Моно-{6-[4-(4-{1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)бутиламино]-гексиловый} эфир фосфорной кислоты (10)

115 мг 1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-[4-(2-фторметоксиэтокси)фенил]азетидин-2-она (7) растворяют в 6 мл абсолютного метанола. Затем добавляют 130 мг 6-амино-1-гексилфосфата в 1,5 мл воды и 107 мг карбоната калия. При температуре 70°С перемешивают в течение ночи. Реакционную смесь концентрируют в ротационном испарителе и остаток очищают препаративной хроматографией. После сушки вымораживанием получают продукт в виде масла. С₃₄Н₄₃F₂ N₂O₇P; MC (ESI) m/z: 660 (M⁺ ).

Пример V

4-{4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]фенокси}бутан-1-сульфокислота (12)

160 мг 3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-1-(4-гидроксифенил)-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она (11) растворяют в 4 мл абсолютного диметилформамида. Добавляют 210 мг порошкообразного карбоната калия и 42 мг 1,4-бутансультона. Перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор концентрируют в вакууме масляного насоса, обрабатывают дихлорметаном и промывают один раз водой. Водную фазу подкисляют с помощью 2 н. соляной кислоты и экстрагируют 2 раза дихлорметаном. Объединенные органические фазы сушат над сульфтом натрия и концентрируют. Остаток хроматографируют через картуш с 10 г SiO₂ (дихлорметан:метанол = 5:1). Продукт (72 мг) получают в виде масла. С₂₉Н₃₂FNO₇S; MC (ESI) m/z: 557 (M⁺).

Пример VI

4-(4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)бутан-1-сульфокислота (13)

250 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-гидроксифенил)азетидин-2-она (7) растворяют в 6 мл абсолютного диметилформамида. Добавляют 337 мг порошкообразного карбоната калия и 69 мкл 1,4-бутансультона. Перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор фильтруют и концентрируют в вакууме масляного насоса. Остаток хроматографируют через картуш с 10 г SiO₂ (дихлорметан:метанол = 5:1) и кристаллизуют из диэтилового эфира. Продукт (131 мг) получают в виде твердого вещества. С₂₈ Н₂₉F₂NO₆S; MC (ESI) m/z: 546 (M⁺).

Пример VII

3-(4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}фенокси)пропан-1-сульфокислота (14)

250 мг 1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-гидроксифенил)азетидин-2-она (7) растворяют в 6 мл абсолютного диметилформамида. Добавляют 337 мг порошкообразного карбоната калия и 59 мкл 1,3-пропансультона. Перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционный раствор фильтруют и концентрируют в вакууме масляного насоса. Остаток хроматографируют через картуш с 10 г SiO₂ (дихлорметан:метанол = 5:1) и кристаллизуют из диэтилового эфира. Продукт (250 мг) получают в виде твердого вещества. С₂₇ Н₂₇F₂NO₆S; MC (ESI) m/z: 532 (M⁺).

Пример VIII

(4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)метансульфокислота (18)

а) 4-[5-(4-Фторфенил)-1-(4-фторфениламино)-5-гидрокси-2-(2-оксо-4-фенилоксазолидин-3-карбонил)пентил]бензонитрил (15)

2,5 г 3-[5-(4-Фторфенил)-5-гидроксипентаноил]-4-фенилоксазолидин-2-она в атмосфере аргона растворяют в 30 мл дихлорметана, к полученному раствору добавляют 3,9 г 4-[(4-фторфенилимино)метил]бензонитрила и охлаждают до температуры -10°С. К этой смеси добавляют 6,4 мл диизопропилэтиламина и в течение 30 минут 4,05 мл триметилсилилхлорида, так, чтобы температура не превышала -5°С. При этой температуре дополнительно перемешивают в течение 1 часа и затем охлаждают до температуры -25°С. После этого медленно добавляют 0,8 мл тетрахлорида титана. Темного цвета смесь перемешивают в течение ночи при температуре от -25°С до -30°С, после чего разлагают с помощью 35 мл 7%-ного раствора винной кислоты и дополнительно перемешивают в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем туда добавляют 15 мл 20%-ного раствора гидрокарбоната натрия и снова перемешивают в течение 1 часа. После разделения фаз органическую фазу промывают с помощью 30 мл воды, сушат над сульфатом магния и концентрируют до объема примерно 10 мл. После добавления 2 мл бистриметилсилилацетамида в течение 30 минут кипятят с обратным холодильником и после этого концентрируют в вакууме. Остаток с помощью смеси этилацетата и гептана доводят до кристаллизации. Отфильтровывают под вакуумом и высушивают в вакууме. Получают продукт с молекулярной массой 653,81 (С₃₇Н₃₇ F₂N₃O₄Si); MC (ионизация электронным распылением с образованием положительных ионов; (ESI+)): 654,3 (M+H⁺), 582,2 (M+H⁺ - Si(CH₃ )₃).

