способ диагностики перинатальных гипоксических поражений головного мозга у доношенных новорожденных

Формула изобретения

Способ диагностики перинатальных гипоксических поражений головного мозга у доношенных новорожденных путем исследования периферической венозной крови ребенка, отличающийся тем, что у новорожденного на пятые сутки жизни в крови определяют количество десквамированных эндотелиоцитов и при его значении, равном 5·10⁴ /л или более, диагностируют перинатальное гипоксическое поражение головного мозга.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к детской неврологии, и позволяет диагностировать перинатальные гипоксические поражения головного мозга у доношенных новорожденных в раннем неонатальном периоде.

Актуальность заявляемого способа определяется высокой частотой перинатальных поражений ЦНС, которые составляют 60-80% всех неврологических заболеваний у детей (1). Сложность диагностики перинатальных гипоксических поражений головного мозга у доношенных новорожденных в первые дни жизни обусловлена трудностью дифференцирования физиологических адаптационных процессов с патологическими как при клиническом осмотре, так и при использовании методов нейровизуализации. Ранняя диагностика этой патологии требует наличия объективных и надежных критериев.

Известен способ диагностики перинатальных поражений головного мозга у новорожденных по результатам нейросонографии (Гаврюшов В.В., Зубарев Е.А., Ефимов М.С. Диагностическая ценность нейросонографии у новорожденных детей // Вопросы охраны материнства и детства - 1990. - №1. - C.7-11), а именно по определению размеров и формы желудочков мозга, сосудистых сплетений, эхогенности перивентрикулярной зоны.

Недостатки способа:

1. Требует дорогостоящего оборудования.

2. Не позволяет диагностировать сосудистые нарушения, которые лежат в основе патогенеза перинатальных гипоксических поражений головного мозга, а только грубые структурные изменения.

3. Субъективность оценки, так как даже выраженные функциональные расстройства часто не имеют морфологического подтверждения.

4. Точность способа не известна.

Наиболее близким по техническому решению является способ диагностики перинатальных гипоксических поражений головного мозга у доношенных детей грудного возраста путем комплексной оценки результатов клинического обследования, биохимического и цитохимического исследования крови, а именно уровня тиреотропного гормона (ТТГ), свободного тироксина (Т ₄ своб.), кортизола и сукцинатдегидрогеназы (СДГ), -глицерофосфатдегидрогеназы ( -ГФДГ), кислой фосфатазы (КФ) в лимфоцитах периферической венозной крови. При перинатальных гипоксических поражениях центральной нервной системы (ЦНС) отмечается повышение уровня ТТГ, снижение Т₄ своб. и кортизола, а также активация СДГ, снижение активности -ГФДГ, повышение активности КФ (Изменения адаптации и их коррекция у детей грудного возраста с постгипоксическими изменениями ЦНС / Измайлова Т.Д., Петричук С.В., Агейкин В.А., Кузнецова Е.Ю. // Педиатрия. - 2002. - №1. - С.27-30).

Недостатки способа:

1. Способ применяется в грудном возрасте, начиная с одного месяца жизни ребенка, не позволяет проводить раннюю диагностику в первые дни жизни после рождения.

2. Метод трудоемкий, диагностика перинатальных гипоксических поражений головного мозга осуществляется путем комплексной оценки результатов клинического обследования, биохимического и цитохимического исследования крови.

3. Используются дорогостоящие реактивы.

4. Отсутствие данных о точности способа.

Указанные недостатки предлагается устранить в заявляемом способе. Технический результат заявляемого способа заключается в том, что у доношенных новорожденных на пятые сутки жизни определяют количество десквамированных эндотелиоцитов в периферической венозной крови и при его значении, равном 5·10 ⁴/л крови или более, диагностируют перинатальное гипоксическое поражение головного мозга с точностью 97,7%.

Новизна способа заключается в том, что впервые для диагностики перинатальных гипоксических поражений головного мозга у доношенных новорожденных в раннем неонатальном периоде предлагается показатель количества десквамированных эндотелиоцитов в 1 л венозной крови.

Ранее показатель количества десквамированных эндотелиоцитов в крови использовали для диагностики эндотелиальной дисфункции у женщин (2), хронического и острого локального нарушения кровообращения (стабильное течение ишемической болезни сердца, ишемический инсульт), системного хронического заболевания, сопровождающегося ангиопатией (инсулинзависимый сахарный диабет) и системного эндотоксикоза (беременные с гестозами) (3). С указанной целью показатель количества десквамированных эндотелиоцитов в крови используется впервые.

Показатель количества десквамированных эндотелиоцитов в крови выбран нами в качестве критерия диагностики перинатальных гипоксических поражений головного мозга, поскольку в основе этих поражений лежит патология мозговых сосудов, в том числе повреждение эндотелия, маркером которого является изменение содержания циркулирующих эндотелиоцитов в крови.

Способ осуществляется следующим образом.

