полимерная композиция для получения стабилизированной формы динитрозильного комплекса железа и способ получения указанной формы комплекса

Формула изобретения

1. Полимерная композиция для получения стабилизированной формы динитрозильного комплекса железа, содержащая динитрозильный комплекс железа с тиоловым лигандом и воду, отличающаяся тем, что композиция содержит динитрозильный комплекс железа общей формулы (RS ^-)₂Fe⁺(NO⁺)₂ (где RS^- - тиольный лиганд, выбранный из группы биогенных тиолов: цистеин, гомоцистеин, цистеамин, глутатион, коэнзим А, липоевая кислота, или синтетических тиолов: N-ацетил-цистеин, N-ацетил-пеницилламин, дитиотреит, лейцил-серил-триптофанил-цистеин), а также полимерный стабилизатор, выбранный из группы: декстран, мальтодекстрин, гидроксиэтилкрахмал, метилцеллюлоза, поливиниловый спирт, поли(2-гидроксиэтилакрилат), при следующем соотношении компонентов, в мас.%:

Динитрозильный комплекс железа	0,1-6,0
Полимерный стабилизатор	1-20
Вода	До 100

2. Способ получения стабилизованного динитрозильного комплекса железа из полимерной композиции по п.1, заключающийся в том, что смешивают компоненты композиции по п.1, далее замораживают полученную композицию при -10...-196°С в течение 0,1-24 ч и высушивают лиофильно до остаточной влажности 0,1-2,0%.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к химии координационных и высокомолекулярных соединений (ВМС), к композициям на основе ВМС и способам обработки композиций ВМС в водной среде, конкретно к стабилизированной форме динитрозильных комплексов железа, способных служить донорами монооксида азота в физиологических условиях.

Изобретение может быть использовано в медицине и в фармацевтической промышленности для получения препаратов, лечебное действие которых базируется на постепенном высвобождении монооксида азота, функционирующего в качестве модулятора разнообразных физиологических и биохимических процессов в живых системах.

Известно, что в организме животных и человека, в растениях и бактериях ферментативно продуцируется монооксид азота (NO), который оказывает регулирующее влияние на клетки и органы живых организмов [Ванин А.Ф. Динитрозильные комплексы железа и S-нитрозотиолы - две возможные формы стабилизации и транспорта монооксида азота в биосистемах. // Биохимия, 1998, т.63, №7, с.782-793]. В частности, NO вызывает расслабление гладкой мускулатуры стенок кровеносных сосудов, подавляет агрегацию тромбоцитов и их адгезию. Монооксид азота необходим для нормальной работы центральной и вегетативной нервных систем, регулирует деятельность органов дыхания, секреторных клеток и тканей, желудочно-кишечного тракта и мочеполовой системы. Наряду с регуляторными функциями NO проявляет цитотоксическую (цитостатическую) активность, принимает участие в процессе апоптоза - генетически запрограммированной смерти клеток [Ignarro L.J. Nitric oxide: Biology and Pharmacology. // San Diego, Academic Press, 2000, 352 p.].

В связи с этим существует задача создания медикаментозных средств, модулирующих функционирование NO в организме животных и человека, в частности, задача разработки новых эффективных доноров моноксида азота. Как оказалось, именно способность продуцировать монооксид азота в организме определяет спазмолитическое и сосудорасширяющее действие таких известных сердечно-сосудистых лекарств как органические нитраты (например, нитроглицерин или нитросорбит). Однако эти вещества обладают рядом существенных недостатков, связанных с проявлением эффекта устойчивости к этим лекарствам (толерантности) и их нежелательного окислительного действия на гемоглобин.

Сейчас в мире проводится усиленный поиск соединений, способных корректировать в качестве доноров монооксида азота, его функционирование в организме животных и человека. Этот поиск связан с модификацией уже используемых в медицине органических нитратов типа нитроглицерина, а также с синтезом различных соединений, способных выделять в организме NO. Однако многие из этих соединений недостаточно стабильны при хранении и обнаруживают токсическое действие.