b) {1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензонитрил (16)

2 г 4-[5-(4-Фторфенил)-1-(4-фторфениламино)-5-гидрокси-2-(2-оксо-4-фенилоксазолидин-3-карбонил)пентил]бензонитрила (15) растворяют в 20 мл метил-трет-бутилового эфира и вместе с 100 мг тетрабутиламмонийфторидтригидрата и 1,3 мл бистриметилсилилацетамида нагревают в течение примерно 1 часа при температуре 40°С. За протеканием реакции следят с помощью тонкослойной хроматограммы. По окончании взаимодействия сначала добавляют 0,2 мл ледяной уксусной кислоты, перемешивают в течение 30 минут и концентрируют. Остаток смешивают с 20 мл смеси из изопропанола и 2 н. серной кислоты в соотношении 10:1 и перемешивают в течение 1 часа. После добавления на кончике шпателя твердого гидрокарбоната натрия снова концентрируют в вакууме, обрабатывают этилацетатом, органическую фазу промывают водой, сушат и после удаления растворителя остаток очищают колоночной хроматографией (SiO₂; CH₂ Cl₂/метанол = 100:1). Получают продукт с молекулярной массой 418,45 (С₂₅Н₂₀F₂N ₂O₂); MC (десорбционно-химическая ионизация с образованием положительных ионов (DCI+)): 419 (M+H⁺ ).

с) 4-(4-Аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-он (17)

200 мг {1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензонитрила (16) растворяют в 20 мл этанола и вместе с 0,5 мл концентрированного раствора аммиака в присутствии никеля Ренея гидрируют в течение 30 часов при давлении водорода 75 бар и при температуре 25°С. Отфильтровывают под вакуумом от катализатора, концентрируют в вакууме и остаток очищают колоночной хроматографией (SiO ₂; смесь CH₂Cl₂, метанола и концентрированного раствора аммиака в соотношении 100:10:1). Получают продукт с молекулярной массой 422,5 (С₂₅Н₂₂F ₂N₂O₂); MC (DCI+): 423 (M+H⁺ ), 405 (M+H⁺ - H₂O).

d) (4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензилкарбамоил)метансульфокислота (18)

К раствору из 40 мг сульфоуксусной кислоты, 110 мкл диизопропилкарбодиимида, 76 мг гидроксибензотриазола в 2 мл диметилформамида добавляют раствор из 120 мг 4-(4-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она (17), 48 мкл диизопропилэтиламина в 1 мл диметилформамида и перемешивают в течение 12 часов при комнатной температуре. Реакционный раствор концентрируют и разделяют высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) (Knauer Eurosper-100-10-C18, вода (0,1% трифторуксусной кислоты)/ацетонитрил (0,1% трифторуксусной кислоты) = 80:20 10:90). Получают продукт с молекулярной массой 544,58 (С₂₇Н₂₆F₂N₂O ₆S₁); MC (ESI): 527,10 (M+H⁺ - H ₂O).

Пример IX

{4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензилкарбамоил}метансульфокислота (19)

К раствору из 20 мг сульфоуксусной кислоты, 55 мкл диизопропилкарбодиимида, 38 мг гидроксибензотриазола в 1 мл диметилформамида добавляют раствор из 60 мг 1-(4-аминометилфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она (5) в 1 мл диметилформамида и перемешивают в течение 12 часов при комнатной температуре. Реакционный раствор концентрируют и разделяют путем ВЭЖХ (Knauer Eurosper-100-10-C18, вода (0,1% трифторуксусной кислоты)/ацетонитрил (0,1% трифторуксусной кислоты) = 80:20 10:90). Получают продукт с молекулярной массой 556,61 (С₂₈Н₂₉F₁N₂O ₇S₁); MC (ESI): 539,05 (M+H⁺ - H ₂O).

Пример Х

N-(4-{1-(4-Фторфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-оксоазетидин-2-ил}бензил)сукцинаминокислота (20)

К раствору из 279 мг янтарной кислоты, 92 мкл диизопропилкарбодиимида, 80 мг гидроксибензотриазола в 2 мл диметилформамида добавляют раствор из 100 мг 4-(4-аминометилфенил)-1-(4-фторфенил)-3-[2-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]азетидин-2-она (17), 33 мкл триэтиламина в 2 мл диметилформамида и перемешивают в течение 12 часов при комнатной температуре. Реакционный раствор концентрируют и разделяют путем ВЭЖХ (Knauer Eurosper-100-10-C18, вода (0,1% трифторуксусной кислоты)/ацетонитрил (0,1% трифторуксусной кислоты) = 80:20 10:90). Получают продукт с молекулярной массой 522,55 (С₂₇Н₂₆F₂N₂O ₆S₁); MC (ESI): 545,19 (M+Na⁺).

