средство, обладающее антиоксидантной активностью

Формула изобретения

Применение экстракта надземной части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.) в качестве средства, обладающего антиоксидантной активностью.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, конкретно к клинической фармакологии, и может быть использовано для фармакологической коррекции свободнорадикальных патологий.

Различные стрессовые ситуации вызывают дисбаланс взаимоотношений систем свободнорадикального окисления и общей антиоксидантной активности [1, 2]. Фитопрепараты действуют на различные системы организма, в том числе на систему антиоксидантной защиты [3-5].

Известны средства, обладающие антиоксидантной активностью - дигидрокверцетин, витамины (аскорбиновая кислота, токоферола ацетат, ретинола ацетат) и их аналоги [2, 5, 6]. Однако терапевтическая эффективность, заключающаяся в способности ингибировать свободнорадикальное окисление на разных стадиях процесса, указанных антиоксидантов при лечении свободнорадикальных патологий, недостаточно высока.

Новая техническая задача - расширение арсенала средств, обладающих антиоксидантной активностью, полученных из растительного сырья.

Поставленную задачу решают применением в качестве средства, обладающего антиоксидантной активностью, экстракта надземной части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.).

В народной медицине растение используют при нервных заболеваниях, в качестве тонизирующего и болеутоляющего средства [7]. В литературе отсутствуют данные о применении экстракта надземной части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.) в качестве средства, обладающего антиоксидантной активностью. Использование экстракта надземной части альфредии поникшей по предлагаемому назначению стало возможным благодаря выявлению экспериментально его новых свойств, а именно способности нормализовать дисбаланс взаимоотношений систем свободнорадикального окисления и общей антиоксидантной активности в организме за счет антиоксидантного действия.

Как показали экспериментальные исследования, экстракт альфредии поникшей приближается по антиоксидантной активности к эталонному фитопрепарату - дигидрокверцетину, что приведет к расширению арсенала средств растительного происхождения, обладающих антиоксидантной активностью.

Новое свойство обнаружено в результате проведенного экспериментального изучения антиоксидантной активности водного и водно-этанольных экстрактов (40%, 70%, 95%) альфредии поникшей.

Антиоксидантную активность экстрактов альфредии поникшей определяли методом катодной вольтамперометрии [8, 9]. Антиоксиданты, имеющие восстановительную природу, реагируют с кислородом и его активными радикалами, что отражается в уменьшении катодного тока электровосстановления кислорода на ртутно-пленочном электроде в области потенциалов от 0 до -0,6 В.

Экспериментальные исследования проводили на серийном вольтамперометрическом анализаторе ТА - 2 ("Техноаналит" г.Томск). Элетрохимические исследования осуществляли в трехэлектродной ячейке с рабочим ртутно-пленочным электродом, электродом сравнения - хлорсеребрянным и вспомогательным - стеклоуглеродным. В качестве фонового электролита (подобран экспериментально) использовали фосфатный буфер рН 6,86 (10 мл). Объем аликвоты образца (С=0,01 г/мл) составлял 0,1 мл, соответственно концентрация образца в ячейке - 1·10^-4 г/мл. В качестве электрохимической ячейки использовали стеклянные стаканчики вместимостью 20 см³. Перемешивание раствора осуществляли с помощью магнитной мешалки М-25 в течение 10 с последующим успокоением в течение 20 с. Для варьирования концентрации кислорода в растворе вплоть до его полного удаления использовали азот, подаваемый в раствор под давлением через газовую трубочку. Съемку вольтамперограмм катодного восстановления кислорода в постоянно-токовом режиме осуществляли в условиях: скорость развертки потенциала 30 мВ/с, диапазон рабочих потенциалов 0-(-0,6) В. Чувствительность прибора варьировали в диапазоне 0,4-4 мкА.

По полученным данным строили зависимость относительного изменения предельного тока электровосстановления кислорода от времени протекания процесса в присутствии образца. По тангенсу угла наклона касательной к первому участку данной кривой рассчитывали кинетический критерий К (мкмоль/л·мин), который отражает количество прореагировавших с образцом кислородных форм; следствием чего является эффективность взаимодействия экстракта с кислородными радикалами и определяется по формуле:

где Co₂ - концентрация кислорода в исходном растворе без образца, равная его растворимости в соответствующем растворителе при нормальных условиях, мкмоль/л;

I _i - текущее значение предельного тока электровосстановления кислорода, мкА;

I_нач - значение предельного тока электровосстановления кислорода в отсутствии образца в растворе, мкА;

Т - время протекания процесса, мин [9].