Одним из перспективных типов доноров монооксида азота, лишенных недостатков органических нитратов и потенциально приемлемых для биомедицинского применения, являются динитрозильные комплексы железа (ДНКЖ), в частности динитрозильные комплексы железа, содержащие тиольные лиганды (ДНКЖ-ТЛ), например, цистеин или глутатион [Ванин А.Ф. Динитрозильные комплексы железа - эндогенные сигнальные агенты в клетках и тканях животных и человека. // Биофизика, 2004, т.49, №4, с.581-586]. Показано, что эти комплексы обладают высокой гипотензивной, сосудорасширяющей и противотромбозной активностью, они экспрессируют гены, ответственные за синтез белков антиоксидантной защиты, модулируют процесс апоптоза в тканях и клетках. При этом подобные ДНКЖ-ТЛ малотоксичны и обладают пролонгированным действием даже при однократном введении в живой организм.

Однако указанные динитрозильные комплексы являются малостойкими веществами, особенно в растворенном состоянии. Спектроскопия электронного парамагнитного резонанса (ЭПР) их водных растворов показывает, что уже через 1 ч они теряют характерный для них сигнал ЭПР, свидетельствуя тем самым о распаде ДНКЖ-ТЛ в этих условиях [Ванин А.Ф. К вопросу о стабильности динитрозильного комплекса железа с цистеином как кандидата на роль эндотелиального фактора релаксации кровеносных сосудов. // Биохимия, 1996. Т.61, №2, с.308-314]. Поэтому подобные препараты приходится хранить при температурах жидкого азота, что малотехнологично и существенно увеличивает стоимость препаратов. В сухом (высушенном) состоянии ДНКЖ-ТЛ более стабильны, чем в растворе, но очень гигроскопичны, а попадание даже небольших количеств воды или водяных паров в сухие препараты ДНКЖ-ТЛ резко снижает их стабильность при хранении. Кроме того, оказалось, что порошки сухих препаратов ДНКЖ-ТЛ обладают повышенной адгезией к материалам сосудов, обычно используемым для выпуска и хранения лекарств, что существенно затрудняет точное дозирование соответствующего препарата при его применении в медицинской практике. Таким образом, несмотря на выраженную биологическую активность, сами по себе ДНКЖ-ТЛ имеют ряд серьезных недостатков при рассмотрении их в качестве серьезных недостатков при рассмотрении их в качестве потенциальных лекарственных средств; особенно это касается недостаточной стабильности таких комплексов, т.е. актуальна проблема их стабилизации.

Известен способ повышения стабильности ДНКЖ путем формирования кристаллических форм этих соединений [Baltusis L.M., Karlin K.D., Rabinowitz H.N., Lippard S.J. Synthesis and structure of Fe(L'H)(NO) ₂, a tetracoordinate complex having a twelve-membered chelate ring, and its conversion to pentacoordinate Fe(L')(NO) through formal loss of HNO (L'=SCH₂CH₂NMeCH ₂CH₂CH₂NMeCH₂CH₂ S^-). // Inorg. Chem. 1980, v.19, p.2627-2633]. Полученные кристаллические формы этих комплексов стабильны при хранении на воздухе в течение нескольких месяцев, однако их нельзя использовать в физиологических исследованиях, т.к. они растворимы только в полярных органических растворителях, токсичных для теплокровных организмов при инъекционном введении.

Известен другой кристаллический комплекс [Санина Р.А., Ракова О.А., Алдошин С.М., Чуев И.И., Атовмян Е.Г., Ованесян Н.С. Синтез, рентгеноструктурное и спектральное исследование соединений [Q₄N]₂[Fe₂ (S₂O₃)₂(NO)₄].//Координационная химия. 2001, т.27, №3, с.198-202], который превращается в ДНКЖ-ТЛ при растворении в воде. Композиция для получения данной кристаллической формы содержит калевую соль тетранитрозильного комплекса железа, отвечающую формуле K₂[Fe₂(S₂ O₃)₂(NO)₄], тетраалкиламмоний бромид и воду при соотношении компонентов (мас.%): 5, 15 и 80, соответственно. Целевую кристаллическую форму ДНКЖ-ТЛ получают в инертной атмосфере смешением тетраалкиламмоний бромида с водным раствором K₂[Fe₂(S₂O₃ )₂(NO)₄] с последующим (через 30 мин) отделением образовавшего осадка фильтрованием и сушкой в вакууме над прокаленным хлористым кальцием. Однако эта форма обладает недостаточно совершенной кристаллической структурой, что сильно мешает рентгеноструктурным исследованиям.