Пример XI

{2-[2-({4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензилкарбамоил}метокси)этокси}уксусная кислота (21)

К раствору из 327 мг 3,6,9-триоксаундекандикислоты, 57 мкл диизопропилкарбодиимида, 50 мг гидроксибензотриазола в 2 мл диметилформамида добавляют раствор из 64 мг 1-(4-аминометилфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она (5), 21 мкл триэтиламина в 1 мл диметилформамида и перемешивают в течение 12 часов при комнатной температуре. Реакционный раствор концентрируют и разделяют путем ВЭЖХ (Knauer Eurosper-100-10-C18, вода (0,1% трифторуксусной кислоты)/ацетонитрил (0,1% трифторуксусной кислоты) = 80:20 10:90). Получают продукт с молекулярной массой 638,70 (С₃₄Н₃₉F₁N₂O ₉); MC (ESI): 639,27 (M+H⁺).

Пример XII

4-((3-Карбоксипропионил)-{4-[3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензил}амино)-4-оксобутановая кислота (22)

К раствору из 190 мг янтарной кислоты, 63 мкл диизопропилкарбодиимида, 55 мг гидроксибензотриазола в 2 мл диметилформамида добавляют раствор из 70 мг 1-(4-аминометилфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она (5), 23 мкл триэтиламина в 1 мл диметилформамида и перемешивают в течение 12 часов при комнатной температуре. Реакционный раствор концентрируют и разделяют путем ВЭЖХ (Knauer Eurosper-100-10-C18, вода (0,1% трифторуксусной кислоты)/ацетонитрил (0,1% трифторуксусной кислоты) = 80:20 10:90). Получают продукт с молекулярной массой 634,4 (С ₃₄Н₃₅F₁N₂O₉ ); MC (ESI-отрицательные ионы): 633,22 (M-H⁺).

Пример XIII

11-{4-[3-[3-(4-Фторфенил)-3-гидроксипропил]-2-(4-метоксифенил)-4-оксоазетидин-1-ил]бензилкарбамоил}ундекановая кислота (23)

К раствору из 371 мг додекандикислоты, 63 мкл диизопропилкарбодиимида, 55 мг гидроксибензотриазола в 2 мл диметилформамида добавляют раствор из 70 мг 1-(4-аминометилфенил)-3-[3-(4-фторфенил)-3-гидроксипропил]-4-(4-метоксифенил)азетидин-2-она (5), 23 мкл триэтиламина в 1 мл диметилформамида и перемешивают в течение 12 часов при комнатной температуре. Реакционный раствор концентрируют и разделяют путем ВЭЖХ (Knauer Eurosper-100-10-C18, вода (0,1% трифторуксусной кислоты)/ацетонитрил (0,1% трифторуксусной кислоты) = 80:20 10:90). Получают продукт с молекулярной массой 646,81 (С₃₈Н₄₇F₁N₆); MC (ESI): 647,35 (M+H⁺).

Таблица 1 Соединения формулы (I)
Пример	R1, R2	R3, R4	R5, R6	Молекулярная масса свободного основания или кислоты (рассчитано)	Молекулярная масса (найдено)
XIV		пара-F, H	пара-F, H	531,58	532,4 (MH+)
XV		пара-F, H	пара-F, H	502,54	503,3 (MH+)
XVI	пара-F, H		пара-F, H	514,58	515,4 (MH+)
XVII	пара-O-CH 3, H		пара-F, H	599,68	599,21 (M+)
XVIII	пара-O-СН 3, H		пара-F, H	739,95	740,42 (MH+ )
XIX	пара-О-СН 3, H		пара-F, H	599,60	600,34 (MH+ )
XX	пара-О-СН 3, H		пара-F, H	534,59	534,4 (MH+)
XXI		пара-F, H	пара-F, H	578,66	561,25 (MH+-H2O)
XXII		пара-F, H	пара-F, H	634,77	617,31 (MH+-H2O)
XXIII	пара-F, H		пара-F, H	585,65	567,70 (MH+ -H2O)
XXIV	пара-О-СН3, Н		пара-F, H	557,64	557,19 (M+)
XXV		пара-F, H	пара-F, H	660,70	660,28 (M+)
XXVI	пара-O-CH3, H		пара-F, H	600,62	600,24 (M+)
XXVII	пара-O-CH 3, H		пара-F, H	614,73	597,32 (M-H2 O)+1
XXVIII		пара-F, H	пара-F, H	559,64	560,4 (MH+)
XXIX		пара-F, H	пара-F, H	545,61	546,3 (MH+)
XXX		пара-F, H	пара-F, H	727,91	710,23 (MH+-H2O)
XXXI	пара-O-CH 3, H		пара-F, H	753,93	752,32 (M-H+ ); измерено в отрицательной области)
XXXII		пара-F, H	пара-F, H	573,62	572,09 (M-H+); измерено в отрицательной области)
XXXII		пара-F, H	пара-F, H	587,67	586,18 (M-H+); измерено в отрицательной области)