У доношенного новорожденного на пятый день жизни проводят забор 0,5 мл венозной крови, к которой в качестве антикоагулянта добавляют 3,8% раствор лимоннокислого натрия в соотношении 1:9. Кровь центрифугируют в течение 10 мин при 1000 оборотах. Затем берут 0,2 мл плазмы и смешивают с 0,04 мл натриевой соли аденозинфосфата в концентрации 1 мг/мл. Полученную смесь механически перемешивают в течение 10 мин путем встряхивания. После этого центрифугируют при 1000 оборотах в течение 3 мин (для удаления агрегатов тромбоцитов). Свободный от тромбоцитов супернатант переносят в другую емкость и центрифугируют 10 мин при 1000 оборотах. Затем надосадочную жидкость удаляют, а полученный осадок ресуспендируют в 0,25 мл физиологического раствора. Суспензией заполняют камеру Горяева, количество клеток эндотелия подсчитывают в 2 сетках камеры с использованием фазово-контрастной микроскопии (3).

Отличительные признаки способа. Установлен новый диагностический параметр содержания десквамированных эндотелиоцитов в венозной крови доношенных новорожденных, при количественном значении которого, равного 5·10⁴ /л крови или более, диагностируют перинатальные гипоксические поражения головного мозга с точностью 97,7%.

Для объективизации данных, параллельно с применением заявляемого способа, проводилось клиническое наблюдение и обследование новорожденных в раннем неонатальном периоде другими функциональными методами исследования: нейросонография (НСГ), ультразвуковая чрезродничковая допплерография, исследование вариабельности ритма сердца.

Существо способа поясняется следующими примерами.

Пример 1. Ребенок А. родился в срок гестации 38-39 недель, с оценкой по шкале Апгар 8-9 баллов, в удовлетворительном состоянии. При обследовании ребенка на 5 день жизни неврологической симптоматики не наблюдалось. По данным НСГ: патологии не выявлено. На основании клинических данных и результатов НСГ сделано заключение: данных за перинатальное гипоксическое поражение головного мозга нет.

Согласно предлагаемому способу у ребенка на 5 день жизни количество десквамированных эндотелиоцитов 3·10⁴/л крови, что ниже заявляемого параметра.

Заключение: данных за перинатальное гипоксическое поражение головного мозга нет, что подтверждается клиническими данными и результатами НСГ.

Пример 2. Ребенок Б. родился в срок 38 недель, с оценкой по шкале Апгар 6-7 баллов. При рождении состояние ребенка расценено как среднетяжелое. По клинико-неврологическим данным отмечалось снижение спонтанной двигательной активности, снижение мышечного тонуса, быстрое угасание безусловных рефлексов. По данным нейросонографии отмечался перивентрикулярный отек, внутрижелудочковое кровоизлияние 1 ст. На основании клинических данных и результатов НСГ поставлен диагноз: Перинатальное гипоксическое поражение головного мозга.

Согласно предлагаемому способу у ребенка на 5 день жизни количество десквамированных эндотелиоцитов в крови - 8·10⁴/л, что соответствует заявляемому параметру.

Заключение: у ребенка диагностируется перинатальное гипоксическое поражение головного мозга, что подтверждается клиническими данными и результатами НСГ.

Пример 3. Ребенок В., рожденный в сроке 39 недель от 1 беременности 1 своевременных родов с оценкой по шкале Апгар 8-9 баллов в удовлетворительном состоянии. При клиническом осмотре у ребенка отмечался тремор подбородка, мышечная дистония. По данным НСГ отмечался перивентрикулярный отек. На основании клинических данных и результатов НСГ поставлен диагноз: перинатальное гипоксическое поражение головного мозга.

Согласно предлагаемому способу количество десквамированных эндотелиоцитов на 5 день жизни - 5·10⁴/л, что соответствует заявляемому параметру.

Заключение: у ребенка диагностируется перинатальное гипоксическое поражение головного мозга, что подтверждается клиническими данными и результатами НСГ.

Указанным способом обследовано 43 ребенка, результаты приведены в таблице.

Таблица
Показатель	Количество обследованных
Всего детей	43
Истинно-положительный результат	32
Ложно-положительный результат	1
Истинно-отрицательный результат	10
Ложно-отрицательный результат	0

Точность заявляемого способа - 97,7%.

Чувствительность заявляемого способа - 100%.

Специфичность заявляемого способа - 90,9%.

Преимущества данного способа:

1. Возможность ранней (на 5 день жизни) диагностики перинатальных гипоксических поражений головного мозга у доношенных новорожденных.

2. Не требует дорогостоящего оборудования и реактивов.

3. Не требует специальной подготовки ребенка для исследования.

4. Требуется небольшое количество крови для исследования (0,5 мл).

5. Требует для своего проведения небольшое количество времени (30 мин).

6. Проводится однократно, не требует исследования в динамике.

7. Высокая точность - 97,7%, чувствительность - 100%, специфичность - 90,9%.

Источники информации

1. Самсыгина Г.А. Гипоксичекое поражение ЦНС у новорожденных детей: клиника, диагностика, лечение // Педиатрия. - 1996. - №5. - С.74-77.

2. Патент №2234094, МПК G 01 №33149, А 61 В 5/02. Способ диагностики эндотелиальной дисфункции у женщин (Л.Г.Краснова, М.Г.Омельяненко, С.Б.Назаров, Т.С.Полятыкина, В.А.Бобков // Изобретение. Полезные модели - 2004 - №22, 4.3. - С.54).

3. Диагностическая ценность десквамированных эндотелиальных клеток в крови / Н.Н.Петрищев, О.А.Беркович, Т.Д.Власов и др. // Клиническая лабораторная диагностика. - 2001. - №1. - С.50-52.