Известна более совершенная кристаллическая форма того же комплекса [Ракова О.А., Шилов Г.В., Стрелец В.В., Борзова И.Б., Куликов А.В., Алдошин С.М. Синтез, структура, редокс-свойства и ЭПР-исследование комплекса [Bu₄N](Fe₂ ( -S₂O₃)₂(NO)₄ .//Координационная химия. 2001, т.27, №9, с.698-704]. Эта кристаллическая форма комплекса содержит тиосульфат-тетранитрозильный комплекс железа общей формулы: [Bu₄N][Fe₂( -S₂O₃)₂(NO)]₄ . Данную форму получают пропусканием газообразного NO через смесь водных растворов сульфата двухвалентного железа и тиосульфата натрия с последующим взаимодействием образовавшейся соли с тетрабутиламмоний бромидом в композиции того же состава, что и в предыдущем случае, и дальнейшей кристаллизацией целевого вещества из водно-щелочного раствора в атмосфере азота.

Данное техническое решение, как наиболее близкое к заявляемому по достигаемому эффекту (высвобождение NO в физиологических условиях), выбрано нами за прототип.

Однако прототип имеет существенные недостатки. Хотя такая форма нитрозильного комплекса железа в сухом виде стабильна в течение нескольких месяцев, в водном растворе комплекс неустойчив и распадается в течение получаса [Васильева С.В., Мошковская Е.Ю., Санина Н.А., Алдошин СМ., Ванин А.Ф. Трансдукция генов железо-нитрозильными комплексами в Escherichia coli.//Биохимия, 2004, т.69, №8, с.1088-1095]. Кроме того, в состав известного железонитрозильного комплекса входят ионы тиосульфата и тетрабутиламмония, которые вредны для животных организмов, вследствие чего указанные комплексы не могут применяться в качестве лекарственных средств. Существенным недостатком способа-прототипа являются необходимость проведения длительной и технологически сложной (из-за необходимости работы в инертной атмосфере) стадии кристаллизации целевого продукта, когда его значительное количество остается в маточном растворе и безвозвратно теряется, что снижает экономические показатели процесса.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка композиции для получения стабилизированной формы динитрозильного комплекса железа, способного служить донором монооксида азота в физиологических условиях, и разработка способа получения указанной стабилизированной формы.

Поставленная задача решается тем, что композиция для получения стабилизированной формы динитрозильного комплекса железа содержит динитрозильный комплекс железа общей формулы (RS^-)₂Fe⁺(NO⁺ )₂ (где RS^- - тиольный лиганд, выбранный из группы биогенных тиолов: цистеин, гомоцистеин, цистеамин, глутатион, коэнзим А, липоевая кислота, или синтетических тиолов: N-ацетил-цистеин, N-ацетил-пеницилламин, дити-отреит, лейцил-серил-триптофанил-цистеин), а также полимерный стабилизатор, выбранный из группы: декстран, мальтодекстрин, гидроксиэтилкрахмал, метилцеллюлоза, поливиниловый спирт, поли(2-гидроксиэтилакрилат), и воду при следующем соотношении компонентов в мас.%: динитрозильный комплекс железа - 0,1-6,0; полимерный стабилизатор - 1-20; вода - до 100.

Получение стабилизованного динитрозильного комплекса железа из полимерной композиции осуществляют смешиванием компонентов композиции с последующим ее замораживанием при -10...-196°С в течение 0,1-24 ч и высушиванием лиофильно до остаточной влажности 0,1-2,0%.

Заявляемые композиция и совокупность операций при получении стабилизированной формы ДНКЖ-ТЛ не известны из уровня техники, поэтому заявляемое техническое решение отвечает критерию новизны.

Стабилизированная форма динитрозильного комплекса железа, получаемая согласно предлагаемому техническому решению, в качестве тиольного лиганда (RS^-) содержит такие биогенные вещества, как цистеин, гомоцистеин, цистеамин, глутатион, коэнзим А, липоевая кислота, широко представленные в живых системах и абсолютно с ними совместимые. Кроме того, в состав комплекса могут входить биосовместимые синтетические тиолы: N-ацетил-цистеин, N-ацетил-пеницилламин, дитиотреит, лейцил-серил-триптофанил-цистеин и др. Концентрация ДНКЖ-ТЛ в композиции для приготовления стабилизированного комплекса лежит в пределах 0,1-6,0 мас.% и определяется в основном его растворимостью при формировании.