Периодический контроль за содержанием кислорода в растворе (Со ₂) осуществляли с помощью кислородного датчика "МЭРА - ЭЛЬВРО" (Польша).

В качестве препарата сравнения использовали стандартный антиоксидант - дигидрокверцетин (С=0,01 г/мл).

Данные, полученные в результате эксперимента, обрабатывали, используя программу Statistica 5,0.

В результате установлено, что экстракты надземной части альфредии поникшей (Alfredia cernua Cass.) проявляют антиоксидантную активность по отношению к процессу электровосстановления кислорода, т.е. все образцы взаимодействуют с активными кислородными формами. Использование водно-этанольных экстрактов способствует увеличению антиоксидантных свойств (табл.). Результаты эксперимента показали, что наибольшую антиоксидантную активность проявляает экстракт альфредии поникшей на 70% этаноле. Экстракция 70% этанолом надземной части растения повышает антиоксидантный эффект целевого продукта за счет наиболее полного извлечения биологически активных веществ (флавоноидов, кумаринов, фенолкарбоновых кислот). Антиоксидантная активность вышеуказанного экстракта альфредии приближается к таковой стандартного антиоксиданта - дигидрокверцетина.

Положительный эффект достигнут благодаря использованию в качестве средства, обладающего антиоксидантной активностью, экстракта надземной части альфредии поникшей, что позволило расширить арсенал препаратов растительного происхождения, обладающих антиоксидантной активностью.

Таблица Антиоксидантная активность экстрактов надземной части альфредии поникшей по отношению к процессу восстановления кислорода
№ п/п	Образец	Кинетический критерий антиоксидантной активности, мкмоль/л·мин
1.	Водный экстракт	0,277±0,057
2.	Экстракт на 40% этаноле	0,348±0,034
3.	Экстракт на 70% этаноле	0,503±0,050
4.	Экстракт на 95% этаноле	0,382±0,047
5.	Дигидрокверцетин	0,650±0,040

Литература

1. Бобырев В.И., Почерняева В.Ф., Стародубцев С.Г., Дубинская Г.М. Специфичность систем антиоксидантной защиты органов и тканей - основа дифференцированной фармакотерапии антиоксидантами // Экспер. и клин. фармакол. - 1994. - Т.57, №1. - С.47-54.

2. Швец П. Свободные радикалы, этиопатогенез заболеваний и пути терапевтического воздействия // Словакафарма ревю. - 1996. - Т.VI, вып 4. - С.75-77.

3. Сейфулла Р.Д., Борисова И.Г. Проблемы фармакологии антиоксидантов // Фармакол. и токсикол. - 1990. - Т.53, №6. - С.3-10.

4. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы и антиоксиданты // Вести. РАМН. - 1998. - №7. - С.43-50.

5. Колхир В.А., Тюкавкина Н.А., Быков В.А., Глызин В.И., Соколов С.Я., Колесников Ю.П., Глазова Н.Г., Руленко И.А., Минаева М.Ф., Лескова Т.Б., Зюзин В.А., Сакович Г.С., Трумпе Т.Е., Хорошков Ю.Г. Диквертин - новое антиоксидантное и капилляроукрепляющее средство // Хим.-фарм. журн. - 1995. - Т.29, №9. - С.61-64.

6. Герчиков А.Я., Гарифуллина Г.Г., Хайруллина В.Р. Антиокислительная эффективность кверцетинов в реакции радикально-цепного окисления этилбензола // Тез. докл. VI Междунар. конф. "Биоантиоксидант". - Москва, 2002. С.108-109.

7. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; Семейство Asteraceae (Compositae). - СПб.: Наука, 1993. - 352 с.

8. Громовая В.Ф., Шаповал Г.С., Луйк А.И. Применение импульсной вольтамперометрии для изучения антиокислительной активности физиологически активных веществ // Хим.-фарм. журн. - 1994. - Т.28, №11. - С.11-14.

9. Короткова Е.И. Вольтамперометрический способ определения активности антиоксидантов // Журн. физ. химии. - 2000. - Т.79, №9. - С.1704-1706.