Предлагаемые согласно изобретению соединения формулы (I) тестировали на их активность с помощью нижеописанного метода:

Влияние на абсорбцию холестерина + выделение ³Н-таурохолевой кислоты на основании фекального выделения мыши, крысы или хомячка

Мышей (NMRI), крыс линии Wistar или золотистых сирийских хомячков (в группах с n=4-6) содержат на стандартной диете (альтромин; нанесение на губу) в респирационных камерах. Во второй половине дня перед введением радиоактивного индикатора (¹⁴С-холестерин) животных оставляют натощак и адаптируют к колосниковой решетке.

Дополнительно животных за 24 часа до перорального введения пробного завтрака (¹⁴С-холестерин в Intralipid ^®20, Pharmacia-Upjohn) подкожно метят с помощью ³Н-ТСА (таурохолевая кислота) (например, от 1 мКи/мышь до 5 мКи/крыса).

Тест на абсорбцию холестерина: 0,25 мл/мышь Intralipid^®20 (Pharmacia-Upjohn) (потенциал действия с 0,25 мКи ¹⁴С-холестерина в 0,1 мг холестерина) вводят перорально с помощью желудочного зонда.

Тестируемые вещества вводят раздельно в 0,5% метилцеллюлоза (Sigma)/5% солутол (BASF, Людвигсхафен) или в пригодном эксципиенте.

Вводимый объем тестируемого вещества составляет 0,5 мл на мышь. Тестируемое вещество вводят непосредственно перед пробным завтраком (Intralipid с меченым ¹⁴С-холестерином) (тест на абсорбцию холестерина).

Фекалии собирают в течение 24 часов: удаление с фекалиями ¹⁴С-холестерина и ³Н-таурохолевой кислоты (ТСА) определяют спустя 24 часа.

Печени извлекают, гомогенизируют и аликвоты сжигают в Oximaten (модель 307, фирма Packard) для определения поглощенного/резорбированного количества ¹⁴ С-холестерина.

Оценка

Образцы фекалий:

Определяют общую массу, доливают водой до определенного объема, затем гомогенизируют, аликвоту высушивают и сжигают в Oximat (модель 307, фирма Packard, для сжигания радиоактивно меченых образцов): количество радиоактивных ³Н-Н ₂О и ¹⁴С-СО₂ точно пересчитывают на выделившееся количество ³Н-таурохолевой кислоты, соответственно, ¹⁴С-холестерина (двоично-изотопный метод). Значения ED₂₀₀ (доза, вызывающая 200%-ный эффект) интерполируют как дозу из кривой доза-действие как такие дозы, которые удваивают выделение ТСА или холестерина, по отношению к одновременно обработанной контрольной группе.

Образцы печени:

Поглощенное количество ¹⁴С-холестерина в печени относят к введенной дозе. Значения ED₅₀ (доза, вызывающая 50%-ный эффект) интерполируют из кривой доза-действие как такую дозу, которая снижает наполовину (50%) поглощение ¹⁴С-холестерина печенью, по отношению к контрольной группе.

Следующие значения ED₅₀ подтверждают активность предлагаемых согласно изобретению соединений формулы (I):

Пример, №	ED 50 (печень) [мг/мышь]
I	1,0
II	>0,1
IV	0,3
VIII	0,3
IX	<1,0
X	<1,0
XIII	<1,0
XVIII	0,005
XXI	0,1
XXII	0,1
XXV	0,3
XXVIII	0,3

Из таблицы можно видеть, что соединения формулы (I) обладают очень хорошим, снижающим уровень холестерина действием.

Резорбируемость:

Резорбируемость соединений формулы (I) испытывали на Сасо-клеточной модели (A.R. Hilgers и др., Caco-2 cell monolayers as a model for drug transport across the intestinal mucosa, Pharm. Res., 7, 902 (1990)).

Из данных измерения можно видеть, что предлагаемые согласно изобретению соединения формулы (I), по сравнению с описанными в уровне техники соединениями (сравнительная структура), обладают отчетливо более незначительной резорбцией:

Сравнительная структура: эзетимиб