В состав заявляемой композиции также входит полимерный стабилизатор из группы полиольных физиологически безопасных соединений, широко используемых в фармацевтической практике. Предусматриваемое изобретением количество такого стабилизатора составляет 1-20 мас.%. Оказалось, что подобные полиольные полимеры в таких концентрациях обладают выраженным стабилизирующим действием в отношении ДНКЖ-ТЛ, причем этот эффект ранее известен не был, что также подтверждает новизну заявляемого технического решения.

При осуществлении заявляемого способа получения стабилизированной формы ДНКЖ-ТЛ сначала готовят смесь ДНКЖ-ТЛ, стабилизатора и воды, а затем замораживают композицию при -10...-196°С в течение 0,1-24 ч и сушат в вакууме до остаточной влажности 0,1-2,0%.. Режимы обработки и сушки подобраны экспериментально, таким образом, чтобы обеспечить желаемый эффект стабилизации ДНКЖ-ТЛ.

Предлагаемые полимерная композиция и способ ее последующей обработки может применяться для получения стабилизированных форм динитрозильных комплексов железа, содержащих не только различные тиольные лиганды, но и лиганды другой химической природы, например, тиосульфат, фосфат или цитрат, что указывает на достаточно универсальный характер заявляемого технического решения.

Ниже приводится типичный пример реализации заявляемого изобретения, остальные примеры, подтверждающие заявляемые параметры, сведены в таблицу.

Пример 1а. Готовят 0,15%-ный раствор FeSO₄×7Н ₂О в дистиллированной воде и 1,4%-ный раствор цистеина в воде при рН 7,4, которые помещают соответственно в верхнюю и нижнюю части аппарата Тунберга, и после вакуумирования аппарата до 1 мм рт.ст. заполняют его объем газообразным NO при давлении 100 мм. рт.ст. Встряхивание аппарата в течение 5 минут приводит к появлению зеленой окраски раствора железа, свидетельствующее об образовании нитрозильного комплекса железа с водой. После этого раствор этого комплекса смешивают в атмосфере NO с раствором цистеина с последующим встряхиванием в течение 5 минут. В результате образуется ДНКЖ-ТЛ (в данном случае - с цистеином), характеризующийся темно-зеленой окраской (концентрация полученного комплекса - 0,15%). После откачки NO из аппарата раствор ДНКЖ-ТЛ используют для регистрации сигнала электронного парамагнитного резонанса и последующего получения стабилизированной формы комплекса. Сигнал ЭПР для ДНКЖ-ТЛ при комнатной температуре регистрации представляет собой симметричный синглет с полушириной 0,7 мТ с центром при g=2,03 и 13-компонентной сверхтонкой структурой с расщеплением 0,7 мТ. Оценка интегральной интенсивности сигнала ЭПР показывает, что все железо включено в ДНКЖ-ТЛ.

Для приготовления стабилизированной формы ДНКЖ-ТЛ в его растворе диспергируют порошок сухого декстрана; систему перемешивают до полного растворения указанного полимерного стабилизатора в концентрации 10 мас.%. Далее замораживают полученный раствор в жидком азоте при -78°С в течение 1 ч и высушивают лиофильно до остаточной влажности 1%.

Растворение высушенного препарата в дистиллированной воде с последующей регистрацией его ЭПР-спектра показывает, что приготовление стабилизированной формы ДНКЖ-ТЛ не приводит к снижению в нем содержания ДНКЖ. Интенсивность ЭПР-сигнала (при g=2,03) свежеполученного комплекса принимается за 100%. Хранение сухого препарата на воздухе в течение 2 месяцев не приводит к снижению в нем количества ДНКЖ, т.е. интенсивность сигнала полностью сохраняется. Аналогичный результат получается при оценке физиологического действия препарата - его способности снижать артериальное давление у крыс с исходным повышенным артериальным давлением 180-200 мм рт.ст. Внутривенное введение животным водного раствора свежеприготовленной стабилизированной формы ДНКЖ-ТЛ в дозе 0,5 мкм на животное весом 250 г приводит к снижению артериального давления у животных в среднем на 80 мм рт.ст. Такое же снижение наблюдается у животных при использовании стабилизированной формы ДНКЖ-ТЛ, хранившейся на воздухе в течение 2 месяцев. В аналогичных опытах с введением животным раствора ДНКЖ с цистеином способность комплексов снижать артериальное давление у животных через 1 ч составляет всего примерно 15 мм рт.ст. (№1 г в таблице 1) и полностью исчезает уже через 2 часа хранения раствора. Этот результат коррелирует с исчезновением сигнала ЭПР раствора, характерного для ДНКЖ-ТЛ.

Приведенные примеры свидетельствуют, что в результате реализации предлагаемого изобретения достигается высокая стабильность препаратов ДНКЖ-ТЛ, улучшаются их эксплуатационные характеристики, снижаются потери веществ:

а) Для всех заявляемых тиольных лигандов, но без добавок полимерного стабилизатора, стабильность соответствующих ДНКЖ-ТЛ в растворе низкая - через 1 ч относительная интенсивность сигнала ЭПР составляет всего 1-5% от интенсивности свежеполученного образца (№№ 1в, г: 4в, г; 6в, г; 8в, г; 9в, г; 10в, г; 11в, г; 13в, г; 15в, г и 16в, г), что также коррелирует с очень слабым проявлением физиологического эффекта, тогда как введение в исходную композицию заявляемых полимерных стабилизаторов повышает устойчивость целевой формы ДНКЖ-ТЛ на несколько порядков.

б) Хранение стабилизированной формы ДНКЖ-ТЛ, полученной из заявляемой полимерной композиции согласно предлагаемому способу, не требует, в противовес аналогам и прототипу, использования сверхнизких температур и инертной атмосферы, что резко упрощает практическое использование ДНКЖ-ТЛ не только для исследовательских целей, но и как потенциальных лекарственных средств, т.к. предлагаемая стабилизированная форма ДНКЖ-ТЛ может хранится в воздушной атмосфере при комнатной температуре или для увеличения времени хранения, в бытовых холодильниках.

в) Испытания различных вариантов стабилизированной формы ДНКЖ-ТЛ, полученных в соответствии с предлагаемым техническим решением, показали, что в отличие от сухой формы ДНКЖ-ТЛ без полимерного стабилизатора, предлагаемая форма не обладает повышенной адгезией к материалам сосудов, обычно используемым для выпуска и хранения лекарств, поэтому точное дозирование соответствующего препарата при возможном его применении в медицинской практике не затруднено.

г) В состав заявляемой стабилизированной формы ДНКЖ-ТЛ не входят компоненты, которые вредны для животных организмов, вследствие чего указанные комплексы потенциально могут применяться в качестве лекарственных средств. Кроме того, заявляемый состав обеспечивает полную растворимость препаратов в воде и физиологических средах.

д) Важным преимуществом заявляемого способа является то, что практически полностью исключаются потери целевого продукта, т.к. все компоненты композиции после лиофилизации оказываются включенными в состав конечной стабилизированной формы ДНКЖ-ТЛ, а в случае реализации способа-протипа значительное количество целевого вещества после его кристаллизации, как указывалось выше, остается в маточном растворе и безвозвратно теряется.

Таблица примеров
№ п/п	Полимерная композиция					Режим замораживания полимерной композиции		Остаточная влажность стабилизированной формы динитрозильного комплекса железа, %	Относительная интенсивность сигнала ЭПР при g=2,03, %	Снижение артериального давления у крыс весом 250 г при разовом введении животным 0,5 мкм ДНКЖ-ТЛ, мм рт.ст.
	Тиол в динитрозильном комплесе железа	Содержание динитрозильного комплекса железа в композиции, мас.%	Полимерный стабилизатор	Содержание полимерного стабилизатора в композиции, мас.%	Содержание воды в композиции, мас.%	Температура, °С	Время, ч
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
1a	цистеин	0,15	декстран	10	89,85	-78	1	1,0	100*)	80*)
1б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	100**)	80**)
1в	то же	0,15	нет	нет	99,85	то же	то же	1,0	100*)	80*)
1г	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	5/0***)	15/0***)

Таблица (продолжение)
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
2а	цистеин	1,0	гидрокси-этил-крахмал	5	94,0	-30	5	0,5	100 *)	80*)
2б	то же	то же	тоже	то же	то же	то же	то же	то же	100 **)	80**)
3а	гомоцистеин	0,2	поливиниловый спирт	7,5	92,3	-20	10	2	100*)	70 *)
3б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	100**)	65**)
4а	гомоцистеин	0,4	метил-целлюлоза	2,5	97,1	-15	18	0,1	100*)	75*)
4б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	100**)	70**)
4в	то же	0,4	нет	нет	99,6	то же	то же	то же	100*)	70*)
4г	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	3/0**)	10/0***)

Таблица (продолжение)
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
5а	цистеамин	6,0	мальто-декстрин	20	74,0	-196	0,1	1,5	100 *)	40*)
5б	то же	то же	тоже	то же	то же	то же	то же	то же	90 *)	35*)
6а	цистеамин	4,0	гидрокси-этил-крахмал	12,5	83,5	-40	2,5	0,9	100*)	50 *)
6б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	95**)	45**)
6в	то же	4,0	нет	нет	96,0	то же	то же	то же	100*)	40*)
6г	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	1/0***)	5/0***)
7а	глутатион	0,3	декстран	15	84,7	-25	8	0,3	100*)	60*)
7б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	100**)	60**)

Таблица (продолжение)
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
8а	глутатион	0,9	поли(2-гидрокси-этилакрилат)	1,0	98,1	-10	24	0,5	100 *)	60*)
8б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	90 **)	55**)
8в	то же	0,9	нет	нет	99,1	то же	то же	1,0	100 *)	60*)
8г	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	1,5/0 ***)	10/0***)
9а	коэнзим А	0,5	метил-целлюлоза	5	94,5	-20	12	1,6	100*)	45
9б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	95 **)	40**)
9в	то же	0,5	нет	нет	99,5	то же	то же	то же	100 *)	45*)
9г	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	1/0 ***)	5/0***)

Таблица (продолжение)
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
10а	липоевая кислота	4,5	поли(2-гидрокси-этилакрилат)	2	93,5	-12	20	0,7	100*)	50 *)
10б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	100**)	50**)
10в	то же	4,5	нет	нет	95,5	то же	то же	то же	100*)	50*)
10г	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	2,5/0***)	10/0***)
11а	N-ацетил-цистеин	0,4	мальто-декстрин	18	81,6	-39	1	2	100*)	80 *)
11б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	100**)	80**)
11в	то же	0,4	нет	нет	99,6	то же	то же	то же	100*)	80*)
11г	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	2/0***)	10/0***)

Таблица (продолжение)
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
12а	N-ацетил-цистеин	0,8	гидрокси-этил-крахмал	8	91,2	-18	18	1,1	100*)	80 *)
12б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	95**)	75**)
13а	N-ацетил-пеницилл-амин	0,1	декстран	16	83,9	-24	12	1,7	100 *)	70*)
13б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	90**)	60 **)
13в	то же	0,1	нет	нет	99,9	то же	то же	то же	100*)	70 *)
13г	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	3/0***)	10/0***)
14а	дитио-треит	3,0	метил-целлюлоза	3	94,0	-15	15	1,5	100*)	60*)
14б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	100**)	60**)

Таблица (окончание)
1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11
15а	дитио-треит	5,0	поливиниловый спирт	6	89,0	-10	22	2	100 *)	60*)
15б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	95**)	55 **)
15в	то же	5,0	нет	нет	95,0	то же	то же	то же	100*)	60 *)
15г	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	5/0***)	10/0***)
16а	лейцил-серил-трипто-фанил-цистеин	0,1	декстран	17,5	82,4	-78	2	1,5	100 *)	65*)
16б	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	100*)	65 *)
16в	то же	0,1	нет	нет	99,9	то же	то же	то же	100*)	65 *)
16г	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	то же	4/0***)	5/0***)
*) Данные для свежеполученного препарата. **) Данные для препарата после 2 месяцев хранения на воздухе. ***) Первая цифра - через 1 ч после приготовления препарата, вторая - после 2 месяцев хранения.